Ефекти воденог екстракта Цистанцхе Тубулоса на микробиоту црева мишева са цревним поремећајима

Контакт: Аудреи Ху Вхатсапп/хп: 0086 13880143964 Е-пошта:audrey.hu@wecistanche.com

Поремећаји микробиоте црева су повезани са многим болестима. те водениекстрактизЦистанцхе тубулоса(ЦТ), традиционална кинеска биљна формула, наводно игра улогу у заштити људског црева. Међутим, мало се зна о његовим ефектима на микробиоту црева. *Садашња студија је спроведена да би се утврдило да ли је ЦТ воденаекстрактможе да модулише микробиом црева код мишева са цревним поремећајима. Открили смо да се оштећена цревна морфологија која је резултат лечења цефиксимом може спасити коришћењемЦТводени екстракт. *поређење микробиолошке разноликости између мишева третираних саЦТекстракт и контролни мишеви су такође указали да се поремећај у заједници микробиома моделских група може обновити третманом са високим и средњим концентрацијамаЦТводени екстракт. Третман цефиксимом је довео до значајног смањења бактерија млечне киселине; међутим, допунаЦТводени екстракт је обновио раст ових бактерија млечне киселине. Штавише, ЦТ водениекстрактбио у стању да ублажи драматичне промене у метаболичким путевима цревног микробиома изазване цефиксомом. Ови налази су пружили увид у корисне ефекте ЦТ воденог екстракта на микробиоту црева, а такође су пружили важну референцу за развој сродних лекова у будућности.

Цистанцхеова функција против старења

1. Представљање

Интестинални микроорганизми углавном колонизују цревни лумен и слој слузокоже и узајамно се повезују са домаћином кроз размену материјала и енергије, трансформацију и друге процесе [1].Тхеи су сигнална чворишта која интегришу поруке животне средине, као што је исхрана, са генетским и имунолошким сигналима, што последично утиче на метаболизам домаћина, имунитет, нервни систем и одговор на инфекције [2]. Нормално, постоји динамичка равнотежа између цревне флоре и домаћина; међутим, дисбиоза црева може довести до промена у равнотежи здравља/болести, поремећаја имунитета и мноштва болести [3]. Умерене промене у цревној микробиоти су прихватљиве за домаћина; међутим, ово још увек може да пружи могућности да се појачају промене у другим отежавајућим факторима, као што су бактериофаги, бактериоцини и оксидативни стрес [4]. Претходне студије су показале да етанолни екстрактЦистанцхе тубулоса(ЦТ), традиционална кинеска биљна формула, може да регулише микробиолошки састав црева код пацова [5], а укупни гликозиди ЦТ су прилагодили поремећену микробиоту црева [6]. Врсте Цистанцхе, које углавном паразитирају на коренима врста Тамарик, такође се називају „женшен из пустиње“ и тоник који се састоји од стабљика Цистанцхедесертицола (ЦД) иЦистанцхе тубулоса(ЦТ) се користи као биљни лек [7].ТхеУтврђено је да главне хемијске компоненте ЦТфенилетанол гликозида (ПХГ), који су антиоксидативне супстанце [8, 9], побољшавају репродуктивну дисфункцију [10], потискују активацију звездастих ћелија јетре, блокирају провођење сигналних путева у ТГФ- 1/СМАД [ 11], и спречавају јетрену фиброзу индуковану албумином у говеђем серуму код пацова [12]. Међу више од 100 компоненти у ЦТ, полисахарид је такође једна од важних супстанци са обилним садржајем [13, 14]. Претходне студије су показале да полисахариди Ц. десертицола индукују меланогенезу у меланоцитима, смањују оксидативни стрес[15], ублажавају когнитивну дисфункцију регулацијом антиоксидативних и антиинфламаторних процеса код пацова [16], штите ПЦ12 ћелије од ОГД/РП-индукованих [17] у , побољшавају апсорпцију ехинакозида ин виво и утичу на микробиоту црева [18]. Пробиотици су живи непатогени микроорганизми који имају здравствене предности и дају микробну равнотежу у гастроинтестиналном тракту када се дају у адекватним количинама [19].Тхеи може побољшати неспецифичне ћелијске имуне одговоре које карактерише активација макрофага, ћелија природних убица (НК) и антиген-специфичних цитотоксичних Т лимфоцита и ослобађање различитих цитокинина на сој-специфичан и дозно зависан начин [20]. Пробиотски сојеви побољшавају својства цревног епитела путем ТЈ модулације, а показало се да специфични пробиотски сојеви регулишу експресију муцина, утичући на тај начин на својства слузног слоја и индиректно регулишући имуни систем црева [21]. Сојеви бактерија млечне киселине (ЛАБ) и Бифидобацтериум су главни пробиотици који се користе у многим областима [22–26].ТхПредности за здравље су бројне, а њихов антиоксидативни капацитет је важан фактор у њиховим здравственим функцијама[27]. Пробиотици могу да хелирају металне јоне како би спречили да катализују оксидацију [28, 29]; они такође могу повећати експресију антиоксидативних ензима [30, 31], производити различите метаболите са антиоксидативном активношћу [32, 33], посредовати антиоксидативним сигналним путевима [34–36] и регулисати ензиме који производе реактивне врсте кисеоника (РОС) и одговор цревних микроорганизми до оксидативног стреса[37]. Недавна студија је показала да полисахариди ЦД-а могу да стимулишу раст неких бактерија млечне киселине, што може бити од користи за људско здравље [38]. Међутим, садржај полисахарида у ЦД је другачији од оног у ЦТ [7, 39] и ова разлика може довести до различитих ефеката на цревне микроорганизме. Штавише, иако ЦД полисахариди могу да смање оксидативни стрес активирањем НРФ2/ХО-1 пута [15], ефекти једног полисахарида могу се разликовати од укупног ефекта више композиција у ЦТ.Тхнама је неопходно прецизно дефинисати дејство ЦТ водених екстраката на цревне микроорганизме. Поред тога, ПХГ такође могу да се одупру оксидативном стресу [40] и потискују инфламаторне одговоре посредоване липополисахаридима активирањем Кеап1/Нрф2/ХО-1 пута [41].Тхестога је одређивање ефекта ЦТ воденог екстракта од велике вредности. Осим тога, ефекти одређених састојака воденог ЦД екстракта на оксидативни стрес и цревну флору сугеришу да отпорност на оксидативни стрес може бити у корелацији са променама цревне флоре. Да бисмо попунили празнине у знању о горе наведеним темама, истражили смо ефекте ЦТТакуеоус екстракт на микробиоти црева мишева са поремећајима цревне флоре. Ови резултати ће пружити драгоцене информације о могућим механизмима путем којих ЦТ мења цревну флору и даје цревну отпорност на оксидативни стрес.

2. Материјал и методе

2.1. Експерименталне животиње.

Укупно 18 мужјака Ц57БЛ/6Ј мишева СПФ класе, тежине 18–22 г, купљено је од Центра за експерименталне животиње Медицинског универзитета Синђианг са бројем лиценце СЦКСК (ново) 2018-0003.Тхеи су били смештени у кавезима под стандардизованим условима: 12 х светло/тамни фотопериод, температура од 23 ± 2 степена и влажност од 55 ± 5 процената.Тхеживотиње су храњене комерцијалном исхраном (51 проценат екстракта без азота, 25 процената сирових протеина, 4,6 процената сирове масти, 6,5 процената сировог пепела, 40 процената сирових влакана и 8,9 процената влаге) и водом из славине.Тхеживотиње су третиране према препорукама описаним у Водичу за негу и употребу лабораторијских животиња Националног института за здравље.

2.2. Екстракција воденог екстракта.

Осушене кришке Ц.тубулоза,које је обезбедио Хотан Дицхен ПхармацеутицалБиотецхнологи Цо., Лтд., су млевене у прах, а грануле са величином честица између 20 и 40 ока су одабране.ТхеУслови екстракције били су следећи: однос чврста и течност 1:19, температура 80 степени, време микроталаса 6 мин, време ултразвука 16 мин, снага микроталаса 400 В и снага ултразвука 400 В.Тхесадржај главних компоненти воденог екстракта мерен је помоћу ХПЛЦ (Агилент 1260 Инфинити ИИ, Калифорнија, САД). Укратко, стандардне супстанце ехинакозида (0,2 мг/мЛ) и актеозида (0,2 мг/мЛ) растворене су у 50% метанола да би послужиле као раствор референтне супстанце.Тхен, 1 г ЦТ воденог екстракта је растворен у 100 мЛ 50% метанола и остављен да се стегне 30 мин.Тхераствор екстракта је третиран ултразвуком на 250 В и 35 кХз током 10 мин и затим центрифугиран на 12,000 рпм/мин.Тхесупернатант је филтриран помоћу {{0}}.45 μм микропорозне филтерске мембране. Референтни раствор супстанце и филтрат су затим детектовани помоћу ХПЛЦ у следећим условима: октадецилсилан везан силика гел као пунило, метанол као мобилна фаза А и 0,1 процентна мравља киселина као мобилна фаза Б.Тхетемпература колоне је постављена на 30 степени, таласна дужина детекције је постављена на 330 нм, а запремина ињекције је била 10 μЛ.

2.3. Експерименти.

Након недељу дана адаптације, 18 мишева је насумично подељено у шест група: А (нормалан са додатком средње дозе ЦТ воденог екстракта), Б (нормалан без ЦТ воденог екстракта), Ц (модел без воденог екстракта), Д (модел са високом дозом ЦТ воденог екстракта). доза са додатком ЦТ воденог екстракта), Е (модел са додатком средње дозе ЦТ воденог екстракта) и Ф (модел са додатком мале дозе ЦТ воденог екстракта).Тхегрупе су третиране на следећи начин: нормална група је натопљена нормалним физиолошким раствором, моделна група је натопљена цефиксимом (30 мг/кг, Схииао Гроуп ОуииПхармацеутицал Цо., Лтд., Схијиазхуанг, Кина) и нормалним раствором соли, група са високим дозама је натопљена цефиксом и 221,14 мг/кг ЦТ воденог екстракта, средња доза група је натопљена цефиксимом и 165,54 мг/кг воденог екстракта, а група са ниском дозом цефиксимом и 110,57 мг/кг воденог екстракта.ТхеАгроуп је натопљен са 165,54 мг/кг воденог екстракта и није додат цефиксим. Цефиксим је2 комплементарна и алтернативна медицина заснована на доказима давана дневно у 12:00 х, а друге супстанце су даване дневно у 15:00 х. Током експеримената, групе Ц, Д, Е и Ф су држане у моделном стању цревних поремећаја.Тхефецес је сакупљен сваких седам дана на стерилном операбилном столу и чуван на -20 степени.

2.4. Хистопатолошко посматрање дебелог црева мишева.

На крају експеримента, мишеви су убијени дислокацијом грлића материце, а њихов садржај дебелог црева је сакупљен на астерилном операбилном столу и чуван на -80 степени; у исто време, узорци ткива дебелог црева су фиксирани у 10% неутралном формалину.Тхен, узорци су дехидрирани коришћењем градијентне концентрације етанола, хијалинизовани коришћењем ксилена, уграђени у парафин, пресечени и обојени хематоксилин-еозином. Морфолошке промене на слузници дебелог црева су уочене и упоређене помоћу оптичког микроскопа. Измерена је дужина ресица и дубина крипте у дебелом цреву и израчунат је однос дужине ресица и дубине крипте (В/Ц вредност) (51).

2.5. Екстракција ДНК и изградња библиотеке.

ДНК је екстрахован из фецеса коришћењем ЕЗНА ®Соил ДНК комплета (Омега Био-Тек, Норцросс, ГА, САД) у складу са протоколом произвођача. Квалитет ДНК је одређен помоћу флуорометра (КуантиФлуор™–СТ, Промега Цорпоратион, САД). Упарени прајмери ​​у В3-В4 региону 16с рДНК дизајнирани су да амплифицирају регион и производе ДНК фрагменте од 466 бп.Тхепредњи прајмер је био 341Ф (-5-ЦЦТАЦГГГНГГЦВГЦАГ-3-), а реверзни прајмер је био 806Р (-5-ГГАЦТАЦХВГГГТАТЦТААТ-3-). Свака ПЦР запремина је била 25 μЛ, садржала је 2,5 μЛ 10 × ПЦР пуфера, 2 μЛ дНТП, 1 μЛ сваког прајмера и 20–30 нг шаблонске ДНК. Затим су индексирани адаптери причвршћени на крај ампликона да би се генерисале библиотеке секвенцирања. Библиотеке су валидиране коришћењем КуантиФлуор™ флуорометра и квантификоване на 10 нмол.

2.6. Секвенцирање гена 16с рРНА и анализа микробне заједнице.

Иллумина платформа (Иллумина МиСек) је коришћена за добијање 2 × 250 бп података упареног краја. Оперативне таксономске јединице (ОТУ) су добијене коришћењем софтвера Упарсе кроз стандардно груписање са 97 процената сличности. Наивни Бајесов алгоритам за доделу РДП класификатора је коришћен за усклађивање ОТУ-а са Греенгене базом података, издање 13.5 и обављање бележења врста. Алфа диверзитет гутмикробиоте је израчунат коришћењем Шеноновог и Симпсониног индекса, а разлике између група су анализиране линеарном дискриминантном анализом Еффецт Сизе (ЛЕфСе). Бета разноврсност је анализирана анализом главних координата (ПЦоА) Бреј-Кертисових разлика. ПИЦРУСт2 је коришћен за процену микробиолошког метаболичког капацитета цревног микробиома [42].

2.7. Статистичка анализа података.

СПСС 20 је коришћен за једносмерну АНОВА, а експериментални подаци су изражени као Кс ± С; Кс означава просечну вредност, а С означава стандардну девијацију.

3. Резултати

3.1. Ефекат ЦТ воденог екстракта на морфологију дебелог црева.

Репрезентативна једињења (ехинакозид и актеозид) и њихове концентрације ЦТ екстракта су потврђене помоћу ХПЛЦ (слика С1). Да бисмо утврдили ефекат воденог екстракта на црева, истражили смо дужину ресица дебелог црева и дубину удубљења након третмана ЦТакуеоус екстрактом.ТхеРесице дебелог црева у нормалним и групама са високим дозама (А, Б и Д) биле су дуже и сличне прстима, док су ресице дебелог црева у групама модела и са ниским дозама (Ц и Ф) биле кратке, а врхови ресица дебелог црева су сломљени ( Слика 1). У складу са тим, висока доза ЦТ воденог екстракта значајно је повећала дужину ресица дебелог црева и смањила дубину удубљења код мишева са цревним поремећајима у поређењу са њима у групи модела (П < 0.01).="" насупрот="" томе,="" дубина="" удубљења="" није="" се="" значајно="" разликовала="" између="" групе="" са="" високом="" дозом="" и="" нормалне="" групе="" (п=""> 0,05) (Табела С1). Ови резултати су показали да висока доза ЦТ воденог екстракта може побољшати морфологију унутар дебелог црева мишева у оквиру цревних поремећаја.

3.2. Ефекат ЦТ воденог екстракта на разноврсност цревне микробиоте.

Извршили смо секвенцирање гена 16с рРНА да бисмо истражили потенцијални узрок морфолошких промена унутар дебелог црева и истражили промене у цревној микробиоти након третмана са ЦТ воденим екстрактом. У просеку 100,553 ефективне ознаке, у распону од 77,734 до 125,144 података, добијено је из необрађених података. (Табела С2).Тхесетагови су групирани у 4932 ОТУ-а (Табела С3). Затим смо анализирали разноликост цревне микробиоте на основу ових ОТУ. Индекси Шенона и Симпсона нису показали разлику између А групе (нормално са ЦТ воденим екстрактом) и Б групе (нормално без ЦТ воденог екстракта) (Слика 2(а)). Ово је показало да код мишева без третмана цефиксимом, ЦТ водени екстракт можда није имао никакве додатне корисне или штетне ефекте на -разноврсност цревне микробиоте. Међутим, -разноврсност у групи модела (Ц) показала је опадајући тренд у поређењу са оним у нормалним групама. Мишеви третирани високим и средњим дозама ЦТ воденог екстракта показали су знаке опоравка -диверзитета, док такав феномен није примећен код мишева третираних ниском дозом ЦТ воденог екстракта (Слика 2(а)). У међувремену, ПЦоА је открио да нормалне групе (А и Б) и групе са цревним поремећајима којима су даване високе дозе (Д) и средње дозе (Е) ЦТакуеоус екстракти имају тенденцију да имају краће међуузорке од оних у групи модела и у ниским дозама ЦТакуеоус група додатака екстракта (Ф) (Слика 2(б)). Ови резултати су показали да би ЦТ водени екстракт могао помоћи да се побољша разноликост цревне микробиоте код мишева у цревним поремећајима.

3.3. Промене у саставу цревне микробиоте третиране ЦТ воденим екстрактом.

*профили састава микробиоте су упоређени међу различитим групама. На нивоу филума, релативна бројност протеобактерија у групи модела била је већа од оне у другим групама (Слика 3 (а)). * Повећање протеобактерија сугерише да је микробиом моделних мишева промењен цефиксимом и да би ЦТ водени екстракт могао имати користи за цревну микробиоту јер је повећана преваленција протеобактерија главни маркер поремећене цревне флоре [43–45]. Поред тога, на нивоу рода, релативна бројност Лацтобациллуса у групи модела се смањила у поређењу са оним у нормалној и групи са високим дозама; међутим, повећао се у поређењу са оним у групи са средњом и ниском дозом (Слика 3(б)). Ови резултати су указали на то да би високи дози ЦТакуеоус екстракта могао да подстакне раст неких бактерија из рода Лацтобациллус. Диференцијална микробиота између испитиваних група је даље одређена према ЛЕфСе анализи. *анализа је показала да је након третмана цефиксимом значајно повећана релативна заступљеност Турицибацтер, Алпхапротеобацтериа, Ацидобацтериа, Бетапротеобацтериалес и Цхлорофлеки, док је релативна заступљеност Лацтобациллуса, Еубацтериум_}нодата угроупоцатум{8}}нодатума Цхристенсенеллацеае_Р-7_група је значајно смањена у поређењу са онима у нормалној групи (Слика 4(а)). Запањујуће, када је група модела допуњена високим дозама ЦТ воденог екстракта, релативна количина Мурибацулацеае, Лацтобациллус, Кинеоспориацеае, Еубацтериум нодатум групе и Педобацтер је значајно повећана у поређењу са онима у групи модела. У међувремену, релативна заступљеност Рходобацтер, Руминоцоццацеае УЦГ_013, Росебуриа, Руминицлостридиум_9 и Цандидатус Стокуефицхус значајно се смањила у поређењу са онима у групи модела (Слика 4(б)).

3.4. Функције цревне микробиоте у вези са лечењем ЦТ воденим екстрактом.

Користили смо софтвер ПИЦРУСт2 да предвидимо метаболичке путеве цревне микробиоте, а нормална група је коришћена као референца за анализу промена у другим групама. Под третманом цефиксимом, повећана је релативна количина деградације етилбензена, биосинтеза нерибозомалних пептида групе сидерофора и метаболизам ксенобиотика путем цитохрома П450; након третмана воденим екстрактима високе и средње дозе ЦТ, њихова релативна заступљеност се вратила на нормалне нивое. У међувремену, релативно обиље пута метаболизма цијаноаминокиселина се смањило под третманом цефиксима; међутим, повећао се након третмана са високим дозама ЦТ воденог екстракта. Штавише, генерално, промене у различитим путевима метаболита након третмана цефиксимом биле су значајне у поређењу са онима у нормалној групи; међутим, додавање ЦТакуеоус екстракта је било у стању да спречи прекомерне промене (Слика 5).

4. Дискусија

Морфологија дебелог црева може да се промени растом, варењем и апсорпцијом, регулацијом имунитета и поправком цревних повреда[46–50]. *Однос е В/Ц може свеобухватно да одражава дигестивни статус цревног тракта и директно је пропорционалан дигестивном и апсорпционом капацитету црева [51, 52]. У овој студији, биопсија ресица и удубљења и статистички подаци су показали да су високе дозе воденеекстрактмогло делимично побољшати дефектну морфологију унутар дебелог црева. Да би се истражило како водениекстрактмења морфологију црева и утиче на цревну микробиоту, радили смо уназад од промена у цревној флори. Открили смо да се релативна заступљеност Протеобацтериа, главног маркера поремећене цревне флоре, повећала под третманом цефиксимом у поређењу са оним без лечења цефиксом.* Релативна заступљеност других маркера чворишта, Бацтероидетес и Фирмицутес, није имала значајне промене, иако су ове групе преовлађујуће у људска црева; Утврђено је да је однос Бацтероидетес/Фирмицутес смањен код гојазних људи у поређењу са оним код мршавих људи, а овај однос се повећава са губитком тежине код људи на два типа нискокалоричне дијете [38, 41, 43–45, 48, 53, 54]. У међувремену, Турицибацтер, који је повезан са гојазношћу [55], био је значајно повишен у групи модела у поређењу са осталим групама. Значајно је да је разноврсност микробиоте црева код модела мишева побољшана додатком ЦТакуеоус екстракта. Приметили смо неке специфичне цревне бактерије код мишева под различитим третманима; на пример, Лацтобациллус и Мурибацулацеае су били два главна рода бактерија који су се повећали у групи третираној воденим екстрактом високе дозе ЦТ у поређењу са онима у моделној групи (Слика 4). Недавне студије су показале да полисахариди ЦТ водених екстраката поседују значајне антиоксидативне активности ин витро [56] и могу да подстакну раст неких бактерија млечне киселине, што би могло бити од користи за здравље домаћина [43]. Паралелно, Мурибацулацеае су пробиотички организми повезани са дуговечности [57]. Ово сугерише да механизам којим ЦТ водени екстракт побољшава микробиоту црева може бити промоција или заштита раста пробиотских организама. Још једна бактерија вредна пажње била је бактерија ИЕ57. Иако је висока доза ЦТакуеоус екстракта промовисала релативну количину бактерије ИЕ57 у овој студији (Слика 4), претходне студије су откриле да је њена заступљеност већа у нормалним цревима него у цревима третираним остатком хербалтеа високе концентрације [58] и да је његова бројност смањена након интервенције са Бациллус лицхениформис у комбинацији са КСОС (ксилоолигосахариди) [59]. *нас, улога ове бактерије у микробиоти црева заслужује даље проучавање. Осим тога, релативно мали број узорака у овој студији могао би да изазове мерење лажно позитивних и лажно негативних, а будућа студија на већим узорцима се предлаже за валидацију идентификованих бактеријских маркера.

ЦТ водениекстрактсастав може бити важан за своје ефекте на састав и функционалне промене у микробиоти црева код мишева са цревним поремећајима. ПХГ су уобичајене активне компоненте које се налазе у ЦД и ЦТ, а ехинакозид је идентификован као главни ПХГ у ЦТ [60]. Последњих деценија показало се да ехинакозид поседује многе фармаколошке активности, као што су антиагинг и неуропротективни ефекти, побољшање срчане функције, смањење хиперлипидемије и хипергликемије и превенција дијабетеса и метаболичког синдрома изазваног гојазношћу [53, 61–65]. У ствари, открили смо промене у метаболичким путевима цревне микробиоте.* Третман цефиксима је довео до обогаћивања бактерија повезаних са деградацијом етилбензена и биосинтезом нерибозомалних пептида групе сидерофора, док су третмани са високим и средњим дозама ЦТ воденеекстрактмогао ублажити ове промене, што указује да је овај екстракт модерирао бактеријску заједницу која је повезана са овим функцијама. Поред тога, повећано обогаћивање бактеријама везано за пут метаболизма цијаноаминокиселина под третманом са високим дозама воденог екстракта и његово смањено обогаћивање код моделних мишева указују на то да ЦТ водени екстракт може да подстакне метаболизам цијаноамино киселине. * Промене релевантних метаболита могу овом воденом екстракту да обезбеде фармаколошке активности.

Референце

[1] А. Хеинтз-Бутцхарт и П. Вилмес, "Микробиом људског црева: функција је важна", Трендс ин Мицробиологи, вол. 26, бр. 7, стр. 563–574, 2018.

[2] ЦА Тхаисс, Н. Змора, М. Леви и Е. Елинав, "*емикробиом и урођени имунитет," Натуре, вол. 535, бр. 7610, стр. 65–74, 2016.

[3] Г. Куаранта, М. Сангуинетти и Л. Масуцци, "Трансплантација фекалне микробиоте: потенцијално средство за лечење болести репродуктивног тракта код жена," Фронтиерс ин Иммунологи, вол. 10, стр. 2653, 2019.

[4] ГА Веисс и Т. Хеннет, "Механизми и последице интестиналне дисбиосис", Целлулар анд Молецулар Лифе Сциенцес, вол. 74, бр. 16, стр. 2959–2977, 2017.

[5] И. Ли, И. Пенг, П. Ма ет ал., "Ефекти екстракта Цистанцхе тубулоса слични антидепресивима на пацове хроничног непредвидивог стреса кроз обнављање хомеостазе цревне микробиоте", Фронтиерсин Пхармацологи, вол. 9, стр. 967, 2018.

[6] Л. Фан, И. Пенг, Ј. Ванг, П. Ма, Л. Зхао и Кс. Ли, "Тоталгликозиди из стабљика Цистанцхе тубулоса ублажавају понашања налик депресији: двосмерна интеракција фитокемикалија и цревне микробиоте," Пхитомедицине, вол. 83, ИД члана 153471, 2021.

[7] И. Ли, И. Пенг, М. Ванг, П. Ту и Кс. Ли, „Људски гастроинтестинални метаболизам воденог екстракта цистанцхес херба инвитро: разјашњавање метаболичког профила на основу свеобухватне идентификације метаболита у желудачном соку, интестинаљуице, људске цревне бактерије и цревни микрозоми, "Јоурнал оф Агрицултурал анд Фоод Цхемистри, вол. 65, бр. 34, стр. 7447–7456, 2017.

[8] Х. Ванг, И. Сун, В.-Ц. Ие ет ал., "Антиоксидативни фенилетаноид и фенолни гликозиди из Пицрорхиза сцропхулариифлора," Цхемицал анд Пхармацеутицал Буллетин, вол. 52, бр. 5, стр. 615–617, 2004.

[9] С.-Л. Ји, К.-К. Цао, Кс.-Кс. Зхао ет ал., "Антиоксидативна активност фенилетаноидних гликозида на неуротоксичност изазвану глутаматом", Биосциенце, Биотецхнологи, анд Биоцхемистри, вол. 83, бр. 11, стр. 2016–2026, 2019.

[10] К. Ванг, Ј. Донг, В. Лу ет ал., „Пхенилетханол глицосидес фром Цистанцхе тубулоса побољшали су репродуктивну дисфункцију регулацијом тестиса стероида путем ЦИП450-3 -ХСДпатхваиа“, Јоурнал оф Етхнопхармацологи, вол. 251, члан ИД112500, 2020.

[11] С.-П. Иоу, Л. Ма, Ј. Зхао, С.-Л. Зханг, и Т. Лиу, "Фенилетанол гликозиди из Цистанцхе тубулоса потискују активацију звездастих ћелија јетре и блокирају провођење сигналних путева у ТГФ- 1/смад као потенцијалним агенсима против хепатичне фиброзе", Молецулес, вол. 21, бр. 1, стр. 102, 2016.

[12] С.-П. Иоу, Ј. Зхао, Л. Ма, М. Тудимат, С.-Л. Зханг, и Т. Лиу, "Превентивни ефекти фенилетаноидних гликозида из Цистанцхе тубулоса на хепатичну фиброзу индуковану албумином у говеђем серуму код пацова", ДАРУ Јоурнал оф Пхармацеутицал Сциенцес, вол. 23, бр. 1, стр. 52, 2015.

[13] Т. Морикава, Х. Ксие, И. Пан ет ал., "Преглед биолошки активних природних производа из пустињске биљке Цистанцхе тубулоса," Цхемицал анд Пхармацеутицал Буллетин, вол. 67, бр. 7, стр. 675–689, 2019.

[14] Ј. Ли, Ј. Ли, А. Аипире ет ал., „Фенилетаноидни гликозиди из Цистанцхе тубулоса инхибирају раст Б16-Ф10 ћелија ин витро и ин виво индукцијом апоптозе путем митохондријалног пута, “ Јоурнал оф Цанцер, вол. 7, бр. 13, стр. 1877–1887, 2016.

[15] И. Ху, Ј. Хуанг, И. Ли ет ал., "Цистанцхе десертицола полисахарид индукује меланогенезу у меланоцитима и смањује оксидативни стрес путем активирања НРФ2/ХО-1 пута," Јоурналоф Целлулар анд Молецулар Медицине, вол. 24, бр. 7, стр. 4023–4035, 2020.

[16] С. Пенг, П. Ли, П. Лиу ет ал., "Цистанцхес ублажава когнитивну дисфункцију изазвану севофлураном регулацијом антиоксиданса и антиинфламаторног деловања зависног од ППАР-ц код пацова," Јоурналоф Целлулар анд Молецулар Медицине, вол. 24, бр. 2, стр. 1345–1359, 2020.

[17] И. Лиу, Х. Ванг, М. Ианг ет ал., "Цистанцхе десертицолаполисаццхаридес штите ПЦ12 ћелије од ОГД/РП-индукованих повреда," Биомедицине & Пхармацотхерапи, вол. 99, стр. 671–680, 2018.

[18] З. Фу, Л. Хан, П. Зханг ет ал., "Цистанцхе полисаццхаридесенханце ецхинацосиде апсорптион ин виво и утиче на цревну микробиоту," Интернатионал Јоурнал оф Биологицал Мацромолецулес, вол. 149, стр. 732–740, 2020.

[19] НТ Виллиамс, "Пробиотици", Америцан Јоурнал оф Хеалтх-Систем Пхармаци, вол. 67, бр. 6, стр. 449–458, 2010.[20] Р. Асхраф и НП Схах, ​​"Стимулација имуног система пробиотичким микроорганизмима," Цритицал Ревиевс ин Фоод Сциенцеанд Нутритион, вол. 54, бр. 7, стр. 938–956, 2014.

[21] Г. Ла Фата, П. Вебер и МХ Мохајери, "Пробиотици и имунолошки систем црева: индиректна регулација", Пробиотицс анд Антимицробиал Протеинс, вол. 10, бр. 1, стр. 11–21, 2018.

[22] МА Зоццо, ЛЗ дал Верме, Ф. Цремонини ет ал., "Еффицаци офлацтобациллус ГГ у одржавању ремисије улцерозног колитиса," Алиментари Пхармацологи анд 8ерапеутицс, вол. 23, бр. 11, стр. 1567–1574, 2006.

[23] МЈ Саез-Лара, Ц. Гомез-Ллоренте, Ј. Плаза-Диаз и А. Гил, "* улога пробиотичких бактерија млечне киселине и бифидобактерија у превенцији и лечењу упалних болести црева и других сродних болести: систематски преглед рандомизираних клиничких испитивања на људима," БиоМед Ресеарцх Интернатионал, вол. 2015, ИД чланка 505878, 15 стр., 2015.

[24] МАО Давоод, С. Косхио, М. Исхикава, ет ал., "Ефекти додатака исхрани Лацтобациллус рхамносус и/и Лацтоцоццус лацтис на раст, микробиоту црева и имуне реакције црвене морске ораде, Пагрус мајор," Фисх & Схеллфисх, вол. 49, стр. 275–285, 2016.

[25] А. Сиван, Л. Цорралес, Н. Хуберт ет ал., "Цомменсал бифидобацтериум промовише антитуморски имунитет и олакшава анти-ПД-Л1 ефикасност", Сциенце, вол. 350, бр. 6264, стр. 1084–1089, 2015.

[26] ПЈ Вхорвелл, Л. Алтрингер, Ј. Морел ет ал., "Ефикасност анкапсулираног пробиотика Бифидобацтериум инфантис 35624 код жена са синдромом иритабилног црева", 8е Америцан Јоурналоф Гастроентерологи, вол. 101, бр. 7, стр. 1581–1590, 2006.

[27] И. Ванг, И. Ву, И. Ванг ет ал., "Антиоксидативна својства пробиотичких бактерија", Нутриентс, вол. 9, бр. 5, стр. 521, 2017.

[28] ЈМЦ Гуттеридге, Р. Рицхмонд и Б. Халливелл, "Инхибиција гвожђем катализованог формирања хидроксил радикала из супероксида и пероксидације липида помоћу десфериоксамина," Биоцхемицал Јоурнал, вол. 184, бр. 2, стр. 469–472, 1979.

[29] Е. Дериу, ЈЗ Лиу, М. Пезесхки, ет ал., "Пробиотичке бактерије смањују колонизацију црева салмонеле Типхимуриум надметањем за гвожђе", Целл Хост & Мицробе, вол. 14, бр. 1, стр. 26–37, 2013.

[30] Т. Куллисаар, М. Зилмер, М. Микелсаар, ет ал., "Два антиоксидативна соја лактобацила као обећавајући пробиотици," Интернатионал Јоурнал оф Фоод Мицробиологи, вол. 72, бр. 3, стр. 215–224, 2002.

[31] ЈГ ЛеБланц, С. дел Цармен, А. Мииосхи, ет ал., "Употреба супероксид дисмутазе и каталазе које производе бактерије млечне киселине у ТНБС-у изазвала је Кронову болест код мишева", Јоурнал оф Биотецхнологи, вол. 151, бр. 3, стр. 287–293, 2011.

[32] М. Росси, А. Амаретти и С. Раимонди, "Производња фолата од стране пробиотичких бактерија", Нутриентс, вол. 3, бр. 1, стр. 118–134, 2011.

[33] А. Помпеи, Л. Цордисцо, А. Амаретти, ет ал., "Примена бифидобактерија које производе офолат побољшава статус фолата код пацова Вистар", 8е Јоурнал оф Нутритион, вол. 137, бр. 12, стр. 2742–2746, 2007.

[34] Л.-Кс. Ванг, К. Лиу, ДВ Гао, и ЈК Хао, "Протецтивееффецтс оф тво Лацтобациллус Плантарум сој ин хиперлипидемиц мишева", Ворлд Јоурнал оф Гастроентерологи, вол. 19, бр. 20, стр. 3150–3156, 2013.

[35] ЕО Петроф, К. Којима, МЈ Ропелески, ет ал., "Пробиотици инхибирају нуклеарни фактор-κБ и индукују протеине топлотног шока у епителним ћелијама црева кроз инхибицију протеазома", Гастроентерологи, вол. 127, бр. 5, стр. 1474–1487, 2004.

[36] А. Сетх, Ф. Иан, ДБ Полк и РК Рао, "Пробиотици побољшавају поремећај епителне баријере изазване водоник пероксидом механизмом зависним од ПКЦ и МАП киназе", Америцан Јоурнал оф Пхисиологи-Гастроинтестинал анд Ливер Пхисиологи, вол. 294, бр. 4, стр. Г1060–Г1069, 2008.

[37] М. Гомез-Гузман, М. Торал, М. Ромеро, ет ал., "Антихипертензивни ефекти сојева пробиотика лактобацила код спонтано хипертензивних пацова," Молецулар Нутритион & ФоодРесеарцх, вол. 59, бр. 11, стр. 2326–2336, 2015.

[38] Х. Зенг, Л. Хуанг, Л. Зхоу, П. Ванг, Кс. Цхен и К. Динг, "Галактоглукан изолован из Цистанцхедесертицола ИЦ Ма. и његова биоактивност на сојеве цревних бактерија," Царбохидрате Полимерс, вол. 223, ИД чланка 115038, 2019.

[39] С. Зхенг, Кс. Јианг, Л. Ву, З. Ванг, и Л. Хуанг, "Хемијска и генетска дискриминација цистанцхес херба заснована на УПЛЦ-КТОФ/МС и ДНК баркодирању", ПЛоС Оне, вол. 9, бр. 5, ИД чланка е98061, 2014.

[40] М. Ли, Т. Ксу, Ф. Зхоу и сарадници, "Нуропротективни ефекти четирифенилетаноидних гликозида на Х2О2-индуковану апоптозу на ПЦ12 ћелијама путем Нрф2/АРЕ пута," Интернатионал Јоурналоф Молецулар Сциенцес, вол. 19, бр. 4, стр. 1135, 2018.

[41] А. Ву, З. Ианг, И. Хуанг ет ал., „Природни фенилетаноидгликозиди изоловани из Цаллицарпа квангтунгенсис сузбијају упални одговор посредован липополисахаридима путем активирања Кеап1/Нрф2/ХО-1 пута 4 у ћелији РАВ, мацропхаге. „ Часопис за етнофармакологију, књ. 258, ИД члана 112857, 2020.

[42] ГМ Доуглас, ВЈ Маффеи, ЈР Заневелд ет ал., "ПИЦРУСт2фор предвиђање функција метагенома," Натуре Биотецхнологи, вол. 38, бр. 6, стр. 685–688, 2020.

[43] Х.-Л. Ли, Л. Лу, Кс.-С. Ванг и сарадници, „Промена цревних микробиота и инфламаторних профила цитокина/хемокина у 5- интестиналном мукозитису изазваном флуоро урацилом“, Фронтиерс ин Целлулар анд Инфецтион Мицробиологи, вол. 7, стр. 455, 2017.

[44] М. Памми, Ј. Цопе, ПИ Тарр, ет ал., "Интестинална дисбиоза недоношчади која претходи некротизирајућем ентероколитису: систематски преглед и мета-анализа," Мицробиоме, вол. 5, бр. 1,п. 31, 2017.

[45] Н.-Р. Шин, ТВ Вхен и Ј.-В. Бае, "Протеобактерије: микробни потпис дисбиозе у цревној микробиоти", Трендс ин Биотецхнологи, вол. 33, бр. 9, стр. 496–503, 2015.

[46] М. де Оливеира Белем, ЦП Цирило, АП де Санти-Рампаззоет ал., "Прилагођавања морфологије црева узрокована ограничењем у исхрани побољшавају нутритивни статус током процеса старења пацова," Екпериментал Геронтологи, вол. 69, стр. 85–93, 2015.

[47] Б. Потсиц, Н. Холлидаи, П. Левис, Д. Самуелсон, В. ДеМарцо и Ј. Неу, "Додавање глутамина и депривација: ефекат на морфологију танког црева вештачки узгајаних пацова", Педијатријска истраживања, вол. 52, бр. 3, стр. 430–436, 2002.

[48] ​​ЈЛ Даниелс, РЈ Блоомер, М. ван дер Мерве, СЛ Давис, КК Буддингтон и РК Буддингтон, "Интестиналне адаптације на комбинацију различитих дијета са и без вежбања издржљивости," Јоурнал оф тхе Интернатионал Социети оф Спортс Нутритион, вол. 13, бр. 1, стр. 35, 2016.

[49] Л. Муноз, МЈ Борреро, М. Убеда ет ал., "Интестинална имунолошка дисрегулација изазвана дисбиозом промовише поремећај баријере и транслокацију бактерија код пацова са цирозом," Хепатологи, вол. 70, бр. 3, стр. 925–938, 2019.

[50] Кс. Ли, И. Ву, З. Ксу ет ал., "Ефекти хетиао јианпи децоцтион он интестиналне повреде и поправке код пацова са дијарејом повезаном са антибиотицима," Медицал Сциенце Монитор, вол. 26, чланак ИДе921745, 2020.

[51] И. Ксие, Ф. Динг, В. Ди ет ал., "Утицај исхране са високим садржајем масти на цревне матичне ћелије и функцију епителне баријере код средовечних женки мишева", Извештаји о молекуларној медицини, вол. 21, бр. 3, стр. 1133–1144, 2020.

[52] БЛ Биволарски и ЕГ Вацхкова, "Морфолошки и функционални догађаји повезани са одбивањем код зечева," Јоурнал оф Анимал Пхисиологи анд Анимал Нутритион, вол. 98, бр. 1, стр. 9–18, 2014.

[53] Х. Схимода, Ј. Танака, И. Такахара, К. Такемото, С.-Ј. Схан и М.-Х. Су, "*е хипохолестеролемијски ефекти екстракта Цистанцхетубулоса, кинеске традиционалне сирове медицине, мишеви", 8е Америцан Јоурнал оф Цхинесе Медицине, вол. 37, бр. 6, стр. 1125–1138, 2009. [54] РЕ Леи, ПЈ Турнбаугх, С. Клеин и ЈИ Гордон, "Хумангутни микроби повезани са гојазношћу", Натуре, вол. 444, бр. 7122, стр. 1022-1023, 2006.

[55] Ј.-И. Ким, ИМ Квон, И.-С. Ким ет ал., „Ефекти додатка браон морској трави ламинариа јапоница на концентрацију ИгГ, триглицерида и холестерола у серуму, и састав цревне микробиоте код пацова,“ Фронтиерс ин Нутритион, вол. 5, стр. 23, 2018.

[56] В. Зханг, Ј. Хуанг, В. Ванг ет ал., "Екстракција, пречишћавање, карактеризација и антиоксидативна активност полисахарида из Цистанцхе тубулоса," Интернатионал Јоурнал оф БиологицалМацромолецулес, вол. 93, стр. 448–458, 2016.

[57] М. Сибаи, Е. Алтунтас¸, Б. Иıлдıрıм, Г. Озт¨урк, С. Иıлдıрıм и ¨Т. Демирцан, "Микробиом и дуговечност: велика количина Мурибацулацеае повезаних са дуговечношћу у цревима дуговечног глодара Спалак леуцодон", ОМИЦС: Јоурнал оф ИнтегративеБиологи, вол. 24, бр. 10, стр. 592–601, 2020.

[58] И. Ксие, З. Цхен, Д. Ванг ет ал., "Ефекти остатака ферментисаног хербалтеа на карактеристике цревне микробиоте Холштајн јуница под топлотним стресом", Фронтиерс ин Мицробиологи, вол. 11, стр. 1014, 2020.

[59] И. Ли, М. Лиу, Х. Лиу ет ал., "Орални додаци комбинованих Бациллус лицхениформис зхенгцхангсхенг и ксилоолигосахарида побољшавају гојазност изазвану исхраном са високим садржајем масти и модулишу микробиоту црева код пацова", БиоМед Ресеарцх Интернатионал, вол. 2020, ИД чланка 9067821, 17 страна, 2020.

[60] И. Јианг и П.-Ф. Ту, "Анализа хемијских састојака инцистанцхе врста", Јоурнал оф Цхроматограпхи А, вол. 1216, бр. 11, стр. 1970–1979, 2009.

[61] Ф. Ли, И. Ианг, П. Зху ет ал., "Ехинакозид промовише регенерацију костију повећањем односа ОПГ/РАНКЛ у МЦ3Т3-Е1 ћелијама," Фитотерапиа, вол. 83, бр. 8, стр. 1443–1450, 2012.

[62] Ф. Танг, И. Хао, Кс. Зханг и Ј. Кин, "Ефекат ехинакосидеонске фиброзе бубрега инхибицијом ТГФ- 1/Смадс сигналног пута у дб/дб моделу мишева дијабетичке нефропатије," Дизајн, развој и терапија лекова, вол. 11, стр. 2813–2826, 2017.

[63] В.-Т. Ксионг, Л. Гу, Ц. Ванг, Х.-Кс. Сун, и Кс. Лиу, "Антихипергликемијски и хиполипидемијски ефекти Цистанцхе тубулоса код дијабетичких дб/дб мишева типа 2", Јоурнал оф Етхнопхармацологи, вол. 150, бр. 3, стр. 935–945, 2013.

[64] Кс.-к. Бао, Х.-х. Ма, Х. Динг, В.-в. Ли, и М. Зху, "Прелиминарна оптимизација формуле кинеског биљног лека заснована на неуропротективним ефектима у пацовском моделу Паркинсонове болести изазване ротеноном", Јоурнал оф ИнтегративеМедицине, вол. 16, бр. 4, стр. 290–296, 2018.

[65] И. Цхен, И.-К. Ли, Ј.-И. Фанг, П. Ли и Ф. Ли, "Успостављање истовременог експерименталног модела остеопорозе комбиноване са Алцхајмеровом болешћу код пацова и двоструким ефектима ехинакозида и актеозида из Цистанцхе тубулоса," Јоурналоф Етхнопхармацологи, вол. 257, ИД члана 112834, 2020.

[66] М. Хенсел, АП Хинслеи, Т. Николаус, Г. Саверс и Б. Ц. Беркс, "*е генетичка основа тетратионатног дисања код Салмонелла типхимуриум," Молецулар Мицробиологи, вол. 32, бр. 2, стр. 275–287, 1999.

[67] СЕ Винтер, П. Тхиеннимитр, МГ Винтер ет ал., "Упала црева обезбеђује респираторни акцептор електрона за Салмонелу", Натуре, вол. 467, бр. 7314, стр. 426–429, 2010.

[68] СЕ Винтер, МГ Винтер, МН Ксавиер ет ал., "Хост-дериведнитрате подстиче раст Е. цоли у упаљеном цреву," Сциенце, вол. 339, бр. 6120, стр. 708–711, 2013.

[69] Ц. Лупп, МЛ Робертсон, МЕ Вицкхам ет ал., "Упала посредована домаћином омета цревну микробиоту и промовише прекомерни раст Ентеробацтериацеае", Целл Хост & Мицробе, вол. 2, бр. 2, стр. 119–129, 2007.

[70] Б. Стецхер, Р. Роббиани, АВ Валкер ет ал., "Салмонеллаентерица серовар типхимуриум користи упалу да се такмичи са цревном микробиотом", ПЛоС Биологи, вол. 5, бр. 10, стр. е244–2189, 2007.

[71] В. Мисхра, Ц. Схах, ​​Н. Мокасхе, Р. Цхаван, Х. Иадав и Ј. Прајапати, "Пробиотици као потенцијални антиоксиданси: систематски преглед", Јоурнал оф Агрицултурал анд Фоод Цхемистри, вол. 63, бр. 14, стр. 3615–3626, 2015.

[72] ЈМП Март´ıн, ПФ Фреире, Л. Даимиел ет ал., "*е антиоксидант-бутилирани хидроксианизол потенцира токсичне ефекте пропилпарабена у култивисаним ћелијама сисара," Фоод андЦхемицал Токицологи, вол. 72, стр. 195–203, 2014.

[73] РС Ланиган и ТА Иамарик, "Коначни извјештај о процјени сигурности БХТ-а," Интернатионал Јоурнал оф Токицологи, вол. 21, бр. 2, стр. 19–94, 2002