Синђанг Цистанцхе полисахариди: способни да очисте реактивне врсте кисеоника и слободне радикале

апстрактно

Проучавана је антиоксидативна активност полисахарида Цистанцхе десертицола ин витро. Узимајући аскорбинску киселину као контролу, узимање реакције сличне Фентону за производњу хидроксилних радикала, реакцију аутооксидације допамина за производњу супероксид ањонских радикала, реакцију натријум хипохлорита са водоник пероксидом за производњу синглетног кисеоника, дифенил горке хидразин радикале као експериментални модел, ефекте на Цистасцацхески радијал супероксида и супер пустиње. хидроксилни радикали ДППХ · слободни радикал (дифенил горки хидразински радикал), ефекат чишћења синглетног кисеоника. Резултати су показали да полисахариди из Цистанцхе десертицола имају очигледне ефекте уклањања наведених слободних радикала, а ефекат чишћења је у позитивној корелацији са концентрацијом полисахарида.

Кључне речи :Цистанцхе десертицола; полисахарид; Слободни радикали

1 . Увод

Тело континуирано производи различите реактивне слободне радикале кисеоника (РОС) у процесу оксидативног метаболизма животних активности, који су међупроизводи оксидационо-редукционе реакције аеробног метаболизма.Истраживања су открила да ће вишак слободних радикала напасти животне макромолекуле и различите органеле, узрокујући различита оштећења на молекуларном нивоу, нивоу ћелија, ткива и органа, убрзавајући процес старења тела и изазивајући болести као што су тромбоза, дијабетес, атеросклероза, тумори итд.. [1]. Због токсичности хемијски синтетизованих антиоксиданата за људско тело, потрага за природним антиоксидансима високе ефикасности и ниске токсичности који могу да уклоне слободне радикале кисеоника је последњих година постала врућа тема истраживања у области медицине, хране, хемијског инжењерства и других области.

Цистанцхе десертицола (Y.C...)је ретка кинеска традиционална медицина и позната је као "пустињски гинсенг" [2]. Цистанцхе десертицола маполисахарид је једна од главних биоактивних компоненти Цистанцхе десертицола, али нема извештаја о томе да ли полисахарид Цистанцхе десертицола има ефекат уклањања слободних радикала. У овом раду спектралном анализом утврђени су ефекти чишћења полисахарида Цистанцхе десертицола на супероксидни ањонски радикал, хидроксил радикал, ДППХ · слободни радикал и синглетни кисеоник како би се проценила његова антиоксидативна активност и пружила научна основа за потпуни развој и коришћење овог природног ресурса.

Кинеска трава цистанцхе

2. Експериментални део

2.1 Инструменти и реагенси

UV-2401 УВ-видљиви спектрофотометар (Схимадзу, Јапан); ЛуматЛБ9507 ултра-осетљиви цевни луминометар (Немачка

БертхолдТецхнологиес); RE-52CS ротациони испаривач (Фабрика биохемијских инструмената у Шангају Јаронг); ХВ-СИ електронско термостатско водено купатило (Фабрика инструмената Јинтан Ксинханг); PHS-3C пХ метар (Схангхаи Прецисион Сциентифиц Инструмент Цо., Лтд.); DZF-6020 пећница за вакуумско сушење (Схангхаи Иихенг Тецхнологи Цо., Лтд.). Цистанцхе десертицола: купљено од Куитун Пхармацеутицал Цорпоратион. Луминол (Сигма, САД), допамин (Кинески институт за контролу фармацеутских и биолошких производа), ФеСО4, ЕДТА, витамин Ц, Х2О2, НаЦлО, На2ЦО3, НаХЦО3, итд., сви су домаћи аналитички реагенси. Експериментална вода је јоноизмењивачка дестилована вода.

2.2 Експериментална метода

2.2.1 Метода екстракције полисахарида Цистанцхе десертицола

Узмите 30 г праха Цистанцхе десертицола и ставите га у конусну тиквицу од 500 мЛ. Потопите га у петрол етар (60-90 степени), етар и 80% врући раствор етанола (30 степени) током 6 сати, респективно, а остатак се испари да би се растварач осушио. Остатак филтера потопите у воду у односу 1:10 током 24 сата, загрејте на 30 степени и екстрахујте 100 минута. Након екстракције, центрифугирати да се добије супернатант. Након што се супернатант концентрише под сниженим притиском, исталожи се са 95% етанолом од 3 пута веће запремине. Дозвољено је да стоји 24 сата на 4 степена. Након центрифугирања, сакупља се и таложи. Након сушења у вакууму, може се добити сирови полисахарид Цистанцхе десертицола. Измерити 1,00 г сировог полисахарида, растворити га водом и ставити у волуметријску тиквицу од 50 мЛ за приправност.

Пустињски гинсенг-антиоксиданс

Кликните овде да видите Цистанцхе производе у праху

【Затражите више】 Е-пошта:cindy.xue@wecistanche.com / ВхатсАпп: 0086 18599088692 / Вецхат: 18599088692

2.2.2 Испитивање способности чишћења полисахарида Цистанцхе десертицола од О2 · слободних радикала

Способност чишћења полисахарида Цистанцхе десертицола до O-2 · тестирана је производњом слободних супероксидних радикала (O-2 ·) аутооксидацијом допамина [3]. Додајте 3,0 мЛ раствора карбонатног пуфера од 0,1 ммол/ЛпХ=10.12, 3,0 мЛ воде и 0,5 мЛ раствора полисахарида различитих концентрација у епрувету за сушење са скалом. Након претходног загревања у воденом купатилу од 30 степени у трајању од 5 минута, додајте 1,0 мЛ 2,0 ммол/Л допамина претходно загрејаног у воденом купатилу од 30 степени, одмах промешајте и време, држите реакцију на 30 степени 5 минута и одмах зауставите реакцију са 2 капи 10 мол/Л ХЦл. Користите раствор пуфера као референцу, измерите апсорбанцију (узорак А) на 221 нм, замените узорак (слепи узорак А) са 0,5 мЛ воде у слепој групи и замените узорак са 0,5 мЛ аскорбинске киселине у контролној групи, измерите сваки узорак три пута паралелно и узмите просечну вредност. O-2 · стопа уклањања (%)=(празно поље - узорак)/празно поље × 100%

2.2.3 Испитивање способности чишћења полисахарида Цистанцхе десертицола на · ОХ слободне радикале

DЕсерт Ливинг Цистанцхе-Антиоксиданс

ЕДТА-Фе (Ⅱ) - метиленско плаво - Х2О2 систем је коришћен за испитивање способности чишћења полисахарида Цистанцхе десертицола на хидроксилни радикал. Принцип је да ЕДТА-Фе (Ⅱ) реагује са водоник пероксидом да би произвео слободне радикале · ОХ, што смањује карактеристични апсорпциони максимум раствора метилен плавог на 660 нм.

Add 1.0mL of 5mmol/L LFeSO4 solution, 1.2mL of 5mmol/L LEDTA solution, 2.0mL of 0.03mol/L NaH2PO4-Na2HPO4 (pH=7.4) buffer solution, and 1.3mL of 20mmol/L hydrogen peroxide solution into a series of 10mL test tubes with stoppers, shake well, add 0.7mL of 0.2mmol/L methylene blue solution, and then add 1.0mL of the solution to be tested and vitamin C1.0 of different concentrations respectively, dilute to 10.00mL with water, mix well, keep at 37 ℃ for 30min, and measure the absorbance value of each solution at 660nm, The blank group replaced the sample solution with water. Each sample shall be measured three times in parallel, and the average value shall be taken. · OH radical scavenging rate of sample (%)=[(A2-A1)/(A0-A1) × In the formula of 100%: A0 -- absorbance value of undamaged tube; A1 - absorbance value of damaged tube; A2 -- Photometric value after adding sample.

2.2.4 Тест на ДППХ · способност чишћења полисахарида Цистанцхе десертицола

Узмите 0,1 мЛ раствора полисахарида Цистанцхе десертицола и додајте га у 5,0 мЛ ДППХ · раствора, брзо промешајте и оставите 10 минута на собној температури,

Одредите његову промену апсорбанције на таласној дужини од 517 нм [4]. Сваки узорак се мери три пута паралелно и узима се просечна вредност. Брзина клиренса узорка ДППХ · (%)=1 - [(АБ)/А0] × У формули од 100%: А0 -- вредност апсорпције ДППХ · (1,9мЛДППХ ·+0.1мЛ50% етанола) без узорка; А - вредност апсорпције узорка после реакције са ДППХ ·; Б -- вредност апсорпције празног узорка (узорак 0,1мЛ+1.9мЛ 50% етанол).

2.2.5 Испитивање полисахарида Цистанцхе десертицола синглетног кисеоника 1О2

Једнолинијски кисеоник (1О2) настаје хемијском реакцијом НаЦлО и Х2О2 на 37 степени [5]. Раствор који се користи за одређивање 1О2 је 100 μЛ2,8ммол/Л раствора НаЦлО, 400 μЛ раствора 5 ммол/НаОХ, 300 μЛ 10 ммол/Х2О2 раствора и 50 μЛ раствора 1 ммол/Л/Луминол. Током реакције, реакциони раствор се додаје раствору узорка, а хемилуминисцентни инструмент аутоматски бележи процес реакције у исто време. Узмите НаЦлО-Х2О2-НаОХ-Луминол као слепу контролу. Започните реакцију и додајте реакциони раствор у епрувету за узорке из боце за складиштење хемилуминисцентног инструмента према количини која је одређена процедуром. Затим се интензитет хемилуминисценције реакционе смеше бележи на папиру за снимање сваких 5с, сваки узорак се мери три пута паралелно и узима се просечна вредност.

Стопа клиренса се израчунава према следећој формули: стопа клиренса (%)=(контролни интензитет светлости - интензитет светлости узорка)/контролни интензитет светлости × 100%

3 Резултати и дискусија

3.1 Ефекат чишћења полисахарида Цистанцхе десертицола на O-2 ·

Предности цистанцхе тубулоса-Антиоксидант

Хемијско својство O-2 · је активно, што може да натера масне киселине на биофилму да производе пероксид, а затим да униште ћелије [6]. У овом раду је коришћена метода допамина за одређивање способности хватања О2 ·. Способност чишћења Цистанцхе десертицола до О2 · приказана је на слици 1. Резултати су показали да полисахарид Цистанцхе десертицола може инхибирати О2 · произведен аутооксидацијом допамина, и да се повећава са повећањем концентрације унутар измереног опсега концентрације (0-8 мг/мЛ), али је способност уклањања корбичне киселине била нижа од оне код корбичне киселине.

3.2 Ефекат чишћења полисахарида Цистанцхе десертицола · ОХ

·ОХ је један од најактивнијих радикала без кисеоника у активним врстама кисеоника. Може да реагује са готово било којим биолошким макромолекулом у живим ћелијама и може да доведе до биохемијских процеса као што су пероксидација липида, полимеризација протеина, деполимеризација, разбијање нуклеинске киселине итд. у ткиву тела, изазивајући болести ткива и ћелија, што доводи до појаве различитих болести и убрзавања старења организма [7]. Способност чишћења полисахарида Цистанцхе десертицола на · ОХ приказана је на слици 2. Резултати су показали да полисахарид Цистанцхе десертицола има добар ефекат чишћења на · ОХ, и да се повећава са повећањем концентрације.

3.3 Способност чишћења полисахарида Цистанцхе десертицола на ДППХ ·

ДППХ · (дифенил горки хидразински радикал) је стабилан слободни радикал, који је љубичаст у органским растварачима и има јаку апсорпцију близу 517 нм. Након додавања антиоксиданата, неки слободни радикали се уклањају, што слаби апсорпцију, што се може користити за процену антиоксидативне активности ове супстанце [8]. Видети слику 3 за ДППХ · капацитет чишћења полисахарида Цистанцхе десертицола. Експериментални резултати су показали да је капацитет чишћења полисахарида Цистанцхе десертицола на ДППХ · у позитивној корелацији са његовом концентрацијом, а капацитет чишћења је већи од капацитета аскорбинске киселине.

3.4 Способност чишћења полисахарида Цистанцхе десертицола до 1О2

Једнолинијски кисеоник је побуђени молекуларни кисеоник са активним хемијским својствима. Пошто неспарени електрони имају тенденцију упаривања, слободни радикали показују активнија хемијска својства [9]. Способност чишћења полисахарида Цистанцхе десертицола до 1О2 приказана је на Слици 4. Експериментални резултати су показали да је капацитет чишћења полисахарида Цистанцхе десертицола био нижи од капацитета аскорбинске киселине у опсегу од 0-4,0 мг/мЛ, а капацитет чишћења био је већи од концентрације Цистанцхе десертицола као концентрације Цистанцхе десертицола од концентрације те киселине десертицола. био већи од 4,0 мг/мЛ.

 

4. Закључак

Антиоксидативна активност полисахарида Цистанцхе десертицола ин витро је детаљно проучавана кроз различите реактивне системе без радикала без кисеоника.Из експерименталних резултата може се видети да у оквиру експерименталног опсега концентрација, полисахаридни екстракт Цистанцхе десертицола има ефекте чишћења на О2 ·, · ОХ, ДППХ · и 1О2, а ефекти чишћења су различити за различите системе.Резултати су то показалиЦистанцхе десертицола полисахарид је ефикасан егзогени природни антиоксиданс, који је вредан даљег истраживања, развоја и свеобухватне употребе.

Цистанцхе 200мг-Антиоксидант

референца

[1] Линг Гуантинг. Антиоксидативна храна и здравље [М]. Пекинг: Цхемицал Индустри Пресс, 2004.1-58.

[2] Гао Минг, Тиан Зииу, Цаи Хонгмеи, ет ал. Алкална екстракција и хемијска анализа полисахарида из Цистанцхе десертицола [Ј]. Пољопривредна и прехрамбена наука и технологија, 2008, 2 (3): 32-34.

[3] Схи Схуангкун, Сонг Ксинфанг. Аутооксидација допамина [Ј]. Јоурнал оф Хебеи Нормал Университи, 1997, 21 (4): 387-389.

[4] Зханг Зекинг, Тиан Јингјуан, Зханг Јинг. Студија о антиоксидативној активности Фангфенг полисахарида [Ј]. Кинеска медицина, 2008, 31 (2): 268-271.

[5] Ли Хаипинг, Џанг Шухај, Џанг Куншен. Студија о антиоксидативној активности лентинана [Ј]. Истраживање и развој хране, 2008, 29 (4): 56-60.

[6] Мо Јиан. Увод у медицинску биологију слободних радикала [М]. Пекинг: Издавачка кућа народног здравља, 1989.21-25.

[7]ФредерицкВЛ.ФрееРадицалс[Ј].ЦлиницалЦхемистри,1993,65(12):374-377.

[8]МатсудаМ,НагахамаИ,СатоТетал.ДМИисаСпецифицДМДомаинГенеРекуиредфорМалеДевелопментинтхеМедакаФисх[Ј].Натуре,2002,30:559-563.

[9]КанофскиЈР.СинглетОкигенПродуцтионбиЛацтоперокидасе[Ј].ЈоурналофБиологицалЦхемистри,1983,258(10):5991-5993.