Ефекти Цистанцхе Десертицола Десертицола и Каемпферола на развој ћелија гранулозе у пилећим претходно агрегираним фоликулима

Апстрактан:Да би се истражили ефекти Цистанцхе десертицола и Каемпферола на развој фоликула пилића, у експерименту су анализирани ефекти различитих концентрација Цистанцхе десертицола и Каемпферола на активност пилећих претходно класификованих гранулоза ћелија МТТ методом и одређена је оптимална концентрација. Флуоресцентни квантитативни ПЦР у реалном времену је коришћен за откривање ефеката Цистанцхе десертицола и Каемпферола на нуклеарни антиген ћелије пролиферације (ПЦНА), рецептор фоликулостимулишућег хормона (ФСХР) и рецептор естрогена пилећих претходно класификованих гранулоза ћелија (ЕР) утицај експресије мРНК;Ефекти Цистанцхе десертицола и каемпферола на развој фоликула јајника анализирани су ин витро културом ткива јајника.Резултати су показали да и Цистанцхе десертицола и Каемпферол у концентрацији 1 × Ат 10-4 мол/Л , може значајно да промовише пролиферацију ћелија гранулозе, док такође промовише ПЦНА, ФСХР и ЕР експресију мРНА у ћелијама гранулозе (П<0.01); Cistanche deserticola and Kaempferol significantly increased the number of follicles in ovarian tissue, and granulosa cells proliferated from monolayer to multilayer. Studies have shown that Cistanche deserticola and Kaempferol can promote the proliferation of aggregate granulosa cells, and promote FSHR and ER α MRNA expression promoting the development of pre-grade follicles towards grade follicles.

Кључне речи: Цистанцхе десертицола; Каемпферол; Пилетина; Зрнасте ћелије пре разреда; Ткиво јајника

Кинеска трава цистанцхе

За велике фарме кока носиља, ниво производње јаја утиче на економску корист, а развој фоликула јајника директно утиче на производне перформансе кокошака носиља. Фоликули су подељени у три стадијума према свом функционалном статусу: примарни фоликули, секундарни фоликули и зрели фоликули [1]. Сваког дана се бира фоликул да се развије до зрелости, а јаје се избацује у јајовод, пролазећи кроз левак, проширење, истхмус, материцу и вагину, формирајући структуру налик јајету [2-3]. Покретање примитивних фоликула повезано је са развојем фоликуларних гранулозних ћелија. Фоликул стимулишући хормон (ФСХ) се везује за рецептор фоликулостимулирајућег хормона (ФСХР) на ћелијама гранулозе, изазивајући стварање рецептора лутеинизирајућег хормона (ЛХР) и стимулишући синтезу стероидних хормона [4-6]. ФСХ и лутеинизирајући хормон (ЛХ) синергистички делују на ћелије гранулозе како би промовисали развој и сазревање фоликула, учествујући у селекцији доминантних фоликула. Истраживања су открила да иако су примордијални фоликули без гранулоза ћелија активирани, на крају сви развијају атрезију [7]. Током развоја фоликула, естроген може да подстакне пролиферацију ћелија гранулозе јајника, док сарађује са ФСХ и ЛХ у промовисању пролиферације и диференцијације ћелија гранулозе јајника. Када се садржај естрогена у плазми повећа, он ће се негативно вратити у хипоталамус кроз систем периферне циркулације, чиме се инхибира лучење гонадотропин-ослобађајућег хормона (ГнРХ) из хипоталамуса. ГнРХ може стимулисати аденохипофизу да синтетише и лучи ФСХ и ЛХ како би подстакао развој фоликула јајника. Када је секреција ГнРХ ниска, може инхибирати лучење ФСХ и ЛХ, што на крају доводи до инхибиције развоја фоликула [8-9].

Претходне студије су откриле да су Цистанцхе десертицола и Цусцута цхиненсис имале добар ефекат поправљања атрофичних јајовода и оштећених јајовода након опоравка, и да би могле да побољшају стопу носивости ниских кокошака носиља [10]. У сточарској производњи, примена флавоноида може значајно побољшати перформансе сточарске производње, побољшати отпорност животиња на болести и побољшати имунолошку функцију животиња.

Кинески лекови као што су гинсенг, Цистанцхе десертицола и астрагалус

Укупни флавоноиди Цистанцхе десертицола могу значајно да промовишу пролиферацију пилећих ћелија пре-граде и степена фоликуларне гранулозе ин витро, ниво транскрипције стероидогеног брзог регулаторног протеина (СтАР), ензим за цепање бочног ланца холестерола (ЦИП11А1) мРНА и секрецију прогестерона. Репрезентативна компонента укупних флавоноида Цистанцхе десертицола је Цистанцхе десертицола. Његова молекуларна тежина је мала, а предност има пролазак кроз крвно-мождану баријеру. Истовремено, има антиинфламаторно, антитуморско и естрогенско дејство [11]. Главна хемијска компонента Цусцута цхиненсис су укупни флавоноиди Цусцута цхиненсис. Тренутно су из Цусцута цхиненсис изоловани различити флавоноиди, углавном кверцетин и кемпферол, који имају високу антиоксидативну активност.

Примена екстракта флавоноида семена додера код женки пацова испољава естрогенску активност, која има одређени ефекат на унапређење функције хЦГ/ЛХ рецептора јајника; Има ефекат гонадотропина на малолетне мишеве и може да подстакне развој њиховог репродуктивног система [12-14].

У овом експерименту, одабрали смо пилеће ћелије фоликуларне гранулозе пре-граде и истражили промотивни ефекат Цистанцхе десертицола и Каемпферола на пролиферацију ћелија фоликуларне гранулозе пре-граде и сродну експресију рецептора кроз ефекат Цистанцхе десертицола и Каемпферола на развој фоликула пилића, да обезбеди теоријску референцу за истраживање и развој безбедних, ефикасних адитива за храну без остатака за побољшање производних перформанси слојева.

Ефекти Цистанцхе-тонифицирајућег бубрега

1 Материјал и методе

1.1 Материјали за испитивање

Цистанцхе десертицола (чистоћа већа или једнака 98 процената) је купљена од Схангхаи Јизхи Биоцхемицал Тецхнологи Цо., Лтд; Каемпферол (чистоћа већа или једнака 98 процената) је купљен од Схангхаи Аладдин Биоцхемицал Тецхнологи Цо., Лтд.

1.2 Главни реагенси и инструменти

Главни реагенси: колагеназа типа ИИ и ДМЕМ су купљени од Тхермо Фисхер Тецхнологи (Цхина) Цо., Лтд; ДМСО је купљен од Беијинг Солебао Тецхнологи Цо., Лтд.; М5 Супер кПЦР РТ комплет са комплетом за реверзну транскрипцију за уклањање гДНК је купљен од Беијинг Јумеи Биотецхнологи Цо., Лтд. Главни инструмент: БЦМ-1300Радни сто за пречишћавање купљен од Схангхаи Бокун Индустриал Цо., Лтд. фабрике медицинске опреме; АКСТГЛ20М центрифуга за замрзавање велике брзине је купљена од Хунан Хеки Инструмент Екуипмент Цо., Лтд.; Херацелл 150и ГП инкубатор са константном температуром је купљен од Бингсхан Сонгианг Биотецхнологи (Далиан) Цо., Лтд.; ЛигхтЦицле ® Квантитативни ПЦР инструмент за флуоресценцију типа 96 и инструмент за обележавање ензима типа ДР-200БС купљени су од Боле Лифе Медицал Продуцтс (Схангхаи) Цо., Лтд.

1.3 Изолација и екстракција ћелија гранулозе из фоликула пре класирања пилића

Одабрано је тридесет 150-дневних здравих хаилан браон кокошака носиља (обезбеђена од стране компаније Хебеи Баодинг Дингнонг), убијених пуштањем крви из каротидне артерије, а јајници су им извађени асептично (ин виво тестови истраживања на животињама су били према смерницама које је одобрио Комитет за етику животиња Пољопривредног универзитета у Хебеју). Пре-граде фоликули се могу поделити на мале беле фоликуле (СВФ,<2 mm), large white follicles (LWF, 3-5 mm), small yellow follicles (SYF, 6-8 mm), and large yellow follicles (LYF, 9-12 mm). Collect granulosa cells from pre-graded follicles with a diameter of 6-8 mm and prior stages. The grading of follicles (see Figure 1). 

Напомена: СВФ представља мале беле фоликуле, ЛВФ представља велике беле фоликуле, СИФ представља мале жуте фоликуле, ЛИФ представља велике жуте фоликуле, а Ф1, Ф2, Ф3, Ф4 и Ф5 представљају пет зрелих фоликула.

Сакупљени фоликули су три пута испрани са 75% алкохола и на крају једном испрани ПБС. Стерилна игла је коришћена за ослобађање течности жуманца у ПБС-у који садржи 3 процента пеницилина и стрептомицина, уклањање слоја мембранске ћелије и одвајање слоја грануларних ћелија. Узето је 15 мЛ ЕП епрувете да се дода слој пресечених ћелија гранулозе фоликула и додато је 4 мЛ 0.1 процента колагеназе типа ИИ. Мућкано је у шејкеру на 37 степени 3 минута. Након што је осцилација завршена, додајте једнаку количину раствора културе који садржи 0.5 процената ФБС да бисте прекинули варење. Филтрирајте помоћу сита од 200 и 400 месх. Центрифугирајте филтрат на собној температури на 1200 р/мин током 5 минута и поновите центрифугирање два пута. Одбаците супернатант, додајте медијум културе, удувајте и аспирирајте равномерно и разблажите ћелијску суспензију до 5 × 106 комада/мЛ и равномерно додати у Петријеву посуду пречника 100 мм и култивисати на 37 степени и 5 процената ЦО2 .

1.4 Ефекти Цистанцхе десертицола и Каемпферола на активност гранулоза ћелија

Грануларне ћелије су рутински култивисане у медијуму ДМЕМ који је садржао 10 процената феталног говеђег серума. Ћелије у логаритамској фази раста су узете и дигестиране са 2,5 г/Л трипсина. Ћелије су равномерно распоређене у плоче са 96 јажица. Свака плоча је подељена у 10 група са 6 поновљених рупа у свакој групи. Додајте 200 у рупе око плоче за културу μ Л ПБС служи као хидратантна пора. Концентрација Цистанцхе десертицола је подешена на 1 × 10-4 мол/Л, 1 × 10-5 мол/Л, 1 × 10-6 мол/Л, 1 × 10-7 мол/ Л, 5 × 10-8 мол/Л, 1 × 10-8 мол/Л, 5 × 10-9 мол/Л, 1 × 10-9 мол/Л, 1 × {{ 24}} мол/Л. Поставите празну контролну групу. Након ко-културе ћелија са Цистанцхе десертицола током 24 сата, додајте 10 процената у сваки бунар μ 5 мг/мЛ МТТ Л. Након даље култивације током 4 сата, додајте 150 μ Л ДМСО у сваки бунар и осцилирајте 3 минута у шејкер константне температуре на 37 степени. Измерити апсорбанцију на 450 нм. Експеримент је поновљен три пута, а процес скрининга оптималне безбедне дозе Кемпферола за ћелије гранулозе био је исти као горе.

Пустињски живи цистанцхе-Тонизујући бубрег

1.5 Ефекти Цистанцхе десертицола и Каемпферола на пролиферирајући ћелијски нуклеарни антиген, рецептор фоликулостимулирајућег хормона и рецептор естрогена у ћелијама гранулозе

Ефекат експресије мРНА примећен је у ћелијама гранулозе логаритамске фазе раста, инокулисаних у три посуде за културу са густином ћелија од 5 × 106 комада/мЛ. Петријеве посуде су подељене у празне контролне групе; Цистанцхе десертицола група, односно, након 24 сата културе ћелија, додати 1 × 10-4 мол/Л Цистанцхе десертицола; У групи Кемпферол, додајте 1 после 24 х ћелијске културе × 10-4 мол/Л Кемпферола; Естрогенска група, додајте 5 након 24 сата културе ћелија × Третирајте са 10 до 8 мол/Л естрогена. После 24 сата култивације, баците сав медијум за културу, исперите ПБС, додајте 1 мЛ ензима панкреаса за варење и након неколико минута додајте једнаку количину медијума за културу да бисте прекинули варење. Центрифугирајте суспензију ћелија на 1000 о/мин 5 минута, одбаците супернатант и додајте Тризол реагенс у кутију за лед. Затим је додат хлороформ и снажно протресен, стављен у кутију за лед на око 3 минута и центрифугиран на 4 степена на 12000 о/мин током 10 минута. Пренесите РНК у нову ЕП епрувету, додајте једнаку запремину изопропанола, нежно добро промешајте и оставите да стоји у кутији за лед 10 минута. После центрифугирања на 4 степена у трајању од 10 минута на 12 000 р/мин, одбаците супернатант и исперите талог са 80 процената етанола. Центрифугирајте на 10 000 о/мин и 4 степена 5 минута, баците етанол, осушите на ваздуху 5-10 минута и додајте ДЕПЦ воду за дување и усисавање да бисте растворили талог. Измерите концентрацију РНК помоћу УВ спектрофотометра.

Користите М5 Супер плус кПЦР РТ комплет са комплетом за уклањање гДНК за реверзну транскрипцију да бисте добили цДНК. Детекција нуклеарног антигена пролиферирајуће ћелије, рецептора фоликулостимулирајућег хормона и рецептора естрогена у ћелијама гранулозе помоћу флуоресцентног квантитативног ПЦР МРНА релативног нивоа транскрипције у реалном времену. Информације о прајмеру су приказане у табели 1, а прајмере је дизајнирао и синтетизовао Схенггонг Биотецхнологи (Схангхаи) Цо., Лтд. Интерна референтна група - Ацтин, релативни ниво транскрипције мРНА за сваки ген је одређен са 2- ΔΔ Израчунато према Цт.

Табела 1 Пример Информације

1.6 Ин витро култура и морфолошко посматрање ткива јајника

Узмите ткиво јајника 30 40-дневних Хаилан браон кокошака носиља и исперите га три пута са 75% алкохола. Исеците ткиво јајника на мале комаде од 1-2 мм3 у ултра чистом столу, са стопом од 500 по бунарчићу μЛ додати у ДМЕМ и ИТС медијум (10 μ Г/мЛ инсулин, 5 μ Г/мЛ трансферин и 30 нмол/Л натријум селенит). Након 72 сата култивације у инкубатору, третирајте према ситуацији груписања. Ткиво јајника је подељено у празну контролну групу, групу Цистанцхе десертицола, групу каемпферола и групу естрогена. После 72 сата култивације, ткиво јајника је фиксирано са 4 процента формалдехида, а делови ткива су рутински припремани за посматрање под оптичким микроскопом.

1.7 Статистика и анализа

кПЦР подаци су анализирани коришћењем софтвера Биорад ЦФКС Манагер 2.{1}} и софтвера Мицрософт Екцел, а софтвер СПСС 21.0 је коришћен за једносмерну АНОВА-у. Данканов метод је коришћен за вишеструка поређења. Резултати су представљени као „средња вредност ± стандардна девијација“ и исцртани помоћу софтвера ГрапхПад Присм 5.0. П<0.05 indicates significant differences, while P<0.01 indicates extremely significant differences.

2 Резултати и анализа

2.1 Ефекти Цистанцхе десертицола и Каемпферола на пролиферацију ћелија гранулозе

На сликама 2 и 3 се може видети да и Цистанцхе десертицола и Каемпферол могу да подстичу пролиферацију ћелија гранулозе. При 1 × 10-4~1 × Унутар градијента концентрације од 10-10 мол/Л, у поређењу са слепом контролном групом, концентрација је 1 × 10-4 мол/Л, 1 × {{ 9}} мол/Л, 1 × 10-6 мол/Л, 1 × На 10-7 мол/Л, разлика је била изузетно значајна (П<0.01), with a concentration of 5 × The difference was significant at 10-8 mol/L (P<0.05).

Напомена: "* *" указује на значајну разлику у поређењу са контролном групом слепог узорка (П<0.01), and "*" indicates a significant difference compared to the blank control group (P<0.05), the same below.

Слика 2 Вредности апсорпције ћелија гранулозе изложене Цистанцхе десертицола различитим концентрацијама током 24 сата

Слика 3 Вредности апсорпције ћелија гранулозе изложене Кемферолу у различитим концентрацијама током 24 сата

2.2 Ефекти Цистанцхе десертицола и Каемпферола на пролиферирајући ћелијски нуклеарни антиген, рецептор фоликулостимулирајућег хормона и естрогенски рецептор ћелија прегранулозе пилића Утицај мРНА на релативне нивое транскрипције

Из табеле 2 се може видети да групе Цистанцхе десертицола и Каемпферол имају ефекте на пролиферирајући ћелијски нуклеарни антиген, рецептор фоликулостимулирајућег хормона и естрогенски рецептор пилећих претходно класификованих гранулоза ћелија. контролна група и група естрогена (П<0.05 or P<0.01), and the follicle-stimulating hormone receptor and estrogen receptor of chicken pre aggregate cells in the Kaempferol group α The transcription level of mRNA is the highest (P<0.01).

Табела 2 Ефекти Цистанцхе десертицола и Каемпферола на пролиферирајући ћелијски нуклеарни антиген, рецептор фоликулостимулирајућег хормона и естрогенски рецептор ћелија прегранулозе пилића Утицај иРНК на релативне нивое транскрипције

2.3 Хистолошко посматрање јајника

На слици 4 се може видети да се у поређењу са контролном групом број фоликула у ткиву јајника третираним са Цистанцхе десертицола и Каемпферолом значајно повећао, а ћелије гранулозе пролиферисале су од једнослојног до вишеслојног. У поређењу са групом естрогена, група Цистанцхе десертицола и Каемпферол група имају очигледнију способност да промовишу сазревање и развој ткива јајника, а група Цистанцхе десертицола и група Каемпферол имају очигледнији ефекат од групе Каемпферол.

3 Дискусија

3.1 Ефекат Цистанцхе десертицола и Каемпферола

Цео процес развоја фоликула прати пролиферација ћелија гранулозе, које су од великог значаја за развој фоликула. Они покрећу раст примитивних фоликула конструисањем повољног молекуларног микроокружења. Током развоја фоликула, апоптоза ћелија гранулозе игра важну улогу у регулисању раста фоликула, сазревању јајних ћелија и лучења естрогена [15-16]. Цистанцхе десертицола, кинески биљни лек, има ефекат сличан полним хормонима, који може подстаћи развој животињских фоликула и производњу сперме, подстаћи нормалан долазак еструса, побољшати функцију и активност јајника и побољшати репродуктивну функцију. Цусцута цхиненсис, као традиционална кинеска медицина која тонификује бубреге, има антиоксидативне, репродуктивне ефекте и ефекте против старења као ефикасна компонента флавоноида. Истраживања су показала да одређена доза флавоноида из Цусцута цхиненсис има пролиферативни ефекат на интерстицијске ћелије тестиса миша [17-18]. У овом експерименту, Цистанцхе десертицола и Каемпферол, као главне компоненте кинеских традиционалних лекова Цистанцхе десертицола и доддер, одабрани су да проучавају њихов ефекат на способност експресије ћелија пилића фоликуларне гранулозе и њихових повезаних рецептора и ткива јајника, како би се потврдили ефекти. Цистанцхе десертицола и Каемпферол о развоју репродуктивног система живине.

Ефекти Цистанцхе-тонифицирајућег бубрега

Кликните овде да видите производе Цистанцхе за болести бубрега

【Затражите више】 Е-пошта:cindy.xue@wecistanche.com / Вхатс Апп: 0086 18599088692 / Вецхат: 18599088692

3.2 Нуклеарни антиген у пролиферацији ћелија, рецептор фоликулостимулирајућег хормона и рецептор естрогена Улога

ПЦНА је ћелијски нуклеарни антиген који се размножава, који игра важну улогу у покретању ћелијске пролиферације и добар је показатељ ћелијске пролиферације. Због тога је повећање ПЦНА у резултатима теста потврдило да Цистанцхе десертицола и Каемпферол подстичу пролиферацију ћелија када делују на ћелије гранулозе. ФСХ је главни хормон који подстиче развој фоликула [19], а место експресије рецептора фоликулостимулирајућег хормона (ФСХР) је углавном концентрисано у јајнику и фоликулима. Главни начин на који ФСХ учествује у репродуктивним активностима кокошака је регулисање развоја фоликула. Када се секреција ФСХ повећа, то може да подстакне повећање ФСХР у гранулоза ћелијама, а комбинација ова два може индуковати синтезу ЛХР активирањем ароматазе. Пилетина може да изазове овулацију под синергистичким дејством ФСХ и ЛХ [20-22]. Пре селекције фоликула, ћелије гранулозе изражавају само базалне нивое ФСХР, који се користе за примање ФСХ сигнала и производњу ниских нивоа цикличног аденозин фосфата за одржавање ћелијске активности. Када је експресија ФСХР значајно повећана у ћелијама гранулозе фоликула пре-граде, то сугерише да ће фоликул бити изабран да постане фоликул степена [23-24]. У овој студији, у поређењу са контролном групом, експресија ФСХР мРНА у групама Цистанцхе десертицола и Каемпферол је значајно повећана, што указује да Цистанцхе десертицола и Каемпферол могу промовисати транскрипцију ФСХР мРНА, повећати секрецију ФСХ и промовисати селекцију фоликула као степена фоликула. Е2 је врста стероидног хормона који луче тека ћелије. Његова функција је да промовише сексуалну зрелост женских животиња и покаже другу сексуалну карактеристику. Под дејством ФСХ, ароматаза коју производе ћелије гранулозе јајника претвара андроген у Е2, који регулишу два естрогена рецептора (ЕР и ЕР ）). Делује на различите органе женки и игра важну улогу у репродукцији животиња, посебно у физиолошкој активности као што је развој фоликула Током раста фоликула, естроген је кључни интрацелуларни регулаторни молекул који убрзава пролиферацију гранулоза ћелија и појачава ефекте ФСХ и ЛХ на пролиферацију и диференцијацију ћелија јајника ЕР Главно прилагођавање је негативна повратна спрега, ЕР Развој фоликула се регулише кроз унутрашње и спољашње путеве јајника [26] ЕР се углавном изражава у ткивима и органима као што су млечна жлезда, материца и вагина животиња, док се ЕР углавном изражава у тестисима. , јајници, простата и хипоталамус [27].

У овој студији, ЕР Нивои експресије Цистанцхе десертицола и Каемпферола су значајно повећани у групама Цистанцхе десертицола и Каемпферол, што сугерише да цистанцхе и каемпферол имају позитивне ефекте на развој, сазревање и овулацију пилећих јајника. Резултати ове студије су открили да је ЕР измерен. Ниво експресије је релативно низак. Ово је у складу са резултатима истраживања Гуо Миао-а [28] да у ембрионалном развоју пилића, јајници раних пилића имају специфична места везивања за ЕР. У белим фоликулима, жутим фоликулима и гранулоза ћелијама пилића, ЕР Експресија је значајно већа од ЕР. Флавоноиди соје, као естроген на биљној бази, могу повећати стопу производње јаја кокошака носиља када се додају у исхрану [29], што указује на директну везу између нивоа хормона естрогена и стопе производње јаја.

Слика 4 Ткиво јајника након ХЕ бојења (10 ×)

3.3 Ефекти Цистанцхе десертицола и Каемпферола на ткиво јајника

У овом експерименту, ко-култивисањем Цистанцхе десертицола и Каемпферола са ткивом јајника, утврђено је да се број фоликула у ткиву јајника захваћених Цистанцхе десертицола и Каемпферолом значајно повећава, а ћелије гранулозе пролиферишу од једнослојног до вишеслојног. Ово даље доказује да Цистанцхе десертицола и Каемпферол могу промовисати развој јајника из хистолошке перспективе. Пролиферирајући ћелијски антиген, рецептор фоликулостимулирајућег хормона и рецептор естрогена мерени у резултатима овог експеримента. Промене индикатора су потврдиле да Цистанцхе десертицола и Каемпферол имају ефекте сличне естрогену, што представља експерименталну основу за истраживање циља главних компоненти. од цистанцхе десертицола и додера.

4. Закључак

Ова студија је потврдила да Цистанцхе десертицола и Каемпферол могу да промовишу пролиферацију пилећих преградираних гранулоза ћелија и да повећају ПЦНА, ФСХР и ЕР Ниво транскрипције мРНА може значајно да подстакне развој фоликула.

Референца:

［1］Ианг Пенгиун, Сонг Беибеи, Ма Јинруи, ет ал. Улога ћелија гранулозе у формирању јаја [Ј] Поултри Сциенце, 2021 (11): 50-54

［2］ ХУО СИ,ЛИ ИР,ГУО И,ет ал. Побољшање ефеката Епимедиум флавоноида на одабране репродуктивне карактеристике код кокошака несаница након принудног лињања［Ј］. Поултри сциенце, 2020, 99(5): 2757-2765.

［3］ ХУО СИ,ЛИ ИР,ЗХАНГ С, ет ал. Функције Епимедиум-а на регресираним јајоводима и фоликулима кокошака које су насилно лињале ［Ј］. Часопис за светско истраживање живине, 2020,10(2):326- 335.

［4］ РАЈУ ГР, ЦХАВАН Р, ДЕЕНАДАИАЛ М, ет ал. Синергија лутеинизирајућег хормона и фоликулостимулирајућег хормона: преглед улоге у контролисаној хиперстимулацији јајника［Ј］. Часопис људске репродукције, 2013, 6（4）:227-234.

［5］ СЦХМИДТ Д. Фактор транскрипције мишјих крилатих хеликса Фокл2 је неопходан за диференцијацију ћелија гранулозе и одржавање јајника［Ј］. Девелопмент,2004,131（4）:933-942.

［6］ СУЛЛИВАН МВ, СТЕВАРТ-АКЕРС А, КРАСНОВ ЈС, ет ал. Одговори јајника код жена на рекомбинантни хормон који стимулише фоликуле и лутеинизирајући хормон (ЛХ): улога ЛХ у завршним фазама сазревања фоликула (Ј). Часопис за клиничку ендокринологију и метаболизам,1999,84(1):228-232.

［7］ ГУО И,ЛИ ИР,ЗХАНГ С, ет ал. Ефекат укупних флавоноида епимедијума на развој ћелија гранулозе код кокошака носиља ［Ј］. Поултри сциенце,2020,99（9）:4598-4606.

［8］ ЗХАНГ ВД,ЛИ Н,ДУ ЗР,ет ал. ИГФ-1 рецептор је укључен у регулаторне ефекте икариина и икаритина у астроцитима у базалним условима и након инфламаторног изазова［Ј］. Европски часопис за фармакологију, 2021,906(5):174269- 174278.

［9］ ФРЕДЕРИКУЕ РЗ,МИГУЕЛ Ф,ГЕ И,ет ал. Регулаторна архитектура Л Т2 гонадотропне ћелије која лежи у основи одговора на гонадотропин-ослобађајући хормон［Ј］. Границе у ендокринологији, 2018, 9:34.

［10］ Хуо Схуиинг, Канг Јингмин, Ли Иуронг и др. Ефекат „Ииму праха” на поправку јајовода и перформансе кокошака носиља [Ј] Кинеска живина, 2018, 40 (19): 4

［11］ ВАНГ С,ВАНГ К,ВАНГ Х, ет ал. Индукција старења РОС и ДНК зависног од оштећења икаритином доприноси његовој антитуморској активности у ћелијама хепатоцелуларног карцинома［Ј］. Фармацеутска биологија, 2019, 57(1):424-431.

［12］ Ванг Јианхонг, Ванг Минзханг, Ву Кингхуа, ет ал Ефекат флавоноида из Цусцута цхиненсис на ендокрину функцију јајника код пацова под стресом [Ј] Кинеска биљна медицина, 2002 (12): 46-48

［13］Миао Јиангкиа Напредак у истраживању активних компоненти и механизма деловања семена виле у регулисању репродукције//Зборник радова са академске конференције о фармацеутској фитохемији и одрживом развоју ресурса традиционалне кинеске медицине (И), 2009: 323-325

［14］ ТАО ЦЦ,ВУ И,ГАО Кс,ет ал. Антитуморски ефекти Ицари⁃ калаја против рака дојке повезани су са естрогенским рецепторима［Ј］. Тренутна молекуларна медицина, 2020, 21（1）:73-85.

［15］ МОННИАУКС, ДАНИЕЛЛЕ. Покретање фоликулогенезе дијалогом оо⁃ цит-соматске ћелије: лекције из генетских модела［Ј］. Тхе⁃риогенологија,2016,86(1):41-53.

［16］ТАКАСХИ СХИМИЗУ А,НАОМИЦХИ КОСАКА А,ЦХИАКИМУ⁃ РАИАМА А,ет ал. Експресија Апелина и АПЈ рецептора у ћелијама гранулозе и тека током различитих фаза развоја фоликула у јајницима говеда: учешће апоптозе и хормонске регулације – научна директна［Ј］. Наука о репродукцији животиња, 2009, 116（1-2）:28-37.

［17］ Лин Сивен, Цхен Схаобо, Иин Цхангцханг, ет ал Естрогени ефекат укупних флавоноида Цистанцхе десертицола десертицола на промовисање остеогене диференцијације ［ Ј］ Истраживање и развој природног производа, 2020, 32 (3): 373-378

［18］ Тао Јинлианг, Ванг Ксиао, Веи Иуаниуан, ет ал Заштитни ефекат флавоноида из Цусцута цхиненсис на БПА индуковано абнормално лучење мушких хормона у интерстицијалним ћелијама тестиса миша [Ј] Напредак у медицини животиња 2019.: {101} {4}}

［19］ Ванг Пенг, Хоу Деиу, Схи Лигуанг, ет ал Данзхоу Цхицкен ФСХ студија о полиморфизму једног нуклеотида гена ［ Ј］ Хеилонгјианг сточарство и ветеринарска медицина, 2018, {10 (19):

［20］ ЗХАНГ М, СХИ Х, СЕГАЛОФФ ДЛ, ет ал. Експресија и локализација рецептора лутеинизирајућег хормона у репродуктивном тракту женке миша［Ј］. Биологија репродукције, 2001, 64(1): 179-187.

［21］ Ли Кин, Ванг Кигуи ТГФ- Напредак истраживања и изгледи чланова породице који регулишу развој фоликула код живине ［ Ј ］ Кинеска живина, 2019, 41 (19): 1-5

［22］Гуан Хонгбин, Ли Кингзханг Напредак истраживања фоликле стимулирајућег хормона [Ј] Јоурнал оф Нортхеаст Агрицултурал Университи, 2002, 8 (3): 306-311

［23］ Ву Ксинпеи, Ванг Схуиинг Имунохистохемијска локализација ФСХР и ЛХР у јајницима црне козе Лаиву ［ Ј］ Лифе Сциенце Ресеарцх, 2006, 25 (4): 367-371

［24］ ТИСЦХКАУ СА,ХОВЕЛЛ РЕ,ХИЦКОК ЈР,ет ал. Налет лутеинизирајућег хормона регулише експресију гена циркадијанског сата у јајницима пилића［Ј］. Цхронобиологи интернатионал, 2011,28（1）:10-20.

［25］Танг Хаифеи, Ванг Зхивен, Зхенг Ксуесонг, ет ал Напредак у истраживању функције естрогена [Ј] Репродукција и контрацепција, 2019, 39 (4): 334-340

［26］ Лиу Лингбин Ефекат монохроматског зрачења светлости на естрогенски рецептор (ЕР , ЕР ）, Ефекат експресије прогестеронских рецептора (ПР-А, ПР-Б) у ткиву јајника Иа'ан: Пољопривредни универзитет у Сечуану, 2013.

［27］ ЦОУСЕ ЈФ,ЛИНДЗЕИ Ј,ГРАНДИЕН К, ет ал. Дистрибуција ткива и квантитативна анализа рецептора естрогена-алфа (ЕРал⁃ пха) и рецептора естрогена-бета (ЕРбета) месинџера рибонуклеа⁃-иц киселине у дивљој киселини и ЕРалпха-нокаут миш［Ј］. Ен⁃ доцринологи,1997,138(11):4613-4621.

［28］Гуо Миао ЕР у ткиву јајника кокошака носиља Очигледна регулација динамичких промена и скрининг регулаторног гена Таи'ан: Схандонг Агрицултурал Университи, 2017. [ Зхао Бикиан Напредак истраживања о примени даидзеина у производњи кокошака носиља [Ј ] Гуангдонг Феед, 2017, 26 (8): 31-33