Зашто се Херба Цистанцхес може користити за лечење синдрома недостатка бубрега?

Метаболичко профилисање открива терапеутске ефекте Херба Цистанцхес у животињском моделу 'синдрома недостатка бубрега' изазваног хидрокортизоном

Контакт: emily.li@wecistanche.com

Јунпинг Киу, Минњун Цхен, Мингминг Су, Гуокианг Ксие, Ксин Ли, Мингмеи Зхоу, Аихуа Зхао, Јиан Јианг & Веи Јиа

Апстрактан

Позадина

Херба Цистанцхес(Роуцонгронг) је ефикасан у лечењу Схенку Зхенга ('синдром недостатка бубрега'). Међутим, механизми и системски метаболички одговори на биљну интервенцију су нејасни.

Методе

Користећи метаболичко профилисање засновано на ГЦ-МС, истражили смо метаболичке одговоре наХерба Цистанцхесинтервенција у моделу пацова изазваног хидрокортизономсиндром недостатка бубрега'.

Резултати

Метаболички профили пацова након ињекције хидрокортизона одступали су од метаболичког стања пре дозе у различитим временским тачкама, у распону од 1. до 10. дана, док су метаболички профили пацова третираних и хидрокортизоном и воденим екстрактомХерба Цистанцхесвраћен у стање пре дозе 10. дана.

Закључак

Интервенција одХерба Цистанцхесизазвало је системски опоравак од метаболичке пертурбације изазване хидрокортизоном код пацова. Ова студија такође показује да је метаболичко профилисање корисно у проучавању терапијских механизама биљних лекова.

Позадина

Кроз модулацију биохемијских реакција, контролних механизама и активности ензима, многи лекови или хемикалије изазивају флуктуацију метаболита присутних у појединачним ћелијама, ткивима или телесним течностима [1]. Метаболичко профилисање, тј. испитивање метаболита мале молекуларне тежине (МВ < 1000="" да)="" помоћу="" напредног="" аналитичког="" инструмента="" у="" комбинацији="" са="" мултиваријантном="" статистиком,="" може="" показати="" системске="" одговоре="" живих="" система="" на="" ксенобиотике.="" такође="" је="" технички="" изводљиво="" каталогизирати="" све="" мултифакторске="" наследне="" и="" метаболичке="" профиле="" организма="" под="" утицајем="" животне="" средине,="" укључујући="" физиопатолошке="" последице="" токсина="" и/или="" поремећаја="" изазваних="" болестима="" или="" неравнотеже="" у="" метаболичкој="" регулаторној="" мрежи="" на="" системском="" нивоу.="" до="" данас="" је="" успостављено="" метаболичко="" профилисање="" у="" скринингу,="" дијагнози,="" прогнози="" болести="" [2–4]="" и="" процени="" безбедности="" одређених="" лекова="" и="" хемикалија="">

Нуклеарна магнетна резонанца (НМР) [12] и масена спектрометрија (МС) [13], примењене самостално или у комбинацији, коришћене су у профилисању и карактеризацији метаболичких последица токсина и/или поремећаја изазваних болестима. НМР, који не захтева досадну претходну обраду узорака, је брз и једноставан метод за добијање суштинских информација из сложених и нетакнутих биолошких узорака. С друге стране, широка примена МС са цртицом у метаболичком профилисању је последица његове високе осетљивости и доступности [14, 15]. Нарочито је метаболичко профилисање засновано на ГЦ-МС коришћено у откривању механизама лекова и хербицида ин виво, биомаркера болести [16] и ефеката измењене експресије гена на метаболизам и праћења перформанси организама у биотехнолошким применама [17–20]. .

Херба Цистанцхес(Роуцонгронг), уобичајена кинеска тоник биљка која расте у пустињи, показује значајне активности за побољшање памћења [21] и/или сексуалне потенције [22], уклањање слободних радикала, против старења [23–26] и неуропротекцију [27]. , 28]. Вековима,Херба Цистанцхесје ефикасно коришћен у лечењу Схенку Зхенга ('синдром недостатка бубрега') [29]. НедавноХерба Цистанцхеспоказало се да има побољшане поремећаје бубрега изазване хидрокортизоном [30]; међутим, његове метаболичке последице нису јасне. Наша претходна студија [31] открила је да метаболички профили пацова изложених хидрокортизону у високим дозама (тј. животињски модел за 'синдром недостатка бубрега') [32], показао је јединствен биохемијски образац ендогених метаболита у урину. Ови резултати су нас инспирисали да проучавамо механизме конзистентних биохемијских промена након модификације хидрокортизона, користећи метаболичко профилисање засновано на ГЦ-МС да бисмо истражили да ли Херба Цистанцхес може да преокрене или супротстави аберантне метаболичке ефекте хидрокортизона.

Цистанцхе може побољшати функцију бубрега

Методе

Материјали и инструменти

Херба Цистанцхесје купљен од Схангхаи Леииунсханг Пхармацеутицал Цо Лтд (Кина) и идентификован као Цистанцхе десертицола ИЦ Ма од стране др Менгиуе Ванг (Лабораторија за фармакогностику, Фармацеутски факултет, Шангајски Јиао Тонг Универзитет) према стандардном протоколу [33]. Раствор хидрокортизона за ињекције (0.5 процената) је купљен од Схангхаи Ксинии Пхармацеутицал Цо (Кина). Дериватизујући реагенси су били Н-метил-Н-триметилсилил три флуороацетамид (МСТФА) (Сигма-Алдрицх Инц, САД) и триметиљодосилан (ТМСИ) (Сигма-Алдрицх Инц, САД) помешани у односу 1000:1. Сви реагенси коришћени у експерименту били су аналитичког квалитета. Ултра чиста вода је припремљена помоћу Миллипоре система за пречишћавање (18,2 МΩ, САД). Метаболички кавези су купљени од Сузхоу Фенгсхи Лаборатори Анимал Екперимент Цо Лтд (Кина).

Припрема екстракта Херба Цистанцхес

Пет стотина грама грубо уситњеног биљног материјала је рефлуксовано са 2 Л ултра чисте воде током 2 сата. После филтрације, екстракт је упарен до око једне десетине првобитне запремине на Буцхи ротационом испаривачу и разблажен до 250 мЛ у волуметријској тиквици са ултра чистом водом. Коначна концентрација сировеХерба Цистанцхесекстракт је био 2 г/мЛ.

Дозирање и узорковање

Руковање свим животињама у овој студији било је у складу са националним смерницама и обављено је у Центру за лабораторијске животиње, Шангајског универзитета традиционалне кинеске медицине, Шангај, Кина. Укупно 19 мужјака Вистар пацова старих девет недеља купљено је од Схангхаи Лаборатори Анимал Цо Лтд (Кина). Све животиње су држане у систему баријере са регулисаном температуром (20–22 степена) и влажношћу (60 ± 10 процената), и у циклусу тамно/светло од 12 сати са укљученим светлима у 8:00 ујутро. Пацовима је давана храна и вода ад либитум. Након две недеље аклиматизације, животиње су пребачене у појединачне метаболичке кавезе и насумично подељене у три групе: (1) група за лечење (н=7) у којој је хидрокортизон (5 процената) убризгаван ип у дози од 1,5 мг/100 г телесне тежине након чега следи орална применаХерба Цистанцхесекстракт за 10 дана; (2) група модела (н=7) у којој је хидрокортизон (5 процената) убризгаван ип у дози од 1,5 мг/100 г једном дневно током 10 дана; и (3) контролна група (н=5) у којој је вехикулум убризгаван ип у дози од око 0,6 мЛ током 10 дана [31].Херба Цистанцхесје примењен терапијској групи у дози од 20 г/кг према препоруци Схен ет ал. [30]. Двадесетчетворочасовни узорци урина су сакупљени у одређеним временским интервалима: пре дозе (-24 – 0 х), 1. дан (0 – 24 х), 3., 7. и 10. дан. Сав урин узорци су центрифугирани (6383 × г, ЛГ 16-В, Беијинг Јингли Центрифуге Цо Лтд, Кина) током 10 минута да би се уклонили суспендовани остаци и одмах ускладиштени на -80 степени за следећу ГЦ-МС анализу.

Припрема узорака и ГЦ-МС

ГЦ-МС је изведен према нашој претходној студији са мањим модификацијама [31]. Укратко, сваки 0.5 μЛ аликвот триметилсилил (ТМС) дериватизованог аналита је убризган у капиларну колону фузионисаног силицијум-диоксида (17 м × 220 μм унутрашњег пречника, 0,11 μм дебљине филма; ХП Ултра{ {9}}, Агилент Ј&В Сциентифиц, САД). ГЦ-МС је спроведена на перкинЕлмер гасној хроматографији и ТурбоМасс-Ауто систем КСЛ масеном спектрометру (ПеркинЕлмер Инц, САД).

Обрада података и мултиваријантна анализа

ГЦ-МС подаци су конвертовани у НетЦДФ формат преко ДатаБридге (ПеркинЕлмер Инц, САД). Прилагођене скрипте су покренуте у МАТЛАБ-у 7.0 (Тхе МатхВоркс Инц, САД) да би се извршила корекција основне линије, деконволуција и поравнање пикова, искључење интерног стандарда и нормализација на укупан збир хроматограма. Резултирајућа 3-димензионална матрица која обухвата произвољни индекс пикова (упарено време задржавања-м/з), узорке (запажања) и нормализоване површине пикова (варијабле) увезена је у СИМЦА-П 11.0 софтвер пакет (Уметрицс, Шведска) за мултиваријантну анализу.

Средње центрирање је изведено у колони да би се уклонили помаци. Сви измерени метаболити су третирани на једнаком нивоу са аутоматским скалирањем (скалирано на јединичну варијансу) пре мултиваријантне анализе. Анализа главних компоненти (ПЦА) је извршена коришћењем софтвера СИМЦА-П 11.0 да би се открило опште груписање, груписање и трендови међу субјектима без претходног знања. Прва главна компонента (ПЦ1) представља највећу варијансу у подацима. Друга главна компонента (ПЦ2) је ортогонална на ПЦ1 и представља максималну количину варијансе која није објашњена са ПЦ1. Преостале главне компоненте су конструисане на исти начин. У међувремену, средње трајекторије ПЦА резултата су коришћене да обезбеде динамичку индикацију за почетак, прогресију и/или опоравак синдрома током времена. Коефицијенти корелације из парцијалних најмањих квадрата – дискриминантна анализа (ПЛС-ДА) су коришћени да се рангира важност сваке варијабле како би се даље ухватили различито изражени метаболити одговорни за раздвајање између група. ПЛС-ДА је изведен из методе парцијалних најмањих квадрата (ПЛС) која је генерализована метода вишеструке регресије која се бави вишеструким колинеарним предикторима и варијаблама одговора [34]. ПЛС-ДА је спроведен коришћењем софтвера СИМЦА-П 11.{16}} [35]. Извршена је типична 7-кружна унакрсна провера. Једна седмина узорака је искључена из модела у сваком кругу како би се модел потврдио. Овај поступак је поновљен на итеративни начин за унакрсну валидацију све док сваки узорак није једном искључен.

Херба Цистанцхес се може користити за лечење синдрома недостатка бубрега

Униваријантна анализа

Диференцијално изражени метаболити идентификовани мултиваријантном анализом такође су верификовани у софтверу МАТЛАБ 7.0 (Тхе МатхВоркс Инц, САД) непараметријским Крускал-Волисовим тестом са нивоом значајности на П < 0.05 .

Резултати и дискусија

Интерпретација ГЦ-МС спектра

Типични ГЦ-МС хроматограми укупне јонске струје (ТИЦ) мокраће пацова 10. дана из третиране групе, групе модела и контролне групе приказани су на слици 1. Коришћењем нашег оптимизованог ГЦ-МС протокола за анализу у вези са софтверским пиком поступак деконволуције, укупно 117 појединачних метаболита је доследно откривено у најмање 90 процената узорака урина. Комбинована идентификација пикова од интереса је извршена поређењем фрагмента масеног спектра са референтним библиотекама НИСТ-а (Националног института за стандарде и технологију), Вилеи библиотекама и референтним стандардима. Успели смо да проверимо 23 од 117 метаболита (20 процената), од којих су већина биле аминокиселине, полиамини, масне киселине, пурини и хормони надбубрежне жлезде који су углавном укључени у енергетски метаболизам, метаболизам липида и метаболизам аминокиселина.

Слика 1 Типични ГЦ-МС хроматограми укупне јонске струје (ТИЦ) урина 10. дана из третиране групе (А), групе модела (Б) и контролне групе (Ц).

Временски зависне промене у узорцима урина

Средње трајекторије ПЦА резултата изведене из групе модела и групе третмана илустроване су на Слици 2. Пролазни помак у дијаграму путање открио је динамички напредак 'синдром недостатка бубрега' изазван хидрокортизоном самим или у комбинацији саХерба Цистанцхестретман. У групи модела, метаболички обрасци 1. и 3. дана били су другачији од оних 7. и 10. дана, што сугерише да је метаболичка регулаторна мрежа 1. и 3. дана можда прошла кроз пролазни период са великим флуктуацијама и да је поремећена мрежа може бити обновљен 7. и 10. дана, што је на крају довело до стабилног обрасца блиског стању пре дозе. Аналогно томе, чињеница да је метаболички образац 1. и 3. дана очигледно одступао од оног за пре-дозу у групи третмана, указује на доминантну 'синдром недостатка бубрега' стање. У овом периоду, ефекти хидрокортизона су вероватно били доминантни над ефектимаХерба Цистанцхесекстракт. Ови налази су били у складу са општим запажањем да су пацови из обе групе показали мању активност 1. и 3. дана. Занимљиво је да су се метаболички обрасци 7. и 10. дана постепено и значајно приближавали стању пре дозе, што сугерише даХерба Цистанцхесимао неке контраиндикативне или терапеутске ефекте на пацове изложене хидрокортизону. Ови резултати подржавају клиничке налазе даХерба Цистанцхесје ефикасан у лечењу 'синдром недостатка бубрега'. Генерално, обе путање дају визуелну, укупну и динамичку слику почетка, прогресије и опоравка 'синдром недостатка бубрега'.

Слика 2 Средња путања резултата ПЦ1 наспрам ПЦ2 за узорке урина из групе модела (-●-) и групе третмана (--●--). Свака тачка означава средњи резултат у различитим временским тачкама, тј. пре дозе, 1., 3., 7. и 10. дан. Трака грешке представља стандардну девијацију за сваку временску тачку добијену од прве главне компоненте.

Упоредна метаболичка анализа узорака урина

Да бисмо боље разумели метаболичке ефекте хидрокортизона, упоредили смо метаболичке профиле добијене из контролне, моделне и третиране групе. Опште груписање три групе може се лако уочити у различитим временским тачкама, тј. пре дозе, 3. и 10. дан (Слика 3). Иако не постоји тенденција раздвајања у профилима урина пре дозе, метаболички профили су одступили од оних у контролној групи 3. дана након излагања хидрокортизону. Метаболичка пертурбација хидрокортизоном појавила се и у моделу и у групи третмана. Међутим, након узастопног 7-дневног третмана саХерба Цистанцхес, метаболички профили третиране групе поново су постали упоредиви са онима у контролној групи, што указује на тоХерба Цистанцхесје ефикасно обновио поремећени метаболизам.

Слика 3 Поређење метаболичких профила из контролне групе (црни дијамант), групе модела (црвени дијамант) и групе третмана (плави дијамант) у различитим временским тачкама: пре дозе (А), дан 3 (Б) и дан 10 (Ц). Свака тачка на графикону ПЦА резултата представља податке добијене од пацова.

Диференцијална идентификација метаболичких профила

Унакрсно валидирани ПЛС-ДА модел је коришћен за идентификацију кључних метаболита у различитим метаболичким профилима ради лакше диференцијације између пацова контролне групе и моделске групе (тј. изазваних хидрокортизоном) пацова са или безХерба Цистанцхестретман 3. дана (табела 1). Одређене су вишеструке промене релативне концентрације сваког кључног метаболита између група и направљена је одговарајућа визуелизација промена између група у пре-дози, дан 3 и дан 10 (Слика 4). Као што је приказано на слици 4 и табели 1, док се већина ендогених метаболита значајно повећала или смањила у групи модела, они у групи третмана прошли су пролазни период као што је примећено 1. и 3. дана и постепено су се приближавали контролном (нормалном) нивоу. . На пример, у поређењу са малим варијацијама (1,1–1,5 пута) метаболита у групи на третману 10. дана, примећени су знатно повећани нивои (1,7–3,0 пута) тирозина, тирамина, допамина и норадреналина у урину. група модела током експеримента. Наша претходна студија је показала да је појачан метаболизам катехоламина изазван глукокортикоидима резултирао прекомерном потрошњом имунолошких функција, што је довело до "синдром недостатка бубрега' [31]. Херба Цистанцхес, тоник биљка која побољшава имуни систем [36], може да се супротстави неким ефектима хидрокортизона.Херба Цистанцхестакође може бити у стању да обнови нормалну метаболичку регулаторну мрежу. Потребни су даљи експерименти са различитим приступима као што су молекуларна биологија, ћелијска биологија и хемија биљака да би се оцртало деловањеХерба Цистанцхес(и његове компоненте) у 'синдром недостатка бубрега'.

Табела 1 Листа метаболита укључених у метаболичко профилисање ове студије

Од: Метаболичко профилисање открива терапеутске ефектеХерба Цистанцхесу животињском моделу хидрокортизоном изазваног 'синдром недостатка бубрега'

Напомена: Коефицијенти корелације (коефицијенти корелације) свих једињења су израчунати из унакрсно валидираног ПЛС-ДА модела (К2Ицум=0.899, задовољавајући модел који користи две компоненте) трећег дана између контролне групе и групе модела. са или безХерба Цистанцхестретман. Поред тога, промене набора су тестиране непараметријским Крускал-Волисовим тестом. Кв (П) означава П вредности теста. Х=контролна група, М=група модела, Д=група третмана. На пример, Х/М/0 представља релативне промене прегиба (модел за контролу) у стању пре дозе.

Слика 4. Преобличите промене кључних метаболита. Црвена боја означава релативне повишене концентрације (кратне промене > 1,5), док зелена боја означава релативно смањене концентрације (промене пута < -1.5).="" промене="" прегиба="" у="" распону="" од="" -1.5="" до="" 1.5="" сматрају="" се="" физиолошким="" варијацијама.="" вишеструка="" промена="" (м/х,="" д/х)="" је="" однос="" концентрације="" моделне="" групе="" или="" групе="" третмана="" према="" контролној="">

Закључак

Садашња студија метаболичког профилисања помоћу ГЦ-МС је то показалаХерба Цистанцхесизазвао системски опоравак од метаболичке пертурбације изазване хидрокортизоном код пацова, животињски модел за 'синдром недостатка бубрега'. Ова студија такође показује да је метаболичко профилисање корисна метода за проучавање терапијских ефеката биљних лекова.

Скраћенице

МС: масена спектрометрија

ГЦ-МС: гасна хроматографија-масена спектрометрија

НМР: нуклеарна магнетна резонанца

ПЦА: анализа главних компоненти

ПЛС-ДА: парцијални најмањи квадрати – дискриминантна анализа

Референце

1. Ницхолсон ЈК, Линдон ЈЦ, Холмес Е: 'Метабономика': Разумевање метаболичких одговора живих система на патофизиолошке стимулусе путем мултиваријантне статистичке анализе биолошких НМР спектроскопских података. Ксенобиотица. 1999, 29 (11): 1181-1189. 10.1080/004982599238047.

2. Бриндле ЈТ, Антти Х, Холмес Е, Трантер Г, Ницхолсон ЈК, Бетхелл ХВЛ, Цларке С, Сцхофиелд ПМ, МцКиллигин Е, Моседале ДЕ, Граингер ДЈ: Брза и неинвазивна дијагноза присуства и тежине коронарне болести срца помоћу 1Х - Метабономија заснована на НМР. Нат Мед. 2002, 8 (12): 1439-1444. 10.1038/нм802.

3. Цонстантиноу МА, Папаконстантиноу Е, Бенаки Д, Спраул М, Схулпис К, Коуппарис МА, Микрос Е: Примена спектроскопије нуклеарне магнетне резонанце у комбинацији са анализом главних компоненти у откривању урођених грешака метаболизма коришћењем крвних мрља: Метабономски приступ. Анал Цхим Ацта. 2004, 511 (2): 303-312. 10.1016/ј.аца.2004.02.012.

4. Бецконерт О, Моннерјахн Ј, Бонк У, Леибфритз Д: Визуелизација метаболичких промена у ткиву рака дојке коришћењем 1Х-НМР спектроскопије и самоорганизованих мапа. НМР Биомед. 2003, 16 (1): 1-11. 10.1002/нбм.797.

5. Мортисхире-Смитх РЈ, Скилес ГЛ, Лавренце ЈВ, Спенце С, Ницхоллс АВ, Јохнсон БА, Ницхолсон ЈК: Употреба метабономике за идентификацију поремећеног метаболизма масних киселина као механизма токсичности изазване лековима. Цхем Рес Токицол. 2004, 17 (2): 165-173. 10.1021/тк034123ј.

6. Ватерс Њ, Холмес Е, Виллиамс А, Ватерфиелд ЦЈ, Дунцан Фаррант Р, Ницхолсон ЈК: НМР и студије препознавања образаца о временским метаболичким ефектима -нафтилизотиоцијаната на јетру, урин и плазму код пацова: интегративна метабономска приступ. Цхем Рес Токицол. 2001, 14 (10): 1401-1412. 10.1021/тк010067ф.

7. Цоен М, Ленз ЕМ, Ницхолсон ЈК, Вилсон ИД, Погнан Ф, Линдон ЈЦ: Интегрисано метабономско испитивање токсичности ацетаминофена код миша коришћењем НМР спектроскопије. Цхем Рес Токицол. 2003, 16 (3): 295-303. 10.1021/тк0256127.

8. Смалл-Ховард А, Турнер Х: Излагање материјалима добијеним од дувана изазива прекомерну производњу излучених протеиназа у мастоцитима. Токицол Аппл Пхармацол. 2005, 204 (2): 152-163. 10.1016/ј.таап.2004.09.003.

9. Ватерс Њ, Ватерфиелд ЦЈ, Фаррант РД, Холмес Е, Ницхолсон ЈК: Метабономска деконволуција уграђене токсичности: Примена на хепато- и нефротоксичност тиоацетамида. Цхем Рес Токицол. 2005, 18 (4): 639-654. 10.1021/тк049869б.

10. Робертсон ДГ: Метабономика у токсикологији: Преглед. Токицол Сци. 2005, 85 (2): 809-822. 10.1093/токиц/кфи102.

11. Робертсон ДГ, Булера СЈ: Токсикологија високе пропусности: практична разматрања. Цурр Опин Друг Дисцовери Дев. 2000, 3 (1): 42-47.

12. Ницхолсон ЈК, Цоннелли Ј, Линдон ЈЦ, Холмес Е: Метабономика: платформа за проучавање токсичности лекова и функције гена. Нат Рев Друг Дисцов. 2002, 1 (2): 153-161. 10.1038/нрд728.

13. Таилор Ј, Кинг РД, Алтманн Т, Фиехн О: Примена метаболомике на дискриминацију генотипова биљака коришћењем статистике и машинског учења. Биоинформатика. 2002, 18 (СУППЛ 2): С241-С248.

14. Вилсон ИД, Ницхолсон ЈК, Цастро-Перез Ј, Грангер ЈХ, Јохнсон КА, Смитх БВ, Плумб РС: течна хроматографија високе резолуције у комбинацији са оа-ТОФ масеном спектрометријом као алатом за профилисање диференцијалног метаболичког пута у функционалне геномске студије. Ј Протеоме Рес. 2005, 4 (2): 591-598. 10.1021/пр049769р.

15. Јонссон П, Гуллберг Ј, Нордстром А, Кусано М, Ковалцзик М, Сјостром М, Моритз Т: Стратегија за идентификацију разлика у великим серијама метаболомских узорака анализираних ГЦ/МС. Анал Цхем. 2004, 76 (6): 1738-1745. 10.1021/ац0352427.

16. Охдои Ц, Нихан ВЛ, Кухара Т: Хемијска дијагноза Лесцх-Нихановог синдрома коришћењем детекције гасне хроматографије-масене спектрометрије. Ј Цхроматогр, Б: Анал Тецхнол Биомед Лифе Сци. 2003, 792 (1): 123-130. 10.1016/С1570-0232(03)00277-0.

17. Фиехн О, Копка Ј, Дорманн П, Алтманн Т, Третхевеи РН, Виллмитзер Л: Профилирање метаболита за биљну функционалну геномику. Нат Биотецхнол. 2000, 18 (11): 1157-1161. 10.1038/81137.

18. Лафаие А, Јунот Ц, Переира И, Даниел Г, Табет ЈЦ, Езан Е, Лабарре Ј: Комбиноване анализе профилисања протеома и метаболита откривају изненађујуће увиде у метаболизам сумпора квасца. Ј Биол Цхем. 2005, 280 (26): 24723-24730. 10.1074/јбц.М502285200.

19. Сцхауер Н, Стеинхаусер Д, Стрелков С, Сцхомбург Д, Аллисон Г, Моритз Т, Лундгрен К, Роесснер-Тунали У, Форбес МГ, Виллмитзер Л, Ферние АР, Копка Ј: ГЦ-МС библиотеке за брзу идентификацију метаболита у сложеним биолошким узорцима. ФЕБС Летт. 2005, 579 (6): 1332-1337. 10.1016/ј.фебслет.2005.01.029.

20. Виллсе А, Белцхер АМ, Прети Г, Вахл ЈХ, Тхресхер М, Ианг П, Иамазаки К, Беауцхамп ГК: Идентификација главних мириса за тело регулисаних комплексом хистокомпатибилности статистичком анализом упоредног експеримента гасне хроматографије/масене спектрометрије. Анал Цхем. 2005, 77 (8): 2348-2361. 10.1021/ац048711т.

21. Ванг КСВ, Ванг КСФ, Ву ЛИ: Побољшање сећања мишева на фенилетаноидне гликозиде Цистанцхе десертицола. Реп Цхин Пхарм. 2002, 19: 41-42.

22. Ксие ЈХ, Ву ЦФ: Ефекат етанолног екстракта Цистанцхе десертицола на садржај моноаминских неуротрансмитера у мозгу пацова. Зхонгцаоиао. 1993, 24: 417-419.

23. Ли ЛЛ, Ванг КСВ, Ванг КСФ: Антилипидна пероксидација и антирадијационо дејство гликозида ухерба Цистанцхес.Цхин Ј Цхин Матер Мед. 1997, 22 (6): 364-367.

24. Схахат АА, Назиф НМ, Абоусетта ЛМ, Ибрахим НА, Цос П, Ван Миерт С, Пиетерс Л, Влиетинцк АЈ: Фитокемијско истраживање и антиоксидативна активност Дуранта репенс. Пхитотхер Рес. 2005, 19 (12): 1071-1073. 10.1002/птр.1766.

25. Гао Ј, Игарасхи К, Нукина М: Три нова фенилетаноидна гликозида из Цариоптерис инцана и њихова антиоксидативна активност. Цхем Пхарм Булл. 2000, 48 (7): 1075-1078.

26. Кириакопоулоу И, Магиатис П, Скалтсоунис АЛ, Алигианнис Н, Харвала Ц: Самиосиде, нови фенилетаноид гликозид са уклањањем слободних радикала и антимикробним активностима из Пхломис самиа. Ј Нат Прод. 2001, 64 (8): 1095-1097. 10.1021/нп010128 плус .

27. Денг М, Зхао ЈИ, Ју КСД, Ту ПФ, Јианг И, Ли ЗБ: Заштитни ефекат тубулозида Б на апоптозу изазвану ТНФ алфа у неуронским ћелијама. Ацта Пхармацол Син. 2004, 25: 1276-1284.

28. Генг КСЦ, Сонг ЛВ, Пу КСП, Ту ПФ: Неуропротективни ефекти фенилетаноидних гликозида из Цистанцхес салса против 1-метил-4-фенила-1, 2, 3, 6- тетрахидропиридин (МПТП) је изазвао допаминергичку токсичност код Ц57 мишева. Биол Пхарм Булл. 2004, 27: 797-801. 10.1248/бпб.27.797.

29. Хе В, Сху Кс, Зонг Г, Схи М, Ксионг И, Цхен М: Ојачање бубрега и јанг који подржавају деловање цистанцхе десертицола ИЦ Ма пре и после припреме. Зхонггуо Зхонг Иао Зазхи. 1996, 21 (9): 534-537. 575

30. Схен ЛЗ, Зхонг КСИ, Ванг СКС: Ефекат Цистанцхе десертицола на нормалне и дефицитарне Схен-ианг пацове. Зхонгиао Иаоли Иу Линцхуанг. 2001, 17 (1): 17-18.

31. Цхен М, Зхао Л, Јиа В: Метабономска студија о биохемијским профилима животињског модела изазваног хидрокортизоном. Ј Протеоме Рес. 2005, 4 (6): 2391-2396. 10.1021/пр050158о.

32. Цхен К, Ии НИ: Животињски модели и лекови за недостатак јина и јанга. Експериментална методологија фармаколошких истраживања у традиционалној кинеској медицини. Уредио: Цхен К. 1993, Пекинг: Пеопле'с Хеалтх Публисхинг Хоусе, 982-984.

33. Национални комитет фармакопеје: Фармакопеја Народне Републике Кине. 2005, Пекинг: Пресс оф Цхемицал Индустри, 1: 90-

34. Мулти- и мегаваријантна анализа података Део И: Основни принципи и примене, Друго ревидирано и проширено издање. [хттп://ввв.уметрицс.цом/дефаулт.асп/пагенаме/траининг_литературе/ц/5]

35. СИМЦА-П и СИМЦА-П плус 11 Упутство за употребу. [хттп://ввв.уметрицс.цом/дефаулт.асп/пагенаме/довнлоадс_усергуиде/ц/3]

36. Цхин ХЛ, Су ИЦ: Студија о фармаколошким ефектима Цистанцхе десертицола Ма. Зхонггуо Зхонг Иао Зазхи. 1993, 19: 143-146.

Из: Кинеска медицина, том 3, број чланка: 3 (2008)