Утицај статуса АБХ-секретара донатора и примаоца на трансплантацију бубрега живог донора некомпатибилног са АБО

За више информација. контактtina.xiang@wecistanche.com

Увод: АБО антигени крвне групе унутар трансплантата су континуирано изложени анти-А Б антителима у серуму прималаца након АБО-инкомпатибилног (АБОи)трансплантација бубрегаи кључни су за одбацивање посредовано антителом. Неки појединци луче растворљиве антигене крвне групе у телесне течности. У овој студији смо истраживали утицај статуса секретора донора и примаоца на исход АБОи трансплантације бубрега.

Методе: Подаци о укупно 32 пацијента са АБОи трансплантацијом бубрега од живог донора су ретроспективно прикупљени између 2014. и 2020. године у болници Западне Кине. Генотип и фенотип и донора и примаоца су испитани и процењени уз промене титра анти-А/Б после трансплантације, функцију графта и одбацивање.

Резултати: Од 32 примаоца и 32 давалаца, 23 (71,9 одсто) примаоца и 27 (84,4 одсто) донора имало је секреторне генотипове, док 9 (28,1 одсто) прималаца и 5 (15,6 одсто) донора није. Анти-АБ титри након АБОи трансплантације бубрега нису били значајно под утицајем секреторног статуса ни донора ни примаоца. Нивои серумског креатинина (Сцр) након трансплантације и процењена брзина гломеруларне филтрације (еГФР) били су бољи код примаоца са слабим или несекреторним 30. даном (Сцр П= 0.047, еГФР П= 0). 008), 90. дан (Сцр П= 0.010, еГФР П=0.005) и 9. месец (еГФР П=0.008), а примаоци од донатора секретора имали су нижу учесталост одбацивања графта у првој години након АБОи трансплантације (П=0.004).

Закључци: Фенотип слабог секреторног статуса је пронађен код оба генотипа, односно код особа које су лучиле растворљиве антигене као и код оних које то нису. Статус АБХ-секретара примаоца може утицати на рану функцију бубрега након трансплантације, а статус АБХ-секретара даваоца може утицати на учесталост одбацивања графта.

Кључне речи: трансплантација бубрега, АБО систем крвних група, некомпатибилност крвних група, функција трансплантата, акомодација

Кликните да сазнате предности екстракта цистанцхе тубулоса и цистанцхе за продају

Цистанцхе тубулосаје уобичајен кинески медицински материјал у нашим животима, познат као пустињски гинсенг, и има веома важну тоничну вредност за тело. Поред своје лековите вредности, Цистанцхе је такође веома укусан састојак. Дуготрајна употреба не само да може ефикасно повећати отпорност организма иимунитет, али и добро утиче на окрепљење бубрега и јачање јанга, што може побољшати сексуални учинак. Тхеполисахаридисадржан у Цистанцхеу може повећати пролиферацију ћелија, ефикасно продужити животни век и смањити могућност смрти. Због тога узимање Цистанцхе Цистанцхеа може веома добро побољшати имунолошку функцију, смањити могућност оболијевања, а такође и продужити живот.

УВОД

Трансплантација бубрега од живих донора донекле је решила проблем недостатка органа(1,2). Међутим, отприлике једна трећина потенцијалних живих давалаца и прималаца су АБО-инкомпатибилни (АБОи)(3). АБОи трансплантација бубрега је алтернатива у случајевима када нема доступних АБО-компатибилних (АБОц) донора. Почетни развој АБОи трансплантације бубрега ометала је висока стопа одбацивања посредованог антителима (АМР) након трансплантације(4). Тренутно се АБОи више не сматра контраиндикацијом за трансплантацију бубрега због протокола предкондиционирања за уклањање анти-донорских АБО антитела(5). Дугорочни резултати показују исту стопу преживљавања и функцију органа између АБОи и АБОц трансплантације бубрега (6).

Да би се спречила АМР, већ постојећи титри анти-А/Б прималаца морају бити сведени на безбедан опсег (нпр. мањи или једнак 1:16 у већини центара за трансплантацију) пре АБОи трансплантације (7-9). Две недеље након АБОи трансплантације бубрега, упркос присуству А/Б антигена на графту и постојању одговарајућих антитела у крви примаоца, није било реакције АБО антиген-антитело и АБОи алографт је функционисао нормално. Ова толеранција је позната као акомодација(10). Међутим, када су титри анти-А/Б били у релативно безбедном опсегу на дан трансплантације, неки графтови и даље нису успели, док су други преживели АБОи трансплантацију; стога, основни механизам треба да се разјасни (1л).

Код АБОи трансплантације бубрега, антигени А и Б су углавном присутни у васкуларном ендотелу, дисталним увијеним тубулима и сабирним каналима бубрега донатора. -галактозид -1,2-фукозилтрансфераза, кодирана геном ФУТ2, је ензим потребан за последњи корак у путу синтезе растворљивих А и Б антигена (12, 13). Особе са ФУТ2 су способне да луче растворљиве антигене крвне групе АБХ у телесне течности, укључујући пљувачку (највише), урин, сузе, желудачни сок, жуч, амнионску течност, серум, сперму, зној и мајчино млеко (14). За примаоце чије су крвне групе крвне групе О, Х антигени се излучују у телесну течност уместо антигена А или Б, који се могу открити у телесним течностима особа са крвним групама А и Б, респективно. Након АБОи трансплантације бубрега, бубрежни трансплантати могу да луче растворљиве А/Б/Х антигене у крв примаоца у складу са секреторним статусом донора(15). Међутим, утицај статуса секреције донора/примаоца на смештај примаоца остаје контроверзан(16, 17). У овој студији смо истраживали корелацију између статуса секреције донатора/прималаца и прогнозе АБОи трансплантације.

МЕТОДЕ

Студи Популатион

Пацијенти који су подвргнути АБОи трансплантацији бубрега у периоду од септембра 2014. до августа 2020. године у нашој установи добровољно су учествовали у овој студији. И даваоци и примаоци су тестирани на генотипове и фенотипове секреторног статуса. Ретроспективно смо прикупили и анализирали клиничке податке укључених парова донор-прималац. Сваку процедуру трансплантације бубрега одобрили су институционални одбор за преглед болнице Западна Кина и Здравствена комисија провинције Сечуан(18). Примаоци са анти-ХЛА антителима (ДСА) пре трансплантације били су искључени из студије. Протокол студије је одобрио локални етички комитет (бр. 2019СХЕН418).

Мера за генотип и фенотип статуса секретара

Из сваког пара даваоца и примаоца узета је периферна крв пре трансплантације бубрега. Серум је затим одвојен и коришћен у лабораторијским тестовима за процену статуса секретора. Генотипови донора/прималаца су одређени коришћењем директног секвенцирања заснованог на ПЦР-у. Други егзон ФУТ2, који кодира протеин, амплификован је ПЦР-ом коришћењем прајмера за амплификацију ФУТ2-Ф(5'-АГЦГЦЦЦЦГГГЦЦТ ЦЦАТЦТЦЦ-3') и ФУТ2-Р(5' -ГГААЦЦАТГТГЦТТ ЦТЦАТГЦЦЦГ-3'). Коначна запремина ПЦР смеше била је 20 ул, која је садржала 10 ул ГоТакГреенМастерМик-а (Промега, САД), 6,8 ул воде без нуклеазе и 2 ул узорка ДНК (приближно 50-100 нг ). Коначна концентрација прајмера била је 0,3 умол/Л. Реакциона смеша је подвргнута почетној денатурацији на 94 степена током 5 минута, након чега су уследила 32 циклуса амплификације (94 степена за 30 с, 59 степени Ц за 30 с, 72 степена за 90 с). Генотипови ФУТ2 су затим одређени двосмерном реакцијом секвенцирања на секвенцеру гена АБИ 3130 са комплетом за секвенцирање БигДие терминатор в3.1 (АБИ, САД). Коришћени прајмери ​​за секвенцирање су били ФУТ2-Ф и ФУТ2-Р, а метода етанол/натријум ацетат је коришћена за пречишћавање појачаних производа реакције секвенцирања.

Статус секретора фенотипа одређиван је применом Винеровог теста аглутинације (19). Укупно 5 до 10 мл пљувачке сакупљено је од даваоца/примаоца и похрањено у стерилну епрувету. Након тога, пљувачка је стављена у кључало водено купатило на 10 минута, а затим екстрахована у центрифуги на 2500 рпм током 10 минута. Следећи узорци су додати у четири различите епрувете: једна кап пљувачке и једна кап анти-А серума су додате у прву епрувету, једна кап пљувачке и једна кап анти-Б серума су додане у другу епрувету, а једна кап кап нормалног физиолошког раствора и једна кап анти-А серума додане су у трећу епрувету, а једна кап нормалног физиолошког раствора и једна кап анти-Б серума додане су у четврту епрувету. После 20 минута на собној температури (16-20 степен), кап 5% суспензије А еритроцита је додата у прву и трећу епрувету, а кап од 5% суспензије Беритроцита је додата у другу и четврту епрувету. После инкубације од 20 минута на собној температури (16-20 степен), све епрувете су прегледане на присуство или одсуство хемаглутинације. Одсуство аглутинације у првој и другој епрувети указује на фенотип секретора. Иста снага аглутинације између прве две епрувете и последње две епрувете означава несекреторни фенотип, док се изразито слабија аглутинација у прве две епрувете сматра слабим секреторним фенотипом.

Имуносупресија и принципи предкондиционирања

Трострука орална имуносупресивна терапија укључујући такролимус (Тац; 3 мг/дан), микофенолат мофетил (ММФ; 1500 мг/дан) или ентерички обложен микофенолат натријум (ЕЦ-МПС; 1080 мг/дан),

и преднизон (Пред; 5 мг/дан) је почео 2 до 4 недеље пре АБОи трансплантације. Према уоченом имунолошком ризику, који зависи од панел реактивних антитела (ПРА), базиликсимаб (20 мг на дан 0 и 4) или анти-тимоцитни глобулин (АТГ; 1 мг/кг на дане Коришћени су 0 до 3 или 0 до 4). Протоколи предкондиционирања који се користе за трансплантацију бубрега од живог донора АБОи су индивидуализовани према почетном нивоу антитела крвне групе. Примаоци чији су почетни титри антитела за крвну групу (ИгГ и ИгМ) били мањи од 1:8 претходно су третирани само имуносупресивима. Примаоци чији је почетни титар антитела за крвну групу био једнак 1:16 примали су оралне имуносупресиве и били подвргнути плазмаферези размене/двоструке филтрације (ПЕ/ДФПП). Примаоци са почетним титаром антитела крвне групе већим или једнаким 1:32 примили су оралне имуносупресиве, интравенски ритуксимаб и ПЕ/ДФПП да би се осигурало да је титар АБОи на дан операције био мањи или једнак 1:8. Орални Тац и Пред су прекинути на дан трансплантације, а доза ММФ је повећана на 2000 мг/дан (ММФ) или 1440 мг/дан (ЕЦ-МПС). Интравенски метилпреднизолон је даван интраоперативно у дози од 500 мг и 200 мг/дан 1. до 3. дана након трансплантације, а затим орални Пред (60 мг/дан, смањен на 5 мг/дан у року од 2 недеље). Тац је поново покренут другог дана након трансплантације. Циљани најнижи ниво Тац је био 5 до 10 нг/мл током прва 3 месеца, 4 до 8 нг/мл током 4. до 12. месеца и 4 до 6 нг/мл после тога.

Дефиниција клиничких параметара

Почетни нивои титра анти-А/Б антитела су дефинисани као титар анти-А/Б антитела прималаца пре било каквог имуномодулаторног третмана. Титар анти-А/Б антитела пре трансплантације је дефинисан као ниво титра анти-А/Б антитела непосредно пре трансплантације бубрега. Титри након трансплантације су праћени 1, 3, 7, 14. дана, као и у месецима 1, 3, 6, 9, 12, 18 и 24 након трансплантације. Користили смо технику гел картице током периода студије да бисмо измерили анти- титар ИгМ и ИгГ донатора.

Да бисмо истражили флуктуацију антитела крвне групе након алогене АБОи трансплантације бубрега, фокусирали смо се на континуирани ниво и прву промену титра анти-А/Б антитела. Дефиниција елевације титра је била први пут да је један или више лог2 серумских титара нивоа антитела у крвној групи промовисано након трансплантације. Слично, смањење титра је дефинисано као први пут једно или више смањења титра лог2 у серуму нивоа антитела крвне групе. Утврђено је и време од дана трансплантације до подизања/смањења титра.

Бубрежна функција је мерена нивоима серумског креатинина(Сцр) и процењеном брзином гломеруларне филтрације (еГФР), према ЦКД-ЕПИ формули (20), која је мерена на дан трансплантације и 1,3,7,14 дана; и такође у месецима 1,3,6,9,12,18 и 24 након трансплантације. Сцр пре трансплантације и еГФР пре трансплантације дефинисани су као нивои Сцр и еГФР на дан трансплантације. Одбацивање графта је дефинисано као клиничка дијагноза одбацивања графта клиничким симптомима, као што су олигурија или едем, или значајно повећање Сцр за више од 50 процената у року од 3 дана, што није објашњено другим разлозима. Биопсија је затим урађена свим пацијентима са клиничком дијагнозом одбацивања графта.

Методе груписања

Због разноликости резултата са генотиповима и фенотиповима секреторног статуса, анти-А/Б титри примаоца након трансплантације ибубрежна функцијасу упоређени на основу следећих метода груписања означених И-ИВ: (а) И, примаоци са секреторима генотипа наспрам прималаца из генотипских секретора; (б) И, примаоци са секреторима фенотипа наспрам примаоца са слабим или не-секреторима фенотипа секретори;(ц)ИИИ, примаоци генотипа наспрам примаоци генотипа који нису секреторни; и (д) ИВ, примаоци фенотипа наспрам примаоца са слабим или не-секреторним фенотипом. Пошто смо открили да су две кохорте подељене методом ИИИ потпуно исте као оне подељене методом ИВ, резултати између две методе су такође били исти.

Статистичка анализа

Све анализе су обављене коришћењем софтвера Р (верзија 3.4.4). Резултати истраживања су представљени као средња вредност ± стандардна девијација (СД) или медијана (опсег). Средње вредности група нормално распоређених података упоређене су коришћењем Студентовог т-теста, док су Вилцокон тестови ранг-суме коришћени за поређење ненормално распоређених података. Даље, хи-квадрат тестови или Фишерови егзактни тестови су коришћени за упоређивање категоричких варијабли. Криве преживљавања су израчунате Каплан-Меиер анализом, а поређења између група су вршена помоћу лог-ранк теста. Статистички значај је постављен на П<>

РЕЗУЛТАТИ

Од 98 узастопних пацијената који су били подвргнути трансплантацији бубрега АБОи живог донора у болници Западне Кине, Универзитет Сичуан, Кина, од септембра 2014. до августа 2020. године, 32 пацијента и њихови одговарајући донатори су учествовали у овој студији и подвргнути су тестовима за генотип и фенотип статуса секретора пре трансплантација бубрега. Дистрибуција генотипова или фенотипова секретора је сажета у табели 1. Од 32 примаоца и 32 донатора који су испунили критеријуме за укључивање, 23 (71,9 одсто) примаоца су били секреторни генотипови, а 9 (28,1 одсто) нису, док 27 (84,4 одсто) )донори су били секреторни генотипови, а 5 (15,6 процената ) нису. Свих девет прималаца несекреторног генотипа и пет донора несекреторног генотипа показали су фенотип слабог или несекреторног, док је 49/50 особа са секреторним генотипом имало фенотип секретора (Слика 3). Међутим, један донор са генотипом секретора показао је фенотип слабог секретора.

Клиничке карактеристике 64 особе (32 примаоца и 32 донора) су представљене у табели 2. Примаоци су били претежно мушкарци (н=23,71,9 процената), а донатори су углавном жене (н=26 ,81,3 процената). Средња старост је била 50 (32-67) за донаторе и 30,5 (20-43) за примаоце. 23 (71,9 одсто) је подвргнуто трансфузији плазме. Средње време праћења у овој студији било је 331,5 (опсег,53-81л) дана. Ниједан од 32 пацијента раније није био подвргнут трансплантацији. Штавише, 5 од 32 пацијента имало је позитивну ПРА пре трансплантације и примало АТГ терапију.

Корелације између флуктуације титара анти-А/Б антитела и статуса секретора донора или примаоца приказане су у табели 3 и Додатном материјалу 1, респективно. Укупно, седам донора је подвргнуто повећању титра ИгГ антитела, а 13 донатора је подвргнуто повишењу титра ИгМ антитела након трансплантације, док је смањење титра ИгГ и ИгМ антитела након трансплантације примећено код 23 односно 22 донора. Међутим, није било значајне разлике у учесталости подизања и смањења титра. Значајна разлика у времену потребном за једно смањење титра лог2 ИгМ уочена је код прималаца између две групе донора генотипа (од секретујућих генотипских донора наспрам донора генотипа који не секретују, П=0.023). Број дана потребних за једно смањење титра лог2 ИгМ између две групе донора фенотипа (од донатора са позитивним секреторним фенотипом наспрам донора са слабим или негативним секреторним фенотипом) је представљао исти тренд, али се није статистички разликовао (п=0). 053). Међутим, дани потребни за једно повећање лог2 у ИгГ и ИгМ или смањење ИгГ нису се значајно разликовали између кохорти груписаних помоћу четири методе (Табела 3).

Слика 1 приказује промене у еГФР и Сцр након трансплантације бубрега, а „Допунски материјал 2 представља одговарајуће П вредности еГФР или Сцр између група према различитим методама груписања. Није било статистичке разлике у еГФР и Сцр пре трансплантације између различитих метода груписања Међутим, примаоци са слабим или не-секреторним статусом обично имају бољи еГФР 30. дана (П=0.008), 90. дана (П=0.005) и 9. месеца (П{{ 10}}.008) у поређењу са онима са секреторним статусом. Нижи Сцр је такође примећен 30. (П=0.047) и 90. дана (П=0.010) код прималаца са слабим Занимљиво је да су примаоци са не-секреторима имали тенденцију да троше више времена (П=0.053) да достигну нижи минимални ниво Сцр (П=0.080), али резултати нису били статистички различити (Допунски материјал 1). Штавише, примаоци фенотипских секретора прошли су краће дане да би достигли минимални ниво Сцр у поређењу са примаоцима са фенотипским слабим или не-секреторима (5 да ис у односу на 7 дана, П=0.024), као што је приказано у табели 3.

Биопсије су урађене на 5 прималаца код којих је клинички дијагностиковано одбацивање графта, а затим су 3 примаоца доказана биопсија. Међу тих 5 прималаца који су развили одбацивање, само 1 прималац је био са позитивним ПРА пре трансплантације. Одбацивање посредовано антителом (АБМР) и одбацивање посредовано Т-ћелијама (ТЦМР) примећено је код 2 и 1 примаоца, респективно. Преостала 2 пацијента су имала типичне клиничке симптоме и значајно повећање Сцр, али резултати биопсије нису показали одбацивање. Они су и даље сматрани примаоцима са клиничком дијагнозом одбацивања трансплантата, због типичних клиничких симптома који се не могу објаснити другим разлозима и чињенице да су били лечени због одбацивања пре биопсије. У табели 4 приказан је број прималаца са одбацивањем графта према различитим методама груписања, а разлике између прималаца донора секретора и прималаца несекреторних донора су биле статистички значајне (П=0.018 и П=0 .034,

Хи-квадрат тест). На слици 2 приказане су криве преживљавања одбацивања графта према различитим статусима секрета донатора и примаоца (криве преживљавања три одбацивања графта доказана биопсијом су представљене у Додатку 3). Примаоци донатора генотипа и фенотипа секретора имају статистичку тенденцију да се подвргну бољем преживљавању без одбијања. Међутим, време праћења 2 примаоца који нису имали одбацивање од донатора генотипа који нису секреторни је релативно кратко, а преживљавање од 0 процената

ДИСКУСИЈА

АБО баријера крвне групе успешно је разбијена одговарајућим протоколима десензибилизације пре трансплантације бубрега. Претходне студије из неколико центара су известиле о упоредивим укупним стопама преживљавања и преживљавању трансплантата између АБОи и АБОц трансплантације (21-23). Међутим, мало пажње је посвећено утицају статуса секретара, а претходни резултати су и даље контроверзни. У овој студији смо истраживали утицај статуса секретора донора и примаоца на исход трансплантације бубрега. АМР након трансплантације није узрокован само АБО антителима већ и антителима ХЛА класе И и ИИ. Да би се смањио утицај ХЛА антитела, примаоци са ДСА су искључени из студије. Занимљиво је да генотип и фенотип секретора нису били у потпуности конзистентни (Слика 3). Фенотип са слабим секреторима је пронађен и код секретора генотипа и код оних који се не излучују, што је уобичајено у јужноазијским људским популацијама (24). Ово је резултат слабо мутираног облика секреторне трансферазе.

Графтови од донатора са статусом секретора су способни да луче растворљиве антигене крвне групе А/Б у крв примаоца. Због тога се претпоставља да растворљиви антигени А/Б крвне групе могу да се вежу за анти-А/Б антитела примаоца и да смање титре након трансплантације, спречавајући инциденцу АМР. Поред еритроцита (црвених крвних зрнаца), антигени АБО крвне групе се такође дистрибуирају на лимфоцитима, тромбоцитима и већини епителних и ендотелних ћелија, укључујући васкуларни ендотел, дисталне увијене тубуле и сабирне канале бубрега донора(25). Сматра се да анти-А/Б титри након трансплантације, који одражавају способност везивања са антигенима на бубрегу графта, играју важну улогу у инциденци АМР(26).

Већина прималаца је подвргнута једном или више смањења титра, што имплицира добар напредак након трансплантације. Смањење титра може бити последица разблажења изазваног проширењем запремине крви после операције, неутрализацијом излученог антигена или везивањем и адсорпцијом графта (27). Повишење титра је такође нађено код неких примаоца, што је било у корелацији са повећаном стопом губитка графта(28). Међутим, повећање или смањење титра након трансплантације није било значајно повезано са секреторним статусом донора, што је било у складу са резултатима претходних студија. Штавише, Ким ет ал. открили да посттрансплантациони титар анти-А/Б антитела такође није био под утицајем секреторног статуса донора; међутим, титар ИгМ показао је брз пад код прималаца од донатора са не-секретором (17). Приметили смо сличан тренд брзог смањења ИгМ у нашој студији. Ово се може објаснити недостатком апсорпције растворљивог антигена из графта који не секретује, а затим је појачано везивање антитела и антигена у алографту. Међутим, на овај налаз може утицати учесталост провера титра ИгМ у периоду након трансплантације и захтева још једну студију са више случајева и чешћим проценама титра. Поред тога, смањење ИгГ се није значајно разликовало између секретирајућих и не-секретирајућих донорских група. Ово може бити због преовлађујућег типа ИгМ у анти-А/Б антителима, па стога на ИгМ може бити већи утицај апсорпције растворљивог АБХ (29).

У овој студији смо открили да примаоци донатора секретора имају тенденцију бољег функционисања бубрега и мању инциденцу одбацивања трансплантата, али резултати у погледу побољшања бубрежне функције између ове две групе нису били статистички значајни. Што се тиче ове тачке, резултати претходних студија су контрадикторни. Дреклер и сарадници верују да су пацијенти који су добили трансплантацију бубрега од донора секретора доживели значајно побољшање у раној бубрежној функцији након трансплантације, са значајним утицајем на хуморално одбацивање(16). Међутим, Ким и др. открили да растворљиви АБХ антигени произведени графтом од секреторних донора не утичу на функцију бубрега и одбацивање графта код примаоца(17). По нашем мишљењу, иако посттрансплантациони анти-А/Б титри нису под утицајем секреторног статуса донора, растворљиви антигени излучени трансплантатом донора секретора могу континуирано да везују циркулишућа антитела крвне групе, имају заштитни утицај на функцију бубрега и спречавају одбацивање трансплантата.

Поред секреторног статуса донора, истраживали смо корелацију између статуса секретора примаоца и прогнозе након трансплантације. Колико нам је познато, ово је прва студија која је проценила утицај статуса секретора примаоца на исход АБОи трансплантације бубрега. Посттрансплантацијски анти-А/Б титри нису били под утицајем статуса секретора примаоца, слично статусу секретора донора. Међутим, открили смо да је на функцију бубрега значајно утицао секреторни статус примаоца. Ови примаоци са слабим или несекреторним путем имали су бољу бубрежну функцију и тренд ка нижој стопи одбацивања трансплантата. Затим смо претпоставили да би секреторни статус примаоца могао некако довести до промене анти-А/Б антитела и утицати на функцију трансплантата. Све у свему, тачни механизми помоћу којих примаоци несекреторног фенотипа доживљавају бољу бубрежну функцију остају непознати и захтевају даља истраживања.

Главна ограничења наше студије укључују њен ретроспективни дизајн и релативно кратко време праћења. Поред тога, захваљујући релативно недавном развоју АБОи технологије трансплантације бубрега, наша студија је била ограничена бројем узорака. Технички проблеми мерења титра такође могу утицати на резултате. Да бисмо минимизирали ову пристрасност, изабрали смо релативно прецизну технику гел картице, а не конвенционалну методу цеви. Сви ови фактори могу утицати на запажања и накнадне закључке; стога би требало прикупити више података о пацијентима са дужим периодима праћења који би били од велике вредности.

У закључку, генотип и фенотип утврђеног секреторног статуса не одговарају у потпуности један другом. Титар анти-А/Б након АБОи трансплантације бубрега није био под утицајем секреторног статуса донора и примаоца. Међутим, статус АБХ-секретара примаоца може утицати на рану функцију бубрега након трансплантације, а статус АБХ-секретара даваоца може утицати на учесталост одбацивања графта.