Сарментосамид, једињење против старења из Стрептомицес Сп. АПмарине042

Кључне речи:цистанцхе; Стрептомицессп. АПмарине042;против старења; ММП-1; УВБ; ТНФ-

Кликните овде да бисте добили више информација о Цистанцхе-у за негу старења коже

1. Представљање

Старење кожеје индукован са два главна процеса, који су резултат унутрашњих и екстринзичних фактора.Екстринзично старењеје првенствено узрокована изложеношћу факторима животне средине као што је загађење ваздуха [1] и ултраљубичасто (УВ) зрачење [2]. УВ светлост се састоји од УВА (315–400 нм), УВБ (280–315 нм),и УВЦ (200-280 нм), од којих је познато да УВБ зраци продиру у епидермис и доприносе кожифотостарење [3]. Фотостарење коже изазвано УВБ зрачењем узрокује оштећење ДНК [4] и реактивне врсте кисеоника(РОС) генерација [5] и ремети екстрацелуларни матрикс [6]. Интринзично старење је узроковано природнимпоследице физиолошких промена, као што су генетски фактори, хормони и метаболички процеси [7]. Штавише, инфламаторни цитокини, као што је фактор некрозе тумора-алфа (ТНФ ), интерлеукин 1 алфа/бета(ИЛ{0}} / ), и интерлеукин 6 (ИЛ-6), хронично се повећавају са годинама. Конкретно, некроза туморафактор- (ТНФ ) познато је да убрзава деградацију компоненти екстрацелуларног матрикса (ЕЦМ) прекоповећање експресије и активности матриксних металопротеиназа (ММП) у старијој кожи [8]. ММП-1 јеуглавном ослобађају фибробласти у дермису, а излучени ММП-1 је одговоран за деградацијудермалног колагена, који подржава структуру и функцију коже. Стога, модулација ММП-1експресија у дермалним фибробластима могла би бити обећавајућа мета за развој против старењакозметички састојци.

Претходне студије су известиле да УВБ зрачење индукује РОС (производњу реактивних врста кисеоника и доводи до активације интрацелуларних сигналних путева и фактора транскрипције (нпр. АП-1, НФ-кБ)) [9. Ови фактори транскрипције су регулисани митогеном -активиране протеинске киназеМАПК), које индукују ММП-1 и проинфламаторне цитокине. Постоје три различите МАПКамилије укључене у УВБ/РОС стимулусе: екстрацелуларне киназе регулисане сигналом (ЕРК), ц-Јун Н-терминал

киназе (НК) и п38. Наша студија је идентификовала Стрептомицес сп. Екстракт АПмарине042 који је показао снажан инхибиторни ефекат на експресију ММП{2}}. Након тога, у овом Стрептомицес сп. Екстракт АПмарине042 и његова хемијска структура идентификовани су помоћу НМР анализе (1), једињења са хексадиенамидним делом 101. Затим даље истражујемо да ли ово једињење инхибира ММП-1 експресију у УВБ-озраченој и ТНФа-индукованој људској кожи фибробласти као и њихова улога у регулацији основних сигналних путева. Поред тога, испитали смо тхе антиоксидативна активност цистанцхе(1) преко 2,2-дифенил-1-пикрилхидразила (ДППХИ)тест радикалног чишћења.

2. Резултати и дискусија

2.1. цистанцхе (1) Изолација и идентификација

цистанцхе (1) је изолован комбинацијом ХПЛЦ-УВ и изолације вођене биоактивношћу. На основу поређења између НМР података (додатни материјали) једињења идентификованог у овој студији (у даљем тексту једињење 1") са онима претходно пријављених једињења, једињење 1 је идентификовано као цистанцхе. Вредност оптичке ротације једињења 1 је била такође у складу са претходним извештајима, који су даље подржавали ту помоћ једињењу 1 (Слика 1).

2.2. Цитотоксични ефекти цистанхе (1) на хумане дермалне фибробласте

Да би се истражили цитотоксични ефекти цистанцхеа, нормални хумани дермални фибробласти (НХД за ћелије фибробласта препуцијума (Хс68) су третирани цистанцхеом у различитим концентрацијама (6, 12, 25, 50, 100 уг/мЛ)) током 24 х, након чега је ћелија Урађен је тест комплета за бројање-8 (ЦЦК-8) ​​да би се квантификовала виталност ћелије. Тетразолијумова со растворљива у води (ВСТ-8) у ЦЦК-8 раствору је смањена активностима дехидрогеназе у ћелије да дају жуту боју формазана, чија је количина била пропорционална броју живих ћелија. Као што је приказано на слици 2, цистанцхе није изазвао уочљиве цитотоксичне ефекте ни у НХДФ ни у Хс68 ћелијама у концентрацијама у распону од {{15} } уг/мл

Слика 2. Тест виталности ћелије цистанхе на фибробластима. (аб) Вијабилност ћелијецистанцхе-третиранинормални хумани дермални фибробласти (НХДФ) (а) и ћелије фибробласта хумане кожице (Хс68) (б) после 24 сата мерене су ЦЦК (комплет за бројање ћелија) тестом. * п < 0.05, ** п < 0,01 вс. нелечена група).

2.3. цистанцхе (1) Инхибира експресију и секрецију ММП-1 у УВБ-озраченим НХДФ ћелијама

Затим, НХДФ у одсуству и присуству УВБ зрачења (25 мЈ/цм2) су третирани са цистанцхе (2,5 уг/мЛ) у кратким периодима, а релативни нивои експресије ММП-1 мРНА су квантитативно одређивани у реалном времену. ПЦР анализа. Утврђено је да цистанцхе снижава нивое ММП-1 мРНА за до 16 процената и 17 процената у одсуству (слика 3а) и присуству (слика 3бо УВБ, респективно. УВБ зрачење, главни спољни фактор ризика од старења коже, може продиру у епидермис и достижу горњи дермис, што резултира стварањем реактивних врста кисеоника (РОС)ММП и смањеном регулацијом синтезе колагена. Због тога је наша студија настојала да испита да ли секреција ММП{12}} инхибирана цистанцхом у УВБ зрачењу НХДФ ћелије. Нивои секреције ММП-1 у медијуму ћелијске културе мерени су помоћу ЕЛИСА, а релативне количине секреције ММП-1нормализоване су на отални протеин у лизатима целих ћелија, који су мерени помоћу бицинхонинске квантификациони тест протеина киселине (БЦА) УВБ зрачење (25 мЈ/цм2) значајно је повећало лучење ММП-1(83- пута) у поређењу са групом која није озрачена УВБ (слика 3ц) и цистанцхе - инхибирано лучење ММП-1 у УВБ-озраченим НХДФ ћелијама на начин зависан од дозе.

Слика 3. Ефекат цистанша на експресију металопротеиназе-1 (ММП-1) у НХДФ-овима озраченим УВБ-ом. (а,б) Релативни нивои мРНА ММП-1 у НХДФ ћелијама су озрачени УВБ (25 мЈ/цм2) или третирани цистанцхеом (2,5 уг/мЛ) током 16 х. РПЛПО ген је коришћен као интерна контрола. * п < {{10}}.05.*** п < 0.001 (Ц) После УВБ зрачења (25 мЈ/цм2) , цистанша у медијуму без серума је третирана током 48 х, а затим су релативни нивои секреције ММП-1 у медијуму ћелијске културе анализирани ЕЛИСА### п < 0,001 (у односу на не-УВБ контролну групу); ** п < 0,01; *** п < 0,001 (УВБ-озрачена контролна група).

Тражи више:

Е-пошта:wallence.suen@wecistanche.com вхатсапп: плус 86 15292862950