Прекомерна експресија ГРП78 покреће ПИНК1-неуропротективну митофагију посредовану ИП3Р, део 3

3.1.3. Индукција митофагије преко прекомерне експресије ГРП78 посредује у неуропротекцији

Претпоставили смо да неуропротекција посредована ГРП78-ом може бити индукцијом селективне аутофагије митохондрија да би се убрзало уклањање дефектних органела.

Последњих година све више студија показује да митохондрије играју важну улогу у формирању и одржавању памћења. Митохондрије су важан орган у ћелијама који је одговоран за производњу енергије. Поред тога, митохондрије су такође укључене у регулацију целокупног ћелијског метаболизма и равнотежу редокс реакција. Недавне студије су такође откриле да митохондрије такође могу утицати на учвршћивање дуготрајне меморије регулацијом промена у неуронској ексцитабилности.

Митохондрије су одговорне за оксидативни метаболизам у ћелијама, а енергија ћелија се углавном преноси преко аденозин трифосфата (АТП) у митохондријима. Неурони, као јединице за пренос информација људског тела, имају посебно велику потражњу за енергијом, па је нормална функција њихових здравих митохондрија од суштинског значаја за физиолошке карактеристике неурона и нормалну функцију нервног система. Истраживачи су открили да ће у стању болести или старења здравље митохондрија бити оштећено и њихова функција ће опасти, што ће резултирати падом функције неурона и смањеном способношћу памћења.

Формирање и одржавање памћења захтева сложену координацију између неурона, синапси и митохондрија у исто време. На синапсама на крају неурона, митохондрије се налазе између неурона и глијалних ћелија које подржавају неуроне. Ове синапсе имају специфичну структуру и веома су пластичне, које се могу прилагодити потребама памћења и учења. Митохондрије су попут „производног центра“ синапси, обезбеђујући неуронима и синапсама потребну енергију и супстанце које могу брзо да регулишу ексцитабилност неурона и одржавају дугорочну пластичност и стабилност синапси.

Још један истраживачки правац који се односи на митохондрије и памћење је лечење ћелија кроз факторе повезане са трансформацијом (врста протеина). Овај третман може побољшати функцију митохондрија, повећати брзину метаболизма и заштитити здравље неурона и синапси. На основу ових студија, сугерише се да јачањем здравља митохондрија можемо побољшати наше памћење и интелектуалне способности док истовремено смањујемо ризик од Алцхајмерове и других неуролошких болести.

Укратко, митохондрије су саставни део формирања и одржавања меморије. Здравље митохондрија је од суштинског значаја за нормалну функцију неурона и синапси и за одржавање дугорочне пластичности и стабилности. Треба да обратимо пажњу на исхрану, вежбање и навике у начину живота како бисмо одржали здравље митохондрија, смањили ризик од Алцхајмерове и других неуролошких болести и побољшали нашу интелигенцију и памћење. Види се да треба да побољшамо памћење, а Цистанцхе може значајно да побољша памћење јер може да регулише и равнотежу неуротрансмитера, као што је повећање нивоа ацетилхолина и фактора раста који су веома важни за памћење и учење. Поред тога, Цистанцхе десертицола може побољшати проток крви и подстаћи испоруку кисеоника, што може осигурати да мозак добије адекватну исхрану и енергију, чиме се побољшава виталност и издржљивост мозга.

Кликните на сазнајте начине да побољшате своје памћење

У прилог овој хипотези, доказано је да ГРП78 промовише макроаутофагију [4] (у даљем тексту аутофагија).

Покушали смо да утврдимо да ли је аутофагија неопходна за ГРП78-индуковану неуропротекцију користећи неколико добро окарактерисаних модулатора аутофагије: рапамицин, који активира аутофагију инхибицијом мТОРЦ1, и два инхибитора тока аутофагије: 3-метиладенин ({{4 }}МА), инхибитор класе ИИИ фосфатидилинозитолкиназе ПИ3К, и ЛИ294002, инхибитор класе И ПИ3К.

Сва три модулатора аутофагије смањила су преживљавање у групама ГФП и ГРП78 у ћелијама третираним Тун у поређењу са носачем (слика 4А). Ови резултати сугеришу да је исправна иницијација аутофагије, кроз ПИ3К-Бецлин1 пут, и касни флукс неопходан, иако не довољан, за тада европротективне ефекте прекомерне експресије ГРП78 у ћелијама под стресом ЕР.

Слика 3. Прекомерна експресија ГРП78 спасава митохондријалну дисфункцију у НСЦ34 ћелијама под стресом. (А) Имуноблот и тракасти графикон који показују нивое ГРП78 у НСЦ34 ћелијама нуклеофектираним плазмидним вектором да би се прекомерно експримирао ГРП78 или несродна контрола протеина (ГФП). (Б) Проценат преживљавања ГФП- или ГРП78-ћелија које експримирају НСЦ34 (средња вредност ± СЕМ) након 24 х у медијуму који садржи 1 µг/мЛ туникамицина (Тун) (лево) или 10 µМ нокодазола (десно) одређено коришћењем МТТ теста (н=4; * п < 0.005,** п < 0,001 у односу на ГФП, Студентов т-тест ). (Ц) Квантитативна анализа флуоресценције МитоСОКС у ћелијама које прекомерно експримирају ГФП или ГРП78 и третиране са Тун или вехикулумом (лево) или ефавирензом (ЕФВ) као контролом или носачем (десно). (Д) Квантитативна анализа флуоресценције ТМРМ у ћелијама које прекомерно експримирају ГФП или ГРП78 и третиране са Тун или вехикулумом (лево) или ЕФВ или носачем (десно) (ГФП-Вех је контролна група). (Е) Лево: Репрезентативна анализа концентрације О2 (користећи Кларкову О2 електроду) као функцију времена у ћелијама које прекомерно експримирају ГФП или ГРП78 и третиране са Тун. Десно: потрошња О2 после 5 х Тунтреатмента у ћелијама које прекомерно експримирају ГФП или ГРП78 (ГФП-Вех је контролна група) (н=4; * п < 0,05 у односу на Вех-ГФП, # п < 0,05 у односу на ГРП78, једносмерна АНОВА).

Слика 4. Означавање митохондрија за митофагију је привилеговано прекомерном експресијом ГРП78. (А) Ступасти графикон процента одрживих НСЦ34 ћелија (средња вредност ± СЕМ) нуклеофектираних било ГФП или ГРП78 плазмидима и третираних Тун или комбинацијом Тун са модулаторима аутофагије: рапамицин (РАПА), 3МА или ЛИ-902, у вези контролно средство (Вех), одређено МТТ тестом 24 х након третмана (ГФП-Вех је контролна група) (н=4–8, * п < 0.05 вс.

Вех-ГФП; # п < 0.05 наспрам Тун-ГФП).(Б) Репрезентативне конфокалне слике ћелија нуклеофектираних само ПАРК2-ХА плазмидом (горњи, средњи панели, контрола) или са ГРП78 плазмид (доњи панели) третиран са вехикулумом (Вех) или Тун (5 х) и имуно обојен на ХА (зелено) и ХСП60 (црвено); скала=10 µм. (Ц) Просек ± СЕМ Пирсоновог коефицијента корелације Паркин и Хсп60 ко-локализације из Вех, Тун и Тун+ГРП78 група (н=4; * п < 0,05 наспрам Паркин-Вех, # п < 0,05 вс.

Паркин-Тун, једносмерна АНОВА). (Д) Леви, Вестерн блотови за назначене протеине у митохондријалним (мито) и цитосолним (цито) окупљеним фракцијама из ГФП- или ГРП78- ћелија које прекомерно експресују, третиране вехикулом или Тун током 5 х. Анализирани протеини су ОПА-1, ЦВ-, ПДИ, ГРП78, убиквитинирани остаци, ЛЦ3 и актин. Десно, тракасти графикони промене просечног пута ГРП78 у обе обједињене фракције и ЛЦ{{1{{20}}}}ИИ у митохондријалној фракцији у односу на актин (цитосол) или бета подјединицу комплекса В (ЦВ-Б) (митохондрије) у ГФП групи. (Е) Ступасти графикон процента живих ћелија (средња вредност ± СЕМ) које прекомерно експримирају ГФП или ГРП78 протеине и лечених само Тун-ом или у комбинацији са ЦЦЦП, ЦСА или БАПТА-АМ, одређен МТТ тестом 24 х након третмана у вези са контролним носачем ћелије. (Ф) Сличан тракасти графикон виталности ћелија за ћелије третиране тапсигаргином (ТХА) са или без ЦЦЦП (ГФП-Вех је контролна група) (н=4–8, у 3 различита експеримента, * п < 0,05 вс. контролно-Вех;# п < 0,05 у односу на ГРП78-Тун).

Паркин не учествује увек у митофагији јер се такође може покренути алтернативним механизмима [46]. Да бисмо утврдили да ли је Паркин укључен у ГРП{1}}посредовани ефекат, одредили смо субћелијску локацију ХА-означеног Паркина експримираног у НСЦ34 ћелијама са и без ЕР стреса.

Конфокалном микроскопијом приметили смо да се Паркин дистрибуира по целији НСЦ34 након 5 х третмана са носачем или Туном (Слика 4Б). Насупрот томе, у ћелијама које прекомерно експримирају ГРП78, дошло је до повећања ко-локализације Паркина са ХСП60, митохондријским протеином. , што сугерише циљање ове органеле формитофагије (слика 4Б, Ц).

Поред тога, изоловали смо митохондријалне и цитосолне фракције из ћелија које су имале прекомерну експресију или ГФП или ГРП78 и третиране су са Туном или вехикулом као контролом 5 х након инзулта. Чистоћа окупљених митохондријалних фракција потврђена је анализом присуства ОПА1 и ЦВ и одсуства протеина резидентног ЕР, протеиндисулфидне изомеразе (ПДИ) (слика 4Д).

Занимљиво је да смо такође приметили тенденцију повећања обиља ГРП78 у удруженим митохондријалним фракцијама ћелија под стресом ЕР у поређењу са контролом. Имајте на уму да иако Тун стимуланс такође може да изазове повећање нивоа ГРП78 у цитосолу, то није примећено на митохондријској фракцији.

Присилна прекомерна експресија ГРП78 је промовисала тенденцију повећања и ПИНК1 и Паркин акумулације у њиховој митохондријалној фракцији (Слика 4Д и Слика С4). Пријављено је да присуство Паркина појачава акумулацију Уб и појачава митофагију у поређењу са присуством самог ПИНК-а [42,47]. Сходно томе, имуноблотинг на убиквитин (Уб) је открио разлике у његовом профилу у митохондријалним фракцијама ћелија које експримирају ГРП78- у поређењу са ГФП групом (слика 4Д).

У стресним условима, убиквитилација митохондријалног протеина доводи до регрутовања компоненти машинерије аутофагозома које почиње акумулацијом липидоване изоформе ЛЦ3 и ЛЦ3ИИ [42,48].

У митохондријалној фракцији примећено је обиље протеина ЛЦ3ИИ са тенденцијом повећања веће присутности у ћелијама под стресом које прекомерно експримирају ГРП78 у односу на оне са ГФП у сличним условима (Слика 4Д). Узети заједно, ови подаци сугеришу да би присилна експресија ГРП78 могла олакшати његову митохондријалну транслокацију и означавање за митофагију.

Да бисмо утврдили могућу релевантност индукције митофагије за неуропротективни ефекат посредован прекомерном експресијом ГРП78, проценили смо промене изазване активаторима и инхибиторима митофагије. Користили смо карбонил цијанид м-хлорофенил хидразин (ЦЦЦП) да хемијски одвојимо оксидативну фосфорилацију и индукујемо митофагију колапсом потенцијала митохондријалне мембране [49,50], као и два инхибитора митофагије: БАПТА-АМ, ћелијски пермеантни цахелатор 2+ и циклоспорин А (ЦСА), инхибитор транзиције поре митохондријалне пермеабилности (мПТП) који блокира ефлукс Ца2+ из митохондрија [51].

Иако је ЦЦЦП третман у НСЦ34 био недовољан да би се значајно смањила одрживост, као што је широко објављено, открили смо да је исти третман на ћелијама под стресом повећао његов опстанак, без обзира на то да ли је ГРП78 био прекомерно изражен (Слика 4Е).

Важно је да је неуропротективни ефекат промовисан прекомерном експресијом ГРП78 на ћелије под стресом у ЕР-у ​​укинут у присуству ЦСА или БАПТА-АМ (Слика 4Е). Ови налази указују да индукција митофагије омогућава ћелијама да се носе са ЕР стресом и протоком Ца2+- је важан за неуропротективни ефекат који промовише ГРП78.

Једна од могућности да ГРП78 изазове митофагију могла би бити омогућавање неопходног деловања Ца2+-, можда кроз деловање инозитол 1,4,5 трифосфатног рецептора (ИП3Р) резидентног у ЕР-у, чији отвор омогућава проток Ца{7}} од ЕР до митохондрија. Желели смо да истражимо ову могућност спречавањем активације ИП3Р коришћењем тапсигаргина (ТХА), инхибитора Ца2+ АТПазе [52].

Такође је познато да Тхапсигаргин производи ЕР стрес у ћелијама пошто овај третман исцрпљује залихе Ца2+ из ЕР-а и стога повећава експресију ГРП78 као део канонског несавијеног протеинског одговора [53]. Слика 4Ф показује да тапсигаргин утиче на одрживост ћелија слично третману туникамицином у ГФП-контролним ћелијама и да ЦЦЦП истовремени третман спречава ћелијску смрт као што је примећено са Тун-ом.

Међутим, присилна прекомерна експресија ГРП78 није била способна да блокира штетан ефекат тапсигаргина као што је то било са увредом туникамицином. Ово запажање потврђује неопходно укључивање Ца2+ флукса у неуропротективни ефекат ГРП78, вероватно кроз ИП3Р.

3.1.4. Неуропротекција посредована ГРП78 Зависи од ПИНК1 и ИП3Р

Да бисмо започели идентификацију медијатора неуропротективног ефекта ГРП78, користили смо схРНА технологију. Прво смо потврдили да је одабрана схРНА смањила експресију ГРП78, ПИНК1 или ИП3Р, респективно (слика С4А-Ц) и да нису угрозили одрживост контролних ћелија (слика С4Д). Прво смо потврдили да је експресија самог ГРП78 била неопходна за неуропротекцију посредовану ГРП78- и ЦЦЦП да би се суочила са Тун-индукованим ЕР стресом (слика 5А).

Затим, утишавање ПИНК1 или ИП3Р блокирало је неуропротективни ефекат промовисан прекомерном експресијом ГРП78 или ЦЦЦП третманом (слика 5А). Штавише, открили смо да је померање ГРП78, нормално распоређено у глаткој дистрибуцији мрља око језгра, ко-локализовано на ИП3Р у жариштима пега када је било прекомерно изражено (Слика 5Б).

Заједно, ови резултати сугеришу да ГРП78 модулира заштитну митофагију у нашем ин витро моделу, и врши ову неуропротекцију на начин зависан од ПИНК1- и ИП3Р.

4. Дискусија

Јачање ендогених механизама неуропротекције може дати ефикасне терапеутске алате за спречавање неуродегенеративних процеса након трауматских лезија или болести [3,54,55]. Праћелник ГРП78 који борави у ЕР је на раскрсници неколико ових механизама који промовишу неуропротекцију када је прекомерно изражен код неколико болести. модели [4].

Да бисмо утврдили основне механизме, користили смо модел авулзије кичменог корена [55] који ремети повезаност мотонеурона изазивајући ретроградни неуродегенеративни процес [20].

Смрт мотонеурона у овом моделу карактерише ЕР стрес, блокирани ток аутофагије и није апоптотичан јер нису примећени активни облици каспазе 3 или 12, што указује да апоптоза није коначни извршилац одумирања неурона [20]. У складу са протеомским приступима, претходно смо верификовали да се анти-апоптотичке карактеристике јављају паралелно са апоптотичким након РА, блокирајући ефикасно извршење апоптозе [25].

У том неуродегенеративном контексту, прекомерна експресија ГРП78 је имала моторну неуропротекцију [20,26,27]. Овде смо, у почетку, користили непристрасну компаративну и квантитативну анализу протеома да бисмо открили примарну основу за ову неуропротекцију.

Неочекивано, митохондрије су биле главна мета, са смањеним садржајем протеина органела, праћеним украсима захваћених митохондрија у везикуле унутар оштећених мотонеурона који су прекомерно експримирали ГРП78.

Ова запажања сугеришу присуство митофагије као кључног елемента за неуропротекцију. Дееперин витро експерименти су потврдили ову хипотезу пошто је ГРП78 посредована неуропротекцијом (и) обнављањем дисања митохондрија и нивоа РОС, (ии) стимулацијом ПИНК1/ПАРКИН транслокације митохондрија, означавањем органеле за митофагију и (иии) зависношћу од функције ИП3Р као есенцијалног медијатора.

Према нашим сазнањима, ово је прва студија која показује да прекомерна експресија ГРП78 промовише заштитну митофагију. Поред улоге ГРП78 у праћењу погрешно савијања протеина и другим функцијама рада као протеина који везује калцијум [4,56], додали смо његово проактивно дејство на стимулишу митофагију. Штавише, наша студија се придружује сету недавних студија које повезују ЕР стрес са митохондријалном дисфункцијом [57–59].

Пронашли смо обележја за митофагију ин виво када је ГРП78 био прекомерно изражен и промовисао неуропротекцију. Исто је примећено коришћењем ин витро модела који опонашају неке особине неуродегенеративног процеса који се јавља након РА, као што је ЕР стрес [20,26].

Контрола квалитета митохондрија митофагијом је кључна за праћење садржаја митохондрија и хомеостазе метаболизма. У литератури је још увек спорно да ли индукција митофагије промовише преживљавање или ћелијску смрт у неколико болести због свог опсежног преслушавања са сигнализацијом апоптозе [60], иако је описано да чишћење оштећених митохондрија има основну улогу у неуродегенеративним болестима као што је Алцхајмерова болест. , Паркинсонова болест или старење [61].

Раније је објављено да ГРП78 инхибира апоптозу изазвану ЕР стресом спречавањем ЦХОП индукције [62,63], активације каспазе 7 [5] или активирањем ПИ3К-АКТ-мТОР сигналне осе [4]. Такође је показано да одржава ниске нивое оксидативног стреса и оштећења ДНК [4,64]. Конкретно, у ћелијама карцинома, показано је да ГРП78 слаби РОС активирањем сигнала киназе ендоплазматске ретикулум киназе сличне РНА (ПЕРК)-НРФ2 [65,66], што доводи до појачане регулације гена повезаних са антиоксидантима, као и повећања нивоа протеина у ћелијама рака. гликолитички ензими [67].

Уместо тога, открили смо да прекомерна експресија ГРП78 смањује гликолитичке ензиме (нпр. ЕНО1 и ЕНО2) (Додатне табеле). Ови резултати могу да сугеришу да би у нашем моделу уочено слабљење РОС могло бити прилично повезано са повећаном митофагијом, иако детаље о укљученом механизму треба даље истражити. Митохондријална дисфункција је уобичајено стање код неуродегенеративних болести [68], а митофагија је укључена код Паркинсонове [49,69], Хантингтонове [70,71] и Алцхајмерове болести и тауопатија [72].

Неколико аутора је истакло да правилном регулацијом путева митофагије тело може да избегне штетне оксидативне врсте и да регулише редокс равнотежу и хомеостазу [73]. Према томе, прекомерна експресија ГРП78 преко ове контролисане индукције митофагије може се сматрати неуропротективном стратегијом у овим болестима. Неуропротекција посредована прекомерном експресијом ГРП78 изгледа да зависи од Ца2+ флукса пошто га је блокирао БАПТА-АМ. БАПТА-АМ хелирање Ца2+ може интервенисати у неколико различитих корака дуж пута аутофагног тока, блокирајући не само покретање аутофагије, већ и инхибирајући кораке у формирању и обради аутофагозома [74].

Насупрот томе, употреба другог агенса који утиче на флукс Ца2+, као што је асхапсигаргин, дала је изненађујуће резултате. Тхапсигаргин блокира сарко-ендоплазматски ретикулум Ца2+ АТПазе (СЕРЦАс), одржавајући повишење Ца2+ цитосола, али такође покреће ЕР стрес кроз хронично исцрпљивање интрацелуларних Ца2+ залиха и акумулацију несавијених протеина.

У овој ситуацији, приметили смо да прекомерна експресија ГРП78 не може да спасе умируће ћелије, и сумњали смо да би то могло бити зато што тапсигаргин такође омета деловање ИП3Р [52]. Базална активност ИП3Р и континуиран ток ниског нивоа Ца2+ од ЕР до митохондрија су суштински за промовисање митохондријалног дисања и биоенергетике ћелије [75].

ГРП78 интерагује са МАМ-овима са комплексом формираним од сигма-1 рецептора (СИГР1) и ИП3Р [76,77]. Након ЕРстреса, интеракција СИГР1-ГРП78 се смањује узрокована смањењем Ца2+, што касније повећава ток Ца2+ из ЕР у митохондрије преко ИП3Р [76]. Поред тога, такође је показано да је ИП3Р неопходан за митофагију изазвану Паркином, посебно да би се омогућило груписање митохондрија низводно регрутовање Паркина [78].

Наши резултати се слажу са тим пошто је смањење ИП3Р технологијом схРНА укинуло неуропротекцију изазвану прекомерном експресијом ГРП78 у ћелијама под стресом ЕР. Занимљиво је и запажање да се ГРП78 може повећати у самој фракцији митохондрија. ГРП78 је откривен у интермедијарном простору унутрашње мембране и матриксу митохондрија, иако његова функција тамо остаје да се разјасни [79].

Ипак, иу погледу његових неколико функција, нагађамо да може бити баферовање Ца2+. Ако је то био случај, његово повећано присуство унутар митохондрија у ћелијама под стресом ЕР-а, када је прекомерно експримирано, могло би да ублажи масивни прилив Ца2+ да би се избегла апоптоза. Даље експериментисање о томе би било веома вредно.

Ограничења студија и будућа истраживања

Ова студија утире пут будућим анализама неуропротективне улоге митофагије зависне од ГРП{0}}у смрти неурона након неуротрауме. Прво ограничење ове студије је да је митофагија анализирана у одређеном временском прозору након РА, а пошто је митофагија динамичан процес, било би занимљиво дешифровати њен ток и који су молекули укључени.

Стога су потребни даљи експерименти који модулирају митофагију (кроз фармаколошке или генетске приступе) да би се дешифровали да ли су ефекти примећени ин виво искључиво зависни од митофагије.

Ово ће нам омогућити да потврдимо да прекомерна експресија ГРП78 промовише преживљавање МН кроз митофагију. Пошто постоји добро описана унакрсна веза између митохондрија и апоптозе, даље ин витро и ин виво манипулације су неопходне за дешифровање који механизам смрти покреће смрт МН у нашем моделу. Ово ће помоћи да се разјасни да ли ГРП78 директно модулира тај механизам ћелијске смрти тако што га блокира или да ли његово присуство омогућава МН да се носе са њим и преживе.

5. Закључци

Ова студија је била прва која је описала нову улогу ГРП78 у модулацији митофагије како би се постигла мотонеуронска заштита. Наши резултати откривају да би ГРП78 могао да покрене митофагију да промовише неуропротекцију дегенерирајућих моторних неурона након тешке трауматске повреде нерва, обнављајући оштећену митохондријалну функцију у неуронским ћелијама. Штавише, ова неуропротекција посредована ГРП78- зависи од ПИНК1 и ИП3Р. Стога, активација фино подешене митофагије, путем генске терапије са ГПР78 или другим кандидатима, може да се користи као нови терапеутски приступ за трауматске повреде нервног система .

Додатни материјали: Следећи материјали су доступни на мрежи на хттпс://ввв.мдпи.цом/артицле/10.3390/биомедицинес9081039/с1. Слика С1: Биоинформатичка анализа. Слика С2: Ендогени нивои ГРП78 након третмана Тун. Слика С3: Тун и ЕФВ узрокују митохондријалну дисфункцију у НСЦ34 ћелијама. Слика С4: Без наслова. Слика С5: Анализа виталности ћелије након нуклеофекције схРНА. Додатни материјали такође укључују табеле са свим протеинима откривеним у протеомској анализи.

Прилози аутора: ТЛ-Р. и ДР-Г. дизајнирао и извео експерименте, анализирао резултате и написао део рукописа. МХ-Г. а ЈФ је помогао у експериментима ин виво.ПМ-Г. а ЈМЛ је извршио пречишћавање митохондрија. МП, ЦБ и НА помогли су у функционалној анализи митохондрија. ВП и АБ су припремили све коришћене плазмиде ГРП78 и вирусне векторе. ЦЦ је осмислио, дизајнирао, надгледао и анализирао све експерименте и написао рукопис. Сви аутори су прочитали и сложили се са објављеном верзијом рукописа.

Финансирање: Овај рад је углавном подржан од стране Министра за економију и конкуренцију Шпаније (#САФ 2014-59701) и Марато де ТВ3 (#201607.10). Такође смо захвални на подршци коју финансирају ЦИБЕРНЕД и Генералитат де Цаталуниа. ЦБ је прималац уговора Мигуела Сервета (ЦП19/00077) са Института за здравље Карлос ИИИ.

Изјава институционалног одбора за ревизију: Све процедуре које су укључивале животиње одобрене су од стране Университат Аутонома де Барцелона и Генералитат де Цаталуниа и следиле су Директиву Савета Европске заједнице 2010/63/ЕУ.

Изјава о информисаној сагласности: Није применљиво.

Изјава о доступности података: Сви подаци генерисани или анализирани током ове студије укључени су у овај објављени чланак и његове датотеке са додатним информацијама.

Признања: Захваљујемо се Марти Монсеррат, Ариадни Арансанз, Мигуелу Цхиллону, Јулији Лоренцо, Сара Мармолејо и Групи за неуропластичност и регенерацију у УАБ. Посебно се захваљујемо Карлосу Гилему (Универзитет Цомплутенсе де Мадрид) што је љубазно обезбедио ПАРК2-ХАплазмид и Елени Галеи и Естер Далфо у УАБ за антитела.

Сукоб интереса: Аутори изјављују да нема сукоба интереса.

Посебна изјава: Аутори желе да посвете посебан спомен сећању на Кети Касас, утицајну научницу и дивну и храбру особу, која је прерано умрла у 54. години живота. Била је част и привилегија поделити део ње. живот, њен професионални капацитет и њене етичке и људске вредности.

Референце

1. Цонфорти, Л.; Гиллеи, Ј.; Цолеман, МП Валлериан дегенерација: нови пут смрти аксона који повезује повреде и болести. Нат.Рев. Неуросци. 2014, 15, 394–409. [ЦроссРеф]

2. Ромео-Гитарт, Д.; Форес, Ј.; Херрандо-Грабулоса, М.; Валлс, Р.; Леива-Родригуез, Т.; Галеа, Е.; Гонзалез-Перез, Ф.; Наваро, Кс.; Петегњеф, В.; Босцх, А.; ет ал. Неуропротективни лек за трауму нерва откривен коришћењем вештачке интелигенције. Сци. Реп. 2018, 8,1879. [ЦроссРеф]

3. Ромео-Гитарт, Д.; Форес, Ј.; Наваро, Кс.; Цасас, Ц. Појачана регенерација и смањена денервирана мишићна атрофија од стране НеуроХеалин а пре-клинички модел авулзије лумбалног корена са одложеном реимплантацијом. Сци. Реп. 2017, 7, 12028. [ЦроссРеф]

4. Цасас, Ц. Грп78 у центру стадијума неуродегенерације и рака. Фронт. Неуросци. 2017, 11, 1–15. [ЦроссРеф]

5. Редди, РК; Мао, Ц.; Баумеистер, П.; Аустин, РЦ; Кауфман, РЈ; Лее, АС Ендоплазматски ретикулум шаперон протеин ГРП78 штити ћелије од апоптозе изазване инхибиторима топоизомеразе. Улога места везивања АТП-а у супресији активације каспазе{2}}. Ј. Биол. Цхем. 2003, 278, 20915–20924. [ЦроссРеф] [ПубМед]

6. Ванг, М.; Кауфман, РЈ Погрешан савијање протеина у ендоплазматском ретикулуму као канал за људске болести. Природа 2016, 529,326–335. [ЦроссРеф] [ПубМед]7. Принтсев, И.; Цуриел, Д.; Царраваи, КЛ Контрола количине мембранског протеина у ендоплазматском ретикулуму. Ј. Мембр. Биол. 2016, 250, 1–14. [ЦроссРеф] [ПубМед]

8. Шу, Ц.-В.; Сун, Ф.-Ц.; Цхо, Ј.-Х.; Лин, Ц.-Ц.; Лиу, П.-Ф.; Цхен, П.-И.; Цханг, МД-Т.; Фу, Х.-В.; Лаи, И.-К. ГРП78 и Раф{11}}кооперативно пружају отпорност на апоптозу изазвану стресом ендоплазматског ретикулума. Ј. Целл. Пхисиол. 2008, 215, 627–635. [ЦроссРеф]

9. Цоок, КЛ; Цларке, Р. Топлотни шок 70 кДа протеин 5/глукозом регулисан протеин 78 "АМП" изазива аутофагију. Аутофагија 2012, 8,1827–1829. [ЦроссРеф]

10. Ли, З.; Ванг, И.; Невтон, ИП; Зханг, Л.; Ји, П.; Ли, З. ГРП78 је умешан у модулацију туморске аеробне гликолизе промовишући аутофагичну деградацију ИКК. Целл. Сигнал. 2015, 27, 1237–1245. [ЦроссРеф]

11. Цха-Молстад, Х.; Иу, ЈЕ; Лее, СХ; Ким, ЈГ; Сунг, КС; Хванг, Ј.; Иоо, ИД; Лее, ИЈ; Ким, СТ; Лее, ДХ; ет ал. Модулација активности СКСТМ1/п62 помоћу Н-терминалне аргинилације шаперона ендоплазматског ретикулума ХСПА5/ГРП78/БиП. Аутофагија 2016,12, 426–428. [ЦроссРеф]

12. Цха-Молстад, Х.; Сунг, КС; Хванг, Ј.; Ким, КА; Иу, ЈЕ; Иоо, ИД; Јанг, ЈМ; Хан, ДХ; Молстад, М.; Ким, ЈГ; ет ал.Амино-терминална аргинилација циља ендоплазматски ретикулум цхаперон БиП за аутофагију кроз везивање п62. Нат. Целл Биол.2015, 17, 917–929. [ЦроссРеф] [ПубМед]

For more information:1950477648nn@gmail.com