Фактори који утичу на бег арбовируса из средњег црева код комараца
Oct 27, 2023
Апстрактан: Арбовирусне болести које шире комарци узрокују значајан морбидитет и смртност у већем делу света. Лечење и превенција ових болести лековима и вакцинацијом су често ограничени, што чини контролу арбовируса на нивоу вектора идеалном. Један од начина да се спречи ширење арбовируса био би да се спречи његов вектор да развије дисеминовану инфекцију, која је неопходна да би вирус успео да дође до пљувачке комараца да би се потенцијално пренео на новог домаћина. Средњи део комараца пружа једну такву прилику да заустави арбовирус у својим траговима. Већ дуги низ година познато је да у одређеним комбинацијама арбовирус-вектор, или под одређеним околностима, арбовирус може инфицирати и реплицирати у средњем цреву, али није у стању да побегне из ткива и изазове дисеминовану инфекцију. Ова ситуација је позната као баријера за бекство средњег црева. Ако боље разумемо зашто се ова препрека појављује, то би могло помоћи у развоју стратегија контроле са више информација. У овом прегледу расправљамо о томе како баријера за бекство средњег црева доприноси специфичности вируса и вектора и могућим механизмима који могу омогућити да се ова баријера превазиђе у успешним комбинацијама вирус-вектор. Такође разматрамо неколико познатих фактора који или повећавају или смањују вероватноћу бекства средњег црева.
бенефиције додатка цистанцхе-повећавају имунитет
Кључне речи: арбовирус; комарац; мидгут; РНАи; апоптоза; базална ламина; антивирусни имунитет
1. Представљање
Арбовирусне болести које преносе комарци и даље угрожавају здравље и безбедност значајног дела људске популације. Последњих неколико деценија поново су се појавили бројни деструктивни арбовируси, укључујући Зика, жуту грозницу, денгу и чикунгуњу [1–4]. Претња од ових болести се повећава, са неколико модела који предвиђају да ће климатске промене омогућити ширење врста вектора болести у регионе који су раније били неприкладни за њихов опстанак [5,6]. Упркос овој хитној претњи, још увек је много тога непознато о томе како арбовируси комуницирају са својим векторима артропода. Једна посебно узнемирујућа мистерија је зашто су вируси често специфични за одређене векторе. Ово је вероватно због бројних генетских и фактора животне средине, који могу бити јединствени за сваку комбинацију арбовирус-вектор. Ипак, ако бисмо могли да почнемо да разумемо зашто један вектор може ефикасно да преноси вирус са једног домаћина на другог и зашто други није у стању, могли бисмо открити ефикасне стратегије за заустављање преноса арбовирусних болести на нивоу вектора. Да би се илустровала специфичност интеракција вирус-вектор, узмите у обзир да у Сједињеним Државама постоји преко 200 врста комараца, али се за само око 12 зна да су важне у преношењу болести [7]. У природном окружењу, разлог зашто неке врсте комараца не преносе неке арбовирусе може бити делимично последица некомпатибилности у географском распону или преференцијама за исхрану домаћина. Међутим, ово не објашњава у потпуности специфичност вируса и вектора, јер чак и када су опсег и понашање усклађени, то не гарантује могућност преношења арбовируса. Супротно томе, неке врсте комараца могу се експериментално инфицирати арбовирусима за које није познато да су природни вектори, као што показују успешне лабораторијске инфекције Аедес аегипти вирусом Синдбис (СИНВ) [8]. Показало се да је способност комарца да пренесе одређени вирус или његова векторска компетенција одређена сложеним интеракцијама између генотипова и комарца и вируса [9]. Векторска компетенција није статична; на пример, утврђено је да једна мутација у геному цхикунгуниа вируса (ЦХИКВ) побољшава компетенцију Аедес албопицтус за овај вирус [10,11]. Ова адаптација је изазвала повећане епидемије и географско ширење ЦХИКВ-а [12].
цистанцхе тубулоса-побољшава имуни систем
Кликните овде да видите производе Цистанцхе Енханце Иммунити
【Затражите више】 Е-пошта:cindy.xue@wecistanche.com / Вхатс Апп: 0086 18599088692 / Вецхат: 18599088692
Било је бројних фактора за које се показало да утичу на способност вектора да пренесе одређене арбовирусе (у овом прегледу ћемо се фокусирати на хоризонтални пренос путем хематофагије и занемарити вертикални пренос, који такође може бити важан за одређене арбовирусе). Један од добро проучених фактора је присуство ткивних баријера унутар вектора које вирус мора да савлада да би се пренео на новог домаћина (прегледано у [13]). Ове баријере укључују баријеру инфекције средњег црева, баријеру за евакуацију средњег црева, баријеру инфекције пљувачне жлезде и баријеру за евакуацију пљувачне жлезде (Слика 1). Успешан вирус мора да превазиђе баријеру инфекције средњег црева тако што има средства да уђе и реплицира се у ћелијама епитела средњег црева комараца након што се унесе у оброк са крвљу. Затим мора да превазиђе баријеру за бекство средњег црева тако што ће изаћи из средњег црева и инфицирати друга ткива комараца. Слично томе, вирус мора да превазиђе баријере пљувачних жлезда тако што инфицира и побегне из епителних ћелија пљувачне жлезде да би се пренео пљувачком следећи пут када комарац узме крвни оброк од новог домаћина. Ако вирус није у стању да превазиђе све ове баријере ткива, онда неће доћи до преношења.
Слика 1. Ткивне баријере за инфекцију арбовирусом. Баријера инфекције средњег црева (доле лево) настаје када вируси нису у стању да уђу или не могу да се реплицирају у епителним ћелијама средњег црева. Насупрот томе, баријера за излазак из средњег црева (доле десно) настаје када вируси могу да инфицирају и реплицирају у ћелијама средњег црева, али се не шире из овог ткива. Баријера за инфекцију пљувачне жлезде (горе лево) настаје када вирус не успе да инфицира ћелије пљувачне жлезде, док се баријера пљувачне жлезде (горе десно) јавља када вирус не може да прође у пљувачку. Слика креирана са Биорендер.цом
Све већи број доказа сугерише да интеракције арбовируса са средњим цревом комарца имају значајан утицај на то да ли ће тај вирус на крају моћи да се пренесе. Док се баријера инфекције средњег црева често може приписати некомпатибилности вирус-рецептор или имунолошким одговорима у средњем цреву, баријера за бекство средњег црева је још збуњујућа. Вирус који наиђе на баријеру за бекство средњег црева је у стању да успешно инфицира и реплицира у епителним ћелијама средњег црева, али не успева да дође до других ткива и није у стању да се пренесе. Ово чини искоришћавање ове баријере обећавајућим средством за контролу арбовируса. Међутим, наше основно разумевање шта чини баријеру за бекство средњег црева и како се ова баријера превазилази је ужасно непотпуно. Доступни докази сугеришу да не постоји ниједан фактор који дозвољава излазак из средњег црева, већ констелација фактора који се усклађују у успешним комбинацијама вирус-в-вектор. У овом прегледу желимо да разговарамо о неколико познатих фактора који утичу на бекство средњег црева. Прво ћемо размотрити значајне препреке које средње црево представља вирусу и размотрити неке алтернативне хипотезе о томе како долази до ширења. Затим покушавамо да разоткријемо многе спољне, вирусне и векторске факторе који изгледа утичу на то да ли дође до бекства средњег црева.
2. Путеви бекства средњег црева
Да би вирус побегао из средњег црева, не само да треба да превазиђе сам епител средњег црева, већ треба и да прође кроз густи влакнасти екстрацелуларни матрикс који лежи испод средњег црева који се зове базална ламина (Слика 1). Утврђено је да су поре у базалној ламини средњег црева мање од већине арбовируса [14]. Из тог разлога, било је неколико предлога о томе како је тачно вирус у стању да превазиђе ову препреку која укључује или локацију у цревима или механизам ширења. У првој категорији су две главне идеје: (1) дисеминација се дешава из кардије/интусусцептираног предњег црева; и (2) дисеминација се дешава из задњег средњег црева. Поред тога, постоје хипотезе о томе како вирус може да пређе екстраћелијски матрикс/базалну ламину: (1) вириони могу да прођу кроз празнине које су довољно велике да то директно омогуће; или (2) друго ткиво као што је трахеја продире у овај слој, омогућавајући вирионима да побегну из средњег црева без потребе за кретањем кроз базалну ламину [13]. Важно је напоменути да ове идеје нису нужно међусобно искључиве, а такође је могуће да постоје различити механизми дисеминације у различитим комбинацијама вирус-в-вектор. Пошто је задње средње црево место варења крви код комараца, а већина арбовируса инфицира ово ткиво, генерално се сматра да је то примарно место дисеминације [15–18]. Идеја да у базалној ламини могу постојати празнине или поре које су довољно велике да вируси прођу била је међу најранијим хипотезама у вези са бекством средњег црева [14]. Растезање средњег црева комараца након узимања крвног оброка доводи до очигледних питања о томе шта ово истезање чини структури базалне ламине. Упркос томе, јасне празнине у базалној ламини повезане са вирионима који побегну нису дефинитивно идентификовани. Међутим, све већи број доказа сугерише да структурне промене у базалној ламини могу довести до могућег пута за бекство. На пример, модификована базална ламина која изгледа порознија или искривљена и повезана је са висцералним мишићима је пријављена након узимања оброка крви који садржи вирус [19,20]. Упркос томе, бекство арбовируса из средњег црева често траје данима (у зависности од врсте вируса), тако да би структурне промене морале да трају довољно дуго да би се то могло десити. Подржавајући ову идеју, у студији која је користила наночестице злата дате у крвном оброку, откривено је да је ширина мреже базалне ламине остала проширена чак и након што је крвно брашно сварено [21]. Неки поремећаји базалне ламине могу бити повезани са дегенерацијом ћелија као што су описали Веавер и сарадници, који су открили да су се патолошке промене у средњем цреву догодиле код Цулисета меланура инфициране вирусом источног коњског енцефалитиса (ЕЕЕВ), укључујући извесну ћелијску дегенерацију која је била повезана са поремећај базалне ламине [22]. Пролазак кроз базалну ламину може довести до тога да вирус побегне директно у хемоцел, што би омогућило вирусу да приступи додатним ткивима, или ће вирус можда морати да инфицира друго ткиво као што је трахеја пре него што дође до даљег ширења. Док празнине у базалној ламини остају одржива и подржана хипотеза о бекству средњег црева, биће потребне даље студије да би се добили убедљиви докази.
Више предњих региона дигестивног система такође је укључено као места дисеминације. У овој хипотези, кардија или интусусцептивна предње црева се инфицирају и тада вирус може да пређе у хемоцел или у друго ткиво, као што је трахеја. Кардија је орган који постоји на споју средњег и предњег црева, садржи ћелије из обе врсте ткива и блиско је повезан са трахејама и мишићима. Окружен је модификованом базалном ламином која делује порозније и стога може бити прихватљивија за бекство вируса [23]. Идеја да би овај регион могао бити важан за дисеминирану инфекцију изведена је из запажања да када су комарци Цулек пипиенс храњени вирусом грознице Рифт Валлеи (РВФВ), већина комараца који нису развили дисеминирану инфекцију имали су вирус откривен у средњем цреву и јесте немају инфекцију интусусцептираног предњег црева, док је већина комараца са дисеминованом инфекцијом имала инфициране ћелије у овом региону [24]. Даља истраживања су успела да схвате слике вириона који пупају из кардиналних епителних ћелија и вириона у базалном лавиринту и матриксу ових ћелија [23]. Проучавајући обрасце инфекције код орално и торакално инфицираних комараца, аутори ове студије сугерисали су да би инфекција срчаних ћелија довела до ширења вируса на интусусцептирано предње црево, а можда и на више предњих делова црева, пре дисеминације у хемоцел коришћењем већих празнина у матриксу [23]. Међутим, ово није вероватан пут у свим комбинацијама вирус-вектор. На пример, вирус денга грознице-2 (ДЕНВ-2) није доследно примећен да инфицира кардију код Ае. аегипти москуитос [18] и, док је антиген вируса Западног Нила (ВНВ) откривен у кардији и интусусцептираном предњем цреву комараца Цулек пипиенс куинкуефасциатус, ова појава се десила отприлике у исто време када и појава у пљувачним жлездама [16]. Према томе, ова анатомска локација може играти кључну улогу у ширењу неких вируса, док у другим игра малу или никакву улогу. Други начин да вирус побегне из средњег црева може бити преко трахеалног система, који се протеже по целом телу комарца и обезбеђује размену гасова. Сва ткива инсеката морају бити у блиској вези са трахеалним гранама да би преживела, укључујући и средње црево. Докази су показали да трахеје могу бити пут за бекство из средњег црева за друге врсте инсеката вируса код других инсеката; нарочито, показало се да бакуловируси користе овај пут код ларви лепидоптера [25,26]. Докази за арбовирусе који користе овај пут код комараца нису тако убедљиви; ипак, неке студије попут оних о којима се говори у наставку су показале да би ово могла бити одржива хипотеза. Важно је да су студије показале да трахеје могу да продру у базалну ламину средњег црева код комараца, обезбеђујући близину неопходну за помоћ при бекству средњег црева [19,27]. Чини се да се инфекција ћелија трахеје такође јавља у низу арбовируса као што су ДЕНВ, вирус венецуеланског коњског енцефалитиса (ВЕЕВ) и РВФВ [18,19,27]. Неки од најдиректнијих доказа за ову хипотезу дошли су из студије која је закључила да, када се убризгава у хемоцоел, ВЕЕВ треба да инфицира трахеју и мишиће пре него што дође до инфекције средњег црева [19]. Главно упозорење овој студији је да је испитивало кретање вируса у обрнутом смеру, што може, али не мора да одражава оно што се дешава природно. Насупрот томе, друга студија која је користила ЦХИКВ закључила је да инфекција трахеје није неопходан корак у ширењу вируса [20]. Постоји могућност да је учешће трахеје у бекству средњег црева релевантније у одређеним комбинацијама вирус-вектор, као што су оне горе поменуте, и да се његов значај може боље разумети уз додатна истраживања.
цистанцхе тубулоса-побољшава имуни систем
3. Фактори који утичу на бег средњег црева
Свака баријера ткива представља препреку за пренос вируса, а сазнање више о овим баријерама може пружити увиде потребне за борбу против арбовирусне болести. Без обзира на тачан механизам бекства из средњег црева, феномен баријера за бекство средњег црева примећен је деценијама у широком спектру арбовируса и врста комараца (Табела 1) [28–32]. Проучавање баријере за бекство средњег црева није једноставно, јер њено присуство или одсуство скоро никада није апсолутно у датој популацији, а проценат комараца који показују баријеру за бекство средњег црева може увелико варирати у различитим популацијама врсте у којима се зна да су неки чланови способни да пренесу одређени вирус. На пример, једна студија која се бавила осетљивошћу различитих Ае. аег ипти популације у Сједињеним Државама и Мексику према ДЕНВ-у су открили да проценат комараца са баријером за бекство средњег црева варира од 4-43% [30]. Генетски и физички атрибути датих врста арбовируса и комараца, као и фактори животне средине су међу многим компонентама које утичу на бекство средњег црева. Преглед неких од најважнијих познатих фактора разматра се у наредним параграфима.
Табела 1. Примери комбинација вирус-вектор који показују баријеру за бекство из средњег црева.
3.1. Спољни фактори
Добро је утврђено да фактори животне средине могу утицати на то да ли је вирус у стању да побегне из средњег црева комарца. Један од најбоље проучаваних фактора је температура, али студије су такође показале да друге компоненте животне средине као што су изложеност инсектицидима и густина ларви такође могу играти важну улогу.
Температура
Утицај температуре на излазак из средњег црева је демонстриран у неколико различитих комбинација врста комараца и арбовируса. Утврђено је да када су одрасли Цулек пипиенс комарци инфицирани ВНВ и држани на вишим температурама (у распону од 28 ◦Ц до 30 ◦Ц), бег средњег црева се дешавао брже, и на крају је више комараца развило дисеминовану инфекцију у поређењу са комарцима који су држани на нижим температурама. температуре (у распону од 18 ◦Ц до 26 ◦Ц) [35,36]. Показало се да се овај ефекат шири и на друге комбинације вектора и вируса, укључујући Ае. албопицтус инфициран са ДЕНВ [37], Ае. аегипти са ЦХИКВ [38], и Цулек са вирусом енцефалитиса Ст. Лоуиса (СЛЕВ) [39]. Предложено је неколико разлога за ове резултате, укључујући да виша температура може повећати репликацију вируса у средњем цреву или може изазвати повећану пермеабилност средњег црева. Ефекат температуре је компликован генетским разликама код комараца и код вируса. Показало се да температура има мањи ефекат на излазак из средњег црева код неких сојева комараца и неких сојева вируса, док има већи ефекат на друге [38,40]. Поред температуре на којој се држе одрасли комарци, температура током развоја ларве може на крају утицати на излазак вируса из средњег црева. Једна студија која истражује Ае. албопицтус и ЦХИКВ су открили да је узгој ларви на нижим температурама повезан са повећаном стопом дисеминације код одраслих [41]. Супротно томе, друга студија је открила да је при ниској густини ларви утврђено да повећана температура повећава стопу дисеминације СИНВ код одраслих Ае. аегипти; међутим, није примећена разлика у дисеминацији када је густина ларви била висока [42]. Аутори су претпоставили да температура ларве може да промени експресију имунског гена одраслих комараца тако да су комарци узгајани на ниским температурама мање компетентни вектори. Ове студије показују да постоји потреба за више истраживања која испитују како на компетенцију вектора утичу различите комбинације фактора животне средине ларве.
Предности цистанцхе тубулоса- ојачати имуни систем
Изложеност пестицидима
Још један еколошки фактор који може утицати на бекство средњег црева је излагање хемијским или биолошким пестицидима. Ненамерни нежељени ефекат пестицида може бити повећана стопа дисеминације код комараца који су изложени на суб-смртоносном нивоу, као што је то показано у неколико студија. Показало се да бифентрин повећава стопе дисеминације Зика вируса (ЗИКВ) у Ае. албопицтус, са посебно јаким ефектом примећеним код старијих комараца [43]. Међутим, чини се да исти инсектицид има мали ефекат на ширење ДЕНВ-а [44]. Сублетална изложеност инсектицидима може бити посебно важна за способност вектора када су ларве изложене, јер се показало да изложеност ларви малатиону повећава стопу дисеминације СИНВ-а [45,46]. Могући разлог за то може бити тај што изложеност ларви овим инсектицидима доводи до деформитета средњег црева одраслих, као што се показало да се дешава када су ларве комараца изложене инсектициду спинозаду [47]. Такође је показано да сублетална изложеност ларви бактеријском инсектициду Бациллус тхурингиенсис субсп. исраеленсис је изазвао повећану стопу дисеминације ДЕНВ-а, иако је то било специфично за сој бактерија [48]. Биће све важније узети у обзир ову могућу нуспојаву приликом третирања подручја заражених векторима болести инсектицидима.
Густина ларви/конкуренција
Показало се да и други услови животне средине ларве утичу на бекство средњег црева, а неке студије сугеришу везу између густине ларве и стопе ширења вируса код одраслих. У једној студији, када је Ае. ларве комараца албопицтус узгајане су у већој густини, одрасли комарци су имали већу стопу дисеминиране инфекције; међутим, овај ефекат није примећен код Ае. аегипти москуитоес. Нејасно је шта тачно узрокује ову разлику. Аутори студије су открили да је третман густине у негативној корелацији са величином комараца и на тај начин закључили да се стопа ширења може повезати са мањим комарцима који су бољи вектори [49]. Међутим, друга студија је показала да конкуренција ларви између Ае. албопицтус и Оцхлеротатус трисериатус довели су до преживљавања Оц. трисериатус комарци су већи и већа је вероватноћа да ће развити дисеминовану инфекцију Ла Цроссе вирусом [50]. Ово показује да конкуренција међу врстама и интраспециес може на крају утицати на векторску компетенцију и да овај ефекат можда није у потпуности повезан са величином.
цистанцхе тубулоса-побољшава имуни систем
3.2. Фактори комараца
Већ дуги низ година било је очигледно да је мало вероватно да ће неке врсте комараца пренети одређене вирусе због баријере за бекство из средњег црева која спречава ширење [28,33,51]. Многе студије су истраживале који фактори комараца доприносе постојању ове баријере, али је често тешко одвојити факторе комараца од вирусних фактора јер се показало да је интеракција генотипова важна [9]. Без обзира на то, неколико аспеката физиологије комараца је укључено у допринос баријери за бекство средњег црева. То укључује физичке карактеристике комараца као што је структура базалне ламине, као и понашање комараца и експресија гена укључених у имунитет или друге физиолошке процесе.
Физичке карактеристике - дебљина и структура базалне ламине
Базална ламина је чврсто исплетена екстрацелуларна матрица коју луче епителне ћелије која окружује средње црево комараца и представља главну препреку за ширење инфекције. Годинама је збуњивало истраживаче како вируси успевају да прођу кроз ову матрицу када су измерене величине пора мање од величине већине вируса [14]. Разлике у структури и дебљини базалне ламеле су предложене да допринесу разликама у стопама евакуације средњег црева. Једна студија је открила да су разлике у исхрани довеле до комараца различитих величина и различите дебљине базалне ламине [52]. Аутори су открили веће стопе ширења вируса Ла Цроссе код мањих комараца који су имали тање базалне ламине и закључили да ова разлика може, делимично, објаснити зашто су неки комарци бољи вектори. Међутим, друге студије нису пронашле повезаност између дебљине базалне ламине и излаза средњег црева. Студија која се бавила дисеминацијом ДЕНВ-а у лабораторијским сојевима Ае. албопицтус са разликама у дебљини базалне ламине није утврдио утицај на излазак вируса из средњег црева [53]. Друге студије су откриле да се након храњења крвљу појављују перфорације у базалној ламини које могу олакшати излазак из средњег црева [20,54]. Остаје да се види да ли су разлике у осетљивости на ове перфорације фактор варијабилности у бекству средњег црева.
Експресија имуног гена
(и). РНАи пут
РНАи пут је први пут откривен код Ц. елеганс, где је неочекивано откривено да дволанчана РНК може довести до уништења или транслационе репресије мРНК са комплементарношћу секвенце [55]. Касније је показано да ово постоји код инсеката и да је велики допринос антивирусном одговору код комараца, укључујући и средње црево [56–58]. Студије су пружиле убедљиве доказе да овај пут може играти главну улогу у томе да ли ће комарац развити дисеминовану инфекцију. На пример, показало се да када је РНАи одговор смањен у Ае. аегипти мидгут снижавањем експресије важних компоненти РНАи пута, посебно у средњем цреву, дошло је до више дисеминације СИНВ-а [59]. Супротно томе, када су комарци генетски модификовани да експримирају инвертирану поновљену РНК изведену из ДЕНВ-2 у средњем цреву, што је изазвало повећан одговор РНАи средњег црева, дошло је до смањене дисеминиране инфекције [60]. Треба напоменути да је ова потоња студија открила мање детектабилну репликацију средњег црева када је РНАи пут промењен, што би се могло сматрати баријером инфекције средњег црева; међутим, пошто експеримент није био осмишљен да блокира улазак у средње црево, већ радије да сузбије репликацију вируса до нивоа који чини мало вероватним да средње црево побегне, разматра се у нашој дискусији овде. Иако ове студије пружају убедљиве доказе о важности РНАи, морамо да знамо да ли постоје природне варијације у експресији или функционалности компоненти пута РНАи, и да ли то може да објасни зашто неки комарци природно развијају дисеминовану инфекцију, а други не. Докази показују да компоненте РНАи као што је Дицер-2 могу да варирају у својој експресији између различитих сојева врста комараца и да ова диференцијална експресија може да утиче на проценат комараца који развијају дисеминовану инфекцију [61,62]. Колико тачно варијација у РНАи путу доприноси бекству средњег црева и векторска компетенција је област која захтева више проучавања.
(ии). Јак/СТАТ, путарине и ИМД путеви
Антивирусна активност у средњем цреву комараца није ограничена на РНАи, јер се показало да неколико других имуних путева такође има антивирусне ефекте и потенцијално може утицати на бекство средњег црева. То укључује Јак/Стат, Толл и ИМД путеве. Показало се да Јак/Стат пут има улогу у урођеном антивирусном имунитету код дрозофиле и комараца [63,64]. Када су комарци пројектовани да повећају Јак/Стат сигнализацију преко прекомерне експресије Доме и Хоп у масном телу и средњем цреву, примећена је нижа преваленција дисеминоване ДЕНВ2 инфекције, али преваленција инфекције средњег црева није промењена [65]. Улога диференцијалне експресије компоненти Јак/Стат пута међу популацијама комараца са варијацијама у стопама бекства средњег црева остаје да се види. Међутим, откривено је да је експресија гена на овом путу повећана код сојева комараца који су и осетљиви и отпорни на ДЕНВ, што може сугерисати да сам овај пут не може да објасни баријеру за бекство средњег црева [66]. Толл пут је још једна имунолошка сигнална каскада за коју се показало да је важна у урођеној имунолошкој одбрани од разних патогена, укључујући грам-позитивне бактерије и гљивице [67]. Касније се показало да игра улогу у антивирусној одбрани код комараца [68–70]. Постоје неки докази који указују на то да базални ниво активације овог пута може варирати између сојева Ае. аегипти, јер је откривено да је релативна експресија РЕЛ1 различита у узорцима целог тела комараца добијених на терену у односу на комараце лабораторијског соја и да се ове популације комараца разликују по стопи дисеминоване инфекције са ДЕНВ [62]. Додатни имуни пут за који се показало да има антивирусну улогу код Дросопхиле је ИМД пут [71]. Такође се показало да је овај пут промењен у средњем цреву вирусно инфицираних комараца [70]. Како се промене у овим путевима посебно односе на бекство средњег црева треба размотрити у будућности.
(иии). Апоптоза и ћелијски обрт
Апоптоза је облик програмиране ћелијске смрти који је високо конзервиран код животиња и опсежно је проучаван на моделним организмима као што су Ц. елеганс, Дросопхила и мишеви [72]. Апоптоза је важна у развоју и одржавању ткива, а поремећаји у процесу могу довести до различитих болесних стања [73,74]. Што је важно за ову тему, познато је да овај пут има антивирусну улогу дуги низ година [75,76]. Основни механизми апоптозе изгледају слични у многим организмима. Једна породица важних актера у апоптотичком путу су каспазе, које су протеазе које садрже цистеин у свом активном месту и генеришу се у неактивном облику званом прокаспазе. Као одговор на активирајуће стимулусе, адаптерски протеини се везују за иницијаторске прокаспазе, што изазива агрегацију и цепање остатака аспарагинске киселине, што доводи до знатно повећане активности протеазе. Отцепљене иницијаторске каспазе, заузврат, активирају ефекторске каспазе које цепају ћелијске мете и на крају доводе до смрти ћелије [77]. Овај процес је високо регулисан различитим протеинима, а једна од важнијих породица је ИАП или породица инхибитора апоптозе која је први пут откривена код бакуловируса [78]; касније, ИАП хомолози су пронађени у многим организмима укључујући сисаре, Ц. елеганс, инсекте и друге [79–82]. ИАП протеини се везују за прокаспазе да би спречили активацију и/или везују се за активиране каспазе како би спречили њихово деловање. Многи ИАП такође служе као убиквитинске лигазе за каспазе и друге мете. Друга група протеина званих ИАП антагонисти ради на спречавању деловања ИАП, што доводи до активације каспазе и смрти ћелије. Код Дросопхиле, гени Реапер, грим, сицкле и хид кодирају ИАП антагонисте. Иако су ови протеини различити, сви они кодирају Н-Н-терминални ИБМ или ИАП мотив везивања који се такмичи за везивање каспазе [83]. Предузети су напори да се боље разуме апоптотички пут у Ае. аегипти су открили да главни пут има свеукупну сличност са стазом код Дросопхила меланогастер. Анотација Ае. аегипти геном је идентификовао многе хомологе познатих гена повезаних са апоптозом у Дросопхила [82,84]. Најважније ефекторске каспазе у апоптози код Ае. аегипти изгледа да су ЦАСПС7 и ЦАСПС8, који су хомологни ДрИЦЕ и Дцп1 у Дросопхила. Ове ефекторске каспазе се активирају иницијаторском каспазом АеДронц коју, заузврат, активира адаптерски протеин АеАрк [85]. АеИАП1 спречава активацију каспазе, а утишавање овог гена доводи до спонтане апоптозе у ћелијама комараца и комарцима [85,86]. Тхе Ае. аегипти геном такође кодира ИАП антагонисте Мицхелоб_к и ИМП, који имају про-апоптотичке функције [82,87,88]. Познато је да је апоптоза антивирусни пут који има импликације на способност вектора код комараца. Међутим, такође се претпоставља да вишак ћелијске смрти у средњем цреву може створити отвор кроз који вируси могу да побегну. Неки докази сугеришу да апоптоза средњег црева варира међу комарцима са различитим нивоима бекства средњег црева. На пример, средња црева ВНВ-рефракторног соја Ц. пипиенс пипиенс су показала доказе о апоптози [89]. Поред тога, показало се да је експресија гена каспазе и других гена критичних за апоптозу повећана у Ае. аегипти сојеви комараца који су отпорни на ДЕНВ или сојеви комараца који показују различите степене баријере за бекство средњег црева [90,91]. Експерименти у манипулисању процесом апоптозе такође сугеришу да овај пут може утицати на бекство средњег црева. На пример, када је СИНВ конструисан да експримира ИАП антагонист Реапер протеина, вирус је брзо изгубио уметнути ген након инфекције Ае. аегипти, што сугерише да је експресија проапоптотичког гена била озбиљно штетна за репликацију вируса [92]. Поред тога, у недавној студији, убацили смо жетелицу у геном СИНВ на начин који је дизајниран да побољша стабилност уметка, што је резултирало знатно мањим бројем комараца који су развили средње црево и проширили инфекцију када су храњени овим вирусом у поређењу са контролама [93 ]. Међутим, не указују сви докази да је апоптоза штетна за ширење вируса. Студија која је тестирала ефекат смањења апоптозе коришћењем РНАи за снижавање експресије гена Аедронц открила је да је дисеминација СИНВ заправо смањена [94]. Занимљиво је да је једна група претпоставила да се ови наизглед контрадикторни резултати могу објаснити улогом коју Аедронц игра у аутофагији, што може подржати репликацију вируса [95]. Активна област истраживања је како равнотежа апоптозе и стварања ћелија у средњем цреву утиче на бекство средњег црева. Недавна студија је открила да је Ае осетљив на ДЕНВ. аегипти комарци су имали спорију генерацију нових ћелија у средњем цреву [96]. Ова студија је, међутим, посматрала само инфекцију у средњем цреву и није проучавала дисеминовану инфекцију, тако да би ово требало даље да се проучава како би се утврдила специфична веза са бекством средњег црева.
Понашање—понашање при храњењу
Фактор који тек почиње да се разматра као део слагалице бекства из средњег црева је улога понашања комараца у храњењу. Иако на површини може изгледати да ово двоје нису повезани, недавни докази говоре супротно. У лабораторијским студијама векторске компетенције, комарцима се често даје један оброк заразне крви. Међутим, ово не одражава природно понашање комараца, јер комарци често узимају више оброка крви током једног гонотрофног циклуса. У једној студији, 61% Ае. аегипти комарци у лабораторији су упијали други оброк крви, често у року од 24 сата, а 50% комараца ухваћених у дивљини показало је доказе о вишеструким оброкима крви [97]. Недавно су истраживачи представили доказе да ово понашање може побољшати ширење вируса из средњег црева. Армстронг и др. установио да када је Ае. аегипти москуитос су примили инфективни крвни оброк који садржи ЗИКВ, а затим накнадни неинфективни крвни оброк, број комараца који су развили дисеминирану инфекцију се повећао [54]. Иста студија је објавила сличне резултате за Ае. аегипти и ДЕНВ, Ае. аегипти и ЦХИКВ, и Ае. албопицтус и ЗИКВ. Користећи сличан режим храњења, Кантор ет ал. је прегледао средње црево након другог неинфективног храњења и открио да се након овог крвног оброка ЦХИКВ вириони могу наћи изван средњег црева и могу се видети на базалној ламини на страни хемоцела, док код комараца храњених само једним инфективним крвног брашна, вириони су виђени само у праменовима базалне ламине [20]. Друга студија је показала да је ДЕНВ4 пронађен у повећаним количинама на базалној ламини средњег црева Ае. аегипти након другог оброка крви, што је вероватно утицало на вероватноћу ширења вируса [21]. У будућности би требало истражити друге аспекте понашања комараца у вези са бекством средњег црева, укључујући запремину крвног оброка и број упијаних крвних оброка.
3.3. Вирусни фактори
Репликација средњег црева
О тачној улози репликације вируса у бекству средњег црева се расправљало и још увек није јасно да ли је репликација средњег црева неопходна у свим случајевима, или да ли у неким ситуацијама постоји екстрацелуларни (који не захтева репликацију вируса у ћелијама средњег црева) дисеминација. Неколико раних студија је документовало појаву вируса у хемолимфи у временима пре него што су могли да имају времена да се реплицирају [98,99]. Ово је довело до хипотезе да вируси могу да се крећу између ћелија средњег црева. Додатни докази за ово су дошли из студије у којој су црвена крвна зрнца из оброка пронађена у хемоцелу неких комараца након храњења [100]. Такође подржавају ову идеју експерименти у којима су наночестице сличне величине као арбовируси храњене комарцима и касније је откривено да су изашле из средњег црева [21,101]. Ови докази сугеришу да репликација средњег црева можда није потребна за дисеминацију у свим случајевима. Међутим, неколико других студија је закључило да је репликација неопходна за ефикасно бекство средњег црева. Студије у којима је РНАи пут у средњем цреву манипулисан да би се побољшала или смањила репликација вируса показала су да је дошло до одговарајућег смањења или повећања дисеминоване инфекције, што указује да је степен репликације вируса утицао на бекство средњег црева [59,60]. Поред тога, када су честице ВЕЕВ репликона које експримирају ГФП које су биле способне само за једну рунду инфекције коришћене за оралну инфекцију комараца, откривено је да је експресија ГФП ограничена на ћелије у средњем цреву [19]. Наша недавна студија, у којој смо користили СИНВ конструкт који је посебно имао смањену способност репликације у средњем цреву, показала је значајно смањење процента Ае. аегипти комарци који су развили дисеминовану инфекцију у поређењу са контролним вирусима [102]. Занимљиво је да је постојао мали проценат комараца који су развили дисеминирану инфекцију овим конструктом, али ће бити потребно више истраживања да би се утврдило да ли постоји ретко коришћени међућелијски пут. Неки истраживачи су претпоставили да ће вирус можда морати да достигне гранични ниво да би побегао из средњег црева и неколико студија (описаних у наставку) пружило је доказе у прилог томе. Студије рађене са вирусом западног коњског енцефалитиса (ВЕЕВ) код Цулек комараца и ЗИКВ-а у европским Ае. албопицтус комарци су закључили да се мора постићи одређени ниво средњег црева да би се дошло до бекства [34,103]. Међутим, друге студије су одбациле ову идеју, укључујући и ону која користи ДЕНВ у Ае. аегипти [104,105]. Наша недавна студија такође није пронашла доказе о корелацији између високог титра средњег црева и високог титра трупа, нити смо открили да је титар средњег црева био посебно добар предиктор дисеминоване инфекције [102]. Све у свему, истраживање је показало да ниво репликације вируса средњег црева може бити важна компонента бекства средњег црева у неким ситуацијама, али може играти мању улогу или никакву улогу у другим случајевима.
Разноврсност вируса и стопа грешке у репликацији
Добро је документовано да средње црево представља значајно уско грло за генетску разноликост арбовируса [106–108]. Једна студија је проценила да је код комараца храњених високом дозом ВЕЕВ-а, број вируса који инфицирају средње црево био у просеку око 1200, док је број вируса који су побегли из средњег црева био само око 50 [107]. Ове студије постављају важно питање: да ли је велика разноликост вируса предност у превазилажењу уског грла за бекство средњег црева? Скоро сви арбовируси су РНК вируси са високим стопама мутација [109]. Истраживачи су били заинтересовани да утврде да ли смањење стопе мутације доводи до мање разноликости, а тиме и до мање способности да се превазиђу изазови бекства средњег црева, и обрнуто, ако постоји предност, до повећања стопе мутација. Једна студија је показала да је мутација полимеразе која је повећала верност ЦХИКВ репликације довела до смањења титара у дисеминованим ткивима, али сличан број комараца је развио дисеминирану инфекцију у поређењу са инфекцијом дивљег типа [110]. Један могући закључак који се може извући из ове студије је да је смањена разноликост можда довела до смањења броја вириона који могу да се шире из средњег црева. Друга студија која је користила мутанте репликације високе верности ВЕЕВ открила је значајно смањене стопе дисеминације [111]. Занимљиво је да је иста студија открила да су мутације ниске верности, које су повећале стопу мутација и вирусну разноврсност, такође смањиле стопу дисеминације [111]. Ово се вероватно може приписати повећаном нагомилавању штетних мутација. Порука из ових студија је да је стопа грешке вирусне РНК полимеразе вероватно већ оптимизована кроз еволуцију како би се максимизирао успех вируса. Студије спроведене без употребе мутаторских варијанти такође су имплицирале важност вирусне генетске разноликости у дисеминацији. На пример, једна студија је открила да СЛЕВ који је серијски пасиран у Ц6/36 ћелијама показује смањену генетску разноликост у поређењу са вирусом који није прошао, а када је пренесени вирус храњен на комарце, дошло је до смањења дисеминоване инфекције [112]. Узето заједно, ове студије сугеришу да промене које утичу на разноликост вируса у средњем цреву могу променити број или способност вириона који побегну из средњег црева.
цистанцхе тубулоса-побољшава имуни систем
Коинфекција
У природи, неке врсте комараца често насељавају подручја у којима такође циркулише неколико или много различитих арбовируса, паразита и бактерија који изазивају болести. Код комараца који су истовремено инфицирани комбинацијом патогена, постоји потреба да се зна како ове сложене интеракције утичу на дисеминацију средњег црева. Филариални црви могу изазвати озбиљне болести код људи и животиња, и као и арбовируси, захтевају вектор инсеката да заврше свој животни циклус. Ове нематоде циркулишу у деловима Азије, Африке и Јужне Америке [113] који такође могу бити домаћини ендемским арбовирусима. Истраживања са бројним вирусима су показала да ингестија микрофиларија од комараца може побољшати дисеминацију арбовируса из средњег црева [114–116]. Сматра се да је разлог за то то што микрофиларије пробијају рупе у средњем цреву комараца, омогућавајући брже и побољшано бекство у хемоцел. Ово је подржано студијом која је открила да су стопе дисеминације ЦХИКВ повећане код комараца који су били коинфицирани са Динофилариа иммитис мицрофилариае, а то је у корелацији са рупама у епителу средњег црева које производе микрофилари [115]. Недавно је откривено да ширење вируса не може бити побољшано једноставним бекством кроз ове рупе, већ да се вируси могу транспортовати кроз епител средњег црева помоћу микрофиларија. Када су Бруги малаии мицрофилариае инкубиране са ЕЕЕВ или ВЕЕВ, а затим опсежно испране и коришћене за инфицирање комараца, многи комарци су се и даље заразили вирусима [117]. Ово сугерише да се вируси могу везати за микрофиларије или на неки други начин бити транспортовани. Забринутост је да ово може довести до већег броја домаћина са компликованим инфекцијама и паразитима и вирусима и да игнорисање питања паразита може угрозити напоре да се елиминише арбовирусна болест. Док је коинфекција са филаријским црвима повећала дисеминацију арбовируса, чини се да коинфекција са другим арбовирусима има неутралан или негативан ефекат на дисеминацију. Истовремена изложеност Ае. аегипти комарце до различитих комбинација ЦХИКВ, ЗИКВ и ДЕНВ-2 резултирало је малом разликом у дисеминацији у поређењу са појединачно зараженим комарцима [118,119]. Слично томе, секвенцијална изложеност ЦХИКВ и ЗИКВ није утицала на стопе дисеминације, иако су стопе преноса биле повећане [120]. Чини се да постоје случајеви коинфекције арбовирусом који имају негативан утицај на дисеминацију, јер је утврђено да СИНВ смањује стопу инфекције и ширења ДЕНВ-4 код Ае. албопицтус [121]. Занимљиво је да инфекција комараца флавивирусима специфичним за инсекте такође може имати негативан утицај на ширење вируса. Утврђено је да вирус агенса за спајање ћелија (ЦФАВ) смањује брзину дисеминације и титар дисеминације ДЕНВ-1 и титар дисеминације ЗИКВ у Ае. аегипти [122]. Штавише, откривено је да Цулек флавивирус (ЦкФВ) утиче на ширење ВНВ 7 дана након инфекције; међутим, ова разлика се смањила за 14 дана [123]. Вирусна коинфекција, посебно са вирусима специфичним за инсекте, биће важна за боље разумевање у будућности.
Вирус Досе
Доступни докази сугеришу да вирусне дозе понекад могу утицати на баријере за излазак из средњег црева. Баријера зависна од дозе може се превазићи повећањем дозе вируса до нивоа који може, али не мора бити могућ у природним условима. Уместо неке фундаменталне некомпатибилности између вируса и вектора, баријера зависна од дозе може бити последица фактора као што је имуни одговор комараца, који може бити надвладан већом дозом вируса. Кхоо ет ал. подржао је ову идеју у студији која је имплицирала РНАи пут у доприносу СИНВ дозно-зависној баријери за бекство средњег црева у Ае. аегипти [59]. Способност да се превазиђе баријера за излазак из средњег црева једноставним повећањем дозе вируса такође је приказана код ВЕЕВ и Цулек тарсалис [34,124], ЗИКВ и Ае. аегипти [125] и ЦХИКВ у Ае. аегипти [126]. Разумевање да ли је баријера зависна од дозе и опсега вирусних титара на које вектор може наићи у природном крвном оброку је важно за разумевање компетенције вектора.
4. Закључци
Јасно је да се бекство средњег црева не може приписати једном фактору, али то не би требало да нас обесхрабри да покушамо да разумемо све што можемо о овом загонетном процесу. Боље разумевање бекства средњег црева може довести до потенцијалних нових средстава за спречавање векторске инфекције; на пример, генетским инжењерингом који има за циљ јачање имунолошких путева у критичним ткивима комараца или чак потенцијално лечењем комараца вирусима специфичним за инсекте. Ово разумевање такође може довести до бољих предвиђања будућих арбовирусних епидемија. Ако знамо како се окружење, комарац и вирус удружују како би промовисали бекство из средњег црева, могли бисмо боље разумети када ће се вероватно десити следећа значајна епидемија и побољшати нашу припрему.
Референце
1. ВХО. Чикунгуња и Денга у југозападном Индијском океану. СЗО—Припремљеност за хитне случајеве, одговор: Вести о избијању болести. Доступно на мрежи: хттпс://ввв.вхо.инт/емергенциес/дисеасе-оутбреак-невс/итем/2006_03_17-ен (приступљено 24. јануара 2023.).
2. Бхатт, С.; Гетхинг, ПВ; Бради, ОЈ; Месина, ЈП; Фарлов, АВ; Моиес, ЦЛ; Драке, ЈМ; Бровнстеин, ЈС; Хоен, АГ; Санкох, О.; ет ал. Глобална дистрибуција и оптерећење денга грознице. Природа 2013, 496, 504–507. [ЦроссРеф] [ПубМед]
3. Панамеричка здравствена организација/Светска здравствена организација. Епидемиолошка ажурирања Резиме стања жуте грознице у Америци; Пан здравствена организација/Светска здравствена организација: Вашингтон, ДЦ, САД, 2018.
4. Фауци, АС; Моренс, ДМ Зика вирус у Америци — још једна претња арбовирусом. Н. Енгл. Ј. Мед. 2016, 374, 601–604. [ЦроссРеф] [ПубМед]
5. Лиу-Хелмерссон, Ј.; Куам, М.; Вилдер-Смитх, А.; Стенлунд, Х.; Еби, К.; Массад, Е.; Роцклов, Ј. Цлимате Цханге анд Аедес Вецторс: 21ст Центури Пројецтионс фор Денгуе Трансмиссион ин Еуропе. ЕБиоМедицине 2016, 7, 267–277. [ЦроссРеф] [ПубМед]
6. Риан, СЈ; Царлсон, ЦЈ; Мордекај, ЕА; Јохнсон, ЛР Глобална експанзија и редистрибуција ризика од преноса вируса Аедес са климатским променама. ПЛоС Негл. Троп. Дис. 2019, 13, е0007213. [ЦроссРеф]
7. Центри за контролу и превенцију болести. Комарци у Сједињеним Државама|Комарци|ЦДЦ. Доступно на мрежи: хттпс://ввв. цдц.гов/москуитоес/абоут/москуитоес-ин-тхе-ус.хтмл (приступљено 30. марта 2022).
8. Милес, КМ; Пиерро, ДЈ; Олсон, КЕ Поређење потенцијала преношења два генетски различита вируса Синдбис након оралне инфекције Аедес аегипти (Диптера: Цулицидае). Ј. Мед. Ентомол. 2004, 41, 95–106. [ЦроссРеф]
9. Ламбрецхтс, Л.; Цхевиллон, Ц.; Олбрајт, РГ; Тхаисомбоонсук, Б.; Рицхардсон, ЈХ; Јарман, РГ; Сцотт, ТВ Генетичка специфичност и потенцијал за локалну адаптацију између вируса денге и вектора комараца. БМЦ Евол. Биол. 2009, 9, 160. [ЦроссРеф]
10. Тсетсаркин, КА; Ванландингем, ДЛ; МцГее, ЦЕ; Хиггс, С. Једна мутација у вирусу Цхикунгуниа утиче на специфичност вектора и потенцијал епидемије. ПЛоС Патог. 2007, 3, 1895–1906. [ЦроссРеф]
11. Тсетсаркин, КА; МцГее, ЦЕ; Хиггс, С. Цхикунгуниа вирус Адаптација на комарце Аедес албопицтус није у корелацији са стицањем зависности од холестерола или смањеним ПХ прагом за реакцију фузије. Вирол. Ј. 2011, 8, 376. [ЦроссРеф]
12. Тхибервилле, СД; Моиен, Н.; Дупуис-Магуирага, Л.; Ноугаиреде, А.; Гоулд, ЕА; Рокуес, П.; де Ламбаллерие, Кс. Цхикунгуниа грозница: епидемиологија, клинички синдром, патогенеза и терапија. Антивир. Рес. 2013, 99, 345–370. [ЦроссРеф]
13. Франц, АВЕ; Кантор, АМ; Пассарелли, АЛ; Цлем, РЈ Ткивне баријере за инфекцију арбовирусом код комараца. Вируси 2015, 7, 3741–3767. [ЦроссРеф]
14. Хоук, ЕЈ; Харди, ЈЛ; Цхилес, РЕ Пермеабилити оф тхе Мидгут Басал Ламина ин тхе Москуито, Цулек тарсалис Цокуиллетт (Инсецта, Диптера). Ацта Троп. 1981, 38, 163–171. [ПубМед]
15. Боверс, ДФ; Абелл, БА; Браун, ДТ репликација и тропизам ткива алфавируса Синдбис у Москуито Аедес албопицтус. Вирологи 1995, 212, 1–12. [ЦроссРеф] [ПубМед]
16. Гирард, ИА; Клинглер, КА; Хиггс, С. Дисеминација вируса Западног Нила и тропизми ткива код орално заражених Цулек пипиенс куинкуефасциатус. Вецтор Борне Зоонотиц Дис. 2004, 4, 109–122. [ЦроссРеф]
17. Миллер, БР; Митцхелл, ЦЈ; Баллингер, МЕ Репликација, ткивни тропизми и пренос вируса жуте грознице у Аедес албопицтус. Транс. Р. Соц. Троп. Мед. Хиг. 1989, 83, 252–255. [ЦроссРеф] [ПубМед]
18. Салазар, МИ; Рицхардсон, ЈХ; Санцхез-Варгас, И.; Олсон, КЕ; Беати, БЈ вирус денге типа 2: Репликација и тропизми код орално заражених комараца Аедес аегипти. БМЦ Мицробиол. 2007, 7, 9. [ЦроссРеф] [ПубМед]
19. Ромосер, ВС; Васиелоски, ЛП; Пусхко, П.; Кондиг, ЈП; Лердтхуснее, К.; Неира, М.; Лудвиг, ГВ Докази за канале за ширење арбовируса из средњег црева комараца (Диптера: Цулицидае). Ј. Мед. Ентомол. 2004, 41, 467–475. [ЦроссРеф]
20. Кантор, АМ; Грант, ДГ; Балараман, В.; Вхите, ТА; Франз, АВЕ Ултраструктурна анализа ширења вируса Цхикунгуниа из средњег црева комарца жуте грознице, Аедес аегипти. Вируси 2018, 10, 571. [ЦроссРеф]
21. Цуи, И.; Грант, ДГ; Лин, Ј.; Иу, Кс.; Франз, АВЕ Зика вирус Ширење из средњег црева Аедес аегипти је олакшано структурном модификацијом базалне ламине средњег црева посредованом крвном брашном. Вируси 2019, 11, 1056. [ЦроссРеф]
22. Веавер, СЦ; Сцотт, ТВ; Лоренц, ЛХ; Лердтхуснее, К.; Ромосер, ВС Патолошке промене повезане са тогавирусом у средњем цреву природног вектора комараца. Ј. Вирол. 1988, 62, 2083–2090. [ЦроссРеф]
23. Лердтхуснее, К.; Ромосер, ВС; Фаран, МЕ; Дохм, ДЈ Рифт Валлеи Февер Вирус у кардији Цулек пипиенса: Имуноција на хемијску и ултраструктурну студију. Сам. Ј. Троп. Мед. Хиг. 1995, 53, 331–337. [ЦроссРеф]
24. Ромосер, ВС; Фаран, МЕ; Баилеи, ЦЛ Новопризнати пут ширења арбовируса из средњег црева комараца (Диптера: Цулицидае). Ј. Мед. Ентомол. 1987, 24, 431–432. [ЦроссРеф] [ПубМед]
25. Енгелхард, ЕК; Кам-Морган, ЛНВ; Васхбурн, ЈО; Волкман, ЛЕ Трахеални систем инсеката: канал за системско ширење вируса нуклеарне полиедрозе Аутограпха Цалифорница М. Проц. Натл. Акад. Сци. УСА 1994, 91, 3224–3227. [ЦроссРеф] [ПубМед]
26. Меанс, ЈЦ; Пассарелли, АЛ вирусни фибробластни фактор раста, матрикс металопротеазе и каспазе су повезани са појачавањем системске инфекције бакуловирусима. Проц. Натл. Акад. Сци. САД 2010, 107, 9825–9830. [ЦроссРеф] [ПубМед]
27. Ромосер, ВС; Турелл, МЈ; Лердтхуснее, К.; Неира, М.; Дохм, Д.; Лудвиг, Г.; Васиелоски, Л. Патхогенесис оф Рифт Валлеи Февер Вирус ин Москуитоес-Трацхеал Цондуитс & тхе Басал Ламина ас ан Ектра-целлулар Барриер. Арцх. Вирол. Суппл. 2005, 19, 89–100. [ЦроссРеф]
28. Паулсон, СЛ; Гримстад, ПР; Цраиг, ГБ Препреке средњег црева и пљувачне жлезде за ширење вируса Ла Цроссе код комараца из групе Аедес трисериатус. Мед. Вет. Ентомол. 1989, 3, 113–123. [ЦроссРеф] [ПубМед]
29. Хартман, ДА; Бергрен, НА; Кондасх, Т.; Сцхлатманн, В.; Вебб, ЦТ; Кадинг, РЦ Осјетљивост и баријере за инфекцију комараца у Колораду вирусом грознице Рифт Валлеи. ПЛоС Негл. Троп. Дис. 2021, 15, е0009837. [ЦроссРеф]
30. Беннетт, КЕ; Олсон, КЕ; Муноз, МдЛ; Фернандез-Салас, И.; Фарфан-Але, ЈА; Хиггс, С.; Црна ИВ, ВЦ; Беати, БЈ Варијација у векторској компетенцији за вирус Денга 2 међу 24 колекције Аедес аегипти из Мексика и Сједињених Држава. Сам. Ј. Троп. Мед. Хиг. 2002, 67, 85–92. [ЦроссРеф]
32. Боромиса, РД; Граисон, МА Орални пренос вируса Јаместовн Цаниона од комараца Аедес Провоцанс из североисточног Њујорка. Џем. Моск. Контрола доц. 1991, 7, 42–47.
32. Кхоо, ЦЦ; Доти, ЈБ; Хелд, НЛ; Олсон, КЕ; Франз, АВ Изолација мутаната из средњег црева два америчка генотипа денга вируса 2 вируса из Аедес аегипти. Вирол. Ј. 2013, 10, 257. [Унакрсна референца]
33. Турелл, МЈ; Линтхицум, КЈ; Патрициан, ЛА; Давиес, ФГ; Каиро, А.; Баилеи, ЦЛ Векторска компетенција одабраних врста афричких комараца (Диптера: Цулицидае) за вирус грознице Рифт Валлеи. Ј. Мед. Ентомол. 2008, 45, 102–108. [ЦроссРеф]
34. Крамер, ЛД; Харди, ЈЛ; Прессер, СБ; Хоук, ЕЈ Препреке ширења вируса западног коњског енцефаломијелитиса у Цулек тарсалис инфицираном након гутања ниских вирусних доза. Сам. Ј. Троп. Мед. Хиг. 1981, 30, 190–197. [ЦроссРеф] [ПубМед]
35. Дохм, ДЈ; О'Гуинн, МЛ; Турелл, МЈ Утицај температуре околине на способност Цулек пипиенс (Диптера: Цулицидае) да преноси вирус Западног Нила. Ј. Мед. Ентомол. 2002, 39, 221–225. [ЦроссРеф] [ПубМед]
36. Рицхардс, СЛ; Морес, ЦН; Господ, ЦЦ; Табацхницк, ВЈ Утицај спољашње температуре инкубације и изложености вирусу на векторску компетенцију Цулек пипиенс куинкуефасциатус Саи (Диптера: Цулицидае) за вирус Западног Нила. Зоонотиц Дис. 2007, 7, 629–636. [ЦроссРеф] [ПубМед]
37. Алто, БВ; Бетинарди, Д. Температура и инфекција вирусом денге код комараца: независни ефекти на незреле и одрасле фазе. Сам. Ј. Троп. Мед. Хиг. 2013, 88, 497–505. [ЦроссРеф] [ПубМед]
38. Мбаика, С.; Лутомиах, Ј.; Чепкорир, Е.; Мулва, Ф.; Кхаиека-Вандабва, Ц.; Тигои, Ц.; Оиоо-Окотх, Е.; Мутисиа, Ј.; Нг'Анг'А, З.; Санг, Р. Векторска компетенција Аедес аегипти у преношењу вируса Цхикунгуниа: Ефекти и импликације спољашње температуре инкубације на стопе ширења и инфекције. Вирол. Ј. 2016, 13, 114. [ЦроссРеф]
39. Рицхардс, СЛ; Господ, ЦЦ; Песко, К.; Табацхницк, ВЈ Еколошки и биолошки фактори који утичу на Цулек пипиенс Куинкуе фасциатус Саи (Диптера: Цулицидае) Векторска компетенција за вирус енцефалитиса Саинт Лоуиса. Сам. Ј. Троп. Мед. Хиг. 2009, 81, 264–272. [ЦроссРеф] [ПубМед]
40. Килпатрик, АМ; Меола, МА; Моуди, РМ; Крамер, ЛД температура, вирусна генетика и преношење вируса западног Нила од комараца Цулек пипиенс. ПЛоС Патог. 2008, 4, е1000092. [ЦроссРеф]
41. Вестброок, ЦЈ; Реискинд, МХ; Пешко, КН; Греене, КЕ; Лоунибос, ЛП Температура животне средине ларве и осетљивост Аедес албопицтус Скусе (Диптера: Цулицидае) на вирус Цхикунгуниа. Зоонотиц Дис. 2010, 10, 241–247. [ЦроссРеф]
42. Мутури, ЕЈ; Блацксхеар, М.; Монтгомери, А. Ефекти окружења ларве зависни од температуре и густине на компетенцију Аедес аегипти за алфавирус. Ј. Вецтор Ецол. 2012, 37, 154–161. [ЦроссРеф]
43. Кнецхт, Х.; Рицхардс, С.; Баланаи, Ј.; Вхите, А. Импацт оф Москуито Аге анд Инсецтициде Екпосуре он Сусцептибилити оф Аедес албопицтус (Диптера: Цулицидае) то Инфецтион витх Зика Вирус. Патогени 2018, 7, 67. [Унакрсна референца]
44. Рицхардс, СЛ; Вхите, АВ; Баланаи, ЈАГ Потенцијал за излагање сублеталном инсектициду утицају векторске компетенције Аедес албопицтус (Диптера: Цулицидае) за вирусе Денга и Зика вируса. Рес. Реп. Троп. Мед. 2017, 8, 53–57. [ЦроссРеф] [ПубМед]
45. Мутури, ЕЈ; Ким, Ц.-Х.; Алто, БВ; Беренбаум, МР; Шулер, МА Стрес околине ларве мења компетенцију Аедес аегипти за Синдбис вирус. Троп. Мед. Инт. Здравље 2011, 16, 955–964. [ЦроссРеф] [ПубМед]
46. Мутури, ЕЈ; Алто, БВ Ларвал Температура животне средине и изложеност инсектицидима Алтер Аедес аегипти Цомпетенце фор Арбовирусес. Зоонотиц Дис. 2011, 11, 1157–1163. [ЦроссРеф] [ПубМед]
48. Фернандес, КМ; Томе, ХВВ; Миранда, ФР; Гонцалвес, ВГ; Пасцини, ТВ; Серрао, ЈЕ; Мартинс, ГФ Аедес аегипти Ларве третиране Спиносадом дају одрасле јединке са оштећеним средњим цревом и смањеном плодношћу. Хемосфера 2019, 221, 464–470. [ЦроссРеф]
48. Молтини-Цонцлоис, И.; Сталински, Р.; Тетреау, Г.; Деспрес, Л.; Ламбрецхтс, Л. Изложеност ларви бактеријском инсектициду Бти повећава осетљивост одраслих Аедес аегипти комараца на вирус денга вируса. Инсекти 2018, 9, 193. [ЦроссРеф]
49. Алто, БВ; Лоунибос, ЛП; Хиггс, С.; Јулиано, СА Конкуренција ларви различито утиче на инфекцију арбовирусом код комараца Аедес. Екологија 2005, 86, 3279–3288. [ЦроссРеф] [ПубМед]
50. Бевинс, СН Инвазивни комарци, конкуренција ларви и индиректни ефекти на векторску компетенцију домаћих врста комараца (Диптера: Цулицидае). Биол. Инвазије 2008, 10, 1109–1117. [ЦроссРеф]
51. Беннетт, КЕ; Беати, БЈ; Блацк, ВЦ селекција Д2С3, соја Аедес аегипти (Диптера: Цулицидае) са високом оралном осетљивошћу на вирус Денга 2 и Д2МЕБ, соја са баријером средњег црева за бег од Денга 2. Ј. Мед. Ентомол. 2005, 42, 110–119. [ЦроссРеф]
52. Гримстад, ПР; Валкер, ЕД Аедес трисериатус (Диптера: Цулицидае) и Ла Цроссе Вирус. ИВ. Недостатак исхране ларви утиче на препреке заразе и преноса код одраслих. Ј. Мед. Ентомол. 1991, 28, 378–386. [ЦроссРеф]
53. Тхомас, РЕ; Ву, ВК; Верлеие, Д.; Раи, КС Дебљина базалне ламине средњег црева и стопе ширења вируса Денга{1}} у лабораторијским сојевима Аедес албопицтус (Диптера: Цулицидае). Ј. Мед. Ентомол. 1993, 30, 326–331. [ЦроссРеф]
54. Армстронг, ПМ; Ехрлицх, ХИ; Магалхаес, Т.; Миллер, МР; Цонваи, ПЈ; Брансфиелд, А.; Мисенцик, МЈ; Глорија-Сорија, А.; Варрен, ЈЛ; Андреадис, ТГ; ет ал. Узастопни оброци крви повећавају ширење вируса међу комарцима и повећавају потенцијал преношења. Нат. Мицробиол. 2020, 5, 239–247. [ЦроссРеф] [ПубМед]
55. Фире, А.; Ксу, С.; Монтгомери, МК; Костас, СА; Возач, СЕ; Мелло, ЦЦ Потентна и специфична генетска интерференција дволанчане РНК у Цаенорхабдитис Елеганс. Природа 1998, 391, 806–811. [ЦроссРеф] [ПубМед]
56. Блаир, ЦД РНАи комараца је главни урођени имунолошки пут који контролише инфекцију и пренос арбовируса. Футуре Мицробиол. 2011, 6, 265–277. [ЦроссРеф] [ПубМед]
57. Цампбелл, ЦЛ; Кеене, КМ; Брацкнеи, ДЕ; Олсон, КЕ; Блаир, ЦД; Вилусз, Ј.; Фои, БД Аедес аегипти користи РНК интерференцију у одбрани од инфекције вирусом Синдбис. БМЦ Мицробиол. 2008, 8, 47. [ЦроссРеф]
58. Санцхез-Варгас, И.; Сцотт, ЈЦ; Пооле-Смитх, БК; Франц, АВЕ; Рие Барбоса-Соломиеу, В.; Вилусз, Ј.; Олсон, КЕ; Блаир, ЦД Денге вирус типа 2 Инфекције Аедес аегипти су модулисане путем интерференције РНК комараца. ПЛоС Патог. 2009, 5, е1000299. [ЦроссРеф]
59. Кхоо, ЦЦ; Пипер, Ј.; Санцхез-Варгас, И.; Олсон, КЕ; Франз, АВ Пут интерференције РНК утиче на инфекцију средњег црева и баријере за бекство за вирус Синдбис у Аедес аегипти. БМЦ Мицробиол. 2010, 10, 130. [ЦроссРеф]
60. Франз, АВЕ; Санцхез-Варгас, И.; Аделман, ЗН; Блаир, ЦД; Беати, БЈ; Јамес, АА; Олсон, КЕ Енгинееринг Резистенција заснована на РНА интерференцији на вирус Денга типа 2 у генетски модификованом Аедес аегипти. Проц. Натл. Акад. Сци. УСА 2006, 103, 4198–4203. [ЦроссРеф]
61. Бонизони, М.; Дунн, ВА; Цампбелл, ЦЛ; Олсон, КЕ; Маринотти, О.; Џејмс, АА Варијација соја у транскриптому вектора грознице денге, Аедес аегипти. Г3 Гени|Геноми|Генет. 2012, 2, 103–114. [ЦроссРеф]
62. Царвалхо-Леандро, Д.; Аирес, ЦФЈ; Гуедес, ДРД; Суесдек, Л.; Мело-Сантос, МАВ; Оливеира, ЦФ; Цордеиро, МТ; Регис, ЛН; Маркуес, ЕТ; Гил, ЛХ; ет ал. Варијације имуног транскрипта међу популацијама Аедес аегипти са изразитом осетљивошћу на серотип денга вируса 2. Ацта Троп. 2012, 124, 113–119. [ЦроссРеф]
63. Достерт, Ц.; Јоуангуи, Е.; Ирвинг, П.; Троклер, Л.; Галиана-Арноук, Д.; Хетру, Ц.; Хоффманн, ЈА; Имлер, ЈЛ Јак-СТАТ сигнални пут је неопходан, али није довољан за антивирусни одговор дрозофиле. Нат. Иммунол. 2005, 6, 946–953. [ЦроссРеф]
64. Соуза-Нето, ЈА; Сим, С.; Димопоулос, Г. Еволуциона очувана функција ЈАК-СТАТ пута у одбрани од денга грознице. Проц. Натл. Акад. Сци. САД 2009, 106, 17841–17846. [ЦроссРеф] [ПубМед]
65. Јупатанакул, Н.; Сим, С.; Англеро-Родригуез, ИИ; Соуза-Нето, Ј.; Дас, С.; Поти, КЕ; Росси, СЛ; Бергрен, Н.; Василакис, Н.; Димопоулос, Г. Инжењерски Аедес аегипти ЈАК/СТАТ Имунитет на вирус Денга вируса посредован путем пута. ПЛоС Негл. Троп. Дис. 2017, 11, е0005187. [ЦроссРеф] [ПубМед]
66. Бехура, СК; Гомез-Мацхоро, Ц.; Дебруин, Б.; Ловин, ДД; Харкер, БВ; Ромеро-Северсон, Ј.; Мори, А.; Северсон, ДВ Утицај генотипа комараца на транскрипциони одговор на инфекцију вирусом денге. Фунцт. Интегр. Геном. 2014, 14, 581–589. [Унакрсна референца] 6
7. Хоффманн, ЈА Имуни одговор Дросопхила. Природа 2003, 426, 33–38. [ЦроссРеф] [ПубМед]
68. Рамирез, ЈЛ; Димопоулос, Г. Тхе Толл Иммуне Сигналинг Патхваи Цонтрол Цонсервед Анти-денгуе Дефенсе тхроугх Диверсе Ае. аегипти сојеви и против вишеструких серотипова вируса Денга. Дев. Цомп. Иммунол. 2010, 34, 625–629. [ЦроссРеф] [ПубМед]
69. Кси, З.; Рамирез, ЈЛ; Димопоулос, Г. Тхе Аедес аегипти Толл Патхваи контролише инфекцију вирусом Денга. ПЛоС Патог. 2008, 4, е1000098. [ЦроссРеф]
70. Сандерс, ХР; Фои, БД; Еванс, АМ; Росс, ЛС; Беати, БЈ; Олсон, КЕ; Гилл, СС Синдбис вирус индукује транспортне процесе и мења експресију гена путева урођеног имунитета у средњем цреву вектора болести, Аедес аегипти. Инсецт Биоцхем. Мол. Биол. 2005, 35, 1293–1307. [ЦроссРеф]
71. Цоста, А.; Јан, Е.; Сарнов, П.; Сцхнеидер, Д. Пут Имд је укључен у антивирусне имуне одговоре код дрозофиле. ПЛоС ОНЕ 2009, 4, е7436. [ЦроссРеф]
72. Оберст, А.; Бендер, Ц.; Греен, ДР Живети са смрћу: Еволуција митохондријалног пута апоптозе код животиња. Целл Деатх Диффер. 2008, 15, 1139–1146. [ЦроссРеф]
73. Ваук, ДЛ; Корсмеиер, СЈ Целл Деатх ин Девелопмент. Целл 1999, 96, 245–254. [ЦроссРеф]
74. Рудин, ЦМ; Тхомпсон, ЦБ АПОПТОЗА И БОЛЕСТИ: Регулација и клиничка релевантност програмиране ћелијске смрти. Анну. Рев. Мед. 1997, 48, 267–281. [ЦроссРеф] [ПубМед]
75. Цлоустон, ВМ; Керр, ЈФР апоптоза, лимфоцитотоксичност и обуздавање вирусних инфекција. Мед. Хипотезе 1985, 18, 399–404. [ЦроссРеф] [ПубМед]
76. Цлем, РЈ; Миллер, ЛК Апоптоза смањује и ин витро репликацију и ин виво инфективност бакуловируса. Ј. Вирол. 1993, 67, 3730–3738. [ЦроссРеф]
77. Албертс, Б.; Јохнсон, А.; Левис, Ј.; Рафф, М.; Робертс, К.; Валтер, П. Програмирана ћелијска смрт (апоптоза). У Молекуларној биологији ћелије, 4. изд.; Гарланд Сциенце: Њујорк, Њујорк, САД, 2002.
78. Цроок, НЕ; Цлем, РЈ; Миллер, ЛК Бакуловирусни ген који инхибира апоптозу са мотивом налик на цинк прст. Ј. Вирол. 1993, 67, 2168–2174. [ЦроссРеф]