Апстрактан:

Недавне студије су показале да плумбагин има антиинфламаторне, антиалергијске, антибактеријске и антиканцерогене активности; међутим, још увек није показано да ли плумбагин потискује синтезу меланина изазвану алфа-меланоцит стимулишућим хормоном (-МСХ) како би спречио хиперпигментацију. У овој студији смо показали да плумбагин значајно потискује -МСХ-стимулисану синтезу меланина у Б16Ф10 ћелијама меланома миша. Да бисмо разумели инхибиторни механизам плумбагина на синтезу меланина, извршили смо тестове активности тирозиназе у ћелијама или без ћелија и анализирали експресију гена везану за меланогенезу. Показали смо да плумбагин директно потискује активност тирозиназе независно од транскрипционе машинерије повезане са меланогенезом, што укључује транскрипциони фактор повезан са микрофталмијом (МИТФ), тирозиназу (ТИР) и протеин 1 повезан са тирозиназом (ТИРП1). Такође смо истражили да ли је плумбагин токсичан за нормалне људске кератиноците (ХаЦаТ) и епителне ћелије сочива (Б3) које могу бити повређене употребом козметике за негу коже. Изненађујуће, ниже концентрације плумбагина (0,5–1 µМ) ефикасно инхибирају синтезу меланина и активност тирозиназе, али не изазивају токсичност у кератиноцитима, епителним ћелијама сочива и ћелијама меланома миша Б16Ф10, што сугерише да је плумбагин безбедан за дермалну примену. Узети заједно, ови резултати сугеришу да инхибиторни ефекат плумбагина на пигментацију може да га учини прихватљивом и безбедном компонентом за употребу у козметичким формулацијама за негу коже које се користе за избељивање коже.

Према релевантним студијама, цистанцхе је уобичајена биљка која је позната као "чудотворна биљка која продужава живот". Његова главна компонента је цистанозид, који има различите ефекте као што су антиоксиданс, антиинфламаторна и промоција имунолошке функције. Механизам између цистанцхе и избељивања коже лежи у антиоксидативном дејству цистанцхе гликозида. Меланин у људској кожи настаје оксидацијом тирозина катализованом тирозиназом, а реакција оксидације захтева учешће кисеоника, тако да радикали без кисеоника у телу постају важан фактор који утиче на производњу меланина. Цистанцхе садржи цистанозид, који је антиоксидант и може смањити стварање слободних радикала у телу, чиме инхибира производњу меланина.

Кликните на Цистанцхе биенфаитс за избељивање

За више информација:

david.deng@wecistanche.com ВхатАпп:86 13632399501

Кључне речи:плумбагин; меланогенеза; пигментација; тирозиназе

1. Представљање

Меланин се састоји од групе пигмената синтетизованих у епидермалним меланоцитима који игра важну улогу у одбрани коже од оштећења ултраљубичастог (УВ) зрачења [1]. Абнормална меланогенеза, било повећана или смањена производња меланина, уско је повезана са неколико кожних болести укључујући меланом и поремећаје пигментације, као што су хлоазма и пеге [2,3]. Биосинтезу меланина иницирају вишеструки стимуланси укључујући УВ зрачење, инфламаторне цитокине и хормонску сигнализацију. Конкретно, -меланоцит стимулишући хормон (-МСХ) ослобођен из кератиноцита изложених УВ зрачењу може стимулисати биосинтезу меланина у епидермалним меланоцитима активацијом цАМП-ПКА-ЦРЕБ (циклични аденозин монофосфат-протеин киназа А-цАМП елемент одговора ки везујући протеин [3] . Активирана цАМП-ПКА-ЦРЕБ оса доводи до повећања мРНА која кодира транскрипциони фактор повезан са микрофталмијом (МИТФ). МИТФ повећава експресију гена тирозиназе (ТИР), протеина 2 повезаног са тирозиназом (ТИРП1) и протеина 2 повезаног са тирозиназом (ТИРП2) након -МСХ стимулације у меланоцитима [3,4]. Поред тога, многи сигнални путеви који контролишу ћелијски раст, укључујући протеин киназе активиране митогеном (МАПК), киназу екстрацелуларног одговора (ЕРК) и АКТ, од суштинског су значаја за меланогенезу регулацијом стабилности и активности МИТФ-а [5].

Ензим тирозиназа, мултифункционална оксидаза која садржи бакар, игра суштинску улогу у биосинтези меланина катализујући реакције у којима се Л-тирозин хидроксилира у Л-дихидроксифенилаланин (Л-ДОПА) и Л-ДОПА се оксидује у о-кинон (допакинон ) [5,6]. Према томе, неки инхибитори тирозиназе такође инхибирају биосинтезу меланина, а они укључују ресвератрол, арбутин и хонокиол, који су сви коришћени у козметичким апликацијама за избељивање коже [7].

Плумбагин је једноставан хидроксил-нафтохинон, који је први пут екстрахован из корена биљака рода Плумбаго и за који се показало да има изузетна лековита својства [8]. Пријављене су антиинфламаторне, антиканцерогене, антиалергијске и антибактеријске активности плумбагина [8,9]. Заиста, пријављено је да плумбагин инхибира активацију неутрофила, ангиогенезу и експресију колагеназе супресијом топоизомеразе-ИИ, што сугерише употребу плумбагина као потенцијалног лека у лечењу реуматоидног артритиса [10]. Поред тога, неколико извештаја је показало да плумбагин испољава активност против рака код више врста карцинома, укључујући дојке [11], простате [12], јајника [13], плућа [14], карцином коже [15] и рак јетре [16]. Иако постаје јасно да плумбагин може бити користан као терапеутска интервенција у лечењу различитих људских болести, никада није пријављен инхибиторни ефекат плумбагина на меланогенезу повезану са хиперпигментацијом.

2. Резултати

2.1. Хемијска структура и цитотоксични ефекти плумбагина у ћелијама меланома миша Б16Ф10

Пре проучавања антимеланогених ефеката плумбагина, прво смо проценили његову токсичност у ћелијама меланома миша Б16Ф10 које производе меланин. Хемијска структура плумбагина је приказана на слици 1А. Резултати нашег теста цитотоксичности где концентрације плумбагина мање од 5 µМ нису утицале на виталност ћелија у Б16Ф10 ћелијама приказани су на слици 1Б.

2.2. Плумбагин потискује -МСХ-индуковану синтезу меланина у Б16Ф10 ћелијама меланома миша

Затим смо истражили инхибиторне ефекте плумбагина на синтезу меланина индуковану меланоцит стимулишућим хормоном (-МСХ) у Б16Ф10 ћелијама. Показали смо да плумбагин снажно потискује акумулацију меланина изазвану -МСХ у култивисаном медијуму ћелија Б16Ф10 (слика 2А). Да бисмо потврдили инхибиторни ефекат плумбагина на синтезу меланина изазвану -МСХ, одредили смо екстрацелуларни или интрацелуларни садржај меланина у одсуству или присуству плумбагина у -МСХ-стимулисаним Б16Ф10 ћелијама. Слике 2Б и Ц показују да плумбагин значајно смањује екстрацелуларни и интрацелуларни садржај меланина.

2.3. Плумбагин не регулише -МСХ-индуковану експресију гена меланогенезе и каскаде трансдукције сигнала

Пошто је транскрипциони фактор повезан са микрофталмијом (МИТФ) есенцијални фактор транскрипције који регулише експресију гена повезану са меланогенезом преко осе -МСХ-ПКА-ЦРЕБ, истражили смо да ли плумбагин може регулисати експресију гена посредовану МИТФ-ом повезану са меланогенезом. Прво смо одредили временску тачку максималне експресије гена меланогенезе за МИТФ, тирозиназу (ТИР) и протеин 1 повезан са тирозиназом (ТИРП1) под -МСХ стимулацијом. МИТФ је снажно појачан после третмана -МСХ током 2 х (слика 3А). ТИР и ТИРП1 су драматично повећани након 48 х третмана -МСХ (Слика 3А). Нивои протеина МИТФ и тирозиназе су се повећали као одговор на третман -МСХ и нису потиснути третманом плумбагином (Слика 3Б). Конзистентно, плумбагин није инхибирао нивое мРНА МИТФ, ТИР и ТИРП1 након -МСХ стимулације, што сугерише да плумбагин не регулише транскрипциону машинерију која се односи на експресију гена меланогенезе у Б16Ф10 ћелијама (слика 3Ц). Пошто су фосфорилација и активација АКТ, ЕРК1/2 и ЦРЕБ (главне каскаде трансдукције сигнала које регулишу меланогенезу) потребне за меланогенезу [3], даље смо истражили да ли плумбагин регулише ове путеве трансдукције сигнала повезане са меланогенезом. Наши резултати, описани на слици 3Д, показују да плумбагин не мења АКТ, ЕРК1/2 или ЦРЕБ сигнализацију након третмана -МСХ.

2.4. Плумбагин инхибира активност тирозиназе

Пошто је јасно да природни производи који директно или индиректно инхибирају тирозиназу могу бити корисни за развој козметике за избељивање коже, затим смо истражили инхибиторни ефекат плумбагина на активност ензима тирозиназе. У овој студији смо показали да плумбагин значајно потискује -МСХ-индуковану ензимску активност ћелијске тирозиназе у Б16Ф10 ћелијама (слика 4А). Да би се разумело да ли плумбагин директно или индиректно инхибира активност тирозиназе, мерена је активност тирозиназе без ћелија. Плумбагин такође снажно инхибира Л-ДОПА оксидациону активност тирозиназе добијене из печурака, што сугерише да плумбагин потискује меланогенезу директно инхибирајући активност тирозиназе (Слика 4Б). Поред тога, примећено је значајно повећање активности уклањања радикала коришћењем 1,1-дифенил-2-пикрилхидразила (ДППХ) теста у узорцима третираним витамином Ц и плумбагином у концентрацијама у распону од 0.1 до 5 мг/мЛ. Сходно томе, 5 мг/мЛ плумбагина је показало сличан ефекат на активност уклањања радикала као и 0,1 мг/мЛ витамина Ц (Слика 4Ц).

2.5. Плумбагин није токсичан у нормалним кератиноцитима и епителним ћелијама сочива

Пошто је козметика као што је крема за кожу за спољну употребу и цитотоксичност може да изазове проблеме са кожом, даље смо истражили да ли је плумбагин токсичан за нормалне кератиноците (ХаЦаТ) и епителне ћелије сочива (Б3) и да ли може бити користан за развој избељивања коже. козметика. Сходно томе, открили смо да ниже концентрације плумбагина (1–5 µМ) не изазивају токсичност у ХаЦаТ и Б3 ћелијама, али су ефикасне у инхибицији синтезе меланина (Слика 5А). Поред тога, плумбагин није индуковао Х2АКС повезан са оштећењем ДНК и смањио поли (АДП-рибоза) полимеразу (ПАРП) и каспазу-3 протеине повезане са ћелијском апоптозом у ХаЦаТ и Б3 ћелијама (Слика 5Б), што сугерише да плумбагин може бити прихватљив за употребу у производима за избељивање коже без икакве дермалне токсичности

За више информација: david.deng@wecistanche.com ВхатАпп:86 13632399501