Истраживање свеобухватне мулти-индексне процене квалитета цистанцхес Херба засновано на методи ЦРИТИЦ Веигхт

ВЕИ Веи, КИ Иунинг, ЦХЕН Веииинг, ЗХУ Схуњуан, ХОУ Јианзхонг
(Центар за инспекцију и испитивање квалитета Јиукуан у провинцији Гансу, Јиукуан, Гансу 735000, Кина)

Апстракт:Циљ је био успоставити вишеиндексну свеобухватну методу евалуације за процену квалитета Цистанцхе десертицола и научно проценити разлике у квалитету међу Цистанцхе Херба из различитих извора (Цистанцхе десертицола и Цистанцхе тубулоса) и различитих производних подручја. Садржај пет фенилетаноидних гликозида (ехинакозида, вербаскозида, тубулозида А, изоактеозида и 2′-ацетилактеозида) одређен је течном хроматографијом високих перформанси (ХПЛЦ). ЦРИТИЦ метод пондерисања је коришћен за израчунавање тежине сваке компоненте, а свеобухватни резултати узорака су израчунати. Кластер анализа је примењена за анализу образаца разлика у квалитету између узорака. Резултати су показали да су уочене разлике у квалитету између Цистанцхе десертицола и Цистанцхе тубулоса. Резултати евалуације Цистанцхе тубулоса су генерално били виши од оних код Цистанцхе десертицола. Кластер анализа је груписала Цистанцхе десертицола и Цистанцхе тубулоса у различите категорије. Квалитет Цистанцхе десертицола показао је минималне варијације, док је квалитет Цистанцхе тубулоса варирао у различитим производним областима. Модел успостављен у овој студији може објективно квантификовати разлике у квалитету између Цистанцхес Херба различитих порекла и производних подручја, пружајући научну основу за процену квалитета Цистанцхеа.

Кључне речи: Цистанцхес Херба;Метода тежине КРИТИКА; кластер анализа;вредновање квалитета

Екстракт Цистанцхе херба на продају

 

 

 

 

 

Цистанцхес Херба се састоји од осушених, љускавих сочних стабљика Цистанцхе десертицола ИЦ Ма или Цистанцхе тубулоса (Сцхенк) Вигхт, раније познатог као пустињски цистанцхе. Цистанцхес Херба је топле природе и слатког и сланог укуса. Тонизује јанг бубрега, користи есенцији и крви и влажи црева за ублажавање опстипације. Користи се за недостатак јанга бубрега, недостатак есенције и крви, импотенцију и неплодност, бол и слабост у струку и коленима, слабост мишића и костију и сувоћу црева са затвором. Потврђено је да његове фармаколошки активне компоненте – као што су фенилетаноидни гликозиди, полисахариди и иридоиди – поседују антиоксидативна, анти-агинг, имуномодулаторна и неуропротективна дејства. Као реномирани традиционални кинески лековити материјал, наведен је као биљка врхунског квалитета у Шенонговој класици Материа Медица и познат је као „пустињски женшен“. Углавном је распрострањен у северозападним регионима Унутрашње Монголије, Гансуа, Синђанга и Нингсије.

Са растућом потражњом на тржишту, дивљи ресурси се приближавају исцрпљивању и вештачка култивација је постала главна струја. Издање Фармакопеје Народне Републике Кине из 2005. проширило је Цистанцхе тубулоса као легални ботанички извор Цистанцхес Херба. Два извора имају одвојена ограничења испитивања, али само за екстракте и садржај ехинакозида и вербаскозида, који не могу свеобухватно да одражавају вишекомпонентне, вишециљне карактеристике традиционалне кинеске медицине. Хемијски састав Цистанцхес Херба варира у зависности од подручја производње, времена бербе и метода прераде. Због тога је успостављање научног и систематског система евалуације квалитета од великог значаја за осигурање безбедности и ефикасности медицинских материјала и промовисање одрживог индустријског развоја. У овој студији анализирано је 20 серија Цистанцхес Херба из различитих производних подручја у Јиукуан-у. ХПЛЦ је коришћен за истовремено одређивање пет фенилетаноидних гликозида – ехинакозида, тубулозида А, вербаскозида, изоактеозида и 2′-ацетилактеозида. Метода пондерисања ЦРИТИЦ је коришћена за додељивање тежине сваком индикатору за свеобухватну процену квалитета два ботаничка извора, а кластер анализа (ЦА) је коришћена за тумачење разлика према ботаничком пореклу и производном подручју, са циљем да се обезбеди научна основа за процену квалитета Цистанцхес Херба.

1 Инструменти и материјали за цистанцхе

1.1 Инструменти и опрема

Агилент 1260 Инфинити ХПЛЦ систем [укључујући кватернарну пумпу, аутосамплер, пећ на колони и ДАД детектор; Агилент Тецхнологиес (Цхина) Цо., Лтд.]; КСП205ДР електронска аналитичка вага (Меттлер-Толедо Инструментс Цо., Лтд.); KQ-500DE ултразвучни чистач (Кунсхан Ултрасониц Инструментс Цо., Лтд.).

 

1.2 Реагенси

Референтни стандарди: вербаскозид (бр. серије. 111530-201914, чистоћа 95,2%) и ехинакозид (бр. серије. 111670-201706, чистоћа 89,7%) набављени су од Националног института за контролу хране и лекова; тубулозид А (серија бр. Б20471, чистоћа већа или једнака 98%), изоактеозид (серија бр. Б21535, чистоћа већа од или једнака 98%) и 2′-ацетилактеозид (серија бр. Б21779, чистоћа већа од или једнака 98%) су набављени од-Тецх Био-Иуан98% или једнаки Цо., Лтд. Метанол је ХПЛЦ квалитета (Мерцк). Ултрачиста вода је припремљена у кући. Остали реагенси су били аналитичког квалитета.

 

1.3 Узорци

Десет серија Цистанцхе десертицола и десет серија Цистанцхе тубулоса прикупљено је из база за узгој Цистанцхес Херба и апотека у области Јиукуан, означених као Р1–Р20 ​​(види табелу 1). Идентификовао их је заменик директора и фармацеут ТЦМ Хоу Јианзхонг из Центра за инспекцију и испитивање квалитета Јиукуан као осушене, љускаве сочне стабљике Цистанцхе десертицола ИЦ Ма или Цистанцхе тубулоса (Сцхенк) Вигхт. Узорци ваучера се депонују у Институту за испитивање лекова и козметике Центра за инспекцију и испитивање квалитета Јиукуан.

Табела 1 Изворне информације за узорке Цистанцхес Херба

Р1|Цистанцхе десертицола|Град Дазхуангзи, округ Јинта, град Јиукуан

Р2|Цистанцхе десертицола|Нови град Јиасхан, округ Суџоу, град Јиукуан

Р3|Цистанцхе десертицола|Град Ксику, округ Јинта, град Јиукуан

Р4|Цистанцхе десертицола|Град Зхонгхе, округ Јинта, град Јиукуан

Р5|Цистанцхе десертицола|Град Схуанглонг, округ Суџоу, град Јиукуан

Р6|Цистанцхе десертицола|Град Хонглиу, округ Гуаџоу, град Јиукуан

Р7|Цистанцхе десертицола|Град Хонгсхаганг, град Дунхуанг, Јиукуан

Р8|Цистанцхе десертицола|Иумен Цити, Јиукуан

Р9|Цистанцхе десертицола|Град Таши, округ Гуаџоу, град Јиукуан

Р10|Цистанцхе десертицола|Град Зонгтаи, град Јумен, Јиукуан

Р11|Цистанцхе тубулоса|Град Дазхуангзи, округ Јинта, град Јиукуан

Р12|Цистанцхе тубулоса|Округ Суџоу, град Јиукуан

Р13|Цистанцхе тубулоса|Округ Суџоу, град Јиукуан

Р14|Цистанцхе тубулоса|Округ Суџоу, град Јиукуан

Р15|Цистанцхе тубулоса|Округ Суџоу, град Јиукуан

Р16|Цистанцхе тубулоса|Град Хонгсхаганг, град Дунхуанг, Јиукуан

Р17|Цистанцхе тубулоса|Град Хонгсхаганг, град Дунхуанг, Јиукуан

Р18|Цистанцхе тубулоса|Град Хонгсхаганг, град Дунхуанг, Јиукуан

Р19|Цистанцхе тубулоса|Град Лиангзхонг, град Јумен, Јиукуан

Р20|Цистанцхе тубулоса|Лиугоу Товнсхип, Анки Цоунти, Јиукуан

 

2 Методе и резултати

2.1 Припрема мешаног референтног раствора

Прецизно одмерити вербаскозид 10,45 мг, ехинакозид 11,56 мг, тубулозид А 10,59 мг, изоактеозид 19,63 мг и 2′-ацетилактеозид 9,03 мг у одвојене 50 мЛ волуметријске боце, допунити запремину 50 мЛ, растворити 0% метола до 5% раствора. Добро промешајте да добијете референтне растворе. Затим прецизно пипетирајте 1,00 мЛ сваког основног раствора у волуметријску тиквицу од 10 мЛ, разблажите до запремине са 50% метанола и промешајте да бисте добили мешани референтни раствор.

Служба подршке Вецистанцхе-За више детаља о сарадњи
Е-пошта:wallence.suen@wecistanche.com
Вхатсапп/тел:+86 15292862950

 

2.2 Припрема раствора за испитивање

Процедите узорке праха кроз сито бр.. 3; одмерити тачно око 1 г у смеђу волуметријску тиквицу од 100 мЛ. Додати 80 мЛ 50% метанола, зачепити, протрести, измерити, потопити 30 мин и обрадити соникацијом 40 мин (250 В, 35 кХз). Охладити на собну температуру, поново извагати, додати 50% метанола да надокнадити губитак тежине, добро промућкати, оставити да одстоји, декантирати супернатант и филтрирати. Сакупите накнадни филтрат као тест раствор.

 

2.3 Услови хроматографије

Користите ИнертСустаин Ц18 колону (4,6 мм × 250,0 мм, 5 μм). Мобилна фаза: метанол (А) и 0,1% раствор фосфорне киселине (Б). Градијент за фазу А: 0–6 мин, 20%; 6–18 мин, 20%→30%; 18–35 мин, 30%→45%. Брзина протока: 1,0 мЛ/мин; температура колоне: 35 степени; таласна дужина детекције: 330 нм; запремина ињекције: 10 μЛ. Теоријске плоче за сваку компоненту нису биле мање од 5.000. Хроматограми мешаног референтног раствора и тест раствора приказани су на слици 1.

 

2.4 Валидација методологије за одређивање садржаја

2.4.1 Тест прецизности

Убризгајте мешани референтни раствор из одељка 2.1 шест пута узастопно под условима из одељка 2.3. РСД површине пикова за све аналите биле су мање или једнаке 0,86%, што указује на добру прецизност инструмента.

 

2.4.2 Тест поновљивости

Прецизно измерити шест порција узорка Р2 (око 1,0 г сваки) и припремити шест тестних раствора по одељку 2.2. Анализирајте под условима у одељку 2.3. РСД вршних површина били су мањи или једнаки 1,12%, што указује на добру поновљивост методе.

 

2.4.3 Испитивање стабилности

Припремити тест раствор из узорка Р1 као у одељку 2.2. Ињектирајте на 0, 2, 4, 8, 12 и 24 х под условима из одељка 2.3. РСД вршне површине су биле мање од или једнаке 1,20%, што указује на добру стабилност раствора у року од 24 х.

 

2.4.4 Линеарност

Припремите серију мешаних референтних раствора тако што ћете тачно пипетирати 0,2, 0,4, 0,6, 0,8, 1,0 и 2,0 мЛ сваког основног раствора у 10 мЛ волуметријске боце и разблажити до запремине са 50% метанола. Ињектирајте под условима наведеним у одељку 2.3. Графикон концентрације у односу на површину пика да бисте добили калибрационе једначине и линеарне опсеге (Табела 2). Резултати су показали добру линеарност за ехинакозид, тубулозид А, вербаскозид, изоактеозид и 2′-ацетилактеозид унутар њихових одговарајућих опсега.

Табела 2 Резултати студије линеарности

Ецхинацосиде|и=2397.4к − 15.363|р=0.9987|линеарни опсег: 0,0046–0,0462 мг·Л−1

Тубулозид А|и=9428.7к − 7.104|р=0.9984|линеарни опсег: 0,0024–0,0242 мг·Л−1

Вербасцосиде|и=12609.5к − 8,507|р=0.9986|линеарни опсег: 0,0024–0,0418 мг·Л−1

Исоацтеосиде|и=11600.3к − 11.359|р=0.9985|линеарни опсег: 0,0079–0,0786 мг·Л−1

2′-Ацетилактеозид|и=10901.8к − 5.216|р=0.9985|линеарни опсег: 0,0036–0,0362 мг·Л−1

2.4.5 Опоравак
Припремите девет порција узорка познатог садржаја (Р1), сваки од око 0,5 г. Повећајте 50%, 100% и 150% номиналног садржаја одговарајућим количинама вербаскозида, ехинакозида, тубулозида А, изоактеозида и 2′-ацетилактеозида. Припремите растворе за испитивање према одељку 2.2 и анализирајте према одељку 2.3. Просјечни поврати износили су 99,58%, 99,24%, 100,26%, 99,84% и 100,46%, са 1,26%, 1,67%, 1,03%, 1,39% и 1,71% динара, што указује на добру тачност.

 

2.4.6 Одређивање садржаја

Прецизно одмерити око 1 г праха Цистанцхе десертицола и Цистанцхе тубулоса, припремити тест растворе по одељку 2.2, анализирати по одељку 2.3 и израчунати садржај вербаскозида, ехинакозида, тубулозида А, изоактеозида и 2′-ацетилактеозида. Резултати су приказани у табели 3.

Табела 3 Резултати одређивања садржаја пет компоненти у Цистанцхес Херба (мг·г−1)

Р1: Ехинакозид 4,81|Тубулозид А 0,16|Вербасцосиде 0,58|Исоацтеосиде 0,26|2′-Ацетилактеозид 0,49

R2: 5.02 | 0.13 | 0.70 | 0.30 | 0.61

R3: 6.62 | 0.24 | 0.67 | 0.21 | 0.43

R4: 5.25 | 0.18 | 0.82 | 0.34 | 0.67

R5: 5.63 | 0.17 | 0.75 | 0.21 | 0.39

R6: 6.85 | 0.24 | 0.91 | 0.29 | 0.44

R7: 6.08 | 0.23 | 0.63 | 0.20 | 0.54

R8: 5.17 | - | 0.49 | 0.18 | 0.24

R9: 6.78 | 0.28 | 0.73 | 0.27 | 0.37

R10: 5.44 | 0.19 | 0.68 | 0.24 | 0.26

R11: 16.77 | 0.97 | 1.20 | 1.19 | -

R12: 13.80 | 1.22 | 2.07 | 1.98 | 0.08

R13: 17.06 | 2.09 | 4.82 | 2.08 | 0.14

R14: 18.56 | 2.86 | 4.76 | 2.89 | 0.16

R15: 20.47 | 3.62 | 5.17 | 1.84 | 0.21

R16: 15.38 | 3.16 | 3.86 | 1.09 | 0.18

R17: 16.23 | 2.97 | 4.43 | 1.44 | 0.17

R18: 15.02 | 2.40 | 3.59 | 1.38 | 0.18

R19: 17.56 | 3.06 | 4.91 | 1.52 | 0.19

R20: 14.87 | 2.64 | 4.05 | 1.26 | 0.20

 

2.5 Процена квалитета применом методе ЦРИТИЦ пондерисања

2.5.1 Стандардизација података

Пошто је измерени садржај индикатора значајно варирао, сваки индикатор је третиран као индикатор типа користи и стандардизован на опсег [0, 1] коришћењем формуле (1).

 

2.5.2 Одређивање тежине

Стандардизовани резултати 20 серија су увезени у СПССПРО онлајн платформу за обраду података, а за израчунавање тежина је коришћен ЦРИТИЦ метод (Табела 4). Као што је приказано у табели 4, садржај информација (1,936) 2′-ацетилактеозида био је значајно већи од садржаја осталих индикатора (0,683–0,758), углавном због његове веома високе мере конфликта (6,786), што указује на веома ниску корелацију са другим индикаторима. Тако је дао јединствене информације у систему евалуације и чинио 40,112% укупне тежине, постајући доминантан индикатор. Тежина остала четири индикатора (ехинакозид, тубулозид А, вербаскозид и изоактеозид) била је релативно уравнотежена.

Табела 4 Резултати израчунавања фактора тежине

Индикатор: Ецхинацосиде|Вариабилност 0,367|Цонфлицт 2.064|Информатион 0.758|Тежина 15,705%

Индикатор: Тубулозид А|0.352|1.940|0.683|14.150%

Индикатор: Вербасцосиде|0.392|1.881|0.737|15,275%

Индикатор: изоактеозид|0.330|2.157|0.713|14,759%

Индикатор: 2′-ацетилактеозид|0,285|6.786|1.936|40,112%

 

2.5.3 Свеобухватна евалуација

На основу утврђених тежина, свеобухватни резултати евалуације 20 серија су израчунати коришћењем формуле (2). Резултати су приказани у табели 5. Изражене разлике у резултату су пронађене између два ботаничка извора. Цистанцхе тубулоса је генерално имала већи садржај ехинакозида и вербаскозида, што је довело до виших свеобухватних резултата од Цистанцхе десертицола.

Табела 5 Свеобухватни резултати евалуације ЦРИТИЦ-а за Цистанцхес Херба

Р1: 0,307 (ранг 14)

Р2: 0,386 (ранг 10)

Р3: 0,292 (ранг 15)

Р4: 0,432 (ранг 8)

Р5: 0,258 (ранг 17)

Р6: 0,313 (ранг 13)

Р7: 0,351 (ранг 12)

Р8: 0,147 (ранг 20)

Р9: 0,265 (ранг 16)

Р10: 0,179 (ранг 19)

Р11: 0,236 (ранг 18)

Р12: 0,335 (ранг 12)

Р13: 0,533 (ранг 4)

Р14: 0,632 (ранг 2)

Р15: 0,667 (ранг 1)

Р16: 0,497 (ранг 6)

Р17: 0,530 (ранг 5)

Р18: 0,469 (ранг 7)

Р19: 0,565 (ранг 3)

Р20: 0,425 (ранг 9)
 

 

2.6 Кластер анализа

Измерени садржај 20 серија увезен је у СПСС 20.0. Метода најдаљег суседа и квадрат Еуклидске удаљености су коришћени као метрика, а веза између група је примењена за груписање (види слику 2). Резултати су указали на разлике у квалитету између два ботаничка извора: Цистанцхе десертицола и Цистанцхе тубулоса груписане у одвојене групе. Цистанцхе десертицола је показала мале варијације унутар групе, док је Цистанцхе тубулоса показала разлике у квалитету између производних подручја и могла се даље поделити у три подгрупе, што је генерално било у складу са свеобухватном проценом заснованом на ЦРИТИЦ-у.