Истраживање терапеутских ефеката и механизма Иисхен Тонглонг децокције на бенигну хиперплазију простате код пацова путем сигналног пута IL-6/СТАТ3
Dec 17, 2025
Абстрацт
Циљ:Истражити, путем трансдуктора интерлеукина (ИЛ)-6/сигнала и активатора сигналног пута транскрипције (СТАТ)3, мелиоративних ефеката и механизама Иики Венсхен Тонглонг Децоцтион (овде скраћено Иисхен Тонглонг Децоцтион) на бенигну хиперплазију простате (БПХ) код пацова.
Методе:Мужјаци Спрагуе-Давлеи (СД) пацова су кастрирани и затим супкутано убризгани тестостерон пропионатом да би се успоставио модел БПХ. Пацови су насумично распоређени у следеће групе (н=12/група): модел; Иисхен Тонглонг Децоцтион групе са ниским и високим дозама (15 и 30 г/кг); СТАТ3 активаторска група (Цоливелин, 1 мг/кг); и комбинована децокција Иисхен Тонглонг високе дозе (30 г/кг) + коливелин (1 мг/кг) група. Додатних 12 мушких СД пацова служило је као лажно оперисана група. Након третмана специфичних за групу са Иисхен Тонглонг Децоцтион и/или Цоливелином, проценили смо индекс простате (ПИ) и однос естрадиола (Е2)/тестостерона (Т); процењена хистоморфологија простате и фиброза са хематоксилин-еозин (ХЕ) и Массоновим трихром бојењем; измерена експресија Ки-67 имунохистохемијом; квантификовани нивои IL-6 и IL-1 у ткиву простате и серуму помоћу ЕЛИСА; и детектоване протеине колагена И/ИИИ и IL-6/СТАТ3 путева везаних за пут Вестерн блотинга.
Резултати:У поређењу са лажном, група модела је показала изражену хиперплазију и фиброзу простате, са значајним повећањем ПИ, Ки-67 оптичке густине, ткива/серума IL-6 и IL-1, колагена И/ИИИ, IL-6 протеина и п-СТАТ3/СТАТ3, уз значајно смањење Е2/Т (005лл П <Т). У поређењу са моделном групом, и ниске и високе дозе Иисхен Тонглонг Децоцтион су ублажиле хиперплазију и фиброзу, смањиле ПИ, Ки-67, IL-6, IL-1, колаген И/ИИИ, IL-6 протеин и п-СТАТ3/СТАТ3, и повећале Е2/Т (све П < 0,05). Декокција са високим дозама дала је већа побољшања од ниске дозе (П < 0,05). Сам Цоливелин је погоршао хиперплазију и фиброзу и додатно повећао ПИ, Ки-67, IL-6, IL-1, колаген И/ИИИ, IL-6 и п-СТАТ3/СТАТ3 док је смањивао Е2/Т (П < 0,05). Истовремена примена Цоливелина је умањила предности декокције у високим дозама, значајно погоршавајући све горе наведене индексе у поређењу са само декоцијом у високим дозама (П < 0,05).
Закључак:Иисхен Тонглонг Децоцтион ублажава упалу и побољшава патологију БПХ код пацова, барем делимично потискивањем активације IL-6/СТАТ3 сигналног пута.
Кључне речи:IL-6/СТАТ3 сигнализација; Иисхен Тонглонг Децоцтион; бенигна хиперплазија простате; биљка за лечење проблема са простатитисом
Херб Цистанцхе суплементи
Више детаља о новој тцм биљци за здравље простате
Увод
Бенигна хиперплазија простате (БПХ) је уобичајено опструктивно стање доњег уринарног тракта код средовечних и старијих мушкараца, које карактерише пролиферација епитела и строме и повећање простате, што доводи до оклевања, учесталости и хитности мокрења што значајно нарушава квалитет живота [1,2]. Упала је кључни покретач патогенезе БПХ; промовише пролиферацију глатких мишића епитела и строме и фиброзно ремоделирање. Стога су антиинфективне и антиинфламаторне стратегије ефикасне у превенцији и управљању БХП [3,4].
IL-6 је плеиотропни проинфламаторни цитокин широко изражен у ћелијама ткива. Активира СТАТ3 да покрене инфламаторне програме [5]. Инхибирање IL-6/СТАТ3 активације смањује низводне проинфламаторне медијаторе, прекида инфламаторне каскаде, смањује имунолошку инфилтрацију и фиброзу повезану са хипертрофијом и на крају успорава прогресију БХП [6,7]. Дакле, IL-6/СТАТ3 је рационална терапијска мета у БПХ.
Иисхен Тонглонг децоцтион је класична кинеска биљна формула са традиционалним функцијама храњења Јина и подршке Јангу, тонизирања Ки-ја и бубрега и промовисања циркулације крви уз ублажавање влаге. Клинички се користи за дисурију због влажне топлоте и застоја крви са недостатком Ки бубрега, а пријављено је да ублажава упалу простате и хиперпластичне промене у БХП [8]. Осим БПХ, инхибира пролиферацију ћелија рака простате код људи, промовише апоптозу и потискује инвазију и миграцију [9]. Мрежна фармакологија и молекуларно спајање сугеришу да кључни циљеви релевантни за модулацију болести простате укључују АКТ1, IL-6 и ВЕГФА, између осталих [10]. На основу овог теоретског образложења и претходних доказа, претпоставили смо да Иисхен Тонглонг децоцтион побољшава БПХ супресијом IL-6/СТАТ3 сигнализације. Ову хипотезу смо тестирали на моделу БПХ пацова.
Материјали и методе
Животиње
Мужјаци СД пацова, СПФ степен, 200–230 г, стари 6–7 недеља, добијени су од Даоке Пхармацеутицал Тецхнологи (Гуангдонг) Цо., Лтд. (СЦКСК [Иуе] 2022-0060). Пацови су смештени на мање од или једнако 4 по кавезу под циклусима светлости/мрака од 12 сати, 50-60% влажности и 23-25 степени.
Реагенси и инструменти
Сирово биље Иисхен Тонглонг Децоцтион: Анемаррхена аспходелоидес (Зхи Му), Пхеллодендрон цхиненсе (Хуанг Баи), Циннамомум цассиа (Роу Гуи), Рехманниа глутиноса припремљени корен (Сху Ди Хуанг), Цорнус оффициналис (Схан Иацосо оп Иу), ПоСхан Иацос (Схан Иацос оп ИуФ), Линг), кора Паеониа суффрутицоса (Му Дан Пи), Ацхирантхес бидентата (Ниу Кси), Ацонитум цармицхаели обрађени бочни корен (Фу Зи), Спарганиум столониферум (Сан Ленг), Цурцума зедоариа (Е Зху), Семе Прунус персица (Тао Ренге Вацца) (Тао Ренге Вацца) плантаго-акуатица (Зе Ксие). Извор: Пекинг Тонгрентанг (Ангуо) Цхинесе Хербал Слицес Цо., Лтд.
Цоливелин (HY-P1061), МЦЕ (САД).
Тестостерон пропионат (чистоћа 98%, Т7260); ЕЛИСА комплети за пацове ИЛ‑1 (SEKR-0002), Е2 (SEKR-0107), Т (СЕКСМ-0003), Беијинг Соларбио Сциенце & Тецхнологи Цо., Лтд.
ХЕ комплет за бојење (аб245880), анти-п-СТАТ3 (аб76315), Массонов комплет (аб150669), анти-СТАТ3 (аб68153), анти-колаген И (аб270993), анти-Ки-аб1667, анти-Ки-б1667 (аб184993), анти‑ИЛ‑6 (аб259341), секундарни ХРП магарца против зеца (аб205722), ИЛ‑6 ЕЛИСА пацова (аб234570), Абцам (САД).
Анти‑‑актин (АФ5003), Беиотиме (Шангај).
Парафински микротом ХС‑2205 (Олабао, Јинан), микроскоп КП‑ПХ100С (Схензхен КЕПУС), УМР‑9600 читач микроплоча (Хангзхоу Иоуми), ПоверПац Басиц 1645050 и ПРОТЕАН напајања (Био‑Рад, САД).
БПХ модел и груписање
Пацови су анестезирани натријум пентобарбиталом (45 мг/кг, 3% в/в, интраперитонеално), тестиси су екстериорисани и хируршки уклоњени. Након 3 дана опоравка, пацови су свакодневно примали поткожне ињекције тестостерон пропионата (5 мг/кг у маслиновом уљу) током 21 дана. Велико увећање и хистопатолошка хиперплазија потврдили су успех моделирања БХП [11]. Лажни пацови су подвргнути резу скротума без орхидектомије и добијали су маслиново уље.
Припрема и администрација
Један рецепт Иисхен Тонглонг Децоцтион је садржао: Зхи Му, Хуанг Баи, Схан Зху Иу, Схан Иао, Фу Линг, Му Дан Пи, Ванг Бу Лиу Ксинг, Зе Ксие (сваки по 15 г); Ниу Си, Сху Ди Хуанг, Тао Рен (сваки по 20 г); Фу Зи, Сан Ленг, Е Жу, Роу Гуи (сваки по 10 г). Биље је два пута препарено водом, филтрати су спојени и концентровани до 1,5 или 3,0 г/мЛ. Коливелин је растворен у физиолошком раствору до 0,1 мг/мЛ.
Групе са ниским и високим дозама: 15 или 30 г/кг (10 мЛ/кг при 1,5 или 3,0 г/мЛ), плус интраперитонеални физиолошки раствор (10 мЛ/кг).
Група коливелина: физиолошки раствор за сону (10 мЛ/кг) плус интраперитонеални коливелин 1 мг/кг (10 мЛ/кг од 0,1 мг/мЛ).
Висока доза + Цоливелин група: гаважа 30 г/кг декокције плус Цоливелин 1 мг/кг ип
Групе лажних и модела: физиолошки раствор за гаважу и физиолошки раствор за ип (10 мЛ/кг).
Сви третмани су били једном дневно током 21 дана.
Индекс простате и Е2/Т; Збирка узорака
Двадесет четири сата након завршног третмана, пацови су анестезирани (као горе). Телесна маса и влажна тежина простате су забележени да би се израчунала ПИ=влажна тежина простате/телесна маса. Крв из абдоминалне аорте је сакупљена, центрифугирана (2000 о/мин, 15 мин) да би се добио серум. Е2 и Т су мерени ЕЛИСА и Е2/Т израчунати; преостали серум је чуван на -80 степени. Приближно 0,7 г ткива простате је брзо замрзнуто у течном азоту за протеинске тестове; остатак је фиксиран, дехидриран, уклопљен у парафин и пресечен на ~5 μм.
ОН и Массоново бојење
Депарафинизација у ксилену и градираним етанолима (100%, 90%, 80%, 75%) је праћена хидратацијом. Секције су обојене ХЕ и Массоновим комплетима према упутствима произвођача (свака по 3 слајда), затим испране, дехидриране, очишћене и монтиране за микроскопију.
Имунохистохемија за пролиферацију ћелија
После депарафинизације/хидратације, пресеци су третирани са 3% Х2О2, блокирани козјим серумом и инкубирани преко ноћи са анти-Ки‑67 (1:150). Детекција је користила СП комплет са ДАБ хромогеном. Слике су добијене и оптичка густина Ки-67 квантификована помоћу ИмагеЈ.
ЕЛИСА за ИЛ‑6 и ИЛ‑1 у простати и серуму
Замрзнуто ткиво простате је млевено, хомогенизовано у РИПА пуферу и центрифугирано (3000 рпм, 20 мин) да би се добили укупни протеински лизати. Концентрације протеина су одређене БЦА. Аликвоти (0,2 мЛ) лизата ткива и одмрзнутог серума су анализирани на ИЛ-6 и ИЛ-1 помоћу ЕЛИСА.
Вестерн блот за протеине колагена И/ИИИ и ИЛ‑6/СТАТ3 путање
Денатурисани узорци (100 степени) су раздвојени помоћу СДС-ПАГЕ и пребачени у нитроцелулозу. Мембране су подељене према молекуларној тежини за колаген И, колаген ИИИ, ‑актин, ИЛ‑6, СТАТ3 и п‑СТАТ3. Након 3% блокаде БСА, примењена су примарна антитела, а затим секундарно антитело коњуговано са ХРП. Траке су визуализоване хемилуминисценцијом и квантификоване помоћу ИмагеЈ.
Статистика
Подаци су анализирани коришћењем СПСС 26.0 са једносмерним АНОВА и СНК‑к пост хоц тестовима.
Резултати
Успех моделирања БПХ: У поређењу са лажним, група модела је показала очигледно повећање величине простате и хистолошку хиперплазију и фиброзу. ПИ, Ки‑67 оптичка густина, простата/серум ИЛ‑6 и ИЛ‑1, колаген И/ИИИ, ИЛ‑6 и п‑СТАТ3/СТАТ3 су сви значајно повишени, док је Е2/Т смањен (П < 0,05).
Терапеутски ефекти Иисхен Тонглонг децокције: И дозе од 15 и 30 г/кг ублажиле су повећање простате и фиброзу. Ови третмани су значајно снизили ПИ, Ки‑67, ИЛ‑6, ИЛ‑1, колаген И/ИИИ, ИЛ‑6 протеин и п‑СТАТ3/СТАТ3 и повећали Е2/Т (П < 0,05). Висока доза је произвела супериорне ефекте од ниске дозе (П < 0,05).
Ефекти активације СТАТ3: Цоливелин је погоршао хиперплазију и фиброзу простате и додатно повећао инфламаторне и фибротичне маркере док је смањио Е2/Т у односу на модел (П <0,05).
Антагонизам Цоливелина: Заједнички третман са Цоливелином је ослабио предности декокције у високим дозама, подижући инфламаторне/фибротичне индексе и смањујући Е2/Т у поређењу са само декоцијом високих доза (П < 0,05).
Дискусија
Механистичко образложење: Оса ИЛ-6/СТАТ3 је централни инфламаторни пут који је укључен у ремоделирање ткива простате. Везивање ИЛ-6 активира ЈАК/СТАТ3 сигнализацију, покреће транскрипцију проинфламаторних и профибротичких гена, подстиче епителну/стромалну пролиферацију, инфилтрацију имуних ћелија и депозицију екстрацелуларног матрикса. Наши налази – побољшање са биљном формулом и погоршање стања са СТАТ3 активатором – подржавају узрочну механичку везу у којој Иисхен Тонглонг децоцтион ублажава БХП тако што пригушује активацију ИЛ‑6/СТАТ3.
Перспектива биљне формуле (биљка за лечење проблема са простатитисом): Компонентне биљке пружају комплементарна дејства релевантна за БПХ и упале сличне простатитису:
Чишћење од влаге и антиинфламаторно: Зхи Му (Анемаррхена), Хуанг Баи (Пхеллодендрон), Му Дан Пи (Паеониа кора), Зе Ксие (Алисма).
Тонификација Ки/бубрега и ендокрина модулација: Сху Ди Хуанг (Рехманниа), Схан Зху Иу (Цорнус), Схан Иао (Диосцореа), Фу Линг (Пориа).
Активација крви и антифиброзни потенцијал: Сан Ленг (Спарганиум), Е Зху (Зедоари), Тао Рен (језгра брескве), Ванг Бу Лиу Ксинг (Ваццариа).
Загревање Јанга и побољшање микроциркулације: Роу Гуи (цимет), Фу Зи (аконит, обрађен).
Подршка тетива/кости и карлична циркулација: Ниу Кси (Ацхирантхес).
Ова синергија може колективно смањити инфламаторне цитокине (ИЛ-6, ИЛ-1), пролиферацију (Ки-67) и фиброзу (колаген И/ИИИ), што је у складу са супресијом сигнализације ИЛ-6/СТАТ3 примећеном у Вестерн блотовима. Пораст Е2/Т сугерише делимичан ребаланс секс-стероидног миљеа, што такође може утицати на динамику раста простате.
Клинички превод и ограничења: Док ови претклинички подаци обећавају за БПХ и потенцијално за упалу налик простатитису, екстраполација на људе захтева опрез. Конверзија дозе, контрола квалитета препарата са више биљака и интеракције између биљака и лекова треба даље проучавати. Без обзира на то, докази усредсређени на путеве (корист од декокције, штета од СТАТ3 активације и очитавања путање) јачају теоријску основу за клиничко истраживање овог биљног приступа лечењу проблема простатитиса и БХП.
Закључак
Иисхен Тонглонг Децоцтион ублажава хиперплазију и фиброзу простате код БПХ пацова тако што инхибира активацију ИЛ-6/СТАТ3 и смањује инфламаторну и профибротичку сигнализацију, са ефикасношћу зависном од дозе. Ови налази пружају механичку подршку за његову традиционалну употребу и модерно образложење засновано на путевима за даљи развој као биљне терапије за БПХ и стања повезана са простатитисом.
Референце
[1–13] Како је наведено у оригиналном тексту.
