СЛЦ37А2, молекул повезан са фосфором повећава се у ћелијама глатких мишића у калцификованој аорти Ⅱ

Резултати

Потражите молекуле кандидата укалцификовани изазвани фосфатомАоСМЦ. За тражење молекула чија се експресија повећава у калцификованом АоСМЦ, извршена је анализа ДНК микромрежа око 26,000 гена коришћењем калцификоване АоСМЦ и некалцификоване АоСМЦ мРНК. Слика 1 приказује ХеатМап различитих гена експримираних између АоСМЦ који нису култивисани са 2,6 мМ и оних који су култивисани са 2,6 мМ П током 12 дана. Укупно 3.066 гена се повећало више од два пута на култивисаном наспрам некултивисаног АоСМЦ. Гени са повећаном експресијом били су молекули повезани са формирањем остеобласта као што су остеопонтин, периостински фактор специфичан за остеобласт (ПОСТН), Внт3, интерлеукин-6 (ИЛ-6), ифактор раста фибробласта23 (ФГФ23) као и неколико молекула у суперфамилији СЛЦ (Табела 1). Међу овим молекулима, фокусирали смо се на СЛЦ37А2 за који се мРНА повећала око 3,1 пута на АоСМЦ култивисаном са 2,6 мМ П током 12 дана у поређењу са АоСМЦ који није култивисан са 2,6 мМ П. Пријављено је да је СЛЦ37А2 повезан са регулацијом П, али његов детаљан ефекат није познат инфламације на експресији СЛЦ37А2.Васкуларна калцификацијаје пријављено да га промовише упала, па смо испитали да ли је на мРНА СЛЦ37А2 утиче инфламаторни одговор. 24 сата након третмана ЛПС, ИЛ-6 се значајно повећао у поређењу са АоСМЦ који није третиран ЛПС (Слика 2А). Ови резултати су такође виђени 72 х након третмана ЛПС. Није било значајних разлика између група у експресији СЛЦ37А2мРНА (слика 2Б).

КЛИКНИТЕ ОВДЕ ДА ДОБИЈЕТЕ ПРИРОДНИ ОРГАНСКИ ЕКСТРАКТ ЦИСТАНЦХЕ СА 25% ЕХИНАКОЗИДА И 9% АКТЕОЗИДА ЗА ФУНКЦИЈУ БУБРЕГА

Услуга подршке Вецистанцхе-а - највећи извозник цистанцхеа у Кини:

Е-пошта:wallence.suen@wecistanche.com

Вхатсапп/тел:+86 15292862950

Купите за више детаља о спецификацијама:

хттпс://ввв.кјцистанцхе.цом/цистанцхе-схоп

Експресија СЛЦ37А2 у калцификованом АоСМЦ изазваном фосфатом. Да бисмо утврдили да ли је СЛЦ37А2 укључен у калцификација, испитали смо експресију мРНК СЛЦ37А2 на некалцификованом и калцификованом АоСМЦ (Сл.3). Калцификација је примећена у АоСМЦ култивисаној са 2,6 мМ П током 6 дана, а напреднија калцификација је примећена у АоСМЦ култивисаној са 2,6 мМ П током 12 дана (Слика 3А). Рунк2 мРНА значајно се повећала на калцификованом АоСМЦ у поређењу са некалцификованим АоСМЦ (слика 3Б). СЛЦ37А2 мРНА је значајно почела да расте 3. дана у калцификованом АоСМЦ, а 9. дана, калцификовани АоСМЦ значајно се повећао око два пута у поређењу са некалцификованим АоСМЦ (слика 3. 3Ц). Експресија протеина СЛЦ37А2 значајно се повећала око два пута 6. дана у калцификованом АоСМЦ у поређењу са не-калцификованим АоСМЦ (слика 3Д).

Експресија СЛЦ37А2 код пацова модела ЦКД.

Да бисмо открили да ли је СЛЦ37А2 укључен у васкуларну калцификацију ин виво, испитали смо експресију мРНА СЛЦ37А2 на судовима пацова са ЦКД изазваним аденином. Аденином индуковани ЦКД пацови су креирани према протоколу приказаном на слици 4А. Табела 2 приказује телесну тежину и биохемијске податке на дан жртвовања. Телесна тежина одаденином индукована ЦКДпацова је била значајно нижа у поређењу са пацовима без ЦКД. У поређењу са групом која није имала ЦКД, групе са ЦКД су имале више нивое П и Цр у плазми и ниже нивое калцијума у ​​плазми и 24-часовно излучивање П, Ца и Цр у урину. Даље, ови резултати су били истакнутији у групи са ЦКД-ХП, као што се видело у претходним студијама.37,39) Дакле, бубрежна функција је смањена у групи са ЦКД-ХП, посебно у групи са ЦКД-ХП. Испитивали смо експресију мРНК у аортним судовима пацова са ЦКД (слика 4). Иако није било значајних разлика у експресији Рунк2 мРНА, транскрипционог фактора који се креће рано у механизму васкуларне калцификације, између група (слика 4Б) експресија остеопонтинске мРНК значајно се повећала у групи са ЦКД-ХП у поређењу са не- ЦКД група иЦКД-ЛПгроуп(Слика 4Ц). Експресија мРНА СЛЦ37А2 је такође значајно повећана у групи која је примала ЦК Д-ХП у поређењу са групом без ЦКД и групом са ЦКД-ЛП (слика 4Д). Пошто су постојале велике индивидуалне разлике код ових пацова, испитали смо корелацију између остеопонтина и мРНК СЛЦ37А2 и пронашли значајну корелацију између ових молекула (слика 4Е). Хистолошки преглед торакоабдоминалне аорте открио је медијалну калцификација само у аорти ЦКД-ХП групе (слика 5А). Да бисмо испитали место експресије СЛЦ37А2 на аорти, спровели смо имунобојење аорте ЦКД-ХПратс-а. СЛЦ37А2 је био снажно изражен на подручју гдеваскуларна калцификацијадесио (слика 5Б).

Слика 1. ХеатМап различито експримираних гена између АоСМЦ некултивисаног са 2,6 мМ П и АоСМЦ култивисаног са 2,6 мМ П. Црвена представља гене са високим нивоом сигнала, а зелена представља гене са ниским нивоом сигнала. АОСМЦ ћелије глатких мишића аорте. Погледајте слику у онлајн верзији.

Дискусија

Истраживали смо кандидате везане за молекуле П који су укључени у васкуларну калцификација. Наши резултати су показали да је СЛЦ37А2 један од молекула који се повећавају саваскуларна калцификацијаин витро и ин виво.

Фамилија СЛЦ37 припада суперфамилији СЛЦ и укључује протеине: СЛЦ37А 1-440) Породица СЛЦ37 садржи трансмембранске протеине у мембрани ендоплазматског ретикулума и има секвенцу хомологну бактеријском органофосфат-фосфат антипортеру.(41) СЛЦ37А4 је познатији каотранспортер глукозе{0}}фосфата.(2-44 Међутим, постоји неколико извештаја о СЛЦ37А2, а детаљи о његовој функцији нису у потпуности схваћени. СЛЦ37А2, такође познат као СПКС2, је обилно експримиран у мишјим макрофагима, слезини, тимусу и белом масном ткиву (ВАТ ) генетски гојазних мишјих модела и ћелија сличних остеокластима изведених из ћелија Рав264.7. (45.6) Протеин СЛЦ37А2 преноси и размене глукоза-6-фосфата/фосфата и фосфата/фосфата.(4) Недавно су извештаји показали повезаност између СЛЦ37А2 са болестима животиња. (47-49) СЛЦ37А2 дефект узрокујекраниомандибуларна остеопатија(ЦМО), самоограничавајућа пролиферативна болест костију, код раса теријера. (47) Код млечних говеда, хомозиготна мутација СЛЦ37А2 је одговорна за смрт ембриона. (8.9) Поред тога. СЛЦ37А2 се сматра метом циљних гена витамина Д. (дакле) Потенцијал циљног гена за рецептор за фосфор-Сер294 прогестерон у прогресији рака дојке је такође узет у обзир (1) Пријављено је да запаљење може изазвати и погоршати васкуларну калцификација. (2с26) Надаље. СЛЦ37А2 је обилно експримиран у макрофагима и ВАТ који су захваћени инфилтрацијом макрофага. (с) Стога. сматрали смо да би СЛЦ37А2 могао бити молекул изражен током упале. Међутим, наши налази нису показали повећање експресије СЛЦ37А2 у АоСМЦ изложеном инфламаторном одговору, чини се да на овај молекул не утиче директно инфламаторна стимулација. СЛЦ37А2 може бити укључен у васкуларну калцификација кроз механизам који није запаљење.

Пријављено је да СЛЦ37А2 делује као П-везананти-портер. (41) Поред тога, пријављено је да је СЛЦ37А2 циљни ген за витамин Д, а ген СЛЦ37А2 садржи главно место за везивање рецептора витамина (сс2). Систематски корелиране промене у експресији гена СЛЦ37А2 и циркулишућих облика витамина Д. примећен је у мононуклеарним ћелијама људске периферне крви. (50) Рецептори витамина Д се везују за 1а, 25-дихидрокси витамин Д, који је метаболит витамина Д, и регулишу експресију гена. ло, 25 дихидроксивитамин Д, функционише у апсорпцији Ца и П у цревима, мобилизацији Ца у костима и реапсорпцији Цаина у бубрезима. (3) Постоји извештај да је код пацова модела ЦКД изазваних аденином, серум ла, 25-дихидрокси витамин Д, био значајно виши код пацова који су узимали исхрану са високим садржајем п, са узнапредовалом васкуларном калцификацијом, у поређењу са пацовима са ниским -п унос исхраном.39) СЛЦ37А2 може бити повезан са регулацијом П преко витамина Д. Потребне су даље студије да би се разјаснило да витамин Д утиче на експресију СЛЦ37А2 ин витро и Виво.

Показало се да је механизам васкуларне калцификације сличан механизму формирања костију. Недостатак СЛЦ37А2 узрокован ЦМО је клинички упоредив са хуманом инфантилном кортикалном хиперостозом, такође познатом као Цаффеиева болест.7 Поред тога, постоје извештаји да се СЛЦ37А2 експримује у коштаној сржи и остеокластима.о Хитоне и сарадници (7 су претпоставили да је дисфункција СЛЦ37А2 би изазвао неравнотежу у функцији формирања остеобластичне и остеокластичне кости и као резултат тога довео до хиперостозе.

Рунк2 је есенцијални фактор транскрипције за васкуларну калцификација. Такође је објављено да је Рунк2 транскрипциони фактор диференцијације остеобласта изражен у епителним ћелијама дојке у развоју. (с435) Чини се да је Рунк2 неопходан за регулацију циљаних гена за фосфор-Сер294 прогестерон, који су повезани са прогресијом рака дојке. СЛЦ37А2 се сматра кандидатом за циљни ген за фосфор-Сер294 рецептор прогестерона. (с1) Због тога се сматра да Рунк2 може регулисати СЛЦ37А2. У овој студији, експресија мРНА СЛЦ37А2 у аорти ЦкД пацова била је у корелацији са мРНК остеопонтина, која циља на ген Рунк2.