Дуготрајно праћење имунитета специфичног за Мицопласма Хиопнеумониае код вакцинисаних свиња

Апстрактан

Мицопласма хипопнеа мобиле је примарни агенс ензоотске пнеумоније код свиња. Да би се минимизирали економски губици узроковани овом болешћу, обично се практикује вакцинација М. хипопнеа мобиле. Међутим, постојаност имунитета изазваног вакцином против М. хиопнеумониае, посебно имунитета посредованог ћелијама, до тренутка клања још није испитана. Дакле, на две комерцијалне фарме, 25 свиња (н=50) је добило комерцијалну бактерију интрамускуларно у доби од 16 дана. Сваког месеца је анализирано присуство серумских антитела специфичних за М. хиопнеумониае и пролиферација ТНФ-, ИФН- и ИЛ-17А различитих подгрупа Т ћелија у крви је процењивана коришћењем тестова опозива. На обе фарме је претпостављена природна инфекција М. хиопнеумониае. Међутим, испитиване свиње су остале негативне на М. хиопнеумониае скоро током целог испитивања. Сероконверзија није примећена након вакцинације и све свиње су постале серонегативне у доби од два месеца. Кинетика фреквенција подскупа Т ћелија била је слична на обе фарме. ЦД4+ЦД8+ Т ћелије које производе мобилно-специфичне цитокине за микоплазму хипопнеју пронађене су у крви свиња са обе фарме у доби од месец дана, али су се значајно смањиле са повећањем старости. С друге стране, уочена је пролиферација Т ћелија након ин витро стимулације М. хиопнеумониае до краја това. Штавише, разлике у хуморалним и ћелијски посредованим имуним одговорима након вакцинације против М. хиопнеумониае нису примећене између свиња са и без антитела добијених од мајке. Ова студија документује дуготрајне имуне одговоре изазване мобилном вакцином против М. хипопнеа код товљеника у пољским условима. Даља истраживања су оправдана како би се истражио утицај природне инфекције на ове одговоре.

цистанцхе користи за мушкарце - јача имуни систем

Кликните овде да видите производе Цистанцхе Енханце Иммунити

【Затражите више】 Е-пошта:cindy.xue@wecistanche.com / Вхатс Апп: 0086 18599088692 / Вецхат: 18599088692

Кључне речи

Мицопласма хиопнеумониае, свиње, лонгитудинална студија, имунитет изазван вакцином, ћелијски посредован имунитет

Увод

Један од најважнијих респираторних патогена код свиња је Мицопласма хиопнеумониае (М. хиопнеумониае). Он је примарни агенс ензоотске пнеумоније, ендемичан на већини фарми и одговоран за значајне економске губитке у производњи свиња широм света [1, 2]. Вакцинација је најчешће коришћена пракса управљања за контролу М. хиопнеумониае јер може да минимизира клиничке знаке и губитак перформанси и да смањи трошкове лечења [3]. Циљ вакцинације против М. хиопнеумониае је да се подигну имуни одговор специфични за патоген који реагује брзо и ефикасно на природну инфекцију М. хиопнеумониае. Већина комерцијално доступних вакцина против М. хиопнеумониае за свиње регистрована је за примену између једне и три недеље старости [4]. Почетак М. хипопнеа мобиле специфичног имунитета варира од једне до четири недеље и има за циљ заштиту од инфекција током целог периода това, до клања [4]. Све у свему, вакцинација или инфекција свиња покрећу диференцијацију меморијских Б ћелија и ЦД4+ЦД8+ Т ћелија, обезбеђујући брз антитела и ћелијски посредован имуни одговор након другог контакта са патогеном [5] . Вакцинација против М. хиопнеумониае може довести до сероконверзије и повећања специфичних антитела за М. хиопнеумониае локално у респираторном тракту [6–9]. Код вакцинисаних животиња, примећени су виши нивои лимфоцита који производе ИФН{{13}, заједно са вишом стопом пролиферације лимфоцита након ин витро стимулације М. хиопнеумониае у поређењу са невакцинисаним животињама [9–11]. Штавише, полифункционалне ЦД4+ЦД8− и ЦД4−ЦД8+ Т ћелије, које производе ИНФ- и ТНФ-, пронађене су након вакцинације против М. хиопнеумониае [12]. Међутим, није потпуно јасно колико дуго траје имунитет изазван вакцином изазван мобилном М. хипопнеа мобиле. У већини студија ефикасности вакцине против М. хиопнеумониае, свиње су већ неколико недеља након вакцинације изазване да се испита кашаљ, имунолошки параметри, оптерећење патогеном и лезије плућа [13–16]. Када је проучавана дугорочна ефикасност, углавном у теренским испитивањима, често су испитивани само производни параметри и лезије плућа при клању, а имунолошки параметри нису или само слабо истражени [17–20]. Према нашим сазнањима, М. хиопнеумониае специфична вакцина изазвана ћелијским имунитетом од тренутка вакцинације до клања у теренским условима још није испитана. Поред вакцинације прасади, вакцинација приплодних назимица против М. хиопнеумониае је уобичајена пракса аклиматизације [21]. ЦД4+ЦД8+ и полифункционалне ЦД4-ЦД8− Т ћелије које производе цитокине специфичне за Мицопласма хиопнеумониае присутне су након вакцинације приплодних животиња [22]. Прасад која сиса колострум од имунизованих крмача имају висок ниво М. хиопнеумониае специфичних мајчинских антитела (МДА) и ћелијски посредован имунитет у крви који може да опстане до одбића или чак дуже [7, 22, 23]. Када се прасад вакцинише против М. хиопнеумониае у присуству (високих нивоа) МДА, сероконверзија често изостаје [24–26]. Међутим, пролиферациони одговор лимфоцита после ин витро стимулације био је значајно већи код вакцинисаних прасади против М. хиопнеумониае у поређењу са невакцинисаним прасадима, без обзира на нивое МДА [26]. Иако су ови аутори показали да је ћелијски посредован имунитет настао након вакцинације против М. хиопнеумониае у присуству високих нивоа МДА, потребна је даља диференцијација подскупова Т ћелија и њихова производња цитокина да би се стекао бољи увид у ове ћелијски посредоване имуне одговоре. и на крају утицај природне инфекције на ове одговоре. Циљ ове студије је био да се испитају хуморални и ћелијски посредовани имуни одговори на вакцинацију против М. хиопнеумониае код свиња на две комерцијалне фарме. У том циљу, серумска антитела и пролиферација и производња цитокина од стране различитих подгрупа Т ћелија су праћени од тренутка вакцинације у доби од 16 дана до старости за клање. Такође је истражен потенцијални утицај мајчиног имунитета специфичног за М. хиопнеумониае на хуморалне и ћелијски посредоване вакцине прасади.

бенефиције додатка цистанцхе-повећавају имунитет

материјали и методе

Опис стада и селекција животиња

Two commercial farrow-to-finish farms were included in the study based on the willingness of the farmer to participate. On both farms, circulation of M. hyopneumoniae was assumed based on the presence of the pathogen in tracheobronchial swabs (TBS) taken from fattening pigs in the past. Danbred breeding gilts were reared on farm A and purchased on farm B. On-farm A, the breeding gilts were vaccinated once against M. hyopneumoniae four weeks before first insemination with Ingelvac MycoFLEX® (Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH, Ingelheim am Rhein, Germany). On-farm B, breeding gilts were vaccinated with Stellamune® Mycoplasma (Elanco, Utrecht, The Netherlands) at six months of age upon arrival at the farm and a second time four weeks later. Furthermore, on-farm B gilts were also booster-vaccinated twice shortly before farrowing. On both farms, sows were not vaccinated against M. hyopneumoniae. Farm A practiced a 5-week batch-farrowing system and piglets were weaned and moved to the nursery unit at approximately 22 days of age. The piglets were vaccinated at 16 days of age against M. hyopneumoniae with an inactivated whole cell J strain-based bacterin (Ingelvac MycoFLEX®, Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH, Ingelheim am Rhein, Germany), porcine circovirus type 2 (PCV2) (Ingelvac CircoFLEX®, Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH) and porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) (UNISTRAIN® PRRS, HIPRA, Amer, Spain). Pigs were moved to the fattening unit at 9 weeks of age. Farm B worked in a 4-week batch-farrowing system and piglets were weaned and moved to the nursery unit at approximately 22 days of age. Tey was vaccinated at 16 days of age against M. hyopneumoniae with the same vaccine as in farm A (Ingelvac MycoFLEX®, Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH) and PRRSV (UNISTRAIN® PRRS, HIPRA). The piglets were moved to the fattening unit at 10 weeks of age. On both farms, five breeding animals (two gilts and three sows of mixed parity) were included in the study. The growing process was monitored by the main investigator and from each litter, five healthy piglets (birth weight>1 кг) су одабрани, зарезани у уво и праћени месечно од рођења до клања (н=25 прасад/фарма). Унакрсно хранитељство прасади са ушним зарезима није било дозвољено и свиње нису примале антибиотике активне против М. хиопнеумониае на обе фарме током целог испитивања.

цистанцхе тубулоса-побољшава имуни систем

Дизајн студије и узорковање

Студију су одобрили Етички комитет Факултета ветеринарске медицине и Факултета за бионауку Универзитета у Генту (број одобрења 2020/31). Од крмача је сакупљан колострум током процеса прасења. У року од 6 х након прасења, од крмача су сакупљени ТБС (катетер за сисање 60 цм, Мединорм ГмбХ, Спиесен-Елверсберг, Немачка) и крв у стерилној серумској епрувети (згрушана крв). У старости од два дана прасад је узета крв у епрувете са серумом. Од једног до шест месеци старости прасићи су сваког месеца узимани крв у стерилном серуму и ЕДТА (незгрушана крв) епруветама и ТБС. На фарми А свиње су заклане у доби од 177 дана, тако да је последњи узорак узет у доби од 5,5 месеци. На фарми Б, свиње су послате у кланицу у доби од 191 дан, тако да је последњи узорак узет са 6 месеци. Узорци колострума и серума су чувани на -20 степену, а узорци ТБС на -80 степену до даље анализе. Незгрушана крв је одмах обрађена за анализу имунитета посредоване ћелијама. Дигитални ПЦР за детекцију ДНК М. хиопнеумониае Да би се тестирало присуство М. хиопнеумониае, ДНК је екстрахована из ТБС узорака коришћењем комерцијалног комплета (ДНеаси® Блоод & Тиссуе кит, Киаген, Венло, Холандија) и дигиталног ПЦР (дПЦР) ) протокол за циљање гена П102 изведен је према претходно описаном протоколу [27]. Антитела специфична за Мицопласма хиопнеумониае Антитела специфична за Мицопласма хиопнеумониае у узорцима серума и колострума су анализирана коришћењем комерцијалне индиректне ЕЛИСА (М. хио Аб тест, ИДЕКСКС Лабораториес Инц., Вестброок, МЕ, САД) према упутствима произвођача. Узорци су сматрани позитивним ако је однос узорка према позитивном (С/П) био већи од 0,40 и негативним ако је однос С/П био једнак или мањи од 0,40.

Производња цитокина Т ћелија

Из свеже, незгрушане крви, мононуклеарне ћелије периферне крви (ПБМЦ) су изоловане коришћењем Лим пхопреп™ градијента густине (Стемцелл тецхнологи, Ван - - цоувер, Канада). Изолација, стимулација и бојење ПБМЦ-а су изведени као што је претходно описано уз неке мање модификације [22]. Ћелије су стимулисане преко ноћи (20 х) са бактеријом соја Ј соја М. хиопнеумониае сопствене производње и за сваку животињу су укључени негативан медијум и позитивна контрола Конканавалина А (ЦонА). Бактерин М. хиопнеумониае Ј соја направљен је на основу протокола за производњу бактерије М. хиопнеумониа Ф7.2 Ц [16]. Да би се истражила производња цитокина, Брефелдин А (еБиосциенце™, Сан Дијего, Калифорнија, САД) је додат у сваки бунар током последња 4 х стимулације да би се инхибирала секреција протеина. За екстрацелуларно бојење, ПБМЦ су инкубирани са анти-ЦД3 (клон ППТ3), анти-ЦД4 (клон 74-12-4) и анти-ЦД8 ​​(клон 11-295-33) моноклонским антителима. Следеће, одговарајућа секундарна антитела анти-мишји ИгГ1 АПЦ-Ци7 (Абцам, Кембриџ, УК), анти-мишји ИгГ2б ФИТЦ (Биолегенд, Сан Дијего, Калифорнија, САД) и анти-мишји ИгГ2а ПЕ-Ци7 (Абцам, Кембриџ, УК) су додати. Затим је изведен корак блокирања мишјим ИгГ1 (10 µг/мЛ). Након површинског бојења, ћелије су фиксиране и пермеабилизоване, а извршено је интрацелуларно бојење за ТНФ-, ИФН- и ИЛ-17А [22]. Подаци су добијени помоћу ЦитоФЛЕКС проточног цитометра (Бецкман Цоултер, Беа, ЦА, УСА), а резултати су даље анализирани помоћу софтвера ЦитЕкперт (Бецкман Цоултер). Хијерархија гајта је приказана у Додатној датотеци 1.

Тест пролиферације Т-ћелија

Изоловани ПБМЦ су стимулисани ин витро са бактеријом соја Ј соја М. хиопнеумониае сопствене производње да би се проценила пролиферација Т ћелија. Коришћени протокол је детаљно описан у претходној студији [22]. За површинско бојење, ћелије су прво инкубиране са анти-ЦД3, анти-ЦД4 и анти-ЦД8 ​​моноклонским антителима, а затим са одговарајућим секундарним антителима анти-мишји ИгГ1 АПЦ-Ци7 (Абцам, Цамбридге, УК), анти-мишји ИгГ2б ФИТЦ (Биолегенд, Сан Дијего, Калифорнија, САД) и анти-мишји ИгГ2а АлекаФлуор 647 (Биолегенд, Сан Дијего, Калифорнија, САД) заједно са пропидијум јодидом. Подаци су добијени помоћу ЦитоФЛЕКС проточног цитометра, а резултати су даље анализирани помоћу софтвера ЦитЕкперт. Хијерархија гајта је приказана у Додатној датотеци 2.

цистанцхе тубулоса-побољшава имуни систем

Анализа података

Statistical analyses were performed using IBM SPSS® Statistics Version 27 (IBM, Chicago, IL, USA) to compare results within farms. A descriptive analysis was performed for M. hyopneumoniae-specific antibody levels and the frequency of different T cell subsets. Kolmogorov-Smirnov and Shapiro-Wilk tests were used as tests for the normality of the residuals. For normally distributed data, repeated measures analyses of variance were used and post-hoc pairwise comparisons were made with a Bonferroni correction to assess possible differences between successive sampling moments. For not mally distributed data, a non-parametric Friedman test was used together with a Wilcoxon signed rank test with Bonferroni correction to compare the different sampling moments. Descriptive results were given to discuss whether the presence (S/P>{{0}}.40) или одсуство (С/П мањи или једнак 0,40) МДА утицало је на хуморални и ћелијски посредовани имунитет након вакцинације прасади.

Резултати

На свакој фарми, пет свиња је искључено током испитивања због смрти или губитка ушне маркице. Подаци ових свиња укључени су у анализу до последњег тачно документованог тренутка узорковања.

Присуство природне инфекције са М. хиопнеумониае на фармама

На фарми А, сви ТБС узорци (од крмача, прасади и свиња у тову) били су негативни на присуство ДНК М. хиопнеумониае. На фарми Б, сви узорци ТБС од крмача, прасади и свиња у тову били су негативни на присуство ДНК М. хиопнеумониае до петог месеца старости. Са шест месеци старости, четири свиње у тову су биле позитивне на М. хиопнеумониае са 300, 7, 22 и 14 М. хиопнеумониае организама/µЛ ДНК.

Перзистентност антитела специфичних за М. хиопнеумониае код свиња

На обе фарме, четири од пет крмача имале су М. хиопнеумониае специфична антитела у серуму и колоструму при прасењу (Слике 1А и Ц). Дводневна прасад која су сисала колострум од тих крмача имала су материнска антитела специфична за М. хиопнеумониае (присутна МДА), док су прасад серонегативних крмача такође била серонегативна (одсутна МДА) (Слике 1Б и Д). Упркос вакцинацији у доби од 16 дана, на обе фарме, ниво антитела специфичних за М. хиопнеумониае у серуму свиња значајно се смањио од два дана старости до месец дана, од једног месеца до два месеца и од два месеца до старости од три месеца (слика 1Е). Нису уочене значајне разлике између каснијих момената узорковања. Од два месеца старости па надаље, све свиње, осим две на фарми А са четири месеца старости, биле су серонегативне на М. хиопнеумониае. Нивои специфичних антитела за М. хиопнеумониае код прасади са МДА су се временом смањивали и у доби од два месеца достигли су исте нивое као они код прасади без МДА (Слика 1Ф).

Кинетика фреквенција подскупа Т ћелија код свиња

Током живота свиње, учесталост различитих подскупина Т ћелија у крви се мења услед сазревања имуног система и контакта са микроорганизмима [28]. Да би се истражила кинетика различитих подгрупа Т ћелија, ПБМЦ крви из контроле нестимулисаног медијума су процењени проточном цитометријом. У старости од месец дана, учесталост (просечна %) ЦД4− ЦД8+ Т ћелија је била 13,6±2,8% и 10,5±3,4% код свиња са фарме А и Б, респективно. Ова учесталост се значајно повећала са два месеца старости на обе фарме и поново значајно опала са три месеца старости на фарми А. Од три месеца старости надаље остала је стабилна на фарми А, док је на фарми Б поново примећен значајан пораст на шест месеци старости (слика 2А). На обе фарме, учесталост ЦД4+ЦД8− Т ћелија била је највећа у узрасту од једног месеца са 37,5±6.0% (фарма А) и 42,3±5,9% (фарма Б). Ова учесталост се значајно смањила са два месеца старости. На фарми А, учесталост се стабилизовала од два месеца надаље, док се на фарми Б смањивање дешавало постепено (Слика 2Б). У узрасту од једног месеца, однос ЦД4/ЦД8 је био 2,8 (фарма А) и 4.0 (фарма Б). Однос је опао са два месеца старости и остао испод 1.0 од трећег месеца старости надаље на обе фарме. Учесталост ЦД4−ЦД8− Т ћелија код једномесечних свиња била је 31,1±7,2% и 25,6±5,4% на фармама А и Б, респективно. На обе фарме, учесталост је остала слична у доби од два месеца, али се значајно повећала након тога да би достигла највиши ниво у доби од пет месеци (Слика 2Ц). Учесталост ЦД4+ЦД8+ Т ћелија била је најнижа у узрасту од једног месеца са 3,3±1,1% и 4.0±1,0% на фармама А и Б, респективно. Ова учесталост се значајно повећала у доби од два месеца. На фарми А, остала је стабилна након тога, док је на фарми Б постепено даље расла до четири месеца старости да би се поново значајно смањила у петомесечној старости (слика 2Д).

Слика 1 Присуство антитела специфичних за Мицопласма хиопнеумониае код крмача и свиња. А, Ц

Слика 2 Месечна учесталост (%) ЦД3+ подгрупа Т ћелија у крви свиња. А

Слика 3 Перзистентност циркулишућих пролиферирајућих ЦД3+ Т ћелија код свиња. А, Б

Пролиферација Т ћелија

ПБМЦ стимулисани М. хипопнеа мониае су анализирани да би се истражио проценат пролиферирајућих Т ћелија. Као што је приказано на сликама 3А и Б, пролиферирајуће ЦД3+ Т ћелије су биле присутне у крви свиња у сваком тренутку узорковања на обе фарме након ин витро стимулације бактеријом М. хиопнеумониае, иако су проценти неких животиња били већи на фарма А. На фарми А, проценат пролиферирајућих Т ћелија значајно се смањио у доби од шест месеци у поређењу са процентом у доби од пет месеци, док на фарми Б није било значајног смањења или повећања пролиферације Т ћелија. бити посматран. ЦД4-ЦД8− Т ћелије су биле доминантна подскупина ЦД3+ Т ћелија која се размножавала као одговор на стимулацију М. хиопнеумониае на обе фарме, праћене ЦД4+ ЦД8− Т ћелија (Слике 3 Ц и Д).

Слика 4 ЦД4+ЦД8+ Т ћелије које производе цитокине специфичне за Мицопласма хиопнеумониае у крви свиња на обе фарме. А

Производња цитокина Т ћелија

Да би се стекао бољи увид у присуство и постојаност Т ћелија специфичних за М. хиопнеумониае код свиња, ТНФ-, ИФН- и ИЛ-17А производња ПБМЦ-а у крви стимулисана ин витро бактеријом М. хиопнеумониае је процењена од стране проточна цитометрија. Као што је приказано на слици 4, на обе фарме, стимулисане ЦД4+ЦД8+ Т ћелије су производиле цитокине, што је било израженије код свиња млађег узраста. Проценат ТНФ- + ЦД4+ЦД8+ Т ћелија значајно се смањио код свиња на фарми А од једног до два месеца старости и од два до три месеца старости на фарми Б. А значајан пад ИФН- + ЦД4+ЦД8+ Т ћелија примећен је од једног до два месеца старости код свиња на обе фарме и од два до три месеца старости на фарми Б. Те проценат ЦД4+ЦД8+ Т ћелија које производе и ТНФ- и ИФН- значајно се смањио код свиња од једног до два месеца старости на фарми А и од два до три месеца на фарми Б. На једном месецу старости, проценат ИЛ-17А+ ЦД4+ЦД8+ Т ћелија је био већи у поређењу са процентом у доби од два месеца, али ова разлика није била статистички значајна. Четири животиње на фарми Б које су биле позитивне на М. хиопнеумониае у доби од шест месеци имале су сличну производњу цитокина од стране ЦД4+ЦД8+ Т ћелија у поређењу са М. хиопнеумониае негативним животињама. Поред подскупа ЦД4+ЦД8+ Т ћелија, приметили смо и разлике у производњи цитокина од других подскупова Т ћелија на фарми Б. Слика 5 показује податке о јасним одговорима и значајним разликама у производњи цитокина од стране друге подгрупе Т ћелија које су се јављале само на фарми Б. За остале параметре и на фарми А, нису примећене разлике у производњи цитокина ЦД4-ЦД8+, ЦД4+ЦД8− или ЦД4− ЦД8- Т ћелије. Проценат ТНФ- + ЦД4+ЦД8− Т ћелија се значајно повећао, док се проценат ИФН- + ЦД4−ЦД8+ Т ћелија значајно смањио од једног до два месеца старости. Треба напоменути да је свиња која је била позитивна на М. хиопнеумониае у доби од шест месеци са 7 М. хиопнеумониае организама/µЛ ДНК имала високе проценте ТНФ- + ЦД4+ЦД8− и ИЛ-17 А+ ЦД4−ЦД8+ Т ћелије у његовој крви. Остале свиње позитивне на М. хиопнеумониае у доби од шест месеци имале су сличне проценте Т ћелија које производе цитокине као код свиња негативних на М. хиопнеумониае.

Слика 5 Циркулишуће подгрупе Т ћелија које производе цитокине специфичне за Мицопласма хиопнеумониае у крви свиња на фарми Б. А

На свакој фарми МДА специфична за М. хиопнеумониае била је присутна у серуму 20 дводневних прасади, а одсутна је у серуму пет прасади, која потичу од крмача без серумских антитела специфичних за М. хиопнеумониае. Да би се испитало да ли је МДА имао утицаја на ћелијски посредовани имунитет изазван вакцином специфичну за М. хиопнеумониае, направљена је разлика између прасади са и без МДА, а разлике између две групе су испитиване за подгрупе Т ћелија за које су значајне уочене су разлике у производњи цитокина (Слике 6А-Е). На фарми Б, проценат ТНФ- + ЦД4+ЦД8+ Т ћелија је имао тенденцију да буде већи код једномесечних свиња са МДА, у поређењу са једномесечним свиње без МДА. За друге ЦД4+ЦД8+ Т ћелије које производе цитокине, просечни проценти су били слични између две групе свиња у доби од једног месеца, на свакој фарми. Временом је постојао тренд смањења просечних процената ЦД4+ЦД8+ Т ћелија које производе цитокине у крви свиња са само малим или никавим разликама у старости од шест месеци између свиња са и без МДА (слике 6А–Ц). Исто је примећено за ИФН- -производње ЦД8+ Т ћелија у крви свиња на фарми Б (Слика 6Д). У доби од једног и два месеца, просечан проценат ТНФ- + ЦД4+ЦД8− Т ћелија на фарми Б био је сличан за свиње са или без МДА, док је у доби од шест месеци већи проценат ТНФ- -производње ЦД4+ЦД8− Т ћелија је примећено у крви свиња без МДА (Слика 6Е).

бенефиције додатка цистанцхе-повећавају имунитет

Дискусија

Ово је прва студија која даје увид у дуготрајне имуне одговоре изазване вакцином против М. хиопнеумониае код свиња од рођења до клања у теренским условима. Хуморални имуни одговор у серуму, процењен помоћу ИДЕКСКС ЕЛИСА, изостао је након вакцинације, али су били присутни имуни одговори посредовани ћелијама. Пролиферација Т ћелија после ин витро стимулације М. хиопнеумониае примећена је до краја периода това. Штавише, у доби од месец дана, након вакцинације против М. хиопнеумониае, ЦД4+ЦД8+ Т ћелије које производе цитокине специфичне за М. хиопнеумониае, које укључују меморијске Т ћелије, биле су присутне, али су се смањивале са порастом старости . Чини се да мајчинска антитела нису утицала на хуморалне и ћелијски посредоване имуне одговоре изазване вакцином током живота свиње, осим присуства ТНФ- + ЦД4+ЦД8+ Т ћелија . Да бисмо проценили постојаност и разлике у имунолошком одговору код вакцинисаних прасади М. хиопнеумониае на нивоу фарме, укључили смо две комерцијалне фарме. Иако је претпостављена циркулација М. хиопнеумониае на обе фарме, испитиване свиње су остале негативне на М. хиопнеумониае током целог испитивања, осим четири свиње на фарми Б на крају испитивања, што нам је омогућило да истражимо постојаност вакцине изазване имуни одговори без утицаја природне инфекције. Четири М. хиопнеумониае ПЦР-позитивне свиње у доби од шест месеци на фарми Б нису имале већи ниво М. хиопнеумониае специфичних антитела у поређењу са ПЦР-негативним свињама. Осим једне свиње, они такође нису имали већи проценат Т ћелија које производе цитокине у крви након ин витро стимулације М. хиопнеумониае. Ово се може објаснити чињеницом да се инфекција М. хиопнеумониае вероватно догодила непосредно пре тренутка узорковања, што није дало имуном систему довољно времена да одговори на инфекцију [29–31]. Код три од четири свиње позитивне на М. хиопнеумониае, оптерећење патогеном у ТБС узорку је такође било прилично ниско.

Слика 6 Просечан проценат подгрупа Т ћелија специфичних за Мицопласма хиопнеумониае које производе цитокине према нивоима антитела добијених од мајке. АЦ

Нивои антитела у серуму код дводневних свиња одговарали су нивоима антитела специфичних за М. хиопнеумониае у серуму и колоструму крмача на прасењу, потврђујући пренос М. хиопнеумониае специфичног имунитета мајке преко колострума [22, 23]. Сероконверзија није примећена након вакцинације против М. хиопнеумониае у доби од 16 дана. Напротив, нивои антитела специфичних за М. хиопнеумониае опадали су током времена са свим животињама које су постале серонегативне у доби од два месеца. Познато је да комерцијална вакцина против М. хиопнеумониае коришћена у овој студији изазива ограничену сероконверзију након једне примене, што је такође примећено у претходним студијама [14, 32, 33]. У експерименталној студији вакцинације прасади око одбића, 40% животиња имало је сероконвертовање 3 недеље након вакцинације, док је у пољском испитивању само 3 од 40 свиња сероконвертовало 7 недеља након вакцинације [14, 32]. Међутим, присуство (или одсуство) серумских антитела специфичних за М. хиопнеумониае после вакцинације не одговара заштити (или њеном недостатку) од инфекције [14, 25, 34]. За заштиту домаћина од факултативних интрацелуларних и екстрацелуларних бактеријских патогена као што је М. хиопнеумониае, ЦД4+ЦД8− Т помоћне ћелије, углавном Т1 и Т17 ћелије, играју важну улогу. Т1 ћелије производе ИФН-, који активира макрофаге да убију патоген, док Т17 ћелије производе ИЛ-17А за јачање мукозне баријере [35–38]. Недавно се показало да се низак проценат ћелија М. хиопнеумониае може наћи и интрацелуларно, а имајући у виду кључну улогу ЦД4-ЦД8+ цитотоксичних Т ћелија у заштити домаћина од интрацелуларних патогена, ове цитотоксичне Т ћелије такође може бити важно за контролу инфекција М. хиопнеумониае [31, 35, 39]. Да би се истражила кинетика различитих фреквенција подскупа Т ћелија и способност ових Т ћелија да пролиферирају након ин витро стимулације М. хиопнеумониае, ПБМЦ су изоловани из прасади на обе фарме. Образац фреквенције подскупа Т ћелија био је сличан на ове две фарме. Према другим студијама, проценат ЦД4+ЦД8− Т ћелија је већи од процента ЦД4−ЦД8+ Т ћелија у млађем узрасту. Са повећањем старости, проценат ЦД4+ЦД8− Т ћелија опада, док се проценат ЦД4−ЦД8+ Т ћелија повећава што доводи до смањења односа ЦД4/ЦД8 током времена [40–42]. Прасад се рађају скоро без ЦД4+ЦД8+ Т ћелија. Ове ћелије се повећавају са годинама када свиње имају контакт са микроорганизмима, јер неке од ових ћелија имају функцију памћења специфичну за патоген [5, 22, 42–44]. Међутим, на фарми А, учесталост ЦД4+ЦД8+ Т ћелија је остала на истом нивоу од два месеца старости надаље. На фарми Б, дошло је до постепеног повећања до четвртог месеца старости, као што се очекивало, иако је проценат ЦД4+ЦД8+ Т ћелија поново опао након тога. Поређење подскупова Т ћелија са другим студијама остаје тешко јер ПБМЦ у овој студији нису мерени директно након узорковања крви, већ су прво инкубирани 20 сати пре мерења процента субпопулација Т ћелија. Пролиферација ЦД3+ Т ћелија специфична за Мицопласма хиопнеумониае је трајала до краја това, потврђујући присуство М. хио пнеумониае специфичних Т ћелија у крви свиња вакцинисаних у доби од 16 дана. Присуство М. хиопнеумониае специфичних пролиферирајућих Т ћелија може бити у корелацији са заштитом од ензоотске пнеумоније јер су претходна истраживања показала да је способност ПБМЦ-а да пролиферирају, након ин витро стимулације митогеном ЦонА, у корелацији са отпорношћу на болести код свиња [45]. ]. ЦД4−ЦД8− Т ћелије су биле главна подскупина Т ћелија која се размножавала на обе фарме, а затим ЦД4+ЦД8− Т ћелије са процентима који су флуктуирали током времена. Код свиња, већина ЦД4-ЦД8- Т ћелија носи инваријантне δ Т ћелијске рецепторе за разлику од Т ћелија специфичних за антиген [31, 42]. Након инфекције свиња другим патогенима као што је ПРРСВ, δ Т ћелије су такође биле главни пролиферативни одговор након виремије ПРСВ [46]. Те Т ћелије такође играју улогу у производњи неутрализујућих антитела након вакцинације свиња против класичне свињске куге [47]. Штавише, у течности за бронхоалвеоларну лаважу код свиња инфицираних Ацтинобациллус плеуропнеумониае, примећено је повећање ЦД8- δ Т ћелија [48]. Даља истраживања су неопходна да би се испитала улога δ Т ћелија у контроли и заштити од инфекција М. хиопнеумониае. У тестовима опозива, различите подгрупе Т ћелија су процењене на њихову производњу ТНФ-, ИФН- и ИЛ-17А. Са два месеца старости, проценат ТНФ- -, ИФН- - и ТНФ-/ИФН- -производе ЦД4+ЦД8+ Т ћелија је значајно смањен у поређењу са процентима у узрасту од једног месеца. Након тога, проценти су били променљиви, или су се даље смањивали или су остали стабилни током времена. Исти образац је примећен за Т ћелије које производе ИЛ{{91}А ЦД4+ЦД8+, иако није статистички значајно. Код назимица вакцинисаних против ПРРСВ-а, производња ИФН-а од стране ПБМЦ је такође примећена до 42 дана након прве вакцинације, али је смањена након тога до 147 дана након вакцинације [49]. Повећан број лимфоцита који луче ИФН након вакцинације против М. хио пнеумониае је раније демонстриран [9, 10].

Пустињски живи цистанцхетубулоса

Недавно су се акумулирали докази да полифункционалне Т ћелије, које производе више од једног цитокина, имају кључну улогу у заштити и уклањању патогена. На пример, код свиња инфицираних врстама Цхламидиа, полифункционалне ЦД4+ЦД8− Т ћелије су у корелацији са заштитом [50]. Вакцинација прасади против М. хио пнеумониае такође је повећала проценте полифункционалних ЦД4+ЦД8− и ЦД4−ЦД8+ Т ћелија [12]. У другој студији, вакцинација свиња против ПЦВ2 довела је до виших нивоа ТНФ- +/ИФН- + ЦД{{11}ЦД8+ Т ћелија 24 дана након вакцинације, поново опадајући пред крај студије 56 дана након вакцинације [51]. У нашој студији смо такође приметили да се присуство ЦД4+ЦД8+ Т ћелија које производе цитокине временом смањивало. Ова студија се фокусирала на лимфоците у циркулацији крви, али вакцинација такође индукује локалне имуне одговоре посредоване ћелијама специфичне за М. хиопнеумониае у плућима и бронхијалним лимфним чворовима [8]. Према томе, будућа истраживања имунитета изазваног вакцином специфичног за М. хио пнеумониае такође треба да се фокусирају на локалне имуне одговоре посредоване ћелијама. Штавише, за имунизацију прасади у овој студији је коришћена само једна комерцијална вакцина против М. хиопнеумониае. Имуни одговори могу да се разликују између вакцина јер су под утицајем формулације вакцине (адјуванса и антигена) и начина примене [16, 52, 53]. На пример, познато је да карбопол, помоћно средство у комерцијалној вакцини против М. хиопнеумониае која се користи, усмерава имуни одговор ка Т1 одговору [54]. На свакој фарми пет прасади је било М. хиопнеумониае серонегативно, ау серуму од 20 прасади М. хиопнеу мобиле специфична МДА. Без обзира на њихов МДА статус, све свиње су биле серонегативне на М. хиопнеумониае у доби од два месеца, а сероконверзија није примећена касније. Наши налази одговарају претходној студији у којој су седмодневна прасад са и без МДА вакцинисана против М. хиопнеумониае [25]. У обе групе, сероконверзија након вакцинације није примећена и све свиње су биле серонегативне 42 дана након вакцинације. С друге стране, други су открили да вакцинација против М. хиопнеумониае у присуству МДА доводи до виших нивоа антитела у поређењу са невакцинисаним прасадима, али што је већи титар МДА, то је нижи одговор [24, 26]. Иако се одговор антитела не примећује увек након вакцинације против М. хиопнеумониае, индукују се имуни одговори посредовани ћелијама специфичним за М. хиопнеумониае [26]. Није примећена разлика у пролиферацији ПБМЦ изолованих од свиња вакцинисаних против М. хиопнеумониае, без обзира на нивое МДА [26]. У нашој студији, у оквиру сваке фарме, нису примећене разлике у Т ћелијама које производе цитокине између вакцинисаних свиња са М. хиопнеумониае са и без МДА у доби од месец дана. Само на фарми Б, прасад са МДА обично има већи проценат ТНФ- + ЦД{{48}ЦД8+ Т ћелија у узрасту од једног месеца у поређењу са прасадима без МДА. Релевантност ових налаза треба даље истражити у студији која укључује већу и једнаку количину прасади са и без М. хиопнеумониае специфичног МДА. Десет такође треба извршити статистичку анализу јер то није урађено у овој студији због малог и неједнаког броја животиња у групи без и са МДА. У закључку, ова студија је показала да, иако је изостала сероконверзија након вакцинације прасади против М. хиопнеумониае, откривени су имуни одговори посредовани ћелијама специфичним за М. хиопнеумониае. ЦД4+ЦД8+ Т ћелије које производе полифункционалне цитокине биле су присутне до три месеца старости, а пролиферирајуће Т ћелије су примећене до краја периода това, што указује на присуство ћелијски посредованог имунитета специфичног за патоген код вакцинисаних свиња против М. хиопнеумониае. Резултати чине основу за даља истраживања која процењују утицај природне инфекције М. хиопнеумониае на имунитет изазван вакцином у теренским условима.

Референце

1. Пиетерс М, Маес Д (2019) Мицопласмосис. У: Зиммерманн ЈЈ, Каррикер ЛА, Рамирез А, Сцхвартз КЈ, Стевенсон ГВ, Зханг Ј (ур.) Болести свиња, 11. изд. Вилеи, Њујорк

2. Рицрофт А (2020) Опште карактеристике и класификација врста микоплазме свиња. У: Маес Д, Сибила М, Пиетерс М (ур.) Мицопласмас ин Свине. Аццо, стр. 26–46

3. Маес Д, Сегалес Ј, Меинс Т, Сибила М, Пиетерс М, Хаесеброуцк Ф (2008) Контрола инфекција Мицопласма хиопнеумониае код свиња. Вет Мицробиол 126: 297–309

4. Гарза-Морено Л, Сегалес Ј, Пиетерс М, Ромагоса А, Сибила М (2018) Стратегије аклиматизације код назимица за контролу инфекције Мицопласма хиопнеумониае. Вет Мицробиол 219:23–29 5. Саалмуллер А, Вернер Т, Фацхингер В (2002) Т-помоћне ћелије од наивних до преданих. Вет Иммунол Иммунопатхол 87:137–145

6. Руиз АР, Утрера В, Пијоан Ц (2003) Ефекат вакцинације крмача Мицопласма хиопнеумониае на колонизацију прасади при одбијању. Ј Свине Хеалтх Прод 11:131–135

7. Сибила М, Бернал Р, Торрентс Д, Риера П, Ллопарт Д, Цалсамиглиа М, Сегалес Ј (2008) Ефекат вакцинације крмача против Мицопласма хиопнеумониае на колонизацију крмача и прасади и сероконверзију, и лезије плућа свиња при клању. Вет Мицробиол 127: 165–170

8. Марцхиоро СБ, Маес Д, Флахоу Б, Пасманс Ф, Дел Позо Сацристан Р, Вранцкк К, Мелкебеек В, Цок Е, Вуитс Н, Хаесеброуцк Ф (2013) Локални и системски имуни одговори код свиња интрамускуларно убризганих инактивираним микоплама инактивираним микоплама. вакцина. Ваццине 31: 1305–1311

9. Мартелли П, Салери Р, Цавалли В, Де Ангелис Е, Феррари Л, Бенетти М, Феррарини Г, Мериалди Г, Боргхетти П (2014) Системски и локални имуни одговор код свиња интрадермално и интрамускуларно убризганим инактивираном Мицопласма хиопнеумониае . Вет Мицробиол 168:357–364

10. Тхацкер ЕЛ, Тхацкер БЈ, Кухн М, Хавкинс ПА, Ватерс ВР (2000) Евалуација локалних и системских имуних одговора индукованих интрамускуларном ињекцијом бактерије Мицопласма хиопнеумониае свињама. Ам Ј Вет Рес 61:1384–1389

11. Сео ХВ, Хан К, Ох И, Парк Ц, Цхоо ЕЈ, Ким СХ, Лее БХ, Цхае Ц (2013) Поређење имунитета посредованог ћелијама изазваног са три комерцијалне једнодозне бактерије Мицопласма хиопнеумониае код свиња. Ј Вет Мед Сци 75:245–247

12. Маттхијс АМФ, Аураи Г, Јакоб В, Гарциа-Ницолас О, Браун РО, Келер И, Бруггман Р, Девриендт Б, Боиен Ф, Гузман ЦА, Мицхиелс А, Хаесеброуцк Ф, Цоллин Н, Барниер-Куер Ц, Маес Д , Суммерфиелд А (2019) Системска ему неологија карактеризација нових формулација вакцине за бактерије Мицопласма хиопнеумониае. Фронт Иммунол 10:1087

13. Вилларреал И, Меинс Т, Девулф Ј, Вранцкк К, Цалус Д, Пасманс Ф, Хаесеб-роуцк Ф, Маес Д (2011) Ефекат вакцинације на преношење Мицопласма хиопнеумониае код свиња под условима на терену. Вет Ј 188:48–52

14. Арсенакис И, Панзаволта Л, Мицхиелс А, Дел Позо Сацристан Р, Боиен Ф, Хаесеброуцк Ф, Маес Д (2016) Ефикасност вакцинације против Мицопласма хиопнеумониае пре и при одбијању од експерименталне инфекције код свиња. БМЦ Вет Рес 12:63

15. Парк Ц, Јеонг Ј, Цхои К, Цхае Ц (2016) Ефикасност нове бивалентне вакцине за цирковирус свиња типа 2 и Мицопласма хиопнеумониае (Фостера™ ПЦВ МХ) у експерименталним условима. Ваццине 34:270-275

16. Маттхијс АМФ, Аураи Г, Боиен Ф, Сцхоос А, Мицхиелс А, Гарциа-Ницолас О, Барут ГТ, Барниер-Куер Ц, Јакоб В, Цоллин Н, Девриендт Б, Суммерфиелд А, Хаесеброуцк Ф, Маес Д (2019) Ефикасност три иновативне бактеринске вакцине против експерименталне инфекције са Мицопласма хиопнеумониае. Вет Рес 50:91

17. Реинолдс СЦ, Ст Аубин ЛБ, Саббадини ЛГ, Кула Ј, Вогелаар Ј, Руннелс П, Петерс АР (2009) Смањене лезије плућа код свиња изазваних 25 недеља након примене појединачне дозе вакцине против Мицопласма хиопнеумо ниае на отприлике 1 недељу старости. Вет Ј. 181:312–320

18. Вилсон С, Ван Бруссел Л, Саундерс Г, Таилор Л, Зиммерманн Л, Хеинритзи К, Ритзманн М, Банхолзер Е, Еддицкс М (2012) Вакцинација прасади у доби од 1 недеље са инактивираном вакцином против Мицопласма хиопнеумониае и смањује број плућних болести побољшивачи просечно дневно повећање телесне тежине. Вакцина 30: 7625–7629

19. Дел Позо Сацристан Р, Сиеренс А, Марцхиоро СБ, Вангроенвегхе Ф, Јоуркуин Ј, Лабаркуе, Хаесеброуцк Ф, Маес Д (2014) Ефикасност ране вакцинације Мицопласма хиопнеумониае против мешовите респираторне болести код старијих товљеника. Вет Рец 174:197

20. Цвјетковић В, Сипос С, Сзабо И, Сипос В (2018) Клиничка ефикасност две стратегије вакцинације против Мицопласма хиопнеумониае у крду свиња које болује од респираторне болести. Порц Хеалтх Манаг 4:19

21. Гарза-Морено Л, Сегалес Ј, Пиетерс М, Ромагоса А, Сибила М (2017) Истраживање о праксама аклиматизације позлаће Мицопласма хиопнеумониае у Европи. Порц Хеалтх Манаг 3:21

22. Биебаут Е, Беуцкелаере Л, Боиен Ф, Хаесеброуцк Ф, Гомез-Дуран ЦО, Девриендт Б, Маес Д (2021) Трансфер оф Мицопласма хиопнеумониае специфичног ћелијског имунитета на неонаталну прасад. Вет Рес 52:96

23. Бандрицк М, Ариза-Нието Ц, Баидоо СК, Молитор ТВ (2014) Колострални имунитет посредован антителима и ћелијски посредовани имунитет доприноси урођеном и антиген-специфичном имунитету код прасади. Дев Цомп Иммунол 43:114–120

24. Ходгинс ДЦ, Схевен ПЕ, Девеи ЦЕ (2004) Утицај старости и мајчиних антитела на одговор антитела новорођених прасади вакцинисаних против Мицопласма хиопнеумониае. Ј Свине Хеалтх Прод 12:10–16

25. Мартелли П, Террени М, Гуаззетти С, Цавирани С (2006) Одговор антитела на инфекцију Мицопласма хиопнеумониае код вакцинисаних свиња са или без мајчинских антитела изазваних вакцинацијом крмача. Ј Вет Мед. 53:229–233

26. Бандрицк М, Тхеис К, Молитор ТВ (2014) Имунитет мајке повећава имунолошки одговор прасади изазван вакцинацијом против Мицопласма хиопнеумониае. БМЦ Вет Рес 10:124

27. Беуцкелаере Л, Хаспеслагх М, Биебаут Е, Боиен Ф, Хаесеброуцк Ф, Крејци Р, Меиер Е, Глееруп Д, Де Спиегелаере В, Девриендт Б, Маес Д (2022) Два различита локална, урођена и адаптивна имунолошка одговора изазивају два одговора комерцијалне бактерије Мицопласма хиопнеумониае и само помоћно средство. Фронт Иммунол 13:1015525

28. Гернер В, Маир КХ, Сцхмидт С (2022) Локална и системска имуно-ћелија Т у борби против вирусних и бактеријских инфекција свиња. Анну Рев Аним Биосци 10:349–372

29. Цалсамиглиа М, Пијоан Ц, Босцх ГЈ (1999) Профилисање Мицопласма хипопнеа мобиле на фармама коришћењем серологије и угнежђене ПЦР технике. Ј Свине Хеалтх Прод 7:263–268

30. Пиетерс М, Даниелс Ј, Ровира А (2017) Поређење типова узорака и дијагностичких метода за ин виво детекцију Мицопласма хиопнеумониае током раних стадијума инфекције. Вет Мицробиол 203: 103–109

31. Тизард ИР (2018) Ветеринарска имунологија, 10. изд. Елсевиер, Ст. Лоуис, Миссоури

32. Арсенакис И, Мицхиелс А, Дел Позо Сацристан Р, Боиен Ф, Хаесеброуцк Ф, Маес Д (2017) Вакцинација против Мицопласма хиопнеумониае на или непосредно пре одбијања у теренским условима: рандомизовано испитивање ефикасности. Вет Рец 181:19

33. Бетлацх АМ, Фано Е, Вандерваал К, Пиетерс М (2021) Ефекат вишеструких вакцинација на преношење и степен инфекције Мицопласма хиопнеумониае код назимица. Ваццине 39:767–774

34. Мартинез-Боикадерас Н, Гарза-Морено Л, Сибила М, Сегалес Ј (2022) Утицај мајчинског имунитета на имуне одговоре изазване раном вакцинацијом прасади против најчешћих патогена укључених у комплекс респираторних болести свиња. Порц Хеалтх Манаг 8:11

35. Сцхродер К, Хертзог ПЈ, Раваси Т, Хуме ДА (2004) Интерферон-: преглед сигнала, механизама и функција. Ј Леукоц Биол 75:163–189

36. Доббс НА, Одех АН, Сун Кс, Симецка ЈВ (2009) Вишеструка улога имунитета посредованог Т ћелијама у патогенези и отпорности на респираторну болест Мицопласма. Цурр Трендс Иммунол 10:1–19

37. Ге И, Хуанг М, Иао И (2020) Биологија интерлеукина-17 и његов патофизиолошки значај у сепси. Фронт Иммунол 11:1558

38. Суммерфелд А (2020) Имуни одговори против инфекција микоплазмом свиња. У: Маес Д, Сибила М, Пиетерс М (ур.) Мицопласмас ин Свине. Аццо, стр. 110–125

39. Раимонд ББА, Турнбулл Л, Јенкинс Ц, Мадхкоор Р, Сцхлеицхер И, Упхоф ЦЦ, Вхитцхурцх ЦБ, Рохде М, Дјордјевиц СП (2018) Мицопласма хиопнеумониае се налази интрацелуларно у епителним ћелијама свиња. Сци Реп 8:17697

40. Боргхетти П, Де Ангелис Е, Салери Р, Цавалли В, Цаццхиоли А, Цорради А, Моццхегиани Е, Мартелли П (2006) Промене периферних Т лимфоцита код новорођених прасади: однос са хормоном раста (ГХ), пролактином (ПРЛ) и промене кортизола. Вет Иммунол Иммунопатхол 110:17–25

41. Бровн ДЦ, Маквелл ЦВ, Ерф ГФ, Давис МЕ, Сингх С, Јохнсон ЗБ (2006) Онтогени оф Т лимфоцита и интестиналне морфолошке карактеристике у новорођенчади свиња у различитим годинама у постнаталном периоду. Ј Аним Сци 84:567–578

42. Степанова Х, Саманкова П, Лева Л, Синкора Ј, Фалдина М (2007) Рани постнатални развој имуног система код прасади: редистрибуција подскупина Т лимфоцита. Целл Иммунол 249:73-79

43. Хернандез Ј, Гарфас И, Нието А, Мерцадо Ц, Монтано ЛФ, Зентено Е (2001) Упоредна процена ЦД4 + ЦД8 + и ЦД4 + ЦД{{5} } лимфоцити у имунолошком одговору на свињски рубулавирус. Вет Иммунол Иммунопатхол 79: 249–259

44. Бланц Ф, Превост-Блондел А, Питон Г, Боугуион Е, Леплат Ј, Адреолетти Ф, Егиди Г, Боурнеуф Е, Бертхо Н, Винцент-Науллеау С (2020) Састав циркулирајућих леукоцита варира у зависности од старости и појаве меланома у МеЛиМ биомедицински модел свиња. Фронт Иммунол 11:291

45. Јеон РЛ, Гилберт Ц, Цхенг Ј, Путз АМ, Дицк МК, Пластов ГС, Фортин Ф, Цанада П, Деккерс ЈЦ, Хардинг ЈЦС (2021) Пролиферација мононуклеарних ћелија периферне крви из здравих прасади након стимулације митогеном као индикатори болести еластичност. Ј Аним Сци 99: скаб084

46. ​​Кицк АР, Амарал АФ, Цортес ЛМ, Фогле ЈЕ, Црисци Е, Алмонд ГВ, Касер Т (2019) Одговор Т-ћелија на вирус репродуктивног и респираторног синдрома свиња типа 2 (ПРРСВ). Вируси 11:796

47. Петерсен Б, Каммерер Р, Френзел А, Хассел П, Дау ТХ, Бецкер Р, Бреитхаупт А, Улрицх РГ, Луцас-Хахн А, Меиерс Г (2021) Генерација и прва карактеризација ТРДЦ-нокаут свиња без δТ ћелија. Сци Реп 11:14965

48. Фалдина М, Нецхваталова К, Синкора Ј, Кнотигова П, Лева Л, Крејци Ј, Томан М (2005) Експериментална инфекција Ацтинобациллус плеуропнеумониае код прасади са различитим типовима и нивоима специфичне заштите: имуно-генотипска анализа субсетне лимфоците циркулацију и лимфоидно ткиво респираторне слузокоже. Вет Иммунол Иммунопатхол 107: 143–152

49. Санцхез-Матаморос А, Цампродон А, Малдонадо Ј, Педразуела Р, Миранда Ј (2019) Безбедност и дуготрајни имунитет комбиноване примене модификоване вакцине са живим вирусом против вируса репродуктивног и респираторног синдрома свиња 1 и инактивиране вакцине против свињског парвовируса и Ерисипелотхрик рхусиопатхиае код приплодних назимица. Порц Хеалтх Манаг 5:11

50. Касер Т, Пастернак ЈА, Делгадо-Ортега М, Хамониц Г, Лаи К, Ерицксон Ј, Валкер С, Диллон ЈР, Гердтс В, Меаренс Ф (2017) Цхламидиа суис и Цхламидиа трацхоматис индукују мултифункционалне ЦД4 Т ћелије код свиња. Вакцина 35:91–100

51. Коиниг ХЦ, Талкер СЦ, Стадлер М, Ладиниг А, Грааге Р, Ритзманн М, Хенниг Паука И, Гернер В, Салмуллер А (2015) Вакцинација против ПЦВ2 индукује Т ћелије које копродуцирају ИФН-/ТНФ са потенцијалном улогом у заштите. Вет Рес 46:20

52. Ксионг К, Веи И, Ксие Х, Фенг З, Ган И, Ванг Ц, Лиу М, Баи Ф, Ксие Ф, Схао Г (2014) Ефекат различитих формулација адјуванса на имуногеност и заштитни ефекат живе Мицопласма хиопнеумониае вакцина након интрамускуларне инокулације. Ваццине 32:3445–3451

53. Маес Д, Боиен Ф, Девриендт Б, Кухнерт П, Суммерфиелд А, Хаесеброуцк Ф (2021) Перспецтивес фор импровемент оф Мицопласма хиопнеумониае вацциес ин свиња. Вет Рес 52:67

54. Гартлан КХ, Красхиас Г, Вегманн Ф, Хиллсон ВР, Сцхерер ЕМ, Греенберг ПД, Еисенбартх СЦ, Могхаддам АЕ, Саттентау КЈ (2016) Стерилна инфламација индукована Царбополом изазива снажне адаптивне имуне одговоре мологених апсцеса у облику абсенце . Ваццине 34: 2188–2196