Улога прелимбичког кортекса ПКЦ и ПКМζ у поновној консолидацији памћења страха и постојаности након реактивације

За више информација:ali.ma@wecistanche.com

Перзистентност новостечених сећања је подржана активношћу ПКМЦ, атипичне изоформе протеин киназе Ц(ПКЦ). Још увек није познато да ли активност конвенционалних и атипичних ПКЦ изоформи доприноси да реактивирана сећања опстају. Слично, да лимеморијареактивација је предуслов за интервенције да би се променила постојаност меморије једва да се истражује. На основу горе наведеног, испитали смо улогу конвенционалних и атипичних ПКЦ изоформи у прелимбичкој реконсолидацији кортекса и постојаности реактивираног контекстуалног страха.меморијакод мужјака пацова Вистар. Показало се да инхибиција ПКЦ активности хелеритрином или ПКМК активности ЗИП-ом нарушава постојаност наших активиранихмеморијанајмање 21 дан; (и) ЗИП дат одмах након тогамеморијареактивација није утицала ни на процес поновне консолидације нити на процес постојаности. Насупрот томе, када се даје 1 сат касније, ослабљен јемеморијаупорност; (ии) хелеритрин дат одмах након реактивације памћења нарушио је поновну консолидацију; (в) изостављањемеморијареактивација је спречила ефекте изазване хелеритрин и ЗИП: (в) ЗИП акција је независна од времена које је протекло између његове примене и почетногмеморијатест. Резултати показују да су прелимбички кортекс ПКЦ и ПКМ укључени умеморијапоновно консолидовање и упорност.

Тхиаго Родригуес да Силва1, Ана Мариа Раимунди1, Леандро Јосе Бертоглио2,

Роберто Андреатини1 и Кристина А. Стерн 1*

Породица протеин киназе Ц (ПКЦ) укључује конвенционалне ( , , и ), нове (δ, ɛ, η и θ) и атипичне (ζ, ι и λ) изоформе1,2. Улога сваке од ових ПКЦ изоформи је тренутно под истрагом. Нагомилани докази сугеришу да упорна активација атипичне изоформе протеин киназе Ц (ПКМζ) у касној фазимеморијаконсолидација је одговорна за одржавање дугорочне потенцирање и дугорочнемеморија 3–5. Такође је пријављено да је ПКМζ неопходан за опстанак новостечених процедуралних, просторних, апетитивних (награђујућих) и аверзивних сећања4,6–8. Показало се да прекомерна експресија ПКМζ у прелимбичком (ПЛ) кортексу потенцира перзистентност аверзивне меморије9. С друге стране, његова метилација ДНК у ПЛ кортексу, или агрегација са неурофибриларним заплетима у хипокампусу, повезана је самеморијаопадање или оштећење код животињских модела болести повезаних са старењем10,11.

Кликните на органску Цистанцхе за памћење

Предложено је да кратка реактивација меморије индукује касну фазу (изван временског оквира реконсолидације) синтезе протеина која би могла бити у основи постојаности реактивираних аверзивних сећања12. Сходно томе, пријављено је да инхибитор синтезе протеина који се даје 9,5 сати након реактивације нарушава постојаност реактивираног памћења страха13. Слично, инхибиција ПКЦ-а 6 или 9 сати након реактивације памћења страха је нарушила њену постојаност без утицаја на процес реконсолидације14. Постоји извесна сличност између консолидације сећања на страх и поновне консолидације, као што је њихов временски оквир појављивања15–17. Механизми који подржавају постојаност меморије током и након консолидације меморије су релативно више истражени18,19. Истраживање механизама одржавања меморије током и након временског оквира реконсолидације је још увек у почетку. Било би од научног и терапеутског значаја да унапредимо наше знање о последњем питању. кортекс ПКЦ и ПКМ (у постојању контекстуалне меморије страха код пацова. Првобитно смо се фокусирали на одређене временске тачке након завршетка временског прозора реконсолидације меморије (од 6 до 18х након реактивације меморије) Даље, изостављањем реактивације меморије, проценили смо захтев овог процеса да изазове механизме постојаности меморије Коначно смо се позабавили да ли су ПКЦ и/или ПКМЦ такође важни за консолидацију меморије и/или постојаност унутар временског оквира поновне консолидације (0 и/или 1 х након реактивације меморије ).

Резултати

Ефекти инхибиције ПКЦ кортекса ПЛ од стране хелеритрина на постојаност реактивиране контекстуалне меморије страха.

Ову фармаколошку интервенцију смо тестирали 6, 9, 12 и 18 сати након реактивације меморије (слика 1А). У првој одабраној временској тачки, мешовити АНОВА је показао значајне ефекте сесија [Ф(2,44)=33.7; П<0.0001], the="" treatment="" [f(1,22)="8.77;" p="0.007]," and="" the="" interaction="" between="" these="" factors="" [f(2,44)="22.0;" p="0.00001]," for="" freezing="" time.="" as="" shown="" in="" fig.="" 1b,="" the="" tukey="" post-hoc="" test="" showed="" a="" signifcant="" diference="" between="" control="" and="" chelerythrine="" groups="" (n="13" and="" 11,="" respectively)="" during="" test="" a2="" (p="0.0001;" hedges'="" g="" efect="" size="2.65)," but="" not="" the="" reactivation="" session="" (p="0.90;" g="0.40)" or="" test="" a1="" (p="0.95;" g="">

У другој одабраној временској тачки (9 х), мешовити АНОВА је показао значајне ефекте сесија [Ф(2,36)=25.1; П<0.0001], the="" treatment="" [f(1,18)="8.95;" p="0.0078]," and="" their="" interaction="" [f(2,36)="7.06;" p="0.0026]." as="" shown="" in="" fig.="" 1c,="" there="" was="" a="" signifcant="" diference="" between="" control="" and="" chelerythrine="" groups="" (n="12" and="" 8,="" respectively)="" during="" test="" a2="" (p="0.001;" g="1.92)," but="" not="" the="" reactivation="" session="" (p="0.81;" g="0.63)" or="" test="" a1="" (p="0.53;" g="">

У трећој одабраној временској тачки (12х), мешовити АНОВА је показао значајан ефекат сесија [Ф(2,28)=20.9; П<0.0001], the="" treatment="" [f(1,14)="11.3;" p="0.0047]," and="" their="" interaction="" [f(2,28)="18.0;"><0.0001]. as="" shown="" in="" fig.="" 1d,="" there="" was="" a="" signifcant="" diference="" between="" control="" and="" chelerythrine="" groups="" (n="7" and="" 9,="" respectively)="" during="" test="" a2="" (p="0.0002;" g="3.15)," but="" not="" the="" reactivation="" session="" (p="0.31;" g="0.75)" or="" test="" a1="" (p="0.96;" g="">

У четвртој одабраној временској тачки (18х), мешовити АНОВА је показао значајне ефекте сесија [Ф(2,24)=9.43; П<0.0001], and="" an="" interaction="" between="" sessions="" and="" treatment="" [f(2,24)="5.00;" p="0.02]," but="" not="" the="" treatment="" [f(1,12)="0.66;" p="0.43]." as="" shown="" in="" fig.="" 1e,="" there="" was="" a="" significant="" difference="" between="" test="" a2="" and="" the="" reactivation="" session="" in="" animals="" treated="" with="" vehicles="" (p="0.03;" g="1.12;" n="7)," but="" not="" chelerythrine="" (p="0.57;" g="0.76;" n="7)." there="" were="" no="" significant="" differences="" between="" groups="" during="" any="" session="" performed.="" altogether,="" the="" results="" associate="" the="" pl="" cortex="" pkc="" activity="" 6,="" 9,="" or="" 12h="" after="" reactivating="" an="" aversive="" memory="" with="" its="">

Оштећена постојаност меморије изазвана инхибицијом ПКЦ у ПЛ кортексу захтева претходну реактивацију меморије.

Промене у постојаности памћења изазване хелеритрином биле су сличне када је овај лек дат 6, 9 или 12 сати након сесије реактивације. На основу овога, изабрана је прва временска тачка за спровођење следећег експеримента у коме је сесија реактивације меморије изостављена (слика 2А) да би се испитало да ли је то предуслов за посматрање горе наведеног исхода. У том циљу, животиње условљене контекстуалним страхом биле су изложене неутралном и неупареном контексту Б (сесија без реактивације) и 6 сати касније третиране носачем или хелеритрином (н=6 по групи). Мешовита АНОВА показала је значајне ефекте сесија [Ф(2,20)=167,48; П=0.000001], али не и третман [Ф(1,10)=0.75; П=0.40] или њихова интеракција [Ф(2.20)=0.34; П=0.71]. Као што је приказано на слици 2Б, обе групе су показале веће вредности замрзавања током теста А1 и А2 него у сесији без реактивације (П<0.0001), confirming="" that="" this="" conditioned="" behavior="" is="" observed="" predominantly="" when="" the="" animals="" are="" re-exposed="" to="" the="" conditioning="" context.="" further,="" no="" treatment="" effect="" was="" observed,="" indicating="" that="" memory="" reactivation="" is="" essential="" for="" chelerythrine-induced="" impairments="" in="" its="">

Ефекти инхибиције ПЛ кортекса ПКМζ ЗИП-ом на постојаност реактивиране контекстуалне меморије страха. Показало се да прекомерна експресија ПКМζ у ПЛ кортексу потенцира перзистентност аверзивне меморије9. На основу овог и претходних налаза хелеритрина, истражили смо да ли је активност ПКМζ у ПЛ кортексу 6х након реактивације контекстуалне меморије страха укључена у њену постојаност (слика 3А). Мешовита АНОВА показала је значајне ефекте сесија [Ф(3,36)=31.4; П<0.0001], the="" treatment="" [f(1,12)="25.9;" p="0.0003]," and="" their="" interaction="" [f(3,36)="15.1;" p="0.0001]." as="" shown="" in="" fig.="" 3b,="" there="" were="" significant="" differences="" between="" control="" and="" zip="" groups="" (n="7" in="" both="" cases)="" during="" test="" a2="" (p="0.0001;" g="2.53)," and="" test="" a3="" (p="0.0001;" g="4.11)," but="" not="" the="" reactivation="" session="" (p="0.99;" g="0.13)" or="" test="" a1="" (p="0.54;" g="1.35)." altogether,="" the="" results="" associate="" the="" pl="" cortex="" pkmζ="" activity="" 6h="" after="" reactivating="" an="" aversive="" memory="" with="" its="">

Да би се истражило да ли је реактивација меморије предуслов да ЗИП утиче на процес постојаности, у следећем експерименту животиње су биле изложене неутралном и неупареном контексту Б (сесија без реактивације) и 6 сати касније третиране вехикулом (н=6 ) или ЗИП (н=9) (слика 3Ц). Мешовита АНОВА показала је значајне ефекте сесија [Ф(3,39)=202; П=0.00001], али не и третман [Ф(1,13)=0.33; П=0.57] или њихова интеракција [Ф(3,39)=0.17; П=0.91]. Као што је приказано на слици 3Д, обе групе су показале дуже време замрзавања током тестова А1, А2 и А3 него у сесији без реактивације (П<0.0001), confirming="" that="" fear="" expression="" is="" more="" selective="" to="" the="" conditioning="" context.="" moreover,="" no="" treatment="" effect="" was="" observed,="" indicating="" that="" memory="" reactivation="" is="" necessary="" for="" the="" zip-induced="" changes="" in-memory="">

Слика 3. Ефекти прелимбичке (ПЛ) инхибиције ПКМ кортекса помоћу ЗИП-а на постојаност активиране контекстуалне меморије страха. (А) У општем експерименталном дизајну који је коришћен, животиње су у почетку упознате са контекстом. Дан касније, контекст је упарен са три шока (САД). Следећег дана, 6 сати након реактивације меморије (поновно излагање контекста А), животиње су примиле билатералну инфузију ЗИП или Сцр-ЗИП (10 нмол) Интра-ПЛцортек-а. Један, седам и 21 дан касније, животиње су поново изложене контексту упаривања (Тестови А, А и А,) да би се проценили ефекти ЗИП-а на памћење, (Б) Ефекти ЗИП-а на постојаност памћења када су дате 6 сати након реактивације. ЗИП. третиране животиње су имале краће време замрзавања од контрола током тестова А и А, што указује на оштећење постојаности у меморији. (Ц) Коришћен је општи експериментални дизајн. Животиње су првобитно упознате са контекстом А. Дан касније, контекст је упарен са три шока (УС). Следећег дана, 6 х након изостављања реактивације меморије (неутрално и неупарено излагање контексту Б), животиње су примиле билатералну инфузију ЗИП или Сцр-ЗИП интра-ПЛ кортекс. Један, седам и 21 дан касније, животиње су поново изложене упареном контексту (Тестови А. А2 и А3) да би се проценили ефекти ЗИП-а на памћење. (Д) ЗИП ефекти на постојаност меморије када се дају 6 сати након изостављања реактивације меморије. Животиње третиране ЗИП-ом показале су време смрзавања слично као код контрола током било ког теста, што указује на то да нема промена у постојаности меморије. (Е) Општи експериментални дизајн који се користи. Животиње су првобитно упознате са контекстом А. Дан касније, контекст је упарен са три шока (САД). Следећег дана, 6 сати након реактивације меморије (поновно излагање контекста А), животиње су примиле билатералну инфузију ЗИП или Сцр-ЗИП интра-ПЛ кортекса, десет дана касније, животиње су поново изложене упареном контексту (Тест А) за процену ефеката ЗИП-а на памћење. (Ф) Ефекти ЗИП-а на постојаност памћења када се даје 6 сати након реактивације, животиње третиране ЗИП-ом су имале краће време замрзавања од контрола током теста А, што указује на оштећење постојаности у меморији. Вредности су изражене као средња вредност± СЕМ (број животиња по групи: Б=7/групи; Д=6-9; Ф=7-9). У „Б“ и „Ф“, звездица означава статистички значајна разлика (П< 0.05)="" from="" the="" respective="" control="" group="" (mixed="" anova="" followed="" by="" the="" tukey="" test).in"d,="" the="" fence="" (hashtag)="" denotes="" a="" statistically="" significant="" difference="">< 0.05)from="" tests="" a,="" a,="" and,="" relative="" to="" the="" no="" reactivation="" session="" in="" both="" groups="" (mixed="" anova="" followed="" by="" the="" tukey="">

Тврдило се да инхибиција ПКМζ може пореметити експресију меморије, а не трајно ометати њену постојаност23. Да би се истражило да ли ефекти изазвани леком на постојаност реактивираног памћења зависе од времена протеклог између третмана и теста А1 (слика 3Е), у следећем експерименту животиње су добиле инфузију третмана у ПЛ кортекс 6 х након реактивације меморије, и Тест А1 је спроведен после 10 дана (уместо 1 дан касније). Мешовита АНОВА показала је значајне ефекте сесија [Ф(1,14)=5.68; П<0.03], the="" treatment="" [f(1,14)="7.40;" p="0.01]," and="" their="" interaction="" [f(1,14)="19.41;" p="0.0006]." as="" shown="" in="" fig.="" 3f,="" there="" was="" a="" significant="" difference="" between="" control="" and="" zip="" groups="" (n="7–9" animals/group)="" during="" test="" a1="" (p="0.01;" g="2.37)," but="" not="" the="" reactivation="" session="" (p="0.78;" g="0.50)." these="" results="" corroborate="" that="" pl="" cortex="" pkmζ="" activity="" 6h="" after="" reactivating="" a="" contextual="" fear="" memory="" is="" involved="" in="" its="" persistence,="" and="" indicate="" the="" zip="" action="" is="" independent="" of="" the="" time="" elapsed="" between="" its="" administration="" and="" test="">

Слика 4. Ефекти инхибиције прелимбичке (ПЛ) кортекса ПКЦ хелеритрин (Цхе) на реконсолидацију реактивиране контекстуалне меморије страха (А) Општи експериментални дизајн који је коришћен. Животиње су првобитно упознате са контекстом А. Дан касније, контекст је упарен са три шока (УС). Следећег дана, одмах након реактивације меморије (поновно излагање контекста А), животиње су примиле билатералну инфузију вехикла (Вех )или Цхе(3.0 нмол) интра-ПЛкортекса. Један, седам и 21 дан касније, животиње су поново изложене упареном контексту (тестови А, А и А) да би се проценили Цхе ефекти на памћење, (Б) Ефекти Цхеа на реконсолидацију памћења када су дати одмах након реактивација. Животиње третиране цхе-ом су имале краће време замрзавања од контрола током тестова А, А и Аз, што указује на оштећење консолидације памћења. (Ц) Коришћен је општи експериментални дизајн. Животиње су у почетку упознате са контекстом. Дан касније, контекст је упарен са три шока (УС). Следећег дана, одмах након изостављања реактивације меморије (неутрално и неупарено излагање контексту Б), животиње су примиле билатералну инфузију Вех или Цхе интра-ПЛцортек.Један и седам дана касније, животиње су поново изложене упареном контексту (Тестови А, и,) да би се проценили Цхе-ови ефекти на памћење. (Д)Цхе утиче на реконсолидацију меморије када се даје одмах након изостављања реактивације меморије. Животиње третиране цхе-ом су показале време смрзавања слично као код контрола током теста А, што указује на то да нема промена у консолидацији меморије. Вредности су изражене као средња вредност 土 СЕМ （број животиња по групи∶Б=7/групи; Д=6/група). У "Б", звездица означава статистички значајну разлику (*П<0.05)from the="" respective="" control="" group="" (mixed-anova="" followed="" by="" the="" tukey="" test).in="" "d"="" the="" fence(hashtag)="" denotes="" a="" statistically="" significant="" difference=""><0.05)from tests="" a,="" and="" a,="" relative="" to="" the="" no="" reactivation="" session="" in="" both="" groups(mixed="" anova="" followed="" by="" the="" tukey="">

третман [Ф(1,14)=7.40; П=0.01], и њихова интеракција [Ф(1,14)=19.41; П=0.0006]. Као што је приказано на слици 3Ф, постојала је значајна разлика између контролних и ЗИП група (н=7–9 животиња/група) током теста А1 (П=0.01; г=2). 37), али не и сесију реактивације (П=0.78; г=0.50). Ови резултати потврђују да је активност ПКМζ ПЛ кортекса 6х након реактивације контекстуалне меморије страха укључена у њену постојаност, и указују да је ЗИП акција независна од времена које је протекло између његове администрације и теста А1.

Ефекти инхибиције ПКЦ кортекса ПЛ од стране хелеритрина на реконсолидацију реактивиране контекстуалне меморије страха.

Ову фармаколошку интервенцију смо тестирали одмах након сесије реактивације меморије (слика 4А). Мешовита АНОВА показала је значајне ефекте сесија [Ф(3,36)=22.5; П<0.0001], the="" treatment="" [f(1,12)="40.8;" p="0.0001]," and="" their="" interaction="" [f(3,36)="5.68;" p="0.0027]." as="" shown="" in="" fig.="" 4b,="" there="" were="" significant="" differences="" between="" control="" and="" chelerythrine="" groups="" (n="7" in="" both="" cases)="" during="" test="" a1="" (p="0.0003;" g="2.95)," test="" a2="" (p="0.0001;" g="4.30)," and="" test="" a3="" (p="0.003;" g="1.26)," but="" not="" the="" reactivation="" session="" (p="0.60;" g="0.79)." these="" results="" indicate="" that="" pl="" cortex="" pkc="" activity="" immediately="" after="" reactivating="" a="" contextual="" fear="" memory="" is="" involved="" in="" its="" reconsolidation,="" and="" the="" drug-induced="" reconsolidation="" impairment="" was="" still="" present="" 21="" days="">

Да би се истражило да ли је реактивација памћења предуслов да хелеритрин утиче на процес реконсолидације, у следећем експерименту сесија реактивације је изостављена јер су животиње биле изложене контексту Б, а затим третиране носачем или хелеритрин (слика 4Ц; н{{1} }/група). Мешовита АНОВА показала је значајне ефекте сесија [Ф(2,26)=379.7; П=0.0001], али не и третман [Ф(1,13)=5.71; П=0.06], или њихова интеракција [Ф(2, 26)=2.76; П=0.09]. Као што је приказано на слици 4Д, обе групе су показале дуже време замрзавања током тестова А1 и А2 него у сесији без реактивације (П<0.0001), confirming="" that="" fear="" expression="" is="" more="" selective="" to="" the="" conditioning="" context.="" moreover,="" there="" was="" no="" treatment="" effect,="" indicating="" that="" memory="" reactivation="" is="" also="" necessary="" for="" drug-induced="" efects="" in="" memory="">

Слика 5. Ефекти инхибиције прелимбичке (ПЛ) кортекса ПКМ од стране ЗлП на реконсолидацију реактивиране контекстуалне меморије страха. (А) Коришћен је општи експериментални дизајн. Животиње су првобитно упознате са контекстом А. Дан касније, контекст је упарен са три шока (УС). Следећег дана, одмах након реактивације меморије (поновно излагање контекста А), животиње су примиле билатералну инфузију ЗИП или Сцр -ЗИП (10 нмол) интра-ПЛкортекс. Један, седам и 21 дан касније, животиње су поново изложене упареном контексту (Тестови А, А и А) да би се проценили ефекти ЗИП-а на памћење. (Б)ЗИП ефекти на реконсолидацију меморије када се дају одмах након реактивације меморије. Животиње које су третиране ЗИП-ом су показале време смрзавања слично као код контрола током тестова А, А, и сугерише да нема промена у поновној консолидацији меморије. (Ц) Коришћен је општи експериментални дизајн. Животиње су првобитно упознате са контекстом А. Дан касније, контекст је упарен са три шока (УС). Следећег дана, 1 х након реактивације меморије (поновно излагање контекста А), животиње су примиле билатералну инфузију ЗИП или Сцр-ЗИП интра-ПЛ кортекс. Један, седам и 21 дан касније, животиње су биле изложене упареном контексту (Тестови А, А и А) да би се проценили ефекти ИП на памћење. (Д) ЗИП ефекти на постојаност меморије када се дају 1 х након реактивације. Животиње које су третиране ЗИП-ом имале су краће време замрзавања од контрола током тестова А2 и А, што указује на оштећење упорности памћења. Вредности су изражене као средња вредност ± СЕМ (број животиња по групи: Б=7/групи; Д=7-8). У "Б" мешана АНОВА праћена Тукеијевим тестом није показала значајну разлику током упареног контекста изложености (контекст А). У "Д", звездица означава статистички значајну разлику (П<0.05)from the="" respective="" control="" group="" (mixed="" anova="" followed="" by="" the="" tukey="">

Ефекти инхибиције ПЛ кортекса ПКМζ ЗИП-ом на поновну консолидацију реактивиране контекстуалне меморије страха.

Ову фармаколошку интервенцију смо тестирали одмах након сесије реактивације меморије и 1 сат касније. У првој одабраној временској тачки (слика 5А), мешовити АНОВА није показао значајне ефекте сесија [Ф(3,36)=4.33; П<0.303], the="" treatment="" [f(1,12)="0.109;" p="0.7472]," and="" their="" interaction="" [f(3,36)="1.62;" p="0.19]." as="" shown="" in="" fig.="" 5b,="" there="" were="" no="" signifcant="" diferences="" between="" control="" and="" zip="" groups="" (n="7" in="" both="" cases)="" during="" any="" session="" performed,="" suggesting="" that="" pkmζ="" activity="" in="" the="" pl="" cortex="" immediately="" afer="" reactivating="" a="" contextual="" fear="" memory="" is="" not="" involved="" in="" its="" reconsolidation="" (and="" persistence).="" at="" the="" second="" time="" point="" selected="" (fig.="" 5c),="" a="" mixed="" anova="" showed="" signifcant="" efects="" of="" the="" sessions="" [f(3,39)="42.2;"><0.0001], the="" treatment="" [f(1,13)="20.2;" p="0.0006]," and="" their="" interaction="" [f(3,39)="7.82;" p="0.0003]." as="" shown="" in="" fig.="" 5d,="" there="" were="" signifcant="" diferences="" between="" control="" and="" zip="" groups="" (n="8" and="" 7,="" respectively)="" during="" test="" a2="" (p="0.0005;" g="2.25)," and="" test="" a3="" (p="0.0002;" g="2.19)," but="" not="" the="" reactivation="" session="" (p="0.99;" g="0.48)" or="" test="" a1="" (p="0.35;" g="1.48)." altogether,="" the="" results="" associate="" the="" pl="" cortex="" pkmζ="" activity="" as="" early="" as="" 1h="" afer="" reactivating="" an="" aversive="" memory="" with="" its="">

Дискусија

Ова студија је настојала да истражи улогу ПЛ кортекса ПКЦ и ПКМζ у поновној консолидацији и постојању реактивираног контекстуалног памћења страха код пацова. Показало се да је: 1) активност и ПКЦ и ПКМζ неопходна за постојаност реактивиране меморије; 2) ефекти инхибиције ПКЦ или ПКМζ захтевају претходну реактивацију меморије; 3) ефекти инхибиције ПКМζ су независни од иницијалног теста 1 дан након инфузије ЗИП; 4) активност ПКЦ, али не и ПКМζ, такође је укључена у реконсолидацију реактивиране меморије; 5) активност ПКМζ током временског прозора реконсолидације је важна за постојаност меморије. Тесеови налази указују на то да ПЛ кортекс ПКЦ и ПКМζ имају различито учешће у испитиваним процесима.

Инхибиција ПКЦ изазвана хелеритрином 6 х након реактивације меморије није имала утицаја на време замрзавања када су животиње тестиране дан касније (Тест А1). Овај резултат потврђује претходне доказе који показују да различите експерименталне интервенције спроведене у овом тренутку више нису у стању да ометају реконсолидацију аверзивне меморије15,16,24. Међутим, након седам дана (Тест А2) постојала је разлика између група, што сугерише да је ПКЦ активност у ПЛ кортексу потребна да би реактивирана аверзивна меморија опстала. Овај образац резултата (смањено време замрзавања 7 дана, али не 24 сата након третмана лековима) је у складу са онима пријављеним након убризгавања инхибитора синтезе протеина у базолатералну амигдалу13, инхибитора ЕРК пута у дорзални хипокампус25 и системске примене не- -селективни ПКЦ инхибитор14.

Обично се наводи да се процеси повезани са перзистенцијом аверзивне меморије, као што је други талас експресије Арц протеина у базолатералној амигдали, јављају до 12 сати након његове реактивације. Да би се даље истражило да ли је активност ПКЦ у ПЛ кортексу важна за перзистентност памћења, ефекти хелерит-рина су процењени у независним групама животиња 9, 12 или 18 сати након реактивације памћења. Дошло је до смањења времена замрзавања изазваног леком у односу на контролу током теста А када је дато 9 или 12 сати након реактивације меморије, али не и 18 сати касније, што указује да период током којег се ПЛцортек ПКЦисиниолиедин перзистентност активира аверзивна меморија креће од 6 до 12х. Вреди напоменути да су животиње које су третиране носачем 18 сати након реактивације меморије показале краће време замрзавања током теста А, у поређењу са њиховом сесијом реактивације, што сугерише да се учење о изумирању могло догодити у контролној групи. Занимљиво је да ова разлика није примећена код животиња које су третиране хелеритрин. Будуће студије ће загарантовано проверити да ли инхибиција ПЛ кортекса ПКЦ утиче на процес изумирања

Ако перзистентност ПКЦ укључености у меморији зависи од претходне реактивације меморије (тј. кратка изложеност контексту условљавања), онда се не би очекивале промене у постојаности памћења код животиња којима је интра-ПЛ кортекс инфундиран хелеритрин 6 х након њиховог излагања неусловљеном контексту . Заиста, никакви ефекти инхибиције ПКЦ нису примећени када је реактивација меморије изостављена, а резултат који се слаже са онима показао је да је индукција механизама повезаних са упорношћу покренута реактивацијом меморијеи4.25:

Улога конвенционалних ПКЦ изоформи је дуго испитивана у парадигмама аверзивног учења7-29. Недавно је фокус био на потенцијалној укључености одређених атипичних изоформи ПКЦ, посебно ПКМЦ, у постојаност новостечених и реактивираних аверзивних сећања-33, с обзиром да хелеритрин има афинитет и за атипичне и за конвенционалне ПКЦисоформе?.3435 , изведен је додатни експеримент у коме је селективни ПКМЦинхибитор ЗИП инфундиран интра-ПЛ кортексу 6 х након реактивације меморије. Дошло је до смањења времена замрзавања изазваног леком у поређењу са контролама током оба теста А и Аа. што указује на потребу ПКМЦ за постојаност реактивиране меморије. Овај резултат се слаже са онима који показују да уливање ЗИП-а у друге дискретне регионе мозга утиче на постојаност различитих типова новостечених сећања. Важно је да су ефекти хелеритрина и ЗИП-а на постојаност памћења били слични, деловање хелеритрина је вероватно било посредовано, барем делимично, инхибицијом активности ПКМЦ, у сваком случају, као што је приказано са хелеритрин. ЗИП ефекти су захтевали реактивацију меморије. Овај резултат је од посебног значаја пошто је пријављено да инхибиција ПКМГ у одсуству реактивације меморије нарушава његову постојаност-3439. Специфичност ЗИП-а је такође доведена у питање, јер је могао да наруши одржавање ЛТП-а код ПКМ нокаут мишева"9 и инхибира активност атипичне ПКЦ изоформе назване ПКЦ/λ³, која је тренутно повезана само са раним фазама памћења. консолидацију и рани ЛТП5. Дакле, могло би се тврдити да су ЗИП ефекти само делимично повезани са инхибицијом ПКМЦ. У ствари, као компензациони механизам, нокаут мишеви за ПКМ повећавају експресију ПКЦ, што је заузврат посредовало у процесу перзистентности меморије. , у нашој студији животиње нису трансгене, што чини мање вероватним да ефекти изазвани ЗИП-ом зависе од механизама који нису посредовани ПКМЦ.

Студија је известила да ефекти изазвани ЗИП-ом зависе од иницијалног теста који се десио први дан након његове инфузије у базолатералну амигдалу када је коришћен страхом потенциран страх2. Овде је интра-ПИЛ инфузија ЗИП6х након реактивације меморије смањила експресију замрзавања када су животиње поново тестиране или И или 10 дана касније, што указује да време које је протекло између примене лека и почетног тестирања није кључни фактор који утиче на ЗИП акцију. Штавише, објављено је да је ЗИП унесен у острвски кортекс нарушио постојаност меморије аверзије укуса 1 месец након инфузије24. Истражили смо ПЛ. кортекс ЗИП утиче на постојаност памћења коришћењем протокола контекстуалног условљавања страха са сесијом упознавања, у којој је допринос медијалног префронталног кортекса дуготрајној меморији већи него у протоколима без претходног излагања контексту који треба условљавати4 , као што је коришћено у тим радовима3. Дакле, разлике у протоколима и областима мозга у које је ЗИП инфундиран могу објаснити уочене помешане налазе.

Тренутно је непознато да ли се механизми реконсолидације и перзистенције преклапају у ПЛ кортексу. За почетак решавања овог питања, хелеритрин је дат одмах након реактивације памћења. Дошло је до смањења времена замрзавања изазваног лековима у односу на контроле током теста А, што сугерише да активност ПКЦ такође утиче на консолидацију меморије контекстуалног страха. Овај резултат се слаже са онима који показују важност ПКЦ активности током реконсолидације меморије у другим регионима мозга43 и доприноса ПЛ кортекса у поновном консолидовању аверзивних сећања.., Вреди напоменути да хелеритрин група такође истиче ниже нивое замрзавања од одговарајућих контрола када тестиран 7 и 21 дан касније (Тестови А и А), резултат је у складу са студијама које показују да интервенције усмерене на поновну консолидацију нису повезане са карактеристикама повезаним са изумирањем, као што је поновно успостављање и спонтани опоравак првобитне меморије страха4. Штавише, показало се да ефекти хелеритрина на реконсолидацију захтевају претходну реактивацију меморије.

Такође су истраживани потенцијални ефекти на реконсолидацију памћења. Није било промена изазваних леком у времену замрзавања у односу на контроле током тестова А..А и Аа када је дат одмах након реактивације меморије, што сугерише да инхибиција ПКМЦ у овој временској тачки у ПЛ кортексу не утиче ни на

поновна консолидација нити постојаност реактивираног сећања. Предложено је да ЗИП може делимично инхибирати механизме преузимања и реактивације меморије. На пример, промет подјединице АМПА рецептора ГлуР2А у синапсе индукује се враћањем меморије и неопходан је за поновну консолидацију меморије --17. Пошто је деловање ЗИП-а у корелацији са инхибицијом трговине ГлуР2А, овај лек је могао да поремети реактивацију меморије и, стога, процес поновне консолидације није био довољно индукован, што је заузврат спречило деловање ЗИП-а. Показало се да инхибиција ПКМЦ у ЦАИ нарушила реконсолидацију просторне меморије, Осим тога. појачање ПКМЦ активности у амигдали изазвано реконсолидацијом било је повезано са одржавањем олфакторне меморије страха код малолетних пацова. Могуће је да разлике у коришћеним парадигмама (алат просторне меморије наспрам памћења страха) могу објаснити мешовите налазе објављене, заиста. сугерисано је да ПКМ (одржава памћење страха у базолатералној амигдали3] и ПЛ, кортексу, али не и у дорзалном хипокампусу3, иако је ово питање још увек у расправи. Даље, старост животиња такође може утицати на исход од малолетних пацова представљају мање задржавање памћења од оних код одраслих. Овде, да би се даље позабавила улогом ПКМЦ у поновној консолидацији меморије, друга група пацова је примила ЗИП инфузију у ПЛ кортекс 1 х након повезивања меморије. Као што је приказано на слици 5Д. један дан касније, не уочене су разлике у понашању смрзавања код свих третираних животиња у односу на контролне, што сугерише да у овом тренутку нема ефеката ПКМинхибиције на реконсолидацију памћења. Међутим, дошло је до смањења нивоа смрзавања у поређењу са контролама током тестова А и Аи , што сугерише да активност ПЛ кортекса ПКМ (активност посредује у аспектима специфично везаним за постојаност меморије већ 1 х након реактивације меморије, овај резултат је у складу са онима из студије од Кравцзикет ал (2016П где је инхибиција ЕРК1/2 у дорзалном хипокампусу 3 х након реактивације памћења задржала меморију на страх нетакнутом дан касније, али је ослабила када су животиње поново тестиране 7 дана касније. Занимљиво је да је недавно показано да реактивација меморије изазива механизме везано и за реконсолидацију памћења и за упорности725.

Заједно, ефекти изазвани хелеритрином на реконсолидацију меморије и недостатак ЗИП ефеката на ову меморијску фазу сугеришу различит допринос конвенционалног ПКЦ-а у поновној консолидацији меморије и атипичног ПКЦ-а, као што је ПКМЦ, за постојаност меморије након реактивације, будуће студије би могле да се позабаве којим ПКЦ-ом изоформе су укључене у сваки меморијски процес у ПЛ кортексу. Све у свему, садашњи налази указују да је ПЛ. кортекс ПКЦ и ПКМЦ укључени су у поновно консолидовање и постојаност реактивираног контекстуалног памћења страха. Штавише, садашњи налази су показали да након завршетка временског оквира поновне консолидације постоји проширена могућност да се ублажи памћење страха.