Производња липазе Иарровиа Липолитица у ферментацији у чврстом стању користећи нуспроизводе Амазоновог воћа и сојину сачму као супстрат, 2. део

2.5. Хидролиза рибљег уља

Липазе су коришћене у хидролизи масних киселина за концентрисање полинезасићених масних киселина (ПУФА) [44,45]. Основна предност примене липаза у производњи полинезасићених масних киселина је специфичност ензима и реакција које се одвијају у условима умерене температуре, што погодује одржавању структуре ПУФА [44]. Употреба липаза је пожељнија од хемијских метода јер оне дају глицериде ниског приноса и чистоће [46]. Улога липаза у селективној хидролизи засићених масних киселина (СФА) и мононезасићених масних киселина (МУФА) из триацилглицерола (ТАГс) је производња глицерида богатих ПУФА. Принцип ове методе је стерична препрека узрокована молекуларном конфигурацијом двоструких веза угљеник-цис у ПУФА које изазивају савијање ланаца масних киселина. Дакле, ензимска активна места не приступају естарским везама ових масних киселина са својим глицеролним скелетима [47,48]. Бројне предности повезују се са увођењем масних киселина у исхрану као што су развој детета, превенција кардиоваскуларних болести, рака и разних менталних поремећаја (депресија, поремећај пажње, хиперактивност), поред антиинфламаторног потенцијала и потенцијалне хипертензије. контрола [49].

Цистанцхе гликозид такође може повећати активност СОД у ткивима срца и јетре и значајно смањити садржај липофусцина и МДА у сваком ткиву, ефикасно хватајући различите реактивне радикале кисеоника (ОХ-, Х₂О₂, итд.) и штитећи од оштећења ДНК изазваног од стране ОХ-радикала. Цистанцхе фенилетаноидни гликозиди имају јаку способност уклањања слободних радикала, већу редукциону способност од витамина Ц, побољшавају активност СОД у суспензији сперме, смањују садржај МДА и имају одређени заштитни ефекат на функцију мембране сперме. Цистанцхе полисахариди могу да појачају активност СОД и ГСХ-Пк у еритроцитима и плућним ткивима експериментално остарелих мишева изазваних Д-галактозом, као и да смање садржај МДА и колагена у плућима и плазми и повећају садржај еластина. добар ефекат чишћења на ДППХ, продужава време хипоксије код старијих мишева, побољшава активност СОД у серуму и одлаже физиолошку дегенерацију плућа код експериментално сенесцентних мишева Са ћелијском морфолошком дегенерацијом, експерименти су показали да Цистанцхе има добру антиоксидативну способност и има потенцијал да буде лек за превенцију и лечење болести старења коже. Истовремено, ехинакозид у Цистанцхе-у има значајну способност да уклони слободне радикале ДППХ и има способност да уклони реактивне врсте кисеоника и спречи деградацију колагена изазвану слободним радикалима, а такође има добар ефекат поправљања оштећења ањона слободних радикала тимина.

Кликните на Цистанцхе Тубулоса

【За више информација:george.deng@wecistanche.com / ВхатАпп:86 13632399501】

Производња екстраката ензима који се примењују у процесима као што је хидролиза може бити скуп задатак. Дакле, истраживање сировина које смањују трошкове производње може пружити занимљиву алтернативу. Употреба чврстог биокатализатора је пожељна јер се овај чврсти биокатализатор може поново користити у ензимским реакцијама, осим што има одличну стабилност складиштења на собној температури, без трошкова хлађења и лакоћу транспорта [41]. Није било извештаја о употреби чврстог биокатализатора из Иарровиа липолитица за производњу ПУФАС ензимском хидролизом рибљег уља. Стога је проучавана примена сировог ензимског екстракта и чврстог биокатализатора произведеног коришћењем андироба уљне погаче и сојине сачме (50:50) да би се проценила потенцијална примена ензима у хидролизи рибљег уља за даљу производњу полинезасићених масних киселина у одговарајућем процесу. (слика 6). Могуће је посматрати висок степен хидролизе (ДХ) у краћим временима реакције коришћењем чврстог биокатализатора (63, 70,8, 72,5 и 74,7 процената) од ензимског екстракта (47,5, 61,5, 66,5 и 74,8 процената) после 24, 48, 72 х и 144 х, респективно.

Процес ензимске хидролизе се стално примењује да би се добиле концентроване полинезасићене масне киселине. Гао ет ал. [50] је користио липазу у хидролизи уља бакалара, а садржај ЕПА и ДХА је побољшан 3.24-пута и 1.98-пута, респективно. Аартхи ет ал. [20] користио је концентровану липазу (1000 У/мЛ) у хидролизи рибљег уља и такође је открио стопу хидролизе изнад 60 процената након 72 х. У овом раду, бољи степен хидролизе је постигнут коришћењем сировог ензимског екстракта липазе (тј. без пречишћавања) када се упореди исто време хидролизе. Други аутори су проучавали хидролизу јетреног уља Мустелеус мустелус и уља од фоке, извештавајући о 75 процената и 70 процената хидролизе после 24 односно 9 х реакције [25,26].

Мартинс ет ал. [51] је користио комерцијалну липазу из Буркхолдериа цепациа (Амано) за хидролизу рибљег уља и после 48 х реакције добио 55,6 процената ДХА у поређењу са максималним израчунатим садржајем. У нашем раду, у прелиминарној студији, добили смо 70,8 процената хидролизе након 48 х реакције помоћу чврстог биокатализатора.

До сада, овакви налази су указивали на одрживост употребе нуспроизвода за производњу липазе у ферментацији у чврстом стању као начина за ублажавање штете по животну средину, процену нуспроизвода и исплативост. Поред тога, резултати показују потенцијалну примену ензима липазе у хидролизи рибљег уља за даљу производњу полинезасићених масних киселина у одговарајућем процесу.

Упркос томе што има у изобиљу јефтиних агроиндустријских нуспроизвода, одређивање и стандардизација састава, поред процене трошкова за добијање ензимског екстракта и чврстог биокатализатора из јефтиних нуспроизвода агроиндустрије, и даље су изазов, али изузетно зависи од врсте нуспроизвода, сезонског карактера и произведене количине, као и од коришћеног процеса и географске локације, између осталих фактора. Дакле, питања као што су сложеност ланца и његови логистички трошкови, употреба сложених и скупих процеса, висока потрошња енергије и регулаторна питања, између осталог, морају бити превазиђена. У том смислу, прерада нуспроизвода мора да превазиђе неколико баријера пре него што постане економски исплатива, укључујући потребу за прерадом великих количина сировина, капацитет за прераду хетерогених сировина, интегрисану логистику са различитим прерађивачким индустријама и могућност интеграције. процес у јединици за обраду како би се омогућило стварање високо вредних састојака, између осталог [52–55].

3. Материјали и методе

3.1. Материјал

Сојина сачма је купљена од Царамуру Алиментоса (Гојас, Бразил). Андироба уљану погачу произведену екстракцијом уља обезбедила је Бераца Ингредиентес Натураис (Пара, Бразил). Оба супстрата су стандардизована у погледу гранулометрије (<1.18 mm) and properly stored under refrigeration in polypropylene packages until use. The fish oil was purchased from Mundo dos Óleos, and according to the manufacturer, it is extracted by cold pressing and filtration, obtained from raw material with guaranteed origin. All other chemicals used were of analytical grade and used as received without any further purification, being obtained from Tedia (acetone), Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA, glucose, azocasein, agar, yeast extract, ethanol, methanol), Vetec (Tween 80), Oxoid (peptone), Isofar (sodium hydroxide, gum Arabic), and Precision Plus Protein Kaleidoscope—Bio-rad (molecular mass markers, kDa).

3.2. Услови узгоја микроорганизама и инокулума

Иарровиа липолитица ИМУФРЈ50682, изолована из ушћа у заливу Гуанабара, Рио де Жанеиро, Бразил [56] је култивисана на 28 ◦Ц у ИПД—агар медијуму (в/в: екстракт квасца 1 проценат; пептон, 2 процента; глукоза, 2 процента); ; агар, 3 процента). Ћелије су узгајане у течном медијуму који садржи екстракт квасца 1 проценат (в/в), пептон, 2 процента (в/в) и глукозу 2 процента (в/в) током 72 х, 160 рпм на 28 °Ц.

3.3. Карактеризација агроиндустријских нуспроизвода

Физичко-хемијски састав сојине сачме и андироба уљане погаче одређен је у погледу влаге, протеина, угљених хидрата, пепела, екстракта етра, нерастворљивих влакана и садржаја растворљивих влакана, према методологији коју је објавило Удружење званичних аналитичких хемичара (АОАЦ). ) [57]. Додатно, пошто на производњу липазе И. липолитица утиче аерација [58], порозност слоја у ССФ је процењена према једначини (1), где је ε порозност (изражена у м3 ваздуха·м−3 слоја); ρдрисолид је привидна густина сувог узорка (кг·м−3); а ρветсолид је густина узорка након додавања воде (кг·м−3 ) [58].

3.4. Липасе Продуцтион би ССФ

Чврсти матрикс који садржи сојину сачму и андироба уљну погачу припремљен је пре инокулације у реактору типа тацне са различитим пропорцијама супстрата и аутоклавиран на 121 ◦Ц током 20 мин. Фиксни параметри процеса коришћени за производњу липазе били су влага од 55 процената и концентрација инокулума од 0,71 мг суве биомасе/г супстрата [24]. Реактори су инкубирани у комори за биохемијску потребу за кисеоником (БОД) на 28 ◦Ц и узорци за жртвовање (тј. један реактор типа посуде за време узорковања) су узимани током ферментације за анализу.

ССФ је процењен коришћењем различитих комбинација андироба уљаног колача и сојине сачме ({{0}}:1{{10}}0; 25:75; 50:50; 75 :25 и 100:0) у различитим временима (0, 12, 24, 32 и 48 х). Након тога, допуна чврсте матрице која садржи андиробу уљну погачу и сојину сачму (50:50) је процењена додавањем 1,5 (% в/в) сојиног уља током времена (0, 12, 14, 20, 24, 28, 48, и 72 х) да би се добило повећање липолитичке активности. Поред тога, тестирано је присуство Твеен 80 (0,001 процента в/в) у медијуму за ферментацију који садржи 1,5 (% в/в) сојиног уља. Ферментација је праћена одређивањем активности липазе и протеазе, као и влаге и пХ (описано у пододељку "3.6. Аналитичка одређивања").

3.5. Екстракција ензима и производња чврстог биокатализатора

Екстракција ензима је изведена додавањем 50 мЛ 50 мМ калијум-фосфатног пуфера пХ 7,0 у биореакторе након чега је уследила инкубација на 37 ◦Ц, 200 рпм, током 20 мин. Након тога, ферментисани материјал суспендован у пуферу је притиснут мешачем са погледом и центрифугиран на 3000 рпм током 5 мин. Чврсти биокатализатор је добијен сушењем замрзавањем целе масе добијене на крају процеса ферментације током 72 х и чуван на собној температури 7 месеци да би се верификовала ензимска стабилност.

3.6. Аналитицал Детерминатионс

3.6.1. Активност липазе

Активност липазе је изведена методом коју су предложили Фреире ет ал. [59]. Реакциони медијум је емулгован у Ултра Туррак (ИКА) хомогенизатору коришћењем 5 процената (в/в) маслиновог уља и 5 процената (в/в) гума Арабиц у 100 мМ фосфатног пуфера (пХ 7.0). Ензимски екстракт (1 мЛ) или 0,5 г чврстог биокатализатора је додат у 19 мЛ реакционе смеше и инкубиран је 20 мин, 200 рпм на 37 °Ц. Реакција је прекинута додавањем 20 мЛ раствора ацетон-етанол и слободне масне киселине су титриране у аутоматском титратору (Метрохм 916—Ти-Тоуцх) коришћењем 0,04 мол/Л раствора НаОХ. Једна јединица активности липазе (У) је дефинисана као количина ензима која производи 1 µмол масне киселине у минути, под условима теста.

3.6.2. Протеасе Ацтивити

Активност протеазе је квантификована према методологији Цхарнеиа и Томареллија [60]. Ензимски екстракт (0.5 мЛ) је додат у 0.5 мЛ 0.5 процената (в/в) раствора азоказеина припремљеног са 50 мМ ацетатног пуфера (пХ) и инкубиран на 32 ◦Ц 40 мин. Реакција је заустављена додатком 0,5 мЛ раствора трихлоросирћетне киселине 15 процената (в/в) и узорци су центрифугирани на 3000 рпм током 15 мин. Супернатант (100 µЛ) је додат у 96- микротитарску плочу која садржи 100 µЛ 5 М калијум хидроксида, а апсорбанца на 428 нм је измерена у читачу микротитарске плоче (СпецтраМак, Молецулар Девицес). Једна јединица активности је дефинисана као количина ензима способног да промовише јединствено повећање апсорпције у минути.

3.6.3. Садржај влаге и пХ

Садржај влаге је праћен коришћењем равнотеже анализатора влаге (АНД МКС-50). пХ је мерен пХ метром (ТЕЦНАЛ, модел ТР-107 ПТ100, Бразил).

3.7. СДС-ПАГЕ

Електрофореза је изведена према методи коју је објавио Лаеммли [61] у полиакриламидном гелу (5 процената слагање, 15 процената раздвајање, 0.75 мм дебљине). Узорци су помешани у односу (1:4) из комбинације андироба уљне погаче и сојиног зрна (50:50) са пуфером за узорке који садржи -меркаптоетанол, загревани на 95 ◦Ц 5 мин и нанети на гел. Електрофореза је изведена на 150 В током 30 мин (Био-Рад, Херцулес, ЦА, УСА), а гел је откривен коришћењем Цоомассие Блуе Р-250. Коришћен је стандардни протеин маркер (Био-рад, Херцулес, ЦА, УСА) молекулске тежине у распону од 10 до 250 кДа.

3.8. Хидролиза рибљег уља: потенцијална примена

Степен хидролизе (ДХ) рибљег уља мерен је вагањем 1 г рибљег уља и додавањем 25 мЛ фосфатног пуфера пХ 7.0 да би се проверила потенцијална примена ензима у хидролизи рибљег уља. Затим је 5 мЛ ензимског екстракта (37 У) у ћилибарским боцама мешано 168 х. Реакција је заустављена са 20 мЛ ацетона и слободне масне киселине су титриране у аутоматском титратору са 0,1 М метанолног КОХ. Реакциони бланк се добија додатком ензима тек на крају реакције.

Степен хидролизе (ДХ) је израчунат према једначини (2):

где је Ас киселост узорка; Аа је киселост аутохидролизе; Си је индекс сапонификације.

3.9. Статистичка анализа

Сви експерименти су реплицирани три пута. У свакој репликацији, анализе су спроведене у три примерка. Резултати су одговарали средњој вредности ± стандардна девијација. Подаци су анализирани једносмерном анализом варијансе (АНОВА), док је Тукијев тест (п < 0.05) коришћен за тестирање разлика између средњих вредности коришћењем Сисвара 5.6.

4. Закључци

Ферментациони медијум добијен мешањем андироба уљане погаче и сојине сачме био је веома ефикасан у производњи липазе. Одабрана ферментациона матрица била је мешавина андироба уљне погаче и сојине сачме у односу 50:50, дајући 63,70 У·г -1 липолитичке активности. Максимална липолитичка активност је постигнута (82,52 У·г -1) након употребе андироба уљне погаче и сојиног сачма од 50:50 након додавања Твеен 80 (0,001 процената) и сојиног уља (1,5 процената). У електрофоретској анализи, откривене су траке протеина које су већ наведене у литератури као ИЛ Лип2 (37 и 40 кДа). Претходна примена липазе у хидролизи уља обезбедила је до 63 процента хидролизе после 24 х. Ова студија је показала да је могуће произвести липазу користећи нуспроизводе из региона Амазоније у комбинацији са сојином сачмом и применити је на хидролизу рибљег уља да би се даље произвеле полинезасићене масне киселине у одговарајућем процесу.

Доприноси аутора:Концептуализација, БДР, АЦЛ и МАЗЦ; Методологија, АССЦ, ЈЦСС, ФВдН, ЦЕЦдС, БДР, АЦЛ и МАЗЦ; Формална анализа, АССЦ, ЈЦСС и ФВдН; Истрага, АССЦ, ЈЦСС и ФВдН; Ресурси, АССЦ, ЈЦСС и ФВдН; Курирање података, АССЦ, ЈЦСС и ФВдН; Писање—припрема оригиналног нацрта, АССЦ, ЈЦСС, ФВдН и ЦЕЦдС; Писање—преглед и уређивање, БДР, ЦЕЦдС, АЦЛ и МАЗЦ; Надзор, БДР, ЦЕЦдСАЦЛ и МАЗЦ; Администрација пројекта, БДР, АЦЛ и МАЗЦ; Прибављање средстава, БДР, АЦЛ и МАЗЦ Сви аутори су прочитали и пристали на објављену верзију рукописа.

Признања: Аутори признају Цоорденацао де Аперфеицоаменто де Пессоал де Нивел Супериор—Бразил (ЦАПЕС—Финансијски код 001); Цонселхо Национал де Десенволвименто Циентифицо (ЦНПк); и Фундацао Царлос Цхагас Филхо де Ампаро а Пескуиса до Естадо до Рио де Јанеиро (ФАПЕРЈ).

Референце

1. Серра, ЈЛ; Родригуес, АМДЦ; Фреитас, РА; Меиреллес, АЈдА; Дарнет, СХ; Силва, ЛХМд Алтернативни извори уља и масти из амазонских биљака: масне киселине, метил алати, укупни каротеноиди и хемијски састав. Фоод Рес. Инт. 2019, 116, 12–19. [ЦроссРеф] [ПубМед]

2. Пенидо, Ц.; Цонте, ФП; Цхагас, МС; Родригуес, ЦА; Переира, ЈФ; Хенрикуес, МГ Антиинфламаторни ефекти природних тетранортритерпеноида изолованих из Царапа гуианенсис Аублет на артритис изазван зимозаном код мишева. Инфламм. Рес. 2006, 55, 457–464. [ЦроссРеф] [ПубМед]

3. Пенидо, Ц.; Коста, КА; Пеннафорте, РЈ; Коста, МФ; Переира, ЈФ; Сиани, АЦ; Хенрикуес, МГ Антиалергијски ефекти природних тетранортритерпеноида изолованих из Царапа гуианенсис Аублет на алергеном индуковану васкуларну пермеабилност и хипералгезију. Инфламм. Рес. 2005, 54, 295–303. [ЦроссРеф]

4. Сантос, КИП; Бењамим, ЈКФ; Коста, КАД; Реис, АС; Соуза Пинхеиро, ВБ; Сантос, АС Метаболомске технике примењене у истраживању фенолних киселина из агроиндустријског нуспроизвода Царапа гуианенсис Аубл. арапски. Ј. Цхем. 2021, 14, 103421. [ЦроссРеф]

5. Лоуренцо, ЈНП; Ферреира, ЛММ; Мартинс, ГЦ; Насцименто, ДГ Продуцао, Биометриа де Фрутос е Сементес е Ектрацао до Олео де Андироба (Царапа Гуианенсис Аублет; Соб Манејо Цомунитарио ем Паринтинс, АМ: Бразилија, Бразил, 2017; стр. 36.

6. Органиц, С. Олео де Андироба.

7. Цонаб. Болетим да Социобиодиверсидаде; Конаб: Бразилија, Бразил, 2017; Том 1, стр. 67.

8. Соуза, ЦР; Лима, РМБ; Азеведо, ЦП; Роси, ЛМБ Андироба (Царапа гуианенсис Аубл.); Ембрапа Амазониа Оцидентал: Бразилија, Бразил, 2006; 21п.

9. Оливеира, Ф.; Соуза, ЦЕ; Пецлат, ВРОЛ; Салгадо, ЈМ; Рибеиро, БД; Коељо, МАЗ; Венанцио, А.; Бело, И. Оптимизација производње липазе код Аспергиллус иберицус из уљних погача и њена примена у реакцијама естерификације. Фоод Биопрод. Процес. 2017, 102, 268–277. [ЦроссРеф]

10. Пандеи, А. Ферментација у чврстом стању. Биоцхем. инж. Ј. 2003, 13, 81–84. [ЦроссРеф]

11. Мартинез, О.; Санцхез, А.; Фонт, Кс.; Баррена, Р. Унапређење биопроизводње једињења ароме са додатом вредношћу путем ферментације у чврстом стању багасе шећерне трске и меласе шећерне репе: Оперативне стратегије и повећање процеса. Биоресоур. Тецхнол. 2018, 263, 136–144. [ЦроссРеф] [ПубМед]

12. Ано, Т.; Јин, ГИ; Мизумото, С.; Рахман, МС; Окуно, К.; Схода, М. Ферментација у чврстом стању липопептидног антибиотика итурина А коришћењем новог система реактора за ферментацију у чврстом стању. Ј. Енвирон. Сци. 2009, 21 (Суппл. С1), С162–С165. [ЦроссРеф]

13. Ванденбергхе, ЛПС; Карп, СГ; Оливеира, ПЗ; Царвалхо, ЈЦ; Родригуес, Ц.; Соццол, ЦР Поглавље 18 — Ферментација у чврстом стању за производњу органских киселина. Ин Цуррент Девелопментс ин Биотецхнологи анд Биоенгинееринг; Пандеи, А., Ларроцхе, Ц., Соццол, ЦР, Едс.; Елсевиер: Амстердам, Холандија, 2018; стр. 415–434.

14. Сала, А.; Виттоне, С.; Баррена, Р.; Санцхез, А.; Артола, А. Скенирање агроиндустријског отпада као супстрата за производњу гљивичних биопестицида: Употреба Беаувериа бассиана и Трицходерма харзианум у ферментацији у чврстом стању. Ј. Енвирон. Манаг. 2021, 295, 113113. [ЦроссРеф] [ПубМед]

15. Банат, ИМ; Царбоуе, К.; Сауцедо-Цастанеда, Г.; де Јесус Цазарес-Маринеро, Ј. Биосурфактанти: Зелена генерација специјалних хемикалија и потенцијална производња коришћењем технологије ферментације у чврстом стању (ССФ). Биоресоур. Тецхнол. 2021, 320, 124222. [ЦроссРеф] [ПубМед]

16. Переира, АС; Сант'Ана, ГЦФ; Амарал, ПФФ Манго агроиндустријски отпад за производњу липазе из Иарровиа липолитица и потенцијал ферментисане чврсте супстанце као биокатализатора. Фоод Биопрод. Процес. 2019, 115, 68–77. [ЦроссРеф]

17. Бригида, АИС; Амарал, ПФФ; Коељо, МАЗ; Гонцалвес, ЛРБ Липаза из Иарровиа липолитица: Производња, карактеризација и примена као индустријски биокатализатор. Ј. Мол. Цатал. Б Ензим. 2014, 101, 148–158. [ЦроссРеф]

18. Треицхел, Х.; Оливеира, Д.; Мазутти, МА; Ди Луццио, М.; Оливеира, ЈВ Преглед производње микробних липаза. Фоод Биопроцесс Тецхнол. 2010, 3, 182–196. [ЦроссРеф]

19. Мехта, А.; Гулериа, С.; Схарма, Р.; Гупта, Р. 6—Липазе и њихова примена са нагласком на прехрамбену индустрију. У микробној биотехнологији у храни и здрављу; Раи, РЦ, ур.; Ацадемиц Пресс: Цамбридге, МА, САД, 2021; стр. 143–164.

20. Аартхи, М.; Сараванан, П.; Аииадураи, Н.; Говтхаман, МК; Камини, НР Процес у два корака за производњу концентрата омега 3- полинезасићених масних киселина из уља сардине коришћењем Цриптоцоццус сп. МТЦЦ 5455 липаза. Ј. Мол. Цатал. Б Ензим. 2016, 125, 25–33. [ЦроссРеф]

21. Насцименто, ФВ; Цастро, АМ; Секи, АР; Цоелхо, МАЗ Увид у допуну медија у ферментацији сојиних љуски у чврстом стању помоћу Иарровиа липолитица: Утицај на производњу липазе у посуди и изолованим биореакторима са упакованим лежиштем. Биоцхем. инж. Ј. 2021, 166, 107866. [ЦроссРеф]

22. Продаја, ЈЦС; Цастро, АМ; Рибеиро, БД; Цоелхо, МАЗ Додавање коре лубенице као појачивача производње липазе и естеразе од стране Иарровиа липолитица у ферментацији у чврстом стању и њихова потенцијална употреба као биокатализатора у реакцијама деполимеризације поли(етилен терефталата) (ПЕТ). Биоцатал. Биотрансформ. 2020, 38, 457–468. [ЦроссРеф]

23. Агуиеирас, ЕКГ; де Баррос, ДСН; Фернандез-Лафуенте, Р.; Фреире, ДМГ Производња липаза у сачму семена памука и примена ферментисане чврсте супстанце као биокатализатора у реакцијама естерификације и трансестерификације. Ренев. Енергетика 2019, 130, 574–581. [ЦроссРеф]

24. Соуза, ЦИК; Фариас, МА; Рибеиро, БД; Цоелхо, МАЗ Додавање вредности агроиндустријским копроизводима од екстракције уљане репице и сојиног уља кроз производњу липазе коришћењем Иарровиа липолитица у ферментацији у чврстом стању. Валоризација отпадне биомасе 2017, 8, 1163–1176. [ЦроссРеф]

25. Хе, Х.; Ли, И.; Зханг, Л.; Динг, З.; Схи, Г. Разумевање и примена регулације азота Бациллус: перспектива синтетичке биологије. Ј. Адв. Рес. 2022; у штампи. [ЦроссРеф]

26. Алмеида, АФ; Таулк-Торнисиело, СМ; Цармона, ЕЦ Утицај извора угљеника и азота на производњу липазе од стране новоизолованог соја Цандида Висванатхан. Анн. Мицробиол. 2013, 63, 1225–1234. [ЦроссРеф]

27. Салиху, А.; Алам, МЗ; Абдул Карим, МИ; Саллех, ХМ Производња липазе: Увид у коришћење обновљивих пољопривредних остатака. Ресоур. Цонсерв. Рециклирај. 2012, 58, 36–44. [ЦроссРеф]

28. Лиу, Кс.; Иу, Кс.; Хе, А.; Ксиа, Ј.; Хе, Ј.; Денг, И.; Ксу, Н.; Киу, З.; Ванг, Кс.; Зхао, П. Ферментација у једном лонцу за производњу еритритола из зрна дестилатора заједничком култивацијом Иарровиа липолитица и Трицходерма реесеи. Биоресоур. Тецхнол. 2022, 351, 127053. [ЦроссРеф] [ПубМед]

29. Ванг, В.; Веи, Х.; Алахухта, М.; Цхен, Кс.; Химан, Д.; Јохнсон, ДК; Зханг, М.; Химмел, МЕ Хетеролошка експресија ензима ксиланазе у липогеном квасцу Иарровиа липолитица. ПЛоС ОНЕ 2014, 9, е111443. [ЦроссРеф] [ПубМед]

30. Насцименто, ФВд; Лемес, АЦ; Цастро, АМд; Секи, АР; Зарур Цоелхо, МА Перспектива временске еволуције производње липазе Иарровиа липолитица у ферментацији у чврстом стању. Процеси 2022, 10, 381. [ЦроссРеф]

31. Мандари, В.; Нема, А.; Девараи, СК Секвенцијална оптимизација и производња липазе великих размера коришћењем мешавине три супстрата из Аспергиллус нигер МТЦЦ 872 ферментацијом у чврстом стању. Процесс Биоцхем. 2020, 89, 46–54. [ЦроссРеф]

32. Мала, ЈГ; Едвиноливер, НГ; Камини, НР; Пуванакрисхнан, Р. Ферментација мешаног супстрата у чврстом стању за производњу и екстракцију липазе из Аспергиллус нигер МТЦЦ 2594. Ј. Ген. Аппл. Мицробиол. 2007, 53, 247–253. [ЦроссРеф]

33. Бартх, Г.; Гаиллардин, Ц. Иарровиа липолитица. У неконвенционалним квасцима у биотехнологији; Волф, К., ур.; Спрингер: Њујорк, Њујорк, САД, 1996; стр. 313–388.

34. Мофтах, ОА; Грбавˇци´ц, С.; Зужа, М.; Луковић, Н.; Безбрадица, Д.; Кнежевић-Југовић, З. Додавање вредности уљној погачи као отпаду из индустрије прераде уља: Производња липазе и протеазе од стране Цандиде која се користи у ферментацији у чврстом стању. Аппл. Биоцхем. Биотецхнол. 2012, 166, 348–364. [ЦроссРеф]

35. Цонтесини, ФЈ; да Силва, ВЦ; Мациел, РФ; де Лима, РЈ; Баррос, ФФ; де Оливеира Царвалхо, П. Анализа површине одговора за производњу енантиоселективне липазе из Аспергиллус нигер ферментацијом у чврстом стању. Ј. Мицробиол. 2009, 47, 563–571. [ЦроссРеф]

36. Риго, Е.; Нинов, ЈЛ; Ди Луццио, М.; Оливеира, ЈВ; Поллони, АЕ; Ремонатто, Д.; Арбтер, Ф.; Варданега, Р.; Оливеира, Д.; Треицхел, Х. Производња липазе чврстом ферментацијом сојине сачме са различитим додацима. ЛВТ Фоод Сци. Тецхнол. 2010, 43, 1132–1137. [ЦроссРеф]

37. Сун, СИ; Ксу, И. Ферментација у чврстом стању за производњу синтетичке липазе из целе ћелије из Рхизопус цхиненсис и идентификација функционалног ензима. Процесс Биоцхем. 2008, 43, 219–224. [ЦроссРеф]

38. Фариас, МА; Валони, ЕА; Цастро, АМ; Цоелхо, МАЗ Липасе Продуцтион би Иарровиа Липолитица у ферментацији у чврстом стању користећи различите агроиндустријске остатке. Цхем. инж. Транс. 2014, 38, 301–306.

39. Сидху, П.; Схарма, Р.; Сони, СК; Гупта, ЈК Производња екстрацелуларне алкалне липазе од стране новог термофилног Бациллус сп. Фолиа Мицробиол. 1998, 43, 51–54. [ЦроссРеф]

40. Цорзо, Г.; Ревах, С. Производња и карактеристике липазе из Иарровиа липолитица 681. Биоресоур. Тецхнол. 1999, 70, 173–180. [ЦроссРеф]

41. Соуза, ЦИК; Рибеиро, БД; Цоелхо, МАЗ Карактеризација и примена липазе Иарровиа липолитица добијене ферментацијом у чврстом стању у синтези различитих естара који се користе у прехрамбеној индустрији. Аппл. Биоцхем. Биотецхнол. 2019, 189, 933–959. [ЦроссРеф]

42. Фицкерс, П.; Фудалеј, Ф.; Далл, МТЛ; Цасарегола, С.; Гаиллардин, Ц.; Тхонарт, П.; Ницауд, ЈМ Идентификација и карактеризација гена ЛИП7 и ЛИП8 који кодирају две екстрацелуларне триацилглицерол липазе у квасцу Иарровиа липолитица. Фунгал Генет. Биол. 2005, 42, 264–274. [ЦроссРеф]

43. Цхенг, И.-Х.; Хсиао, ФС-Х.; Вен, Ц.-М.; Ву, Ц.-И.; Дибус, А.; Иу, И.-Х. Мешовита ферментација сојине сачме протеазом и пробиотицима и њени ефекти на перформансе раста и имуни одговор бројлера. Ј. Аппл. Аним. Рес. 2019, 47, 339–348. [ЦроссРеф]

44. Цхакраборти, К.; Паул Рај, Р. Селективно обогаћивање н-3 полинезасићених масних киселина дужином Ц18–Ц20 ацилног ланца из уља сардине коришћењем Псеудомонас флуоресценс МТЦЦ 2421 липазе. Фоод Цхем. 2009, 114, 142–150. [ЦроссРеф]

45. Зараи, З.; Еддехецх, А.; Ригано, Ф.; Отери, М.; Мицализзи, Г.; Дуго, П.; Монделло, Л.; Цацциола, Ф. Карактеризација моноацилглицерола и диацилглицерола богатих полинезасићеним масним киселинама произведених хидролизом уља јетре Мустелеус мустелус катализованом имобилисаном бактеријском липазом. Ј. Цхроматогр. 2020, 1613, 460692. [ЦроссРеф]

46. ​​Ианг, Ј.; Сонг, Кс.; Ванг, Л.; Цуи, К. Свеобухватна анализа метаболичких промена у Сцхизоцхитриум сп. сојеви са различитим садржајем ДХА. Ј. Цхроматогр. Б 2020, 1160, 122193. [ЦроссРеф]

47. Ианг, З.; Јин, В.; Цхенг, Кс.; Донг, З.; Цханг, М.; Ванг, Кс. Ензимско обогаћивање глицерида н-3 полинезасићених масних киселина селективном хидролизом. Фоод Цхем. 2021, 346, 128743. [ЦроссРеф]

48. Окада, Т.; Морриссеи, МТ Производња концентрата н-3 полинезасићених масних киселина из уља сардине помоћу имобилисане Цандида ругоса липазе. Ј. Фоод Сци. 2008, 73, Ц146–Ц150. [ЦроссРеф]

49. Риедигер, НД; Отхман, РА; Сух, М.; Могхадасиан, МХ Системски преглед улоге н-3 масних киселина у здрављу и болести. Џем. Дијета. доц. 2009, 109, 668–679. [ЦроссРеф] [ПубМед]

50. Гао, К.; Цху, В.; Сун, Ј.; Мао, Кс. Идентификација алкалне липазе способне за боље обогаћивање ЕПА од ДХА због селективности и региоселективности масних киселина. Фоод Цхем. 2020, 330, 127225. [ЦроссРеф]

51. Мартинс, ПА; Тробо-Маседа, Л.; Лима, ФА; де Мораис Јуниор, ВГ; Де Марко, ЈЛ; Салум, ТФЦ; Гуисан, ЈМ Омега-3 производња хидролизом рибљег уља употребом липазе из Буркхолдериа гладиоли БРМ58833 имобилисана и стабилизована техникама након имобилизације. Биоцхем. Биопхис. Реп. 2022, 29, 101193. [ЦроссРеф] [ПубМед]

52. Лемес, АЦ; Егеа, МБ; Оливеира Филхо, ЈГд; Гаутерио, ГВ; Рибеиро, БД; Цоелхо, МАЗ Биолошки приступи за екстракцију биоактивних једињења из нуспроизвода агроиндустрије: Преглед. Фронт. Биоенг. Биотецхнол. 2022, 9, 1–18. [ЦроссРеф] [ПубМед]

53. Лемес, АЦ; Сала, Л.; Орес, ЈДЦ; Брага, АРЦ; Егеа, МБ; Фернандес, КФ Преглед најновијих достигнућа у шифрованим биоактивним пептидима из отпада богатог протеинима. Инт. Ј. Мол. Сци. 2016, 17, 950. [ЦроссРеф]

54. Лемес, АЦ; Коељо, МАЗ; Гаутерио, ГВ; Паула, ЛЦ; Филхо, ЈГдО; Егеа, МБ Поглавље 11—Индустријски отпад и нуспроизводи: извор функционалне хране, нутријената и биополимера. У биополимерима у нутријентима и функционалној храни; Тхе Роиал Социети оф Цхемистри: Лондон, УК, 2023; стр. 329–360.

55. Пинтадо, МЕ; Теикеира, ЈА Валоризацао де субпродутос да индустриа алиментар: Обтенцао де ингредиентес де валор ацресцентадо. Бол. Биотецнол. 2015, 1, 10–12.

56. Хаглер, АН; Мендонца-Хаглер, ЛЦ Квасци из морских и естуарских вода са различитим нивоима загађења у држави Рио де Жанеиро, Бразил. Аппл. Енвирон. Мицробиол. 1981, 41, 173–178. [ЦроссРеф]

57. АОАЦ. Званичне методе анализе АОАЦ Интернатионал-а; Удружење званичних аналитичких хемичара: Вашингтон, ДЦ, САД, 1995.

58. Цастро, АМд; Цастилхо, ЛдР; Фреире, ДМГ Карактеризација бабасуа, репице, рицинусовог семена и сунцокретових остатака за употребу као сировина за процесе ферментације. Инд. Цропс Прод. 2016, 83, 140–148. [ЦроссРеф]

60. Фреире, ДМ; Телес, ЕМ; Бон, ЕП; Сант' Анна, ГЛ, Јр. Производња липазе од стране Пенициллиум-а ограничена у ферментору на клупи: ефекат исхране угљеником и азотом, мешање и аерација. Аппл. Биоцхем. Биотецхнол. 1997, 63–65, 409–421. [ЦроссРеф]

60. Цхарнеи, Ј.; Томарелли, РМ Колориметријска метода за одређивање протеолитичке активности дуоденалног сока. Ј. Биол. Цхем. 1947, 171, 501–505. [ЦроссРеф] [ПубМед]

61. Лаеммли, УК Цепање структурних протеина током скупштине главе бактериофага Т4. Природа 1970, 227, 680–685. [ЦроссРеф] [ПубМед]

Одрицање одговорности/Напомена издавача:Изјаве, мишљења и подаци садржани у свим публикацијама су искључиво они појединачних аутора и сарадника, а не МДПИ и/или уредника(а). МДПИ и/или уредник(и) се одричу одговорности за било какву повреду људи или имовине која је резултат идеја, метода, упутстава или производа наведених у садржају.

【За више информација:george.deng@wecistanche.com / ВхатАпп:86 13632399501】