Антиоксидативни графен оксид нанориббон ​​као ново средство за избељивање инхибира механизам меланогенезе повезан са микрофталмијом повезан са фактором транскрипције

Контакт:joanna.jia@wecistanche.com/ ВхатсАпп: 008618081934791

АПСТРАКТАН:Умеланинпроцес синтезе, оксидативне реакције играју суштинску улогу, и то је добра стратегија за инхибицију производње меланина смањењем оксидативног стреса. Фулерен и његови деривати, или комплекси, сматрани су јаким хватачима слободних радикала, а ми смо даље применили вишеслојни сп2наноугљеник да бисмо открилимеланинмеханизме инхибиције синтезе. У овој студији користили смо нове наноматеријале, као што су вишезидне угљеничне наноцеви (МВЦНТ), МВЦНТ кратког типа, нанотраке графенског оксида (ГОНР) и ГОНР кратког типа, као антиоксидативна средства за регулацијумеланинпроизводње. Резултати су показали да ГОНР-ови имају боље антиоксидативне способности у интрацелуларним и ванћелијским платформама за анализу оксидативног стреса од других. Предложили смо да ГОНР имају функционалне групе које садрже кисеоник. У тесту 2′,7′-дихлородихидрофлуоресцеин диацетата, открили смо да ГОНР може да хелатира металне јоне до активних врста кисеоника. У погледу молекуларног увида, приметили смо да ови наноматеријали смањују синтезу меланина смањењем експресије гена повезаних са транскрипционим фактором повезаним са микрофталмијом, а било је и сличних последица у експресији протеина. Укратко, ГОНРс је потенцијални агент као романантиоксиданси козметолошки материјал за избељивање коже.

цистанцхеинхибирају стварање меланина

1. ПРЕДСТАВЉАЊЕ

Кожа је орган који покрива спољашњу површину људског тела. Пошто је интерфејс у ​​контакту са околином, слој коже игра важну улогу у заштити тела од патогена, избегавању прекомерног губитка воде, регулисању телесне температуре и тако даље. Меланоцити расту у базалној мембрани епидермиса коже и чине 5 до 10 процената ћелијског садржаја. Оне су окарактерисане као једноћелијске "жлезде" које имају танке, дугачке дендрите налик на траке и гранање. Меланоцити се крећу кроз епидермалне ћелије у њиховој непосредној близини, стварајући констелацију епидермалних ћелија око сваког меланоцита. Постоји много унутрашњих и спољашњих узрока старења коже, а један од таквих фактора је ултраљубичасто (УВ) зрачење сунчеве светлости.1 Током излагања УВ зрачењу, нивои реактивних врста кисеоника (РОС) у кожи се драматично повећавају, што је познато као оксидативни стрес. Неколико фактора токсичности животне средине такође појачавају оксидативни стрес на кожи, као што су пестициди, угљен-тетрахлорид, тешки метали, ароматични амини и честице 2,5 (ПМ2,5).2 У биохемијском механизму, интрацелуларни оксиданти се стварају из неензимског система, претварајући их у РОС да покрене пут меланогенезе.

Поред РОС-а, постоји много фактора који утичу на производњу меланина, укључујући експресију гена, запаљење, ендокрине промене и узимање пигмента.1 У првим корацима производње меланина, тирозиназа игра улогу у катализацији тирозина у феомеланин и еумеланин. Механизми производње оба пигмента су слични, што укључује хидроксилацију Л тирозина у 3,4-дихидрокси-Л-фенилаланин (Л-ДОПА) и оксидацију Л-ДОПА у допахинон. У следећем кораку, допамин се оксидује протеином 1 (ТРП-1) који је повезан са тирозиназом и протеином 2 (ТРП-2) у меланосому, који је регулисан транскрипционим фактором повезаним са микрофталмијом (МИТФ) да се формирамеланинКоначно, меланин сазрева и таложи се унутар стратумцорнеума.4,5 Они продиру у суседне кератиноците базалног слоја и штите њихову ДНК од било каквих УВ-индукованих мутација или модификација. Сазреомеланинунутар меланозома се преноси у кератиноците6−9 и коначно доводи до дуготрајне пигментације. Лентигине, пеге и смеђе/црне мрље понекад узрокују социјалне проблеме код мушкараца и жена. Блокирање оксидативног стреса или супресија активности тирозиназе је једна од стратегија за смањење синдрома хиперпигментације и дерматолошких поремећаја.Антиоксидансилече хиперпигментације изазване РОС-ом и ћелијска оштећења.10,11 Стога, синтетизована антиоксидативна једињења имају многе биофункционалне примене у апликацијама за негу коже.

Фулерен (Ц60), угљеничне наноцеви (ЦНТ), графен, андграфенска нанотрака (ГНР) су четири врсте сп2 наноугљеника које се широко истражују широм света.12 Фулерен и његови деривати или комплекси се дуго времена сматрају јаким хватачима слободних радикала. Иодох ет ал. користио Ц60 растворљив у води као заштитни агенс против дегенерације изазване катаболичким стресом. Ињац и др. закључио да је Ц60(ОХ)24 јакантиоксидансједињење када је оксидативни стрес превисок. Окуда и др. сугерисали су да комплекси Ц60 могу спречити повреде ћелија посредоване НО.13,14 Тонг ет ал. показали су да би комплекси Ц60 могли бити обећавајући кандидати за лечење болести повезаних са мозгом узрокованих повећаним нивоима супероксида. Заправо, јапанска компанија је идентификовала фулерене са јаком антиоксидативном активношћу за козметичку употребу 2006. Луценте Сцхултз и сар. показали су да је способност уклањања радикала кисеоника функционализованих једнозидних ЦНТ-ова (СВЦНТ) скоро 40 пута већа од оне код дендритских Ц60.15-19 Феноглио ет ал. приметио да ЦНТ са више зидова (МВЦНТ) поседују изузетан капацитет уклањања радикала у контакту са спољним извором хидроксилних или супероксидних радикала.20 Прорачуни теорије функционалне густине такође су открили модел СВЦНТ-а као хватача слободних радикала. Године 2004, Новоселов и сарадници су први пут показали да графен показује снажан амбиполарни електрични ефекат и да може бити обећавајући за електронске апликације.21 Након тога, наставили су да показују да графен има електронска својства која су карактеристична за 2Д гас честица описаних Дираковом једначином. 22,23 Од ова два револуционарна рада, све више пажње се поклања истраживању заснованом на графену.24−30 На пример, Киу ет ал. 2014. показао да графен оксид и вишеслојни графен показују значајнеантиоксидансактивност и може заштитити различите биомолекуларне молекуле од оксидације.31Хан ет ал. експериментално демонстрирано 2007. да се енергетски јаз ГНР-ова може контролисати током процеса литографије променом ширине врпце.32 Међу четири наноугљеника, ГНР-овима је придато најмање пажње. Колико нам је познато, постоји мало истраживања о антиоксидативним својствима нано трака графен оксида (ГОНР).31,33 Стога смо у овој студији пажљиво припремили МВЦНТ, кратке МВЦНТ, ГОНР и кратке ГОНР и имали за циљ да систематски упоредимо њихова антиоксидативна својства и сродне резултате. .

2. РЕЗУЛТАТИ И ДИСКУСИЈА

2.1. Морфологија МВЦНТ-а и ГОНР-а.

Figure 1a shows the low- and high-magnification transmission electron microscopy (TEM) images of MWCNTs and short MWCNTs. Following acidic cutting under ultrasonication, the length of MWCNTs could be shortened from >10 μм до 2−3 μм. Истовремено, примећено је да третман азотном киселином охрапава глатке површине цеви. Неки зарези и неправилни облици су приказани на слици са великим увећањем. Даље, коришћењем МВЦНТ-а и кратких МВЦНТ-а кроз микроталасне реакције добија се ГОНР и кратки ГОНР, респективно. Такође смо илустровали ТЕМ слике са малим и великим увећањем ГОНР-а и кратког ГОНР-а. Због великог уздужног откопчавања и мањег хоризонталног сечења, чини се да су ГОНР-ови били краћи од МВЦНТ-а. С друге стране, слике са великим увећањем су показале веће пречнике, односно 0.11-0,18 μм, ГОНР-а од оних код МВЦНТ-а, што указује да је процес распакивања био успешан. Слично, кратки ГОНР-ови су показали краћу дужину и већи пречник од кратких МВЦНТ-ова. У ваздушном компресору нашег новог процеса раскопчавања, танкослојне структуре ГОНР-а биле су мање од онога што смо добили у раном извештају за исту микроталасну снагу од 250 В уз задржавање дебљих централних МВЦНТ-ова.12 То је значило да ће вероватније да ће хетероструктура МВЦНТ/ГОНР једро-љуске појављују се уместо потпуно раскопчане структуре нано траке кроз све микроталасне снаге у новом процесу. Да бисмо упоредили са кратким ГОНР-ом у нашим претходним студијама,34 већа микроталасна снага је створила више зареза на бочним странама трака и није формирала лепе глатке ивице траке. Имајте на уму да смо користили две различите врсте Цу мрежа на слици 1а. За МВЦНТ и ГОНР-ове са довољно дужине, коришћена је Гу мрежа са чипкастим формваром стабилизованим угљеником (бр. производа 01881-Ф, Тед Пелла, Инц., САД). Отворене рупе у чипкастом карбонском филму спречиле су преклапање слике преноса између нано угљеника и угљеничног филма. Тамносиве мреже припадају чипкастом угљеничном филму. Међутим, Гу мрежа са формваром стабилизованом угљеником (бр. производа 01800-Ф, Тед Пелла, Инц., САД) била је потребна за кратко МВЦНТ и кратко ГОНР. То је било зато што су велике рупе у чипкастом карбонском филму изазвале проблеме за ефикасно држање кратког МВЦНТ-а и кратког ГОНР-а. Као што је илустровано на Слици 1, светло сиви контраст испод кратких МВЦНТ и кратких ГОНР је лагани слој угљеника. Овај слој угљеника је стабилизовао филм формваре изложен снопу електрона преко својих топлотних и електричних проводних својстава.

2.2. Конфигурације везивања МВЦНТ-ова и ГОНР-ова.

Раманови спектри четири наноугљеника су представљени на слици 1б; Д трака ГОНР-а била је већа од оне код МВЦНТ-а након процеса распакивања. Ово се приписује вишем нивоу оксидације и већем броју ивичних структура ГОНР-а у поређењу са МВЦНТ. Овај феномен је такође сличан ономе што смо приметили у 2011.12 Због високог нивоа графитизације, Г опсег МВЦНТ-а је имао најмањи број пуне ширине на пола-максимуму. ИД/ИГ односи четири наноугљеника били су 0.076, 0.502, 0,483 и 0,700, респективно. Укратко, смањена дужина и површинска оксидација повећали су ниво дефекта и тиме учинили ИД/ИГ однос вишим. Д′ врх је присутан у свим дефектним графенима и посматра се као мерило квалитета.35 Као што је илустровано на слици 1б, Д′ врхови у четири спектра постају истакнутији након процеса сечења или отварања, што сугерише да су то деструктивни процеси који уводе много недостатака. Слика 1ц,д приказује спектре рендгенске фотоелектронске спектроскопије за четири наноугљеника. Очигледно, Д′ пик је најјаснији за кратке ГОНР-ове. Као што је приказано на слици 1ц, ниво О је значајно порастао са 7,6 процената (МВЦНТ) на 19,9 процената (ГОНР) због јаке оксидационе способности КМнО4 у киселој средини. С друге стране, ниво О је незнатно порастао за 0,8 процената са МВЦНТ на кратке МВЦНТ. Важно је да је највиши ниво О је 38,3 процента за кратки ГОНР, што имплицира да би крајеви нано трака лакше причврстили функционалне групе кисеоника него планарне сп2 површине. Већи максимални број пуне ширине на пола и прелазак на високу енергију везивања Ц1с пикова након процеса распакивања и МВЦНТ-а и кратких МВЦНТ-а илустровани су на слици 1д. За оксиде графена, деконволутивни врхови у високој енергији везивања страна би се могла приписати везама Ц-Ц(ЦЦ), Ц-О, ЦО и ЦООХ.36 Окарактерисали смо ГОНР (200В) 2013. године,37 и резултати су били слични резултатима ове студије. Ова студија је закључила феномене Раманових спектра, што значи да је више функционалних група које садрже кисеоник генерисано током трансформације цеви у траку (слика 2).

2.3. Антиоксидативна својства МВЦНТ-а и ГОНР-а.

2.3.1. Одређивање активности уклањања слободних радикала 1,1-дифенил-2-пикрилхидразила.

1,1-дифенил-2-пикрилхидразил (ДППХ) активност уклањања слободних радикала јеантиоксиданспримењена платформа за откривање антиоксидативног капацитета; резултати за четири наноугљеника су описани у табели 2. У ДППХ тесту, витамин Ц у концентрацији од 100 μМ је коришћен као позитивна контрола. Да би се тестирала антиоксидативна активност МВЦНТ, кратких МВЦНТ, ГОНР и кратких ГОНР, дозе од 1, 5 и 10 мг/Л су инкубиране у реакционом раствору ради мерења својстава. МВЦНТ, кратки МВЦНТ, ГОНР и кратки ГОНР имали су умерену инхибиторну способност при 1{{20}} мг/Л (19,2 ±0,3, 12,1 ± 0,3, 26,8 ± 0,3 и 30,0). ± 0,4 процента), док је витамин Чад сличан услов на 100 μМ (93,4 ± 0,1 проценат) за сузбијање.

2.3.2. Испитивање јонске хелирајуће активности.

Унутар ситуације оксидативног стреса, ферозин може да развије комплекс са Фе2 плус који се квантитативно мери. У присуству хелатних медијатора, комплекс се разбија, што доводи до редукције јона гвожђа из тамно црвене боје Фе2 плус комплекса. Користили смо ЕДТА као позитивну контролу. Табела 2 показује да су МВЦНТ, кратки МВЦНТ, ГОНР и кратки ГОНР имали хелатну активност при 10 мг/Л (29,2 ± {{10}}.8, 28,7 ± 0. 7, 69,7 ± 0.6, и 68,9 ± 0,3 процената), док је позитивна контрола имала слично стање на 100 μМ (93,4 ± 0,1 проценат).

2.3.3. Мерење снаге антиоксиданса који смањује ферик.

Тест потенцијала редукције гвожђа је једноставан и поуздан тест који се користи за квантификацију синтезе комплекса Фе(ИИИ)-ферицијанида. У овом тесту, редукциона моћ четири нано угљеника који производе комплекс гвожђа Фе(ИИИ)-ТПТЗ је откривена променама боје раствора од жуте до зелене и плаве. Табела 2 показује да су редукционе моћи МВЦНТ, кратког МВЦНТ, ГОНР и кратког ГОНР биле оптичка густина (ОД) 1,11, 1,13, 1,15 и 1,11 при 10 мг/Л.

2.3.4. МВЦНТ и ГОНР инхибирају интрацелуларну РОСА акумулацију.

Многи извештаји су показали да РОС уништава структурни интегритет ћелијских мембрана, укључујући ћелијске мембране и нуклеарне мембране, што доводи до оштећења ћелија и губитка нормалне функције.38-40 Поред тога, РОС је такође један од важних фактора за катализацију тирозиназе која формира меланин, и инхибиција производње РОС је добра стратегија за смањење регулацијемеланин synthesis. In this study, we used the 2′,7′-dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCFDA) staining assay to analyze the intracellular oxidative stress level in MWCNT and GONR treatment cells. Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) induced oxidative stimulations in MWCNT and GONR groups and was used as a negative control.41 When the concentration of PMA was 20 ng/mL, it induced oxidative stress, increasing the value to 38%; after treating GONRs and MWCNTs, the levels of ROS were downregulated to the normal level. The data showed that both materials inhibited oxidative stress levels, and the anti-oxidative effect of GONRs was higher than that of MWCNTs (Figure 3). Table 1 shows a similar consequence list. We contended that there are three reasons for our new findings: first, the order of solubility of these materials was as follows: short GONRs > GONRs >кратки МВЦНТ > МВЦНТ, што значи да је контактна површина кратких ГОНР била највећа, тако да је била супериорна за уклањање РОС-а. Друго, ГОНР и МВЦНТ су биле сп2-угљене структуре које су могле да униште електричну енергију РОС путем формирања адукта или преноса електрона.42 Открили смо даантиоксидативни ефектиструктуре нанотрака биле су боље од оних структура наноцеви, тако да нанотраке олакшавају пренос електрона од наноцеви. Коначно, на слици 1б, примећујемо да ГОНР сп2-угљеничко место садржи функционалне групе више кисеоника него МВЦНТ, групе карбоксилне киселине могу да хелирају металне јоне, а хидроксилне групе могу бити Х-донатор за уклањање РОС и инхибирање производње меланина.

2.4. Цитотоксичност МВЦНТ-а и ГОНР-а третираних у ћелијама хуманих дермалних фибробласта.

Метода {{0}}(4,5-диметилтх-триазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолијум бромида (МТТ) је примењена за процену цитотоксичности својства ГОНР-а на Хс68 ћелијама (Слика 3), а ћелије су култивисане у различитим дозама од 1, 5 и 10 уг/мЛ. Испитивали смо да је виталност ћелија МВЦНТ 100,7 ± 3,7, 99,8 ± 4,9 и 94,1 ± 4,7 процената при концентрацијама од 1, 5 и 10 мг/Л, респективно; виталности за кратки МВЦНТ су израчунате истим редоследом и утврђено је да су 93,9 ± 2,2, 86,4 ± 3,0 и 98,9 ± 2,1 процената. Приметили смо да су ћелије Б16-Ф10 инкубиране у високим концентрацијама, а преживљавање ћелија Хс68 било је више од 80 процената, што сугерише да МВЦНТ и кратки МВЦНТ немају токсични ефекат на ћелије хуманих дермалних фибробласта. Ћелијске способности ГОНР-а и кратког ГОНР-а биле су 86.24 ± 2.1, 90.87± 3.5, 88.58 ± 2.5, 89.03 ± 3.6, 90.71 ± 2.8 и 90.64 ± 2.5 процената На слици 4а је такође истакнуто да ГОНР и кратки ГОНР нису имали уочљив цитотоксични ефекат на ћелије ХС68. У претходним извештајима, употреба непроверених наноматеријала у козметичке сврхе могла се сматрати упитном,43,44 и обично је била последица напада ДНК након што су наночестице ушле у ћелије. Након теста цитотоксичности, открили смо да наши материјали нису изазвали токсичност нормалних ћелија коже. Закључили смо да након што наноматеријали уђу у ћелије, наноматеријали само инхибирају производњу меланина тако што смањују оксидативни стрес и хелирају металне јоне и не оштећују митохондрије или ДНК, што значи да су МВЦНТ и ГОНР били безбедни за употребу.

2.5. Два типа МВЦНТ-а и ГОНР-а у активности ћелијске тирозиназе Б16-Ф10 и садржају меланина.

Умеланинпуту синтезе, тирозиназа игра кључну улогу. Тирозиназа оксидира и формира еумеланин и феомеланин кроз низ биохемијских реакција. Да бисмо утврдили да ли ГОНР и МВЦНТ инхибирају активности тирозиназе и узрокују смањење производње меланина, анализирали смо активност тирозиназе у Б16-Ф10 ћелијама. Открили смо да МВЦНТ и кратки МВЦНТ инхибирају активност тирозиназе за приближно 17,1 посто и 23 посто при 10 мг/Л. ГОНР и кратки ГОНР имали су бољи ефекат у сузбијању активности тирозиназе при истим концентрацијама у поређењу са другим ГОНР-ом. Они су такође били у зависности од дозе и инхибирали су 49,8 процената и 44,7 процената активности тирозиназе, као што је приказано на слици 4б.

Меланинје неопходан пигмент у људском телу, али прекомерна експресија меланина често изазива низ болести. У претходним студијама, Ксиао ет ал. користио је сличан материјал, радикални сунђер, наночестицу фулерена, као антимеланинагенс.45 Било је добрих резултата; око 20 одстомеланинпроизводња би могла бити инхибирана. Да бисмо побољшали његову ефикасност, додатно смо побољшали материјал за тестирање за мерење стопе инхибиције меланина и његовог молекуларног механизма, приказаног на сликама 4ц и 5. МВЦНТ и кратки МВЦНТ су смањили садржај меланина за 17,6 ± 5,5 и 13,2 ± 0. 2 процента при 10 мг/Л и на начин који зависи од дозе. ГОНР-ови и кратки ГОНР-ови снажно су смањили вредности на 32,0 ±2,3 и 35,3 ± 3,4 процента при 10 мг/Л. Експериментални резултати сугеришу да сва четири типа могу да инхибирају синтезу меланина, а ГОНР-ови су имали јачи ефекат. С друге стране, такође смо приметили да кратки ГОНР има бољи ефекат у инхибицији производње меланина. Закључујемо да кратки ГОНР-ови имају више функционалних група и могу ефикасно спречити тирозиназу катализовану металним јонима, додатно инхибирајући производњу меланина (Слика 2). У табели 1, примећујемо да је напор кратког типа који хелира металне јоне већи од нормалног типа; то значи да се ови кратки ГОНР-ови могу потенцијално применити у области козметике као средства за негу коже.

2.6. Механизам МВЦНТ-а и ГОНР-а инхибирао је садржај ћелијског меланина Б16-Ф10.

Ћелије реагују на спољашњи оксидативни стрес регулацијом експресије протеина. Ћелије Б16-Ф10 повећавају експресију гена ц-миц и појачавају АМПК да би смањиле нивое оксидације,46 и у овом раду, МИТФ је специфични транскрипциони фактор тирозинасета који регулише сигнални пут молекуларне синтезе меланина.47-49 На слици 5а, МВЦНТ и ГОНР смањују транскрипциони фактор повезан са микрофталмијом смањењем оксидативног стреса, а затим и низводни ген ТРП-1 и ТРП-2 су такође смањени. За ниво протеина, пронађен је сличан феномен, при чему су МВЦНТ и ГОНР смањивали пут меланогенезе повезан са МИТФ-ом, а затим коначно смањивалимеланинсадржај (слика 5б).

цистанцхе бодибуилдинг

3. ЕКСПЕРИМЕНТАЛНИ МАТЕРИЈАЛИ И МЕТОДЕ

3.1. Припрема МВЦНТ и ГОНР.

Релевантни процес прављења ГОНР-а је објављен у претходном раду. 12МВЦНТ (0.05 г) је суспендован у 9:1 Х2СО4/Х3ПО4 и третиран микроталасним реактором (ЦЕМ-Дисцовер) са подешеном снагом. на 250 В у трајању од 2 мин. Након додавања КМнО4 (0,25 г) у растворе, раствори су третирани истом микроталасном снагом на 65 степени током 4 мин12 Затим смо модификовали овај процес коришћењем краћег микроталасног времена другог степена од 8 минута коришћењем ваздушног компресора. Овде се ваздушни компресор користи за контролу температуре микроталасног реактора током процеса. Снага микроталасне пећнице је постављена на 250 В у прелиминарним тестовима.

3.2. Припрема кратких МВЦНТ и кратких ГОНР.

Релевантни процес за прављење кратких ГОНР-а је приказан у нашем претходном раду.34 Време киселог третмана је изабрано као 8 х. Снага микроталасне пећнице је подешена на 250 В, што је исто као и за добијање ГОНР-а.

3.3. ДППХ активност уклањања радикала.

ДППХ се често користио за одређивање капацитета уклањања узорака и антиоксидационих својстава.50 ДППХ је љубичасти реагенс који мења боју из љубичасте у жуту ако се слободни радикали пренесу на аналит. У раствор су додати позитивни антиоксидативни узорци одговарајућих концентрација и узорци су анализирани на 517 нм током 30 мин. Користили смо проценте преосталог ДППХ поред узорака за тестирање да бисмо измерили бројантиоксидансипотребно да се редукују претходни ДППХ радикали. Витамин Ц у количини од 100 μМ је коришћен као позитивна контрола. Активност чишћења (проценти) мерена је као

3.4. Активност хелирања метала.

Јон метала је фактор који узрокује прекомерну оксидацију липида, а Фе2 плус је један од јона који највише утичу.50 Различите концентрације нано биоматеријала (1 μЛ) су стављене у 96- плочу са бунаром, која је садржала 2мМ ФеЦл2·4Х2О ( 10 μЛ), а затим стављен у ферозин (5 мМ, 20 μЛ). Смеша је потпуно помешана са 69 μЛ ментола и држана на собној температури 10 мин. Затим је примећен реакциони раствор узорка на 562 нм. ЕДТА је коришћена као позитивна контрола на 100 μМ, а формула за израчунавање активности метала-хелата заснована је на једначини 1.

3.5. Редуцинг Повер.

Прорачун редукцијске снаге је заснован на претходној студији.50 Прво, 2,5 μЛ графенских материјала је помешано са ПБС пуфером (67 мМ, пХ 6,8) и К3Фе(ЦН)6 (2,5 μЛ, 20 процената), а затим инкубирано на 50 степени током 20 мин. Затим је 10% трихлоросирћетне киселине (160 μЛ) помешано са реагенсима на 300 г центрифугирано 20 мин. Дужина апсорпције је одређена на 700 нм након мешања са 25 μЛ ФеЦл3 (2 процента). Бутиловани хидроксианизол (БХА) је коришћен на 100 μМ.

3.6. Испитивања пролиферације ћелија.

Ћелијска линија хуманих дермалфибробласта ХС68 је коришћена за анализу односа пролиферације ћелија. ХС68 је инкубиран у Дулбеццо-овом модификованом медијуму Еагле (ДМЕМ) који садржи 10 процената феталног говеђег серума и 1 проценат мешавине пеницилина и стрептомицина.50,51 Након третмана различитим концентрацијама узорака, применили смо МТТ да бисмо открили однос пролиферације ћелија. 8000 ћелија је засејано у 96-плоче са бунарима и третирано узорцима током 24 х. Раствор супернатанта је уклоњен, а ми смо користили МТТ раствор за културу 2 х на 37 степени. После инкубације, медиј који садржи МТТ је померен и растворен у диметил сулфоксиду (ДМСО). Раствор је очитан на ОД 590 нм и брзина је израчуната помоћу једначине 1.

3.7. Процена садржаја ћелијског меланина.

Користили смо метод са мањим модификацијама заснованим на претходном тесту.52,53 Ћелијске пелете Б16-Ф10 из Центра за прикупљање и истраживање биоресурса (БЦРЦ, ЦРЛ 6323, Синчу, Тајван) растворене су у мешавини 2,0 Н НаОХ и 10 процената ДМСО. Узорак је затим загреван 1 х на 90 степени и центрифугиран на 10,000г још 10 минута да би се добио прочишћени супернатант. Тхемеланинброј је одређен праћењем ОД супернатанта на 475 нм.

3.8. Б16-Ф10 Активност ћелијске тирозиназе.

За активност ћелијске тирозиназе Б16-Ф10, позвали смо се на претходни рад са неким модификацијама.50 Ћелије су култивисане у 12-плочама са 105 ћелија у сваком лежишту. После третмана са узорцима, ћелије су лизиране у 1 проценту Тритон Кс-100/ПБС и 2 мМЛ-тирозина (50 μЛ) током 3 х. После инкубације, уклонили смо медијум и очитали апсорбанцију на ОД 590 нм. Формула активности тирозиназе је израчуната помоћу једначине 1.

3.9. Детекција РОС помоћу ДЦФДА бојења.

Позивајући се на претходну студију,54 1.2 1.105 Б16-Ф10 ћелије су засејане у6-плоче са бунарима и третиране различитим концентрацијама узорака. Ћелије су суспендоване у ПБС, а затим напуњене са ДЦФДА (5 μМ) у нефенол црвеном ДМЕМ током 30 минута на 37 степени. Проточни цитометар (Гуава, Мерцк, Немачка) је коришћен за детекцију флуоресцентног сигнала ДЦФДА. Таласне дужине ексцитације и емисије ДЦФДА биле су 488 и 535 нм, респективно.

3.10. Квантитативна ланчана реакција полимеразе у реалном времену.

Пратили смо методе Лин ет ал. (2018).1 Квантитативна реверзна транскрипција-полимераза ланчане реакције у реалном времену (кРТ-ПЦР) састојала се од ексклузивне прајмер-сонде за генерисање флуоресценције. Користио је технику детекције флуоресценције која детектује сваки циклус користећи 7500 кРТ-ПЦРСистем (Апплиед Биосистемс, САД). Открио је циклус на основу количине ослобођене флуоресценције, а затим је производ сваког циклуса израчунат за генерисани садржај, што је резултирало постизањем квантитативних циљева у реалном времену. Тризол (Инвитроген, САД) је коришћен за екстракцију комплетне РНК из плућног ткива, у складу са упутствима произвођача. Након тога, комплет за реверзну транскрипцију (Такара, Јапан) је коришћен за генерисање ДНК. У кРТ-ПЦР помоћу прајмера, наведених у табели 1, прво је узорак загрејан да би се формирао један ланац ДНК; затим је дошло до везивања прајмера да би се формирала дволанчана ДНК (дсДНК), након чега је комбинована СИБР Греен дсДНК, за шта је коришћен СИБР греен плус комплет реагенса (Роцхе, Басел, Свисс), што је резултирало ослобађањем флуоресценције. Резултанта је пропуштена кроз систем за детекцију флуоресценције. Детекција флуоресцентних сигнала се одвијала током фазе елонгације или жарења сваког циклуса; након детекције, садржај узорка је потиснут уназад детектованим интензитетима флуоресценције.55 Нивои експресије циљних гена су нормализовани на нивое -тубулина коришћењем 2-ΔΔЦт методе .

цистанцхе ефекат избељивања на кожу до антиоксидације

3.11. Вестерн блот тест.

Ћелије Б16-Ф10 су лизиране на 4 степена преко ноћи са пуфером за испитивање радиоимунопреципитације (Тхермо Сциентифиц Цо., УСА), који садржи инхибиторе протеазе. Комплет за анализу протеина бицинхонинске киселине (БЦА, Сигма-Алдрицх Цорп., САД) је коришћен за квантификацију количине протеина. Протеини узорка су раздвојени на 10% натријумдодецил сулфат-полиакриламид гелу и пребачени на мембрану аполивинилиден дифлуорида (ПВДФ) (Палл ЛифеСциенце, Анн Арбор, МИ, САД). ПВДФ мембрана је блокирана пуфером за блокирање (Тхермо Сциентифиц) током 1 х и инкубирана са специфичним примарним антителом преко ноћи на 4 степена. Затим је мембрана два пута испрана физиолошким раствором пуфера Твеен 20 пуфером Трис и инкубирана са секундарним антителима 1,5 м. Након тога, мембрана је потопљена у реагенсе за детекцију хемилуминисценције (Тхермо Сциентифиц) и анализирана помоћу МиниЦхеми Цхемилуминесценцеимагер-а (Беијинг Саге Цреатион Сциенце, Кина). Извори антитела укључивали су зечји анти-МИТФ, зечји анти-ТРП-1, зечји анти-ТРП-2 и -актин (Тхермо Сциентифиц).

3.12. Анализа материјала.

ТЕМ (ЈЕОЛ ЈЕМ{0}}, 100 кВ) је коришћен за посматрање морфологије наноугљеника. Амикро Раман спектрометар (ПТТ, РАМакер) је примењен за проверу резонантних модова наноугљеника. Мерења рендгенске фотоелектронске спектроскопије (КСПС, Кратос Акис Ултра ДЛД) су такође спроведена за одређивање композиционе анализе.

3.13. Статистичка анализа.

Сви узорци и стандардни експерименти су поновљени најмање три пута. Применили смо Студентов т-тест да бисмо статистички упоредили и изразили просек средњих вредности ± стандардна девијација.

4. ЗАКЉУЧЦИ

Да сумирамо, приметили смо да је кратки ГОНР потенцијални материјал за производњу неге коже због својих вишеструких биофункционалних својстава (Слика 6). Резултати су показали да је наноугљеник играо улогу екстрацелуларног и интрацелуларног антиоксиданса. У међувремену, наноугљеник је инхибирао активност тирозиназе имеланинсадржаја и није изазвао озбиљне повреде пигментних ћелија. Овај рад је утврдио антимеланогенезу функције четири типа наноугљеника; будуће студије ће се испитивати о механизму ових једињења на експресији специфичних гена и протеина у вези са сазревањем, транспортом и акумулацијом меланина.

цистанцхе биенфаитс

РЕФЕРЕНЦЕ

(1) Лин, Л.-Ц.; Цхен, Ц.-И.; Куо, Ц.-Х.; Лин, И.-С.; Хванг, БХ; Ванг, ТК; Куо, И.-Х.; Ванг, Х.-МД 36Х: Нови моћни инхибитор за антимеланогенезу. Окид. Мед. Ћелија. Дуговечност 2018,2018, 6354972.

(2) Ли, Р.; Киу, Кс.; Ксу, Ф.; Лин, И.; Фанг, И.; Зху, Т. Макрофагом посредовани ефекти финих честица у ваздуху (ПМ2.5) на инсулинску резистенцију хепатоцита ин витро. АЦС Омега 2016, 1, 736−743.

(3) Ви, И.-Ј.; Ву, П.-И.; Лиу, И.-Ј.; Хоу, Ц.-В.; Ву, Ц.-С.; Вен, К.-Ц.; Лин, Ц.-И.; Цхианг, Х.-М. Сесамол је инхибирао хиперпигментацију и оштећење изазване ултраљубичастим зрачењем на кожи миша Ц57БЛ/6. Антиоксиданси 2019, 8, 207.

(4) Хсеу, И.-Ц.; Цхенг, К.-Ц.; Лин, И.-Ц.; Цхен, Ц.-И.; Цхоу, Х.-И.; Ма, Д.-Л.; Леунг, Ц.-Х.; Вен, З.-Х.; Ванг, Х.-М. Синергистички ефекти линдеранолида Б у комбинацији са арбутином, ПТУ или којичном киселином на инхибицију тирозиназе. Цурр. Пхарм. Биотецхнол. 2015, 16, 1120−1126.

(5) Бае-Харбое, И.-СЦ; Парк, Х.-И. Тирозиназа: централни регулаторни протеин за пигментацију коже. Ј. Инвест. Дерматол. 2012, 132,2678−2680.

(6) Резапоур-Лацтосе, А.; Иеганех, Х.; Остад, СН; Гхариби, Р.; Мазахери, З.; Аи, Ј. Термореспонзивна полиуретанска/силоксанска мембрана за завоје рана и трансплантацију ћелијских листова: Ин витро и ин виво студије. Матер. Сци. инж., Ц 2016, 69, 804−814.

(7) Боо, ИЦ п-кумаринска киселина као активни састојак у козметици: преглед који се фокусира на њене антимеланогене ефекте. Антиоксиданси 2019, 8, 275.

(8) Аван, Ф.; Ислам, МС; Може.; Ианг, Ц.; Схи, З.; Берри, РМ; Там, КЦ Целулосе наноцристал-ЗнО Нанохибридс фор Цонтроллинг Пхотоцаталитиц Ацтивити анд УВ Протецтион ин Цосметиц Формулатион.АЦС Омега 2018, 3, 12403−12411.

(9) Цристина Негритто, М.; Валдез, Ц.; Схарма, Ј.; Росенберг, Ц.; Селассие, ЦР Инхибиција раста и оштећење ДНК изазвано Кс фенолима у квасцу: Квантитативна студија односа структуре и активности. АЦС Омега 2017, 2, 8568−8579.

(10) Хамелин, М.; Хеммати, С.; Варма, К.; Веиси, Х. Греенсинтхесис, антибактеријски, антиоксидативни и цитотоксични ефекат златних честица коришћењем екстракта Пистациа Атлантица. Ј. Таиван Инст. Цхем.Енг. 2018, 93, 21−30.

(11) Менесес-Гутијерез, ЦЛ; Херна ндез-Дамиа н, Ј.; Педраза- Цхаверри, Ј.; Гуерреро-Легаррета, И.; Теллез, ДИ; Јарамилло-Флорес, М. Е. Антиоксидативни капацитет и цитотоксични ефекти катехина и ресвератролних олигомера произведених ензимском оксидацијом против Т24 ћелија рака мокраћне бешике код људи. Антиоксиданси 2019, 8, 214.

(12) Сун, Ц.-Л.; Цханг, Ц.-Т.; Лее, Х.-Х.; Зхоу, Ј.; Ванг, Ј.; Схам,Т.-К.; Понг, В.-Ф. Микроталасна синтеза хетероструктуре МВЦНТ/ГОНР језгро-љуска за електрохемијску детекцију аскорбинске киселине, допамина и мокраћне киселине. АЦС Нано 2011, 5, 7788−7795.

(13) Лин, Т.-Е.; Лу, И.-Ј.; Сун, Ц.-Л.; Пицк, Х.; Цхен, Ј.-П.; Лесцх, А.; Гираулт, ХХ Меке електрохемијске сонде за мапирање дистрибуције биомаркера и убризганих наноматеријала у људским ткивима животиња. Ангев. Цхем., Инт. Ед. енгл. 2017, 56, 16498−16502.

(14) Окуда, К.; Хирота, Т.; Хиробе, М.; Нагано, Т.; Моцхизуки, М.; Нисхино, Т. Синтеза различитих у води растворљивих деривата Г60 и њихова активност гашења супероксида. Фуллерене Сци. Тецхнол. 2000, 8,127−142.

(15) Луценте-Сцхултз, РМ; Мооре, ВЦ; Леонард, АД; Прице, БК; Косинкин, ДВ; Лу, М.; Партха, Р.; Цониерс, ЈЛ; Тоур, ЈМА Антиоксидантне једнозидне угљеничне наноцеви. Џем. Цхем. Соц. 2009, 131, 3934−3941.

(16) Ињац, Р.; Персе, М.; Обермајер, Н.; Ђорђевић-Милић, В.;Пријатељ, М.; Ђорђевић, А.; Церар, А.; Штрукељ, Б. Потенцијални хепатопротективни ефекти фулерена Ц60(ОХ)24 у хепатотоксичности изазваној доксорубицином код пацова са карциномом дојке. Биоматеријали 2008, 29, 3451−3460.

(17) Тонг, Ј.; Зиммерман, МЦ; Ли, С.; Ии, Кс.; Луксенхофер, Р.; Јордан, Р.; Кабанов, АВ Неуронски унос и интрацелуларно уклањање супероксида фулерен (Ц60)-поли(2-оксазолин)снаноформулације. Биоматеријали 2011, 32, 3654−3665.

(18) Иугиох, К.; Схисхидо, К.; Мураиама, Х.; Иано, М.; Матсубаиасхи, К.; Такада, Х.; Накамура, Х.; Масуко, К.; Като, Т.; Нисхиока, К. Фулерен Ц60 растворљив у води спречава дегенерацију зглобне хрскавице код остеоартритиса преко смањења активности хондроцита и катаболичке активности и инхибиције дегенерације хрскавице током развоја болести. Артхритис Рхеум. 2007, 56, 3307−3318.

(19) Такада, Х.; Мимура, Х.; Ксиао, Л.; Ислам, РМ; Матсубаиасхи,К.; Ито, С.; Мива, Н. Иновативни антиоксиданс: фулерен (ИНЦИ #:7587) је као "радикални сунђер" на кожи. Висок ниво сигурности, стабилности и потенцијала као врхунски козметички састојак против старења и избељивања. Фуллерени, Наноцеви, Царбон Наноструцт.2006, 14, 335−341.

(20) Феноглио, И.; Грецо, Г.; Томатис, М.; Муллер, Ј.; Раимундо Пинеро, Е.; Бегуин, Ф.; Фонсеца, А.; Наги, ЈБ; Лисон, Д.; Фубини, Б. Структурни дефекти играју главну улогу у акутној плућној токсичности вишезидних угљеничних наноцеви: физичко-хемијски аспекти. Цхем. Рес.Токицол. 2008, 21, 1690−1697.

(21) Новоселов, КС; Геим, АК; Морозов, СВ; Јианг, Д.; Зханг, И.; Дубонос, СВ; Григориева, ИВ; Фирсов, АА Ефекат електричног поља у атомски танким угљеничним филмовима. Наука 2004, 306, 666−669.

(22) Новоселов, КС; Геим, АК; Морозов, СВ; Јианг, Д.; Катснелсон, МИ; Григориева, ИВ; Дубонос, СВ; Фирсов, АА Дводимензионални гас безмасених Дирацових фермиона у графену. Природа 2005,438, 197−200.

(23) Зхоу, Кс.; Веи, И.; Он, К.; Боеи, Ф.; Зханг, К.; Зханг, Х. Редуковани филмови графен оксида који се користе као матрица МАЛДИ-ТОФ-МС за детекцију октахлородибензо-п-диоксина. Цхем. Цоммун. 2010, 46,6974−6976.

(24) Зхао, В.; Фан, С.; Ксиао, Н.; Лиу, Д.; Таи, ИИ; Иу, Ц.; Сим, Д.; Хуанг, ХХ; Зханг, К.; Боеи, Ф.; Ма, Кс.; Зханг, Х.; Иан, К. Папири са флексибилним угљеничним наноцевима са побољшаним термоелектричним својствима.Енерги Енвирон. Сци. 2012, 5, 5364−5369.

(25) Ванг, З.; Ву, С.; Зханг, Ј.; Цхен, П.; Ианг, Г.; Зхоу, Кс.; Зханг, К.; Иан, К.; Зханг, Х. Компаративне студије једнослојних редукованих филмова графенског оксида добијених електрохемијском редукцијом и редукцијом паре хидразина. Наносцале Рес. Летт. 2012, 7, 161.

(26) Лианг, Кс.; Фу, З.; Цхоу, СИ Графенски транзистори произведени путем трансфер-штампе у активним областима уређаја на великој плочици. Нано Летт.2007, 7, 3840−3844.

(27) Сун, Кс.; Лиу, З.; Велсхер, К.; Робинсон, ЈТ; Гоодвин, А.; Зарић, С.; Даи, Х. Нано-графен оксид за снимање ћелија и испоруку лекова. Нано Рес. 2008, 1, 203−212.

(28) Цхен, В.; Ксиао, П.; Цхен, Х.; Зханг, Х.; Зханг, К.; Цхен, И. Расути материјали полимерног графена са 3Д умреженом монолитном графенском мрежом. Адв. Матер. 2019, 31, 1802403.

(29) Цхен, Д.; Фенг, Х.; Ли, Ј. Графен оксид: припрема, функционализација и електрохемијске примене. Цхем. Рев. 2012, 112, 6027−6053.

(30) Рањан, П.; Агравал, С.; Синха, А.; Рао, ТР; Балакрисхнан, Ј.; Тхакур, АД Нискобуџетна неексплозивна синтеза графеноксида за скалабилне апликације. Сци. Реп. 2018, 8, 12007.

(31) Киу, И.; Ванг, З.; Овенс, АЦЕ; Кулаотс, И.; Цхен, И.; Кане,АБ; Хурт, РХ Антиоксидативна хемија материјала на бази графена и њена улога у технологији заштите од оксидације. Наносцале 2014, 6,11744−11755.

(32) Хан, МИ; Озиилмаз, Б.; Зханг, И.; Ким, П. Енерги банд-гапенгинееринг оф грапхене нанориббонс. Пхис. Рев. Летт. 2007, 98,206805.

(33) Соуза, ЈП; Мансано, АС; Вентурини, ФП; Сантос, Ф.; Зуцолотто, В. Антиоксидативни метаболизам зебрице након подлеталног излагања графенском оксиду и опоравак. Фисх Пхисиол. Биоцхем. 2019,45, 1289−1297.

(34) Сун, Ц.-Л.; Су, Ц.-Х.; Ву, Ј.-Ј. Синтеза кратких графеноксидних нанориббона за побољшану детекцију биомаркера Паркинсонове болести. Биосенс. Биоелецтрон. 2015, 67, 327−333.

(35) Кинг, ААК; Давиес, БР; Ноорбехесхт, Н.; Невман, П.; Цхурцх, ТЛ; Харрис, АТ; Разал, ЈМ; Минетт, АИ Нова РаманМетрица за карактеризацију Графен оксида и његових деривата.Сци. Реп. 2016, 6, 19491.

(36) Хсу, Х.-Ц.; Показано, И.; Веи, Х.-И.; Цханг, И.-Ц.; Ду, Х.-И.; Лин,И.-Г.; Тсенг, Ц.-А.; Ванг, Ц.-Х.; Цхен, Л.-Ц.; Лин, И.-Ц.; Цхен, К.-Х. Графен оксид као обећавајући фотокатализатор за конверзију ЦО2 у метанол. Наносцале 2013, 5, 262−268.

(37) Лин, Л.-И.; Иех, М.-Х.; Тсаи, Ј.-Т.; Хуанг, И.-Х.; Сун, Ц.-Л.; Хо, К.-Ц. Нова хетероструктура језгро-љуска са више зидова угљеничне наноцеви@грапхенеокиде нанориббон ​​као потенцијални суперкондензаторски материјал. Ј. Матер. Цхем. 2013, 1, 11237−11245.

(38) Иин, Х.; Ксу, Л.; Портер, НА Пероксидација слободних радикала липида: механизми и анализа. Цхем. Рев. 2011, 111, 5944−5972.

(39) Тунг, Ц.-Х.; Цханг, Ј.-Х.; Хсиех, И.-Х.; Хсу, Ј.-Ц.; Еллис, АВ; Лиу, В.-Ц.; Иан, Р.-Х. Поређење приноса хидроксилних радикала између фото- и електрокатализованих третмана воде. Ј. Таиван Инст. Цхем.Енг. 2014, 45, 1649−1654.

(40) Охсхима, Х.; Иосхие, И.; Ауриол, С.; Гилберт, И. Антиоксидативна и прооксидативна дејства флавоноида: ефекти на оштећење ДНК изазвано азотним оксидом, пероксинитритом и нитроксил ањоном. Фрее Радицал Биол. Мед.1998, 25, 1057−1065.

(41) Цхоу, Х.-И.; Лее, Ц.; Пан, Ј.-Л.; Вен, З.-Х.; Хуанг, С.-Х.; Лан,Ц.-В.; Лиу, В.-Т.; Час, Т.-Ц.; Хсеу, И.-Ц.; Хванг, Б.; Цхенг, К.-Ц.; Ванг, Х.-М. Обогаћени екстракт астаксантина из ХаематоцоццусПлувиалис повећава излучивање фактора раста да би се повећала пролиферација ћелија и индукује деградација ММП1 да би се побољшала производња колагена у људским дермалним фибробластима. Инт. Ј. Мол. Сци. 2016, 17.955.

(42) Битнер, БР; Марцано, ДЦ; Берлин, ЈМ; Фабиан, РХ; Цхериан, Л.; Цулвер, ЈЦ; Дицкинсон, МЕ; Робертсон, ЦС; Пауллер,РГ; Кент, ТА; Тоур, ЈМ Антиоксидативне честице угљеника побољшавају цереброваскуларну дисфункцију након трауматске повреде мозга. АЦСНано 2012, 6, 8007−8014.

(43) Лиао, Ц.; Ли, И.; Тјонг, С. Грапхене Наноматериалс: Синтхесис, Биоцомпатибилити, анд Цитотокицити. Инт. Ј. Мол. Сци. 2018, 19, 3564.

(44) Конг, Х.; Ванг, Л.; Зху, И.; Хуанг, К.; Фан, Ц. Цултуремедиум-ассоциатед пхисицоцхемицал инсигхтс он тхе цитотокицити офцарбон наноматериалс. Цхем. Рес. Токицол. 2015, 28, 290−295.

(45) Ксиао, Л.; Матсубаиасхи, К.; Мива, Н. Инхибиторни ефекат деривата фулерена омотаног полимером растворљивог у води на меланогенезу изазвану УВА-ом преко смањења експресије тирозиназе у меланоцитима и кожним ткивима човека. Арцх. Дерматол. Рес. 2007, 299,245−257.

(46) Кфоури, А.; Амаро, М.; Цоллет, Ц.; Сордет-Дессимоз, Ј.; Гинер, МП; Цхристен, С.; Моцо, С.; Лелеу, М.; Левал, Л.; Коцх, У.; Трумп, К.; Сакамото, К.; Беерманн, Ф.; Радтке, Ф. АМПК промовише преживљавање ц-Миц-позитивних ћелија меланома сузбијањем оксидативног стреса. ЕМБО Ј. 2018, 37, бр. е97673.

(47) Хсеу, И.-Ц.; Цхенг, К.-Ц.; Лин, И.-Ц.; Цхен, Ц.-И.; Цхоу, Х.-И.; Ма, Д.-Л.; Леунг, Ц.-Х.; Вен, З.-Х.; Ванг, Х.-М. Синергистички ефекти Линдеранолида Б у комбинацији са арбутином, ПТУ или Којичном киселином на инхибицију тирозиназе. Цурр. Пхарм. Биотецхнол. 2015, 16,1120−1126.

(48) Лее, С.; Ким, Ј.; Сонг, Х.; Сеок, Ј.; Хонг, С.; Боо, И. Лутеолин{1}}Сулфат слаби синтезу меланина кроз инхибицију експресије тирозиназе посредоване ЦРЕБ и МИТФ. Антиоксиданси 2019, 8, 87.

(49) Дувал, Ц.; Цохен, Ц.; Цхагнолеау, Ц.; Флоурет, В.; Боурреау,Е.; Бернард, Ф. Кључна регулаторна улога инпигментације дермалних фибробласта као што је показано коришћењем реконструисаног модела коже: утицај фото-старења. ПЛоС Оне 2014, 9, бр. е114182.

(50) Ли, П.-Х.; Цхиу, И.-П.; Схих, Ц.-Ц.; Вен, З.-Х.; Ибето, ЛК; Хуанг, С.-Х.; Цхиу, ЦЦ; Ма, Д.-Л.; Леунг, Ц.-Х.; Цханг, И.-Н.; Ванг, Х.-МД Биофункционалне активности екстракта Екуисетум рамосиссимум: заштитни ефекти против оксидације, меланома и меланогенезе. Окид. Мед. Ћелија. Дуговечност 2016, 2016, 2853543.

(51) Лианг, Ц.-Х.; Цхан, Л.-П.; Динг, Х.-И.; Дакле, ЕЦ; Лин, Р.-Ј.; Ванг, Х.-М.; Цхен, И.-Г.; Цхоу, Т.-Х. Активност уклањања слободних радикала 4-(3,4-дихидроксибензоилоксиметил)фенил-О- -д-глукопиранозида из Ориганум вулгаре и његова заштита од оксидативног оштећења. Ј. Агриц. Фоод Цхем. 2012, 60, 7690−7696.

(52) Ванг, Х.-М.; Цхен, Ц.-И.; Вен, З.-Х. Идентификовање инхибитора меланогенезе из Циннамомум СубГениус са ин витро и ин виво системима скрининга циљањем на људску тирозиназу. Екп.Дерматол. 2011, 20, 242−248.

(53) Ванг, И.-Ц.; Хуанг, Кс.-И.; Цхиу, Ц.-Ц.; Лин, М.-И.; Лин, В.-Х.; Цханг, В.-Т.; Тсенг, Ц.-Ц.; Ванг, Х.-МД Инхибиције меланогенезе путем праха екстракта воћа Пхиллантхус Емблица у ћелијама Б16Ф10. Фоод Биосци. 2019, 28, 177−182.

(54) Панчук, РР; Скорокхид, НР; Козак, ИС; Лехка, ЛВ; Моисеенок, АГ; Стоица, РС Ткивна заштитна активност селенометионина и Д-пантхерина код мишева који носе Б16 меланом под третманом доксорубицином није повезана са њиховим потенцијалом уклањања РОС. Хрват. Мед. Ј. 2017, 58, 171.

(55) Ванг, Х.-МД; Цхен, Ц.-Ц.; Хуинх, П.; Цханг, Ј.-С. Истраживање потенцијала коришћења алги у козметици. Биоресоур. Тецхнол.2015, 184, 355−362