Патогени механизам -синуклеина у ХиПСЦ моделу Паркинсонове болести

Апстрактан

-синуклеин је све истакнутији актер у патологији разних неуродегенеративних стања. Паркинсонова болест (ПД) је неуродегенеративни поремећај који погађа углавном допаминергичке (ДА) неуроне у супстанцији нигра мозга. Типично за патологију ПД је налаз агрегација протеина названих „Левијева тела“ у захваћеним регионима мозга. -синуклеин је укључен у многа болесна стања укључујући деменцију са Левијевим телима (ДЛБ) и Алцхајмерову болест. Међутим, ПД је најчешћа синуклеинопатија и наставља да буде значајан фокус истраживања ПД у погледу патологије -синуклеинског Левијевог тела. Мутације у неколико гена су повезане са развојем ПД, укључујући СНЦА, који кодира -синуклеин. Различити системи модела су коришћени за проучавање физиологије и патофизиологије синуклеина у покушају да се ближе повежу са патологијом ПД. Ови модели обухватају ћелијске и животињске системе који истражују трансгене технологије, експресију вирусних вектора, приступе нокдауну и моделе за проучавање потенцијалних ефеката -синуклеина налик прионским протеинима. Тренутни преглед се фокусира на моделе плурипотентних матичних ћелија изазваних људима (иПСЦ) са посебним фокусом на мутације или умножавање СНЦА гена. иПСЦ су технологија која се брзо развија са огромним обећањима у проучавању нормалне физиологије и моделирања болести ин витро. Способност да се одржи генетска позадина пацијента и реплицирају слични фенотипови ћелија чини иПСЦ моћним алатом у проучавању неуролошких болести. Овај преглед се фокусира на тренутна сазнања о физиолошкој функцији -синуклеина, као и на његовој улози у патогенези ПД на основу хуманих иПСЦ модела.

Кључне речи

-патогенеза синуклеина; хиПСЦ модели; Паркинсонова болест; Неуродегенеративне болести;Цистанцхе користи.

Кликните овде да купитеЦистанцхе суплементи

Увод

Неуродегенеративне болести су група прогресивних поремећаја које карактерише смрт неуронских ћелија, искључујући стања првенствено повезана са исхемијом, инфекцијом или малигнитетом [1]. Неуродегенеративна стања су најчешћи поремећаји повезани са старењем код људи, који постају све распрострањенији и погађају милионе људи широм света. Упркос значајним научним и клиничким истраживачким напорима, ефикасне терапије још увек недостају. Стога је од виталног значаја да премостимо празнине у нашем разумевању физиолошких и патолошких процеса који су у основи неуродегенерације како би се олакшао развој циљаних и ефикасних стратегија лечења. У последњих 25 година идентификовани су многи ћелијски и молекуларни механизми који су повезани са дегенерацијом неурона, а најистакнутији међу њима су депозиција протеинских агрегата [2], мутације митохондријалне ДНК [3] и оксидативни стрес [4]. Формирање абнормалних агрегата физиолошких протеина изазвало је велико интересовање и идентификовано је као кључни знак за многе неуродегенеративне болести, које су сада груписане у оно што се назива протеинопатије [5]. Неуродегенеративне протеинопатије представљају групу болести које су дефинисане неодговарајућом агрегацијом, депозицијом и/или акумулацијом нормалног протеина који има значајну нормалну физиолошку функцију. Протеинопатије су класификоване на основу главног протеина који се налази у овим наслагама, тако да тауопатије садрже претежно τ протеин, а ТДП-43 протеинопатије садрже ТДП-43 [6]. -синуклеин је кључни члан ове групе протеина укључених у неуродегенеративне болести.

Показало се да синуклеин игра кључну улогу у патологији различитих неуродегенеративних стања, груписаних као синуклеинопатије. -синуклеин је кодиран СНЦА геном који се налази на хромозому 4 (4к21.3-22) и мутације у овом гену показују аутозомно доминантни образац наслеђивања. Показало се да мутације овог гена доводе до акумулације и агрегације -синуклеина, што се јавља код многих типова неуродегенеративних стања [7–9]. Добро познате болести као што су Паркинсонова болест (ПД), деменција са Левијевим телима (ДЛБ) и мултипла системска атрофија (МСА) су обухваћене у овој групи, као и мање уобичајене патологије као што су неуроаксоналне дистрофије, чиста аутономна инсуфицијенција (ПАФ) или поремећај понашања у РЕМ спавању [10].

Тренутно постоји широк спектар модела система који су доступни за помоћ у проучавању синуклеинопатија. Животињски модели пружају драгоцене информације о променама у понашању које су повезане са променама неурона, али разлике у врстама стварају препреку за добијање фенотипова специфичних за болести које се могу превести код људи. Ћелијски модели имају предност у томе што дозвољавају да се патологија брзо развија, исплативи су и могу се лакше генетски манипулисати, што постаје интересантно, посебно у молекуларним и ћелијским студијама. У последњих 14 година, појава технологије индукованих плурипотентних матичних ћелија (иПСЦ) увелико је унапредила наше разумевање молекуларних механизама болести специфичних за пацијенте, као и развој потенцијалних нових терапеутика и скрининга лекова. Ова технологија је заснована на способности да се репрограмирају фибробласти специфични за болест форсирањем експресије специфичних фактора транскрипције (најчешће Оцт4, Сок2, цМиц и Клф4), што резултира плурипотентним стањем. Након тога, ове плурипотентне ћелије се затим диференцирају у специфичне соматске зреле ћелије од интереса [11]. Овај тип приступа је опште познат као моделирање „болести у посуди“ [12] (Слика 1). Ова методологија има предност у одржавању комплетне генетске позадине пацијента и омогућава проучавање утицаја одређених кључних мутација на патофизиологију, омогућавајући карактеризацију кључних фенотипова заснованих на ћелијским мутацијама у комплексним болестима као што је ПД [13].

Допаминергички (ДА) неурони су главни тип ћелије који се користи за проучавање неуродегенерације у ПД користећи неколико различитих протокола. Већина протокола укључује присилну експресију ЛМКС1А, који кодира фактор транскрипције критичан за идентитет вентралног средњег мозга, узимајући приступ инхибицији са двоструком СМАД. Овај процес се заснива на употреби једињења Ноггин и СБ431542 која делују као инхибитори фамилије протеина за претварач сигнала СМАД (акроним од фузије Цаенорхабдитис елеганс СМА гена и Дросопхила МАД, мајке против декапентаплегика), који су кључни регулатори раст ћелија [14–16]. У новије време, диференцијација може бити усмерена присилном прекомерном експресијом фактора АСЦЛ1, НУРР1 и ЛМКС1А [17]. Репрограмирање ћелија пацијената са ПД и диференцијација у ДА неуроне је детаљно прегледано на другим местима [18,19].

Узимајући у обзир драгоцене информације које нуде иПСЦ модели и важност -синуклеина у неуродегенерацији, овај преглед ће се фокусирати на знање стечено проучавањем СНЦА мутација у системима иПСЦ модела, истражујући агрегацију и токсичност -синуклеина. У овом контексту, биће размотрена нека релевантна питања: да ли су мутације у СНЦА гену једини покретач агрегације -синуклеина? Који је патогени ефекат СНЦА мутација различит од агрегације -синуклеина?

-синуклеин: структура и нормална физиолошка функција

На основу постојеће литературе, -синуклеин је 14-кДа протеин, свеприсутно експримиран у пресинаптичким терминалима мозга, претежно у ексцитаторним неуронима, први пут објављен 1988. [20]. Природна структура протеина -синуклеина је још увек извор дебате, али се сматра природно несавијеним протеином у нормалним физиолошким условима [21,22]. Стога његова структура може да варира у зависности од промена у локалном окружењу [23], где може да ступа у интеракцију са липидима [24] или металима [25]. Сматра се да су промене у структури -синуклеина повезане са његовим патолошким погрешним савијањем и агрегацијом која се обично види код синуклеинопатија [26]. На пример, примећено је да формирање олигомера -синуклеина изазвано мутацијама као што су Е35К и Е57К утиче на пропустљивост и интегритет ћелијске мембране промовишући смрт ћелије [27]. Док многи фактори могу допринети аберантној производњи и агрегацији -синуклеина, један од главних фактора су мутације СНЦА гена који кодира -синуклеин и овај ген је била прва мутација пријављена у аутозомно-доминантној ПД [28] са каснијом асоцијацијом на ДЛБ [ 8]. Прецизна физиолошка функција -синуклеина је још увек непозната, али су идентификоване различите улоге повезане са синаптичком функцијом. Ове функције укључују груписање везикула, рециклирање и одржавање резервног базена синаптичких везикула [29,30]. Поред тога, показало се да -синуклеин промовише формирање СНАРЕ комплекса који појачава ослобађање неуротрансмитера [31]. Поред тога, он је такође укључен у регулацију унутарћелијске трговине кроз интеракцију са више чланова породице Раб ГТПазе [32], као и у нуклеацији микротубула и брзини раста [33]. Друге студије засноване на подацима из ПД мозга показују да -синуклеин такође може да регулише нивое допамина утичући на активност ДАТ [34]. Повећани нивои допамина могу довести до оштећења ћелија као последица оксидативног стреса [35]. Недавно је показано да -синуклеин инхибира фосфолипазу Д (ПЛД) која је одговорна за конверзију фосфатидилхолина у фосфатидну киселину, модулирајући неуронске процесе као што су раст, диференцијација и ослобађање неуротрансмитера и неуродегенерација ДА [36,37]. Такође је пријављено да синуклеин игра улогу у неуроинфламацији покретањем имунолошког одговора. Екстрацелуларни -синуклеин може да изазове активацију и пролиферацију имуних ћелија, секрецију цитокина и фагоцитозу [38,39].

-фенотип синуклеина у СНЦА-мутираним моделима изведеним из иПСЦ-а

иПСЦ-ови нуде неколико предности у односу на друге моделне системе, са неограниченом залихама клинички релевантних фенотипских ћелија људског порекла уз задржавање оригиналних геномских карактеристика пацијента, укључујући мутације гена или абнормалности хромозома. Главне СНЦА варијанте повезане са генетском ПД, укључујући трипликације/дупликације [40] и мутације мисенсе тачке као што су А53Т [41], А30Т [42] или Е46К [9], моделоване су у иПСЦ. Због велике преваленције трипликација или А53Т СНЦА мутације код пацијената са ПД, велика већина иПСЦ модела до сада је фокусирана на ова два типа мутација, а њихови карактеристични фенотипови су сажети на слици 2.

иПСЦ модели СНЦА трипликације

Умножавање СНЦА гена је повезано са млађим узрастом почетка ПД и повећаном озбиљношћу симптома. Трипликације СНЦА резултирају стварањем додатних копија СНЦА гена и прекомерном експресијом -синуклеина дивљег типа што доводи до формирања токсичних агрегата и широко распрострањеног оштећења неурона [43], што указује на дозно зависан ефекат -синуклеина у узрочности болести. Носиоци СНЦА трипликације имају тежи фенотип и показују бржу прогресију болести него носиоци дуплирања и у многим случајевима показују додатне моторичке карактеристике [44]. Неуропатолошки преглед мозга пацијената са ПД са трипликацијом СНЦА показује тешку дегенерацију црне супстанце, значајан губитак неурона и вакуолацију у темпоралном кортексу, као и широко распрострањену акумулацију Левијевог тела [45]. Ова патологија се огледа у иПСЦ изведеним ДА неуронима са СНЦА трипликацијом, који показују повећане нивое мРНА -синуклеина, што резултира абнормалним и повишеним нивоима експресије протеина [46]. Поред тога, неурони добијени из иПСЦ-а који садрже ову мутацију показују више нивое фосфорилације -синуклеина, нешто што се обично налази у мозгу ПД [47], као и абнормално повећање агрегата -синуклеина и Левијевих тела [9,48].

иПСЦ модели сада такође почињу да пружају додатне информације о основним молекуларним путевима са СНЦА трипликацијама. Утврђено је да се стрес ендоплазматског ретикулума (ЕР) и активација одговора несавијеног протеина (УПР) активирају у неуронима изведеним из иПСЦ-а који садрже СНЦА трипликацију [49]. Ово показује кључну улогу коју ЕР игра у елиминацији аберантних протеинских агрегата унутар ћелије што доводи до ЕР стреса и повезаног УПР-а када је капацитет ЕР прекорачен.

СНЦА трипликација утиче на нормалне неуронске процесе, а иПСЦ модели су показали да се диференцијација и сазревање неурона мењају СНЦА трипликацијом. СНЦА трипликација Неурони изведени из иПСЦ-а нису у стању да генеришу типичну комплексну неуронску мрежу, одржавајући свој пролиферативни капацитет и показујући суптилне промене у капацитету диференцијације. Ове промене су додатно подржане значајним смањењем уоченим у генима повезаним са диференцијацијом као што су ДЛК, ГАБАБР2 и НУРР1, и смањењем дужине неурита [46,47]. Ови подаци указују на губитак регенеративног капацитета који може додатно погоршати губитак неурона код пацијената са ПД.

Иако је -синуклеин претежно локализован у пресинаптичким нервним терминалима, мали део се такође налази у језгрима ћелија. иПСЦ неурони са СНЦА трипликацијом показују промене у структури генома, што доводи до оштећења ДНК [50]. Ови неурони добијени из иПСЦ-а изражавају аберантне фенотипове старења, што је додатно доказано смањеном експресијом хетерохроматинских маркера и показујући абнормални нуклеарни омотач [48], као и утичу на интегритет генома који изазивају прекиде ДНК нити и смрт ћелије [50].

Митохондријална дисфункција је уобичајена карактеристика губитка неурона и главна је органела погођена патологијом -синуклеина. У складу са овим, уобичајено је пронаћи оштећење митохондрија у неуронима трипликације СНЦА добијених из иПСЦ [51]. Оштећење митохондрија се манифестује као промене у енергетском метаболизму као резултат поремећаја есенцијалних процеса као што су респираторни капацитет и производња АТП-а [52]. Када су неурони изведени из иПСЦ СНЦА трипликације изложени ниским концентрацијама феритина калцијум јонофора или ласерски индукованог РОС, они имају већу осетљивост на формирање прелазних пора пермеабилности (ПТП) у поређењу са контролним неуронима [53]. Неколико студија такође показује да СНЦА мутације имају повећану базалну осетљивост на оксидативни стрес изазван токсином који може бити погоршан интеракцијама металних јона [54]. Изложеност неурона изведених из иПСЦ СНЦА трипликације токсинима као што је 6ОХДА доводи до повећане ћелијске смрти и активације каспазе-3 [47] као и повећања аутофагозома [46]. Ови резултати су додатно подржани повишеним нивоима маркера оксидативног стреса као што су ДНАЈА1, ХМОКС2, УЦХЛ1 и ХСПБ1, укључени у заштиту ћелије од оксидативног оштећења, и МАОА, који је извор оксидативног стреса када је прекомерно експримиран у овим неуронима [ 55].

Цистанцхе пилуле

иПСЦ модели СНЦА-А53Т мутације

Неурони добијени из иПСЦ-а са мутацијом А53Т показују већу тенденцију производње -синуклеинских олигомера и агрегата у поређењу са контролним неуронима. Ово се добро подудара са оним што се примећује у људском мозгу код пацијената који носе исту мутацију [41,56]. СНЦА-А53Т миссенсе мутација је прва идентификована и најчешћа је мутација присутна код пацијената са ПД [28]. Мутација А53Т је повезана са приближно 10-годином ранијег почетка у поређењу са другим мутацијама мисенсе тачке [44]. Мутација А53Т стабилизује протеин -синуклеин у -листовима, што доводи до бржег формирања фибрила као токсичног повећања функције, доприносећи раном настанку породичне ПД [26,57]. Неурони добијени из иПСЦ-а такође показују дисрегулацију у производњи протеина и мРНК у вези са транскрипцијом услед интеракције А53Т мутираног -синуклеина са есенцијалним транскрипционим факторима, рибонуклеопротеинима и рибозомалним протеинима, на основу извештаја анализе у целом геному [58]. Међутим, друга студија је показала смањење односа тетрамера/мономера у неуронима изведеним из СНЦА-А53Т иПСЦ у поређењу са контролом, што сугерише да одређене конформације као што су тетрамери могу стабилизовати протеин и спречити токсичне ефекте примећене код неких олигомера [59].

Као што је пријављено за СНЦА трипликацију у неуронима изведеним из иПСЦ, УПР систем је такође поремећен у неуронима изведеним из СНЦА-А53Т иПСЦ. Ово је повезано са смањењем експресије фактора ИРЕ, који је суштинска компонента у овом процесу [60]. Уско повезан пут лизозомалног стреса је такође поремећен у неуронима изведеним из иПСЦ А53Т мутираним, где се -синуклеин везује и деактивира икт6, што доводи до агрегације протеина која може бити токсична за неуроне [61].

Слично дистрофичним обрасцима неурита уоченим у неуронима трипликације СНЦА, ово је случај и са неуронима изведеним из СНЦА-А53Т иПСЦ [56]. Отечене варикозности и велике сфероидне инклузије, који су повезани са раном дегенерацијом неурита, присутни су у неуронима изведеним из СНЦА-А53Т иПСЦ. Ове промене доводе до поремећаја у формирању неуронских мрежа уз значајно смањење синаптичких контаката [62]. Синаптичка активност у неуронима изведеним из СНЦА-А53Т иПСЦ је угрожена уоченом смањеном регулацијом важних пре- и постсинаптичких ћелијских адхезионих протеина [62]. Штавише, оштећење ових процеса доводи до промене синаптичке активности са већом средњом амплитудом на већем броју спонтаних Ца2 плус транзијента [56].

У СНЦА-А53Т неуронима, поремећен је антероградни митохондријални транспортни процес, што се чини да је повезано са нитрацијом микротубула и немогућношћу интеракције са митохондријалним транспортним комплексима [63]. Слично, неурони добијени из СНЦА-А53Т иПСЦ-а показују кашњење митофагије повезано са повећањем регулације Миро1, кључног протеина укљученог у митохондријски транспорт [64]. Морфологија митохондрија је такође промењена у кружнији и неразгранати облик са значајним смањењем његовог мембранског потенцијала у мутираним неуронима [60]. Штавише, антиоксидативни путеви су повишени, вероватно као компензациони механизам као одговор на повећање митохондријалног стреса. Нагађа се да је то због повећаног нивоа каталазе или коактиватора рецептора активираног пероксизом-пролифератором 1- (ПГЦ1-) [60]. Сви ови фактори доприносе про-апоптотичном фенотипу који је присутан са мутацијом СНЦА-А53Т. Постоји повећање експресије протеина повезаних са аутофагијом, као што је п62 или маркер аутофагозома ЛЦ3 [60]. Овај процес је посебно погоршан код неурона изведених из СНЦА-А53Т иПСЦ након излагања агрохемикалијама [41].

Додатни фактори који утичу на агрегацију синуклеина и патологију пронађени у иПСЦ моделима

Иако је присуство мутација у СНЦА кључни фактор који одређује савијање и агрегацију протеина у токсичне врсте, показало се да и други фактори и варијабле играју улогу у овом процесу. Неурони добијени из иПСЦ-а са мутацијама у другим генима такође показују агрегацију -синуклеина и показују токсичне ефекте. Неурони добијени из иПСЦ-а који носе мутацију ЛРРК2 Г2019С имају повећане нивое -синуклеина и имају значајне агрегације у поређењу са контролама [65]. Штавише, ови неурони су осетљиви на прекомерну дегенерацију када су изложени претходно формираним -синуклеинским фибрилима (ПФФ). Интересантно, показало се да је овај ефекат реверзибилан, када је мутација коригована у изогеним контролама, формирање агрегата је ублажено [66]. Поред тога, пронађен је још један фактор који утиче на агрегацију -синуклеина због диференцијалне експресије протеина који интерагује са тиоредоксином (ТКСНИП) у органоидним културама неурона изведених из иПСЦ-а са мутацијом ЛРРК2 Г2019С. ТКСНИП је раније идентификован као фактор ризика за ПД и његова мутација и диференцијална експресија резултирају убрзаном акумулацијом -синуклеина у ЛРРК2 Г2019С неуронима [67]. ТКСНИП мутације су такође повезане са дефицитима у механизмима аутофагије који доприносе повећању нивоа акумулације -синуклеина у неуронима [68]. Сви ови подаци су такође у сагласности са доказима из узорака људског мозга, који показују екстензивну патологију -синуклеина код пацијената са ПД са мутацијом ЛРРК2 Г2019С [69].

Паркин ген (ПАРК2) који кодира Е3 убиквитин лигазу је још један важан фактор у иПСЦ студијама -синуклеина. Недавне студије показују значајно повећање нивоа -синуклеина и агрегације у неуронима изведеним из иПСЦ-а код пацијената са ПАРК2 мутацијама у поређењу са контролним линијама [70,71]. Међутим, одсуство Левијевих тела у мозгу пацијената са ПД са мутацијама паркина чини ову детаљну везу нејасном, што сугерише да би сам паркин могао да интерагује и да убиквитинира протеин у интеракцији са -синуклеином, синфилин-1 и промовише инклузије Левијевих тела [72] . Такође постоје докази о ретким генетским факторима ризика за ПД, као што је ЦХЦХД2, који показују повећање акумулације нерастворљивог синуклеина у ДА неуронима изведеним из иПСЦ-а који носе мутацију ЦХЦХД2 Т61И [73].

Системи иПСЦ модела били су од непроцењиве вредности у демонстрирању ових веза и наглашавању корисности и потенцијала које иПСЦ технологија може донети у комплексно молекуларно мапирање неуродегенерације -синуклеина у ПД.

Цистанцхе тубулоса

Ограничења иПСЦ модела модела болести

Упркос многим предностима које иПСЦ технологија олакшава у моделирању болести, још увек постоје нека ограничења и изазови које треба превазићи. Прво, најчешћи изазов је туморигеност која може бити изазвана током процеса репрограмирања коришћењем ретровирусних и лентивирусних метода репрограмирања. Непознати или неизмерени ефекти процеса репрограмирања су потенцијални збуњујући фактор у процени заиста репрезентативне природе иПСЦ-а као модела специфичних за болест. Међутим, треба напоменути да новији протоколи користе методе без интеграције као што су Сендаи вирус или ДНК вектори и иду на неки начин да минимизирају ове проблеме [74,75]. Још једна препрека која је добро позната студијама матичних ћелија је интринзична варијабилност иПСЦ-а генерисаних од различитих донатора, или клонова од истог донатора, ову варијабилност је тешко помирити у неким случајевима јер може бити ефекат пацијента или ефекат протокола. Репрограмирање је дизајнирано да потпуно ресетује епигенетски отисак прста ћелија донора, што у ствари може довести до пристрасног потенцијала диференцијације у одређене типове ћелија [76], међутим, чини се да неки подаци показују да се епигенетско памћење смањује током времена у култури [77] . Једно од главних ограничења иПСЦ-а у моделирању ПД је стварање ДА неурона са фенотипом старења. Студије су показале да процес репрограмирања враћа остарелу ћелију у млађе стање, са фенотиповима који имају дуже теломере, смањен оксидативни стрес и компетентну митохондријалну организацију [78,79]. Обично све ћелије користе бројне мере контроле квалитета како би заштитиле нормалну физиолошку функцију, тако да је могуће да се фенотипски дефекти манифестују само када се заштитни путеви покваре. Стога је стварање остарелог фенотипа сложен задатак, али неки новији подаци указују на могућност индуковања фенотипа старења додавањем прогерина, скраћеног облика ламина А који је повезан са прераним старењем [80] и инхибицијом теломеразе [81]. Постоје неки проблеми када се користе неурони изведени из иПСЦ-а за моделирање болести и посебно стања болести повезаних са узрастом. Упркос изазовима и потенцијалним замкама, неурони добијени из иПСЦ-а су вредан ресурс у моделирању -синуклеинске патологије.

Будући правци са иПСЦ моделима патологије -синуклеина

Неурони добијени из иПСЦ-а нам омогућавају да створимо 'болест у посуди', али такође олакшавају детаљно проучавање физиолошких путева у основи болести ин витро. -синуклеин агрегиране врсте се налазе у мозгу већине пацијената са ПД мозга и иПСЦ-ови су моћно средство за проучавање односа између -синуклеина и неуродегенерације, истражујући физиолошке и патофизиолошке улоге -синуклеина. Подаци из неуронских иПСЦ модела специфичних генетских мутација повезаних са ПД расту и показују јаку корелацију са подацима из узорака људског мозга [9]. Конкретно, у случају СНЦА мутација које преовлађују у популацији ПД, критично је важно да иПСЦ као модел могу снажно рекапитулирати стање болести. Подаци који су овде прегледани сугеришу да су иПСЦ-ови заиста одличан модел за проучавање физиологије и патофизиологије СНЦА мутација.

Типично, СНЦА мутације доводе до стабилизације и агрегације или фибрилације -синуклеина у Левијевим телима заједно са другим протеинима. Једном када су ове агрегиране врсте присутне у ћелији, оне ступају у интеракцију са другим ћелијским структурама као што су микротубуле, ометајући аксонски митохондријални транспорт и на крају доводећи до дегенерације синаптичких терминала и губитка ћелије [9,26]. Поред тога, важне митохондријалне функције су поремећене интеракцијом -синуклеинских олигомера са АТП синтазама као што је отварање ПТП-а, оштећење дисања и индукција пероксидације липида [53]. Штавише, интеракција -синуклеин агрегата са протеинима укљученим у митофагију и спречава одговарајући клиренс дефектних митохондрија унутар ћелије [64]. Такође се сугерише да интеракције олигомера -синуклеина са металним јонима изазивају стварање слободних радикала у неуронима, што доводи до поремећаја нормалне физиологије ћелије, што доводи до смрти ћелије [54]. Већина фенотипова приказаних неуронима изведеним из иПСЦ-а такође се налази у људском мозгу, наглашавајући прикладност иПСЦ моделирања не само у опонашању физиолошких и патолошких стања ћелије, већ и њихову потенцијалну улогу као платформе за откривање нових података који су можда раније имали ослањао на прикупљање биопсија мозга од преминулих пацијената.

Моделирање болести помоћу иПСЦ-а пружило је важне доказе да оштећења у другим ћелијским механизмима могу у неким случајевима индуковати агрегацију и акумулацију -синуклеина. Неурони добијени из иПСЦ-а од пацијената са ПД који носе мутације, у ЛРРК2 или паркину истичу ове интеракције. На пример, претпоставља се да убиквитинација синфилина-1 у неуронима изведеним из иПСЦ-а који носе мутације паркина има средњу улогу у индуковању формирања Левијевог тела [72]. Штавише, један од кључних механизама који доприносе акумулацији -синуклеина је дефектна аутофагија и лизозомална протеолиза, који играју виталну улогу у уклањању дефектних агрегата. Показало се да су ови процеси компромитовани у ЛРРК2-мутираним неуронима изведеним из иПСЦ-а [68,82]. У свим овим студијама, неурони изведени из иПСЦ-а показују фенотипове који су уско усклађени са онима пријављеним за узорке људског мозга. Процена узрока агрегата -синуклеина који се обично налазе у мозгу ПД је сложена и до данас се показала неуспешном.

Херба Цистанцхе

Док је дефинитивна улога агрегације -синуклеина у патологији ПД још увек нејасна, литература показује веома сложену интеракцију између ових агрегираних врста са многим другим протеинима унутар ћелије, стварајући каскаду оштећења ћелијског пута која фаворизује дефектну агрегацију протеина, што на крају доводи до дегенерација. У овом широком и замршеном молекуларном пејзажу, иПСЦ изведени модели пацијената са ПД могу помоћи да се идентификују ефекти најчешћих мутација у овој патологији, будући да су у стању да имитирају ћелијске процесе мозга ПД са великом прецизношћу. Штавише, овај систем моделирања 'болести у посуди' може олакшати и откривање лекова велике пропусности и истраживање приступа ћелијској терапији. Будући рад са ЦРИСПР-Цас9 технологијом у комбинацији са иПСЦ-има може револуционисати приступ синуклеинопатијама како би се замениле штетне мутације или избрисале мултипликације из кључних гена болести [83] или заиста модулација сродних механизама као што су хистони укључени у посттранслационе модификације [ 84].

Опсежан рад који је до сада обављен на вишеструким моделским системима, снажно сугерише да присуство агрегата -синуклеина, олигомера и фибрила има централну улогу у неуродегенерацији ДА повезаној са ПД. Са побољшаном основом платформе која је релевантна за болести која користи иПСЦ и брзим растом нашег разумевања стања болести, будућност изгледа светла за терапије које могу да циљају синуклеинопатије.

Референце

1. Тсуији, Х. и Иаманака, К. (2014) Животињски модели за неуродегенеративне поремећаје. Биотехнологија животиња, стр. 39–56, Елсевиер,

2. Боурденк, М., Коулакиотис, НС, Саноудоу, Д., Безард, Е., Дехаи, Б. и Тсарбопоулос, А. (2017) Агрегација протеина и неуродегенерација у прототипским неуродегенеративним болестима: примери амилоидопатија и синуклеинопатија, . Прог. Неуробиол. 155, 171–193,

3. Мадабхусхи, Р., Пан, Л. и Тсаи, Л.-Х. (2014) Оштећење ДНК и његове везе са неуродегенерацијом. Неурон 83, 266–282,

4. Рекатсина, М., Паладини, А., Пироли, А., Зис, П., Перголиззи, ЈВ и Варрасси, Г. (2020) Патофизиологија и терапеутске перспективе оксидативног стреса и неуродегенеративних болести: наративни преглед. Адв. Тхер. 37, 113–139,

5. Ковач, ГГ (2016) Молекуларна патолошка класификација неуродегенеративних болести: окретање ка прецизној медицини. Инт. Ј. Мол. Сци. 17,

6. Ковач, ГГ (2017) Појмови и класификација неуродегенеративних болести. Хандб. Цлин. Неурол. 145, 301–307,

7. Киели, АП, Аси, ИТ, Кара, Е., Лимоусин, П., Линг, Х., Левис, П., ет ал. (2013) -Синуклеинопатија повезана са Г51Д СНЦА мутацијом: веза између Паркинсонове болести и вишеструке системске атрофије? Ацта Неуропатхол. 125, 753–769,

8. Зарранз, ЈЈ, Алегре, Ј., Г´омез-Естебан, ЈЦ, Лезцано, Е., Рос, Р., Ампуеро, И. ет ал. (2004) Нова мутација, Е46К, алфа-синуклеина изазива деменцију Паркинсоновог и Левијевог тела. Анн. Неурол. 55, 164–173,

9. Протс, И., Гросцх, Ј., Браздис, Р.-М., Симмнацхер, К., Вебер, В., Хавлицек, С. ет ал. (2018) -Олигомери синуклеина изазивају рану аксоналну дисфункцију у људским моделима синуклеинопатија заснованим на иПСЦ-у. Проц. Натл. Акад. Сци. САД 115, 7813–7818,

10. МцЦанн, Х., Стевенс, ЦХ, Цартвригхт, Х. и Халлидаи, ГМ (2014) - Фенотипови синуклеинопатије. Паркинсонизам Релат. Дисорд. 20, С62–С67,

11. Такахасхи, К., Танабе, К., Охнуки, М., Нарита, М., Ицхисака, Т., Томода, К. ет ал. (2007) Индукција плурипотентних матичних ћелија из фибробласта одраслих људи дефинисаним факторима. Ћелија 131, 861–872,

12. Вогел, Г. (2010) Матичне ћелије. Болести у посуди узлећу. Наука 330, 1172–1173,

13. Аваззадех, С., Баена, ЈМ, Кеигхрон, Ц., Феллер-Санцхез, И. и Куинлан, ЛР (2021) Моделирање Паркинсонове болести: иПСЦс ка бољем разумевању људске патологије. Браин Сци. 11,

14. С´анцхез-Дан´ес, А., Цонсиглио, А., Рицхауд, И., Родр´ıгуез-Пиз`а, И., Дехаи, Б., Едел, М., ет ал. (2012) Ефикасно стварање допаминергичких неурона средњег мозга А9 путем лентивирусне испоруке ЛМКС1А у људским ембрионалним матичним ћелијама и индукованим плурипотентним матичним ћелијама. Зујати. Гене Тхер. 23, 56–69,

15. Цхамберс, СМ, Фасано, ЦА, Папапетроу, ЕП, Томисхима, М., Саделаин, М. и Студер, Л. (2009) Високо ефикасна неуронска конверзија људских ЕС и иПС ћелија двоструком инхибицијом СМАД сигнализације. Нат. Биотецхнол. 27, 275–280,

16. Крикс, С., Схим, Ј.-В., Пиао, Ј., Ганат, ИМ, Вакеман, ДР, Ксие, З. ет ал. (2011) Допамински неурони изведени из људских ЕС ћелија ефикасно се уграђују у животињске моделе Паркинсонове болести. Натуре 480, 547–551,

17. Тхека, И., Цаиаззо, М., Дворетскова, Е., Лео, Д., Унгаро, Ф., Цуррели, С. ет ал. (2013) Брзо стварање функционалних допаминергичких неурона из хуманих индукованих плурипотентних матичних ћелија кроз процедуру у једном кораку коришћењем транскрипционих фактора ћелијске лозе. Стем Целлс Трансл. Мед. 2, 473–479,

18. Ванг, М., Линг, К.-Х., Тан, ЈЈ и Лу, Ц.-Б. (2020) Развој и диференцијација допаминергичког неурона средњег мозга: од клупе до кревета. ћелије 9,

19. Мартон, РМ и Иоаннидис, ЈПА (2019) Свеобухватна анализа протокола за извођење допаминергичких неурона из људских плурипотентних матичних ћелија. Стем Целлс Трансл. Мед. 8, 366–374,

20. Маротеаук, Л., Цампанелли, ЈТ и Сцхеллер, РХ (1988) Синуклеин: неурон-специфичан протеин локализован на језгру и пресинаптичком нервном терминалу. Ј. Неуросци. 8, 2804–2815,

21. Уверски, ВН, Ли, Ј. и Финк, АЛ (2001) Докази за делимично пресавијени интермедијер у формирању алфа-синуклеинских фибрила. Ј. Биол. Цхем. 276, 10737–10744,

22. Тхеиллет, Ф.-Кс., Бинолфифи, А., Бекеи, Б., Марторана, А., Росе, ХМ, Стуивер, М. ет ал. (2016) Структурни поремећај мономерног -синуклеина опстаје у ћелијама сисара. Природа 530, 45–50,

23. Буелл, АК, Галвагнион, Ц., Гаспар, Р., Спарр, Е., Вендрусцоло, М., Кновлес, ТПЈ ет ал. (2014) Услови раствора одређују релативни значај процеса нуклеације и раста у агрегацији -синуклеина. Проц. Натл. Акад. Сци. УСА 111, 7671–7676,

24. Ровере, М., Сандерсон, ЈБ, Фонсеца-Орнелас, Л., Пател, ДС и Бартелс, Т. (2018) Поновно савијање спиралног растворљивог -синуклеина кроз пролазну интеракцију са липидним интерфејсима. ФЕБС Летт. 592, 1464–1472,

25. Моонс, Р., Конијненберг, А., Менсцх, Ц., Ван Елзен, Р., Јоханнессен, Ц., Маудслеи, С. ет ал. (2020) Облик металних јона -синуклеин. Сци. Реп. 10, 16293,

26. Бертонцини, ЦВ, Фернандез, ЦО, Гриесингер, Ц., Јовин, ТМ и Звецкстеттер, М. (2005) Породични мутанти алфа-синуклеина са повећаном неуротоксичношћу имају дестабилизовану конформацију. Ј. Биол. Цхем. 280, 30649–30652,

27. Виннер, Б., Јаппелли, Р., Маји, СК, Десплатс, ПА, Боиер, Л., Аигнер, С. ет ал. (2011) Ин виво демонстрација да су олигомери алфа-синуклеина токсични. Проц. Натл. Акад. Сци. УСА 108, 4194–4199,

28. Полимеропоулос, МХ, Лаведан, Ц., Лерои, Е., Иде, СЕ, Дехејиа, А., Дутра, А. ет ал. (1997) Мутација алфа-синуклеинског гена идентификована у породицама са Паркинсоновом болешћу. Наука 276, 2045–2047,

29. Ласхуел, ХА, Оверк, ЦР, Оуеслати, А. и Маслиах, Е. (2013) Многа лица -синуклеина: од структуре и токсичности до терапеутског циља. Нат. Рев. Неуросци. 14, 38–48,

30. Цабин, ДЕ, Схимазу, К., Мурпхи, Д., Цоле, НБ, Готтсцхалк, В., МцИлваин, КЛ ет ал. (2002) Деплеција синаптичких везикула корелира са ослабљеним синаптичким одговорима на продужену понављајућу стимулацију код мишева којима недостаје алфа-синуклеин. Ј. Неуросци. 22, 8797–8807,

31. Бурр´е, Ј., Схарма, М., Тсетсенис, Т., Буцхман, В., Етхертон, МР и С¨удхоф, ТЦ (2010) Алфа-синуклеин промовише склапање СНАРЕ-комплекса ин виво и ин витро. Наука 329, 1663–1667,

32. Мираглиа, Ф., Рицци, А., Рота, Л. анд Цолла, Е. (2018) Субцелуларна локализација агрегата алфа-синуклеина и њихова интеракција са мембранама. Неурал Реген. Рес. 13, 1136–1144,

33. Царнватх, Т., Мохаммед, Р. и Тсианг, Д. (2018) Директни и индиректни ефекти -синуклеина на стабилност микротубула у патогенези Паркинсонове болести. Неуропсицхиатр. Дис. Лечити. 14, 1685–1695,

34. Версингер, Ц. и Сидху, А. (2003) Слабљење активности транспортера допамина помоћу -синуклеина. Неуросци. Летт. 340, 189–192,

35. Лее, ФЈ, Лиу, Ф., Приступа, ЗБ и Низник, ХБ (2001) Директно везивање и функционално спајање алфа-синуклеина са транспортерима допамина убрзавају допамином индуковану апоптозу. ФАСЕБ Ј. 15, 916–926

36. Ахн, Б.-Х., Рхим, Х., Ким, СИ, Сунг, И.-М., Лее, М.-И., Цхои, Ј.-И. ет ал. (2002) алфа-синуклеин ступа у интеракцију са изозимима фосфолипазе Д и инхибира перванадатом индуковану активацију фосфолипазе Д у ћелијама људског ембриона бубрега-293. Ј. Биол. Цхем. 277, 12334–12342,

37. Горбатиук, ОС, Ли, С., Нгуиен, ФН, Манфредссон, ФП, Кондрикова, Г., Сулливан, ЛФ ет ал. (2010) - Експресија синуклеина у супстанцији нигра пацова потискује токсичност фосфолипазе Д2 и нигралну неуродегенерацију. Мол. Тхер. 18, 1758–1768,

38. Ферреира, СА и Ромеро-Рамос, М. (2018) Одговор микроглије током Паркинсонове болести: интервенција алфа-синуклеина. Фронт. Ћелија. Неуросци. 12, 247,

39. Грозданов, В. и Данзер, КМ (2020) Интрацелуларни алфа-синуклеин и функција имуних ћелија. Фронт. Целл Дев. Биол. 8, 562692,

40. Девине, МЈ, Ритен, М., Водицка, П., Тхомсон, АЈ, Бурдон, Т., Холден, Х. ет ал. (2011) Паркинсонова болест индуковала је плурипотентне матичне ћелије са трипликацијом -синуклеинског локуса. Нат. Цоммун. 2, 440,

41. Риан, СД, Долатабади, Н., Цхан, СФ, Зханг, Кс., Акхтар, МВ, Паркер, Ј. ет ал. (2013) Изогени хумани иПСЦ Паркинсонов модел показује дисфункцију изазвану нитрозативним стресом у транскрипцији МЕФ2-ПГЦ1. ћелија 155, 1351–1364,

42. Барбути, П., Антони, П., Сантос, Б., Массарт, Ф., Цруциани, Г., Дординг, Ц. ет ал. (2020) Коришћењем скрининга са високим садржајем за генерисање иПС клонова добијених од пацијената са коригованим геном за једну ћелију открива вишак алфа-синуклеина са породичном тачком мутације Паркинсонове болести А30П. ћелије 9,

43. Денг, Х. и Иуан, Л. (2014) Генетске варијанте и животињски модели код СНЦА и Паркинсонове болести. Агинг Рес. Рев. 15, 161–176,

44. Кастен, М. и Клеин, Ц. (2013) Тхе мани фацес оф алфа-синуцлеин мутатионс. пон. Дисорд. 28, 697–701,

45. Синглетон, АБ, Фаррер, М., Јохнсон, Ј., Синглетон, А., Хагуе, С., Кацхергус, Ј. ет ал. (2003) умножавање алфа-синуклеинског локуса изазива Паркинсонову болест. Наука 302, 841,

46. ​​Оливеира, ЛМА, Фаломир-Лоцкхарт, Љ, Ботелхо, МГ, Лин, КХ, Валес, П., Коцх, ЈЦ ет ал. (2015) Повишени -синуклеин изазван трипликацијом СНЦА гена омета диференцијацију и сазревање неурона у плурипотентним матичним ћелијама изазваним Паркинсоновим пацијентима. Целл Деатх Дис. 6, е1994,

47. Лин, Л., Г¨оке, Ј., Цукуроглу, Е., Драниас, МР, ВанДонген, АМЈ и Стантон, ЛВ (2016) Молекуларне карактеристике у основи неуродегенерације идентификоване кроз ин витро моделирање генетски разноликих пацијената са Паркинсоновом болешћу. Целл Реп. 15, 2411–2426,

48. Таглиафифиерро, Л., Замора, МЕ и Цхиба-Фалек, О. (2019) Умножавање СНЦА локуса погоршава нуклеарно старење неурона. Зујати. Мол. Генет. 28, 407–421,

49. Хеман-Ацках, СМ, Манзано, Р., Хооземанс, ЈЈМ, Сцхепер, В., Флинн, Р., Хагерти, В. ет ал. (2017) Алфа-синуклеин индукује несавијени протеински одговор у неуронима изведеним из иПСЦ СНЦА трипликације Паркинсонове болести. Зујати. Мол. Генет. 26, 4441–4450,

50. Васкуез, В., Митра, Ј., Хегде, ПМ, Пандеи, А., Сенгупта, С., Митра, С., ет ал. (2017) Оксидовани -синуклеин везан за хроматин изазива прекиде ланаца у неуронским геномима ин витро моделима Паркинсонове болести. Ј. Алцхајмерова болест. 60, С133–С150,

51. Браздис, Р.-М., Алецу, ЈЕ, Марсцх, Д., Дахмс, А., Симмнацхер, К., Л¨орентз, С. ет ал. (2020) Демонстрација неуронске рањивости специфичне за регион мозга у моделу породичне Паркинсонове болести заснованом на хуманом иПСЦ-у. Зујати. Мол. Генет. 29, 1180–1191,

52. Флиерл, А., Оливеира, ЛМА, Фаломир-Лоцкхарт, Љ, Мак, СК, Хеслеи, Ј., Солднер, Ф. ет ал. (2014) Већа рањивост и осетљивост на стрес неуронских прекурсора ћелија које носе алфа-синуклеин ген трипликације. ПЛоС ОНЕ 9, е112413,

53. Лудтманн, МХР, Ангелова, ПР, Хорроцкс, МХ, Цхои, МЛ, Родригуес, М., Баев, АИ ет ал. (2018) -синуклеински олигомери ступају у интеракцију са АТП синтазом и отварају прелазне поре пермеабилности код Паркинсонове болести. Нат Цоммун. 9, 2293,

54. Деас, Е., Цремадес, Н., Ангелова, ПР, Лудтманн, МХР, Иао, З., Цхен, С. ет ал. (2016) Олигомери алфа-синуклеина у интеракцији са металним јонима изазивају оксидативни стрес и смрт неурона код Паркинсонове болести. Антиоксид. Редок Сигнал. 24, 376–391,

55. Биерс, Б., Цорд, Б., Нгуиен, ХН, Сцх ¨уле, Б., Фенно, Л., Лее, ПЦ ет ал. (2011) СНЦА трипликација ДА неурони из иПСЦ изведени код Паркинсоновог пацијента акумулирају -синуклеин и подложни су оксидативном стресу. ПЛоС ОНЕ 6, е26159,

56. Зигогианни, О., Антониоу, Н., Каломоири, М., Коуроупи, Г., Таоуфифик, Е. и Матсас, Р. (2019) Ин виво фенотипизација породичне Паркинсонове болести са хуманим индукованим плурипотентним матичним ћелијама: доказ -концепт студија. Неуроцхем. Рес. 44, 1475–1493,

57. Цонваи, КА, Харпер, ЈД и Лансбури, ПТ (1998) Убрзано ин витро формирање фибрила мутираним алфа-синуклеином повезаним са раном појавом Паркинсонове болести. Нат. Мед. 4, 1318–1320,

58. Кхурана, В., Пенг, Ј., Цхунг, ЦИ, Аулуцк, ПК, Фаннинг, С., Тардифф, ДФ ет ал. (2017) Мреже на нивоу генома повезују гене неуродегенеративне болести са -синуклеином преко специфичних молекуларних путева. Целл Сист. 4, 157.е14–170.е14,

59. Деттмер, У., Невман, АЈ, Солднер, Ф., Лутх, ЕС, Ким, НЦ, вон Сауцкен, ВЕ ет ал. (2015) Мисенс мутације синуклеина које изазивају Паркинсон померају природне тетрамере у мономере као механизам за иницирање болести. Нат. Цоммун. 6, 7314,

60. Замбон, Ф., Цхерубини, М., Фернандес, ХЈР, Ланг, Ц., Риан, БЈ, Волпато, В. ет ал. (2019) Патологија ћелијског синуклеина је повезана са биоенергетском дисфункцијом у допаминским неуронима који потичу од Паркинсонове иПСЦ. Зујати. Мол. Генет. 28, 2001–2013,

61. Цудди, ЛК, Вани, ВИ, Морелла, МЛ, Питцаирн, Ц., Тсутсуми, К., Фредриксен, К. ет ал. (2019) Стресом изазван ћелијски клиренс је посредован СНАРЕ протеином икт6 и поремећен -синуклеином. Неурон 104, 869.е11–884.е11,

62. Коуроупи, Г., Таоуфифик, Е., Влацхос, ИС, Тсиорас, К., Антониоу, Н., Папастефанаки, Ф. ет ал. (2017) Дефектна синаптичка повезаност и аксонска неуропатологија у моделу породичне Паркинсонове болести заснованом на хуманом иПСЦ-у. Проц. Натл. Акад. Сци. САД 114, Е3679–Е3688,

63. Стикел, МГ, Хумпхриес, К., Кирби, МП, Цзаниецки, Ц., Ванг, Т., Риан, Т. ет ал. (2018) Нитрација микротубула блокира аксонални митохондријски транспорт у моделу људских плурипотентних матичних ћелија Паркинсонове болести. ФАСЕБ Ј. 32, 5350–5364,

64. Схалтоуки, А., Хсиех, Ц.-Х., Ким, МЈ и Ванг, Кс. (2018) Алфа-синуклеин одлаже митофагију и циљање Мироа спашава губитак неурона у Паркинсоновим моделима. Ацта Неуропатхол. 136, 607–620,

65. Нгуиен, ХН, Биерс, Б., Цорд, Б., Схцхегловитов, А., Бирне, Ј., Гујар, П. ет ал. (2011) ДА неурони изведени из иПСЦ мутанта ЛРРК2 показују повећану осетљивост на оксидативни стрес. Целл Стем Целл 8, 267–280,

66. Биери, Г., Брахић, М., Боуссет, Л., Цоутхоуис, Ј., Крамер, Њ, Ма, Р. ет ал. (2019) ЛРРК2 модификује -син патологију и ширење у моделима миша и људским неуронима. Ацта Неуропатхол. 137, 961–980,

67. Ким, Х., Парк, ХЈ, Цхои, Х., Цханг, И., Парк, Х., Схин, Ј. ет ал. (2019) Моделирање Г2019С-ЛРРК2 спорадичне Паркинсонове болести у 3Д органоидима средњег мозга. Матичне ћелије Реп. 12, 518–531,

68. Реинхардт, П., Сцхмид, Б., Бурбулла, ЛФ, Сцх ¨ондорф, ДЦ, Вагнер, Л., Глатза, М. ет ал. (2013) Генетичка корекција мутације ЛРРК2 у хуманим иПСЦс повезује паркинсонову неуродегенерацију са променама зависним од ЕРК у експресији гена. Целл Стем Целл. 12, 354–367,

69. Сцхиеслинг, Ц., Киепер, Н., Сеидел, К. и Кр¨угер, Р. (2008) Преглед: Породична Паркинсонова болест–генетика, клинички фенотип и неуропатологија о уобичајеном спорадичном облику болести. Неуропатхол. Аппл. Неуробиол. 34, 255–271,

70. Схалтоуки, А., Сивапатхам, Р., Пеи, И., Геренцсер, АА, Момˇцилови ´ц, О., Рао, МС ет ал. (2015) Митохондријалне промене од ПАРКИН-а у допаминергичким неуронима користећи ПАРК2 специфичне за пацијенте и ПАРК2 нокаут изогене иПСЦ линије. Матичне ћелије Реп. 4, 847–859,

71. Имаизуми, И., Окада, И., Акаматсу, В., Коике, М., Кузумаки, Н., Хаиакава, Х. ет ал. (2012) Митохондријална дисфункција повезана са повећаним оксидативним стресом и акумулацијом -синуклеина у неуронима изведеним из ПАРК2 иПСЦ и постморталном можданом ткиву. Мол. Мозак 5, 35,

72. Цхунг, КК, Зханг, И., Лим, КЛ, Танака, И., Хуанг, Х., Гао, Ј., ет ал. (2001) Паркин убиквитинира протеин који интерагује са алфа-синуклеином, синфилин-1: импликације за формирање Левијевих тела код Паркинсонове болести. Нат. Мед. 7, 1144–1150,

73. Икеда, А., Нишиока, К., Менг, Х., Таканасхи, М., Хасегава, И., Иносхита, Т. ет ал. (2019) Мутације у ЦХЦХД2 узрокују агрегацију -синуклеина. Зујати. Мол. Генет. 28, 3895–3911,

74. Папапетроу, ЕП и Саделаин, М. (2011) Генерисање хуманих плурипотентних матичних ћелија индукованих без трансгена са једним полицистронским вектором који се може ексцизити. Нат. Протоц. 6, 1251–1273,

75. Нарсинх, КХ, Јиа, Ф., Роббинс, РЦ, Каи, МА, Лонгакер, МТ и Ву, ЈЦ (2011) Генерисање плурипотентних матичних ћелија одраслих људи индукованих помоћу невирусних миникружних ДНК вектора. Нат. Протоц. 6, 78–88,

76. Ким, К., Зхао, Р., Дои, А., Нг, К., Унтернаехрер, ​​Ј., Цахан, П. ет ал. (2011) Тип ћелије донора може утицати на епигеном и потенцијал диференцијације плурипотентних матичних ћелија изазваних људима. Нат. Биотецхнол. 29, 1117–1119,

77. Нисхино, К., Тоиода, М., Иамазаки-Иноуе, М., Фукаватасе, И., Цхиказава, Е., Сакагуцхи, Х. ет ал. (2011) Динамика метилације ДНК у људским индукованим плурипотентним матичним ћелијама током времена. ПЛоС Генет. 7, е1002085,

78. Иехезкел, С., Ребибо-Саббах, А., Сегев, И., Зуцкерман, М., Схакед, Р., Хубер, И. ет ал. (2011) Репрограмирање теломерних региона током генерисања хуманих индукованих плурипотентних матичних ћелија и накнадна диференцијација у деривате сличне фибробластима. Епигенетика 6, 63–75,

79. Рохани, Л., Јохнсон, АА, Арнолд, А. и Столзинг, А. (2014) Потпис старења: обележје индукованих плурипотентних матичних ћелија? Агинг Целл 13, 2–7,

80. Миллер, ЈД, Ганат, ИМ, Кисхиневски, С., Бовман, РЛ, Лиу, Б., Ту, ЕИ ет ал. (2013) Хумано иПСЦ-базирано моделирање болести са касним почетком путем старења изазваног прогерином. Целл Стем Целл 13, 691–705,

81. Вера, Е., Босцо, Н. и Студер, Л. (2016) Генерисање модела болести заснованих на хуманом иПСЦ-у са касним почетком индукцијом неуронских фенотипова повезаних са узрастом кроз манипулацију теломеразом. Целл Реп. 17, 1184–1192,

82. С´анцхез-Дан´ес, А., Рицхауд-Патин, И., Царбалло-Царбајал, И., Јим´енез-Делгадо, С., Цраиг, Ц., Мора, С., ет ал. (2012) Фенотипови специфични за болест у допаминским неуронима из хуманих иПС-базираних модела генетске и спорадичне Паркинсонове болести. ЕМБО Мол. Мед. 4, 380–395,

83. Сафари, Ф., Хатам, Г., Бехбахани, АБ, Резаеи, В., Барекати-Мовахед, М., Петрамфар, П. ет ал. (2020) ЦРИСПР систем: пакет алата високе пропусности за истраживање и лечење Паркинсонове болести. Ћелија. Мол. Неуробиол. 40, 477–493, х

84. Гухатхакурта, С., Ким, Ј., Адамс, Л., Басу, С., Сонг, МК, Адлер, Е. ет ал. (2021) Циљано слабљење повишених хистонских ознака код СНЦА ублажава -синуклеин код Паркинсонове болести. ЕМБО Мол. Мед. 13, е12188,

Јара М. Баена-Монтес1, Сахар Аваззадех1 и Лео Р. Куинлан1,2

1. Медицински факултет за физиологију, Национални универзитет Ирске Галваи, Галваи, Ирска;

2. Ц ´ УРАМ СФИ Центар за истраживање медицинских уређаја, Национални универзитет Ирске Галваи, Галваи, Ирска