Нове улоге покретних епидермалних хлоропласта у имунитету биљака

Апстрактан:

Епидермис биљке садржи атипичне мале хлоропласте. Међутим, физиолошка улога ове органеле је нејасна у поређењу са великим хлоропластима мезофила, чија је добро позната функција фотосинтеза. Иако је знање о учешћу хлоропласта у имунитету биљака до данас проширено, разлике између епидермалних и мезофилних хлоропласта су ван оквира ове студије. С обзиром на улогу биљног епидермиса као баријере за стресове из околине, укључујући нападе патогена, и имунолошку функцију хлоропласта, истраживање биљне одбране на епидермалним хлоропластима је поље у настајању. Недавне студије су откриле динамичке покрете епидермалних хлоропласта као одговор на гљивичне и оомицетне патогене. Штавише, пријављени су протеини повезани са епидермалним хлоропластом и ћелијски догађаји који су уско повезани са отпорношћу епидерме на патогене. У овом прегледу, фокусирао сам се на недавни напредак у имуности биљака посредованим епидермалним хлоропластом.

Кључне речи: епидермални хлоропласт; кретање хлоропласта; стромуле; биљни патоген; пенетрација; отпорност без домаћина; преинвазивна одбрана; Арабидопсис тхалиана; Ницотиана бентхамиана; ЦХУП1.

Имунитет биљака и људски имунитет су два различита одбрамбена механизма и постоје очигледне разлике:

1. Различити патогени против којих се треба борити: биљке се углавном одупиру биолошким патогенима као што су бактерије, гљиве и вируси, док се људски имунитет углавном одупире бактеријама и вирусима.

2. Различите методе имуног одговора: имунитет биљака се углавном брани од патогена кроз физичку изолацију, хемијску инхибицију и регулацију гена, док се људски имунитет углавном одупире патогенима кроз макрофаге, Т ћелије и Б ћелије.

3. Различита имунолошка специфичност: Имунитет биљака усваја исти метод одбране од свих патогена, односно неспецифичан имунитет, док је људски имунитет специфичан, способан да препозна и произведе одговарајуће имуне одговоре против специфичних патогена.

4. Другачија имунолошка меморија: Биљке немају способност имунолошког памћења, то јест, када се одупру одређеном патогену, и даље морају да поново покрену имунолошки одговор следећи пут када се суоче са истим патогеном. Људски имуни систем има способност имунолошког памћења, односно, након отпора патогену, имаће дугорочну имунолошку меморију за овај патоген, а следећи пут када се поново сусретне са истим патогеном, може брзо да генерише имуни одговор. , чиме се ефикасно контролише патоген Инфецт. Дакле, у поређењу, наш људски имунитет је такође веома важан. Морамо да се фокусирамо на побољшање нашег имунитета. Цистанцхе десертицола то може. Полисахариди у месу могу регулисати имуни одговор људског имуног система и побољшати стресну способност имуних ћелија. , Појачати бактерицидни ефекат имуних ћелија.

Кликните додатак цистанцхе десертицола

1. Представљање

Епидерма вишећелијских организама, укључујући биљке, делује као баријера за заштиту од разних стресова као што су промене у спољашњем окружењу и напади патогена. Из перспективе патогена, пробијање епидермалних ћелија биљке је суштински први корак у инвазији; посебно, гљивични и оомицетни патогени треба да продру директно у епидерму биљке и да развију инвазивне хифе унутра за успешну инфекцију. На пример, гљиве антракнозе Цоллетотрицхум и гљива пиринча Пирицулариа оризае (син. Магнапортхе оризае) формирају меланизовану ћелију у облику куполе звану апресоријум на површини биљке да би развили клин за продор у епидерму биљака домаћина, праћен инвазивним проширење хифа и избијање деструктивне болести [1].

Међутим, ако биљка није домаћин, ови гљивични патогени могу да формирају меланизовани апресоријум, али не могу да продру у епидермалне ћелије због пре-инвазивне не-домаћинске резистенције (НХР) биљака, која генерално обезбеђује издржљив, робустан и имунитет широког спектра и ефикасно спречава инвазија огромног броја неприлагођених гљива и оомицета у некомпатибилним интеракцијама [2,3]. У моделу капуњасте биљке Арабидопсис тхалиана, објављено је да многи имунолошки путеви и компоненте подржавају примену епидермалног НХР-а на вишеслојни начин против уласка неприлагођених гљивичних и оомицетних патогена, као што је Блумериа граминис ф. сп. хордеи [4–12], Цоллетотрицхум тропицале [13–16], П. оризае [17–22] и Пхитопхтхора инфестанс [6,7]. Међутим, потпуно разумевање молекуларне основе преинвазивног НХР остаје неухватљиво. Да би се стекло свеобухватно разумевање НХР-а, важно је идентификовати непознате догађаје и компоненте везане за имунитет у биљној епидерми.

Код виших биљака, осим неколико биљака, као што је дуван, дуго се веровало да у епидермалним ћелијама не постоје хлоропласти осим ћелија чувара [23–26]. Већина студија о хлоропласту се фокусира на ћелије мезофила, где су бројни типични велики хлоропласти високо диференцирани за фотосинтезу [27–29]. Међутим, атипични мали хлоропласти који садрже хлорофил такође су примећени у ћелијама епидермалног коловоза А. тхалиана, иако су тилакоиди, који су одговорни за реакције фотосинтезе зависне од светлости, слабо развијени [30–36]. Стога је физиолошка улога епидермалних хлоропласта тема у настајању у области науке о биљкама.

Познато је да хлоропласти функционишу као сензори животне средине против вишеструких биотичких и абиотичких стресова [37,38]. На пример, за имуни одговор биљака на патогене, секундарни преносиоци, као што су реактивне врсте кисеоника (РОС) и калцијум (Ца2 плус), и прекурсори фитохормона, као што су салицилна киселина (СА), јасмонска киселина и абсцизинска киселина, су сви потичу од хлоропласта [39–42]. Постоји много одличних рецензија о улози хлоропласта у имунитету биљака. Упућујем читаоце на недавне прегледе, који ће пружити преглед одговора на одбрану биљака везаних за хлоропласт [43–47].

Међутим, постоји врло мало студија одбране биљака које се фокусирају на епидермалне хлоропласте, а функционалне разлике између епидермалних и мезофилних хлоропласта у имунолошком систему биљака нису привукле велику пажњу. Недавно су неки извештаји показали учешће епидермалних хлоропласта у имунитету биљака. У овом прегледу, примарни фокус је на епидермалним хлоропластима, а описан је и недавни напредак у епидермалном имунитету биљака.

2. Одговор епидермалног хлоропласта контролише улазак гљивичних патогена у А. тхалиана

2.1. Интрацелуларни покрети епидермалних хлоропласта као одговор на гљивичне патогене у А. тхалиана

У стабилном стању А. тхалиана, епидермални хлоропласти се не примећују у близини горњег периклиналног зида (површине) коловозних ћелија, јер се обично налазе на доњем периклиналном (доњем) и антиклиналном зиду. У недавном извештају, открио сам да су се епидермални хлоропласти појавили на површини коловозних ћелија као одговор на гљивице Цоллетотрицхум са формирањем меланизованог апресоријума, и назвао сам овај феномен епидермални хлоропластни одговор (ЕЦР) (слика 1) [48].

Interestingly, ECR occurs more strongly against nonadapted fungi such as the Japanese flowering cherry pathogen Colletotrichum nymphaea PL1-1-b, the cosmos pathogen Colletotrichum fioriniae CC1, and the apple pathogen Colletotrichum siamense MAF1, compared to the adapted Brassicaceae pathogen Colletotrichum higginsianum Abr1-5, which readily penetrates and infects wild-type plants of A. thaliana [48]. Furthermore, the frequency of ECR varies according to the nonadapted fungal strains; the order of ECR-inducing ability in the wild-type plant is as follows: C. nymphaea PL1-1-B > C. fioriniae CC1 > C. siamense MAF1, while two other nonadapted strains, hau tree pathogen C. siamense COC4, and cucurbit pathogen Colletotrichum orbiculare 104-T, do not trigger ECR in the wild-type plant [48]. Importantly, C. siamense COC4 and C. orbiculare 104-T sufficiently induce ECR in plants with a mutation in the PEN2 gene [48], which encodes an atypical myrosinase that works as a core preinvasive NHR contributor against many fungal and oomycete pathogens [6,9,13,17,48–50], although these two nonadapted pathogens cannot invade pen2 mutants. The frequencies of ECR in the pen2 mutant against C. fioriniae CC1 and C. siamense MAF1 are also higher than those in the wild-type plant, whereas other single mutants of immune-related genes such as EDR1, GSH1 EDS5, and CAS have little effect on ECR [48]. These results suggest that ECR is preferentially activated when PEN2-based antifungal preinvasive defense becomes ineffective in epidermal cells. Similarly, in penetration tests on multiple Arabidopsis mutants with many immune-related mutations, these five nonadapted Colletotrichum strains displayed the differential abilities to overcome preinvasive NHR in the same order as the ECR-inducing ability; C. nymphaea PL1-1-B and C. fioriniae CC1 can invade the epidermis of the wild-type plant to some degree and more of the pen2 mutant, whereas C. siamense MAF1, COC4, and C. orbiculare 104-T can break through the epidermal NHR only in the presence of pen2 mutation or with additional mutations such as edr1, gsh1, eds5, and cas (Figure 2, Redrawn from [51]) [48,51]. Thus, there is a tight link between ECR induction in plants and the invasion ability of the nonadapted Colletotrichum fungi, which implies the involvement of ECR in epidermal preinvasive NHR, because these fungal pathogens are incompatible with and definitely cannot infect A. thaliana. The contribution of ECR to preinvasive NHR is described in a later section. Int. J. Mol. Sci. 2022, 23, x FOR PEER REVIEW 3 of 17 readily penetrates and infects wild-type plants of A. thaliana [48]. Furthermore, the frequency of ECR varies according to the nonadapted fungal strains; the order of ECR-inducing ability in the wild-type plant is as follows: C. nymphaea PL1-1-B > C. fioriniae CC1 >Ц. сиаменсе МАФ1, док два друга неприлагођена соја, патоген хау дрвета Ц. сиаменсе ЦОЦ4 и патоген тиквице Цоллетотрицхум орбицуларе 104-Т, не изазивају ЕЦР у биљци дивљег типа [48].

Важно је да Ц. сиаменсе ЦОЦ4 и Ц. орбицуларе 104-Т у довољној мери индукују ЕЦР код биљака са мутацијом гена ПЕН2 [48], који кодира атипичну мирозиназу која делује као кључни преинвазивни НХР доприноситељ против многих гљивица и оомицета. патогени [6,9,13,17,48–50], иако ова два неприлагођена патогена не могу да нападну пен2 мутанте. Учесталости ЕЦР у пен2 мутанту против Ц. фиориниае ЦЦ1 и Ц. сиаменсе МАФ1 су такође веће од оних у биљци дивљег типа, док други појединачни мутанти гена повезаних са имунитетом као што су ЕДР1, ГСХ1 ЕДС5 и ЦАС имају мало ефекат на ЕЦР [48]. Ови резултати сугеришу да се ЕЦР првенствено активира када антифунгална преинвазивна одбрана заснована на ПЕН2-у постане неефикасна у ћелијама епидерме.

Слично, у тестовима пенетрације на вишеструким Арабидопсис мутантима са много мутација повезаних са имунитетом, ових пет неприлагођених сојева Цоллетотрицхум показало је диференцијалне способности да превазиђу преинвазивни НХР у истом редоследу као и способност индукције ЕЦР; Ц. нимпхаеа ПЛ1-1-Б и Ц. фиориниае ЦЦ1 могу да нападну епидермис биљке дивљег типа до одређеног степена и више пен2 мутанта, док Ц. сиаменсе МАФ1, ЦОЦ4 и Ц. орбицуларе {{8 }}Т може да пробије епидермални НХР само у присуству пен2 мутације или са додатним мутацијама као што су едр1, гсх1, едс5 и цас (Слика 2, поново нацртана из [51]) [48,51]. Дакле, постоји тесна веза између индукције ЕЦР у биљкама и инвазивне способности неприлагођених Цоллетотрицхум гљивица, што имплицира умешаност ЕЦР у епидермални преинвазивни НХР, јер су ови гљивични патогени некомпатибилни и дефинитивно не могу да инфицирају А. тхалиана. Допринос ЕЦР преинвазивном НХР мутанти Арабидопсис који нису домаћини су процењени на основу стопа уласка посредованог меланизованим апресоријумом (МАЕ) и класификовани. Стопа МАЕ (проценти) је израчуната коришћењем следеће нумеричке формуле: (број меланизованих апресорија са формирањем инвазивне хифе)/(број меланизованих апресорија). Адаптирани Ц. хиггинсианум Абр1-5 (МАФФ305635) је приказан као контрола. Проценат тестова уноса гљивица као "−", " плус /−", " плус ", " плус плус ", " плус плус плус " и " плус плус плус плус плус " је 0–2 процента, 2–10 процената, 10–20 процената, 20–35 процената, 35–60 процената и 60–100 процената, респективно. нд: није утврђено. Преузето из [51].

ЕЦР није специфичан за Цоллетотрицхум. Епидермални хлоропласти се такође појављују на површини након инокулације неприлагођеним патогеном П. оризае, који показује инвазију биљака типа меланизованог апресоријум-посредованог уласка (МАЕ), али је филогенетски далеко сродан са Цоллетотрицхум [48]. Учесталост ЕЦР-а изазваног П. оризае такође се повећава код пен2 мутанта. Дакле, ЕЦР може бити епидермални одговор широког спектра на широк спектар гљивичних патогена. Ова идеја је у складу са новим открићем да неприлагођена гљива Алтернариа алтерната, која није патоген типа МАЕ и формира меланизоване конидије, такође индукује ЕЦР код А. тхалиана који није домаћин, посебно у присуству пен2 мутације (Слика 3) .

2.2. Окидач одговора епидермалног хлоропласта

Иако остаје отворено питање како епидермис биљке препознаје гљивичне патогене и индукује ЕЦР, неки подаци указују на фасцинантну корелацију између карактеристика које се односе на испитивање уласка гљивица и индукције ЕЦР [48]. Неки од добро проучених молекула добијених од патогена су молекуларни обрасци повезани са патогеном/микробом (ПАМП/МАМП), који су високо конзервирани међу патогенима широког спектра и доприносе њиховој одрживости [52]. Молекуларни обрасци повезани са оштећењем (ДАМП), молекули добијени од домаћина као што је Пеп1 који се ослобађају екстрацелуларно током инвазије патогена, такође су сигнали за урођене имуне одговоре [53]. ПАМП/ДАМП се препознају помоћу рецептора за препознавање биљних узорака (ПРР), а имунитет изазван ПАМП/ДАМП се покреће преко протеина повезаних са ПРР, као што су РЛП 23 и РЛП30, протеини слични рецепторима (РЛП), ФЛС2 и БАК1. , мембрански уграђене рецепторске киназе (РЛК) и БИК1 и ПБЛ1, цитоплазматске киназе сличне рецепторима (РЛЦК) [54–61].

Изузетне критике о ПРР сигнализацији у имунитету биљака објавило је неколико истраживача [62–65]. Занимљиво је да ЕЦР не зависи од БАК1, БИК1, ПБЛ1, Пеп{5}}осетљивих РЛКс, ПЕПР1 и ПЕПР2; стога, ПАМП и/или ДАМП сигнални догађаји, барем они посредовани овим РЛК и РЛЦК, нису укључени у индукцију ЕЦР [48]. Штавише, квантификација ЕЦР у пен2 мутантној биљци против вишеструких мутаната Ц. орбицулар који недостају у различитим корацима морфогенезе повезане са инвазијом, открила је да је формирање пенетрационог клина, игличасте гљивичне структуре која излази из апресоријума за успешан улазак у биљку епидермис, неопходан је за индукцију ЕЦР [48].

Биљне патогене гљиве и оомицете луче арсенал вирулентних протеина, званих ефектори, да манипулишу биљним ћелијским процесима и индукују супресију имунитета. Објављени су бројни прегледи о ефекторима биљних патогена [66–70]. Код Цоллетотрицхум, флуоресцентно обележени ефекторски протеини првенствено се акумулирају у доњој пору апресоријума за излучивање кроз пенетрациони клин [71,72]. Ова ефекторска секреција зависи од в-СНАРЕ СЕЦ{{5}посредованог интрацелуларног саобраћајног пута у гљивици [72] и, што је занимљиво, корелира са индукцијом ЕЦР [48]. Ова запажања наговештавају следеће потенцијалне кандидате као покретаче ЕЦР-а: (и) молекул(и) пореклом из патогена који се излучују из клина за пенетрацију током покушаја уласка гљивица и (ии) сигнал(и) пореклом из биљака генерисани као одговор на степен гљивична прогресија у покушају продирања. ЕЦР је универзални догађај против многих типова гљивичних патогена, укључујући врсте Цоллетотрицхум, П. оризае и А. алтерната (Слика 3) [48]. Стога, типични ефектори који су ограничени на уски опсег гљивичних патогена због специфичности свог домаћина можда неће бити знак ЕЦР; уместо тога, уобичајени ензими који разграђују ћелијске зидове или високо конзервирани главни ефектори широког спектра патогених гљива или сигнали оштећења биљака који нису повезани са Пеп1 могу покренути ЕЦР у биљној епидерми.

2.3. Регулатори одговора епидермалног хлоропласта и преинвазивне нехостове отпорности Арабидопсис-а

Велики мезофилни хлоропласти показују унутарћелијске покрете на основу интензитета светлости за безбедну и ефикасну фотосинтезу; они беже од јаког светла и мигрирају ка антиклиналним зидовима ћелије да би спречили фотооштећење (одговор избегавања) и крећу се ка слабом светлу и таложе се на периклиналним зидовима како би повећали фотосинтетичку ефикасност (одговор акумулације). Многи регулаторни протеини овог адаптивног феномена, који се називају покрети фоторелокације хлоропласта, идентификовани су унутар ћелија мезофила [73]. Међутим, постоји мало извештаја, а мало се зна о компонентама које контролишу интрацелуларно кретање епидермалних хлоропласта [74,75]. У том контексту, недавно сам показао да ЕЦР у епидермалним ћелијама дели заједничке регулаторне протеине са покретима фоторелокације мезофила хлоропласта [48]. Протеин који везује актин ЦХУП1 генерише покретачку силу засновану на хлоропласту актина и неопходан је и за акумулацију и за реакције избегавања [76–78], док протеин Ј-домена сличан ауксилину ЈАЦ1 регулише појаву и нестанак филамената хлоропласт-актина. и потребан је за одговор акумулације [79]. Генетски модификована А. тхалиана показује да прекомерна експресија ЦХУП1 протеина изазива снажну супресију ЕЦР.

Типично, епидермални хлоропласти се једва откривају на површини, чак и након инокулације неприлагођеним гљивичним патогенима [48]. Међутим, прекомерна експресија ЈАЦ1 или брисање ЦХУП1 доводи до конститутивног позиционирања епидермалних хлоропласта на површини, без обзира на инокулацију гљивица [48]. Дакле, ЦХУП1 и ЈАЦ1 регулишу негативно и позитивно, респективно, позиционирање епидермалних хлоропласта на површини коловозних ћелија (слика 4). Важно је напоменути да је инокулација мутанта цхуп1 са високим концентрацијама неприлагођених гљива само незнатно повећала популацију површинских хлоропласта, што указује на оштећење ЕЦР-а због исцрпљивања ЦХУП1 протеина. Насупрот томе, фототропин 1 и 2, који су рецептори плаве светлости одговорни за кретање фоторелокације хлоропласта [80–82], неопходни су за активацију ЕЦР [48]. Стога, локација фотографије хлоропласта и ЕЦР имају различите системе за препознавање стимулуса за светлост и патогене, респективно, али деле бар неке низводне регулаторне компоненте. Са становишта разлика између мезофила и епидермалних хлоропласта, разноврсност адаптивних система против различитих стресова животне средине може одражавати разрађену стратегију преживљавања биљке.

Фасцинантно је питање да ли ЕЦР доприноси имунитету биљака у епидермалним ћелијама А. тхалиана. Да би се разјаснило учешће ЕЦР-а у преинвазивном НХР-у, истражени су ефекти оштећења ЕЦР-а прекомерном експресијом или исцрпљивањем ЦХУП1 протеина на МАЕ стопу више неприлагођених гљива у биљној епидерми [48]. Ц. нимпхаеа ПЛ1-1-Б, који је показао релативно нижу некомпатибилност са А. тхалиана у поређењу са другим неприлагођеним гљивама, показао је повећану стопу МАЕ код биљака са оштећењем ЕЦР (Слика 2) [48]. Штавише, у биљкама са пен2 или другим додатним мутацијама као што су едр1, гсх1, едс5 и цас, повећање или смањење нивоа ЦХУП1 протеина је промовисало МАЕ стопу Ц. фиориниае ЦЦ1, Ц. сиаменсе МАФ1, ЦОЦ4 и Ц орбицуларе 104-Т (слика 2) [48]. Слични резултати су добијени за стопу МАЕ код П. оризае. Сходно томе, ЕЦР је одговор биљке на стрес, којим се преинвазивни НХР појачава у епидермалним ћелијама када гљивични патогени покушају инвазију кроз пенетрациони клин.

Као што је описано, ЕЦР се првенствено активира у одсуству ПЕН{0}}одбрамбеног пута. Слично, инокулација неприлагођеног Ц. фиориниае ЦЦ1 је такође изазвала експресију многих гена повезаних са одбраном, као што су ПАД3, ЦИП79Б2, ЦИП71А13, ПДФ1.2а, МИБ51, ПР1, ФРК1 и НХЛ10, само у случају пен2 мутације иако је праг за ЕЦР био нижи од оног за експресију ових гена [48]. На основу слојевите структуре биљног НХР-а, ЕЦР је један од одбрамбених одговора који је програмиран да подржи преинвазивни НХР када су путеви укључени у преинвазивну одбрану вишег слоја, укључујући путеве повезане са ПЕН{17}}, неефикасни [ 48,51].

Ово је у складу са односом између А. тхалиана и ниже некомпатибилног неприлагођеног патогена Ц. нимпхаеа ПЛ1-1-Б, који делимично превазилази преинвазивну одбрану високог слоја [51]; Ц. нимпхаеа ПЛ1-1-Б снажно покреће ЕЦР и такође индукује гене везане за одбрану у биљци дивљег типа [48]. Претпоставља се да постоји у природи неколико фитопатогених гљива, као што је Ц. нимпхаеа ПЛ1-1-Б, које делимично превазилазе преинвазивну одбрану А. тхалиана вишег слоја. Због тога су биљке развиле ЕЦР као један од механизама епидермалног НХР против ових врста гљивичних патогена (Слика 4).

3. Епидермалне хлоропластне имуне компоненте доприносе преинвазивној антифунгалној отпорности Арабидопсиса

3.1. Преференцијална локализација компоненти повезаних са имунитетом на покретне епидермалне хлоропласте у А. тхалиана

Остаје да се потпуно разјасни како ЕЦР доприноси преинвазивном НХР-у против неприлагођених гљивичних патогена. Флуоресцентно снимање живих ћелија открило је да су компоненте повезане са имунитетом, као што су -глутамилцистеин синтетаза ГСХ1, Ца2 плус -сенсинг рецептор ЦАС, транспортер породице МАТЕ ЕДС5, изохоризмат синтаза ИЦС1/СИД2 и аминотрансфераза АЛД1, локализоване у епидермалној пластичној малој хлоро4 пластике. [15,48,83–86]. Занимљиво је да су флуоресцентни сигнали ових компоненти у епидермалним хлоропластима много јачи од оних у великим мезофилним хлоропластима [48,83,85,86]. У ЕЦР-активираним коловозним ћелијама након инокулације са неприлагођеним Ц. фиориниае ЦЦ1, пронађено је да се протеини ГСХ1, ЕДС5 и ЦАС локализују на површини заједно са покретним епидермалним хлоропластима, што указује на чврсту везу између ЕЦР-а и интрацелуларног позиционирања ових имуне компоненте [48]. Ова запажања могу ојачати значај епидермалних хлоропласта у имунитету биљака

3.2. Епидермалне хлоропласт-локализоване имуне компоненте и преинвазивна одбрана код А. тхалиана

ГСХ1 доприноси одбрани биљака путем биосинтезе глутатиона у компатибилним и некомпатибилним интеракцијама А. тхалиана-патоген [15,87]. ЦАС је укључен у пролазну Ца2 плус сигнализацију у хлоропластима током имунитета биљке [88], а ЦАС-циљани гљивични ефектор Сцлеротиниа сцлеротиорум омета СА сигнализацију у биљци домаћину [89]. ИЦС1/СИД2 и ЕДС5 су неопходни за биосинтезу и транспорт СА прекурсора, респективно, током имунолошког одговора биљке [85,90,91]. Чврста веза између ових имунолошких компоненти и епидермалних хлоропласта имплицира њихову укљученост у епидермални НХР против гљивичних патогена који покрећу ЕЦР. Допринос ГСХ1, ЦАС, ЕДС5 и ИЦС1/СИД2 преинвазивном НХР против неприлагођених гљива је демонстриран; Ц. нимпхаеа ПЛ1-1-Б је показала повећану МАЕ у епидермису појединачних мутаната гсх1, цас и едс5 у поређењу са оним у биљци дивљег типа [51], док су слични ефекти ових мутација на МАЕ код Ц. фиориниае ЦЦ1, Ц. сиаменсе МАФ1 и П. оризае су примећени код сваког двоструког мутанта са пен2 мутацијом (Слика 2) [48].

Повећане стопе МАЕ више некомпатибилних Ц. сиаменсе ЦОЦ4 и Ц. орбицуларе 104-Т потврђене су у пен2 мутантним биљкама са вишеструким мутацијама у генима везаним за имунитет (Слика 2) [48]. Према томе, ефекти ових мутираних гена који зависе од пен2-а, који кодирају протеине локализоване у епидермалним хлоропластима, корелирају са ЕЦР-ом који покреће сваки гљивични патоген. Ова студија предлаже да ћелије епидерме Арабидопсис примењују имуни одговор усредсређен на ЕЦР, при чему интрацелуларно репозиционирање протеина повезаних са имунитетом може побољшати антифунгални НХР (Слика 4) [48]. Протеин специфичан за епидермални хлоропласт, АЛД1, је неопходан за локалну резистенцију на болести и системску стечену резистенцију против вирулентних и авирулентних бактеријских патогена, а испољава свој ефекат тако што контролише акумулацију СА [86,92–94]. У будућности би требало да се разјасни да ли АЛД1 такође функционише у преинвазивном НХР против гљивичних патогена.

4. Епидермални хлоропласти се акумулирају на интерфејсу са патогеном оомицета и ЦХУП1 је неопходан за отпорност на продирање у Ницотиана бентхамиана

4.1. Фокална акумулација епидермалних хлоропласта на интерфејсу са патогеном оомицета у Н. бентхамиана

Улога епидермалних хлоропласта као одговор на оомицетни патоген П. инфестанс такође је проучавана у моделу соланацеус биљке Н. бентхамиана [95–97]. У овом одељку помињем недавна истраживања о динамици кретања епидермалног хлоропласта и укључености ЦХУП1 у имунитет актиномицета, иако постоји нејасноћа у вези са адаптивним или неприлагодљивим карактеристикама П. инфестанс на Н. бентхамиана, што показује двосмислену резистенцију везану за узраст. до П. инфестанс; зреле биљке су отпорне, док су младе биљке осетљиве [98].

Током одговора Н. бентхамиана на П. инфестанс, епидермални хлоропласти показују унутарћелијске покрете и акумулирају се на интерфејсу са патогеном хаусторијумом, специјализованим хифама повезаних са инфекцијом, на БАК1-независан начин (слика 5) [96] . Дакле, фокални имунитет посредован епидермалним хлоропластима је предложен у Н. бентхамиана-П. инфестанс патосистем. Сличан феномен је примећен у ЕЦР-активираним ћелијама А. тхалиана током антифунгалног одговора; међутим, већина површинских хлоропласта је била расута у случају ЕЦР-а и, барем под микроскопом, није се повезивала са интерфејсом патогена [48]. С обзиром да се епидермални хлоропласт Н. бентхамиана обично детектује на површини коловозних ћелија, без обзира на инокулацију патогена, механизми рада епидермалних хлоропласта као одговор на нападе патогена нису били потпуно исти између А. тхалиана и Н. бентхамиана.

Штавише, ЦХУП{0}}повезан ЕЦР и фокална акумулација епидермалних хлоропласта на местима продирања гљивица могу бити независни догађаји у А. тхалиана јер је акумулација епидермалних хлоропласта у Н. бентхамиана специфична за интерфејс патогена ЦХУП{{2} }независно (слика 5) [97]. У овом контексту, остаје да се разјасни да ли део епидермалних хлоропласта А. тхалиана, који се фокално акумулирају на местима продирања гљивица, има различиту улогу(е) од епидермалних хлоропласта повезаних са ЕЦР, као и оне у Н. бентхамиана.

4.2. ЦХУП1-Зависно таложење калозе на месту продирања оомицета током епидермалне резистенције Н. бентхамиана

Саваге и др. известили су да се позиционирање епидермалних хлоропласта на граници између Н. бентхамиана и хаусторије П. инфестанс дешава независно од ЦХУП1 [97], што се мало разликовало од Арабидопсис ЕЦР [48]. Међутим, они су показали да је ЦХУП1 неопходан за отпорност на пенетрацију у епидермалним ћелијама Н. бентхамиана против П. инфестанс [97]. Утишавање или нокаутирање два ЦХУП1 алела код Н. бентхамиана повећава осетљивост на П. инфестанс, док акумулација епидермалних хлоропласта око хаусторије није нарушена код ЦХУП1 нокаут мутанта (цхуп1) [97]. Арабидопсис цхуп1 мутант је такође показао смањен преинвазивни НХР против МАЕ неприлагођених гљивичних патогена [48], што указује на важност протеина ЦХУП1 повезаног са хлоропластом у имунитету епидермалних биљака и против оомицета и против гљивичних патогена.

Занимљиво је да фокално таложење калозе на хаусторији П. инфестанс, што је један од одбрамбених одговора биљке, зависи од ЦХУП1-, што сугерише да протеин ЦХУП1 повезан са хлоропластом доприноси епидермалном имунитету против патогена оомицета тако што повећава отпорност на пенетрацију преко таложења калозе (слика 5) [97]. Кључно питање је како постоји веза између овог таложења калозе и фокалне акумулације епидермалних хлоропласта на интерфејсу патогена јер је ЦХУП1 протеин повезан са хлоропластом. С тим у вези, Саваге ет ал. нису показали корелацију између таложења калозе и присуства хлоропласта око хаусторијума [97]. У складу са овим налазом, код А. тхалиана-Ц. орбикуларна некомпатибилна интеракција, таложење калозе није у корелацији са активацијом ЕЦР; Калоза је довољно депонована на местима покушаја пенетрације патогена у биљци дивљег типа, где се ЕЦР једва активира због претходне функције високослојне преинвазивне одбране [48]. Нокаут гена ЦХУП1 у Н. бентхамиана не утиче на друге основне имуне процесе, као што је фосфорилација МАПК изазвана ПАМП-ом, конститутивно активна ћелијска смрт изазвана преосетљивим одговором (ХР) налик на МЕК2ДД, и смрт ћелије изазвана ефекторима [97].

Стога, Саваге ет ал. спекулише да у ЦХУП1-нокауту Н. бентхамиана, смањење производње молекула добијених из епидермалног хлоропласта, као што су прекурсори РОС и СА, може вероватно да изазове оштећење акумулације калозе око хаусторијума. Они такође нису искључили могућност да снимак снимака не одражава тачно учешће мобилизације епидермалног хлоропласта у хаусторији у фокалном таложењу калозе, јер су се хлоропласти можда удаљили од хаусторије након депозиције калозе [97]. Очекујем да будућа истраживања разјасне регулаторни механизам депозиције калозе на интерфејсу патогена преко ЦХУП1 повезаног са хлоропластом код Н. бентхамиана и упореде га са имуним одговорима епидермалних хлоропласта код А. тхалиана.

5. Динамичка морфологија епидермалних хлоропласта и интеракција између органа у биљном имунитету

5.1. Формирање стромуле, проширење и формирање шупљине

Мезофил и епидермални хлоропласти расту динамичке цевасте екстензије зване стромуле, које су испуњене стромом [99]. У епидермалним ћелијама Н. бентхамиана, стромуле се повећавају током антивирусног и антибактеријског имунитета, где долази до смрти ХР ћелија изазване ефекторима [95]. Н. бентхамиана такође индукује формирање стромуле током имунитета изазваног ПАМП-ом против оомицета ИНФ1 поред бактеријског флг22 и гљивичног хитина на БАК1-зависан начин [95,96]. Занимљиво је да је индукција стромуле потиснута ефектором П. инфестанс АВР3а [96]. Индукција стромуле у епидермалним хлоропластима је такође примећена током антибактеријског имунитета код А. тхалиана [95]. Све у свему, ова запажања имплицирају могуће учешће стромула у одбрамбеним реакцијама биљака. Важно је да су покрети хлоропласта и везе са другим органелама, као што су језгра, посредовани стромулама током имунолошког одговора биљака [95,100]. Штавише, стромуле могу да транспортују сигнални молекул РОС који се односи на одбрану и одбрамбени протеин хлоропласта НРИП1 до језгра Н. бентхамиана [95,101]. НРИП1 је неопходан за антивирусну резистенцију код Н. бентхамиана [102]. Протеини повезани са имунитетом ГСХ1, ЕДС5 и ЦАС су такође локализовани на стромуле које се протежу од епидермалних хлоропласта код А. тхалиана, иако је сигнал локализације тилакоидног протеина ЦАС у стромулама слабији од сигнала друга два протеина и може бити артефакт прекомерне експресије [48].

Дакле, у епидермалним ћелијама, компоненте повезане са имунитетом могу динамички да мењају своје позиционирање кроз покрете хлоропласта и даље проширују своју локацију на спољашњост хлоропласта преко стромула током имунолошких одговора. Међутим, такође је веома контроверзно да ли повећане стромуле имају позитивне ефекте на антимикробну резистенцију. Цаплан ет ал. објавили су да су мутанти Н. бентхамиана и Арабидопсис цхуп1 утишани геном ЦХУП1 показали повећане стромуле, које су визуализоване са НРИП1-ГФП фузионим протеином, у одсуству патогена и промовисале смрт ХР ћелија изазвану ефекторима током антивирусног и антибактеријског имуног одговора [95]. Насупрот томе, Саваге ет ал. је показао да цхуп1 мутанти и Н. бентхамиана и А. тхалиана показују смањене стромуле, које су визуелизоване помоћу ГФП-а, у одсуству патогена [97].

Штавише, цхуп1 мутант Н. бентхамиана може у довољној мери индуковати формирање стромуле када је изазван П. инфестанс, упркос његовој повећаној осетљивости на овај патоген [97]. Такође је пријављено смањење преинвазивног НХР код Арабидопсис са мутацијом цхуп1 против гљивичних патогена типа МАЕ [48]. Ова неслагања могу се објаснити у будућим студијама. Важно је напоменути да су у имунитету биљака, индукција стромуле и покрети хлоропласта, као што су ЕЦР и фокална акумулација на интерфејсу патогена, више повезани, али различити догађаји, јер први зависи од ПАМП сигналне киназе БАК1, док други не. Према томе, различити сигнали изведени из патогена могу бити интегрисани кроз систем усредсређен на епидермални хлоропласт да би се ускладили одбрамбени одговори.

Епидермални хлоропласти су знатно мањи од хлоропласта мезофила. Међутим, интригантно, могли су се приметити увећани епидермални хлоропласти у ћелијама активираним ЕЦР-ом, а популација увећаних хлоропласта се постепено повећавала током инкубације са неприлагођеним гљивичним патогенима (Слика 6). У раној фази ЕЦР-а нису примећени увећани хлоропласти. Потврђено је формирање шупљина унутар увећаних епидермалних хлоропласта (слика 6). Физиолошки значај ових промена у морфологији епидермалних хлоропласта током ЕЦР-а тренутно је нејасан, али епидермални хлоропласти могу побољшати преинвазивни НХР путем ових додатних догађаја у касној фази ЕЦР-а. Алтернативно, на морфологију органела биљака могу утицати ефектори патогена, јер је пријављено да пролазна експресија ефекторских протеина Цоллетотрицхум доводи до повећања језгара у епидермалним ћелијама Н. бентхамиана [103]. Ако су такве органелне експанзије међу стратегијама инфекције патогеном преко ефектора, то је у складу са чињеницом да многи ефектори патогена улазе у хлоропласте и циљају на протеине локализоване у хлоропласту [46,47].

5.2. Перинуклеарно груписање епидермалних хлоропласта и нуклеарна кретања

Познато је да се хлоропласти групишу око језгра ради комуникације између органела, где се пренос ретроградних сигнала јавља као одговор на различите стресове околине (37,38,104-106). У одбрамбеним одговорима Н. бентхамиана, пријављено је ретроградно РОС сигнализирање од перинуклеарних кластеризираних хлоропласта до једра кроз стромуле (95); исто је предложено у А. тхалиана (88,107,108). Занимљиво је да губитак ЦХУП1 гена доводи до повећаног перинуклеарног груписања епидермалних хлоропласта и код Н. бнетхамиана и код А. тхалиана (97. Перинуклеарно груписање епидермалних хлоропласта је такође примећено током Арабидопсис ЕЦР након инокулације патогена или у ЦХУП{{10} осиромашени услови без патогена [48]. Дакле, ове две биљне врсте имају сличне регулаторне механизме за контролу перинуклеарног груписања епидермалних хлоропласта, у којима ЦХУП1 показује негативне ефекте. С обзиром на оштећење ЕЦР и преинвазивног НХР конститутивног површинског позиционирања епидермалних хлоропласта у цхуп1 мутанту А. тхалиана [48], веће перинуклеарно груписање епидермалних хлоропласта такође може функционално да се погорша. У складу са овом идејом, ЦХУП1-нокаут Н. бентхамиана је подложнији П. инфестанс [97] .

Светло индуковано нуклеарно кретање у мезофилу Арабидопсис и ћелијама епидермалних коловоза зависи од ЦХУП1-[74,78]. ЦХУП1 се специфично локализује на омотач хлоропласта, али не и на језгра, и регулише кретање хлоропласта; стога је интрацелуларно кретање епидермалних хлоропласта посредовано ЦХУП1-мотивом за кретање језгара као одговор на јако светло [74,78]. Слично, језгра, заједно са перинуклеарним кластеризованим хлоропластима, мигрирају на површину током ЕЦР-а код А. тхалиана, која је чврсто повезана са количином ЦХУП1 протеина [48]. Перинуклеарни ендоплазматски ретикулум се такође репозиционира на епидермалну површину током ЕЦР-а [48]. Код Н. бентхамиана, језгро се помера до места пенетрације оомицета П. инфестанс [96,109]. Ово се такође примећује у другим биљним патосистемима који користе гљивичне и оомицетне патогене [110–112]. На фокалну акумулацију језгра није утицало повећано перинуклеарно груписање епидермалних хлоропласта у ЦХУП1-нокауту Н. бентхамиана [97]. С обзиром на то да прекомерна експресија и исцрпљивање ЦХУП1 протеина имају супротне ефекте на кретање епидермалних хлоропласта током Арабидопсис ЕЦР, било би интересантно утврдити да ли је перинуклеарно груписање епидермалних хлоропласта потиснуто прекомерном експресијом ЦХУП1 у Н. бентхамиана, и стога да ли је фокална акумулација језгро на интерфејсу П. инфестанс је поремећено.

6. Закључци

Значај функције хлоропласта у имунитету биљака је широко признат. Истраживања која се фокусирају на типове хлоропласта сада се појављују у области антимикробних одговора. С обзиром на функцију биљног епидермиса као примарног упоришта за одбијање непријатеља, као што су гљивични и оомицетни патогени са способношћу директног продирања, епидермални атипични хлоропласти су идеалан предмет истраживања због своје мале количине информација у поређењу са добро познатим типичним мезофилним хлоропластима. .

Конкретно, недавне студије су откриле везу између интрацелуларне динамике епидермалних хлоропласта и биљног епидермалног имунитета, при чему ЕЦР, фокална акумулација епидермалних хлоропласта на интерфејсу патогена, формирање стромуле, комуникација међу органелама и други процеси могу бити оркестрирани за појачавају отпорност на антимикробне лекове [48,95–97,113]. ЦХУП1 локализован на хлоропласту, који је првобитно идентификован као регулатор кретања фоторелокације хлоропласта у ћелијама мезофила [76], има кључну функцију у догађајима везаним за епидермални хлоропласт као одговор на патогене. ЈАЦ1, регулатор фотоиндукованог одговора акумулације хлоропласта, такође је укључен у интрацелуларно позиционирање епидермалних хлоропласта током ЕЦР [48]. Да би се разумео механизам који лежи у основи епидермалног имунитета путем покретних одговора усредсређених на хлоропласт, потребна је даља анализа о томе које и како компоненте употребљене у систему премештања фотографија хлоропласта доприносе одбрамбеним одговорима у биљној епидерми.

Финансирање:

Ово истраживање је финансиран од стране ЈСПС КАКЕНХИ Грант Нумберс 15К18648, 18К05643 и 21Х02194 и од стране програма Водећа иницијатива за одличне младе истраживаче (ЛЕАДЕР) МЕКСТ-а.

Признања:

Захваљујем Јошитака Такану на помоћи и корисним дискусијама.

Сукоби интереса:

Аутор изјављује да нема сукоба интереса.

Референце

1. Кубо, И.; Фурусава, И. Биосинтеза меланина: Предуслов за успешну инвазију на биљног домаћина апресоријама Цолле-тотрицхум и Пирицулариа. Ин Тхе Фунгал Споре анд Дисеасе Инитиатион ин Плантс анд Анималс; Цоле, ГТ, Хоцх, ХЦ, Едс.; Пленум Публисхинг: Њујорк, Њујорк, САД, 1991; стр. 205–217.

2. Хеатх, МЦ Отпорност без домаћина и неспецифична одбрана биљака. Цурр. Опин. Плант Биол. 2000, 3, 315–319. [ЦроссРеф]

3. Лее, Х.-А.; Лее, Х.-И.; Сео, Е.; Лее, Ј.; Ким, С.-Б.; Ох, С.; Цхои, Е.; Цхои, Е.; Лее, СЕ; Цхои, Д. Цуррент Ундерстандингс оф Плант Нонхост Ресистент. Мол. Интеракција биљака и микроба. 2017, 30, 5–15. [ЦроссРеф] [ПубМед]

4. Цоллинс, НЦ; Тхордал-Цхристенсен, Х.; Липка, В.; Бау, С.; Комбринк, Е.; Киу, Ј.-Л.; Хуцкелховен, Р.; Стеин, М.; Фреиалденховен, А.; Сомервилле, СЦ; ет ал. Отпорност на болести посредована СНАРЕ протеинима на зиду биљне ћелије. Природа 2003, 425, 973–977. [ЦроссРеф] [ПубМед]

5. Јацобс, АК; Липка, В.; Буртон, Р.; Панструга, Р.; Стризхов, Н.; Сцхулзе-Леферт, П.; Финцхер, ГБ За формирање ране и папиларне калозе потребна је калозна синтаза Арабидопсис, ГСЛ5. Плант Целл 2003, 15, 2503–2513. [ЦроссРеф]

6. Липка, В.; Диттген, Ј.; Беднарек, П.; Бхат, Р.; Виермер, М.; Стеин, М.; Ландтаг, Ј.; Брандт, В.; Росахл, С.; Сцхеел, Д.; ет ал. Одбране пре и после инвазије доприносе отпорности не-домаћина код Арабидопсиса. Наука 2005, 310, 1180–1183. [ЦроссРеф] [ПубМед]

7. Стеин, М.; Диттген, Ј.; Санцхез-Родригуез, Ц.; Хоу, Б.-Х.; Молина, А.; Сцхулзе-Леферт, П.; Липка, В.; Сомервилле, С. Арабидопсис ПЕН3/ПДР8, транспортер касете за везивање АТП-а, доприноси отпорности домаћина на неодговарајуће патогене који улазе директном пенетрацијом. Плант Целл 2006, 18, 731–746. [ЦроссРеф] [ПубМед]

8. Јенсен, МК; Хагедорн, ПХ; де Торес-Забала, М.; Грант, МР; Рунг, ЈХ; Цоллинге, ДБ; Лингкјаер, МФ Регулација транскрипције помоћу НАЦ (НАМ-АТАФ1,2-ЦУЦ2) фактора транскрипције смањује АБА сигнализацију за ефикасну базалну одбрану према Блумериа граминис ф. сп. хордеи у Арабидопсису. Плант Ј. 2008, 56, 867–880. [ЦроссРеф] [ПубМед]

9. Беднарек, П.; Пи´слевска-Беднарек, М.; Сватош, А.; Сцхнеидер, Б.; Доубскы, Ј.; Мансурова, М.; Хумпхри, М.; Цонсонни, Ц.; Панструга, Р.; Санцхез-Валлет, А.; ет ал. Пут метаболизма глукозинолата у живим биљним ћелијама посредује у антифунгалној одбрани широког спектра. Наука 2009, 323, 101–106. [ЦроссРеф]

10. Пиноса, Ф.; Бухот, Н.; Квааитаал, М.; Фахлберг, П.; Тхордал-Цхристенсен, Х.; Еллерстром, М.; Андерссон, МКС Арабидопсис фосфолипаза Дδ је укључена у базалну одбрану и отпорност домаћина на гљивице пепелнице. Плант Пхисиол. 2013, 163, 896–906. [ЦроссРеф]

11. Цампе, Р.; Лангенбацх, Ц.; Леиссинг, Ф.; Попесцу, Г.; Попеску, СЦ; Гоеллнер, К.; Бецкерс, ГЈМ; Цонратх, У. АБЦ транспортер ПЕН 3/ ПДР 8/ АБЦГ 36 ступа у интеракцију са калмодулином који је, као и ПЕН 3, неопходан за отпорност не домаћина Арабидопсис. Нев Пхитол. 2015, 209, 294–306. [ЦроссРеф]

12. Нилсен, МЕ; Јургенс, Г.; Тхордал-Цхристенсен, Х. ВПС9а Активира Раб5 ГТПазу АРА7 да би пружио јасан пре- и постинвазивни урођени имунитет биљака. Биљна ћелија 2017, 29, 1927–1937. [ЦроссРеф] [ПубМед]

13. Хирума, К.; Онозава-Комори, М.; Такахасхи, Ф.; Асакура, М.; Беднарек, П.; Окуно, Т.; Сцхулзе-Леферт, П.; Такано, И. Режим уласка – зависна функција пута индол глукозинолата у Арабидопсис-у за отпорност без домаћина против патогена антракнозе. Плант Целл 2010, 22, 2429–2443. [ЦроссРеф]

14. Хирума, К.; Нисхиуцхи, Т.; Като, Т.; Беднарек, П.; Окуно, Т.; Сцхулзе-Леферт, П.; Такано, И. Арабидопсис ПОБОЉШАНА ОТПОРНОСТ НА БОЛЕСТИ 1 је неопходан за експресију дефензина биљака изазвану патогеном у отпорности која није домаћин и делује преко интерференције репресорске функције посредоване МИЦ{4}}. Плант Ј. 2011, 67, 980–992. [ЦроссРеф] 15. Хирума, К.; Фукунага, С.; Беднарек, П.; Пи´слевска-Беднарек, М.; Ватанабе, С.; Нарусака, И.; Схирасу, К.; Такано, И. Метаболизам глутатиона и триптофана је неопходан за имунитет Арабидопсис током преосетљивог одговора на хемибиотроф. Проц. Натл. Акад. Сци. САД 2013, 110, 9589–9594. [ЦроссРеф] [ПубМед]

16. Ириеда, Х.; Иноуе, И.; Мори, М.; Иамада, К.; Осхикава, И.; Саитох, Х.; Уемура, А.; Терауцхи, Р.; Китакура, С.; Косака, А.; ет ал. Конзервирани ефектор гљивице потискује имунитет изазван ПАМП-ом циљајући биљне имуне киназе. Проц. Натл. Акад. Сци. САД 2018, 116, 496–505. [ЦроссРеф] [ПубМед]

17. Маеда, К.; Хоујиоу, И.; Коматсу, Т.; Хори, Х.; Кодаира, Т.; Исхикава, А. АГБ1 и ПМР5 доприносе ПЕН2-преинвазионој отпорности на Магнапортхе оризае код Арабидопсис тхалиана. Мол. Интеракција биљака и микроба. 2009, 22, 1331–1340. [ЦроссРеф]

18. Накао, М.; Накамура, Р.; Кита, К.; Инукаи, Р.; Исхикава, А. Отпорност не-домаћина на пенетрацију и раст хифа Магнапортхе оризае у Арабидопсис. Сци. Реп. 2011, 1, 171. [ЦроссРеф] [ПубМед]

19. Окава, Ц.; Исхикава, А. МПК6 доприноси отпорности домаћина на Магнапортхе оризае у Арабидопсис тхалиана. Биосци. Биотецхнол. Биоцхем. 2013, 77, 1320–1322. [ЦроссРеф]

20. Такахасхи, Т.; Схибуиа, Х.; Исхикава, А. СОБИР1 доприноси отпорности не-домаћина на Магнапортхе оризае у Арабидопсису. Биосци. Биотецхнол. Биоцхем. 2016, 80, 1577–1579. [ЦроссРеф]

21. Такахасхи, Т.; Схибуиа, Х.; Исхикава, А. ЕРЕЦТА доприноси отпорности не-домаћина на Магнапортхе оризае код Арабидопсис. Биосци. Биотецхнол. Биоцхем. 2016, 80, 1390–1392. [ЦроссРеф]

22. Такахасхи, Т.; Мурано, Т.; Исхикава, А. СОБИР1 и АГБ1 независно доприносе отпорности домаћина на Пирицулариа оризае (син. Магнапортхе оризае) код Арабидопсис тхалиана. Биосци. Биотецхнол. Биоцхем. 2018, 82, 1922–1930. [ЦроссРеф] [ПубМед]

23. ДуПрее, П.; Пвее, К.-Х.; Греи, ЈЦ Експресија фузије гена-промотора фотосинтезе у епидермалним ћелијама листа трансгених биљака дувана. Плант Ј. 1991, 1, 115–120. [ЦроссРеф]

24. Бовес, БГ; Маусетх, ЈД Плант Струцтуре—А Цолор Гуиде, 2нд ед.; Мансон Публисхинг, Лтд.: Лондон, УК, 2008. 25. Ваугхан, К. Иммуноцитоцхемистри оф Плант Целлс; Спрингер: Дордрехт, Холандија, 2013.

For more information:1950477648nn@gmail.com