Део Ⅱ: Фенилетаноид гликозиди Цистанцхе Тубулоса индукују апоптозу ћелија хепатоцелуларног карцинома путем путева зависних од митохондрија и МАПК и појачавају антитуморски ефекат кроз комбинацију са цисплатином

Контакт: Аудреи Ху Вхатсапп/хп: 0086 13880143964 Е-пошта:audrey.hu@wecistanche.com

Даље смо проценили имуностимулаторни ефекат ЦТПГ (Цистанцхе Тубулоса Пхенилетханоид Глицосидес) на мишевима. После ип ињекције, сц ињекције и иг примене ЦТПГ (200 и 400 мг/кг), није било значајне промене у стању мишева у поређењу са нетретираном групом. Телесна тежина мишева такође није имала значајну разлику између група које су третиране ЦТПГ и група које нису третиране (Слика 7А). Индекси срца, јетре, слезине, плућа, бубрега и тимуса код мишева били су слични међу свим групама осим индекса слезине код мишева у групи која је примала 400 мг/кг ЦТПГ ип ињекције (табела 1). Резултати су показали да одабране дозе ЦТПГ-а нису имале нежељене ефекте код мишева. Слезина је важан имунолошки одбрамбени орган код сисара, а њен развој директно утиче на имунолошку функцију појединца и способност да се одупре болестима. Индекс имунолошких органа одражава развој и имунолошку функцију имунолошких органа. Слезина садржи различите имуне ћелије, укључујући Т ћелије, Б ћелије, природне ћелије убице (НК ћелије), макрофаге, дендритске ћелије (ДЦ) и друге, које играју важну улогу у имунолошком систему.30 Пријављено је да полисахариди могу повећати број имуних ћелија како би побољшали телоимунитет.31 Како је ип ињекција ЦТПГ-а значајно повећала индекс слезине (повећан 0.55 пута), даље смо анализирали број различитих имуних ћелија у слезини. Резултати су показали да је ип ињекција ЦТПГ значајно повећала број Т ћелија (ЦД3 плус ЦД19− ћелије) (повећан 0.49 пута), Б ћелија (ЦД3−ЦД19 плус ћелије) (повећан 0 ,49 пута) и НК ћелије (ЦД3-ЦД19-ЦД49б плус ћелије) (повећане 1,63 пута) у поређењу са нетретираном групом. ЦД4 плус и ЦД8 плус Т ћелије, као главни подтипови Т ћелија, играју важну улогу у антиген-специфичном ћелијском имуном одговору.32 Стога смо даље анализирали број и статус активације ЦД4 плус и ЦД8 плус Т ћелија у слезина. Резултати су показали да ип ињекција ЦТПГ-а не само да је значајно повећала број ЦД4 плус и ЦД8 плус Т ћелија (повећан 0.55 и 0,34 пута, респективно), већ је такође побољшао стање активације ЦД4 плус Т ћелије (ЦД4 плус ЦД44 плус ћелије) (повећане 0.84 пута) (Слика 7Б), ови резултати сугеришу да је ЦТПГ имао функцију побољшања имунитета.

Комбинација ЦТПГ-а(Цистанцхе Тубулоса Пхенилетханоид Глицосидес) и Цисплатин су показали снажан антитуморски ефекат на моделу Х22 тумора миша

Опште је прихваћено да хемотерапија или радиотерапија могу довести до лоше прогнозе и изазвати бројне нежељене догађаје, који могу бити последица супресије имуног система и оштећења нормалних ткива и органа. Полисахариди из ТЦМ-а имају ефекте на јачање имунитета и ублажавају оштећења имуних органа и имуних ћелија изазвана хемотерапијом, на пример, хитозан33 и полисахариди Лициум барбарум.34 Горњи резултат је показао да ЦТПГ(Цистанцхе Тубулоса Пхенилетханоид Глицосидес) може ублажити нежељене ефекте цисплатина на имуни систем. Због тога је антитуморски ефекат ЦТПГ у комбинацији са цисплатином процењен на Х22 моделу миша тумора. Као што је приказано на слици 8А, сам ЦТПГ, сам цисплатин и комбинација ЦТПГ и цисплатина (ЦТПГ плус цисплатин) значајно су потиснули раст тумора Х22 у поређењу са контролном групом. ЦТПГ плус цисплатин показао је јачи инхибиторни ефекат од самог ЦТПГ-а и цисплатина. Двадесетог дана, запремине тумора у контролној групи, само цисплатин, само ЦТПГ и ЦТПГ плус цис платина група су биле око 1707,8, 722,5, 1033,8 и 367,5 мм3, респективно. Истог дана, тумори су сакупљени за визуелно посматрање (Слика 8Б) и поређење тежине (Слика 8Ц). ЦТПГ плус цисплатин је показао боље терапеутске ефекте на моделу миша тумора Х22 него ЦТПГ или сам цисплатин. Тежина тумора у групи која је примала ЦТПГ плус цисплатин била је нижа од оне у другим групама. Ови резултати сугеришу да антитуморска активност ЦТПГ-а и цисплатина резултира синергистичким ефектима.

Телесна тежина мишева је измерена да би одражавала здравствено стање мишева. Телесна тежина се значајно смањила након третмана цисплатином, што указује на озбиљну системску токсичност изазвану цисплатином.35 У поређењу, ЦТПГ у комбинацији са цисплатином значајно је побољшао губитак телесне тежине изазван цисплатином, док је ЦТПГ(Цистанцхе Тубулоса Пхенилетханоид Глицосидес) сам није имао значајан утицај на телесну тежину мишева (Слика 8Д). Органи укључујући слезину, срце, јетру, плућа, бубреге и тимус такође су изоловани да би се израчунали индекси органа. У поређењу са нетретираном групом, индекси слезине су значајно смањени и повећани код цисплатина и ЦТПГ-а, респективно. ЦТПГ плус цисплатин је повратио индексе слезине у поређењу са самим цисплатином. Индекси осталих органа нису показали значајну разлику међу свим групама (табела 2).ЦТПГ(Цистанцхе Тубулоса Пхенилетханоид Глицосидес) У комбинацији са Цисплатин Енханцед тхеИмунитетод туморских мишева.

Горе наведени резултати су показали да ЦТПГ(Цистанцхе Тубулоса Пхенилетханоид Глицосидес) појачао имунитетмишева и инхибирао апоптозу спленоцита индуковану цисплатином. Даље смо истражили да ли је антитуморски ефекат ЦТПГ плус цисплатина у корелацији са побољшаним имунитетом. У процесу настанка и развоја тумора, имунолошки систем тела игра важну функцију имунолошког надзора, а ћелијски имунитет посредован Т ћелијама игра кључну улогу. ЦД4 плус Т ћелије имају функцију помоћи ћелијском имунитету и хуморалном имунолошком одговору, а ЦД8 плус Т ћелије су главне ефекторске ћелије имуног одговора, које могу специфично да убијају циљне ћелије и играју важну улогу у имунитету тумора и антивирусном имунитету.32 Сакупљене су слезине мишева са туморима да би се открио број Т ћелија и Б ћелија помоћу проточне цитометрије. Учесталости и број Т ћелија укључујући ЦД4 плус и ЦД8 плус Т ћелије у групи ЦТПГ плус цисплатин били су значајно већи од оних у контролној (повећани 0,55 и 0,7 пута, респективно) и групе цисплатина (повећане 0,92 и 1,16 пута, респективно) (Слика 9А и Б). У поређењу са контролном групом, сам ЦТПГ је такође делимично повећао број ЦД4 плус и ЦД8 плус Т ћелија иако није било значајне разлике. Учесталост и број Б ћелија нису имали значајну разлику међу свим групама.

Супресорске ћелије изведене из мијелоида (МДСЦ) и регулаторне Т ћелије (Трегс) се шире у туморима и инхибирају антитуморске имуне одговоре; они потискују активацију и експанзију ЦД4 плус Т ћелија, функцију ефекторских Т ћелија, активацију и/или пролиферацију и формирање цитокина ЦД4 плус и ЦД8 плус Т ћелија, пролиферацију Б ћелија и производњу имуноглобулина и промену класе, цитотоксичне функције НК и Т ћелија природних убица (НКТ), и функција и сазревање ДЦ-а.36-38 Учесталости и број МДСЦ (ЦД11б плус Гр-1 плус ), макрофага (ЦД11б плус Гр -1−), и Трегс (природни Трегови: ЦД4 плус ЦД25 плус Фокп3 плус ; индуковани Трегс: ЦД4 плус ЦД25-Фокп3 плус) у слезини туморских мишева анализирани су проточном цитометријом. У поређењу са контролном групом, учесталост и број МДСЦ-а су се значајно смањили након ињекције самог цисплатина (смањен 1,56 пута) или у комбинацији са ЦТПГ-ом(Цистанцхе Тубулоса Пхенилетханоид Глицосидес) (смањен 0.62 пута). Број ЦД11б плус Гр-1− макрофага такође се значајно смањио иако није било значајне промене у њиховим фреквенцијама (Слика 9Ц). Поред тога, ЦТПГ(Цистанцхе Тубулоса Пхенилетханоид Глицосидес) сам третман и третман ЦТПГ плус цисплатином значајно су смањили учесталост индукованих Трег-ова (смањени {{0}}.33 и 0,37 пута, респективно) (Слика 9Д). Ови резултати сугеришу да би антитуморски ефекат ЦТПГ плус цисплатина могао бити у корелацији са побољшаним имунитетом који се карактерише повећаним бројем Т ћелија и смањеним бројем МДСЦ и Трег-ова.