Секретом денталних мезенхималних матичних ћелија: интригантан приступ неуропротекцији и неурорегенерацији, 2. део

Важно је приметити да старост донора и услови микроокружења у витромају такође утичу на састав секретома. Извештава се да је ДПСЦ-ЦМ добијен у нормоксичним условима обогаћен молекулима са антиинфламаторним својствима, обнављањем ткива и регенеративним својствима у поређењу са ЦМ добијеним у хипоксичним условима [44].

У људском учењу, памћењу и спознаји, ин витро микроокружење игра виталну улогу. Живот у добром микроокружењу ин витро може нам помоћи да боље одржимо памћење, побољшамо ефекте учења и унапредимо опште физичко здравље.

Прво, добро микроокружење ин витро може промовисати формирање и одржавање неуронских веза. Неурони су врста ћелија у мозгу које су одговорне за пренос сигнала и формирање сећања. Када научимо нове ствари, везе између неурона ће наставити да јачају, што помаже у формирању нових сећања. Добро окружење може помоћи да неуронске везе остану стабилне без ометања.

Друго, ин витро микроокружење може утицати на метаболизам и функцију можданих ћелија. Довољно кисеоника, исхране и воде могу побољшати метаболички ниво можданих ћелија, избећи смрт и старење можданих ћелија, и на тај начин допринети развоју памћења и когнитивних способности. У исто време, тихо или умерено удобно окружење може помоћи људима да се концентришу и промовишу побољшање учења и ефикасности рада.

Осим тога, здраво окружење ин витро такође има позитиван утицај на друге аспекте физичког здравља. Напори у аспектима као што су адекватан сан, ослањање на здрав избор исхране и умерено вежбање могу побољшати памћење и когнитивне способности. Здрав начин живота који интегрише тело и ум може да смањи негативне емоције као што су анксиозност, депресија и стрес, чиме се помаже да се побољша радна ефикасност мозга и виталност размишљања.

Укратко, постоји нераскидива веза између ин витро микроокружења и меморије. Оптимизовано окружење може помоћи у јачању везе између неурона и побољшању метаболичке функције можданих ћелија, чиме се промовише формирање и одржавање памћења, а такође је и гаранција физичког и менталног здравља. Хајде да радимо заједно на изградњи здравог и позитивног ин витро окружења како бисмо дали бољи допринос нашем здрављу и успеху. наранџасти човек:

Види се да треба побољшати памћење, а Цистанцхе може значајно побољшати памћење, јер

Цистанцхе је традиционални кинески медицински материјал са многим јединственим ефектима, од којих је једно побољшање памћења. Ефикасност Цистанцхеа потиче од различитих активних састојака које садржи, укључујући танинску киселину, полисахариде, флавоноидне гликозиде, итд. Ови састојци могу да унапреде здравље мозга на много начина.

Кликните на сазнајте 10 начина за побољшање меморије

Штавише, секретомеколектована из 5% О2 култивисаних ДПСЦ-а показала је веће стимулативне ефекте на пролиферацију и миграцију НИХ3Т3 ћелија мишјих ембрионалних фибробласта и неуронску диференцијацију ћелија СХ-СИ5И [45].
Количина и величина ЕКСО и њихова експресија тетраспанина могу варирати у зависности од медијума који се користи за културу [46]. Секретом СХЕД и младих ДПСЦ садржао је више фактора раста и ниже нивое проинфламаторних цитокина у поређењу са ДПСЦ добијеним од старих субјеката.

Потенцијал диференцијације је такође био већи код СХЕД и младих ДПСЦ [47].

ЦМ могу добити здрави ПДЛСЦ, али и запаљени ПДЛСЦ. ЦМ добијен од упаљених повећао је пролиферацију и здравих и запаљених ПДЛСЦ, али је смањио диференцијацију према остеобластима. Здрава ЦМ је спасила поремећену остеогену диференцијацију [48].

Третман различитим супстанцама такође може утицати на секретом ћелије. Третман ДПСЦ са 2,3,5,40-тетрахидроксистилбеном-2-О- -Д-глукозидом (ТХСГ), биоактивном компонентом Полигонум мултифлорум Тхунб., изазвао је промене у секрецији протеина повезаних са растом у ЦМ, повећавајући неке од њих као што су АКТ2 и НГФ рецептор [49].

Уместо тога, ЦМ из ФГФ-2-модификованих ГМСЦ садржао је више ВЕГФ-А, ФГФ-2 и ТГФ- [50]. Третман СХЕД аскорбинском киселином повећао је ослобађање фактора раста неопходних за регенерацију ткива и хомеостазу, укључујући ВЕГФ, СЦФ, ИГФ-1, ХГФ,бФГФ, Анг-1 и ЕГФ, и антиинфламаторних цитокина, као што су као НО, индолеамин 2,3-диоксигеназа (ИДО), ПГЕ-2, ИЛ-10 и ИЛ-6.

Напротив, инфламаторни цитокини ЦЦЛ2 и ТГФ- 1 су смањени [51].

Излагање медијуму за диференцијацију такође може изазвати промене у некодирајућим РНАин ЕВ и ЕКСОс ПДЛСЦ.

Конкретно, 69–557 кружних РНК (цирцРНА) и 2907–11,581 лнцРНА пронађено је у ЕВ изолованим од ПДЛСЦ и ПДЛСЦ изложених медијуму за остеогену диференцијацију у различитим временским тачкама.

У поређењу са недиференцираним ПДЛСЦсЕВ, 3 цирцРНА и 2 лнцРНА су биле повишене регулације, а 39 цирцРНА и 5 лнцРНА су биле конзистентно смањене после 5 и 7 дана излагања медијуму за диференцијацију [52].

Штавише, 72 миРНК су повећане, док је 35 било смањено у ПДЛСЦс ЕКСО након остеогене индукције [53]. Сажетак главних фактора пронађених у секретому различитих зубних МСЦ може се наћи у табели 1.

Анг, ангиопоетин; БДНФ, неуротрофни фактор из мозга; БМП, коштани морфогенетски протеин; БМСЦ, МСЦ коштане сржи; цирцРНА, кружна РНК; ЦМ, кондиционирани медијум; ЦУЛ7, куллин 7; ЦКСЦЛ, ЦКСЦ мотив хемокинелиганд; ДАЦЦ, развој апикалних комплексних ћелија; ДФСЦ, матичне ћелије зубног фоликула; ДПСЦ, матичне ћелије зубне пулпе; ЕЦМ, екстрацелуларни матрикс; ЕГФ, епидермални фактор раста; ЕЦМ, екстрацелуларни матрикс; ЕВ, екстрацелуларни везикули; ЕКСОс, егзосоми; ФГФ, фактор раста фибробласта; Г-ЦСФ, фактор који стимулише колонију гранулоцита; ГДНФ, неуротрофни фактор изведен из глијалних ћелија; ГМ-ЦСФ, фактор стимулације колоније гранулоцита-макрофага; ГМСЦ, гингивални МСЦ; ХГФ, фактор раста хепатоцита; ИЦАМ, молекул интерцелуларне адхезије; ИДО, индолеамин2,3-диоксигеназа; ИФН, интерферон; ИГФ, фактор раста сличан инсулину; ИЛ, интерлеухин; лнцРНА, дуга некодирајућа РНК; МЦП, моноцитни хемоатрактантни протеин; миРНА, микроРНА; ММП, матрикс металопротеиназа; НГФ, фактор нервног раста; НТ, неуротрофин; ПДГФ, тромбоцитни фактор раста; ПДЛСЦ, матичне ћелије пародонталног лигамента; пиРНА, ПИВИ-интерагујуће РНК; ПСМА1, Протеазомска подјединица, алфа тип; СЦАП, матичне ћелије из апикалне папиле; СДФ, фактор изведен из стромалних ћелија; СХЕДс, матичне ћелије из људских ексфолијираних млечних зуба; ТГФ, трансформишући фактор раста; ТХСГ, 2,3,5,40-тетрахидроксистилбен-2-О- -Д-глукозид; ТИМП, ткивни инхибитор металопротеиназе; ТНФ, фактор некрозе тумора; УЦ-МСЦ, мезенхималне матичне ћелије пупчане врпце; ВЕГФ, фактор раста васкуларног ендотела ↑, повећање/побољшања; ↓, смањење.

3. Неуропротективни и неурорегенеративни потенцијал секретома зубних матичних ћелија у претклиничким моделима

Да би се проценио неуродегенеративни и неуропротективни потенцијал денталногМСЦ секретома, ефекти ЦМ и ЕВ су процењени у претклиничким моделима неуродегенеративних и неуролошких болести и моделима оштећења неурона, као што је повреда кичмене мождине (СЦИ).

Поред тога, процењени су ефекти посредовани секретомом на раст неурона, његов капацитет да стимулише диференцијацију неурона и његови ефекти на глијалне ћелије.

Извршили смо ПубМед претрагу тражећи студије које показују неуродегенеративни и неуропротективни потенцијал секретома денталних МСЦ ин витро и ин виво модела.

3.1. Секретом матичних ћелија зубне пулпе

Секретом ДПСЦ-а био је један од највише проучаваних. Различите студије су процениле његову ефикасност у изазивању раста неурита. Пријављено је да је ДПСЦ-ЦМ промовисао неуроне неурона дорзалног корена (ДРГ) у прерастању неурита.

Конкретно, укупна дужина и број зглобова неурита су се повећали након третмана ЦМ. Штавише, ДПСЦ-ЦМ промовише способност Сцхваннове ћелије и формирање мијелина [54]. ДПСЦс-ЦМ је побољшао преживљавање ћелија и индуковао раст неурита ПЦ12 ћелија, што показује неуронски нуклеарни протеин (НеуН), протеин 2 повезан са микротубулама (МАП-2 ), и ИИИ-тубулин.

Конкретно, ДПСЦс-ЦМ је био ефикаснији у изазивању раста неурита ПЦ12 у поређењу са ДПСЦ/ПЦ12 ко-културама, што указује да су ћелијске кокултуре имале одложено време кашњења у производњи ефикасних количина трофичких фактора.

ДПСЦ-ЦМ је такође побољшао миграцију ћелија. Занимљиво је да је број преживелих ПЦ12 ћелија смањен када је ЦМ додат анти-ГДНФ. Уместо тога, додавање анти-НГФ, анти-ГДНФ и анти-БДНФ антитела слаби ПЦ12 неуритни раст.

Ови подаци су показали да су НГФ, БДНФ и ГДНФ укључени у опстанак и диференцијацију ПЦ12 [55]. ДПСЦ секретом показује хемоатрактиван ефекат на СХ-СИ5И ћелије. Штавише, процењен је његов ефекат на неурално сазревање. Са овим циљем, ћелије СХ-СИ5И су индуковане према неуронским ћелијама након што су биле изложене ДПСЦ секретому.

СХСИ5И ћелије подвргнуте ДПСЦ секретому показале су повећан раст неурита, стечене ултраструктурне карактеристике неуронских ћелија и показале су повећану имунолошку реактивност за неуронске маркере. Штавише, ћелије СХ-СИ5И третиране са ЦМ-ом развиле су различите карактеристике, укључујући струје осетљиве на Цд2+-, што сугерише да је СХ-СИ5И сазрео ЦМ-ДПСЦ-ом стекао напонски ограничене Ца2+ канале [56].

У складу са претходном студијом, ЦМ добијен ДПСЦ листом индуковао је формирање и раст неурита у неуронско диференцираним СХ-СИ5И ћелијама неуробластома. Ови ефекти су побољшани када су ДПСЦ листови култивисани са ФГФ2.

Ефекти подстицања неурита су укинути када су неуротрофни фактори били инхибирани, што сугерише да су они потребни за позитиван ефекат ДПСЦ листова на активност неуронских ћелија [57].

Недавно су Цхоуаиб ет ал. доказали да ДПСЦ-ЦМ побољшање неурита израста у сензорне неуроне зависи од концентрације. Аутори су такође открили да је 48 х ДПСЦ кондиционирања најбоља опција за добијање ЦМ са ефикасном активношћу, док продужење времена кондиционирања није побољшало ефекте ДПСЦ-ЦМ.

Занимљиво је да замрзнуто складиште није утицало на експерименталне резултате. ЦМ је садржао неке факторе познате по својој улози у неурогенези и неуропротекцији, али и ангиогенези и остеогенези. Штавише, кондиционирање ДПСЦ са додатком Б-27 појачало је неуродегенеративне ефекте њиховог секретома, изазивајући промену у његовом саставу фактора раста.

Конкретно, ЦМ је био ефикаснији када је Б-27 додат у ДПСЦ пре кондиционирања [58]. ЦМ из ДПСЦ је побољшао неуритогенезу и показао хемоатрактантни ефекат и на неуралне матичне ћелије (НСЦ).

Примена ДПСЦ-а фибрином богатим леукоцитима и тромбоцитима (ЛПРФ) повећала је секрецију БДНФ, али није имала додатне ефекте на механизме поправке посредоване паракрином [59].

Такође се показало да је ЦМ изведен из ДПСЦ-а у стању да заштити и регенерише изоловане примарне неуронске ћелије тригеминалног ганглија (ТГНЦ). Заиста, ЦМ је побољшао преживљавање ТГНЦ повезано са екстензивним израстањем и гранањем неурита.

Паралелно, ДПСЦ-ЦМ је значајно повећао експресију неуронских маркера НеуН, ИИИ-тубулина и синапсина-И, као и ТРПВ1. Занимљиво је да ДПСЦ-ЦМ садржи НГФ, БДНФ, НТ-3 и ГДНФ [60].

ДПСЦ мобилисани Г-ЦСФ су експримирали веће неуротрофне факторе у поређењу са базалним ДПСЦ-има и њихов секретом је показао повећан потенцијал екстензије неурита. Заиста, мобилисани ДПСЦ ЦМ је имао већи ефекат на раст неурита у ТГВ ћелијама [61]. Раније је показано да ЦМ из мобилисаног ДПСЦ повећава пролиферацију и миграциону активност неуронских Сцхванн РТ4-Д6П2Т ћелија [62].

Занимљиво, показало се да ЦМ из СХЕД-а и ДПСЦ-а може да промовише ту генерацију церебралних грануларних неурона који инхибирају сигнале инхибитора раста аксона путем паракриних механизама [63]. Секретом ДПСЦ-а такође показује супериорне ефекте у поређењу са другим МСЦ.

Кумар и сарадници су показали да секретом изведен из ДПСЦ-а, СЦАП-а и ДФСЦ-а изазива неуралну диференцијацију у ИМР-32 ћелијама, пренеуробластној ћелијској линији, ефикасније од БМСЦ-а.

Конкретно, дужина неурита је била већа када су ИМР{0}} ћелије третиране ДПСЦ секретомом. ДПСЦ секретом је садржао ГЦСФ, ИФН- и ТГФ-, који могу да промовишу неуралну диференцијацију [64].

ДПСЦ, БМСЦ и АМСЦс промовисали су повећање преживљавања ко-култивираних ћелија ретиналних ганглија. Конкретно, повећање преживљавања је побољшано у ретиналним културама третираним ДПСЦ.

Занимљиво је да је кокултура са ДПСЦ изазвала значајно повећање и броја ретиналних ганглијских ћелија које носе неурите и дужине неурита у поређењу са кокултурама са БМСЦ и АМСЦ. Међутим, ови ефекти су блокирани коришћењем блокатора рецептора неуротрофних фактора Фц-рецептора.

Различити типови МСЦ-а су показали другачији образац експресије неуротрофног фактора, и, конкретно, ДПСЦ-ови су ослобађали више нивое неколико фактора раста као што су НГФ, БДНФ и ВЕГФ у поређењу са БМСЦ и АМСЦ-има.

Конкретно, ВГФ може посредовати у неуропротективним ефектима ДПСЦ-а [65]. ЦМ-ДПСЦ-и су показали заштитне ефекте на цитотоксичност изазвану депривацијом кисеоника и глукозе (ОГД) у астроцитима на начин зависан од дозе.

Конкретно, и пре и после третмана са ЦМ-ДПСЦ, али и ЦМ-БМСЦс, ослабили су ОГД-индуковану експресију глијалног фибриларног киселог протеина (ГФАП), нестина и мусаши-1 у астроцитима. Третман са ЦМ је такође блокирао производњу реактивних врста кисеоника (РОС) изазвану ОГД и повећање регулације ИЛ-1. Занимљиво је да ЦМ-ДПСЦ дају супериорну цитопротекцију против ћелијске смрти у поређењу са БМСЦ [66].

Венугопал ет ал. упоредили су неуропротективни потенцијал ЕКСО, ЦМ или неурон--МСЦ-кокултурног система против ексцитотоксичности изазване каинском киселином ин витро. Штавише, да би се идентификовао најприлагођенији тип МСЦ-а, тестирани су ЕКСО и ЦМ изведени из ДПСЦ-а и БМСЦ-а.

Сва три приступа су показала неуропротективни потенцијал захваљујући повећању експресије фактора раста и инхибицији апоптозе кроз активацију ПИ3К-Бцл-2 пута.

Важно је напоменути да су ЕКСО показали боља анти-некротична својства у поређењу са неурон-МСЦ кокултуром или ЦМ. Што се тиче ЦМ, само протеини који садрже фракцију у опсегу од 3–10 кДа показали су неуропротекцију и спасили неуроне од ексцитотоксичности [67].

Секретом ДПСЦ-а је такође показао корисне ефекте на моделима неуродегенеративних болести. Третман ДПСЦ секретомом смањио је амилоидну (А) цитотоксичност у анин витро моделу Алцхајмерове болести (АД), повећавајући виталност ћелија и смањујући апоптозу.

Показало се да ДПСЦ секретом садржи повишене нивое ВЕГФ, фракталкина, РАНТЕС, протеина хемоатрактанта моноцита-1 (МЦП-1) и ГМЦСФ у поређењу са БМСЦ и АМСЦ.

Занимљиво је да је неприлизин, протеаза способна да разгради А, такође пронађена у ДПСЦ секретому. ДПСЦ секретом протеолитички разграђује А 1–42 ин витро, што доводи до непотпуне деградације након 12 х [68].

For more information:1950477648nn@gmail.com