Ефекти полигона-полисахарозе на фероптозу код пацова дијабетичке нефропатије

Кључне речи:дијабетичка нефропатија;полигона-полисахароза; фероптоза; трансферин; ФТХ1; ГПКС4

 

Дијабетичка нефропатија(ДН) је озбиљна микроваскуларна компликацијашећерна болест[1] ДН је озбиљанмикроваскуларна компликација дијабетесамеллитус [1], који се обично манифестује као микроалбуминурија у раним фазама, праћен прогресивним развојем Рани стадијум се обично манифестује микроалбуминуријом, праћен прогресивним развојем масивне протеинурије, прогресивним смањењем брзине гломеруларне филтрације и прогресивним повећањем креатинина у крви [2 ]. прогресивно повећање креатинина[2] . Ако се не лечи, болест може довести до хроничне болести. Ако се не лечи, може довести до хроничног прогресивног оштећења бубрега и на крају болести у завршној фази. Ако се не лечи, може довести до хроничне прогресивне повреде бубрега и на крају до завршног стадијума бубрежне инсуфицијенције[3]. Смрт гвожђа Смрт гвожђа је акумулација незасићених масних киселина зависно од гвожђа. Смрт гвожђа је акумулација зависна од гвожђа оксидација фосфолипида незасићених масних киселина која доводи до смрти ћелије, која се углавном манифестује као главна манифестација смрти гвожђа је акумулација гвожђа зависна. интрацелуларни липидни пероксиди[4] . [4] . Студије Утврђено је да је повреда бубрежних тубуларних епителних ћелија уско повезана са смрћу гвожђа[5]. Ванг и др.

Ванг и сарадници [6] су открили да је експресија глутатион пероксидазе 4 (ГПКС4) у експресији интерстицијалне тубуле бубрега (ГПКС4) уско повезана са озбиљношћу и прогресијом ДН болести. ГПКС4, као важан циљ за покретање програма смрти гвожђа, је сензор оксидативног стреса и сигнализације смрти ћелије, а смањена експресија ГПКС4 доводи до значајног повећања експресије живог ГПКС4, што резултира значајним повећањем живог кисеоника у телу[ 7] . . Стога, инхибиција смрти епителних ћелија бубрежних тубуларних ћелија кроз регулацију смрти гвожђа Стога, инхибиција смрти епителних ћелија бубрежних тубуларних ћелија кроз регулацију смрти гвожђа да би се ублажило оштећење бубрега ДН може бити ефикасна стратегија за лечење ДН. Стога, инхибиција бубрежних тубуларних ћелија Смрт епителних ћелија кроз регулацију смрти гвожђа може бити ефикасна стратегија за лечење ДН.
ТхеполисахаридаофЦ. флавусје најзаступљенија и најважнија фармаколошка То је једна од најзаступљенијих и најважнијих фармаколошких компоненти Ц. флавус. Експериментална студија је показала да игра важну улогу у побољшању бубрежне функције ДН и ублажавању инфламаторног одговора. Ли и др[8] . Ли и др [9] . открили су да су Ли и сарадници [9] открили да је интервенција полисахарида Ц. флавус значајно побољшала поремећаје метаболизма глуколипида и толеранцију на инсулин код дијабетичких мишева. Ли ет ал. Друга студија је открила да су глукоза, 24 х глукоза и толеранција на инсулин код мишева са дијабетичком нефропатијом значајно побољшани након интервенције полисахарида жутог екстракта. Друга студија је открила да су глукоза у крви, 24- микроалбумин у урину, креатинин у крви (СЦр) и азот урее у крви (БУН) код мишева модела дијабетичке нефропатије значајно побољшани након интервенције полисахарида Фруцтус флавус. и нивои азота уреје у крви (БУН) су значајно смањени у моделу дијабетичке нефропатије[10]. Третман ДН полисахаридом из Флос Цхрисантхеми Међутим, специфичан механизам његовог деловања није јасан. Стога, садашњост У овој студији, исхрана са високим садржајем масти у комбинацији са ињекцијом стрептозотоцина (СТЗ) коришћена је за успостављање ДН модела пацова.
Стога смо у овој студији успоставили ДН модел пацова исхраном са високим садржајем масти у комбинацији са ињекцијом стрептозотоцина (СТЗ) и посматрали ефекат полисахарида Ц. флавус на смрт гвожђа код пацова. Стога је ова студија спроведена да би се посматрао ефекат полисахарида Ц. флавус на смрт гвожђа код пацова храњених храном са високим садржајем масти у комбинацији са ињекцијом стрептозотоцина (СТЗ) и да би се разјаснио механизам деловања полисахарида Ц. флавус на ДН.

материјали и методе
1.1 Животиње
Педесет здравих мушких СД пацова са телесном масом од (200±20) г смештени су на Институту за радиологију Кинеске академије медицинских наука, Пекинг, Кина, у циклусу од 12- х светло-мрак на температури од (25±2) степена и релативне влажности (50±15) процената, и храњен ад либитум. Дијета са високим садржајем шећера и масти (10 процената свињске масти, 20 процената сахарозе, 2,5 процената холестерола, 67,5 процената конвенционалне хране), (4,8 процената масти, 20 процената протеина и 59,4 процената укупног шећера), Беијинг Хуафуканг Биотецхнологи Цо. Овај експеримент је одобрио болница интегративне медицине Цангзхоу (ЦЗКС2022-КИ-023).

1.2 Лек и припрема
ПолисахаридофФлос Астрагалус(чистоћа 70 процената, број серије С27804), Схангхаи Иуание Биотецхнологи Цо. Лтд. Лтд. је припремљен са физиолошким раствором у концентрацији од 200, 800 мг/мЛ, респективно. 800 мг/мЛ раствора. Ирбесартан таблете (лот 8А411), Санофи (Хангзхоу) Пхармацеутицал Цо. (Хангзхоу) Пхармацеутицал Цо., Лтд. је припремљен у физиолошком раствору од 30 мг/мЛ. решење.

 

1.3 Главни реагенси и инструменти
Протеини у урину (број серије Ц035-2-1), СЦр (број серије Ц011-2-1), БУН (број серије Ц013-2-1) БУН (број серије Ц013-2-1), малондиалдехид ( МДА, серијски број Ц003-1- 2), глутатион (ГСХ, серија Ц006-2-1), укупан садржај гвожђа јона (број серије А039-2-1), Нањинг Јианцхенг Институт за истраживање биолошког инжењерства Институт за биолошки инжењеринг , Нањинг, Кина; Трансферин (серијски број аб278498), феритин Трансферин (лот аб278498), тешки ланац феритина (ФТХ1, партија аб75973), ГПКС4 (лот аб252833) и -феритин (лот аб252833). аб252833), -актин (лот аб179467), Абцам, УК. иМарк680 мултифункционални ензимски маркер, Био-Рад, САД. Фресцо17 центрифуга, Тхермо, САД; 5810 сточна замрзнута центрифуга, Еппндорф, Немачка; Квантификација флуоресценције АБИ Присм® 7500 Апплиед Биосистемс, САД; ДИЦЗ-24ДН резервоар за вертикалну електрофорезу, пекиншка фабрика инструмената Лиуии, Пекинг, Кина; СХ-523 цхемилуминесценце имагинг Лтд, Хангзхоу Схенхуа Тецхнологи Цо.

 

1.4 Моделирање, груписање и примена лекова
После 1 недеље адаптивног храњења, 10 пацова је насумично одабрано као нормално. Преосталих 40 пацова је упућено на метод из литературе [11] да би се успоставио ДН модел пацова. Пацови су храњени исхраном са високим садржајем шећера и масти током 7 недеља, а затим су постили 12 сати без воде. Пацови су храњени храном са високим садржајем шећера и масти током 7 недеља, а затим су постили храном и водом 12 сати. СТЗ је убризган интраперитонеално у дози од 30 мг/кг. После 72 х, крв је сакупљена из репне вене да би се открила насумична глукоза у крви, а глукоза у крви већа од или једнака 16,7 ммол/Л се сматрала успешним моделирањем дијабетеса. Пацови су храњени храном са високим садржајем шећера и масти током 1 недеље, а 24-х урин је сакупљен из метаболичког кавеза.

 

 

1.5.5 Вестерн блот тест
Сакупити ткива бубрега, додати 150 μЛ РИПА пуфера за лизу, хомогенизовати. Супернатант протеина је задржан након центрифугирања. Укупна концентрација протеина је одређена коришћењем комплета за анализу БЦА протеина. Укупна концентрација протеина је одређена коришћењем комплета за анализу БЦА протеина, а концентрација протеина је хомогенизована. Једнаке количине протеина 20 уг, 8 процената -12 процената СДС-ПАГЕ је коришћено за одвајање протеина, а протеин је пренет. Мембране су затворене са 5 процената обраног млека у праху на собној температури током 2 х. Додато је примарно антитело зеца против пацова Трансферрин (1:2 000), ФТХ1 (1:3 000) и ГПКС4 (1:3 000). 3,000), ГПКС4 (1:3,000), -актин (разблажен 1:5,000), и инкубирао преко ноћи на 4 степена. Инкубирајте преко ноћи на 4 степена. Мембрана је испрана, додато је секундарно антитело (1:9 000) и инкубирано 2 х на собној температури. Мембране су испране са ТБСТ, развијеним ЕЦЛ хемилуминисценцијом и откривене коришћењем
Имаге Ј софтвер је коришћен за анализу вредности сивих тонова трака.

 

1.6 Статистичке методе
За анализу је коришћен статистички софтвер СПСС Статистицс25.0. Експеримент Резултати су изражени као кˉ±с, а сви подаци су тестирани на нормалност и хи-квадрат. Сви подаци су тестирани на нормалност и хи-квадрат, а коришћени су т-тестови ако су били задовољени, а непараметарски тестови ако нису били задовољени. П<0.05 indicates that the difference is statistically significant.

 

2 Ресултс
2.1 Ефекти флавопиридијум полисахарида на телесну масу и ниво глукозе у крви наташте модел пацова У поређењу са нормалном групом, телесна маса пацова у моделној групи је значајно смањена (П<0.01) and FBG was significantly increased (P<0.01); compared with the model group, the body mass of rats in the positive drug group was significantly increased (P<0.05), and the differences in FBG of rats in each group were not statistically significant (P>0.05). Види табелу 2.

2.2 Ефекти Флавопиридијум полисахарида на индексе бубрежне функције моделних пацова
У поређењу са нормалном групом, СЦр, ниво БУН и садржај протеина у 24 х у урину код пацова у моделној групи били су значајно виши (П<0.01); compared with the model group, the Cr, BUN level and 24 h urine protein content of rats in the positive drug group and the high dose group of Flavopiridium polysaccharide were significantly lower (P<0.05, P<0.01). See Table 3.

2.3 Ефекти полисахарида жутог екстракта на хистопатолошку морфологију бубрега моделних пацова
Гломерула и тубуларна структура пацова нормалне групе нису показивали никакве абнормалности, а тилакоидна мембрана и тилакоидна строма нису били пролиферисани, и није било инфилтрације инфламаторних ћелија итд.; модел Код пацова модела, уочена је фокална тубуларна дегенерација и атрофија, а базална мембрана гломерула је била незнатна. Пацови у групи модела су показали фокалну тубуларну дегенерацију и атрофију, благо задебљану базалну мембрану гломерула, тилакоидну хиперплазију и масну дегенерацију гломерула и тубуле. Пацови у свакој групи са применом лека показали су смањене лезије, а побољшање је било очигледније у групи позитивних лекова и високој дози Флавопиридијум полисахарида. Побољшање је било очигледније у групи позитивних лекова и високој дози Флавопиридијум полисахарида. Види слику 1.