Део Ⅰ: Могућа важност рецептора растворљивог лутеинизирајућег хормона током развоја и одраслог доба код дечака и мушкараца
Apr 06, 2023
Симпле Суммари
Репродуктивни хормони лутеинизирајући хормон (ЛХ) и хумани хорионски гонадотропин (хЦГ), оба агониста рецептора лутеинизирајућег хормона (ЛХЦГР), неопходни су за мушку репродукцију током развоја и одраслог доба. лХЦГР се експримира и стимулише производњу тестостерона Леидиговим ћелијама тестиса. У овој студији смо показали да је растворљиви ЛХЦГР присутан у крви, урину и семену здравих дечака и мушкараца, као и код пацијената са аберацијама полних хромозома. Показујемо како циркулишући нивои сЛХЦГР корелирају са пубертетским развојем, функцијом тестиса и квалитетом сперме, и демонстрирамо да се ЛХЦГР ослобађа из феталног људског не-гонадалног ткива. ХЦГ се ослобађа у серум преко тестиса и других органа, што указује на могућу екстрагонадну улогу ЛХ или хЦГ код дечака и мушкараца.
Апстрактан
Лутеинизирајући хормон (ЛХ) и хумани хорионски гонадотропин (хЦГ) су агонисти рецептора лутеинизирајућег хормона (ЛХЦГР), који регулише мушку репродуктивну функцију. лХЦГР се може ослободити у телесне течности. Желели смо да утврдимо да ли је растворљиви ЛХЦГР маркер функције гонада. Попречне, лонгитудиналне и интервентне студије су спроведене на 195 здравих дечака и мушкараца и 396 мушкараца са неплодношћу, недостатком или Клинефелтеровим синдромом (КС) како би се повезао ЛХЦГР мерен у серуму, семену, урину и артеријама јетре/бубрега са функцијом гонада. . лХЦГР је мерен ин витро и ин виво моделима људског ткива и ћелијских линија тестиса, моделима миша ксенографта, а резултати хуманог Вестерн блота показали су да су фрагменти ЛХЦГР откривени у серуму и ткивима гонада сличне величине коришћењем три различита антитела. Чак и након хуманих ксенотрансплантата, ЛХЦГР-ЕЛИСА није показала унакрсну реактивност међу врстама или неспецифичне реакције у серуму миша. Насупрот томе, сЛХЦГР је пуштен у медијум културе након културе бубрега и надбубрежне жлезде људског фетуса. Серум сЛХЦГР је био значајно нижи код здравих дечака у пубертету (п=0.0001). Код здравих мушкараца, сЛХЦГР у серуму је био у негативној корелацији са односом инхибина Б/ФСХ (-0.004,п=0.027). Код неплодних мушкараца, сперма сЛХЦГР је имала негативну корелацију са серумским ФСХ (0,006, п=0.009), концентрацијом сперме (-3,5, п=0,003) и укупним бројем сперматозоида (-3.2, п=0.007). Ињекција хЦГ је смањила сЛХЦГР у серуму и урину здравих мушкараца (п <0,01). У закључку, сЛХЦГР се ослобађа у телесне течности и повезан је са развојем пубертета и функцијом гонада. Циркулишући сЛХЦГР код мужјака орхидеја сугерише да сЛХЦГР у серуму може настати у не-гонадалним ткивима и да може функционисати у не-гонадалним ткивима. (Клиничка испитивања: НТЦ01411527, НЦТ01304927, НЦТ03418896).
Кључне речи
ЛХ рецептор; пубертет; развој; неплодност;Цистанцхе користи; екстра-гонадни ефекти; гонадотропини; фетални бубрег; фетална надбубрежна жлезда; ТЦАМ2; НТера2
Кликните овде да купитеЕкстракт биљке Цистанцхе
Увод
Лутеинизирајући хормон (ЛХ) и хумани хорионски гонадотропин (хЦГ) су оба агонисти рецептора лутеинизирајућег хормона (ЛХЦГР), који је неопходан за мушку репродукцију током развоја и одраслог доба [1]. ХЦГ је рецептор повезан са Г протеином за који се зна да се експримује у Леидиг-у, грануларном лутеину и мембранским ћелијама и моћан је регулатор производње полних стероида [1]. хЦГ је снажан и упоран агонист, али је само физиолошки важан током феталног развоја [2]. Осим код неких карцинома заметних ћелија и карцинома панкреаса, хЦГ се не производи у одраслом добу, иако је ранија студија открила ниско пулсирајуће лучење хЦГ-а хипофизе код одраслих мушкараца и жена. хЦГ се користи за лечење жена за изазивање овулације током лечења плодности, за мушкарце да стимулише синтезу тестостерона и потенцијалну сперматогенезу код хипогонадних мушкараца, или као дијагностички тест за производњу ендогеног тестостерона [4]. Аблација мишјег ЛХ рецептора (ЛХЦГР) доводи до драматичног смањења квалитета тестостерона и сперме [5], а неколико истраживачких група је идентификовало мутације и СНП у ЛХЦГР, показујући његов значај за људску репродуктивну функцију [6-8].
ЛХЦГР ген се налази на хромозому 2 и састоји се од 11 егзона, од којих егзони 1-10 кодирају екстрацелуларне структурне домене, а егзон 11 кодира 7 трансмембранских и интрацелуларних структурних домена [9]. Постоји неколико изоформи ЛХЦГР, од којих се за једну сматра да се лучи јер нема трансмембранско сидро [10]. Друга могућност је да ослобађање ЛХЦГР у телесне течности зависи од ензиматског цепања протеина на ћелијској мембрани, као што су АДАМ, ММП и други познати трансмембрански протеини који се цепају. Заиста, показало се да хЦГ специфично регулише ММП-2 и ММП-9 [11,12], а неколико студија је показало пост-транскрипциону регулацију ЛХЦГР [13,14]. Растворљиви ЛХЦГР (ЛХЦ) је мерен у женском серуму и фоликуларној течности помоћу ЕЛИСА платформе [15,16]. Специфичност антитела коришћених у ЕЛИСА тесту је потврђена експресијом различитих ЛХЦГР фрагмената у ЦХО ћелијама за локализацију епитопа и откривање експресије у људској плаценти [15-17]. сЛХЦГР је детектован у серуму помоћу ЛЦ-МС/МС [18]. концентрације сЛХЦГР у серуму код жена биле су повезане са лечењем плодности, прееклампсијом, превременим порођајем и трудноћом код деце са стопом имплантације са Дауновим синдромом [15,16], али до сада нису потврђене од стране других истраживачких група. Колико знамо, сЛХЦГР никада није описан у телесним течностима здравих мушкараца, дечака адолесцената у развоју или мушкараца са аберацијама полних хромозома. сЛХЦГР може да функционише у мушкој циркулацији као маркер функције гонада кроз транспорт везивања високог афинитета или промену активности ЛХ или хЦГ.
Материјали и методе
1. Кохорте
Младићи из опште популације
У Данској, сви здрави младићи старији од 18 година морају да се подвргну физичком прегледу како би се утврдила њихова подобност за војну службу. Од 1996. године, око 300 регрута, који представљају општу популацију, сваке године се прегледа на квалитет сперме. Сви су дали узорке сперме, попунили упитник, урадили ултразвучни преглед тестиса и вадили узорке крви. Узорци серума и семена из биобанке, као и ултразвучне процене и информације о БМИ и старости од 148 мушкараца анкетираних 2013. и 2014. године, укључени су у актуелну студију (одобрење Етичког комитета: Х-КФ-289428).
Здрави дечаци пре и после пубертета
Копенхашка студија адолесценције је комбинована студија попречног пресека и лонгитудиналне студије здраве данске деце [20]. Из насумично одабраних јавних школа, 6203 деце је позвано да учествује. Укупан број учесника био је 2020 деце. Лонгитудинално праћење 209 деце (101 дечак) је спроведено сваких 6 месеци и укључивало је физички преглед, Таннерову процену пубертета и узорке крви и урина. Тридесет и шест дечака са лонгитудиналним праћењем укључено је у ову студију ради процене сЛХЦГР током пубертета (клиничко испитивање: НТЦ01411527).
Неплодни мушкарци без озбиљних коморбидитета
Цопенхаген-Боне-Гонад Студи је кохортна студија на 307 неплодних мушкараца без тешких коморбидитета који су похађали нашу мушку клинику од 2011. до 2015. године, укључујући укупно 1427 мушкараца [21,22]. Сви мушкарци су упућени на нашу клинику због лошег квалитета сперме и жеље за родитељством. Сви су подвргнути физичком прегледу, укључујући ултразвук тестиса, узети су узорци крви и дати узорке сперме. Специјалиста је добио њихову детаљну историју болести. Истраживачи су пратили мушкарце 150 дана и узимали су витамин Д или плацебо као што је претходно описано. Сви подаци дати у овој студији су из почетне посете пре интервенције и све укључене варијабле су биле унапред дефинисане (клиничко испитивање: НЦТ01304927).
Стандардизед Цистанцхе
Мушкарци и дечаци са Клинефелтеровим синдромом и пацијенти са анорхијом
Идентификовали смо 64 дечака и мушкарца са Клинефелтеровим синдромом (КС), 47 након пубертета и 16 пре пубертета, дефинисаних према Таннеру, из наше мушке клинике. Имали смо тачне хромозомске аберације, историју болести, статус пубертета и информације о серуму доступне за све. 7 дечака је подвргнуто лонгитудиналном праћењу са редовним клиничким прегледима и узорковањем крви пре и током пубертета.
Такође смо укључили 8 мушкараца са нормалним бројем хромозома којима су уклоњени билатерални тестиси због претходних стања: карцином заметних ћелија тестиса (н=4), дифузни рак простате (н=1), билатерални крипторхизам и педијатријска орхиектомија ( н=1), билатерална неоплазија герминативних ћелија ин ситу (н=1) и узнапредовали рак тестиса након уклањања преосталих тестиса услед трауме (н=1).
Одрасли подвргнути мерењу протока Спланцхницус
Укључили смо три мушкарца и три жене у постменопаузи са нормалном функцијом јетре који су примљени због сумње на мезентеричну исхемију и упућени на мерење висцералног крвотока, али нису показали мезентеричну исхемију. Узорци крви су узети истовремено из јетре, бубрега, феморалне вене и одговарајуће артерије (одобрење Етичког комитета: Х.18048245)
Интервентна студија: Здрави мушкарци изложени хуманом хорионском гонадотропину
Једанаест здравих мушкараца је регрутовано да учествују у клиничкој интервенцији путем најаве данског Ригсхоспиталета. Добровољци су третирани са 5000 ИУ хуманог хорионског гонадотропина и измерена је њихова максимална производња ендогеног тестостерона упоређивањем основних узорака крви и урина са контролним узорцима прикупљеним 8, 24 и 72 сата након ињекције хЦГ (клиничко испитивање: НЦТ03418896).
2. Мишеви, људско ткиво и ћелијске линије
Два соја ћелија рака тестиса код људи НТера-2 и ТЦам{1}}, који представљају ембрионални карцином и семином, коришћена су и култивисана као што је претходно описано [23].
Серуми су сакупљени од голих мишева без тумора (ВТ) и ТЦам-2 ксенографских голих мишева третираних вектором, ЛХ или хЦГ, респективно (Инспекторат за експериментисање на животињама, Копенхаген, Данска, број лиценце: 2012-15-2934-00051) .
Људска фетална ткива у првом тромесечју сакупљена су из донираних женских ткива након планираних абортуса. Фетални бубрег и ткиво надбубрежне жлезде фетуса култивисани су у моделима капи суспензије као што је претходно описано и медијум је сакупљен за анализу [24,25] (одобрење Етичког комитета: Х-1-2012-007).
Узорци тестиса одраслих су добијени од мушкараца са овариектомијом са раком тестиса (одобрење Етичког комитета: Х{{0}}). Перитуморално ткиво које садржи немалигне области чувано је на - 80◦ Ц или фиксирано преко ноћи на 4◦ Ц у формалину или модификованом Стиеве-овом фиксатору (200 мЛ 37% формалдехида, 40 мЛ сирћетне киселине у 1 Л 0,05 М фосфата пуфер, пХ 7,4).
3. Биохемијске анализе
Детекција укупног сЛХЦГР у серуму, сперми, урину и различитим медијумима за културу обављена је у процесу валидације коришћењем ЕЛИСА комплета из Нове холандске лабораторије за биомаркер катализатор (НБЦЛ) коришћењем антитела ЛХР029 против хуманог ЛХЦГР и мерењем свих ових више пута. ЕЛИСА тест је имао границу детекције од 0,01 пмол/мЛ и максимални ниво од 15,55 Шест мушкараца из опште популације са нивоима сЛХЦГР изнад горње границе детекције су разблажили и поново измерили узорке, показујући нивое до 30 пмол/мЛ. перформансе ЕЛИСА платформе су детаљно описане раније [15-17].
Цистанцхе суплементи
Такође смо поставили две различите интерне ЕЛИСА анализе, које су поставили наши лабораторијски техничари, а све даље реагенсе је обезбедио Оригин Биомаркерс Лтд, УК, према њиховом предложеном подешавању [26]. Прво, циркулишући сЛХЦГР везан за хЦГ је откривен коришћењем сендвич ЕЛИСА комплета са антителима 5А10Ц9 (ПроМаб) и ам0{{20}}904пун ( ОриГене) усмерен против ЛХЦГР и хЦГ, респективно. Друго, на сличан начин смо користили интерну ЕЛИСА тесту за одређивање укупних артеријских и венских узорака јетре, бубрега и доњих екстремитета од шест одраслих сЛХЦГР, где смо користили исто антитело ЛХР029 (НБЦЛ Холланд) против сЛХЦГР. Тестирана су два различита протокола. Сва мерења сЛХЦГР описана у овом раду су обављена коришћењем НБЦЛ ЕЛИСА, осим за хЦГ-сЛХЦГР комплекс и артеријске/венске узорке из органа описаних изнад. Код здравих дечака, тестостерон је анализиран коришћењем РИА комплета обложеног ДПЦ-ом (Диагностиц Продуцтс, Лос Анђелес, Калифорнија) са границом детекције (ЛОД) од 0,23 нмол/Л и ЦВ од 8,6 процената коришћењем имунофлуоресценције са временским разлучивањем. (Делфиа; Валлац, Турку, Финска), граница детекције је била 0,20 нмол/л са ЦВ од 6,4 процената. Код одраслих, тестостерон и глобулин за везивање полних хормона (СХБГ) су анализирани хемилуминисцентним имунолошким тестом (Аццесс, Бецкман Цоултер, САД) са ЛОД од 0,35 нмол/Л и 0,33 нмол/Л, респективно. Нивои ФСХ и ЛХ у серуму и урину су мерени коришћењем имунофлуоресценције са временским разлучивањем (Делфиа; Валлац, Турку, Финска) са границама детекције од 0,06 и 0,05 ИУ/Л, респективно, и ЦВ и лт; оба по 5 процената. Тест инхибина Б је изведен коришћењем специфичног билатералног имуноесеја ензима (инхибин Б генИИ, Бецкман Цоултер, САД) ЦВ <11 процената. За АМХ смо користили Бецкман Цоултер ензимски имунотест (Иммунотецх, Бецкман Цоултер, Марсеиллес, Француска) и ЦВ <8 процената. Коначно, ИГФ1 и ИГФ-БП3 су одређени коришћењем хемилуминисцентног теста ИДС-иСИС имунодијагностичког система са ЦВ од 10 процената и 9 процената, респективно. Слободни естрадиол је израчунат коришћењем Мазерове константе, а слободни тестостерон (ФТ) је израчунат коришћењем Вермеуленове формуле [27,28].
Анализа семена
Здрави младићи и неплодни одрасли учесници дали су узорке сперме и добили информације које су сами пријавили о трајању апстиненције од ејакулације. Анализу сперме су урадили обучени техничари као што је претходно описано [19]. Запремина сперме је процењена вагањем. За процену одрживости сперматозоида, 10 μЛ добро измешаних реплика сперме је стављен на плочице и прегледан под микроскопом × 400к на загрејаном делу од 37◦ Ц. Сперматозоиди су класификовани као напредно одрживо (СЗО класа а плус Б), непрогресивно одрживо (класа Ц) или неактивно (класа Д). Коришћен је просек две процене одрживости. Да би се проценила концентрација сперме, узорци су разблажени у дестилованом воденом раствору од 0,6 мол/Л НаХЦО3 и 0,4 процента (в/в) формалдехида, а затим процењени коришћењем Буркер-Турк хемоцитометра и коришћен је просек оцена. Пребројане су само сперматозоиде са реповима. Коначно, припремљени су брисеви и обојени Папа бојом, а морфологија сперме је процењена стриктно према критеријумима [29].
Вестерн блоттинг
Људско ткиво тестиса је хомогенизовано у пуферу за лизу, разблажено у СДС пуферу за пуњење, а затим загревано на 95°Ц током 5 мин. Узорци су стављени на 4-20 процената готових полиакриламидних гелова (БиоРад, цат# 456-8096) и стављени на 100 В током 1 х да би се одвојили протеини. Да би се открио сЛХЦГР у серуму, албумин и ИгГ су уклоњени коришћењем комплета за уклањање албумина/ИгГ Пиерце (Тхермо Сциентифиц, Валтхам, МА, УСА, кат. бр. 89875) пре стављања узорака на гел. након гел електрофорезе, протеини су пребачени на поливинилиден дифлуоридне мембране помоћу влажног упијача (БиоРад). Мембране су затворене у трис-пуферисаном физиолошком раствору и 5% обраног сувог млека током 1 сата, затим инкубиране преко ноћи на 4°Ц са примарним антителима и 1 сат на собној температури са секундарним антителима. Мембране су испране појачаном хемилуминисценцијом (Тхермо Сциентифиц Супер Сигнал Вест Фемто Макимум Сенситиве Субстрате, Цат# 34095) и фотодетектором са цхемиДоц МП системом за снимање (БиоРад, Цат# 17001402). За детекцију ЛХЦГР у ткиву и серуму коришћена су три различита антитела: Авива Систем Биологи (ОАСГ04237); НБЦЛ Холланд, исто антитело као у серумском ЕЛИСА комплету (ЛХР029) и Санта Цруз Биотецхнологи (Далас, Тексас, САД, СЦ- 26341). -2 микроглобулин је коришћен као контрола пуњења.
Имунохистоцхемистри
Имунохистохемија је изведена као што је претходно описано [25]. Укратко, пресеци су фиксирани модификованим чврстим фиксативом, девоскани и рехидрирани. Екстракција антигена је изведена у аутоклаву који садржи цитратни пуфер за екстракцију (10 мМ, пХ 6.0). Ендогена пероксидаза је блокирана са 3 процента (в/в) Х2О2 у метанолу током 30 мин. Између сваког корака, делови су испрани у ТБС. Секције су инкубиране са 0,5% БСА коњског серума током 30 минута, након чега је уследила инкубација преко ноћи са два различита примарна антитела током 1 сата на собној температури (ЛХР029 за ВБ/ЕЛИСА, Санта Цруз Биотецхнологи СЦ- 25828). Секције су инкубиране са секундарним антителима 30 минута. Слике су визуелизоване са аминоетил карбазолом (АЕЦ, Инвитроген, Лифе Тецхнологиес/Тхермо Фисхер Сциентифиц, Валтхам, МА, УСА). Негативне контроле су биле без примарних антитела. Ниједна негативна контрола није обојена. Контрабојење је извршено Маиеровим хематоксилином, а монтажа је извршена Акуатек-ом. Секције су процењене на микроскопу Никон Мицропхот-ФКСА (Никон Цорпоратион, Мелвилле, НИ, УСА). Коначна анализа је извршена коришћењем софтвера НДПвиев верзија 1.2.36 (Хамаматсу Пхотоницс, Ивата Цити, Јапан.
Користи екстракта цистанцхе за бубреге
РЕФЕРЕНЦЕ
1. Дуфау, МЛ Рецептор лутеинизирајућег хормона. Анну. Рев. Пхисиол. 1998, 60, 461–496.
2. Рао, ЦВ Диференцијална својства везивања хуманог хорионског гонадотропина и хуманог лутеинизирајућег хормона за плазма мембране жутог тела говеда. Ацта Ендоцринол. 1979, 90, 696–710.
3. Оделл, ВД; Гриффин, Ј. Пулсативно лучење хуманог хорионског гонадотропина код нормалних одраслих особа. Н. Енгл. Ј. Мед. 1987, 317, 1688–1691.
4. Банг, АК; Нордкап, Л.; Алмструп, К.; Прискорн, Л.; Петерсен, ЈХ; Рајперт-Де Мејтс, Е.; Андерссон, А.-М.; Јуул, А.; Јøргенсен, Н. Динамиц ГнРХ и хЦГ тестирање: Успостављање нових дијагностичких референтних нивоа. ЕУР. Ј. Ендоцринол. 2017, 176, 379–391.
5. Зханг, ФП; Поутанен, М.; Вилбертз, Ј.; Хухтаниеми, И. Нормалан пренатални, али заустављен постнатални сексуални развој код мишева нокаутом рецептора лутеинизирајућег хормона (ЛуРКО). Мол. Ендоцринол. 2001, 15, 172–183.
6. Бруистерс, М.; Цхристин-Маитре, С.; Верхоеф-Пост, М.; Султан, Ц.; Аугер, Ј.; Фаугерон, И.; Ларуе, Л.; Лумбросо, С.; Тхеммен, АПН; Боуцхард, П. Нова мутација спајања ЛХ рецептора је одговорна за мушки хипогонадизам са субнормалном производњом сперме у пропоситусу и неплодност са редовним циклусима код погођене сестре. Зујати. Репрод. 2008, 23, 1917–1923.
7. Латронико, АЦ; Арнхолд, ИЈП Инактивирајуће мутације рецептора хуманог лутеинизирајућег хормона код оба пола. Семин. Репрод. Мед. 2012, 30, 382–386.
8. Симони, М.; Туттелманн, Ф.; Мицхел, Ц.; Боцкенфелд, И.; Ниесцхлаг, Е.; Громолл, Ј. Полиморфизми гена лутеинизирајућег хормона/хорионског гонадотропина рецептора: Повезаност са слабо спуштеним тестисима и мушком неплодношћу. Пхармацогенет. Геном. 2008, 18, 193–200.
9. Асколи, М.; Фанелли, Ф.; Сегалофф, ДЛ Тхе лутропин/цхориогонадотропин рецептор, а 2002 перспецтиве. Ендоцр. Рев. 2002, 23, 141–174.
10. Тена-Семпере, М.; Зханг, ФП; Хухтаниеми, И. Перзистентна експресија скраћеног облика рибонуклеинске киселине преносиоца лутеинизирајућег хормона у тестисима пацова након селективне деструкције Леидигових ћелија етилен метан сулфонатом. Ендокринологија 1994, 135, 1018–1024.
11. Флухр, Х.; Бисцхоф-Ислами, Д.; Крензер, С.; Лицхт, П.; Бисцхоф, П.; Зигмунт, М. Хумани хорионски гонадотропин стимулише матрикс металопротеиназе-2 и -9 у цитотрофобластним ћелијама и смањује ткивни инхибитор металопротеиназа-1, -2 и -3 у децидуализованим ћелијама стромалне ћелије ендометријума. Фертил. Стерил. 2008, 90, 1390–1395.
12. Лицхт, П.; Флухр, Х.; Неувингер, Ј.; Валлвиенер, Д.; Вилдт, Л. Да ли је хумани хорионски гонадотропин директно укључен у регулацију људске имплантације? Мол. Ћелија. Ендоцринол. 2007, 269, 85–92.
13. Ли, И.-Кс.; Гуо, Кс.; Гулаппа, Т.; Менон, Б.; Менон, КМЈ СРЕБП игра регулаторну улогу у експресији мРНА ЛХ/хЦГ рецептора у људским ћелијама гранулозе-лутеина. Ј. Цлин. Ендоцринол. Метаб. 2019.
14. Менон, КМЈ; Менон, Б.; Ванг, Л.; Гулаппа, Т.; Харада, М. Молекуларна регулација експресије гонадотропин рецептора: Однос према метаболизму стерола. Мол. Ћелија. Ендоцринол. 2010, 329, 26–32.
15. Цхамберс, АЕ; Гриффин, Ц.; Наиф, СА; Миллс, И.; Миллс, ВЕ; Сингелаки, А.; Николаидес, КХ; Банерјее, С. Квантитативне ЕЛИСА анализе за ЛХЦГР растворљив у серуму и хЦГ-ЛХЦГР комплекс: Потенцијална дијагностика у скринингу трудноће у првом триместру за мртворођеност, Даунов синдром, превремени порођај и прееклампсију. Репрод. Биол. Ендоцринол. 2012, 10, 113.
16. Цхамберс, АЕ; Наиини, КП; Миллс, ВЕ; Лоцквоод, ГМ; Банерјее, С. Циркулишући ЛХ/хЦГ рецептор (ЛХЦГР) може идентификовати пацијенте пре третмана ИВФ који имају ризик од ОХСС-а и лоше имплантације. Репрод. Биол. Ендоцринол. 2011, 9, 161.
17. Цхамберс, АЕ; Станлеи, ПФ; Рандева, Х.; Банерјее, С. Ослобађање растворљивог ЛХ/хЦГ рецептора (ЛХЦГР) посредовано микровезикулама из трансфектованих ћелија и експлантата плаценте. Репрод. Биол. Ендоцринол. 2011, 9, 64.
18. Гао, ХЈ; Цхен, ИЈ; Зуо, Д.; Ксиао, ММ; Ли, И.; Гуо, Х.; Зханг, Н.; Цхен, РБ Квантитативна протеомска анализа за високу пропусност скрининга диференцијалних гликопротеина у серуму хепатоцелуларног карцинома. Цанцер Биол. Мед. 2015, 12, 246–254.
19. Прискорн, Л.; Нордкап, Л.; Банг, АК; Краусе, М.; Холмбое, СА; Егеберг Палме, ДЛ; Винге, СБ; Мøруп, Н.; Царлсен, Е.; Јоенсен, УН; ет ал. Просечан број сперматозоида остаје непромењен упркос смањењу пушења код мајки: Резултати велике студије пресека са годишњим истраживањима током 21 године. Зујати. Репрод. 2018, 33, 998–1008.
20. Сøренсен, К.; Аксглаеде, Л.; Петерсен, ЈХ; Јуул, А. Недавне промене у времену пубертета код здравих данских дечака: Асоцијације са индексом телесне масе. Ј. Цлин. Ендоцринол. Метаб. 2010, 95, 263–270.
21. Бломберг Јенсен, М.; Лаваетз, ЈГ; Петерсен, ЈХ; Јуул, А.; Јøргенсен, Н. Ефекти суплементације витамина Д на квалитет сперме, репродуктивне хормоне и стопу живог рађања: Рандомизовано клиничко испитивање. Ј. Цлин. Ендоцринол. Метаб. 2018, 103, 870–881.
22. Бломберг Јенсен, М.; Гернер Лаваетз, Ј.; Андерссон, А.-М.; Петерсен, ЈХ; Нордкап, Л.; Банг, АК; Екбом, П.; Јоенсен, УН; Прӕториус, Л.; Лундстрøм, П.; ет ал. Недостатак витамина Д и низак ниво јонизованог калцијума повезани су са квалитетом сперме и нивоима сексуалних стероида код неплодних мушкараца. Зујати. Репрод. 2016, 31, 1875–1885.
23. Лорензен, М.; Ниелсен, ЈЕ; Андреасен, ЦХ; Јуул, А.; Тофт, БГ; Рајперт-Де Мејтс, Е.; Даугаард, Г.; Бломберг Јенсен, М. Рецептор лутеинизирајућег хормона је изражен у туморима заметних ћелија тестиса: могуће импликације за раст и прогнозу тумора. Ракови 2020, 12, 1358.
24. Елдруп, Е.; Тхеиладе, С.; Лорензен, М.; Андреасен, ЦХ; Поулсен, КХ; Ниелсен, ЈЕ; Хансен, Д.; Ел Фасси, Д.; Берг, ЈО; Баги, П.; ет ал. Хиперкалцемија након ињекција козметичког уља: разоткривање етиологије, патогенезе и тежине. Ј. Боне Минер. Рес. 2020, 36, 322–333.
25. Јøргенсен, А.; Мацдоналд, Ј.; Ниелсен, ЈЕ; Килцоине, КР; Перлман, С.; Лундвалл, Л.; Лангхофф Тхуесен, Л.; Јуул Харе, К.; Фредериксен, Х.; Андерссон, А.-М.; ет ал. Нодална сигнализација регулише развој заметних ћелија и успостављање семенских врпца у тестису људског фетуса. Целл Реп. 2018, 25, 1924–1937.е4.
26. Цхамберс, АЕ; Фаирбаирн, Ц.; Гаудоин, М.; Миллс, В.; Воо, И.; Пандиан, Р.; Станцзик, ФЗ; Цхунг, К.; Банерјее, С. Растворљиви ЛХ-ХЦГ рецептор и естрадиол као предиктори трудноће и живог рођења у ИВФ. Репрод. Биомед. Онлајн 2019, 38, 159–168.
27. Вермеулен, А.; Вердонцк, Л.; Кауфман, ЈМ Критичка процена једноставних метода за процену слободног тестостерона у серуму. Ј. Цлин. Ендоцринол. Метаб. 1999, 84, 3666–3672.
28. Мазер, НА Нова метода прорачунске табеле за израчунавање слободних серумских концентрација тестостерона, дихидротестостерона, естрадиола, естрона и кортизола: са илустративним примерима из мушке и женске популације. Стероиди 2009, 74, 512–519.
29. Менквелд, Р.; Стандер, ФС; Котзе, ТЈ; Кругер, ТФ; ван Зил, ЈА Процена морфолошких карактеристика хуманих сперматозоида према строжим критеријумима. Зујати. Репрод. 1990, 5, 586–592.
Ли Јуел Мортенсен1, Метте Лорензен1, Анне Јøргенсен2, Јакоб Албретхсен2, Ниелс Јøргенсен2,Сøрен Мøллер3,4, Ана-Марија Андерссон2, Андерс Јуул2,4и Мартин Бломберг Јенсен1,5
1. Група за скелетну, минералну и гонадалну ендокринологију, Универзитетско одељење за раст и репродукцију, Ригсхоспиталет, 2100 Копенхаген, Данска; li.juel.mortensen@regionh.dk (ЉМ); метте.лорензен.01@регионх.дк (МЛ)
2. Одељење за раст и репродукцију и Међународни центар за истраживање и истраживачку обуку у ендокрином поремећају мушке репродукције и здравља деце (ЕДМаРЦ), Ригсхоспиталет, Универзитет у Копенхагену, Блегдамсвеј 9, 2100 Копенхаген, Данска; Анне.Јоергенсен.02@регионх.дк (АЈ); Jakob.Christian.Albrethsen@regionh.dk (ЈА); Niels.Joergensen@regionh.dk (Њ); Ана-Maria.Andersson@regionh.dk (А.-МА); Anders.Juul@regionh.dk (АЈ)
3. Центар за функционално и дијагностичко снимање и истраживање, Одељење за клиничку физиологију и нуклеарну медицину 260, болница Хвидовре, 2650 Копенхаген, Данска; Soeren.Moeller@regionh.dk
4. Катедра за клиничку медицину, Факултет здравствених наука Универзитета у Копенхагену, 2200 Копенхаген, Данска
5. Одсек за истраживање костију и минерала, Харвард Сцхоол оф Дентал Медицине/Харвард Медицал Сцхоол, Бостон, МА 02115, САД
