Одређивање садржаја пет једињења у семену Рехманниае и утврђивање његовог ХПЛЦ отиска прста

Табела 3 Резултати теста опоравка (н=6)

2.4 Одређивање узорка

Сакупљених шест серија Рехманије припремљено је у складу са методом под "2.2.2" и узорковано и одређено у складу са хроматографским условима под "2.1". Резултати одређивања садржаја приказани су у табели 4. Резултати показују да је међу пет компоненти, садржај гликозида реманије Д највећи, у распону од 0.460% до {{1 0}}.730%; садржај леонури гликозида је на другом месту, у распону од 0,100% до 0,270%, а садржај две компоненте у узорцима из различитих производних подручја се значајно не разликује. У узорку СКС1, осим ехинакозида, садржај остале четири компоненте је значајно већи од садржаја других серија узорака; садржај ехинакозида, цистанхезида А и вербаскозида у Рехманниа глутиноса из различитих производних подручја је прилично различит и неправилан.

БИЉА ЦИСТАНЦХЕ СОДОБРО КВАЛИТЕТНА КОНЗИСТЕНТНОСТ

2.5 Утврђивање и процена сличности ХПЛЦ отиска прста Рехманниа глутиноса

Хроматограми и подаци вишекомпонентног одређивања садржаја у Рехманниа глутиноса увезени су у софтвер „Цхинесе Хербал Медицине Цхроматограпхиц Фингерпринт Симиларити Евалуатион Систем (2012 Едитион)“ и одабран је хроматограм узорка за тестирање СКС1 као референтни спектар. Ширина временског прозора је постављена на 0.10 мин, а метода медијане је коришћена за генерисање суперпонираних спектра и референтних спектра. Идентификована су укупно 23 уобичајена врха (видети слику 3). Сличност између отисака прстију узорка Рехманниа глутиноса и референтног је била 0,904 ~ 0,950, што указује да су узорци Рехманниа глутиноса из различитих производних подручја и између сирове Рехманниа глутиноса и куване Рехманниа глутиноса били слични и да су имали конзистенцију доброг квалитета.

Табела 4 Резултати одређивања садржаја 5 компоненти у семену Рехманниае/%

13. рехманниосиде Д; 17. леонурид; 19. ехинакозид; 20. кастанозид А; 21. актеозид

Слика 3 Преклапање ХПЛЦ хроматограма 6 серија Семен Рехманниае (СКС1-СКС4, ХН1, ХН2) и референце (Р)

3 Дискусија

3.1 Избор хроматографских услова

У овој студији су испитивана четири система мобилне фазе, ацетонитрил-вода, ацетонитрил-0.1% раствор мравље киселине, метанол-вода и метанол-0.1% раствор мравље киселине. Резултати су показали да пет компоненти има добре ефекте раздвајања у систему ацетонитрила; у поређењу са системом мобилне фазе ацетонитрил-вода, пикови гликозида рехманниа глутиноса и матичњака у мобилној фази ацетонитрила-0.1% раствора мравље киселине били су ужи и имали су добру вршну симетрију. Истовремено, због различите апсорпције ултраљубичастог зрачења пет компоненти, садржај компоненти веома варира. Да би се прецизније одредио садржај сваке компоненте и обезбедило да је интензитет апсорпције пет компоненти равномерно распоређен на истом хроматограму, ултраљубичаста апсорпцијагликозид реманије Д, гликозид матичњака, ехинакозид, цистанхезид А и вербаскозид је анализиран и одабрано је одређивање променљиве таласне дужине, односно 0-24 мин, први издвојени гликозид реманије одређен је на 203 нм, а 24-40 мин, одвојени ехинакозид, цистанхезид А и вербаскозид су одређени на 330 нм. Поред тога, ова студија је такође истраживала ефекте екстракције метанола, 70% раствора метанола, 50% раствора метанола и 50% раствора ацетонитрила као растварача за екстракцију. Резултати су показали да 70% раствор метанола као растварач за екстракцију може боље да раствори компоненте које се испитују, а екстраховани узорак има мање нечистоћа. Стога је ова студија одабрала 70% метанола као растварач за екстракцију, ацетонитрил-0.1% раствор мравље киселине као систем мобилне фазе и користила променљиву таласну дужину за одређивање садржаја пет компоненти у Рехманниа-у.

3.2 Анализа резултата одређивања узорка

Из резултата одређивања види се да је након парења, осим благог повећања садржаја ехинакозида, значајно смањен садржај остале четири компоненте, посебно леонуризида и цистанхезида А; садржај рехманниа гликозида Д и цистанхезида А код Рехманниа глутиноса из истог производног подручја био је незнатно различит, а садржај леонуризида, ехинакозида и вербаскозида значајно се разликовао; садржај ехинакозида у Рехманниа глутиноса из производног подручја Хенан био је значајно већи него у узорцима из производног подручја Сханки, а садржај остале четири компоненте је био незнатно другачији. Истовремено, према ХПЛЦ отиску прста установљеном у овој студији, сличност између 6 серија узорака Рехманниа и контролног отиска прста била је 0.904~0.950, што указује да је главна хемикалија компоненте 6 серија узорака Рехманниа пре и после обраде биле су веома конзистентне.

Укратко, метода одређивања садржаја и ХПЛЦ отисак прста утврђени у овој студији су тачни, поуздани и имају добру специфичност. Могу се користити за карактеризацију промена у компонентама и степена обраде Рехманниа глутиноса пре и после обраде, као и за пружање техничке подршке за контролу квалитета Рехманниа глутиноса. Међутим, ова студија има недостатке мале серије узорака и непотпуну покривеност производних подручја, што захтева даљу анализу и верификацију.

Референце

[1] Кинески фармакопејски комитет. Фармакопеја Народне Републике Кине: Том 1 [С]. Пекинг: Цхина Медицал Сциенце анд Тецхнологи Пресс, 2020: 129-130.

[2] Ксу Јун, Фу Зхетонг. Истраживање историјске еволуције имена прерађене Рехманниа глутиноса и проучавање њене ефикасности [Ј]. Кинеска патентна медицина, 2017, 39 (9): 1913-1916.

[3] Зху Јуе, Зху Ксиангмеи, Схи Иухе, ет ал. Напредак истраживања Рехманниа глутиноса и анализа предвиђања њених маркера квалитета [Ј]. Кинеска патентна медицина, 2022, 45 (2): 1273-1281.

[4] Цхен Јинпенг, Зханг Кекиа, Лиу Ии, ет ал. Напредак истраживања хемијског састава и фармаколошких ефеката Рехманниа глутиноса [Ј]. Кинеска хербална медицина, 2022, 52 (6): 1772-1784.

[5] Ли Хонгвеј, Менг Сиангл. Напредак истраживања хемијских компоненти и фармаколошких ефеката Рехманниа глутиноса［Ј］.

Истраживање о процени лекова, 2015, 38(2): 218-228.

[6] Зханг Боионг, Јианг Зхензуо, Ванг Иуефеи, ет ал. Анализа хемијских компоненти свеже Рехманниа глутиноса, сирове Рехманниа глутиноса и куване Рехманниа глутиноса од стране УПЛЦ/ЕСИ-К-ТОФ МС［Ј］. Кинеска патентна медицина, 2016, 38(5): 1104-1108.

[7] Зханг Ликиан, Веи Иуе, Ли Феифеи, ет ал. Препознавање узорака отиска прста и вишекомпонентно одређивање садржаја различитих обрађених производа Рехманниа глутиноса［Ј］. Хубеи Агрицултурал Сциенцес, 2023, 62(9): 135-141.

[8] Цхен Јинпенг, Зханг Кекиа, Лиу Ии, ет ал. Напредак истраживања хемијских компоненти и фармаколошких ефеката Рехманниа глутиноса［Ј］. Кинеска биљна медицина, 2021, 52(6): 1772-1784.

[9] Тао Ји, Јианг Ианхуи, Танг Кејиан, ет ал. Компаративна студија хемијских компоненти Рехманниа глутиноса пре и после обраде помоћу УХПЛЦ-К-ТОФ/МС［Ј］. Нови кинески лекови и клиничка фармакологија, 2016, 27(1): 102-106.

［10］ Ксу Зхуо, Даи Ксинкин, Су Схулан, ет ал. Динамичка акумулација компоненти нуклеозида и аминокиселина у Рехманниа глутиноса на основу УПЛЦ-ТК-МС［Ј］. Кинеска биљна медицина, 2021, 52(23): 7323-7330.

［11］ Ли Иујиао. Студија о технологији обраде и механизму "девет парења и девет излагања" Рехманниа глутиноса［Д］. Ђинан: Универзитет Шандонг, 2023.

［12］ Ванг Иуе, Зхоу Киао, Зханг Ксуелан, ет ал. ХПЛЦ Истовремено одређивање садржаја осам компоненти у Рехманниа глутиноса и њеним различитим прерађеним производима УПЛЦ анализом отиска прста и одређивањем садржаја компоненти са више индекса [Ј]. Кинески медицински материјали, 2021, 44 (7): 64-68.

[13] Гуо Ксиаокаи, Ксуе Схујуан, Цхен Суикинг. Процена квалитета Рехманниа глутиноса на основу УПЛЦ отиска прста и одређивања садржаја компоненти са више индекса [Ј]. Кинески медицински материјали, 2021, 44 (4): 917-923.