Ултразвучна екстракција полисахарида из Цистанцхе Тубулоса: оптимизација процеса, изолација фракција, структурна карактеризација и ефекти против замора

 

Апстракт:Ова студија је имала за циљ да оптимизује процес екстракције полисахарида Цистанцхе тубулоса (ЦП) и да истражи њихове структурне карактеристике и ефекте против умора. Вођени експериментима са једним фактором и оптимизовани коришћењем методологије површине одзива, оптимални услови су били ултразвучна обрада од 20 минута, однос растварача и материјала од 20:1 и ултразвучна снага од 220 В, дајући 8,55% ЦП. Целулозна колонска хроматографија је затим произвела једну неутралну фракцију (ЦПН) и три киселе фракције (ЦПА‑1, ЦПА‑2, ЦПА‑3). Међу њима, ЦПН је показао највећи опоравак (40,3%), највећи садржај угљених хидрата (39,5%) и јаку антиоксидативну активност упоредиву са ЦПА‑2; стога је ЦПН изабран за дубинску карактеризацију. Структурне анализе су откриле карактеристичне полисахаридне функционалне групе, доминацију глукозе и манозе и доказе за две компоненте са изразито различитим молекулским тежинама. Ин виво, ЦПН је значајно продужио време пливања код мишева, снизио азот урее и лактата у серуму и повећао гликоген у јетри, потврђујући активност против умора. Ови налази пружају научну основу за развој полисахарида Цистанцхе тубулоса у функционалне производе против умора и сродне комерцијалне примене.

Кључне речи: Цистанцхе тубулоса полисахариди; методологија површине одговора; процес екстракције; структурна карактеризација; против умора; нове предности за ЦП у функционалној храни и нутрацеутици

 

Увод

Цистанцхе тубулоса (Сцхенк) Вигхт,цењена лековита и јестива хомологна биљка позната као „пустињски женшен“ има дугу историју употребе у Кини [1]. Његови главни биоактивни састојци укључују полисахариде, фенилетаноидне гликозиде и иридоиде; међу њима, полисахариди показују важне физиолошке функције, као што су имуномодулаторни [2], антиоксидативни [3], анти-заморни [4] и хипогликемијски ефекти [5], показујући широке изгледе за примену у фармацеутским производима, здравственим производима и функционалној храни [6]. Традиционалне методе екстракције полисахарида (нпр. потапање у топлу воду и рефлукс) често пате од дугог трајања, ниске ефикасности, велике потрошње енергије и потенцијалног оштећења структуре и активности полисахарида [7–9]. Осим екстракције топлом водом [10] и рефлукса [11], Тенг ет ал. [12] упоређивали су ултразвук, микроталасну и комбиновану екстракцију ултразвуком и микроталасом, откривши да је синергистички ултразвук-микроталасна метода дала најбољи принос (11,00%), 1,28% већи од екстракције топлом водом, након чега следе само микроталасна и ултразвук.

Одвајање и пречишћавање полисахарида има за циљ добијање високо чистих, структурно дефинисаних и биоактивних моносупстанци или специфичних фракција из сирових полисахарида који садрже протеине, нуклеинске киселине, липиде и друге нечистоће. Аиладан Маимаитиаили [11] је обезбојио и депротеинизовао сирове полисахариде Цистанцхе са АБ-8 макропорозном смолом, затим их раздвојио ДЕАЕ-650М целулозом коришћењем дејонизоване воде и НаЦл градијента, дајући један неутрални и пет киселих полисахарида; ин витро, неутрална фракција је показала супериорну антиоксидативну активност. Тренутно се студије биоактивности на полисахаридима Цистанцхе фокусирају углавном на антиоксидативне, антиинфламаторне ефекте и ефекте против старења [13], док су истраживања против умора релативно ретка.

Као новија техника екстракције природног производа, екстракција уз помоћ ултразвука (УАЕ) нуди кратко време екстракције, високу ефикасност, оперативну једноставност и нема или ниско загревање, чиме се избегава термичка деградација компоненти осетљивих на топлоту и побољшава принос и чистоћа; широко се користи за биљне полисахариде [14]. Међутим, услови УАЕ за екстракцију полисахарида Цистанцхе тубулоса (ЦП) захтевају даљу оптимизацију да би се максимизирала ефикасност. Методологија површине одговора (РСМ), ефикасан приступ пројектовању и оптимизацији заснован на математичком моделовању, омогућава свеобухватну анализу више фактора и њихових интеракција како би се одредили оптимални параметри.

У овој студији, користили смо РСМ за оптимизацију процеса УАЕ за ЦП, раздвојили и идентификовали резултујуће сирове полисахариде, упоредили ин витро антиоксидативне активности фракција и на основу најјачих антиоксидативних ефеката процењених против умора ин виво. Циљ је да се обезбеди научна и техничка подршка за коришћење ресурса Цистанцхе тубулоса са додатом вредношћу и да се убрза превод у функционалне производе за велнес индустрију.

Полисахариди Цистанцхе тубулоса: предности

 

 

 

Листа бенефиција Цистанцхе

 

 

Набавите високе полисахариде Цистанцхе тубулоса

 

 

1 Материјали и методе

1.1 Материјали и инструменти

Cistanche tubulosa was purchased from the Urumqi dried fruit market; polysaccharides were prepared in-house at Xinjiang Agricultural University. Absolute ethanol, acetone, and ether were analytical grade (Tianjin Zhiyuan Chemical Reagent Co., Ltd.). DPPH was from Shanghai Ruji Biotechnology Development Co., Ltd. ABTS and shiitake polysaccharide (purity >98%) је било из Соларбија (Пекинг).

Главна опрема: брусилица КСЛ‑02А (Иецханг Мацхинери Цо., Лтд.); ХХ‑С дигитално водено купатило константне температуре (Фабрика медицинских инструмената Јиангсу Јинтан); ЈБТ/Ц‑ИЦЛ400Т/3П(Д) ултразвучни фармацеутски процесор (Јининг Јинбаит Специал Енгинееринг Мацхинери Цо., Лтд.); ВП50 јединица за вакуумску филтрацију (Беијинг Лабтецх); РЕ‑52Б ротациони испаривач (Фабрика биохемијских инструмената у Шангају Јаронг); 80‑1 центрифуга (Фабрика инструмената Јинтан Хенгфенг); УВ‑2550 спектрофотометар (Схимадзу, Шангај).

Животиње: Педесет мужјака СПФ Кунминг мишева, телесне тежине 20,00±2,00 г, старости 3–4 недеље, купљено од Центра за лабораторијске животиње Медицинског универзитета Синђианг (лиценца СИКСК‑Ксин 2024‑0001).

 

Полисахариди Цистанцхе тубулоса: предности

 

 

1.2 Методе

1.2.1 Процес екстракције полисахарида

Кришке Цистанцхе су уситњене у прах и пропуштене кроз сито од 50-месх. Прашак је стављен у тиквицу са округлим дном, помешан са 8 запремина 80% етанола, рефлуксован на 90 степени 2 х и филтриран. Остатак је осушен на ваздуху. Дестилована вода је додата осушеном остатку и екстрахована под ултразвуком; екстракт је филтриран, филтрат задржан, а остатак једном поново екстрахован. Два филтрата су комбинована и концентрована до једне четвртине првобитне запремине. У концентрат су додата три запремине апсолутног етанола, остављена да стоји на 4 степена 12 х, и вакуумски филтрирана да би се сакупио талог. Талог је испран узастопно апсолутним етанолом, ацетоном и етром, осушен и измерен да би се добио сирови ЦП.

 

Полисахариди Цистанцхе тубулоса: предности

 

1.2.2 Експерименти са једним фактором

1.2.2.1 Утицај односа растварача и материјала на принос ЦП

Припремљено је пет порција Цистанцхе праха (по 4 г). Време екстракције и ултразвучна снага су фиксирани на 20 мин и 175 В. Односи растварача и материјала од 10:1, 15:1, 20:1, 25:1 и 30:1 (мЛ:г) су тестирани на њихов утицај на принос ЦП. Сваки експеримент је изведен у три примерка.

 

1.2.2.2 Утицај ултразвучне снаге на принос ЦП

Пет порција праха (по 4 г) екстраховано је при оптималном односу растварача и материјала који је утврђен у 1.2.2.1, са временом екстракције фиксираним на 20 мин. Тестирани су нивои ултразвучне снаге од 125, 150, 175, 200 и 225 В. Изведени су троструки експерименти.

 

1.2.2.3 Утицај ултразвучног времена на принос ЦП

Пет порција праха (свака по 4 г) екстраховано је при оптималном односу растварача и материјала (од 1.2.2.1) и оптималној ултразвучној снази (из 1.2.2.2). Тестирана су ултразвучна времена од 10, 15, 20, 25 и 30 минута. Сваки услов је изведен у три примерка.

 

1.2.3 Методологија површине одговора (РСМ)

На основу резултата са једним фактором, коришћен је Бок-Бехнкен дизајн са приносом ЦП као одговором и ултразвучним временом, односом растварача и материјала и ултразвучном снагом као факторима. РСМ оптимизација је спроведена у Десигн-Екперт 8 са трофакторским дизајном на три нивоа (видети табелу 1). Експерименти су изведени у три примерка.

 

Полисахариди Цистанцхе тубулоса: предности

 

1.2.4 Одређивање садржаја полисахарида

Садржај полисахарида је мерен колориметријском методом сумпорна киселина–антрон [15]. Антрон (20 г) је растворен у концентрованој сумпорној киселини и допуњен до 100 мЛ да би се припремио раствор од 0,2 г/мЛ. Одговарајућа количина ЦП је растворена и разблажена до 100 мЛ. Аликвот од 1 мЛ је помешан са 5 мЛ 0,2 г/мЛ антрон-сумпорне киселине, вортексиран, остављен на собној температури 5 минута, загреван у воденом купатилу од 90 степени 15 минута, охлађен, а апсорбанца је измерена на 585 нм. Глукоза је коришћена за припрему стандардне криве: И=0.0081Кс + 0.0176 (Р²=0.9991). Апсорбанца узорка је замењена у криву да би се израчунао садржај полисахарида.

 

1.2.5 Прорачун приноса полисахарида

Принос полисахарида је израчунат према стандардној формули (маса добијеног полисахарида у односу на масу сировине), користећи измерени садржај полисахарида.

 

1.2.6 Пречишћавање полисахарида

Crude CP extract was prepared under the optimized conditions. Following Wang et al. [16], Sevag reagent (chloroform:n‑butanol = 4:1, v/v) was used for deproteinization with vigorous shaking for 10 min, followed by centrifugation; the supernatant was collected and the process repeated three times. Eight volumes of 95% ethanol were added to the filtrate and left at 4 °C for 24 h. After centrifugation (8000 r/min, 10 min), the precipitate was collected and freeze‑dried to obtain crude CP. A 10 mg/mL solution was prepared by dissolving 100 mg crude CP in 10 mL distilled water, centrifuged at 7000 r/min for 10 min to remove insolubles, and filtered through a 0.45 μm membrane. The solution was loaded onto a DEAE‑52 cellulose column and eluted stepwise with distilled water and 0.1, 0.3, and 0.5 mol/L NaCl. Eluates were monitored by anthrone–sulfuric acid assay; fractions with absorbance >1,0 је сакупљено, концентровано, дијализовано, осушено замрзавањем и измерено да би се добиле различите фракције полисахарида. Принос (И) је израчунат као:
Y = (C × V × D) / (m × P)
где је Ц концентрација полисахарида (мг/мЛ) пречишћеног циљног раствора, В је запремина (мЛ), Д је фактор разблажења, м је маса сировог ЦП (г), а П је садржај полисахарида сировог ЦП.

 

1.2.7 Поређење антиоксидативних активности фракција

1.2.7.1 Чишћење ДППХ радикала

Након Јианга ет ал. [17] са модификацијама, свеже припремљен радни раствор ДППХ од 0,2 ммол/Л. Фракциони раствори од 0,2, 0,4, 0,6, 0,8 и 1,0 мг/мЛ (сваки по 1 мЛ) су помешани са 2 мЛ ДППХ, вортексирани и инкубирани у мраку на собној температури 30 мин. Апсорбанца је мерена на 517 нм (Аи). Сваки тест је утростручен, а витамин Ц (Вц) у одговарајућим концентрацијама је служио као позитивна контрола. Брзина чишћења је приказана у зависности од концентрације и израчуната према:
ДППХ чишћење (%)=[1 − (Аи − Ај) / (А0)] × 100
где је Аи А (2 мЛ ДППХ + 1 мЛ узорак/Вц), Ај је А (2 мЛ етанола + 1 мЛ узорак/Вц), а А0 је А (1 мЛ воде + 2 мЛ ДППХ).

 

1.2.7.2 Чишћење радикала АБТС

Након Ксуа ет ал. [18] са модификацијама, 1 мЛ узорка при 0,2–1,0 мг/мЛ је помешан са 4 мЛ АБТС раствора, вортексиран и инкубиран у мраку 6 минута на собној температури. Апсорбанца је мерена на 734 нм, у три примерка. Вц при одговарајућим концентрацијама је била позитивна контрола. Брзина чишћења је приказана у зависности од концентрације и израчуната према:
АБТС чишћење (%)=[1 − (Аи − Ај) / (А0)] × 100
где је Аи А(1 мЛ узорка/Вц + 4 мЛ АБТС), Ај је А(1 мЛ узорка/Вц + 4 мЛ воде), а А0 је А(1 мЛ воде + 4 мЛ АБТС).

 

1.2.8 Структурна анализа фракција полисахарида

1.2.8.1 Инфрацрвена спектроскопија Фуријеове трансформације (ФТИР)

Након Зханг ВенЦхао ет ал. [19] са модификацијама, 2 мг претходно обрађеног полисахарида је помешано са 200 мг осушеног КБр, млевено и пресовано у пелете. Спектри су прикупљени од 400–4000 цм⁻¹ при резолуцији 4 цм⁻¹ са 32 скенирања.

 

1.2.8.2 Одређивање молекулске тежине

Након Зханг Јиаиуана [20] са модификацијама, 5 мг узорка је растворено у 0,05 мол/Л НаЦл до 5 мг/мЛ, центрифугирано и филтрирано кроз мембрану од 0,22 μм. Молекуларна тежина је одређена помоћу ХПГПЦ са две водорастворне СЕЦ колоне на бази полимера (8 мм × 300 мм) у серији, детектор: Ватерс РИ; мобилна фаза: 0,05 М НаЦл; проток: 0,50 мЛ/мин; температура колоне: 40 степени; ињекција: 30 μЛ. Калибрационе криве су биле:
Лг Мп–РТ: и=−0,1359к + 9.4523 (Р²=0.9974)
Лг Мв–РТ: и=−0,1375к + 9.5035 (Р²=0.9976)
Лг Мн–РТ: и=−0,1368к + 9.4749 (Р²=0.9971)
Сходно томе су израчунате молекулске тежине.

 

1.2.8.3 Састав моносахарида

Пратећи Накин С ет ал. [21], узорци су обрађени и анализирани јонском хроматографијом/ХПЛЦ. Стандарди (по 5 мг рамнозе, арабинозе, галактозе, глукозе, ксилозе, манозе, галактуронске киселине, глукуронске киселине, глукозамина ХЦл, галактозамина ХЦл; 10 мг фукозе) су растворени и направљени до 10 мЛ, а затим разблажени до серије концентрација. За хроматографију је коришћен Тхермо У3000 систем са Агилент ЗОРБАКС Ецлипсе КСДБ‑Ц18 колоном (4,6 мм × 250 мм, 5 μм); мобилна фаза: ацетонитрил:фосфатни пуфер (12 г/Л КХ2ПО4, пХ подешен на 6,8 са 2 М НаОХ)=17:83 (в/в), изократски; проток 0,8 мЛ/мин; стуб 30 степени; детекција 250 нм; ињекција 10 μЛ.

 

1.2.9 Експерименти против замора фракција полисахарида

1.2.9.1 Груписање животиња и администрација

Етичко одобрење бр.. 2023048. После 3 дана аклиматизације, 50 мишева је рандомизовано у пет група (н=10): празна контрола; позитивна контрола (схиитаке полисахарид 300 мг/кг); фракција мале дозе (150 мг/кг); фракција средње дозе (300 мг/кг); фракција високе дозе (600 мг/кг). Фракције и контроле су даване гаважом током 15 дана; мишеви су имали слободан приступ храни и води.

 

1.2.9.2 Тест пливања са оптерећењем

Пет сати након последње сонде, оловна тежина једнака 7% телесне тежине је причвршћена за сваки реп миша. Мишеви су пливали у резервоару дубине 60 цм на 30±2 степена. Време од потапања до тренутка када је глава остала потопљена 10 с без поновног израња забележено је као исцрпно време пливања.

 

1.2.9.3 Азот урее у крви (БУН)

После пливања, крв је сакупљена преко орбиталног синуса у хепаринизоване епрувете и центрифугирана на 3000 р/мин током 10 мин. БУН је мерен стриктно према упутствима за комплет.

 

1.2.9.4 Лактат у крви

Серум (20 μЛ) је обрађен према упутствима за комплет. Апсорпција је очитана на 530 нм (дужина пута од 1 цм) са двоструко дестилованом водом као нула, и израчуната је концентрација лактата.

 

1.2.9.5 Хепатични гликоген

Одмах након узимања крви, мишеви су еутаназирани дислокацијом грлића материце. Јетре су изрезане, испране физиолошким раствором, осушене и 80 мг ткива стављено је у епрувету са 3 запремине алкалије (пХ 8,0). Узорци су кувани 20 минута, охлађени и гликоген је квантификован према упутствима за комплет.

 

1.2.10 Анализа података

Подаци су анализирани коришћењем СПСС 17.1 и приказани као средња вредност ± СД (Кс±С). Коришћена је једносмерна АНОВА са тестирањем хомогености варијансе; П < 0,05 се сматра статистички значајним. Слике су припремљене у Оригин 2021 и ГрапхПад Присм 9.

Комерцијални превод и примена наглашени

Ново позиционирање предности: Оптимизовани неутрални полисахарид Цистанцхе (ЦПН) показао је двоструке антиоксидативне ефекте и ефекте против умора – продужену издржљивост, смањени БУН и лактат, и повишене тврдње које подржавају гликоген у јетри, као што су „подржава издржљивост“, „помаже у смањењу подршке вежбању,“ и „антиоксидансима изазваним замором“.

Формати производа: напици за издржљивост спремни за мешање, гел схотови, функционалне гумене гуме и капсуле. Комбинујте ЦПН са електролитима, Б‑витаминима и угљеним хидратима са ниским ГИ за спортске формулације; или са традиционалним Цистанцхе фенилетаноидним гликозидима за синергистичке СКУ-ове „енергија + опоравак“.

Смернице за обраду: Услови УАЕ (20 мин, однос растварача 20:1, 220 В) су прилагодљиви и енергетски ефикасни; ДЕАЕ-52 фракционисање даје неутралну фракцију олова (ЦПН) са већим садржајем и активношћу угљених хидрата, омогућавајући доследну стандардизацију (нпр. већи или једнак 39% угљених хидрата, ХПГПЦ отисак прста са бимодалном Мв).

Усклађеност и поткрепљење: Користите садашње резултате ин виво да поткрепите тврдње о структури/функцији; проширите експериментима са људским пилотима који мере време до исцрпљивања, кинетику лактата и уочени напор. Примените чисту екстракцију и изјаве о растварачу.

Контрола квалитета: Усвојити ФТИР маркерске траке, односе моносахарида (преовлађујући глукоза/маноза) и ХПГПЦ профил молекулске тежине као критеријуме за ослобађање. Антиоксидативни тестови (ДППХ/АБТС) као провере активности у процесу.

 

Повезаност и референце аутора (ауторитативни извор)

ДУАН Јихуа1, ХАН Хаикиа2,+, ЗХАО Вениан3, ЈИА Мингки2, СУН Јингјинг2, ЗХОУ Јикианг2, СОНГ Сукин4, ЗХУ Донглианг3*, БАО Ксиаовеи2*
(1. Ксињианг Сикаи Фоод Р&Д Центер (Цо., Лтд.), Цхангји, Ксињианг 831100; 2. Цоллеге оф Фоод Сциенце анд Пхармаци, Ксињианг Агрицултурал Университи, Урумки 830052, Кина; 3. Фармацеутски и инструментални институт за тестирање, одељење за логистику Ксињианг Милит регије Ксињианг 830052 4. Свеобухватна експериментална станица Урумчи, Академија пољопривредних наука у Синђијану, Синђанг, Урумчи 830052)

Референце
[1] ЗХАО Хонгтинг, КСИН Гуокионг, ГУО Иуан. Напредак истраживања Цистанцхис синенсис, традиционалне кинеске медицине са истим извором хране и лека. Кинеска биљна медицина, 2025, 56(09): 3316–3329.
[2] ИАНГ МХ, ЦХЕН РХ, ЗХОУ Кс, ет ал. Напредак истраживања фармаколошких ефеката и механизма полисахарида. Старцх-Старке, 2024, 76(9–10): 2300168.
[3] МУ С, ИАНГ ВЈ, ХУАНГ Г Л. Антиоксидативна активност и механизми полисахарида. Цхем Биол Друг Дес, 2021, 97(3): 628–632.
[4] ЗХАНГ СС, ЛИУ Б, ИАН ГИ, ет ал. Хемијска својства и ефекат полисахарида против умора. Ј Фоод Биоцхем, 2022, 46(1): е14015.
[5] ФУ И, ВАНГ ЛВ, ЈИАНГ ГЦА, ет ал. Антидијабетичка активност полисахарида из вар. Ли. Фоодс, 2022, 11(10): 1464.
[6] ЦХЕН Цхангмао, ГАЗАНГ Зхаки, ВАНГ Јие, ет ал. Напредак истраживања активних компоненти и фармаколошког механизма Цистанцхиакиса. Кинеска биљна медицина, 2025, 56(12): 4464–4477.
[7] ВАНГ Венли, ЗХАНГ Јинлинг, ВЕИ Ианинг, ет ал. Напредак екстракције природног полисахарида, пречишћавања и биоактивности. Наука и технологија прехрамбене индустрије, 2022, 43(22): 470–480.
[8] ГОНГ П, ВАНГ СИ, ЛИУ М, ет ал. Методе екстракције, хемијске карактеристике и биолошке активности полисахарида печурака: мини-преглед. Царбохидр Рес, 2020, 494: 108037.
[9] ЦХЕН Кс, ЛИУ ИБ, ДЕНГ И, ет ал. Примарна студија о утицају метода екстракције на својства и активности полисахарида. Молецулес, 2025, 30(1): 148.
[10] ЈИАНГ Хуабин, ЛИУ Лисха, ЗХАНГ Кинг, ет ал. Симултано одвајање и пречишћавање тубуларних Цистанцхе фенилетаноидних гликозида и полисахарида технологијом мембранске сепарације. Наука о храни и технологија, 2019, 44(07): 229–234.
[11] МАИМАИТИАИЛИ Аиладан. Студија о екстракцији, раздвајању и пречишћавању полисахарида из Херба Цистанцхе и њиховој ин витро имунолошкој активности. Урумчи: Медицински универзитет Синђианг, 2021.
[12] ТЕНГ Липинг, МУ Лонг, ЛУО Фенг, ет ал. Метода за екстракцију сирових полисахарида из Цистанцхе тубулоса и његов ефекат на уклањање дифенил радикала. Гуизхоу Агрицултурал Сциенцес, 2011, 39(01): 66–68.
[13] БАИ Донгвен. Ефекти екстракта цвета Педицуларис и Цистанцхе на хипокампус и микробиоту црева под хипоксијом на великој надморској висини. Урумчи: Пољопривредни универзитет Синђианг, 2023.
[14] ЈИНГ ИС, ЗХАНГ СЛ, ЛИ МС, ет ал. Екстракција, структура и биоактивност полисахарида. Фоодс, 2022, 11(14): 2126.
[15] ГУО Ксиаолеи, ЗХУ Сицхао, ЗХАИ Ксуфенг, ет ал. Поређење метода антрон сулфата и фенол сулфата за одређивање полисахарида Ганодерме. Кинески часопис традиционалне кинеске медицине, 2010, 28(09): 2000–2002.
[16] ВАНГ Сензхенг, СУН Ионгфанг, ЗХОУ Ие, ет ал. Оптимизација екстракције, структурна карактеризација и ефекти на функционалну констипацију Вен Цурцума полисахарида. Истраживање и развој природних производа: 1–17.
[17] ЈИАНГ Зхикуан, ЦАИ Зифу, ДОНГ Сиси, ет ал. Хемијска модификација полисахарида бодљикаве крушке и анализа антиоксидативне и хипогликемијске активности. Наука и технологија прехрамбене индустрије: 1–20. дои:10.13386/ј.иссн1002-0306.2025020006.
[18] КСУ Кинг, ИАНГ Јианг, ЛИ Андинг. Поређење главних функционалних компоненти и антиоксидативних активности маракује различитог порекла. Модерна прехрамбена наука и технологија, 2023, 39(08): 94–102.
[19] ЗХАНГ ЦВ, ЗОУ ИФ, ЗОУ И, ет ал. Ултразвучна екстракција полисахарида из Паеониае Радик алба: оптимизација екстракције, структурна карактеризација и антиоксидативни механизам ин витро. Инт Ј Биол Мацромол, 2024, 268: 131816.
[20] ЗХАНГ Јиаиуан. Изолација и пречишћавање полисахарида коприве, идентификација структуре и хипогликемијска активност. Сиан: Универзитет науке и технологије Шанкси, 2021.
[21] СУН НКС, ЗХАО ИН, ИИН М И. Екстракција, пречишћавање, структура и биоактивност полисахарида из маитакеа: Преглед. Ј Фоод Меас Цхарацт, 2023, 17(6): 6200–6213.
[22] ВАН ​​Иуе, КИ Јииинг, ЗЕНГ Хонг, ет ал. Оптимизација ултразвучне екстракције шитаке полисахарида методологијом површине одговора. Биотехнолошки билтен, 2015, 31(01): 79–85.
[23] ЛИ Ли, ЗХАНГ Саи, ХЕ Кианг, ет ал. Примена методологије површине одзива у експерименталном дизајну и оптимизацији. Лабораторијска истраживања и истраживања, 2015, 34(08): 41–45.
[24] МА Квхуан, СХИ Ксиаофенг, СХЕН Веи, ет ал. Оптимизација екстракције полисахарида иглица кедровине анализом површине одговора. Кинески часопис традиционалне кинеске медицине, 2018, 33(03): 1106–1110.
[25] ЗХАО Јинсонг, ПЕНГ Јингјинг, ЗХАНГ Лианг, ет ал. Компаративна студија о побољшању непријатних укуса у баијиу користећи различите активне угље. Цхина Бревинг, 2025, 44(09): 179–186.
[26] ВУ Хуикионг, ВУ Хаилиан, КСИАО Нан, ет ал. Пицкеринг емулзије Мосла цхиненсис испарљивог уља синергистички стабилизоване нанокристалном целулозом/композитним честицама кукурузног скроба. Наука и технологија прехрамбене индустрије: 1–27. дои:10.13386/ј.иссн1002-0306.2025060255.
[27] ВУ Схуанг. Утицај фукоидана на стабилност Пицкеринг емулзија на бази протеина. Далиан: Политехнички универзитет Далиан, 2022.
[28] ЛИН Јинг, ЗХЕНГ Меикиа, ЦХЕН Цхангмеи, ет ал. Двофазна екстракција полисахарида црног чаја јасмина и антиоксидативна активност уз помоћ ултразвука. Хемија и биоинжењеринг, 2025, 42(09): 35–42.
[29] ВАНГ Иихан, КСИЕ Кингиун, ТЕНГ Јианвен, ет ал. Ефекти изолације и пречишћавања на структуру полисахарида Тремелла и ин витро активност снижавања липида. Технологија прехрамбене индустрије, 2025, 46(05): 81–90.
[30] БАН Схидонг, ЗОНГ Цхунианг, ВАНГ Ксиаодан, ет ал. Оптимизација Лацтобациллус плантарум ферментације полигоната ради повећања приноса полисахарида и ин витро пребиотичке активности. Наука и технологија прехрамбене индустрије: 1–18. дои:10.13386/ј.иссн1002-0306.2025030047.
[31] МО Иунфенг, ЦХЕН Зикуан, ПЕНГ Јуниинг, ет ал. Ефекти процеса сушења на својства праха бундеве и антиоксидативни капацитет. Наука и технологија прехрамбене индустрије: 1–19. дои:10.13386/ј.иссн1002-0306.2025040072.