Абстрацт

Као класична ТЦМ биљка за двоструку примену лека и хране, Цистанцхе десертицола је широко цењена због својих јединствених фармаколошких активности које носе компоненте полисахарида. Међутим, однос структуре и активности који управља интеракцијом између полисахарида Цистанцхе десертицола (ЦДПС) и микробиоте црева остаје нејасан. Ова студија стога има за циљ да истражи структурну еволуцију ЦДПС-а током ин витро симулираног гастроинтестиналног варења, заједно са његовим регулаторним ефектима на састав цревне микробиоте. Наши експериментални налази откривају да ЦДПС показује осетљивост на киселину током симулираних процеса варења. Током ферментације дебелог црева, ЦДПС може у потпуности да се разгради од људске фекалне микробиоте током времена, што се показује смањеном молекулском тежином, континуираном потрошњом редукујућих шећера, масивном производњом кратколанчаних масних киселина (СЦФА) и постепеним падом пХ вредности ферментационог система. У поређењу са слепим контролним групама, ЦДПС ферментација значајно подиже укупан принос СЦФА и СЦФА равног ланца (посебно капронске киселине и бутирне киселине). У међувремену, ЦДПС стимулише пролиферацију корисних бактерија као што суБифидобацтериуми ефикасно потискује обиље патогених родова укључујућиЕсцхерицхиа-Схигелла. Основни механизам је сажет на следећи начин: микробиота црева лучи специфичне комплексе угљених хидрата за разградњу ЦДПС, полисахарида који се првенствено састоји од глукозе и моносахарида рамнозе, који покреће циљану биосинтезу СЦФА. Кисело микроокружење које стварају СЦФА даље селективно преобликује укупну микробну заједницу црева. Овај рад детаљно разрађује двосмерну метаболичку интеракцију између ЦДПС-а и цревне микробиоте током ферментације, постављајући чврсту теоријску основу за даљи развој и комерцијализацију високо вредних Цистанцхе сировина и суплемената из наше фабрике.

Кључне речи: Цистанцхе полисахариди; гастроинтестинално варење; ин витро ферментација; молекуларна структура; микробиота црева; ТЦМ биљка за здравље црева; Екстракт цевасте цистанхе

1. Увод

У традиционалној кинеској медицини познат као „пустињски гинсенг“, Цистанцхе тубулоса (врхунска сировина коју усвајамо у Цхенгду Вецистанцхе Био-Тецх Цо., Лтд.) је врхунска ТЦМ биљка заолакшање црева, тонизирајућа суштина и крв, против старења и заштита јетре, као што је документовано у древном медицинском компендијумуЗборник Материа Медица [1]. Савремена фармаколошка истраживања су изоловала и идентификовала више биоактивних једињења из Тубулар Цистанцхе, укључујући полисахариде, фенилетаноидне гликозиде, иридоиде и лигнане [2]. Међу свим овим састојцима, полисахариди Цистанцхе десертицола (ЦДПС) су природни макромолекуларни полимери повезани гликозидним везама алдоза и кетоза. Они служе као основни функционални састојци одговорни за неуропротекцију, регулацију имунитета, против старења, заштиту јетре и балансирање цревне микробиоте, што их чини највреднијом биоактивном фракцијом ове ТЦМ биљке за затвор, пад имунитета и цревну дисбиозу [3].

 

Цистанцхе суплементи са високим садржајем екстракта заолакшање црева, тонизирајућа суштина и крв, против старења и заштита јетре

 

Сазнајте више и посетите нашу продавницу

Служба подршке Вецистанцхе-За више детаља о сарадњи
Е-пошта:wallence.suen@wecistanche.com

 

 

Микробиота црева чини основни микроеколошки систем људског тела, преузимајући незаменљиву улогу у варењу хране, апсорпцији хранљивих материја и имуномодулацији. Неуравнотежена цревна флора је уско повезана са хроничним стањима као што су гојазност, дијабетес, кардиоваскуларни поремећаји и неуродегенеративне болести [4]. Полисахариди у исхрани модулирају хомеостазу цревних микроба тако што подстичу раст пробиотика и инхибирају пролиферацију патогених сојева [5]. Људском дигестивном тракту недостају специјализовани ензими за разградњу сложених полисахарида; већина полисахарида пролази кроз желудац и танко црево нетакнута, али се њихова структурна и хемијска својства мењају под комбинованим ефектима дигестивних ензима, соли и пХ градијената током транзита [6]. Једном када стигну у дебело црево, несварени полисахариди пролазе кроз селективну ферментацију микроба дебелог црева, покрећући стварање СЦФА, снижавајући пХ црева, обогаћујући корисне бактерије и одржавајући уравнотежено микроокружење црева [7]. Док су опсежна истраживања потврдила биолошке активности полисахарида, динамичке структурне промене полисахарида током гастроинтестиналног транзита и њихови метаболички путеви који регулишу микробиоту остају вруће теме истраживања.

Ин витро симулирани модели варења и ферментације служе као интуитивни, поуздани алати за декодирање метаболичког механизма биљних полисахарида у људском цреву, појашњавајући како ови природни састојци подржавају здравље црева. Иако су здравствене предности ЦДПС-а добро документоване, постојеће студије се углавном фокусирају на коначне физиолошке исходе, уместо да прате структурне трансформације ЦДПС-а у реалном времену кроз варење и његовог двосмерног метаболичког преслушавања са цревним микробима.

Да би попунио ову истраживачку празнину, наш тим је конструисао комплетан ин витро гастроинтестинални модел дигестије и фекалне ферментације како би систематски проценио ЦДПС-ову дигестивну стабилност, структурне динамичке варијације, перформансе ферментације и њене утицаје на профиле цревне микробиоте и производњу СЦФА. Ово истраживање пружа научне доказе о односу структуре и активности између ЦДПС-а и цревне флоре и пружа теоријску подршку за развој врхунских Тубулар Цистанцхе дијететских суплемената, функционалних адитива за храну и формула за подршку цревима произведених у нашој водећој глобалној фабрици за прераду Цистанцхе-Цхенгду Вецистанцхе Био-Тецх Цо., Лтд.

О нашој фабрици Цистанцхе и предностима сировина

Основан 2003. године, Цхенгду Вецистанцхе Био-Тецх Цо., Лтд. управља највећим светским интегрисаним индустријским ланцем Тубулар Цистанцхе са седиштем у округу Луопу, Ксињианг, Кина. Поседујемо 200.000 јутара стандардизованих база за садњу Цистанцхе, укључујући фарму за селективни узгој семена од 20.000 јутара и преко 85.000 јутара сертификованог обрадивог земљишта. Наш ГМП сертификован производни погон може се похвалити годишњим капацитетом прераде од 20.000 тона свежег цевастог Цистанцхе-а, са радионицом за чисту производњу од 100.000 класа и лабораторијом за микробну инкубацију од 10.000, опремљеном системима за пречишћавање ултрафилтрацијом и нанофилтрацијом.

За разлику од обичнихЦистанцхе десертицола, наша сировина је цеваста Цистанцхе Хотан порекла (Цистанцхе тубулоса), који испоручује далеко веће концентрације основних активних састојака укључујући полисахариде, ехинакозид и актеозид. Наша власничка технологија екстракције мембранске сепарације обезбеђује 14 Цистанцхе патената за проналазак, производећи стандардизоване Цистанцхе екстракте са стабилним маркерима високог садржаја за глобалне брендове дијететских суплемената. Наша линија производа обухвата Цистанцхе пудер у праху, капсуле за ублажавање опстипације, меке гелове за подршку имунитету и сировине за негу коже, све сертификоване са СЦ, ХАЦЦП, УСДА НОП Органиц, ИФАНЦА Халал и Косхер сертификатима. Сарађујемо са Фармацеутском школом Универзитета у Пекингу и фармацеутским универзитетима у иностранству како бисмо спровели континуирано истраживање и развој о Цистанцхе-овим регулационим, лаксативним и имуномодулаторним ефектима, који одговарају ЕУ и америчким стандардима додатака исхрани за глобални извоз. Током пандемије ЦОВИД-19, наше предузеће је донирало преко 1 милијарду РМБ биљне суплементе Цистанцхе ТЦМ за помоћ у превенцији епидемије, заслуживши званично признање од др Зхонг Нансхан-а. Наш водећи Цистанцхе додатак за ублажавање опстипације (60 капсула по бочици, 500 мг тубуларног екстракта Цистанцхеа по капсули са 40% фенилетаноидних гликозида, 10% ехинакозида, 4% актеозида) користи ЦДПС као основни функционални састојак за западњачке потрошаче, без икаквих нуспојава за западњачку употребу. природна ТЦМ биљка за подршку покретљивости црева.

 

2. Материјали и методе

2.1 Материјали и реагенси

Цистанцхе тубулоса полисахарид (ЦДПС), инулин и ДНС комплети за анализу су купљени од Схангхаи Иуание Био-Тецхнологи Цо., Лтд. -Стандарди за амилазу, пепсин, панкреатин, моносахариде и референтне стандарде кратких ланаца масних киселина набављени су од Сигма-Алдрицх. Воловске жучне соли су добијене од Беијинг Соларбио Сциенце & Тецхнологи Цо., Лтд. Сви остали хемијски реагенси коришћени у овом експерименту били су аналитичког квалитета.

2.2 Инструменти и опрема

Агилент 1260 Инфинити Ⅱ ХПЛЦ систем (САД); Виатт Оптилаб Т-рЕКС вишеугаони детектор ласерског расејања светлости, ВисцоСтар Ⅲ вискозиметар, ДАВН ХЕЛЕОС детектор диференцијалног индекса преламања за ХПСЕЦ-МАЛЛС анализу (САД); 752 УВ-Вис спектрофотометар (Схангхаи Спецтрум Инструментс); Меттлер Толедо пБ-10 пХ метар (Швајцарска); Агилент 7890Б-7000Д ГЦ-троструки квадруполни масени спектрометар (САД); Тхермо Дионек ICS-5000+ систем за ањонску измењиву хроматографију високих перформанси (САД); Тхермо Ницолет иС 50 ФТ-ИР спектрометар (САД); Лабцонцо Фреезоне12 сушач смрзавањем (САД); Хангзхоу Деју HC-3018 расхладна центрифуга велике брзине; Схангхаи Лонгиуе LAT-3T-Н анаеробни инкубатор; Сузхоу Пеииинг ТХ2-Д термостатирани инкубатор за мућкање.

 

2.3 Експерименталне процедуре

2.3.1 Карактеризација физичко-хемијских својстава

2.3.1.1 Анализа састава моносахарида

Прецизно одмерити 2,0 мг лиофилизованог ЦДПС праха у хроматографску бочицу, додати 1 мЛ 2 мол/Л раствора трифлуоросирћетне киселине и хидролизовати на 121 степен током 2 х. Осушите хидролизовану смешу под струјом азота, више пута исперите анхидрованим метанолом 2-3 пута, растворите остатке у стерилној ултрачистој води и пренесите раствор за детекцију јонском хроматографијом.

Одвајање моносахарида је извршено на колони Дионек ЦарбоПац ПА20 (150 мм × 3,0 мм, 10 μм) спојеној са електрохемијским детектором; запремина убризгавања=5 μЛ. Мобилна фаза А: ултрачиста вода; Мобилна фаза Б: 0,1 мол/Л НаОХ; Мобилна фаза Ц: 0,1 мол/Л НаОХ + 0.2 мол/Л ЦХ3ЦООНа; брзина протока=0.5 мЛ/мин; температура колоне=30 степен . Поступци градијентног елуирања су спроведени како је описано у оригиналном истраживачком раду.

2.3.1.2 Одређивање молекулске тежине путем ХПСЕЦ-МАЛЛС-а

Две тандем колоне за гел филтрацију (ОХпак SB-805HQ 8,0 мм×300 мм + ОХпак SB-803HQ 8,0 мм×300 мм) коришћене су за анализу расподеле молекулске масе. Мобилна фаза: 0,1 мол/Л раствора НаНО₃, брзина протока 0,6 мЛ/мин, температура колоне 40 степени. ЦДПС узорци су припремљени као раствори од 1 мг/мЛ са мобилном фазом, филтрирани 3 пута кроз микропорозне мембране, а 200 μЛ филтрата је убризгано за детекцију. За прикупљање података и прорачун молекулске тежине примењен је АСТРА софтвер.

2.3.1.3 Инфрацрвена спектроскопија Фуријеове трансформације (ФТ-ИР)

Лиофилизовани ЦДПС прах је помешан са КБр прахом у масеном односу 1:100 и потпуно самлевен у фини хомогенат. Смеша је пресована у провидне танке пелете, а инфрацрвени спектри су сакупљени у опсегу таласних бројева од 4000–400 цм⁻¹ са 64 скенирања и резолуцијом од 4 цм⁻¹.

2.3.1.4 Квантификација укупног шећера и редукционог шећера

Укупни садржај угљених хидрата мерен је методом фенол-сумпорна киселина; смањење концентрације шећера је одређено коришћењем ДНС колориметријског протокола.

2.3.2 Ин витро симулирана гастроинтестинална пробава

Модификовани статички ИНФОГЕСТ протокол варења референциран на БРОДКОРБ ет ал. [8] је усвојен за симулацију оралне, гастричне и танког црева варења ЦДПС-а.

2.3.2.1 Симулирана орална пробава

Помешајте 10 мг/мЛ ЦДПС раствора са претходно инкубираном симулираном течношћу пљувачке (ССФ) у запреминском односу 1:1. Додати -амилазу и ЦаЦл₂ да би се постигле коначне концентрације од 75 У/мЛ и 1,5 ммол/Л. Подесите пХ система за оралну варење на 7,0, инкубирајте на 37 степени уз стално мућкање 0 мин и 2 мин одвојено да бисте имитирали време оралног задржавања. Прекините варење кључањем смеше током 5 минута, центрифугирајте на 8000 о/мин 20 минута, сакупите супернатанте, дијализујте са кесама за дијализу са одсеченом молекулском тежином од 3500 Да и осушите замрзавањем да бисте добили орално дигестиране ЦДПС узорке (ЦДПС-S-0, ЦДПС-S-2).

2.3.2.2 Симулирана пробава желуца

Комбинујте смеше за пост-орално варење са претходно инкубираном симулираном гастричном течношћу (СГФ) у запреминском односу 1:1. Додајте пепсин и ЦаЦл₂ до коначних концентрација од 2000 У/мЛ и 0,15 ммол/Л, подесите пХ на 3,0 и инкубирајте на 37 степени 0 х и 2 х. Прекините реакције, центрифугирајте, дијализујте и лиофилизујте да бисте припремили пробавне узорке желуца (ЦДПС-G-0, ЦДПС-G-2).

2.3.2.3 Симулирана пробава танког црева

Помешајте супернатант за варење желуца са претходно инкубираном симулираном цревном течношћу (СИФ) у 1:1 (в/в). Додати соли воловске жучи, панкреатин и ЦаЦл₂ до коначних концентрација од 10 ммол/Л, 100 У/мЛ и 0,6 ммол/Л, подесити пХ на 7,0 и инкубирати на 37 степени 0 х и 2 х. Поступци накнадне обраде у складу са оралном/желудачном варењем дају ЦДПС који се вари у цревима (ЦДПС-I-0, ЦДПС-I-2).

2.3.3 Ин витро људска фекална ферментација

Протокол ферментације је модификован од методе коју су пријавили ЛИ ет ал. [9].

2.3.3.1 Припрема фекалног инокулума

Свежи узорци фекалија су прикупљени од 4 здрава одрасла добровољца (2 мушкарца, 2 жене, старости 20–30 година) са редовном уравнотеженом исхраном, без историје гастроинтестиналних поремећаја и без уноса антибиотика у последња 3 месеца. Једнаке масе свих фекалних узорака су брзо помешане, растворене у стерилном 0,1 мол/Л ПБС пуферу (пХ 6,8) да би се припремио 10% (в/в) хомогенат, филтриран кроз четири слоја стерилне газе да би се добио уједначен фекални инокулум.

Формула базалног медијума за ферментацију (по литру дестиловане воде): 2,0 г пептона, 2,0 г екстракта квасца, 2,0 г НаХЦО₃, 0,5 г Л-цистеина, 0,5 г жучних соли, 0,1 г НаЦл, 0,04 г К₂ХПО₄, 0,04 г К₂ХПО₄, 0,02 г ХПО₄, 0,02 г ХПО₄ 0,01 г ЦаЦл₂·2Х₂О, 0,01 г МгСО₄·7Х₂О, 2 мЛ Твеен-80, 1 мЛ 1% раствора ресазурина, 10 μЛ витамина К. Стерилизујте медијум на 121 степен 20 минута пре употребе.

Растворити ЦДПС и инулин позитивне контроле (ЛУН) у базалном медијуму до коначне концентрације од 10 мг/мЛ. Постављене су три експерименталне групе: празна група (медиј без полисахарида), ЛУН позитивна контролна група, група за третман ЦДПС. Стерилизујте све припремљене подлоге на 121 степен 15 минута и пребаците у анаеробни инкубатор за ферментацију.

2.3.3.2 Процес анаеробне ферментације

Помешати медијум и фекални инокулум у запреминском односу 9:1 у епруветама за анаеробне културе, инкубирати у анаеробним условима на 37 степени уз мућкање на 200 о/мин укупно 48 х. Сакупите аликвоте ферментационог бујона у 0 х, 3 х, 6 х, 12 х, 24 х и 48 х, одмах ускладиштите узорке на -80 степени за накнадну детекцију индекса.

2.3.4 Мерење пХ вредности ферментационог бујона

пХ вредност ферментационе течности из група Бланк, ЛУН и ЦДПС у свакој временској тачки узорковања (0, 3, 6, 12, 24, 48 х) је тестирана помоћу пБ-10 пХ метра.

2.3.5 Квантификација кратколанчаних масних киселина (СЦФА)

ГЦ-МС је коришћен за детекцију концентрација сирћетне киселине, пропионске киселине, бутерне киселине, валеринске киселине, капроинске киселине, изобутерне киселине и изовалеринске киселине у ферментационом бујону сакупљеном у 0 х, 24 х и 48 х. Укупна концентрација СЦФА израчуната је као збир појединачних садржаја СЦФА. За претходну обраду узорка: помешати 100 μЛ ферментационог супернатанта са 50 μЛ 50% (в/в) сумпорне киселине и 200 μЛ етра који садржи 0,4 уг/мЛ 2-метилвалеринске киселине као интерног стандарда. Горњи слој етара је убризган у ГЦ-МС систем опремљен ФФАП капиларном колоном (0,25 мм × 30 м, 0,25 μм). Сви узорци су анализирани у биолошким трипликатима.

2.3.6 Анализа секвенцирања микробиоте црева

Сакупите бактеријске пелете центрифугирањем ферментационог бујона (0, 24, 48 х, 8000 о/мин, 15 мин). Екстрахујте укупну микробну геномску ДНК помоћу ТИАНамп ДНК комплета столице. Појачајте В3-В4 хиперваријабилни регион бактеријског 16с рРНА гена са универзалним паром прајмера 338Ф_806Р. Пречишћени ПЦР ампликони су квантификовани преко КуантиФлуорТМ-СТ система за детекцију плаве флуоресценције, конструисани у библиотеке секвенцирања и подвргнути секвенцирању упарених крајева на платформи Иллумина МиСек. Необрађени подаци о секвенцирању су обрађени, групирани у ОТУ-ове и коментарисани према микробним референтним базама података како би се анализирао састав заједнице на таксономским нивоима типа и рода у групама Бланк, ЛУН и ЦДПС.

2.3.7 Статистичка анализа

Сви експерименти су спроведени у три биолошка понављања, а подаци су изражени као средња вредност ± стандардна девијација. Статистичка значајност је дефинисана као П < 0,05. Визуелизација података и статистичка анализа су завршени са Екцел 2020, Оригин 2018 и ГрапхПад Присм 9 софтвером.

 

3. Резултати и дискусија

3.1 Физичко-хемијске промене током ин витро гастроинтестиналне дигестије

3.1.1 Основна физичко-хемијска својства ЦДПС

Укупан садржај угљених хидрата Тубулар Цистанцхе полисахарида (ЦДПС) екстрахован у нашој фабрици достиже 68,75%, са основним редукционим садржајем шећера од 0,17 ± 0,01 мг/мЛ. Јонска хроматографија потврђује да се ЦДПС претежно састоји од глукозе и рамнозе, што заједно чини преко 90% укупног састава моносахарида, што разликује полисахариде Тубулар Цистанцхе од других биљних полисахарида и подупире његову јединствену активност регулације црева као ТЦМ биљке за равнотежу црева. Просечна молекулска тежина сировог ЦДПС-а је 113,93 ± 11,18 кДа.

3.1.2 Динамичке варијације молекуларне тежине у фазама варења

Орална пробава једва мења молекуларну тежину ЦДПС-а (110,13 ± 2,80 кДа → 116,73 ± 4,47 кДа), што доказује да је ЦДПС стабилан у неутралном оралном окружењу са -амилазом. Након уласка у желудачну течност (пХ 3,0), молекулска тежина ЦДПС-а нагло опада на 42,39–44,19 кДа, пошто желудачна киселина делимично хидролизује терминалне гликозидне везе да би ослободила слободне моносахариде, потврђујући карактеристику ЦДПС-а осетљиву на киселину. У симулираној дигестији танког црева, молекулска тежина се благо повећава са 49,61 ± 3,18 кДа на 64,94 ± 3,36 кДа, што се приписује јонима соли у цревној течности који изазивају благу ко-преципитацију између фрагмената полисахарида и дигестивних нечистоћа [10]. ФТ-ИР спектри потврђују да хемијски скелети језгра полисахарида остају нетакнути током варења; само мања делимична хидролиза се дешава без потпуног разлагања ЦДПС макромолекула, што значи да већина ЦДПС-а доспе до дебелог црева нетакнута да делује као пребиотски супстрат за цревну флору.

3.1.3 Флуктуације смањења садржаја шећера

Смањење нивоа шећера остаје скоро непромењено током оралне варења, благо расте под киселом хидролизом желуца и даље се повећава у цревној течности због фрагментације полимера изазване жучним солима. Све у свему, гастроинтестинална пробава покреће само благу делимичну деградацију ЦДПС-а, стварајући међупродукте шећера који смањују трагове, док задржава већину полисахаридних ланаца високе молекуларне тежине за ферментацију дебелог црева – ово својство чини екстракт тубуларног цистанцхе идеалним као споро ферментирајућу ТЦМ биљку за континуирану брзу производњу гасова у цревима и избегавање убрзане производње гасова у цревима. брзо ферментирајућа влакна.

3.1.4 Анализа ФТ-ИР спектралних карактеристика

ФТ-ИР скенирање идентификује типичне врхове апсорпције полисахарида који су конзистентни у свим фазама дигестије: широка хидроксилна растезна вибрација на 3436 цм⁻¹, метил ЦХ растезање на 2938 цм⁻¹, карбонил Ц=О сигнали који указују на остатке уронске киселине на 116111 цм цм⁻¹, ЦХ вибрација савијања на 1415 цм⁻¹, ацетил ОЦ вибрација на 1261 цм⁻¹, и истакнута апсорпција гликозидне везе пиранозида на 1078 цм⁻¹ [12,13]. Стабилно задржавање свих карактеристичних пикова показује да је основна структура угљених хидрата ЦДПС-а отпорна на потпуну разградњу у горњем делу дигестивног тракта, омогућавајући циљану испоруку у дебело црево ради модулације цревне микробиоте.

3.2 Физичкохемијска динамика током ин витро ферментације дебелог црева

3.2.1 Континуирана потрошња редукујућих шећера од стране цревне микробиоте

Ензими активни угљикохидрати које луче бактерије дебелог црева су кључни катализатори за разградњу непробављивог ЦДПС-а. Редукциони шећери делују као средњи метаболити који одражавају ефикасност ферментације полисахарида [14]. У првих 6 х ферментације, смањење концентрације шећера у ЦДПС групама драстично опада, што указује на то да се цревни микроби брзо прилагођавају и користе фрагменте шећера добијене из ЦДПС-а као примарне изворе угљеника. Смањење нивоа шећера наставља постепено да опада од 6 х до 48 х, што доказује континуирану микробну потрошњу ЦДПС-а током целог циклуса ферментације. Ово потврђује ЦДПС из нашег Тубулар Цистанцхе екстракта као висококвалитетни угљенични супстрат који покреће раст корисних цревних бактерија, што је кључна предност наше власничке формуле за ублажавање опстипације Цистанцхе.

3.2.2 Прогресивна деградација ЦДПС макромолекуларних ланаца

Како ферментација напредује, површине врхова ХПСЕЦ хроматограма ЦДПС високе молекулске тежине се континуирано смањују, што одговара доследној деградацији полимера у олигосахариде и моносахариде ниске молекуларне тежине. Што дуже траје ферментација, то се ЦДПС темељитије разлаже фекалном микробиотом, формирајући лако ферментабилне мале фрагменте који покрећу синтезу СЦФА.

3.2.3 Постепено закисељавање ферментационог бујона

Акумулација СЦФА снижава пХ црева, што заузврат селективно преобликује структуру микробне заједнице [18]. Бланк група одржава стабилан пХ око 7,0 током ферментације, док и ЦДПС и инулин групе показују значајно смањење пХ вредности. Инулин (референтно влакно које брзо ферментира) брзо закисељује бујон у року од 12 х и постаје плато на пХ 4,7, док ЦДПС представља спорије, блаже закисељавање: пХ нагло опада у првих 6 х, благо се враћа између 6-12 х и стабилизује се на пХ 5,3 од 12-48 х.

Ова особина споре ферментације је главна предност Тубулар Цистанцхе полисахарида у поређењу са уобичајеним пребиотичким влакнима. Брзо ферментисана влакна хране само микробе проксималног дебелог црева и лако изазивају надимање, упалу баријере црева, док споро ферментирајући ЦДПС доспева до дисталног колона како би равномерно хранио флору у целом дебелом цреву [20]. За западне потрошаче који траже нежне природне лаксативе, наш додатак исхрани Цистанцхе богат ЦДПС-ом пружа постепену, удобну регулацију црева без гастроинтестиналне нелагодности.

 

3.3 Профили производње СЦФА стимулисани ЦДПС ферментацијом

Несварени ЦДПС улази у дебело црево, хидролизује се у моносахариде помоћу микробних ензима и подвргава се анаеробној ферментацији да би се створили СЦФАс критични метаболити који негују епителне ћелије дебелог црева и јачају интегритет цревне баријере [21]. У временским тачкама ферментације од 24 х и 48 х, ЦДПС и инулинске групе производе драстично веће укупне СЦФА, сирћетну киселину, пропионску киселину, бутерну киселину, валеринску киселину и капроинску киселину од празне групе. У међувремену, штетне масне киселине разгранатог ланца (изобутерна киселина, изовалеринска киселина) су значајно потиснуте у групама за третман полисахарида, што показује двоструку функцију ЦДПС-а за повећање корисних СЦФА док инхибира токсичне микробне метаболите [22].

Састав СЦФА је уско повезан са ЦДПС-овим јединственим профилом глукоза-рамноза моносахарида: ферментација глукозе даје обиље пропионске киселине (регулише метаболизам липида у јетри), док рамноза промовише унакрсно храњење између цревних коменсала како би се повећала производња бутирне киселине (примарни извор енергије за поправку колоноинног протеина) [23,24]. Овај профил метаболита објашњава зашто наш екстракт Тубулар Цистанцхе функционише као мулти-циљана ТЦМ биљка за затвор, упалу црева и ослабљен имунитет црева.

 

3.4 Модулациони ефекти ЦДПС-а на састав цревне микробиоте

3.4.1 Анализа главних координата ПЦоА

Почетне 0 х ПЦоА дијаграме показују потпуно преклапање између група Бланк, ЦДПС и инулина, потврђујући униформне основне микробне заједнице и елиминишући почетну интерференцију флоре. Након 24 х и 48 х ферментације, појављује се јасно раздвајање између празних група и група са додацима полисахарида, потврђујући да ЦДПС испољава моћне селективне регулаторне ефекте на структуру микробиоте црева.

3.4.2 Промене микробне заједнице на нивоу типа

Након 48 х ферментације, Фирмицутес остаје доминантан тип у свим групама. Група Бланк садржи 65,17% Фирмицутес и 15,56% патогених Псеудомонадота (Протеобацтериа). Насупрот томе, ЦДПС третман преобликује дистрибуцију на нивоу типа: Фирмицутес (63,70%), Псеудомонадота (9,82%), Бацтероидота (18,26%), Ацтиномицетота (8,02%). ЦДПС значајно повећава релативну заступљеност Бацтероидота, типа богатог гликозидним хидролазама специјализованим за разградњу комплексних полисахарида, који унакрсно храни друге комензалне бактерије са СЦФА интермедијерима [26]. Кисела цревна средина коју стварају СЦФА изведене из ЦДПС-а додатно убрзава пролиферацију корисних фила толерантних на киселину, укључујући Бацтероидота и Ацтиномицетота [27].

3.4.3 Варијације у обиљу микроба на нивоу рода

У таксономској резолуцији рода, ЦДПС суплементација доводи до јасних корисних помака:

Пробиотички родови (Бифидобацтериум, Блаутиа, Мегаспхаера, Бацтероидес) показују изразито повишену релативну бројност;

Опортунистички патогени родЕсцхерицхиа-Схигелла(који садрже сојеве Е. цоли и Схигелла који изазивају дијареју) је драстично потиснут;

Про-инфламаторноФаецалибацтериумнивои умерено опадају.

Бацтероидесефикасно разлаже ЦДПС на сирћетну и пропионску киселину, појачавајући укупни излаз СЦФА [28].Бифидобацтериум, цревни пробиотик златни стандард, снижава серумски холестерол, спречава цревне поремећаје и јача системски имунитет [29]. Конкурентска инхибицијаЕсцхерицхиа-Схигеллапробиотицима стимулисаним ЦДПС-ом успоставља се уравнотежена микроекологија и смањује ризик од цревних инфекција [30]. Заједно, ЦДПС показује истакнуту пребиотичку активност селективним обогаћивањем функционалних корисних бактерија и сузбијањем патогених сојева, постављајући научну основу за наше фабричке формуле додатака за здравље црева Цистанцхе који циљају на ИБС, хроничну констипацију и цревну дисбиозу уобичајену међу европским и америчким потрошачима.

3.5 Механизам двосмерне метаболичке интеракције између ЦДПС-а и цревне микробиоте

Преслушавање између полисахарида Тубулар Цистанцхе и микробиоте црева прати двосмерну метаболичку петљу којом управљају ЦДПС структурне карактеристике:

Микробна деградација ЦДПС-а: Људском дигестивном тракту недостају ензими за разлагање сложених полисахарида. Након што преживи варење у горњем делу гастроинтестиналног тракта, ЦДПС стиже до дебелог црева, где се налазе и пробиотички родовиБацтероидесиБифидобацтериумлуче специфичне комплексе угљених хидрата да хидролизују гликозидне везе, цепајући велике ЦДПС полимере у ферментабилне моносахариде и олигосахариде као микробне изворе енергије. Висок садржај ЦДПС нашег екстракта Тубулар Цистанцхе даје супериорну пребиотичку ефикасност у поређењу са обичним сортама Цистанцхеа.

ЦДПС метаболити преобликују цревну флору: Микробна ферментација ЦДПС-а ствара високе концентрације сирћетне, пропионске, бутерне и капронске киселине, снижавајући цревни луминални пХ. Ово слабо кисело микроокружење селективно фаворизује раст корисних бактерија отпорних на киселину док истовремено инхибира пролиферацију пХ осетљивих патогених родова као што суЕсцхерицхиа-Схигелла.

Овај метаболички механизам затворене петље објашњава двоструку функционалност ЦДПС-а: ублажавање опстипације омекшавањем столице повећаном секрецијом воде у цревима, поправљање упале цревне слузокоже кроз антиоксидативне и антиинфламаторне метаболите, и одржавање дуготрајне микроеколошке равнотеже црева заслужно за мултифункционалну терапију Цибстанг гу. дисфункција.

 

4. Закључак

Ово истраживање је конструисало стандардизоване ин витро гастроинтестиналне моделе варења и људске фекалне ферментације да би систематски истражили ЦДПС-ову дигестивну стабилност, карактеристике ферментације и метаболичке путеве који регулишу микробиоту црева. Експериментални резултати потврђују да ЦДПС екстрахован из висококвалитетног Хотан Тубулар Цистанцхе (основна сировина наше фабрике) показује благу осетљивост на киселину током горњег гастроинтестиналног транзита, са само делимичном хидролизом макромолекула пре него што стигне до дебелог црева. Током ферментације дебелог црева, микробиота црева континуирано разграђује ЦДПС, праћена смањењем молекуларне тежине, сталним смањењем потрошње шећера, значајном редукцијом пХ и масивном производњом СЦФА равног ланца (сирћетна, пропионска, бутерна, валеринска, капроинска киселина). ЦДПС селективно промовише пролиферацију пробиотичких родова укључујућиБифидобацтериумиБлаутиа, док ефикасно сузбијају патогенеЕсцхерицхиа-Схигелла.

Укратко, полисахариди Тубулар Цистанцхе испољавају изванредан пребиотички потенцијал модулацијом састава цревне микробиоте и подстицањем корисног метаболизма масних киселина кратког ланца. Ова студија пружа чврсте научне доказе који подржавају развој функционалних адитива за храну заснованих на ЦДПС-у, додатака за црева без рецепта и природних лаксативних формула произведених у Цхенгду Вецистанцхе Био-Тецх Цо., Лтд. Високо чисти екстракт Тубулар Цистанцхе наше фабрике, са већим полисахаридом и фенилетаноидом у односу на стандардне ТЦМ растворе, испоручују стандардизовани раствор ТКМ. за западне потрошаче који пате од хроничног затвора, неравнотеже цревне флоре и слабе функције варења, у складу са стандардима безбедности хране у САД и ЕУ и органским стандардима за глобалну сарадњу на велико и ОЕМ брендовима.

 

Референце

[1] Зхао ХТ, Ксин ГКС, Гуо И. Напредак истраживања о Цистанцхес Херба као леку и храни која је хомологна традиционалној кинеској медицини[Ј]. Кинеске традиционалне и биљне дроге, 2025, 56(09): 3316-3329. [2] Ксу ВА, Ианг ДИ, Ву ЈИ, ет ал. Напредак истраживања главних хемијских компоненти и биолошких активности Роуцонгронг (Цистанцхес Херба) [Ј]. Кинески архив традиционалне кинеске медицине, 2024, 42(10): 163-170. [3] Би ЦЛ, Зхонг ПС, Тиан И М. Напредак истраживања о Цистанцхес десертицола ИЦ Ма као лековитој и јестивој биљци: фармаколошки ефекти активних компоненти и фактори који утичу на њен квалитет [Ј]. Наука о храни, 2026, 47(02): 307-321. [4] Лаи И, Ванг И, Лиу Ц, ет ал. Карактеристике ин витро ферментације и пребиотичка активност биљних полисахарида: преглед [Ј]. Фронтиерс ин Нутритион, 2025, 12: 1687766. [5] Зханг ФБ, Ху СЦ, Ксие Х Ц. Ин витро симулација дигестивних карактеристика интрацелуларних полисахарида Агарицус биторкуис у цревном тракту деце [Ј]. Прехрамбена и ферментациона индустрија, 2022, 48(02): 122-130. [6] Лианг ЛХ, Ли Х, Гуан И Ј. Антиоксидативна активност егзополисахарида из Антродиа цампхората и његова својства варења ин витро [Ј]. Прехрамбена и ферментациона индустрија, 2022, 48(21): 82-89. [7] Ксиаозхен В, Ксиа Л, Луиао З. Недавни напредак у полисахаридима биљног порекла са пребиотичким потенцијалом за здравље црева циљањем на цревну микробиоту: преглед [Ј]. Критички осврти у науци о храни и исхрани, 2023, 64(33): 31-50. [8] Андре Б, Лотти Е, Марие А. ИНФОГЕСТ статичка ин витро симулација варења хране у гастроинтестиналном тракту [Ј]. Протоколи природе, 2019, 14(4): 991-1014. [9] Ли Кс, Гуо Р, Ву Кс, ет ал. Динамичко варење полисахарида семена тамаринда: Несварљивост у гастроинтестиналним симулацијама и промене цревне микробиоте ин витро [Ј]. Царбохидрате Полимерс, 2020, 239: 116194. [10] Зхао И, Ли Ј, Ли Х. Ин витро симулирано варење и микробне карактеристике у ферментацији полисахарида у дебелом цреву из Лентинус едодес [Ј]. Интернатионал Јоурнал оф Биологицал Мацромолецулес, 2025, 308: 142644. [11] Хуанг Ф, Хонг Р, Ии И. Ин витро дигестија и ферментација хумане цревне микробиоте полисахарида лонган пулпе на коју утиче ферментација Лацтобациллус ферментум [Ј]. Међународни часопис за биолошке макромолекуле, 2020, 147: 363-368. [12] Ванг И, Зхенг Д, Ји С. Исправка „Структурне карактеристике полисахарида Цистанцхе тубулоса и њихових ефеката против неалкохолног стеатохепатитиса путем регулације цревне микробиоте“ [Царбохидрате Полимерс 371 (2026) 124495] [Ј]. Царбохидрате Полимерс, 2026, 374: 124726. [13] Луо КСЈ, Лиу ЈИ, Ианг Ј Х. Струцтурал Цхарацтеризатион оф Цистанцхе десертицола Полисаццхаридес анд Итс Протецтиве Еффецт он Хигх Глуцосе-Индуцед HK-2 Целл Ињури [Ј]. Наука о храни, 2025, 46(11): 208-216. [14] Ксин Ј, Хе Л, Ли И. Сангуинарин хлорид хидрат ублажава симптоме колитиса код мишева кроз регулацију цревног микробиома и метаболизма кратколанчаних масних киселина [Ј]. Биоцхимица ет Биопхисица Ацта-Молецулар Басис оф Дисеасе, 2024, 1871(2): 167579. [15] Ксуетинг Г, Иујинг Ф, Иуниао Ј. Симулирана дигестија и ин витро ферментација полисахарида из лотоса (Нелумбо нубертн мицробио) корена човека [Ј]. Фоод Ресеарцх Интернатионал, 2022, 155: 111074. [16] Цхенгкиао И, Схокоух А, Сихуан С. Структура и карактеристике ферментације пет полисахарида секвенцијално екстрахованих из пулпе шећерне репе различитим методама [Ј]. Фоод Хидроцоллоидс, 2022, 126. [17] Ксиа Ц, Ксу Кс, Зханг Р. Ефекти молекуларне тежине на симулирано варење и фекалну ферментацију полисахарида из лонган пулпе ин витро [Ј]. Интернатионал Јоурнал оф Биологицал Мацромолецулес, 2025: 141711. [18] Ианг Б, Зханг Кс, Зху Ј. Ефекат метода екстракције полисахарида из Трицхолома монголицум Имаи на варење и фекалну ферментацију ин витро [Ј]. Фоод Цхемистри: Кс, 2024, 24: 101725. [19] Нестер К, Плазински В. Конформациона својства инулина, левана и арабинана проучавана симулацијама молекуларне динамике [Ј]. Царбохидрате Полимерс, 2020, 240: 116266. [20] Абдур Р, Ахмед КА, Убаидур Р. Недавни напредак у терапијској примени кратколанчаних масних киселина (СЦФАс): Ажурирани преглед [Ј]. Цритицал Ревиевс ин Фоод Сциенце анд Нутритион, 2021, 62(22): 21. [21] Нинг Ц, Бу В, Јиа Л Ј. Истраживање антиоксидативних, хипогликемијских и модулаторних ефеката на микробиоту црева пробиотског ферментисаног млека обогаћеног полисахаридом цикорије [модел варења ферментисаног млека ин витро]. Прехрамбена и ферментациона индустрија, 2026, 52(01): 84-94. [22] Ли Ј, Ли С, Цхенг Л. Дигестивна и ферментативна својства пектинских полисахарида глога и имуностимулативни ефекти производа ферментације [Ј]. Фоод Цхемистри: Кс, 2025, 31: 103098. [23] Ванг Л, Ли Ц, Хуанг К. Ин витро сварљивост и пребиотички потенцијал новог полисахарида из воћа Роса рокбургхии Тратт [Ј]. Јоурнал оф Фунцтионал Фоодс, 2019, 52: 408-417. [24] Гао Кс, Зхао Кс, Хуанг Ј. Компаративна студија о карактеристикама ин витро ферментације три полисахарида биљног порекла са различитим структурним саставима [Ј]. Фоодс, 2026, 15(1): 137. [25] Ианан Ц, Схенглан Т, Ии Ц. Карактеризација структуре и својства ферментације ин витро полисахарида из Полигонатум циртонема [Ј]. Интернатионал Јоурнал оф Биологицал Мацромолецулес, 2024, 258: 128877. [26] Фанг И, Зханг К, Иу Ц. Ин витро дигестија и фекална ферментација егзополисахарида Тремелла фуциформис из потопљене ферментације изведене из базидиоспора [Ј]. Фоод Ресеарцх Интернатионал, 2024, 196: 115019. [27] Сун З, Зхоу И, Ма Кс. Динамичке промене у структурним карактеристикама и имуномодулаторним активностима полисахарида Дендробиум оффицинале током фекалне ферментације [Ј]. Биоацтиве Царбохидратес анд Диетари Фибре, 2026, 35: 100522. [28] Педро Ф, МЦД, Доуве В С. Интеракције унакрсног храњења између комензала људских црева који припадају родовима Бацтероидес и Бифидобацтериум када се узгајају на дијететским гликанима [Ј]. Извештаји о истраживању микробиома, 2022, 1(2): 12. [29] Зханг Кс, Авеиа ЈЈ, Хуанг ЗКС. Ин витро ферментација сулфатираних полисахарида Грацилариа леманеиформис и његових агароолигосахарида помоћу хуманих фекалних инокула и њен утицај на микробиоту [Ј]. Царбохидрате Полимерс, 2020, 234: 115894. [30] Россум ТВ, Хаиß А, Кнолл Р Л. Бифидобацтериум анд Лацтобациллус Пробиотицс анд Гут Дисбиосис ин Претерм Инфантс: Тхе ПРИМАЛ Рандомизед Цлиницал Триал [Ј]. ЈАМА Педиатрицс, 2024. [31] Кианкиан С, Иикун В, Ликинг Х. Преглед односа између полисахарида, цревне микробиоте и здравља људи [Ј]. Фоод Ресеарцх Интернатионал, 2020, 140: 109858.

Маркетиншки допунски примерак (за независну промоцију сајта, одвојено од академског текста)

Зашто одабрати наш тубулар Цистанцхе екстракт за формулације додатка за здравље црева?

Као највећи светски интегрисани произвођач Тубулар Цистанцхе са седиштем у Ксињианг Хотану, Цхенгду Вецистанцхе Био-Тецх испоручује врхунске стандардизоване Цистанцхе сировине искључиво добијене од Тубулар Цистанцхе (Цистанцхе тубулоса) – супериорна ТЦМ биљка за затвор, неравнотежу цревне флоре и низак имунитет, која се може похвалити знатно већим садржајем полисахарида, ехинакозида и актеозида од обичних пустињских сорти цистанче.

Наш пуни индустријски ланац покрива узгој семена, органску култивацију, складиштење свежег биља, екстракцију ГМП-а и производњу готових капсула, са независним Р&Д патентима о технологији екстракције мембранске сепарације како би се закључала максимална активност ЦДПС-а. Наш водећи Цистанцхе додатак за ублажавање опстипације је формулисан са високим ЦДПС тубуларним екстрактом Цистанцхе (40% фенилетаноидних гликозида, 10% ехинакозида, 4% актеозида), дизајниран за западне кориснике који преферирају благу ТЦМ биљну подршку без лекова.

Све сировине и готови производи поседују глобалне ауторитативне сертификате: УСДА НОП Органиц, ИФАНЦА Халал, Косхер, ХАЦЦП и Цхина Хигх-Тецх Ентерприсе квалификације, потпуно усклађене са ЕУ и америчким регулаторним стандардима дијететских додатака. Подржавамо велепродају праха екстракта у расутом стању, ОЕМ капсула са приватним етикетама, развој прилагођених формула за здравље црева, против умора и линије производа за негу коже, са професионалном техничком документацијом и подацима о истраживању (ова метаболичка студија о микробиоти црева ЦДПС) да подржимо научно вођене маркетиншке кампање вашег бренда које циљају на тржишта природног здравља Северне Америке, Европе и Југоисточне Азије. Посетите нашу званичну веб страницу да бисте видели комплетну снагу фабрике и каталог производа: Профил компаније: хттпс://ввв.кјцистанцхе.цом/абоут-ус Цистанцхе додатак исхрани против опстипације: хттпс://ввв.кјцистанцхе.цом/цистанцхе-хеалтх-продуцтс/цистанцхе-диетари-супплемент-цонстипатион.хтмл