Иридоидни и ациклични монотерпенски гликозиди, канканозиди Л, М, Н, О и П из Цистанцхе Тубулоса

Цистанцхе тубулоса(SЦХРЕНК) R. WИГХТ(Оробанцхацеае) је вишегодишња паразитска биљка која расте на коренуСалвадораилиЦалотрописврста, распрострањена у северној Африци, Арабији и азијским земљама.1) Стабљике ове биљке (Канка-никујуиоу на јапанском) традиционално се користе залечење импотенције, стерилитета, лумбага и телесне слабостикао и средство за подстицање циркулације крви.1,2) Током наших студија о биоактивним састојцима из стабљикаЦ. тубулоса, 3-6) Раније смо пријавили двадесет четири фенилетаноидна аминогликозида укључујући канканозиде Х1, H2, I, J1, J2, K1, и К2, и два ацилирана олигошећера из свежих стабљикаЦ. тубулоса. 5,6) Штавише, директорфенилетаноидни гликозиди, ехинакозид, актеозид и изоактеозид, откривено је да инхибирају повећање нивоа аспартат аминотрансферазе (АСТ) и аланин аминотрансферазе (соли) у повређеној јетри мишева изазваноD-галактозамин (D-ГалН)/ липополисахарид у дозама од 25-100 мг/кгпер ос(p.o.). Такође су разјашњени структурни захтеви фенилетаноидних гликозида за хепатопротективну активност.5) У овој континуираној студији о састојцима у свежим стабљикамаЦ. тубулоса, даље смо изоловали једанаест иридоидних гликозида укључујући канканозиде Л (1), M (2), и Н (3), седам ацикличних монотерпенских гликозида укључујући канканозиде О (4) и П (5), три фенилпропаноида и четири лигнана. Овај рад се бави изолацијом и разјашњавањем структуре пет нових једињења (1-5).

ПРИРОДНА ЦИСТАНЦХЕ ТУБУЛОСА ЗА УБЛАЖАВАЊЕ СЕКСУАЛНЕ ДИСФУНКЦИЈЕ ПХГС75% ЕЦХ 30% АЦТ 12%

Свеже стабљике Ц. тубулоса (култивисане у Урумчију, провинција Синђијанг, Кина) су екстраховане метанолом под рефлуксом да би се добио метанолни екстракт (8,36% из свежих стабљика). Из метанолног екстракта, фракције елуиране Х2О- и МеОХ (5,63% и 2,73%, респективно) добијене су Диаион ХП-20 колонском хроматографијом (Х2О→МеОХ) како је претходно описано.5) Фракција елуирана са МеОХ је подвргнути хроматографији на СиО2 и ОДС колони и на крају ХПЛЦ-у да би се добили канканозиди Л (1, 0.0026%), М (2, 0.{{27 }}001%), Н (3, 0.00{{60}}7%), О (4, 0.0{{90}}2{{105}}%) и П (5, 0 .0002%), 6-деоксикаталпол3,7) (6, 0.197%), барциозид3,7) (7, { {147}}.0583%), глурозид3,7) (8, 0.0443%), канканоизид А3) (9, 22,3 мг, 0,0010%), мусенозидна киселина3,7) ( 10, 0,0056%), 8- епилоганска киселина3,8) (11, 0,0023%), 8-епидеоксилоганска киселина3,7) (12, 0,0004%), генипосидна киселина3,7) (13, 0,0040% ), канканозид Е3) (14, 0,0026%), (2Е,6З)-8-бД-глукопираносилокси-2,6-диметил-2,6-октадиенска киселина3 ,9) (15, 31,0 мг, 0,0014%), (2Е,6Е)-3,7-диметил-8-хидроксиоктадиен-1-ил-ОбД-глукопиранозид10) (16, 0,0082%), 8-хидроксигераниол 8-О-бД-глукопиранозид11) (17, 0,0044%), бетулалбузид А12) (18, 0,0004%), четинар13) (19, 0,00ин) (19, 0,00ин) 20, 0,0015%), синапински алдехид 4-ОбД-глукопиранозид14) (21, 0,0001%), ( )-пинорезинол ОбД-глукопиранозид4,8,15) (22, 0,0010%), еукоммин А2302 %), изоеукомин А17) (24, 0,0010%) и ( )-сирингарезинол ОбД-глукопиранозид4,8,18) (25, 0,0044%).

Структуре канканозида Л (1), М (2) и Н (3)

Канканозид Л (1) је добијен као бели прах са негативном оптичком ротацијом ([а]Д 26 - 45.7 у МеОХ). Његов ИР спектар је показао јаку апсорпциону траку на 3433 и 1{{20}}80 цм- 1 што указује на гликозидни део. Бомбардовање брзим атомом (ФАБ)-МС од 1 циклуса у режиму позитивних и негативних јона показало је квазимолекуларне пикове јона при м/з 371 [М На] и 347 [М-Х]-, респективно, а молекулска формула је била одређена као Ц15Х24О9 ФАБМС мерењем високе резолуције. Кисела хидролиза 1 са 1,0 М хлороводоничном киселином (ХЦл) ослобађа Д-глукозу, која је идентификована ХПЛЦ анализом коришћењем оптичког детектора ротације.3-6) 1 Х- и 13Ц-НМР спектри 1 (ЦД3ОД, табеле 1, 2), који су додељени различитим НМР експериментима,19) показују сигнале који се могу приписати четири метилена [д 1,43 (1Х, бр дд, Ј= око 5, 13 Хз, 4а-Х), 1,73 ( 1Х, бр дд, Ј= око 12, 14 Хз, 6а-Х), 1,85 (1Х, м, 4б-Х), 1,93 (1Х, бр дд, Ј= око 8). , 14 Хз, 6б-Х), 3,50 (1Х, ддд, Ј= 2.4, 12,5, 13,0 Хз, 3а-Х), 3,83 (1Х, бр дд, Ј=

ца. 5, 13 Хз, 3б-Х), 3,78, 4,12 (1Х сваки, оба д, Ј= 13.1 Хз, 10-Х2)], два метина [д 2,15 (1Х, дд, Ј=7.2, 8.9 Хз, 9-Х) и 2.23 (1Х, м, 5-Х)], и ацетал група [д 4.81 (1Х, д, Ј{{28 }},9 Хз, 1-Х)] заједно са б-глукопиранозилном остатком [д 4,70 (д, Ј= 7,9 Хз, 1 -Х)]. Као што је приказано на слици 1, експеримент корелационе спектроскопије 1 Х–1 Х (1 Х–1 Х ЦОСИ) на 1 је показао присуство парцијалних структура написаних подебљаним линијама. У експерименту хетеронуклеарне корелације вишеструких веза (ХМБЦ) на 1, уочене су корелације дугог домета између следећих протона и угљеника (1-Х и 3-Ц, 8-Ц; {{ 49}}Х и 7-Х и 10-Ц 8-Ц; }}Х2 и 7-Ц, 8-Ц 1 -Х и 1-Ц) као што је приказано на слици 1. Затим, релативну стереоструктуру 1 карактерише осетљивост на фазу; Експеримент нуклеарне Оверхаусерове спектроскопије побољшања (НОЕСИ осетљив на фазу), који је показао НОЕ корелације између следећих протонских парова (1-Х и 3аХ; 3а-Х и 4а-Х; 3б-Х и 4б-Х; 4б-Х и 5-Х, 5- Х и 6б-Х, 9-Х и 7-Х; и 10-Х2), као што је приказано на Слици 1. 1Х- и 13Ц-НМР спектри 1 су се могли преклопити на оне главног иридоидног састојка 6-деоксикаталпола (6), осим за сигнале на засићени д-лактолни део. Коначно, хидрогенација 6 је дала 1, тако да је стереоструктура канканозида Л разјашњена као 3,4- дихидро{102}}деоксикаталпол (1).

ПРИРОДНА ЦИСТАНЦХЕ ТУБУЛОСА ЗА УБЛАЖАВАЊЕ ПОРЕМЕЋАЈА УБУЂЕЊА ПОШТЕ ПХГС75% ЕЦХ 30% АЦТ 12%

Канканозид М (2) је добијен као бели прах са негативном оптичком ротацијом ([а]Д 26 - 18.7 у МеОХ). ИР спектар 2 показао је апсорпционе траке на 3433, 1736, 1655 и 1076 цм- 1 које се могу приписати хидроксилним, д-лактонским, олефинским и етарским деловима. ФАБ-МС спектар позитивних јона од 2 показао је квазимолекуларни пик јона при м/з 353 [М На] , а молекулска формула је одређена као Ц15Х22О8 ФАБ-МС мерењем високе резолуције позитивних јона. Кисела хидролиза 2 са 1,0 М ХЦл ослобађа Д-глукозу. 1Х- и 13ЦНМР спектри 2 (ЦД3ОД, табеле 1, 2) показали су сигнале који се могу приписати четири метилена [д 1,66, 2,11 (1Х сваки, оба м, 4-Х2), 2,15, 2,75 (1Х сваки, оба м, 6-Х2), 4,29 (1Х, ддд, Ј= 2.8, 8,4, 14,3 Хз, 3б-Х), 4,32, 4,51 (1Х сваки, оба д, Ј{{61 }}.1 Хз, 10-Х2), 4.35 (1Х, ддд, Ј= 3.1, 6.7, 14.3 Хз, 3а-Х)], два метина [д 2.97 (1Х, м, 5-Х), 3,82 (1Х, бр с, 9-Х)], олефин [д 5,94 (1Х, м, 7-Х)] и засићена лактонска група (д Ц 174.9) заједно са бД-глукопиранозилном остатком [д 4.32 (1Х, д, Ј= 7.9 Хз, 1 -Х)]. Као што је приказано на слици 1, експеримент 1 Х–1 Х ЦОЗИ на 2 показао је присуство делимичних структура написаних подебљаним линијама и, у ХМБЦ експерименту, уочене су корелације дугог домета између следећих протонских и угљеничних парова ({{ 103}}Х и 1-Х и 9-Х и 8-Ц; }}Х2 и 7-Ц, 8-Ц, 9-Ц 1 -Х и 10-Ц); Релативну стереоструктуру 2 карактерише НОЕСИ експеримент осетљив на фазу, који је показао корелације НОЕ између следећих протонских парова (3а-Х и 4а-Х; 3б-Х и 4б-Х; 4б-Х и 5- Х 5-Х и 6б-Х, 9-Х) као што је приказано на слици 1. Дакле, стереоструктура 2 је разјашњена као што је приказано.

Канканозид Н (3) је изолован као бели прах са негативном оптичком ротацијом ([а]Д 25 - 24.6 у МеОХ). У ФАБ-МС са позитивним јонима од 3, примећен је пик квазимолекуларних јона на м/з 371 [М На]. Молекуларна формула Ц16Х28О8 одређена је ФАБ-МС мерењем високе резолуције. Кисела хидролиза 3 са 1.0 М ХЦл ослобађа Д-глукозу. Подаци 1Х- и 13Ц-НМР (ЦД3ОД, табеле 1, 2) показали су сигнале који се могу приписати метилу [д 1.07 (3Х, д, Ј= 7.2 Хз, {{ 28}}Х3)], четири метилена {д 1,37, 1,87 (1Х сваки, оба м, 7-Х2), 1,65, 1,81 (1Х сваки, оба м, 6-Х2), [3,65 ( 1Х, дд, Ј= 9.1, 9.8 Хз), 3.90 (1Х, дд, Ј= 5.9, 9.8 Хз), 11-Х2] и [3.70 (1Х, дд, Ј= 3.3, 12.0 Хз), 3.88 (1Х, м), 3-Х2]}, четири метина [д 1.69 (1Х, м, 4-Х), 1.75 (1Х, м, 9-Х), 2,06 (1Х, м, 8-Х), 2,16 (1Х, м, 5-Х)] и хемиацетална група [д 4,67 ( 1Х, д, Ј= 7.4 Хз, 1-Х)] заједно са бД-глукопиранозилном остатком [д 4.26 (1Х, д, Ј= 7.9 Хз, {{101 }}Х)]. Иридоидна структура 3 је разјашњена експериментима 1 Х–1 Х ЦОЗИ и ХМБЦ, а релативна стереоструктура је окарактерисана фазно осетљивим НОЕСИ експериментом као што је приказано на слици 1. Сходно томе, стероструктура 3 је разјашњена као што је приказано.

ПРИРОДНА ЦИСТАНЦХЕ ТУБУЛОСА ЗА РЕШАВАЊЕ СЕКСУАЛНОГ ПРОБЛЕМА ПХГС75% ЕЦХ 30% АЦТ 12%

Структуре канканозида О (4) и П (5)

Канканозиди О (4) и П (5), Ц16Х26О8, такође су добијени као бели прах са негативним оптичким ротацијама (4: [а]Д 23 - 26.1; 5: [а]Д 21 - 32. 7 оба у МеОХ). ИР спектри 4 и 5 су показали апсорпционе траке на 3433, 1696, 1647 и 1076 цм- 1 за 4, и 3434, 1701, 1647 и 1{ {95}}76 цм- 1 за 5, приписује се гликозидним, карбоксилним и олефинским функцијама. Њихови УВ спектри су показали заједнички максимум апсорпције на 217 нм што указује на присуство а,б-незасићеног дела карбоксилне киселине у оба. Кисела хидролиза 4 и 5 ослобађа Д-глукозу, док ензимском хидролизом са глукозидазом, 4 и 5 даје (2Е,6Е)-8-хидрокси-2,6-диметил{{37} },6-октадиенска киселина20) (4а) и (2Е,6Е)-8-хидрокси-3,7- диметил-2,{{ 47}}октадиенска киселина21) (5а), респективно. 1 Х- и 13Ц-НМР подаци за 4 (ЦД3ОД, табеле 2, 3) показали су сигнале који се могу приписати два метила [д 1,71 (3Х, бр с, 10-Х3), 1,81 (3Х, д, Ј{{ 66}}.0 Хз, 9-Х3)], три метилена {д 2,19 (2Х, бр т, Ј= око 7 Хз, 5-Х2), 2,36 (2Х, м, 4-Х2), [4.24 (1Х, дд, Ј= 7.6, 12.0 Хз), 4.33 (1Х, дд, Ј= 6.2, 12.0 Хз), { {96}}Х2]}, и два трисупституисана олефина [д 5,41 (1Х, ддд, Ј= 1.2, 6,2, 7,6 Хз, 7- Х), 6,75 (1Х, тк, Ј{ {111}}.2, 1.0 Хз, 3-Х)] заједно са делом б-Дглукопиранозил [д 4.34 (д, Ј= 7.8 Хз, 1 -Х)]. Поређењем сигнала угљеника у 13Ц-НМР спектру 4

са онима од 4а, примећен је помак гликозилације на позицији 8- (д Ц 4: 65,5; 4а: 59,4). Положај глукозидне везе је такође потврђен експериментима ХМБЦ као што је приказано на слици 2. Као последица тога, разјашњено је да је стереоструктура 4 (2Е,6Е)-8-бД-глукопираносилокси-2,{{ 16}}диметил-2,6-октадиенска киселина. С друге стране, 1Х- и 13Ц-НМР подаци за 5 (ЦД3ОД, табеле 2, 3) указују на присуство (2Е,6Е)-8-хидрокси{{30}} ,7-диметил-2,6-отадиенска киселина [д 1,70 (3Х, бр с, 10-Х3), 2,14 (3Х, бр с, 9- Х3), 2,24 (2Х, м, 4-Х2), 2,27 (2Х, м, 5-Х2), 4,05, 4,20 (1Х сваки, оба бр д, Ј= ца. 12 Хз, 8-Х2), 5,47 (1Х, тк, Ј= 7.1, 0,9 Хз, 6-Х), 5,67 (1Х, бр с, 1-Х )] заједно са бД-глукопиранозил делом [д 4,23 (д, Ј= 7,7 Хз, 1 -Х)]. Повезаност бД-глукопиранозилног дела у 5 је разјашњена на основу ХМБЦ експеримената као што је приказано на слици 2. Штавише, уочен је типичан помак гликозилације за сигнале на 8- позицији (д Ц 5: 75,6; 5а: 68.8). на основу горе наведених доказа, утврђено је да је стереоструктура 5 (2Е,6Е)-8-бД-глукопираносилокси-3,7-диметил-2,{{103} }} октадиенска киселина.

Ефекти састојака на цитотоксичност изазвану фактором некрозе тумора-а (ТНФ-а) у ћелијама Л929

Познато је да ТНФ-а посредује у разним повредама органа путем индукције ћелијске апоптозе. У случају јетре, биолошки ефекти ТНФ-а су умешани у повреде јетре изазване токсинима јетре, исхемију/реперфузију, вирусни хепатитис и алкохол.22-24) Стога се сматра да је ТНФ-а важна мета за откривање антиинфламаторних и хепатопротективних агенаса. На основу горе поменутог концепта, истражили смо заштитне састојке из производа који се природно појављују на ћелијској смрти изазваној ТНФ-а у ћелијама Л929, ћелијској линији осетљивој на ТНФ-а.25) Раније смо извештавали

да је утврђено да неколико састојака из Пипер цхаба, 26-29) Боесенбергиа ротунда, 30,31) Пуница гранатум, 32) Хелицхрисум аренариум, 33-35) и Сапиндус рарак, 36-38) показују инхибиторне ефекте цитотоксичности изазване ТНФ-а у ћелијама Л929. Пошто фенилетаноидни састојци Ц. тубулоса (нпрехинакозид, актеозид и изоактеозид, итд.) 5) такође инхибирао ову цитотоксичност, даље смо испитали иридоидне, фенилпропаноидне и лигнанске састојке као што је приказано у табели 4. Као резултат, канканозид А (9, инхибиција: 16,3±2.0% на 1 00 мМ), мусаенозидна киселина (10, 44,7±8,7%), 8-епигаминска киселина (11, 10,7±0,4%), 8-хидрокси гераниол 8-ОбД- Утврђено је да глукопиранозид (17, 21,3 ± 2,4%) и ( )-пинорезинол ОбД-глукопиранозид (22, 22,3 ± 1,6%) показују значајну активност. Иако су њихове активности биле слабије од активности ехинакозида (ИЦ50= 31.1 мМ), актеозида (17,8 мМ) и изоацетеозида (22,7 мМ), главних састојака фенилетаноида.5

ПРИРОДНА ЦИСТАНЦХЕ ТУБУЛОСА ЗА ПОБОЉШАЊЕ СЕКСУАЛНЕ ФУНКЦИЈЕ ПХГС75% ЕЦХ 30% АЦТ 12%