Ефекат воденог екстракта Цистанцхес Херба на губитак костију код пацова са јајницима

Контакт: Аудреи Хуaudrey.hu@wecistanche.com

Хаидонг Лианг 1,*, Фанг Иу 2, Зхихонг Тонг 1 и Заигуо Хуанг 3

1 Hands and feet microsurgery, Dalian Municipal Central Hospital, Dalian 116033, China; E-Mail: tongzhih37@sina.cn

2 School of Medicine, Dalian University, Dalian 116033, China; E-Mail: yufangk7@sina.cn

3 Orthopedics Department, Dalian Municipal Central Hospital, Dalian 116033, China; E-Mail: huangzg41@sina.com

Апстрактан:Да би се проценила способност традиционалне кинеске медицине Цистанцхес Херба екстракт (ЦХЕ) да спречи губитак кости код пацова са овариектомијом (ОВКС), екстракт Цистанцхес Херба (ЦХЕ) је примењен интрагастрично пацовима. Женке пацова су анестезиране пентобарбитал натријумом (40 мг кг-1, ип), а јајници су им уклоњени билатерално. Пацови у групи лажно оперисаних су анестезирани, лапаротомски и зашивени без уклањања јајника. После 1 недеље опоравка од операције, ОВКС пацови су насумично подељени у три групе и орално третирани са Х2О (ОВКС група) или ЦХЕ (100 или 200 мг кг-1 дневно) током 3 месеца. Лажно оперисана група (н=8) је орално лечена Х2О. После 3 месеца, укупна телесна минерална густина костију (БМД), минерални садржај кости (БМЦ), биомеханички индекс костију, нивои минерала у крви и активности антиоксидативних ензима у крви испитани су код пацова који су били лажно оперисани, овариектомирани и третирани екстрактом Цистанцхес Херба. Резултати су показали да третман екстрактом Цистанцхес Херба значајно у зависности од дозе повећава минералну густину костију (БМД), садржај минерала костију (БМЦ), максимално оптерећење, померање при максималном оптерећењу, напон при максималном оптерећењу, оптерећење при аутоматском прекиду, померање при аутоматском прекиду , стрес при аутопрекидању и активности антиоксидативних ензима у крви, смањили су нивое Ца, Зн и Цу у крви у поређењу са ОВКС групом. Овај експеримент показује да примена екстракта Цистанцхес Херба пацовима са овариектомијом преокреће губитак костију и спречава остеопорозу.

Кључне речи:овариектомија; пацов; кост; антиоксиданс; Цистанцхес Херба

Цистанцхес Херба

1. Представљање

Остеопороза је болест старења повезана са губитком коштане масе која се често јавља без симптома све док микроархитектонско погоршање не постане толико значајно да се фрактура кости увек дешава на месту где је смањење коштане масе испод онога што је потребно за интегритет кости. Остеопороза је од великог значаја у здравственој заштити. Иако смањене масе, кости су нормалне у односу на минерализацију, али хистолошки, долази до смањења дебљине кортекса и броја и величине трабекула грубе спужвасте кости [1–3].

Последњих година спроведено је много студија о овој болести. Акумулирани подаци су показали да је губитак естрогена у менопаузи главни допринос патогенези болести јер је овај хормон главни негативни регулатор активности остеокласта [4–6], а остеокласти су главне ћелије одговорне за ремоделирање костију код остеопорозе. [7].

Постменопаузална остеопороза је најчешће метаболичко обољење костију, карактерише се брзим губитком минерализованог коштаног ткива, нарушавањем трабекуларне архитектуре кости и променама кристалних својстава минералних наслага, које резултирају структурним оштећењем (фрактуром) костију. места богата спужвастим костима, као што су пршљени, кук и дистална подлактица [8–11]. Недостатак естрогена се сматра главном детерминантом губитка коштане масе код жена у постменопаузи. Пацови и пси са јајницима су се интензивно користили у моделима остеопорозе. Године 1996. су пријављени ефекти ибандроната на псе са овариектомијом [12].

Цистанцхес Херба (ЦХ), холопаразитска биљка Цистанцхе десертицола ИЦ Ма, класификована је као средство за тонирање у оријенталној традиционалној медицини и обично се користи за лечење заборавности, губитка слуха, неплодности и хроничног затвора. ЦХ има различите фармаколошке активности, укључујући антиноцицептивне, антиинфламаторне и имуно-појачавајуће ефекте [13,14]. Претходна студија је известила да Цистанцхес Херба може да усмерава коштане мезенхималне матичне ћелије (БМСЦ) да се диференцирају у остеобласте, што обећава повољну перспективу за лечење остеопорозе и раздвајања фрактура костију [15]. Цхен ет ал. [16] су известили да полисахариди Цистанцхес Херба могу да подстичу транзицију циклуса ћелија коштане сржи и опоравак хематопоетске функције код анемичних мишева са депресијом коштане сржи, убрзавају хематогенезу код соја рубрум и соја макронуклеуса.

У овој студији, минерална густина костију (БМД), садржај минерала у костима (БМЦ), биомеханички индекс костију, нивои минерала у крви и активности антиоксидативних ензима у крви испитани су код лажно оперисаних, овариектомираних и третираних пацовима Цистанцхес Херба да би се проучавали ефекти третмана. са екстрактом Цистанцхес Херба на квалитет костију.

Традиционална кинеска медицина Цистанцхес Херба екстракт (ЦХЕ)

2. Материјал и методе

2.1. Припрема водених екстраката биљке Цистанцхес Херба

Цистанцхес Херба је сакупљен из пустиње у алкса лиги Аутономне регије Неи Монгол (Унутрашња Монголија) 2010. године.

Осушена стабљика Цистанцхес Херба екстрахована је дестилованом водом на 100 степени током 2 х. Раствор је центрифугиран на 4000 р/мин током 10 мин. Остаци су уклоњени филтрацијом и комбиновани филтрат је упарен загревањем да би се добила жељена концентрација (2,1 г сувог биљног еквивалента екстракта/мЛ). Принос екстракције био је 13,7 процената (в/в). Водени екстракт је чуван на 2-8 степени.

2.2. Животиње

За истраживање су коришћене 32 женке Вистар пацова старе 3 месеца, тежине између 240 и 270 г на почетку експеримента. Одржавани су у стандардним лабораторијским условима са циклусом светлости и таме од 12 х, са слободним приступом стандардној лабораторијској храни за пацове и води из славине.

2.3. Експерименти на животињама.

Женке пацова су анестезиране пентобарбитал натријумом (40 мг кг-1, ип), а јајници су им уклоњени билатерално. Пацови у групи лажно оперисаних су анестезирани, лапаротомски и зашивени без уклањања јајника. Након 1 недеље опоравка од операције, ОВКС пацови су насумично подељени у три групе (н=8 у свакој групи) и интрагастрично третирани са Х2О (ОВКС група), екстрактом Цистанцхес Херба (ЦХЕ) (100 или 200 мг кг −1 дневно) током 3 месеца. Лажно оперисана група (н=8) је орално лечена Х2О.

Последњег дана студије, животиње су измерене и жртвоване, а узорци крви су прикупљени истовремено. Бутне кости су сециране и одстрањене од меког ткива за мерење биомеханичког испитивања.

Сви експерименти су спроведени у складу са истраживачким протоколима које је успоставио кинески комитет за негу животиња.

2.4. Боне Денситометрија

Минерални садржај феморалне кости (БМЦ) и минерална густина костију (БМД) одређени су коришћењем Хологиц КДР{{0}}В ДКСА. Инструмент је прилагођен за режим ултра високе резолуције са размаком линија од 0.0254 цм, резолуцијом од 0,0127 цм и колиматором пречника 0,9 цм. Кости су стављене у петријеву посуду. Да би се симулирала густина меког ткива која окружује кости, вода из славине је сипана око костију да би се постигла дубина од 1 цм. Резултати су дати за БМЦ и за мерену површину. БМД ове области се израчунава као БМЦ подељен са површином. Поред резултата за укупну бутну кост, дистални и средњи део бутне кости анализирани су као подрегије [17].

2.5. Биомеханичко испитивање костију

Кости бутне кости су држане на 4 степена до утврђивања чврстоће на ломљење помоћу 5-кН Флекуре Фиктуре, конфигурисане за тестове савијања у три тачке и причвршћене на Инстрон универзалну машину за тестирање модел 4502 опремљену са 10- кН ћелија за оптерећење (Инстрон, Кантон, МА, САД), као што је претходно описано [18]. Брзина укрштене главе била је 50 мм/мин, а брзина узорковања података 10 узорака/с. Максимално оптерећење, напон при максималном оптерећењу, оптерећење при квару и напон при квару одређени су у бутним костима коришћењем софтвера Серије ИКС, в 8.08.{11}} (Инстрон).

2.6. Биохемијска анализа

Нивои Ца, Зн и Цу у крви су мерени атомском апсорпционом спектрофотометријом.

На основу методе Кинга и Армстронга [19], активност алкалне фосфатазе (АЛП) је испитивана коришћењем динатријум фенил фосфата као супстрата. Развијена боја је очитана на 510 нм у УВ-вис спектрофотометру након 10 мин. Активности АЛП-а су изражене као ИУ/Л.

Концентрација малондиалхехихе (МДА) у крви одређена је методом коју су описали Јаин ет ал. [20], засновано на ТБА реактивности. Укратко, 0.2 мЛ пелета еритроцита или супернатанта добијених из ткива, 0.8 мЛ фосфатног пуфера (пХ 7,4), 0.025 мЛ БХТ и { {19}}.5 мЛ 30% ТЦА је додато у епрувете и помешано. После 2 х инкубације на -20 степени, смеша је центрифугирана (4000 × г) 15 мин. Након тога, 1 мЛ супернатанта је узет и додат у сваку епрувету, а затим 0,075 мЛ 0,1 М ЕДТА и

0. Додато је 25 мЛ 1% ТБА. Ове епрувете са тефлоном обложеним поклопцима на навој су инкубиране на 90 степени у воденом купатилу 15 минута и охлађене на собну температуру. Оптичка густина је мерена на 532 за концентрацију МДА у крви.

Активност глутатион пероксидазе (ГСХ-Пк) одређивана је по методи Лоренса и Бурка [21]. Мешавина за испитивање састојала се од 2.0 мЛ 75 мМ фосфатног пуфера (пХ 7.0), 50 μЛ 60 мМ глутатиона, {{15} },1 мЛ 30 јединице/мЛ глутатион редуктазе, 0.1 мЛ 15 мМ ЕДТА, 0,1 мЛ 3 мМ НАДПХ и одговарајућа количина супернатанта ткива до коначне запремине од 3,0 мЛ . Реакција је започета додавањем 0,1 мЛ 7,5 мМ Х2О2. Брзина промене апсорпције током конверзије НАДПХ у НАДП плус је забележена спектрофотометријски на 340 нм током 3 мин. Активност ГСХ-Пк за ткива изражена је као μмол НАДПХ оксидованог у НАДП плус мин-1 мг-1 протеин.

У крви је одређена активност супероксид дисмутазе (СОД) према методи Сун ет ал. [22]. Принцип методе је заснован на инхибицији редукције нитроплавог тетразолијума (НБТ) коришћењем система ксантин-ксантин оксидазе као генератора супероксида. Активност је процењена у супернатантима 10000 г метанол/хлороформ (5/3, в/в) екстракта хомогената ткива (10 процената). Једна јединица СОД је дефинисана као количина ензима која узрокује 50 посто инхибиције у стопи смањења НБТ.

Активност каталазе (ЦАТ) је мерена коришћењем Абеијеве [23] методе. Серум је додат у кивету која садржи 2,89 мЛ 50 ммол/Л фосфатног пуфера (пХ 7.0). Реакција је започета додавањем 0.1 мЛ свеже припремљене 30 ммол/Л Х2О2 да би се добила коначна запремина од 3,0 мЛ на 25 степени. Брзина разлагања Х2О2 је мерена на 240 нм током 5 минута на спектрофотометру. Једна јединица (У) ЦАТ је дефинисана као количина ензима потребна за разлагање 1 нмол Х2О2 у минути, на 25 степени и пХ 7,8.

2.7. Статистичка анализа

Експериментални резултати су изражени као средња вредност ± СД за осам животиња у свакој групи. Биохемијски параметри су статистички анализирани коришћењем једносмерне анализе варијансе АНОВА, након чега је уследио Дуннеттов тест вишеструког поређења (ДМЦТ). П-вредност<0.05 was="" considered="" statistically="">

3. Резултати

Две животиње су истекле током студије. Сходно томе, бројеви за групе на крају студије су били: 8 у лажној контроли; 7 у групи ОВКС; 7 у групи која је примала ЦХЕ (100 мг кг-1 дневно), и 8 у групи која је примала ЦХЕ (200 мг кг-1 дневно). Два дана након операције, унос хране и воде код пацова био је нешто мањи него пре операције. Ниједна животиња није патила од инфекције и анабиозе. Нису примећени клинички евидентни нежељени ефекти код пацова.

Пре операције није било значајне (п > {{0}}.01) разлике у телесној тежини пацова између група. Телесна тежина групе ОВКС била је значајно (п < 0.01)="" нижа="" од="" оне="" лажне="" групе="" (табела="" 1).="" примена="" екстракта="" цистанцхес="" херба="" у="" дози="" од="" 100="" и="" 200="" мг/кг="" дневно="" значајно="" је="" (п="">< 0,05)="" повећала="" телесну="" тежину="" пацова="" у="" групи="" третираној="" цхе="" (100="" и="" 200="" мг/кг="" дневно).="" подаци="" добијени="" од="" животиња="" су="" показали="" да="" постоје="" статистички="" значајне="" разлике="" између="" бмд="" и="" бмц="" групе="" овкс="" и="" лажне="" контроле="" (п="">< 0,01).="" као="" што="" се="" и="" очекивало,="" примена="" екстракта="" цистанцхес="" херба="" у="" дози="" од="" 200="" мг/кг="" довела="" је="" до="" значајног="" повећања="" бмд="" и="" бмц="" групе="" третиране="" цхе="" (п="">< 0,05;="" п=""><>

4. Дискусија

Остеопороза је један од најчешћих поремећаја повезаних са недостатком естрогена и старењем. Менопауза доводи до повећаног коштаног промета, неравнотеже између формирања костију и ресорпције костију и нето губитка кости. Губитак коштане масе узрокован недостатком естрогена првенствено је последица повећања остеокластичне ресорпције кости и код људи и код експерименталних животиња [24].

Иако остеопороза погађа и старије мушкарце и жене, жене у постменопаузи су примарни фокус остеопорозе [25,26]. Драматични недостатак женских хормона је најважнији фактор за остеопорозу жена у постменопаузи. ОВКС модел пацова се најчешће користи у истраживањима постменопаузалне остеопорозе [27,28], у којој овариектомија доводи до вишка ресорпције кости у односу на формирање кости у почетку и узрокује губитак кости. Операција ОВКС изазива значајно повећање телесне тежине што би могло бити путоказ за процену успеха операције [29]. На крају ове студије, телесна тежина групе ОВКС је значајно смањена у поређењу са лажном групом, а третман са екстрактом Цистанцхес Херба у потпуности је спречио ово смањење. Претпостављамо да је ОВКС изазвао тешку физиолошку нелагодност која је утицала на унос хране пацовима. Након тога, телесна тежина групе ОВКС је значајно смањена.

Минерална густина костију је описана као само сурогат мера чврстоће кости [30]; међутим, микроархитектонска својства су новонастали маркер за процену правог утицаја третмана на квалитет трабекуларне кости. Иако је ниска коштана маса главни фактор ризика за прелом [31], очување трабекуларне архитектуре кости значајно доприноси јачини кости и може смањити ризик од прелома изван БМД и БМЦ, као што је показано бројним студијама које су пријавиле блиску корелацију између микроструктурних својства и биомеханичку чврстоћу костију [32,33]. У овом раду утврђено је да се БМД и БМЦ значајно разликују између лажних и оваријектомираних група. Третман екстрактом Цистанцхес Херба значајно је побољшао БМД и БМЦ код ОВКС пацова. Поред тога, примена екстракта Цистанцхес Херба и даље значајно у зависности од дозе повећава максимално оптерећење, померање при максималном оптерећењу, напон при максималном оптерећењу, оптерећење при аутоматском прекиду, померање при аутоматском прекиду и стрес код група које су третиране ЦХЕ аутоматским пробијањем. у поређењу са ОВКС групом. Ови резултати су показали да су бутне кости пацова храњених екстрактом Цистанцхес Херба имале веће оптерећење при отказивању и самим тим могле бити отпорније на стресне фрактуре. Поред тога, пацови у групи ОВКС имали су више нивое Ца, Зн и Цу у крви од оних у лажној групи. Примена екстракта Цистанцхес Херба смањила је нивое Ца, Зн и Цу у крви код ОВКС пацова.

Идеја да је оксидативни статус важан код остеопорозе је у складу са снажном епидемиолошком везом између остеопорозе и атеросклерозе, болести у којој оксидативни стрес игра главну улогу. Штавише, недавно је примећено да код жена постоји повезаност између оксидативног стреса (мереног биомаркером оксидативног стреса, 8-исо-ПГФ2-) [34], нивоа антиоксиданата [35] и Коштана густина. Клиничке студије које су испитивале однос између исхране и/или суплементације аскорбата и коштане масе код људи такође сугеришу повезаност са повећаном коштаном масом [36].

Пошто МДА има високу реактивност према амино групама, он инхибира синтезу нуклеинских киселина и протеина и такође деактивира ензиме [37,38]. Дакле, смањење антиоксидативних ензима бутне кости уочено након ОВКС може бити последица повећане пероксидације липида. Антиоксидативни ензими су укључени у систем одбране од оштећења ткива или ћелија посредованих слободним радикалима. Они метаболишу или слободне радикале или интермедијере реактивног кисеоника у нерадикалне производе. Ови ензими укључују породицу ензима зависних од глутатиона [39]. У овој студији извештавамо о значајном смањењу нивоа антиоксидативних ензима, тј. СОД, ГСХ-Пк, ЦАТ у крви пацова са овариектомијом. Ови налази сугеришу да је недостатак хормона јајника у корелацији са неуспехом у борби против оксидативног стреса. Примена екстракта Цистанцхес Херба значајно повећава активност СОД, ГСХ-Пк и ЦАТ у крви у ОВКС пацовима у зависности од дозе. Чини се да ови резултати указују на бољи заштитни ефекат екстракта Цистанцхес Херба против оксидативног стреса изазваног током ОВКС.

Укратко, екстракт Цистанцхес Херба је ефикасан у спречавању губитка коштане масе узроковане недостатком хормона јајника, што се види из БМД бутне кости, вредности БМЦ-а и нивоа Ца, Зн и Цу у крви. Како је остеопороза повезана са оксидативним стресом, студије ове врсте потврђују важност терапијских вредности антиоксиданата. Претпостављамо да екстракт Цистанцхес Херба побољшава квалитет костију вероватно делимично кроз повећање активности антиоксидативних ензима ОВКС пацова и смањење минералних елемената костију.

Екстракт Цистанцхес Херба: спречава губитак костију

Референце

1. Цаналис, Е.; Гиустина, А.; Билезикиан, ЈП Механизми анаболичких терапија за остеопорозу. Н. Енгл. Ј. Мед. 2007, 357, 905–916.

2. Хеанеи, РП; Рецкер, РР; Савилле, ПД Менопаузалне промене у ремоделирању костију. Ј. Лаб. Цлин. Мед. 1978, 92, 964–970.

3. МцНамара, ЛМ; Едервеен, АГХ; Лионс, ЦГ; Прице, Ц.; Сцхаффер, МБ; Веинанс, Х.; Прендергаст, ПЈ Снага спужвастог коштаног трабекуларног ткива код нормалних, овариектомираних и пацова третираних лековима током старења. Кост 2006, 39, 392–400.

4. Цомпстон, ЈЕ Хормонска супституциона терапија. Цлин. Реуматол. 1997, 11, 583–596.

5. Меинер, СЕ. Остеопороза у ширењу пејзажа: могућности лечења данас. Адв. Нурсе Працт.1999, 7, 26–31.

6. Аубин, ЈЕ; Боннелие, Е. Остеопротегерин, анд итс лиганд: Нова парадигма за регулацију остеокластогенезе и ресорпције костију. Остеопорос. Инт. 2000, 11, 905–913.

7. Роодман, ГД Напредак у биологији костију: остеокласт. Ендоцр. Рев. 1996, 17, 308–332.

8. Кестен, ЦХ, ИИИ. Терапија лековима: калцитонин, бисфосфонати и анаболички стероиди. У остеопорози: етиологија, дијагноза и управљање; Риггс, БЛ, Мелтон, Љ, ИИИ, ур.; Липпинкот-Равен: Филаделфија, Пенсилванија, САД, 1995.

9. Куан, К.-М.; Ву, В.; Ли, И.-Кс.; Цаи, К.-Р. Варијације у садржају икарина и флавоноида у врстама Барренворт. Ј. Мед. Плантс Рес. 2010, 4, 1176–1181.

10. Ду, КСГ; Пан, ХЗ; Зханг, ЦИ; Зханг, ХИ; Лиу, ХМ; Цхен, ЗИ; Зенг, КСИ Зингибер оффицинале екстракт модулира имуносупресију изазвану г-зрацима код мишева. Ј. Мед. Плантс Рес. 2010, 4, 1647–1655.

11. Пасцхалис, ЕП; Беттс, Ф.; ДиЦарло, Е.; Менделсохн, Р.; Боскеи, АЛ ФТИР микроспектроскопска анализа биопсија хуманог илијачног гребена из нетретиране остеопоротичне кости. Цалциф. Тиссуе Инт. 1997, 61, 487–492.

12. Мотоие, Х.; Канох, Х.; Огата, С.; Кавамуки, К.; Схикама, Х.; Фујикура, Т. Превенција губитка коштане масе бисфосфонатом ИМ175 код паса са овариектомијом са ограничењем калцијума у ​​​​дијети. Јпн. Ј. Пхармацол. 1996, 71, 239–246.

13. Лин, ЛВ; Хсиех, МТ; Тсаи, ФХ; Ванг, ВХ; Ву, ЦР Анти-ноцицептивна и антиинфламаторна активност изазвана Цистанцхе десертицола код глодара. Ј. Етхнопхармацол. 2002, 83, 177–182.

14. Ву, КСМ; Гао, КСМ; Тсим, КВ; Ту, ПФ Арабиногалактан изолован из стабљика Цистанцхе десертицола индукује пролиферацију култивисаних лимфоцита. Инт. Ј. Биол. Мацромол. 2005, 37, 278–282.

15. Зенг, ЈЦ; Фан, ИГ; Лиу, ЈР; Зенг ИР; Ии, ЦЗ; Лианг И. Експериментална студија усмерене диференцијације коштаних мезенхималних матичних ћелија (БМСЦ) до остеобласта вођена цистанцхе десертицола која садржи серум. Зхонггуо Гу Сханг 2010, 23, 606–608.

16. Цхен, З.-В.; Зху, Б.-Д.; Ксу Х.-И. Експериментална студија полисахарида цистанхе у пустињи на регулисаној хематогенези код мишева са депресијом анемије коштане сржи. Брада. Арцх. Традит. Брада. Мед. 2007, 25, 1473–1474.

17. Пракасам, Г.; Иех, ЈК; Цхен, М.-М.; Кастро-Магана, М.; Лианг, ЦТ; Алоиа, ЈФ Ефекти хормона раста и тестостерона на формирање кортикалне кости и густину костију код старијих пацова са овариектомијом. Боне 1999, 24, 491–497.

18. МцЦлунг, ЈП; Стахл, ЦХ; Марцхители, Љ; Моралес-Мартинез, Н.; Макин, КМ; Иоунг, АЈ; Сцримгеоур, АГ Ефекти дијететске фитазе на повећање телесне тежине, телесну композицију и биомеханику костију код пацова који су се хранили исхраном са ниским садржајем цинка. Ј. Нутр. Биоцхем. 2006, 170, 190–196.

19. Кинг, ЕЈ; Армстронг, АР Погодан метод за одређивање активности серума и жучне фосфатазе. Моћи. Мед. доц. Ј. 1934, 31, 376–381.

20. Јаин, СК; МцВие, Р.; Дуетт, Ј.; Хербст, ЈЈ Пероксидација липида мембране еритроцита и гликозиловани хемоглобин код дијабетеса. Диабетес 1989, 38, 1539–1543.

21. Лавренце, РА; Бурк, РФ активност глутатион пероксидазе у јетри пацова са недостатком селена. Биоцхем. Биопхис. Рес. Цоммун. 1976, 71, 952–958.

22. Сун, И.; Оберлеи, ЛВ; Иинг, Л. Једноставна метода за клиничко испитивање супероксид дисмутазе. Цлин. Цхем. 1988, 34, 497–500.

23. Абеи, Х. Цаталасе ин витро. Метходс Ензимол. 1988, 10, 121–126.

24. Мозаффари, З.; Азарниа, М.; Абдолхамид Ангаји, С. Евалуација токсичних ефеката воденог екстракта листа Тригонелла фоенум-граецум на развој дугог коштаног ткива у фетусу пацова. Ј. Мед. Плантс Рес. 2010, 4, 1148–1155.

25. Буенцамино, МЦА; Сикон, АЛ; Јаин, А.; Тхацкер, ХЛ. Опсервациона студија о придржавању смерница за лечење остеопеније. Ј. Здравље жена 2009, 18, 873–881.

26. Сцхмитт, МН; Сцхмитт, Ј.; Дорен, М. Улога физичке активности у превенцији остеопорозе код жена у постменопаузи — ажурирање. Матуритас 2009, 63, 34–38.

27. Леловас, ПП; Ксантхос, ТТ; Тхомас, СЕ; Текстови, ГП; Донтаси, ИА Лабораторијски пацов као животињски модел за истраживање остеопорозе. Цомп. Мед. 2008, 58, 424–430.

28. Нцанго, ДМ; Похл, ЦХ; ван Вик, ПВЈ; Коцк, ЈЛФ Нестероидни антиинфламаторни лекови (НСАИД) инхибирају раст патогена квасца. Афр. Ј. Мицробиол. Рес. 2011, 5, 1123–1125.

29. Фазлиана, М.; Назаимоон, ВМВ; Гу, ХФ; Остенсон, ЦГ Екстракт Лабисиа пумила регулише телесну тежину и адипокине код пацова са овариектомијом. Матуритас 2009, 62, 91–97.

30. Боуррин, С.; Амманн, П.; Боњоур, ЈП; Риззоли, Р. Опоравак минералне густине и чврстоће костију проксималне тибије, али не и архитектуре спужвасте кости, након дуготрајне терапије бисфосфонатима или селективним модулатором естрогенских рецептора код старијих пацова. Кост 2002, 30, 195–200.

31. Борах, Б.; Дуфресне, ТЕ; Цхмиелевски, ПА; Гросс, ГЈ; Пренгер, МЦ; Пхиппс, РЈ Риседронат чува трабекуларну архитектуру и повећава чврстоћу костију у пршљенима мини свиња са оваријектомијом, мерено тродимензионалном микрокомпјутерском томографијом. Ј. Боне Минер. Рес. 2002, 17, 1139–1147.

32. Муллер, Р.; Ханнан, М.; Смитх, СИ; Баусс, Ф. Интермитентни ибандронат чува квалитет костију и чврстоћу костију у лумбалној кичми после 16 месеци лечења код мајмуна циномолгуса са овариектомијом. Ј. Боне Минер. Рес. 2004, 19, 1787–1796.

33. Лане, НЕ; Кумер, ЈЛ; Мајумдар, С.; Кхан, М.; Лотз, Ј.; Стевенс, РЕ; Клеин, Р.; Пхелпс, КВ Ефекти синтетичких коњугованих естрогена, а (Ценестин) на структуру и снагу трабекуларне кости у моделу пацова са овариектомијом. Остеопоросис Инт. 2002, 13, 816–823.

34. Басу, С.; Мицхаелссон, К.; Олофссон, Х.; Јоханссон, С.; Мелхус, Х. Повезаност између оксидативног стреса и минералне густине костију. Биоцхем. Биопхис. Рес. Цоммун. 2001, 288, 275–279.

35. Маггио, Д.; Барабани, М.; Пиерандреи, М.; Кристина Полидори, М.; Цатани, М.; Мецоцци, П.; Сенин, У.; Пацифици, Р.; Цхерубини, А. Изражено смањење антиоксиданса у плазми код старијих жена са остеопорозом: Резултати студије пресека. Ј. Цлин. Ендоцринол. Метаб. 2003, 88, 1523–1527.

36. Мортон, ДЈ; Барет-Цоннор, ЕЛ; Сцхнеидер, ДЛ употреба додатка витамина Ц и минерална густина костију код жена у постменопаузи. Ј. Боне Минер. Рес. 2001, 16, 135–140.

37. Бирд, РП; Драпер, ХХ Ефекат малоналдехида и ацеталдехида на култивисане ћелије сисара: Морфологија раста и синтеза макромолекула. Ј. Енвирон. Здравље 1980, 6, 811–823.

38. Абделхалим, МАК Потенцијални утицај оксидативног стреса изазваног исхраном високог холестерола на састав и својства црвених крвних зрнаца код зечева. Афр. Ј. Мицробиол. Рес. 2010, 4, 836–843.

39. Цхаудиере, Ј.; Феррари-Иллиоу, Р. Интрацелуларни антиоксиданси од хемијских до биохемијских механизама. Фоод Цхем. Токицол. 1999, 37, 949–962.