Транспорт ехинакозида и актеозида, осетљив на флоридзин и измењени пут цревне апсорпције након примене екстракта Цистанцхе Тубулоса

За више информација:ali.ma@wecistanche.com

Тадатосхи Танино и др

АбстрацтОбјецтивес

Циљ ове студије је био да се позабави корисним ефектимаЕкстракт Цистанцхе тубулосао побољшању ниске цревне пермеабилности ехинакозида (ЕЦХ) и актеозида (АЦТ).

Методе

Апсорпција ЕЦХ и АЦТ уЕкстракт Цистанцхе тубулосаје окарактерисан коришћењем монослоја ћелија Цацо{0}} црева човека са интактним једињењима. Апсорпција ЕЦХ и АЦТ зависна од транспортера глукозе потврђена је техником ин-ситуинтестиналне перфузије.

Кључни налази

Привидна пермеабилност (Папп) није се значајно разликовала између интактног ЕЦХ и интактног АЦТ-а. У присуству флоридзина, Папп ЕЦХ и АЦТ у високој дози је смањен на 20 процената одговарајућег не-третмана, али га флоретин и верапамил нису променили.Екстракт Цистанцхе тубулосапри ниским и високим дозама повећали су Папп ЕЦХ и АЦТ (оба троструко), што је резултирало њиховим великим учешћем у апсорпцији независној од транспортера глукозе која зависи од натријума. При ниској концентрацији, флоридзин је значајно потиснуо истовремене нивое ЕЦХ и АЦТ у порталној крви.

Закључак

Дијетална и лековитаЕкстракт Цистанцхе тубулосапобољшање интестиналне апсорпције ЕЦХ и АЦТ може послужити за боље управљање људским здрављем, иако би требало смањити учешће транспорта осетљивог на флоридзин.

Кључне речиактеозид; монослојеви Цацо{0}} ћелија;Екстракт цистанцхетубулоса; ехинакозидтранспортер глукозе осетљив на флоридзин

Екстракт Цистанцхе тубулоса

Цлицк то Цистанцхе тубулоса прах

Увод

Корени Цистанцхе тубулоса традиционално се користе за лекове и храну.Екстракт Цистанцхе тубулосапознато је да поседује фармаколошке ефекте у различитим болестима мозга, функцијама против старења, метаболизму масти и расту косе.[1–4]У скорије време, иридоиди, монотерпеноиди, фенилетаноидгликозиди и лигнани су изоловани из њих.Цистанцхе тубулоса.[5,6] Фенилетаноидни гликозиди, класа полифенолних једињења, су главни хемијски састојци у врстама Цистанцхе,[7] иако њихове количине варирају међу различитим врстама. Ехинакозид (ЕЦХ; Слика 1) је један од главних фенилетаноидних гликозида у ХербаЦистанцхис-у. Хидролизују га у актеозид (АЦТ; такође се назива вербаскозид) ензимима бактеријског порекла у дебелом цреву.[8,9] ЕЦХ и АЦТ поседују корисну активност хепатопротекције[10] и анти-инфламације[11] код глодара. Изненађујуће, високо растворљив у води ЕЦХ побољшава понашање и неурохемијске резултате на мишјем моделу Паркинсонове болести и инхибира активацију каспазе-3 и каспазе-8 у неуронима церебеларне грануле.[9] Добро је познато да крвно-мождана баријера стриктно ограничава улазак и дистрибуцију ксенобиотика у мозак из крви. Ву ет ал.[12] такође су показали да се АЦТ растворљив у води брзо дистрибуира у можданим ткивима пацова. Према томе, ЕЦХ и АЦТ могу да се транспортују у мозак, црева и јетру помоћу специфичног система.

Иако постоје јаки докази који указују на то да је потрошњаЕкстракт Цистанцхе тубулосаје корисна за људско здравље, пропустљивост чистог ЕЦХ кроз Цацо{{0}} ћелијске слојеве при апикалној концентрацији од 8,4 ± 1,6 уг/мл која је једнака или нижа од оне коју има парацелуларни транспортни маркерманитол.[13] Када се чисти ЕЦХ орално даје пацовима (доза, 1{{10}}0 мг/кг), апсорпција је изузетно брза (Тмак, 15 мин), а максимална концентрација у серуму је веома ниска (Цмак, 0.61 ± 0.32 уг/мл).[14] Апсолутна биорасположивост ЕЦХ је само 0,83 процента. Слично томе, када се Цацо{15}} ћелије инкубирају са фенолном фракцијом делимично пречишћеном из отпадне воде млинова маслина, апсорпција чистог АЦТ-а је брза са врхунском акумулацијом након 30 минута и укупном ефикасношћу акумулације од 0,1 процената, обезбеђујући интрацелуларни ниво од 130 пмол/мг ћелијског протеина.[15] Код пацова, максимална концентрација (0,13 ± 0,03 уг/мл) чистог АЦТ-а је постигнута у року од 30 минута након оралног дозирања са 100 мг/кг,[12] што имплицира брзу интестиналну апсорпцију. Орална биорасположивост АЦТ-а, као и ЕЦХ, је прилично ниска (0,12 ± 0,04 процента), што указује на могућност ефеката првог проласка кроз цревни тракт и јетру. У жучи пацова, метилациони и глукуронидациони коњугати ЕЦХ су главни метаболити,[16] иако обим метаболизма у јетри остаје нејасан. Прелиминарно смо утврдили да су ЕЦХ и АЦТ прилично стабилни у хомогенатима цревне слузокоже пацова и вештачком гастрикациду (подаци нису приказани). Најар и др.[17] показао да АЦТ инхибира активност П-гликопротеина (П-гп)-АТПазе на начин сличан верапамилу (репрезентативни инхибитор П-гп), што подразумева модулатор П-гп; међутим, неизвесно је да ли је АЦТ доступан као П-гп супстрат. Занимљиво је да су недавни налази флавоноид-Д-глукозида у исхрани показали да протеин резистенције на више лекова (МРП2) маскира натријум-зависни транспортер глукозе (СГЛТ)1-посредовано преузимање кверцетин 4′-О- -глукозе,[18 ,19] који је одговоран за веома лошу апсорпцију. Међутим, врло мало се зна о осетљивости полифенолних глукозида на апсорпционе транспортере, укључујући транспортере глукозе. Информације о карактеристикама апсорпције кверцетин4′-глукозида и брзо пропустљивог за крвно-мождану баријеру ЕЦХ навеле су нас да истражимо транспортер-сензитивни унос Ц-а у исхрани г. тубулоса.

У овој студији смо истраживали апсорпцију интактног ЕЦХ и АЦТ посредовану транспортером глукозе користећи монослојеве хуманих интестиналних Цацо{1}} ћелија. Истовремено, апсорпциони транспорт ЕЦХ и АЦТ истовремено је у исхраниЕкстракт Цистанцхе тубулосаје карактерисан ин-витромоделом и ин-ситу интестиналним перфузионим системом са узорковањем крви из портала, који може лако разликовати степен апсорпције и избегавање хепатичне диспозиције првог пролаза.

Материјали и методе

Материјали

Нетакнути ЕЦХ и АЦТ били су великодушни поклони од ЕисхинТрадинг Цо., Лтд (Осака, Јапан). Флоридзин и флоретин су купљени од Токио Касеи Цо., Лтд. (Токио, Јапан). Верапамил и п-кумаринска киселина, коришћени као интерни стандарди за тест течне хроматографије високих перформанси (ХПЛЦ), добијени су од Сигма-Алдрицх (Сент Луис, МО ,САД). Све остале коришћене хемикалије биле су аналитичког квалитета и комерцијално доступне.

Биљни материјал и припрема метанолног екстракта

Ц. тубулоса (СЦХРЕНК) Р. ВИГХТ (Оробанцхацеае) је вишегодишња паразитска биљка која расте на корену врсте Салвадораор Цалотропис, а распрострањена је у северноафричким, арапским и азијским земљама. Осушене стабљике Ц. тубулоса су уситњене у прах и екстраховане три пута уз рефлукс метанола у току 3 х. Испаравање растварача под смањеним притиском дало је метанолни екстракт. Теметанолни екстракт (комерцијални квалитет, серија бр. 20070130; регистровано трговачко име, Сабаку Нинњинн Канка) био је великодушан поклон од Еисхин Традинг Цо., Лтд преко Мураока и Морикава (Универзитет Кинки, Јапан), а ботаничку идентификацију је предузео професор Јиа Ксиаогу Институт за традиционалне кинеске и етнолошке лекове Синђианг.

Анализа биљних екстраката: хроматографија

Утврдили смо садржај ЕЦХ и АЦТ уЕкстракт Цистанцхе тубулоса(Серија бр. 20070130) помоћу ХПЛЦ анализе описане у наставку. Добијени подаци приказани су у табели 1.

Ћелијска култура

Ћелије Цацо{{0}}, купљене од Америцан Типе ЦултуреЦоллецтион (АТЦЦ, Роцквилле, МД, УСА), коришћене су на пасусима 38–53. Узгајани су у медијуму културе који се састојао од Дулбековог модификованог Еагле-овог медијума (ДМЕМ, Нацалаи Тескуе Цо., Кјото, Јапан) са додатком 0.1 мМ неесенцијалних амино киселина, 10 процената топлотно инактивираног феталног говеђег серума, 100 У/мл пеницилина Г и 0,1 мг/мл стрептомицин сулфата.

Транспортне студије

Цацо-2 ћелије су постављене на поликарбонатне филтере са густином од 6,4 × 103 ћелија/цм2. Једнослојеви су коришћени за експерименте транспорта 21-25 дана након сетве. Нетакнути ЕЦХ и АЦТ који су били еквивалентни свом садржају уЕкстракт Цистанцхе тубулоса (4.5 and 13.5 mg/ml) were mixed with DMEM medium containing 0.5% dimethylsulfoxide to maintain the integrity of the cell monolayer over the periods of the experiments. Intact ACT equivalent to ECH content in the extract was also dosed in the incubation medium. The extract was suspended in a DMEM medium and was centrifuged to remove insoluble components. Supernatants were loaded to the apical side. At the indicated times, an aliquot of the incubation medium was withdrawn from the basolateral side and was mixed with acetonitrile containing an internal standard for the assay. In separate experiments, phloridzin (final concentration, 1 mM) and verapamil (final concentration, 0.2 mM) was added to the apical side of the monolayer; however, phloretin (final concentration, 0.3 mM) was treated on both sides of the monolayer. The integrity of monolayers was monitored by transepithelial electrical resistance (TEER) using Millicell-ERS (Millipore, Bedford, MA, USA) before and after transport experiments. TEER values of monolayers used were >300 Ω·цм2.

Ехинакозид инЕкстракт Цистанцхе тубулоса

Ин-ситу интестинална перфузија

Мужјаци Вистар пацова (230–250 г) су добијени из СЛЦЈапан (Хамаматсу, Јапан). Животиње су биле смештене у климатизованој просторији у циклусу светлости/мрака од 12 сати 1 недељу пре употребе. Пацови су храњени стандардном лабораторијском храном (Ориентал Иеаст Цо., Лтд., Токио, Јапан) са водом ад либитум и гладовали су преко ноћи пре теста. Ин-ситуре циркулирајућа студија перфузије је изведена према модификованој процедури коју су описали Михара и сарадници.[20] Укратко, пацови су анестезирани са 25 процентним раствором уретана (1 мг/кг) да би се избегло смањење крвног притиска. Направљен је средњи абдоминални рез и откривено је танко црево. Жучни канал је подвезан да би се избегло излучивање жучи у перфузат. Цело танко црево као један сегмент (од дванаестопалачног црева до илеума) је испирано нормалним физиолошким раствором на 37 степени током 10 минута док испирање није постало бистро. Стаклене цеви повезане са силиконским цевчицама су затим канилиране у оба краја танког црева и причвршћене концем за шавове. Затим је танко црево замењено у абдомену, а каниле су спојене на перисталтичку пумпу. Портална вена је канулирана полиетиленском цевчицом (ПЕ10).Екстракт Цистанцхе тубулосакомерцијално доступан је суспендован у Кребс-Хенселеит бикарбонатном пуферу (пХ 7,4) да би се добила коначна концентрација од 4,5 мг/мл и центрифугиран је 10 мин на 8000 рпм да би се уклониле нерастворљиве компоненте. Супернатант у одсуству или присуству флоридзина (1 мМ) је сакупљен у резервоар, који је одржаван на температури од 37 ± 0,5 степени током експеримента. У назначено време, крв је узета кроз канилу порталне вене. После центрифугирања узорака крви, резултујућа плазма је депротеинизована ацетонитрилом који садржи унутрашњи стандард и центрифугирана на 3000 рпм. Супернатанти су упарени, а остатак је растворен са мобилном фазом која се састоји од ацетонитрила и 0,5 процената сирћетне киселине. Мешани раствор је стављен на ХПЛЦ колону. Пацови су коришћени у складу са етичким процедурама у складу са Смерницама за негу и употребу лабораторијских животиња које су издале јапанска влада и Универзитет Кинки.

ХПЛЦ анализа

ХПЛЦ анализа је изведена на систему опремљеном аСхимадзу СПД{{0}}А, УВ детектором, Схимадзу ЛЦ-10А пумпом и Схимадзу Ц-Р4А хроматопак интегратором (Кјото, Јапан). ЕЦХ и АЦТ су раздвојени помоћу Инертсил ОДСцолумн (5 μм, 4,6 × 150 мм, ГЛ Сциенцес Инц., Осака, Јапан). Коришћена је мобилна фаза ацетонитрила и 0,5 процената сирћетне киселине у односу 15:85 (в/в) при брзини протока од 1,0 мл/мин. Детекција је изведена на 334 нм

Кинетичка анализа

Коефицијенти привидне пермеабилности (Папп) процењени су на основу нагиба линеарног дела временског тока транспорта једињења кроз монослојеве Цацо{0}} ћелија, на следећи начин: П дК дт АЦ апп=( ) ( )

где је дК/дт стопа пермеабилности, Ц0 је почетна концентрација растворене супстанце у донорској комори, а А је површина мембране (4,7 цм2).

У студији интестиналне перфузије пацова ин ситу, површина испод криве концентрације у плазми-време (АУЦ0–90) у порталној вени од нулте до последњег мерења израчуната је према линеарном трапезоидном правилу.

Ацтеосиде инЕкстракт Цистанцхе тубулоса

Физичкохемијска својства

Поларна површина и неполарна површина једињења израчунате су коришћењем програма САС (верзија 0.8, Олссон, Т.; Схербукхин, В., Синтхесис анд Струцтуре Администратион, 1997–2001, АстраЗенеца, Цари , НЦ, САД). Експериментално одређене вредности лог П и пКа добијене су из литературе.

Статистичка анализа

Подаци су анализирани једносмерном анализом варијансе праћено Тукијевим пост-хоц тестом. Вредности вероватноће мање од 5 процената сматране су значајним.

Резултати

Апсорптивни транспорт ехинакозида и актеозида кроз монослојеве ћелије Цацо{0}}

Код мишева и пацова, интактни ЕЦХ[10,14] и АЦТ[12,21] се орално примењују у дозама од 100–1000 мг/кг. ТхеЕкстракт Цистанцхе тубулосакоришћени садрже приближно 30 процента ЕЦХ и 15 процената АЦТ по дози. Пошто је екстракт променио осмотски притисак и пХ у медијуму за инкубацију, концентрације од 4,5 и 13,5 мг/мл су одређене на основу оралне дозе (неоштећена једињења: 2–20 мг/2{{2{{31} }}} г телесне тежине) код мишева. Екстракт у малим (4,5 мг/мл) и високим дозама (13,5 мг/мл) је садржао 2.0 и 6,1 мг за ЕЦХ и 1.0 и 3.0 мг за АЦТ, респективно. Применили смо количине екстракта Ц. тубулоса које су биле много ниже од оралних доза ЕЦХ и АЦТ пријављених код људи (препоручена количина екстракта у исхрани: 150 мг који садржи приближно 45 мг за ЕЦХ и 22,5 мг за АЦТ). При ниским и високим дозама нетакнутих једињења, профили апсорпције (Слика 2) и Папп нису се значајно разликовали између ЕЦХ и АЦТ као ЕЦХ еквивалента (Табела 2). Када је екстракт Ц. тубулоса у високој дози од 13,5 мг/мл уметнут у медијум, вредности Папа (1,27 ± 0.13 и 0,34 ± 0,03 × 10−6 цм/с, респективно) ЕЦХ и АЦТ су били троструко већи од оних (0,38 ± 0,09 и 0,10 ± 0,03 × 10-6 цм/с, респективно) интактних ЕЦХ и АЦТ (Табела 2). Екстракт, за разлику од нетакнутих једињења, значајно је побољшао транспорт апсорпције ЕЦХ и АЦТ.

Инхибиторни ефекат флоридзина, флоретина и верапамила

To characterize the intestinal absorption of ECH and ACT, Caco-2 cell monolayers were incubated with representative inhibitors. Apical glucose transporter 1-sensitive phloridzin dramatically reduced the Papp of intact ECH and ACT to 20% of non-treatment at the high dose (Table 2). Basolateral glucose transporter (GLUT) 2-sensitive phloretin did not decrease the transport of intact ECH and ACT (Figure 3). In this study, higher concentrations (>0.3 мМ) флоретина није могло да се користи због приметне токсичности за ћелије. Поред тога, П-гп је идентификован као важан играч одговоран за интеракцију између биљних лекова и клинички важних П-гпс супстрата. Верапамил није побољшао апсорптивни транспорт интактних једињења (Слика 3).

Апсорптивни транспорт ЕЦХ и АЦТ у екстракту (ниска доза) значајно је инхибирао флоридзин (Табела 2 и Слика 4). Екстракт у високој дози потиснуо је инхибицију осетљиву на флоридзин, иако је транспорт интактног ЕЦХ и АЦТ био осетљивији на флоридзин (Табела 2).

Ин-ситу студија перфузије црева

У ин ситу студији, тестирали смо да ли су ЕЦХ и АЦТ инЕкстракт Цистанцхе тубулосатранспортовани су помоћу СГЛТ1 који се налази на апикалној страни танког црева. Када је дијетални екстракт у малој дози (4,5 мг/мл) перфузиран, ЕЦХ и АЦТ су се брзо појавили у крви портала (Слика 5). АУЦ је одређена као 2702,8 ± 384,1 μм·мин за ЕЦХ и 698,3 ± 197,2 μм·мин за АЦТ. Након што је АУЦ нормализован са садржајем изЕкстракт Цистанцхе тубулоса, апсорбована количина се није значајно разликовала између ЕЦХ и АЦТ. СГЛТ1-осетљиви флоридзин, за разлику од флоретина, значајно је потиснуо апсорптивни транспорт истовременог ЕЦХ (АУЦ, 649,4 ± 248,2 μм·мин) и АЦТ (није детектован).

Дискусија

Неки биљни састојци су супстрати П-гп који је високо експримиран у јетри, цревима, мозгу и бубрезима. П-гп је одлучујући фактор за ин виво биорасположивост, диспозицију и дистрибуцију биљних лекова, укључујући кантарион, куркумин, ехинацеу, гинсенг, гинко и ђумбир.[22,23]Биорасположивост генистеина{{5} }глукозид, флавоноидни дериват, такође је био ограничен интестиналним МРП2 транспортером.[24] Стога је ова студија осмишљена да истражи својства апсорпције ЕЦХ и АЦТ у исхрани и лековима.Екстракт Цистанцхе тубулоса.

Поларизовани монослојеви Цацо{{0}} ћелија, као и црева,[25], експримирају главне интестиналне транспортере ефлукса лекова, као што су П-гп, МРП и протеин отпорности на рак дојке.[26]Флавоноиди у исхрани у исхрани. показало се да кверцетин[27] и мирицетин[28] инхибирају П-гп посредован ефлукс иу ћелијским линијама и на животињским моделима. Верапамил, инхибитор П-гп, није променио пермеабилност АЦТ и ЕЦХ кроз монослојеве Цацо-2 ћелија (Слика 3), што указује да интактни ЕЦХ и АЦТ нису били ограничени П-гп ефлукс пумпом. Наше претходне студије су показале да протеини МРП2 нису експримирани у монослојевима Цацо{13}} ћелија.[29] П-гп и МРП{16}}посредовани ефлукс би могао бити искључен у ЕЦХ и АЦТ транспорту. Неки гликозиди кверцетина са ниском липофилношћу су се ефикасније апсорбовали од самог кверцетина.[30] Такође је важно напоменути да се АЦТ са шећерним делом брзо дистрибуира у можданим ткивима. Наша пажња је усмерена на комбиновано деловање два транспортера глукозе у ентероцитима: СГЛТ у мембрани са ивицама четкице и олакшани дифузиони транспорт глукозе (ГЛУТ) у базолатералној мембрани. Цацо-2 ћелијска култура се може користити као модел за проучавање ГЛУТ2 осетљивог на флоретин, и СГЛТ1 и 2 транспортера осетљивих на флоридзин.[31–34]Глукоза се транспортује од апикалне ка базолатералној страни Цацо-2 монослоја. великом брзином са Паппоф-ом 36,8 ± 1,1×10-6 цм/с.[35] Поседује већи Папп него трансцелуларни транспортни маркер пропранолол (23,4 ± 2,8 × 10-6 цм/с). Као што је приказано у табели 2, интактни ЕЦХ и АЦТ су имали много нижи Папп од оног пријављеног за глукозу и пасивни пропранолол. Израчунали смо логаритам коефицијента расподеле (октанол-вода), лог П, израчунато је да буде −2,32 и 0.077 за ЕЦХ и АЦТ, респективно. Верује се да се поларно хидрофилна једињења транспортују парацелуларним путем (преко уских спојева). Чини се да се два фенилетаноидна гликозида, попут манитола, транспортују парацелуларним путем. Међутим, флоридзин је драматично смањио апсорпциону пермеабилност интактног ЕЦХ и АЦТ (Табела 2), што сугерише да апикални СГЛТ1 игра главну улогу у цревној апсорпцији интактног ЕЦХ и АЦТ. При еквивалентној дози, већа хидрофобна АЦТ пермеабилност била је близу ЕЦХ пермеабилности (Слика 2 и Табела 2). Јошикава и др.[36] су показали да су фасилитативни транспортери (ГЛУТ 1 и 2), као и СГЛТ1 осетљиви на флоридзин, интензивно експримирани у танком цреву. Пошто су апсорбоване количине једињења засноване на равнотежи масе између уноса и елиминације, проценили смо учешће ГЛУТ2. Глукоза пролази кроз апикалне мембране ентероцита помоћу СГЛТ1 са високим афинитетом и малим капацитетом и излази преко базолатералне мембране кроз ГЛУТ2 са ниским афинитетом и високим капацитетом. Флоретин (специфични инхибитор ГЛУТ2) није укинуо транспорт интактног ЕЦХ и АЦТ (Слика 3). Фунес и др.[37] показали су да је АЦТ снажно интераговао са фосфатним групама фосфолипидних мембрана. Пошто су хидроксилне групе у изобиљу у АЦТ структури, највероватније интеракције су водоничне везе између ових група и поларних глава глицерола или фосфатних група фосфолипида. Када су нетакнути ЕЦХ и његов еквивалентни АЦТ инкубирани са Цацо-2 монослојевима током 11 х, ћелијска акумулација АЦТ (0,24 ± 0,04 нмол/цм2) била је три пута већа од ЕЦХ (0,07 ± 0,01 нмол/цм2). Мислили смо да се СГЛТ{74}}осетљиви ЕЦХ и АЦТ полако померају из ентероцита у крвоток, што је вероватно довело до уоченог ниског Папп. У поређењу са високо хидрофилним ЕЦХ, ниска пермеабилност АЦТ-а може бити последица интеркалације у ћелијске мембране.

Екстракт Цистанцхе тубулоса

Полифенолна једињења се конзумирају у биљним мешавинама током њихове клиничке примене и комерцијално су доступна као дијететски суплементи. У ин-витро студији, показано је да на апсорпцију фенолног епикатехина није утицао састав састојака прехрамбених материјала за пиће.[38] Насупрот томе, Хиперицум перфоратумЛ. матрице производа утичу на транспорт кверцетинглукозида (рутина и изокверцитрина) и хиперозида кроз Цацо-2 ћелије због разлика у фитокемијском саставу матрикса и карактеристикама транспорта, тј. парацелуларног трансфера и транспорта посредованог носачем или активног транспорта.[39] У овој студији, Ц. тубулоса је обезбедила троструко већи трансепителни транспорт од интактних ЕЦХ и АЦТ (Слика 2 и Табела 2). Спекулишемо да су компоненте уЕкстракт Цистанцхе тубулосаактивирају транспортер осетљив на флоридзин и/или убрзавају елиминацију интрацелуларног ЕЦХ и АЦТ.Екстракт Цистанцхе тубулосачинило се да при високој дози у великој мери маскира моћ транспорта осетљивог на флоридзин (Табела 2). Дијететски угљени хидрати[40] и протеини[41]у интеракцији су са неким полифенолима у гастроинтестиналном тракту.Морикава ет ал.[10] показао да се пет иридоида, канканозида АД и канканола, монотерпенског гликозида, канканозида Е, два фенилетаноидна олигогликозида, канканозида Ф и Г, и ацилирани олигошећер, канканоза, могу изоловати изЕкстракт Цистанцхе тубулоса

тренутно се користи. Остали састојци, укључујући протеине уЕкстракт Цистанцхе тубулоса, остаје нејасно. Заједно са горњим спекулацијама, осмишљени смо да испитамо да ли друге компоненте интерагују са СГЛТ1 и инхибирају апсорпцију ЕЦХ и АЦТ.

Експерименти ин виво не могу лако разликовати степен апсорпције и избегавање диспозиције првог проласка кроз јетру. Ин ситу модел интестиналне перфузије има предност у односу на ин виво и ин витро моделе због лаке контроле параметара експеримента и искључивања утицаја других органа и одржавања нетакнутог цревног снабдевања крвљу.[22] Учешће транспортера глукозе осетљивог на флоридзин је процењено у анин-ситу интестиналном перфузионом систему. Као што је приказано на слици 5, апсорбоване количине пратећих састојака ЕЦХ и АЦТ уЕкстракт Цистанцхе тубулоса (low dose) were greatly abolished by phloridzin, which agrees with our in-vitro data (Figure 4). Using peptides and 20 drugs passively absorbed, a good correlation is obtained between in-vivo drug absorption and the drug permeability of Caco-2 monolayers.[42] Drugs with a Papp of >1 × 10−6 цм/с се потпуно апсорбују код људи, док се слабо апсорбују лекови и пептиди (<1% of="" dose)="" have="" papp="" values="" of=""><1 ×="" 10−7="" cm/s.="" surprisingly,="" the="" papp="" of="" the="" ech="" concomitant="" (high="" dose)="" was="">1 × 10-6 цм/с (Табела 2), што указује на високу оралну биорасположивост код животиња и људи. Цреспи ет ал.[43] показало да се ефлукс у ин ситу интестиналној перфузионој студији није значајно разликовао између флоридзина и флоретина. Они[44] су такође показали да је орална биорасположивост флоридзина са високом осетљивошћу на СГЛТ1 била само 10 процената код пацова. Будуће студије треба да процене биорасположивост и ефекат првог проласка кроз јетру истовременог ЕЦХ након оралне примене дијететског екстракта у високој дози. Резултати на лицу места подразумевају да је уносЕкстракт Цистанцхе тубулосаможе побољшати ниску оралну апсорпцију интактног ЕЦХ и АЦТ.

Закључак

Дијетална и лековитаЕкстракт Цистанцхе тубулосапобољшање интестиналне апсорпције ЕЦХ и АЦТ може послужити за боље управљање људским здрављем, иако би требало смањити учешће транспорта осетљивог на флоридзин.

Декларације

Сукоб интереса

Аутор(и) изјављује(ју) да нема сукоба интереса за откривање

Финансирање

Овај рад је делимично подржао Високотехнолошки истраживачки центар са Универзитета Кинки.

Признања

Аутори желе да се захвале Осаму Мураока (Кинки Универзитет, Осака, Јапан) и Тосхио Морикава (Кинки Универзитет, Осака, Јапан) за набавкуЕкстракт Цистанцхе тубулосаи чистих састојака. Веома смо захвални Масахиру Ивакију (Универзитет Кинки) на студијској подршци.

Екстракт Цистанцхе тубулосапроизводи

Од: ' Транспорт ехинакозида и актеозида који је осетљив на флоридзин и измењени пут цревне апсорпције након применеЕкстракт Цистанцхе тубулоса' од странеТадатосхи Танино и др

---© 2015. Роиал Пхармацеутицал Социети, Јоурнал оф Пхармаци анд Пхармацологи, 67, стр. 1457–1465,Фенилетаноид глукозиди које преноси СГЛТ1

Референце

1. Танака Ј ет ал. ЕфекатЕкстракт Цистанцхе тубулосана разне болести мозга. Стил хране 21 2008; 12: 24–26.

2. Танака Ј ет ал. Функције против старењаЕкстракт Цистанцхе тубулоса. Стил хране 21 2008; 12: 27–29.
3. Танака Ј ет ал. Функције лепоте и раста косеЕкстракт Цистанцхе тубулоса. Стил хране 21 2008; 12: 29–32.
4. Танака Ј ет ал. Ефекат метаболизма мастиЕкстракт Цистанцхе тубулоса. Стил хране 21 2008; 12: 30–33.
5. Иосхизава Ф ет ал. Састојци Цистанцхе тубулоса Сцхренк (Хоок) ф.ИИ. изолација и структура новог фенилетаноидног гликозида и новог неолигнан гликозида. Цхем Пхарм Булл 1990; 38: 1927–1930.
6. Иосхикава М ет ал. Фенилетаноидни олигогликозиди и ациловани олигошећери са вазорелаксансном активношћу из Цистанцхе тубулоса. Биоорг Мед Цхем 2006; 14: 7468–7475.
7. Ту ПФ ет ал. Анализа фенилетаноидних гликозида Херба цистанце помоћу РП-ХПЛЦ. Иао Ксуе Ксуе Бао 1997; 32: 294–300.
8. Леи Л ет ал. Метаболичка регулација фенилетаноидних гликозида из Херба цистанцхес у гастроинтестиналном тракту пса. Иао Ксуе Ксуе Бао 2001; 36: 432–435.
9. Генг Кс ет ал. Неуропротективни ефекти ехинакозида у мишјем МПТП моделу Паркинсонове болести. Еур Ј Пхармацол 2007; 564: 66–74.
10. Морикава Т ет ал. Ацилирани фенилетаноидни олигогликозиди са хепатопротективном активношћу из пустињске биљке Цистанцхе тубулоса. Биоорг Мед Цхем 2010; 18: 1882–1890.
11. Паола РД ет ал. Ефекти вербаскозида, биотехнолошки пречишћених културама биљних ћелија сиринга Вулгарис, у моделу пародонтитиса код глодара. Ј Пхарм Пхармацол 2011; 63: 707–717.
12. Ву ИТ ет ал. Одређивање актеозида у Цистанцхе десертицола и Босцхниакиа россица и његове фармакокинетике код слободно покретних пацова коришћењем ЛЦ-МС/МС. Ј Цхроматогр Б Аналит Тецхнол Биомед Лифе Сци 2006; 844: 89–95.
13. Матија А и др. Студије пермеабилности алкиламида и коњугата кафеинске киселине из ехинацее коришћењем модела монослоја ћелија цацо{1}}. Ј Цлин Пхарм Тхерапеут 2004; 29: 7–13.
14. Јиа Ц ет ал. Одређивање ехинакозида у серуму пацова течном хроматографијом високих перформанси реверзне фазе са ултраљубичастом детекцијом и његова примена на фармакокинетику и биодоступност. Ј Цхроматогр 2006; 844: 308–313.
15. Цардинали А ет ал. Вербаскозиди из воде из млина маслине: процена њихове биоприступачности и интестиналног уноса коришћењем ин витро система за варење/како{1}}. Ј Фоод Сци 2011; 176: Х48–Х54.
16. Јиа Ц ет ал. Метаболизам ехинакозида, доброг антиоксиданса, код пацова: изолација и идентификација његових билијарних метаболита. Друг Метаб Диспос 2009; 37: 431–438.
17. Најар ИА ет ал. Модулација активности П-гликопротеин АТПазе неким фитоконституентима. Пхитотхер Рес 2009; 24: 454–458.
18. Валгрен РА ет ал. Ефлукс дијететског флавоноида кверцетин 4′-бета-глукозида кроз монослојеве хуманих интестиналних цацо-2 ћелија путем апикалног протеина повезаног са вишеструком резистенцијом-2. Ј Пхармацол Екп Тхер 2000а; 294: 830–836.
19. Валгрен РА ет ал. Ћелијско преузимање дијеталне флавоноид кверцетин 4′-бета-глукозидазе натријум-зависним транспортером глукозе СГЛТ1. Ј Пхармацол Екп Тхер 2000б; 294: 837–843.
20. Михара К и др. Метаболизам првог пролаза кроз црево еперизона код пацова. Пхарм Рес 2001; 18: 1131–1137.
21. Исаццхи Б ет ал. Антихипералгетичка активност вербаскозида у два модела неуропатског бола. Ј Пхарм Пхармацол 2011; 63: 594–601.

22. Цоок ТЈ ет ал. Интестинална пермеабилност хлорпирифоса применом методе интестиналне перфузије са једним пролазом код пацова. Токицологи 2003; 184: 125–133.

23. Кумар ИС ет ал. Интеракција биљних лекова посредована П-гликопротеином и цитохромом П-450-. Друг Метабол Друг Интерацт 2010; 25: 3–16.
24. Валле УК ет ал. Транспорт генистеин-7-глукозида путем ЦАЦО-2 ћелија црева човека: потенцијална улога за МРП2. Рес Цоммун Мол Патхол Пхармацол 1999; 103: 45–56.
25. Ито К ет ал. Апикална/базолатерална површинска експресија транспортера лекова и њена улога у векторском транспорту лекова. Пхарм Рес 2005; 22: 1559–1577.
26. Лаитинен Л ет ал. Ћелијске културе Цацо{1}} у процени интестиналне апсорпције: ефекти неких истовремено примењених лекова и природних једињења у биолошким матрицама. (Универзитет у Хелсинкију, Финска, 2006) Академска дисертација, стр. 1–66.
27. Сцамбиа Г ет ал. Кверцетин појачава ефекат адриамицина у МЦФ-7 ћелијској линији хуманог рака дојке отпорној на више лекова: П-гликопротеин као могућа мета. Цанцер Цхемотхер Пхармацол 1994; 34: 459–464.
28. Цхои ДХ ет ал. Утицај мирицетина, антиоксиданса, на фармакокинетику лосартана и његовог активног метаболита, ЕКСП-3174, код пацова: могућа улога цитохрома П450 3А4, цитохрома П450 2Ц9 и П- инхибиција гликопротеина мирицетином. Ј Пхарм Пхармацол 2010; 62: 908–914.
29. Танино Т ет ал. Пролек паклитаксел-2′-етилкарбонат може да заобиђе ћелијски ефлукс посредован П-гликопротеином да би повећао цитотоксичност лека. Пхарм Рес 2007; 24: 555–565.
30. Холлман ПЦ ет ал. Апсорпција дијеталних гликозида кверцетина и кверцетина код здравих добровољаца са илеостомијом. Ам Ј Цлин Нутр 1995; 62: 1276–1282.
31. Келлетт ГЛ ет ал. Дифузна компонента интестиналне апсорпције глукозе је посредована глукозом индукованим регрутовањем ГЛУТ2 на мембрану даске четкице. Биоцхем Ј 2000; 350: 155–162.
32. Материја К ет ал. Сортирање ендогених протеина плазма мембране се дешава са два места у култивисаним хуманим интестиналним епителним ћелијама (Цацо-2). Целл 1990; 60: 429–437.
33. Махраоуи Л ет ал. Присуство и диференцијална експресија мРНК транспортера СГЛТ1, ГЛУТ1, ГЛУТ2, ГЛУТ3 и ГЛУТ5 хексозе у ћелијским клоновима Цацо{6}} у односу на раст ћелије и потрошњу глукозе. Биоцхем Ј 1994; 298: 629–633.

34. Месонеро Ј ет ал. Експресија транспортера фруктозе ГЛУТ 5 у Цац-2 ћелијама зависна од шећера. Биоцхем Ј 1995; 312: 757–762.

35. Валгрен РА ет ал. Транспорт кверцетина и његових глукозида кроз Цацо-2 ћелије епитела људског црева. Биоцхем Пхармацол 1998; 55: 1721–1727.
36. Иосхикава Т ет ал. Упоредна експресија транспортера хексозе (СГЛТ1, ГЛУТ1, ГЛУТ2 и ГЛУТ5) у целом гастроинтестиналном тракту миша. Хистоцхем Целл Биол 2011; 135: 183–194.
37. Фунес Л ет ал. Ефекти вербаскозида, фенилпропаноидног гликозида из лимунске вербене, на мембране модела фосфолипида. Цхем Пхис Липидс 2010; 163: 190–199.
38. Неилсон АП ет ал. Утицај састава матрикса чоколаде на биодоступност какао флаван{1}}ола ин витро и биодоступност код људи. Ј Агриц Фоод Цхем 2009; 57: 9418–9426.
39. Гао С ет ал. Веома варијабилни садржаји фенола у производима кантариона утичу на њихов транспорт у моделу ћелија Цацо{1}} црева човека: фармацеутски и биофармацеутски образложење за стандардизацију производа. Ј Агриц Фоод Цхем 2010; 58: 6650–6659.
40. Сцхрамм ДД ет ал. Ефекти хране на апсорпцију и фармакокинетику какао флаванола. Лифе Сци 2003; 73: 857–869.
41. Лаурент Ц ет ал. Винска матрица без етанола и полифенола стимулише диференцијацију ћелија Цацо{1}} црева човека. Утицај њихове повезаности са екстрактом семена грожђа богатим процијанидином. Ј Агриц Фоод Цхем 2005; 53: 5541–5548.
42. Артурссон П ет ал. Корелација између оралне апсорпције лека код људи и привидних коефицијената пропусности лека у ћелијама унутрашњег епитела човека (Цацо-2). Биоцхем Биопхис Рес Цоммун 1991; 175: 880–885.
43. Цреспи В ет ал. Поређење интестиналне апсорпције кверцетина, флоретина и њихових глукозида код пацова. Ј Нутр 2001а; 131: 2109–2114.
44. Цреспи В ет ал. Биорасположивост флоретина и флоридзина код пацова. Ј Нутр 2001б; 131: 3227–3230.