Мета-анализа ефеката полиморфизма ендотелне синтазе азот-оксида 4ба на интерстицијалну фиброзу бубрега код дијабетичке нефропатије
Mar 13, 2022
Увод
ДН је једна од најозбиљнијих компликација код дијабетичара и један од главних узрока смрти (1). Као водећи узрок завршног стадијумабубрежна болест, одмах иза гломерулонефритиса, ДН је често праћен компликацијама као што су хронична хипергликемија и протеинурија (2,3). ДН се односи на изузетно сложен метаболички поремећај, а након његове прогресије у завршну фазубубрежна болест, обично је тежи за лечење од другихболести бубрега. Стога су рана превенција и контрола од великог значаја.Реналинтерстицијска фиброза је уобичајена болест у процесу дијабетичке нефропатије, која лако може довести добубрежниинсуфицијенција и чакинсуфицијенција бубрега(4). Његова типична патолошка карактеристика је заменабубрежниинтерстицијум и тубуле са великим количинама екстрацелуларног матрикса, који синтетишу или луче ћелије укључујући епителне ћелије фибробласта и ендотелне ћелије (5). Прогресија одбубрежниинтерстицијална фиброза може бити праћена променама у експресији и регулацији различитих цитокина, фактора раста и гена у ћелијама гломерула. ДН на генетском нивоу је такође истакнути фокус актуелних истраживања (6).
ЦИСТАНЦХЕ ЋЕ ПОБОЉШАТИ БОЛЕСТИ БУБРЕГА/БУБРЕГА
Полиморфизам гена се односи на истовремено и често присуство 2 или више дискретних варијанти, генотипова или алела у биолошкој популацији. Механизам који лежи у основи формирања генских полиморфизама је мутација гена, укључујући на целокупном индивидуалном, ћелијском, протеинском и генетском нивоу (7). Постоји низ генетских полиморфизама укључујући фенотипске, хромозомске, протеинске, ензимске, антигенске и ДНК полиморфизме (8). Истраживања су показала да азот оксид (НО) може да игра важну регулаторну улогу у нервној проводљивости, имунолошком одговору, вазодилатацији и циркулацији крви (9). Ендотелна синтаза азот оксида (еНОС), као оксидаза мешовите функције, углавном се експримира у васкуларним ендотелним ћелијама и такође је кључни фактор у одређивању нивоа НО у зиду крвних судова. Литература је потврдила да је еНОС имао известан утицај на прогресију дијабетеса и појавуобољење бубрега. Људски еНОС ген се налази на хромозому 7к35-к36, пуне дужине од 21–22 кб, који садржи 25 интрона и 26 егзона. Штавише, постоји много генетских полиморфизама, на пример, променљиви број полиморфизама тандем понављања од 27бп у интрону 4, укључујући алел б поновљен 5 пута и алел а поновљен 4 пута, који чине 4бб, 4аа и 4ба више генотипова (10) .Укратко, дугорочна литература од 2003. до 2019. иновативно је прикупљена, а различити генотипски индикатори су екстраховани да би се истражила веза између полиморфизма гена еНОС 4б/а и осетљивости ДН набубрежниинтерстицијска фиброза. Представљамо следећи чланак у складу са ПРИСМА контролном листом за извештавање (доступно на хттп://дк.дои.орг/10.21037/апм-20-2585).
Кључне речи:Ендотелна синтаза азот оксида (еНОС 4б/а); мета-анализа; дијабетичка нефропатија (ДН); интерстицијска фиброза бубрега; Киднеи; бубрежни
Методе
Преузимање документаМетода проналажења сложене логике Булова логичка метода је усвојена да би се идентификовала релевантна литература за мета-анализу. Спроведена је електронска претрага литературе ПубМед-а, Медлине-а, ЕМБАСЕ-а, Кинеске базе података о биомедицинској литератури, базе података ЦНКИ, података Ванфанг, базе података ЦКВИП и Гоогле Сцхолар-а. Коришћени термини за претрагу били су „еНОС 4б/а“, „дијабетес“,„бубрежниинтерстицијска фиброза" и "обољење бубрега". Праћена је сва укључена литература, као и референтне листе које су објавиле рецензије, како би се пронашла литература која није индексирана у бази података. Време преузимања је било од почетка базе података до 15. августа 2020. Квалитет литературе је процењен помоћу РевМан-а 5.2 софтвер из Цоцхране Цоллаборатион-а. Различити термини за претрагу су слободно комбиновани; спроведено је више претраживања да би се потврдила литература, а потврђена литература је праћена претраживачем. Осим тога, контактирани су стручњаци и истраживачи у одговарајућој области да би добили најновије напредак истраживања који се односи на потврђену литературу.
Критеријуми за укључивање и искључивање литературеКритеријуми за укључивање су били следећи: (И) однос између еНОС 4б/а и еНОС 4б/а у ДН је истражен на основу полиморфизма; (ИИ) пацијенти у експерименталној групи били су дијабетичари са нефропатијом; (ИИИ) контролну групу су чинили пацијенти са дијабетесом без нефропатије или здрави субјекти без дијабетеса или обоје; (ИВ) за патолошку контролну анализу, поређење индекса је било поуздано унутар интервала поузданости од 95 процената (ЦИ); (В) дијагноза ДН је заснована на стандардима Светске здравствене организације; (ВИ) за студије без података о генотипу или алелу, релевантни подаци се могу добити од аутора. Искључене су студије које испуњавају било који од следећих критеријума: (И) преклапање истраживачких објеката; (ИИ) генотип
или подаци о алелима пацијената са ДН који садрже податке из фазе 1 и фазе 2, који се нису могли раздвојити (ИИИ) подаци о генотипу или алелу нису били доступни, чак и након што је контактиран оригинални аутор; (ИВ) неетиолошке студије. Два виша стручњака су независно прегледала сажетак и пун текст чланака. Три претходна експеримента су спроведена пре скрининга. Ако би дошло до неслагања између два стручњака, кроз дискусију би се донео консензус или би трећи стручњак био позван да арбитрира.
Оцена квалитета литературеЊукасл-Отава скала (НОС) Цоцхране Цоллаборатион је коришћена за процену контролисаних патолошких студија у мета-анализи. НОС користи систем звезда (од 9 звездица) за мерење резултата у вези са предметима истраживања, поређења случајева и поређења између група. Чланци са више од или једнаким 7 звездица сматрани су високим квалитетом (тј., мали ризик од пристрасности); сматрало се да су они са 2–6 звездица средњег квалитета (тј. средњи ризик од пристрасности); а они са мање или једнаким 1 звездици сматрани су ниским квалитетом (тј. високим ризиком од пристрасности). Два стручњака су независно оцењивала квалитет референци, а пре евалуације су спроведена три претексперимента. Ако би дошло до неслагања између два стручњака, кроз дискусију би се донео консензус или би трећи стручњак био позван да арбитрира.
ЦИСТАНЦХЕ ЋЕ ПОБОЉШАТИ ФУНКЦИЈУ БУБРЕГА/БУБРЕГА
Екстракција податакаДва стручњака су независно издвојила податке у обједињену Екцел табелу (Мицрософт), а пре екстракције су спроведена три пре-експеримента. Ако би дошло до неслагања између два стручњака, кроз дискусију би се донео консензус или би трећи стручњак био позван да арбитрира. Подаци издвојени за метаанализу укључивали су: (И) првог аутора и годину издања; (ИИ) студијска популација; (ИИИ) пол, старост и индекс телесне масе (БМИ) испитаника; (ИВ) ток болести, тип дијабетеса и дијагностички критеријуми дијабетичара са ДН или без нефропатије; (В) извор, величина узорка, однос генотипизације и однос алела ДН или дијабетичке контролне групе без нефропатије или дијабетеса.
статистичке методе Statistical analysis was performed using StataSE12.0 software (Stata). Odds ratios (ORs) and 95% CIs were used to compare eNOS 4b/a gene polymorphism (eNOS4bb, eNOS4ba, and eNOS4aa) between DN patients and non-nephropathy diabetic patients, as well as between DN patients and normal controls. The bias risk evaluation chart of the Review Manager software was used to evaluate the risk of bias of the articles. Each effect was represented by the 95% CI. When P>0.1 и И2<50%, the="" fixed-effects="" model="" was="" adopted="" for="" the="" meta-analysis;="" and="" when=""><0.1 and="" i2="">50 процената, модел случајних ефеката је усвојен за мета-анализу.
Резултати
Резиме преузете литературе и оцена на НОС скалиСлика 1 показује да је у овој претрази добијено укупно 247 чланака, од којих је 136 чланака елиминисано након читања сажетака и наслова. Након комплетног читања литературе, 98 чланака је елиминисано, а 13 чланака је коначно уврштено у метаанализу. Главни разлози за искључење били су следећи: понављајући субјекти истраживања (26 чланака), врсте литературе осим студија случаја-контроле (62 чланка), неетиолошке студије (51 чланак), генотип
или подаци о алелима који садрже ДН стадијуме 1 и 2 који се не могу раздвојити (49 чланака) и информације у вези са истраживањем које није могуће издвојити (59 студија). Табела 1 приказује основне информације укључених студија. Временски интервал је био 2000–2019, а студије су долазиле из Европе, Азије, Африке и других региона. Просечан БМИ субјеката истраживања у целој литератури био је 27 м2/кг, а просечни ток болести био је 13 година. Слика 2 представља оцене чланака на НОС скали. Било је 5 чланака са више или једнако 7 звездица, 8 чланака са 2–6 звездица и ниједан чланак са мање од или једнако 1 звездици, што значи да су сви чланци укључени у ову метаанализу били средњег до високог квалитета.
Резултати процене пристрасности у погледу ризика за чланке Слика 3 и Слика 4 приказују резултате вишеструких процена пристрасности у погледу ризика за чланке извршене коришћењем софтвера Ревиев Манагер. Укључене су све методолошке карактеристике чланака, а резултати евалуације су унети у софтвер да би се направио дијаграм пристрасне процене ризика. За укључене чланке, било је очигледно да су пристрасности генерисања насумичних секвенци (пристрасност избора), прикривања алокације (пристрасност избора), заслепљујући метод евалуације резултата (пристрасност мерења), непотпуни подаци о резултатима (пристрасност праћења) и селективно извештавање ( пристрасност извештавања) сви су били под малим ризиком. Штавише, резултати евалуације пристрасности ниског ризика методом заслепљивања испитаника и истраживача (пристрасност у примени) и друге пристрасности били су око 50 процената. Осим истраживања Луоа ет ал. [2003], чланци су имали очигледан низак ризик од пристрасности.
Поређење дистрибуције генотипа еНОС4бб између пацијената са ДН и пацијената са дијабетесом без нефропатијеСлика 5 приказује поређење дистрибуције генотипа еНОС4бб између пацијената са ДН и не-нефропатије
дијабетичари. Слика 5А се односи на пацијенте са ДН, а Слика 5Б се односи на пацијенте са дијабетесом без нефропатије. Студија Еззидија и сарадника чинила је највећи удео (10.5 процената) коначних комбинованих резултата, праћена студијама Сантоса ет ал. (9,9 процената) и Ахлувалиа ет ал. (9,6 одсто). Даље, хоризонталне линије 95 процената ЦИ већине студија биле су на левој страни неважеће вертикалне линије, а неке хоризонталне линије су прелазиле неважећу вертикалну линију. Хоризонтална линија ЦИ од 95 процената била је десно од неважеће вертикалне линије. Међу 13 укључених студија, 1.919 испитаника је било укључено у групу А и 1,970 испитаника у групу Б. Дистрибуција еНОС4бб генотипова у 2 групе била је хетерогена (χ2 =36.87, И{ {20}} процената, П=0.0002), а величина комбинованог ефекта (блок дијаманта) је била на левој страни неважеће линије (ИЛИ: −0,09, 95 процената ЦИ: − 0,14, −0,03). Анализа модела случајних ефеката је показала да је учесталост генотипске дистрибуције еНОС4бб у групи А била значајно нижа од оне у групи Б (З=3.19, П=0.001). Слика 6 приказује дијаграм левка који приказује дистрибуцију генотипа еНОС4бб код пацијената са ДН и пацијената са дијабетесом без нефропатије. Као што се јасно може видети, број кругова са обе стране средње линије је сличан, а кругови су у основи концентрисани на средњу линију, што указује на високу тачност истраживања и без пристрасности у публикацији.
Поређење дистрибуције генотипа еНОС4ба између пацијената са ДН и пацијената са дијабетесом без нефропатијеСлика 7 приказује поређење дистрибуције генотипа еНОС4ба између пацијената са ДН и пацијената са дијабетесом без нефропатије. Слика 7А се односи на пацијенте са ДН, а Слика 7Б се односи на пацијенте са дијабетесом без нефропатије. Студија Еззидија ет ал. представљала је највећи удео у коначним комбинованим резултатима (10.0 процената), праћена студијама Сантоса ет ал. (9,5 процената) и Ахлувалиа ет ал. (9,5 одсто). За већину студија, хоризонтална линија од 95 процената ЦИ је прешла неважећу вертикалну линију. За неколико студија, хоризонтална линија ЦИ од 95 процената била је десно од неважеће вертикалне линије. Ни у једној студији није била хоризонтална линија 95-постотног ЦИ лево од неважеће вертикалне линије.
Међу 13 укључених студија, 1.919 испитаника је било укључено у групу А и 1.970 испитаника у групу Б. Дистрибуција еНОС4ба генотипова у 2 групе је била хетерогена (χ2 =41.36, И2 =71 процената, П<0.0001), and="" the="" combined="" effect="" size="" (diamond-shaped="" block)="" crossed="" the="" invalid="" line="" (or="" value:="" 0.04,="" 95%="" ci:="" −0.01,="" 0.09).="" random-effects="" model="" analysis="" showed="" that="" the="" genotypic="" distribution="" frequency="" of="" enos4ba="" between="" group="" a="" and="" group="" b="" was="" not="" statistically="" different="" (z="1.45," p="0.15)." figure="" 8="" shows="" the="" funnel="" plot="" of="" enos4ba="" genotype="" distribution="" in="" dn="" patients="" and="" non-nephropathy="" diabetic="" patients.="" the="" circles="" of="" the="" included="" studies="" are="" roughly="" symmetrically="" distributed="" on="" both="" sides="" of="" the="" midline,="" and="" most="" of="" them="" are="" concentrated="" on="" the="" midline,="" showing="" no="" publication="" bias="" in="" the="" included="">
Поређење дистрибуције генотипа еНОС4аа између пацијената са ДН и пацијената са дијабетесом без нефропатијеСлика 9 приказује поређење дистрибуције генотипа еНОС4ба између пацијената са ДН и пацијената са дијабетесом без нефропатије. Слика 9А се односи на пацијенте са ДН, а Слика 9Б се односи на пацијенте са дијабетесом без нефропатије. Студија Сантоса и других чинила је највећи удео у коначним комбинованим резултатима (11,8 процената), праћена студијама Еззидија ет ал. [2008] (11,3 посто) и Донг ет ал. [2005] (11,5 процената). Хоризонталне линије 95-процентних ЦИ-а већине студија прешле су неважећу вертикалну линију, а хоризонталне линије 95-постотних ЦИ-ја неколико студија биле су десно од неважеће вертикалне линије. Ни у једној студији није била хоризонтална линија 95-постотног ЦИ лево од неважеће вертикалне линије. Међу 13 укључених студија, група А укључивала је укупно 1.919 испитаника, а група Б је укључивала укупно 1907 испитаника. Дистрибуција еНОС4ба генотипова у 2 групе је била хетерогена (χ2 =34.83, И2 =66 процената, П=0.0005), а комбинована величина ефекта (блок у облику дијаманта) прешао неважећу линију (ОР: 0,03; 95 процената ЦИ: 0,01, 0,05). Анализа модела случајних ефеката показала је да је учесталост генотипске дистрибуције еНОС4аа у групи А била значајно виша од оне у групи Б (З=2.57, П=0.01). Слика 10 приказује дијаграм лијевка дистрибуције генотипа еНОС4аа пацијената са ДН и дијабетичара без нефропатије. Већина кругова укључених студија концентрисана је на средњу линију, што показује да је тачност студија била релативно висока. Стога, укључене студије нису имале пристрасност у објављивању.
Поређење дистрибуције генотипа еНОС4бб између пацијената са ДН и нормалне контролеСлика 11 показује поређење дистрибуције генотипа еНОС4бб између пацијената са ДН и нормалних контрола. Слика 11А се односи на пацијенте са ДН, а слика 11Ц се односи на нормалне контроле. Резултати Еззиди ет ал. чинио највећи удео (18,4 процента) у коначним комбинованим резултатима, а следе резултати Сантоса ет ал. (15,9 одсто). Хоризонталне линије 95-процентних ЦИ-а већине студија биле су лево од неважеће вертикалне линије, а хоризонталне линије 95-постотних ЦИ-ја неколико студија су прелазиле неважећу вертикалну линију. Ни у једној студији није била хоризонтална линија 95-постотног ЦИ на десној страни неважеће вертикалне линије.
Међу 8 студија укључених у ово поређење, 1.297 испитаника је било укључено у групу А и 1.339 испитаника у групу Ц. Дистрибуција еНОС4бб генотипова између 2 групе је била хетерогена (χ2 =27.29, И{{9 }} процената , П{{10}}.0003), а величина комбинованог ефекта (блок дијаманта) је била на левој страни неважеће линије (ИЛИ: 0,67 и 95 процената ЦИ: 0,56, 0,80). Анализа модела случајних ефеката је показала да је учесталост генотипске дистрибуције еНОС4бб у групи А била значајно нижа од оне у групи Ц (З=3.03, П=0.002). Слика 12 је дијаграм левка који приказује дистрибуцију генотипа еНОС4бб пацијената са ДН и нормалних контрола. Кругови укључених студија имају асиметричну дистрибуцију, што указује на присуство пристрасности објављивања.
Поређење дистрибуције генотипа еНОС4ба између пацијената са ДН и нормалне контролеСлика 13 приказује поређење дистрибуције генотипа, Слика 9 Поређење дистрибуције генотипа еНОС4аа између пацијената са ДН и пацијената без нефропатије. А је био дијабетес ибубрежниинтерстицијски пацијенти, Б су били пацијенти са дијабетесом без нефропатије. ДН, дијабетичка нефропатија.
еНОС4ба између пацијената са ДН и нормалних контрола. Слика 13А се односи на пацијенте са ДН, а слика 13Ц се односи на нормалне контроле. Студија Еззидија и сарадника представљала је највећи удео у коначним комбинованим резултатима (57,8 процената), праћена студијама Сантоса ет ал. (16,2 одсто) и Рахими ет ал. (10,9 одсто). Штавише, хоризонталне линије 95-постотних ЦИ-а већине студија прешле су неважећу вертикалну линију, а хоризонталне линије 95-постотних ЦИ-ја неколико студија биле су десно од неважеће вертикалне линије. Ни у једној студији није била хоризонтална линија 95-постотног ЦИ лево од неважеће вертикалне линије.
Међу 8 укључених студија, 1297 испитаника је било укључено у групу А, а 1339 испитаника у групу Ц. Није пронађена хетерогеност у дистрибуцији еНОС4ба генотипа између 2 групе (χ2 =10.45, И{{ 7}} процената, П=0.16), а величина комбинованог ефекта (блок дијаманта) је била на десној страни неважеће линије (ОР: 1,25, 95 процената ЦИ: 1,04, 1,50). Модел фиксних ефеката је показао да је учесталост генотипске дистрибуције еНОС4ба у групи А значајно виша од оне у групи Ц (З=2.36, П=0.02). Слика 14 приказује дијаграм левка који приказује дистрибуцију еНОС4ба генотипа пацијената са ДН и нормалних контрола. Кругови укључених студија концентрисани су у горњем делу, што указује на високу тачност истраживања, и распоређени су на обе стране средње линије, у приближно симетричном облику, што одражава одсуство пристрасности у публикацији.
Поређење дистрибуције генотипа еНОС4аа између пацијената са ДН и нормалних контрола Слика 15 показује поређење дистрибуције генотипа еНОС4аа између пацијената са ДН и нормалних контрола. Слика 15А се односи на пацијенте са ДН, а слика 15Ц се односи на нормалне контроле. Студија Еззидија ет ал. чини највећи удео у коначним комбинованим резултатима (22,2 процента), а следе студије Алгенабија ет ал. (20,3 одсто) и Сантос ет ал. (15,3 одсто). Штавише, за неке студије, хоризонтална линија од 95 процената ЦИ је прешла неважећу вертикалну линију. За неке студије, хоризонтална линија ЦИ од 95 процената
налазио се десно од неважеће вертикалне линије. Ни у једној студији није била хоризонтална линија 95-постотног ЦИ лево од неважеће вертикалне линије. Међу 8 укључених студија, 1297 испитаника је било укључено у групу А, а 1339 испитаника у групу Ц. Дистрибуција еНОС4ба генотипова у 2 групе била је хетерогена (χ2 =18.64, И2 =62 проценат , П=0.009), а величина комбинованог ефекта (блок дијаманта) била је на десној страни неважеће линије (ОР: 2,64, 95 процената ЦИ: 1,17, 5,96). Анализа модела случајних ефеката показала је да је учесталост генотипске дистрибуције еНОС4аа у групи А значајно виша од оне у групи Ц (З=2.34, П=0.02). Слика 16 приказује дијаграм левка који приказује дистрибуцију генотипа еНОС4аа пацијената са ДН и нормалних контрола.
дијабетичари су били хетерогени (χ2 =36.87, И2 =67 процената, П=0.0002). Штавише, учесталост дистрибуције генотипа еНОС4бб код пацијената са ДН била је значајно нижа од оне код пацијената са дијабетесом без нефропатије (З=3.19, П=0.001), што сугерише да је појавабубрежниинтерстицијска фиброза код пацијената са дијабетесом била је повезана са генотипом еНОС4бб (28). Генотип еНОС4бб се смањивао са прогресијомбубрежниинтерстицијум. Није било евидентне разлике у учесталости дистрибуције еНОС4ба генотипа између пацијената са ДН и пацијената без нефропатије (З=1.45, П=0.15), што сугерише да је дистрибуција еНОС4ба генотипа имала нема везе са процесомбубрежниинтерстицијска фиброза у ДН (29). Учесталост дистрибуције генотипа еНОС4аа у ДНбубрежниинтерстицијални пацијенти је био значајно већи него код пацијената са дијабетесом без нефропатије (З=2.57, П=0.01), што указује да се генотип еНОС4аа повећава са прогресијомбубрежниинтерстицијска фиброза.
ЦИСТАНЦХЕ ЋЕ ПОБОЉШАТИ БУБРЕЖНУ/БУБРЕЗНУ ДИЈАЛИЗУ
Из поређења између пацијената са ДН и нормалних контрола, дистрибуција генотипа еНОС4бб између пацијената са ДН и нормалних контрола била је хетерогена (χ2 =27.29, И2 =74 процената, П=0.0003 ). Штавише, учесталост генотипске дистрибуције еНОС4бб код пацијената са ДН је била значајно нижа од оне у нормалним контролама (З=3.03, П=0.002), што је било у складу са горњим резултатима, што указује да Генотип еНОС4бб игра улогу у развоју ДН и да се смањује са развојемобољење бубрега(30). Није пронађена хетерогеност у дистрибуцији генотипа еНОС4ба између пацијената са ДН и нормалних контрола (χ2 =10.45, И2 =33 процената, П=0.16), док је његова дистрибуција у ДН пацијената је била значајно већа него у нормалним контролама (З=2.36, П=0.02). Овај резултат је показао да са развојем нефропатије код пацијената са дијабетесом, генотип еНОС4ба показује тренд раста. Стога је откривено да генотип еНОС4ба игра важну улогу у процесу ДН. Што је већа учесталост дистрибуције генотипа еНОС4ба, већа је вероватноћа ДН (31). Учесталост генотипске дистрибуције еНОС4ба код пацијената са ДН била је значајно већа од оне у нормалним контролама (З=2.34, П=0.02), што је показало да генотип еНОС4аа има већи утицај на ДН.
Закључци
У овој студији, однос између генетског полиморфизма еНОС 4б/а и појаве ДН је истражен путем мета-анализе. Међутим, мета-анализа има ограничења због утицаја различитих збуњујућих фактора. Сви чланци одабрани за анализу били су студије случај-контрола, које су увеле пристрасност преживљавања. Поред тога, време преживљавања пацијената са ДН је релативно кратко, а многи пацијенти који носе гене ризика можда нису били укључени у студије, што у великој мери смањује величину комбинованог ефекта. Убудуће треба спровести накнадну анализу пацијената са дијабетесом како би се истражила појавабубрежниинтерстицијална фиброза код пацијената са дијабетесом, како би се даље резултати мета-анализе. Укратко, полиморфизам генотипа еНОС 4б/а је уско повезан са ДН.
