Нано-ПСО администрација ублажава когнитивне и неуронске дефиците који су резултат трауматске повреде мозга, део 1

Апстракт: Трауматска повреда мозга (ТБИ), један је од најчешћих узрока неуролошких оштећења у младим популацијама. Широко се сматра фактором ризика за неуродегенеративне болести, као што су Алцхајмерова болест (АД) и Паркинсонова (ПД) болест.

Трауматска повреда мозга је забрињавајуће стање које може да изазове озбиљна оштећења нашег мозга, утичући у различитом степену на памћење, размишљање и доношење одлука. Међутим, иако ови проблеми могу утицати на наше животе неко време, још увек постоје многе позитивне мере које нам могу помоћи да се опоравимо или побољшамо памћење.

Прво, можемо помоћи да побољшамо наше памћење кроз низ когнитивних тренинга, који могу укључивати играње игрица, обављање свакодневних задатака и стимулисање нашег мозга учењем нових ствари. Овај тренинг нам може помоћи да развијемо нове неуронске путеве, побољшамо нашу способност размишљања и побољшамо памћење.

Друго, у свакодневном животу можемо да нам помогнемо да одржимо здрав мозак тако што ћемо променити навике у исхрани и вежбању. Неке намирнице богате протеинима, витаминима и антиоксидансима, попут поврћа, воћа и орашастих плодова, могу нам помоћи да побољшамо наше когнитивне способности и заштитимо мозак од оштећења. Поред тога, редовно вежбање и одржавање доброг квалитета сна такође могу бити корисни за опоравак мозга и здравствену негу.

Коначно, можемо подржати и водити наш процес опоравка тако што ћемо остати у контакту са породицом, пријатељима и здравственим радницима. Комуникација са другима и примање помоћи и подршке може нам помоћи да задржимо оптимистичан став, који је од суштинског значаја за опоравак нашег мозга и побољшање памћења.

У закључку, иако трауматска повреда мозга може донети неке изазове, можемо превазићи ове потешкоће и побољшати своје памћење и когнитивне способности кроз позитивне акције. Запамтите, свако може постићи позитивне резултате напорним радом и стрпљивим напорима. Види се да треба да побољшамо памћење, а Цистанцхе може значајно да побољша памћење јер Цистанцхе може да регулише и равнотежу неуротрансмитера, као што је повећање нивоа ацетилхолина и фактора раста који су веома важни за памћење и учење. Поред тога, Цистанцхе такође може побољшати проток крви и промовисати испоруку кисеоника, што може осигурати да мозак добије адекватну исхрану и енергију, чиме се побољшава виталност и издржљивост мозга.

Кликните на сазнајте начине да побољшате своје памћење

Ове болести се делимично карактеришу акумулацијом погрешно савијених протеина специфичних за болест и деле заједничке патолошке карактеристике, као што је смрт неурона, као и инфламаторно и оксидативно оштећење.

Показало се да нано формулација уља семена нара [Нано-ПСО (Гранагард ТМ)] циља свој активни састојак на мозак и након тога инхибира опадање памћења и смрт неурона код мишева на моделима АД и генетске ЦреутзфелдтЈацобове болести.

У овој студији показујемо да примена Нано-ПСО мишевима пре или после ТБИ апликације спречава когнитивни пад и пад понашања. Поред тога, имунохистохемијско бојење мозга указује да је превентивни третман Нано-ПСО значајно смањио смрт неурона, смањио глиозу и спречио оштећење митохондрија у погођеним ћелијама.

На крају, испитали смо нивое Сиртуина1 (СИРТ1) и синаптофизина (СИП) у кортексу користећи Вестерн блотинг.

Потрошња НаноПСО довела је до виших нивоа СИРТ1 и СИП протеина након повреде. Узети заједно, наши резултати показују да Нано-ПСО, као природни антиоксиданс усмерен на мозак, може спречити део оштећења изазваних ТБИ.

Кључне речи: ТБИ; Нано-ПСО; неуроинфламација; оксидативни стрес; неуродегенерација

1. Увод

Трауматска повреда мозга (ТБИ) је озбиљан проблем јавног здравља и главни узрок инвалидитета и смрти код младих одраслих и старије популације. Сматра се једном од најчешћих неуролошких повреда које изазивају морбидитет и морталитет и погађају више од 10 милиона људи широм света сваке године [1]. Пошто повреде главе не захтевају увек тражење одговарајуће медицинске неге, ови подаци су вероватно још већи.

Главни узроци ТБИ укључују падове, саобраћајне несреће, нападе и спортске повреде [2]. ТБИ је чест међу мушкарцима и посебно чест код адолесцената и младих одраслих након саобраћајних несрећа и повреда узрокованих алкохолом.

Такође је честа код старијих због повећане шансе за падове [3]. Људи који су имали ТБИ могу патити од поремећаја понашања, когнитивних и емоционалних поремећаја, краткорочних и дуготрајних, у зависности од тежине повреде [3 ].

Пацијенти изложени ТБИ могу изаћи неповређени, али такође могу бити изложени повредама које захтевају продужену хоспитализацију и чак се завршавају смрћу. Око 40% случајева тешких повреда након ТБИ завршиће се смрћу, а преживели ће патити од различитих неуролошких поремећаја укључујући епилепсију, деменцију и неуродегенеративне болести [3,4].

Умерене повреде изазивају морфолошке промене сличне онима код тешке повреде, али су мање изражене, а когнитивна оштећења су углавном блажа него код тешких повреда [5]. Поред тога, постоје добро утврђени докази да је ТБИ важан фактор ризика за развој неуродегенеративних болести као што су Алцхајмерова и Паркинсонова болест [6–8].

Оксидативни стрес је једна од потенцијалних секундарних повреда ТБИ-а, која такође укључује ексцитотоксичност, упалу, апоптозу и митохондријалну дисфункцију. Митохондријална дисфункција се често налази код пацијената са неуродегенеративним обољењима као што су Паркинсонова и Алцхајмерова болест [9–12].

Митохондријска дисфункција може довести до нерегулисане прекомерне производње реактивних врста кисеоника (РОС), што је чест показатељ секундарне повреде ТБИ [13]. Људско тело производи ендогене антиоксиданте да надокнади или инхибира потенцијално повећање производње РОС.

Када ТБИ доведе до повећања производње РОС, природни нивои антиоксиданата у телу су преоптерећени, што често узрокује пероксидацију липида и оштећење ДНК и протеина [14]. Ово може довести до прекорачења РОС или ниског нивоа антиоксиданса, стања познатог као оксидативни стрес који може имати разорне и често токсичне ефекте, узрокујући смрт неуронских ћелија и потенцијалну патогенезу [15–19].

ТБИ нема доказан третман за смањење штете или чак превенцију. Из тог разлога, од највеће је важности тражити боље разумевање патолошких механизама који прате повреду како би се одредили идеални протоколи лечења.

Показало се да Нано-ПСО (Гранагард ТМ), нано-формулација уља семена нара која садржи високе нивое пуницинске киселине, најјачег природног антиоксиданса, побољшава знакове неуродегенерације, укључујући памћење и ћелијску смрт у неколико модела неуродегенеративних болести [20–22].

У моделу трансгених мишева за генетски ЦЈД, дуготрајна примена Нано-ПСО довела је до одлагања прогресије болести и смањене смрти ћелија. У моделу 5КСФАД мишева за АД, администрација Нано-ПСО спречила је оштећење памћења и смањила акумулацију А-бета, како интрацелуларно тако и интрацелуларно.

У свим моделима, Нано-ПСО је спречио смањење митохондријалне активности, вероватно због своје снажне антиоксидативне функције усмерене на мозак. Недавно је показано да Нано-ПСО код људи повећава памћење код пацијената са мултиплом склерозом [23].

У овој студији показујемо да примена Нано-ПСО, дијететског суплемента пре или после ТБИ код мишева, ублажава оштећења визуелне и просторне меморије.

Такође смањује губитак неурона у темпоралном кортексу и зупчастом гирусу и смањује интензитет реактивног астроцита у темпоралном кортексу повређеног мозга мишева. Штавише, обнавља производњу цитохром Ц оксидазе (ЦОКС), митохондријалног ензима за који се наводи да је погођен у можданим ћелијама током неуродегенерације [24].

Штавише, он игра улогу у респираторном ланцу и одговоран је за смањење до 95% кисеоника који преузимају ћелије, укључујући нервне ћелије [24].

2. Резултати

2.1. Давање нано-ПСО мишевима пре и после ТБИ спречава њихово когнитивно погоршање

Након излагања ТБИ и третмана са Нано-ПСО, било као превентивно или као третман после ТБИ (видети Слику 1 и методе за шему експеримената), мушки ИЦР мишеви су процењени коришћењем повишеног плус лавиринта две недеље након ТБИ међу одвојеним кохортама.

Процењивали смо понашање мишева налик анксиозности тако што смо бележили време проведено у отвореним рукама лавиринта и укупан број улаза у сваку руку, респективно.

Није било разлика у времену проведеном у отвореним рукама између свих група у оба тестирана приступа третману, што указује да на понашање мишева слично анксиозности није утицала ни повреда ни третман са Нано-ПСО (резултати нису приказани).

Да би се проценили ефекти оба приступа третману (пре или после ТБИ) потрошње НаноПСО на формирање памћења, нове парадигме за препознавање објеката (НОР) и И-мазепарадигме су изведене на различитим групама мишева две недеље након повреде.

Конзистентно се наводи да је парадигма НОР оштећена ТБИ [25]. Као што се очекивало, ТБИ мишеви су патили од значајног дефицита визуелне меморије и проводили мање времена у близини новог објекта, у поређењу са свим осталим групама (п < 0.01, п < 0,001, слика 2А, Б) .

Дефицит је побољшан Нано-ПСО у оба приступа третману. Затим смо извршили тест И-лавиринт да бисмо проценили просторну меморију као што је претходно описано [26].

У оба приступа третману, ТБИ мишеви су имали оштећење просторне меморије у поређењу са нетретираним контролним мишевима (п < {{0}}}.001, Слика 3А, Б). Када су мишеви конзумирали третман Нано-ПСО, оштећење просторне меморије је побољшано у оба приступа третману (п <0,001).

Слика 3. Примена нано-ПСО мишевима ТБИ побољшала је просторну меморију процењену у И-мазетесту. ТБИ мишеви третирани или нетретирани су били подвргнути тесту И лавиринта две недеље након ТБИ описаног у методама: (А) мишеви третирани Нано-ПСО пре ТБИ; и (Б) мишеви третирани Нано-ПСО након ТБИ представљају индекс преференције релативног времена које су мишеви провели истражујући новеларм у поређењу са старом руком.

Статистичка анализа Оне-ваи АНОВА открила је да ТБИ животиње имају мањак просторне меморије у поређењу са свим другим групама. (А: Ф (3, 36)=16.039, п=0.000 Фишеров ЛСДпост хоц, *** п < 0.{101} {15}}1, н=10; Б: Ф (1, 15)=14.127, п=0.00 Фисхеров ЛСД пост хоц, ** п < 0,01, н {15}}1, н=10; {18}}).НС=Није значајно. Вредности су представљене као средња вредност ± СЕМ.

2.2. Нано-ПСО третман спречава неуронску смрт код ТБИ мишева

Пратећи експерименте у понашању, који су открили да Нано-ПСО може спречити когнитивна оштећења која настају услед повреде мозга, имуноцитохемијски смо испитали нивое ТБИ оштећења мозга у присуству или одсуству Нано-ПСО на ћелијском нивоу.

Мишеви су угашени, а њихови мозгови су сакупљени три недеље након повреде, када су нађене даље биохемијске промене [25,27].

Промене су испитиване у темпоралном кортексу, ЦА3 региону хипокампуса и зубатом гирусу на обе стране мозга. Резултати са обе стране мозга су комбиновани у једну вредност за сваког миша.

Слике 4А и Б приказују имунолошко бојење ових подручја мозга анти-НеуН антителом, маркером зрелих неурона. Резултати показују да је број неурона значајно смањен након ТБИ, али је такво смањење неурона спречено ако је Нано-ПСО примењен пре ТБИ или после ТБИ и све док мишеви нису прекинути (три недеље касније).

ТБИ је изазвао пад броја неурона унутар кортекса и зубног гируса у поређењу са свим другим групама (** п < {{0}}.01, *** п < 0,001), што указује на значајан губитак неурона у три недеље након повреде (Слика 4А, Б). Оба приступа третману су сачувала број неурона у кортексу и зубном гирусу.

Међутим, превентивни третман је додатно ублажио губитак неурона у овим областима (** п < {{0}}.01, *** п < 0,001) (Слика 4А) у поређењу са третманом након ТБИ ( * п < 0,05) (Слика 4Б).

2.3. Примена Нано-ПСО смањује упалу изазвану ТБИ

Процена неуро-инфламаторних процеса који се јављају након излагања ТБИ добијена је имуно-хистохемијским бојењем коришћењем ГФАП антитела које обележава реактивне астроците [28,29].

Бојење је обављено да би се испитало да ли је дошло до промена у нивоу експресије ТБИ астроцита три недеље након повреде и да ли је превентивни или пост-ТБИ третман са Нано-ПСО утицао на ове промене. Резови мозга добијени из темпоралног кортекса проучавани су три недеље након повреде.

Као што се може видети на Слици 5, изложеност ТБИ изазвала је значајно повећање астроцита у кортексу (п < 0.001,п < 0.01), односно (слика 5). Када је Нано-ПСО примењен као превентива или третман након ТБИ, то је довело до значајног смањења активираних астроцита у кортексу, п < 0,001, п < 0,05, респективно (Слика 5).

Ови резултати показују да су због ТБИ, као и код нелеченог ТБИ, третирани Нано-ПСО пре ТБИ и третирани Нано-ПСО после ТБИ имуно обојени на НеуН (зелено) и ДАПИ (плаво) [скала бар 50 µм ]; (Б) квантитативна процена НеуН имунолошког бојења за све пресеке (брегма темпорални кортекс -1.06 нм и зубни гирус-1,34 нм) на крајњој тачки сваког експеримента је квантификована коришћењем Оне-ваи АНОВА (Цортек:ПРЕ ( Ф (3, 16)=15.469, п=0.000 Фисхеров ЛСД пост хоц, *** п < 0.0{{46 }}1, Н=5 (Ф (3, 12) {{20}.607,п=0.{23} } Фишеров ЛСД пост хоц, * п < 0,05 ** п < 0,01, н=3–5)), (ДГ: ПРЕ (Ф (3, 14)=6.804, п {{34) }}.000Фишеров ЛСД пост хоц, ** п < 0,01, н=4–5 ПСОТ (Ф (3, 13)=12.580, п {{44}); }.000 Фишеров ЛСД постхоц, * п < 0,05, ** п < 0,01, *** п < 0,001, н=3–4)). НС=Није значајно. Вредности су представљене као средња вредност ± СЕМ.

2.4. Нано-ПСО обнавља активност ЦОКС ИВ1 након ТБ1

Раније је показано да је у спонтаним/генетским моделима неуродегенеративних болести, као што су АД и ЦЈД, експресија ЦОКС ИВ1, важног митохондријалензима за производњу енергије у ћелијама, драстично смањена и замењена ЦОКС ИВ2, који може да функционише под високим нивоима РОС [24,30]. Међутим, ово је привремени ефекат све док такви нивои РОС коначно не доведу до апоптозе и смрти ћелије.

Примена нано-ПСО смањује нивое РОС и враћа експресију ЦОКС [30]. Стога смо у овом раду тестирали да ли је то случај и са ТБИ, спољашњом повредом коју су изазвали нормални мишеви.

У том смислу, резови мозга су обојени имуном као што је горе описано са ЦОКС ИВ1 антителом. Слика 6 показује да, као што је био случај са генетским болестима, ТБИ такође изазива смањење нивоа ЦОКС ИВ1 чак и три недеље након наношења оштећења у мозгу.

У овом случају, и као што је показано раније [30,31], примена Нано-ПСО повећава нивое ЦОКС ИВ1 како у контролној тако и код мишева пре и после ТБИ. Пошто повећање нивоа ЦОКС ИВ1 одражава оксидативни статус ћелија, закључујемо да Нано-ПСО такође може смањити нивое РОС код контролних мишева, а не само код мишева захваћених ТБИ.

Слика 6. Третман нано-ПСО обновио је експресију митохондријалног ЦОКС ИВ1 код свих мишева: (А) Короналне секције кроз темпорални кортекс мозга из третираних и нетретираних контрола, као и из нетретиране ТБИ, третиране Нано-ПСО пре ТБИ и третиране нано- ПСО после ТБИ су имуно обојени на ЦОКС ИВ1 (црвено) и ДАПИ (плаво) [скала бар 50 µм]; (Б) Квантитативна процена имунолошког бојења ЦОКС ИВ1 за све пресеке (брегма темпорални кортекс −1.06 нм) на крајњој тачки сваког експеримента је квантификована једносмерном АНОВА (Ф (4, 12)=45 .101, п=0.000 Фишеров ЛСД постхоц, ** п < 0,01, *** п < 0,001, н=3–4). НС=Није значајно. Вредности су представљене као средња вредност ± СЕМ.

2.5. Нано-ПСО подиже нивое СИРТ1 и СИП након ТБИ

Имуноблот укупних нивоа СИРТ1, маркера за НАД-зависни деацетилазиртуин-1 у кортексу, испитан је за све мишеве три недеље након ТБИ (Слика 7). Утврђено је смањење нивоа СИРТ1.

Ови резултати су у складу са претходном студијом са моделом благе ТБИ из наше лабораторије [32]. Међутим, ово смањење је спречено са Нано-ПСО када је примењен одмах неколико недеља након догађаја.

Слика 7Б приказује имуноблот укупних нивоа синаптофизина (СИП), маркера за синаптичке структуре, из хомогената мозга контролних мишева третираних или нетретираних са Нано-ПСО, као и мишева третираних ТБИ или после ТБИ.

Резултати показују да је, упоредо са неуронском смрћу приказаном на сликама 4А и Б, синаптичко оштећење такође узроковано ТБИ. Међутим, ово оштећење се може спречити ако се јак антиоксиданс усмерен на мозак као што је Нано-ПСО одмах примени неколико недеља након наношења штете.

Раније је показано да већина захваћених неурона није умрла одмах након повреде, већ неколико дана након тога због екстензивног оксидативног стреса изазваног ТБИ [33]. Стога, непосредни антиоксидативни третман може бити довољно ефикасан да спречи велика оштећења у дужем временском периоду. трчи.

Слика 7. Утицај Нано-ПСО на експресију СИРТ1/СИП у кортексу ТБИ мишева: (А) Хомогенати мозга из десног кортекса третираних и нетретираних контрола, као и ТБИ и НаноПСО третираних након ТБИ мишева су имуноблотирани са СИРТ1 и ТУБ откривеним на (110 КДа, 50 КДа), респективно. Квантитативна анализа имунореактивних трака СИРТ1 је квантификована помоћу Имаге Јанд нормализованог у односу на контролни протеин ТУБ.

Нивои СИРТ1 су значајно смањени 30 дана након повреде у кортексу ТБИ мишева у поређењу са контролом. Нано-ПСО третман спречио је ово смањење ** п < 0,01. Једносмерна АНОВА открила је значајно повећање експресије СИРТ1 мишева који су добили третман после повреде. (Ф (3, 20)=1.084, п=0.002, Н=5 Фишеров ЛСД пост хоц).

(Б) Хомогенати мозга из десног кортекса третираних и нетретираних контрола, као и ТБИ и Нано-ПСО третираних мишева после ТБИ су имуноблотирани са СИП и ТУБ детектовани на (37 КДа, 50 КДа), респективно.

Квантитативна анализа имунореактивних трака СИП је квантификована помоћу слике Ј и нормализована у односу на контролни протеин ТУБ.

Једносмерна АНОВА је открила значајно повећање у експресији СИП код мишева који су примали третман после ТБИ у поређењу са ТБИгрупом (Ф (3,20) ​​= 1.084, п {{6} }.379, Фисхеров ЛСД пост хоц * п < 0,5, н=4–5). НС=Није значајно. Вредности су представљене као средња вредност ± СЕМ.

Испод сваког графикона је представљена репрезентативна слика нивоа СИРТ1/СИП и протеина тубулина у домаћинству (ТУБ) у десном кортексу међу свим групама.

For more information:1950477648nn@gmail.com