Ин витро процена најактивнијих пробиотичких сојева који могу да побољшају функције цревне баријере и да спрече упалне болести гастроинтестиналног системаⅢ

4. Дискусија

Одржавање интегритета цревне баријере је од пресудног значаја у превенцији настанка не само цревних обољења, већ и метаболичких, аутоимуних и поремећаја нервног система [36,37]. Бројне студије спроведене на цревној мукози су показале да штити домаћина кроз стимулацију механизама урођеног и стеченог имунитета [38] и гарантује хомеостазу захваљујући одржавању равнотеже микробиоте [39]. Лактобацили су пробиотици који се обично налазе у ферментисаним храни и микробиоти црева људи и животиња [40,41].

Кликните да бисте одмах ублажили опстипацију код одраслих

Последњих година постигнут је велики напредаку проучавању механизама симбиозе између бактерија млечне киселине и домаћина. Њихови главни корисни ефекти су се показали као регулација неравнотеже цревне флоре [42], јачање функција цревне баријере [23,27,36]. ], одржавање хомеостазе [36,43], регулацију имуног система [43] и производњу неуротрансмитера (осовина црева-мозак) [44]. Такође је показано да егзополисахарид (ЕПС) који производе лактобацили има нарочиту способност да модификује микробиоту [45] и да побољша колонизацију и раст цревних бактерија делујући као извор угљеника [46].

Штавише, пробиотици могу да се такмиче са колонизујућим патогенима гастроинтестиналног тракта, спречавајући њихову адхезију и инхибирајући њихов раст услед снижења пХ изазваног производњом млечне киселине [36]. Ин витро модели који симулирају људско дебело црево представљају користан алат за механичка истраживања на интеракције пробиотика са епителом црева [47]; у овом раду користили смо експериментални модел ко-култура цревних епителних ћелија, Цацо-2 и ХТ29-МТКС, и анализирали њихову интеракцију са различитим сојевима Лацтобациллус спп. да бисмо утврдили који од ових сојева показао најбољу функционалност штитећи цревни епител, јачањем баријере и промовисањем антиинфламаторних и имуномодулирајућих својстава.

Избор за рад са ко-културом био је због неколико доказа: пре свега, трансепителни електрични отпор (ТЕЕР) је много већи у Цацо-2 монослојевима (до 500 ома цм2) него у људском цреву (12–69 охм цм2) због високе експресије ТЈс; поред тога, цревна баријера се састоји од неколико ћелијских фенотипова, укључујући ентероците, пехарасте ћелије, Панетове ћелије, ендокрине ћелије и матичне ћелије. Модел кокултуре који комбинује два главна ћелијска фенотипа пронађена у цревима, Цацо-2 и ХТ29-МТКС који лучи слуз, обезбеђује монослој епитела обложен слузом који најефикасније опонаша стање које се јавља ин виво.

Ефикасност овог модела демонстрирали су Махлер ет ал. [48]. Избор сојева био је због тога што су били комерцијализовани и што су већ били предмет различитих студија; у ствари, Л. бревис СП-48 је присутан у комерцијалним производима (нпр. Флорап лади) који промовишу равнотежу цревне флоре и функционалност уринарног тракта. Штавише, наша недавна студија је показала да инхибира Х. пилори и да делује као модулатор имуног система, смањујући запаљење потенцијално повезано са лечењем цревних болести [49].

Слично, активност Л. ферментум је процењена на моделу ћелија епитела желуца који демонстрира модулацију инфламаторних цитокина и инхибицију Х. пилори [32]; штавише, други сојеви Л. ферментум су показали антиинфективна и имуномодулаторна својства [50 Лацтобацил]. рхамносус ИМЦ 501 и Лацтобациллус парацасеи ИМЦ 502 су комерцијално доступни пробиотички сојеви (нпр. СИНБИО). Верденели и коаутори су показали постојаност два соја, примењена у комбинацији, у цревном тракту испитаника, као и побољшање природне правилности и добробити црева [51,52].Л. бревис нормално колонизује људски гастроинтестинални тракт и показало се да има неколико ефеката који стимулишу здравље [53], од којих неки побољшавају баријерну функцију слузокоже [54]. Л. реутери ЛР92 је такође присутан у комерцијалним производима и клиничке студије су показале да побољшава симптоме колике код новорођенчади ако се превентивно даје мајкама у последњим месецима трудноће [55].

У првом делу рада смо стога третирали кокултуре, које су диференциране 21 дан, различитим сојевима Лацтобациллус спп. током 24 х, и анализирали смо, ПЦР и ЕЛИСА тестом у реалном времену, нивое експресије ТЈс Оццлудин, Зонулин-1 и Цлаудин-1 и антимикробног пептида ХБД-2 . Добијени резултати су открили да сви тестирани сојеви лактобацила могу значајно индуковати експресију ТЈ, посебно Л. бревис и Л. рхамносус. Што се тиче ХБД-2, с друге стране, значајна индукција производње пептида се цени посебно у присуству Л. реутери. Да би се проценила антиинфламаторна активност лактобацила, кокултуре су третиране 24 х са С. Типхимуриум ЛПС сам или у комбинацији са различитим сојевима,а нивои експресије про- и антиинфламаторних цитокина су процењени коришћењем ПЦР и ЕЛИСА теста у реалном времену.

Добијени подаци су открили да, осим за ИЛ-8 чију експресију нису модулисали Л. ферментум и Л. парацасеи, сви сојеви могу значајно да индукују експресију проинфламаторних цитокина и индукују експресију антиинфламаторног цитокина ТГФ-. На основу добијених података, а с обзиром на то да су сви анализирани сојеви пробиотика показали значајно антиинфламаторно дејство, можемо констатовати да посебно благотворно делују три специфична соја на цревну слузокожу: Л. реутери, који се јавља због своје способности да значајно стимулише имунолошку одбрану промовишући масовно ослобађање ХБД-2, Л. рхамносус и Л. бревис, што је открило високу способност јачања цревне баријере, неопходан услов за правилно одржавање различитих функција, укључујући апсорпцију микронутријената и одржавање хомеостазе. У другом делу рада смо стога проценили способност ова три соја да инхибирају адхезију и инвазију С. Типхимуриум и ЕИЕЦ у цревну слузокожу.

У ту сврху, тестови адхезије и инвазије су спроведени на три различита начина — инхибиција, конкуренција и расељавање — да би се разумела динамика интеракције између лактобацила и патогена. У ствари, преинкубацијом са лактобацилима, њихова способност да производе бактериоцине и смање пХ околине може да испољи активност убијања која инхибира адхезију патогена; с друге стране, истовремено додавање обе врсте могло би да изазове такмичење између две бактеријске врсте, како за везивање за места ћелијских рецептора, тако и за узимање нутритивних фактора; коначно, додавање пробиотика након адхезије патогена може изазвати његово измештање са места везивања, такође због убијајуће активности коју врше бактериоцини.

Добијени резултати су показали да сва три соја значајно инхибирају тестове конкуренције ЕИЕЦ адхезиона и блокирају његову инвазију кроз конкуренцију и инхибицију. Ово другачије понашање може бити зато што лактобацили нису у стању да спрече адхезију патогена ако се узимају превентивно, док могу да се такмиче са њим; међутим, када дође до адхезије, активност лактобацила која повећава интегритет баријере (која повећава експресију у тесном споју) спречава инвазију на субмукозу црева. Што се тиче С. Типхимуриума, међутим, активност инхибиције се углавном спроводи у фази адхезије, како у инхибицији тако иу тесту конкуренције, вероватно зато што се избегава адхезија патогена узводно, чиме се значајно смањује оптерећење бактеријама које инвазију на субмукоза црева, која је већ значајно смањена. У тестовима измештања, нису добијени задовољавајући резултати за оба соја, ни у погледу адхезије ни инвазије, што показује да лактобацили нису у стању да испоље своје заштитно дејство против два патогена ако се узму када је инфекција већ наступила.

5. Закључци

Иако се употреба суплемената базираних на пробиотицима практикује дуги низ година, у последње време интересовање за ову врсту производа значајно је порасло због све већег интересовања јавности за коришћење природних користи/ресурса [56]. Широко је показано да су лактобацили пробиотици. који могу допринети одржавању основних функција за оптимално здравствено стање; међутим, ове ин витро студије показују да различити пробиотички сојеви могу различито да делују на епител и на патоген са којим ступају у интеракцију; из тог разлога би било корисно, приликом дизајнирања формулација заснованих на пробиотицима, узети у обзир специфичност сојева и њихову намеравану употребу, да би се добиле конзорцијумске формулације које могу да постигну максимални принос у смислу користи за пацијенте.

Природни биљни лек за ублажавање опстипације-Цистанцхе

Цистанцхе је род паразитских биљака који припада породици Оробанцхацеае. Ове биљке су познате по својим лековитим својствима и вековима се користе у традиционалној кинеској медицини (ТЦМ). Цистанцхе врсте се претежно налазе у сушним и пустињским регионима Кине, Монголије и других делова Централне Азије. Цистанцхе биљке се одликују својим меснатим, жућкастим стабљикама и веома су цењене због својих потенцијалних здравствених користи. У ТЦМ-у се верује да Цистанцхе има тоник и да се обично користи за исхрану бубрега, повећање виталности и подршку сексуалне функције. Такође се користи за решавање проблема везаних за старење, умор и опште благостање. Док Цистанцхе има дугу историју употребе у традиционалној медицини, научна истраживања о његовој ефикасности и безбедности су у току и ограничена. Међутим, познато је да садржи различита биоактивна једињења као што су фенилетаноидни гликозиди, иридоиди, лигнани и полисахариди, што може допринети његовим лековитим ефектима.

Вецистанцхе'сцистанцхе прах, цистанцхе таблете, цистанцхе капсуле, а други производи се развијају користећипустињацистанцхекао сировине, а све то добро утиче на отклањање опстипације. Специфичан механизам је следећи: Верује се да Цистанцхе има потенцијалне користи за ублажавање опстипације на основу његове традиционалне употребе и одређених једињења која садржи. Док су научна истраживања посебно о ефекту Цистанцхеа на констипацију ограничена, сматра се да има више механизама који могу допринијети његовом потенцијалу за ублажавање опстипације. Лаксативан ефекат:Цистанцхесе дуго користи у традиционалној кинеској медицини као лек за затвор. Верује се да има благи лаксативан ефекат, који може помоћи у промовисању пражњења црева и изазвати затвор. Овај ефекат се може приписати различитим једињењима која се налазе у Цистанцхеу, као што су фенилетаноидни гликозиди и полисахариди. Влажење црева: На основу традиционалне употребе, сматра се да Цистанцхе има хидратантна својства, посебно усмерена на црева. Промовисање хидратације и подмазивања црева може помоћи у омекшавању алата и олакшавању пролаза, чиме се ублажава затвор. Анти-инфламаторни ефекат: Затвор понекад може бити повезан са упалом у дигестивном тракту. Цистанцхе садржи одређена једињења, укључујући фенилетаноидне гликозиде и лигнане, за која се верује да имају антиинфламаторна својства. Смањењем упале у цревима, може помоћи у побољшању редовности пражњења црева и ублажавању затвора.