Синергистички ефекат анти-коже пигментација цистанце фенилетаноидног гликозида и глабридин
Jan 14, 2025
Сажетак за истраживање синергистичкеефекат цистанцефенил етанол страна (ПХГС) и Глабридин (ГЛА) против пигментације коже, масовни однос ПХГС-а и ГЛА прегледани су ин витро експеримент инхибиције инхибиције, 1, 1- дифенил -2- тринитрофенилхидразине (ДППХ) и 2, 2- Диазо-бис (3- етил-бензотиазол -6- сулфонска киселина диаммонијумска катион (АБТС +). Основан је модел хипопигментације УВБ изазваног УВБ-а, а инхибиција производње меланина је процењена коришћењем активности тиросиназе и садржаја меланина као индекса.
ТхезапаљенОснована је модел ћелија хацата који су изазвани липополисахарид (ЛПС) и противупални ефекат лека оцењени инхибицијом ослобађања интерлеукина -6 (ИЛ {2}) и фактором некрозе тумора. Даље је успостављен модел оксидативног стреса ХАЦАТ ћелија индукованих азодиизобуамидин хидрохлорида (Афра) и побољшана активност супероксида омаловажавања (СОД) и каталазе (мачка) коришћена је као индекси за процену антиоксиданса. Оптимални масовни однос ПХГС-а и ГЛА одређен је горе наведеним три ћелијским моделима. Резултати су показали да водени раствори ПХГС / ГЛА (1,11), ПХГС / ГЛА (5:1) и ПХГС / ГЛА (10:1) припремљени са М (ПХГС):::: 1:1, 5:1, 10:1 изложено добре инхибиторе и синергистичке ефекте на активности тирозиназе и активности. Стопе инхибиције ПХГС / ГЛА (1:1),
ПХГС / ГЛА (5:1) и ПХГС / ГЛА (1 0 :1) водени раствори са масовном концентрацијом од 0,4 г / л били су 94,37%, 92,93% и 88,06%, респективно. Стопе прочишћења ДПП-а на слободним радикалима износиле су 89,44%, 88,72,% и 88,10%, респективно.
Стопе окидања АБТС + слободних радикала било је 1 0 0,13%, 100,0,1%, односно 99,87%, респективно. Када је масовна концентрација ПХГС-а / ГЛА била 25 уг / мЛ, ПХГС / ГЛА (1:1), ПХГС / ГЛА (5:1) и ПХГС / ГЛА (10:1) водени раствори нису показали цитотоксичност Б16Ф10 и ћелијама ХАЦАТ-а. Инхибиција активности тирозиназе у воденим раствору у ПХГС / ГЛА (1: 1: 1,2) била је јачи (активност тирозиназе 23,80%), а садржај меланина (30,90%) значајно је смањен. ПХГС / ГЛА (1:1) Водени раствор показао је најбољи ефекат инхибиције на ИЛ -6 и ТНФ-опула и способност побољшања активности СОД и ЦАТ-а. Комбинација ПХГС-а и ГЛА показала је добре синергистичке перформансе, супериорне А до једноструког лека и више од ПХГС / ГЛА (5:1) и ПХГС / ГЛА (10:1) водени раствор. Комбинација ПХГС и ГЛА одиграла је синергистичку улогу у побољшању пигментације коже инхибирајући производњу меланина и противупалним и антиоксидативним ефектима.
Кључне речи цистанце фенилетаноидни гликозиди; Глабридин; синергистички ефекти; Пигментација против коже; анти-оксидација; антиинфламаторни; материјали за лекове
Цистанше фенил етанолска страна за избјељивање
Подршка служба Вецистанца - највећи извозник цистанса у Кини:
Е-пошта: wallence.suen@wecistanche.com
Вхатсапп / Тел: +86 15292862950
За више информација о потенцијалним попустима, не устручавајте се да се обратите нашем тиму за кориснике. Они ће вам радо помоћи!
Пигментација коже је кожна болест узрокована факторима као што су повреде, упала коже и ултраљубичасто зрачење [{0}}]. Ови фактори могу довести до ненормалног повећања меланина, што заузврат узрокује проблеме као што су Цхлоасма, пеге и хиперпигментацију након упалне (ПХ) [{2}}], утицале на ментално стање људи и квалитета живота. Тренутно лечење пигментације коже углавном се фокусира на инхибицију тирозиназе, кључног ензима у формирању меланина [{3}}].
Последња истраживања [{0}}] показују да пигментација коже зависи од блиске везе између кератиноцита и меланоцита у епидерми. Једном када слободне радикале и упални фактори ослободе кератиноцита контактирају ме Меланоцити, они ће изазвати пораст активности тирозиназе, што је довело до повећања садржаја меланина. Они ће такође убрзати транспорт меланина и изазвати да се меланин положи на површини коже. Стога је лечење пигментације коже захтева различите мере као што су инхибирање производње меланина, противупалне и антисидације.
Тренутно, иако традиционалне припреме лекова, као што су хидрокинон и хидрокинон, имају одређене ефекте у лечењу пигментације коже, њихови начини деловања су релативно самохрани и могу произвести нежељене реакције [{0}}]. У поређењу, природни лијекови су природни и благи ефекти и све више препознају и хвале потрошачи [{1}}]. Конкретно, комбинација вишеструких екстраката биљке [13-14] не може да инхибира производњу меланина, већ такође има више ефеката као што су анти-упални и антиоксидативни ефекти, пружајући нове идеје и методе за лечење пигментације коже.
ЦИСТАНЦХЕ ДЕСЕРТИЦОЛА МА има јединствену лековиту вредност и познат је као "Десерт Гинсенг". Студије су утврдиле да карактеристичан састојак фенилетаноидно гликозид садржан на ЦИСТАНЦЕ има добру антиоксидативну активност [15] и противупални ефекти [16], а такође има одређени инхибиторски ефекат тиросиназе [17]. Глицирризин је флавоноидна компонента у Глициирризи Глабри Л., која има снажан ефекат избељивања и познат је као "избјељивање злата" [18]. Традиционална кинеска медицинска обрада пигментације коже обично започиње фбиствонгстхенгуннг слезине и бубрега, чишћење топлоте и детоксикације и надокнађивање КИ и крви [19].
Фенилетанолички гликозиди Цистацхе Десертицола могу напунити ианг бубреге и суштину и крви, док Глицииррхиза Глабра може напунити слезину и КИ, очистити топлоту и детоксиковати. Њих двоје могу радити заједно да се одупрег пигментације. Комбинацијафенилетаноидни гликозиди цистанце десертицола и глабридин може се одупријети пигментацији коже из више димензија и циљева, штите од ултраљубичастих зрака у целом бенду, синергистички инхибирају тирозиназу и смањити производњу меланина и упални фактори и индулирајући се меланинским производима и уграђеним наделама и уграђене индустрије и усисавајуће наређене и уграђене натегнуте. Међутим, у литератури постоји мало извештаја о синергистичкој инхибицији пигментације коже фенилетаноидним гликозидима Цистанце Десертицола и Глабридин.
Овај рад намерава да истражује да ли постоји синергистички ефекат између пхенилетаноидглицосида цистанце десертицола (ПХГС) и глабридин (ГЛА) кроз ин витро биохемијски експерименти и успостављање 3 ћелијске моделе, прибављати оптимални коефицијент једине масе за синергистички ефекат. Очекује се да ће пружити теоријску подршку и практичне смернице за развој производа за негу коже природних биљних и да помогне у промоцији индустрије неге коже да се развија у природнијем, здравом и ефикасном правцу.
Где: Реакција је апсорбанција решења узорка, л-тирозин раствор, ПБС и раствор тирозиназе; Реакциона контрола је апсорбанција решења узорка, л-тирозин раствор, н и решење за ПБС; Празно је апсорбанција л-тирозинског решења, раствора ПБС и раствор тирозиназе; Празна контрола је апсорбанција Л-Тирозина и ПБС решења.
'
1.3.2 Одређивање дисплејске способности слободних радикала ДППХ-а
Прво, тачно тежи {0}}}. 0 197 г (0. 0 5 ммол) ДППХ и раствори га у 25 0 мл безводног етанола да припреми ДППХ радно решење са концентрацијом 0. 2 ммол / л. Затим су ПХГС и ГЛА припремљени у ПХГС раствор Етанол и раствор ГЛА етанол са масовним концентрацијама 0. 0 01, 0.8, 1.2, 1,6, 0,8 мг / мл, односно коришћењем 50% етанол раствором и ВЦ Еттанол раствор је припремљен на исти начин. Затим су ПХГС Етханол раствор и ГЛА етанол раствор помешан равномерно на М (ПхГС раствор): м (ГЛА раствор): м (ГЛА раствор) {{24:1, 5:1, 1:1, 1:40, 1:20, 1:40 да би се добило 9 врста пршута / ГЛА етанол решења са различитим масовним омјерима, који су снимљени као ПХГС / ГЛА. (40:1) ~ ПХГС / ГЛА (1:40) Етханол решења. Коначно, додајте 100 ул различите узорак и 100 ул радног решења ДППХ на тањир 96-, добро мешати и држите даље од светлости на собној температури током 30 мин. Измерите апсорбанцију на 517 нМ са ензимским маркером. ВЦ је коришћен као позитивна контрола и сваки експеримент је поновљен 3 пута. Израчунајте ДППХ-ом без радикалне брзине прочитања (%) према Формули (2).
ДППХ БЕСПЛАТНО РАДИЧНА СТРАНА /%=(1 -𝐴1-𝐴3𝐴2) × 100 (2) где: А1 је апсорбанција узорка раствора + ДППХ радно решење; А2 је апсорбанција од 50% етанола по запремини + ДППХ радно решење; А3 је апсорбанција узорка раствора + 50% етанола по запремини.
1.3.3 Одређивање АБТС + Слободна способност задијале
Прво, тежи 1 г (1,82 ммол) АБТС и растопи га у деионизираној води да би се припремило АБТС радно решење са коначном концентрацијом од 7,4 ммол / Л; вагати 0. 5 г калијум перфелуфата и растворити га у деионизираној води да би се припремило радно раствор калијум за перфет са коначном концентрацијом од 2,6 ммол / Л; Помешајте радно решење АБТС и радно раствор калијум у једнаком количинама и реагују 12 х у мраку да би припремили АБТС + радно решење. Затим, према поступку у одељку 1.3.2, припремите ПХГС раствор Етанол, решење ГЛА Етанол, Н и ВЦ Етханол раствор, као и ПХГС / ГЛА (40:1) ~ ПХГС / ГЛА (1:40) ЕТХАНОЛ раствор.
Коначно, додајте 40 ул различите решења за узорку и 160 ул АБТС + радног решења за 96- добро, помешајте добро, реагујте на собној температури у мраку 6 мин и измерите апсорбанцију раствора на 734 нМ користећи ЕЛИСА читач. Израчунајте АБТС + бесплатну радикалну брзину окидања (%) према формули (3).
Где: А1 је апсорбанција узорка раствора + АБТС + радно решење; А2 је апсорбанција деионизоване воде + АБТС + радно решење; А3 је апсорбанција раствора узорка + деионизирана вода.
1.4 ћелијски експеримент
1.4.1 ћелијска култура
Након што су оживеле Б16Ф10 и Хацат ћелије, они се инокулирају у ДМЕМ медијум високог глукозе (који садржи 10% феталног говеда и 1% пеницилин-стрептомицин масовним фракцијом) и култивира се у инкубатору на 37 степени, 5% ЦО2 фракције јачине звука и 70% влаге током 24 сата. Статус раста ћелија примећен је под микроскопом, а медијум је замењен или субкултуран према статусу раста ћелија.
1.4.2 Експериментална групација
Б16Ф10 и Хацат ћелије у фази раста логаритамиће инокулирају се у таблице 96- са одговарајућим бројевима ћелија и култивирају се током 24 сата како би се дозволили ћелијама да се придржавају зида. Узорак решења различитих масовних концентрација припремају се помоћу медијума ДМЕМ културе. Нормална група, Група модела, ПХГС ниске дозе (125 уг / мл) Група, средње дозе (250 уг / мл) Група, висока доза (500 уг / мл) Група, ниско доза ГЛА (6,25 уг / мл) Група, средња доза ГЛА (12,5 уг / мл) Група, висока доза ГЛА (1:1) ГЛО (1:1) Успостављена је група, ПХГС / ГЛА (5:1) Група и ПХГС / ГЛА (10:1) Средња група културе.
У моделу ПИГМЕНТАЦИЈЕ УВБ изазване Б16Ф10, ћелије модела групне ћелије су додате са 30 ул ПБС-а (пХ =7. 4) и постављене 3 цм директно испод УВБ озрачије за 110 с; Експериментална група је била претресана са 100 ул узорака раствора различитих концентрација масе током 1 х, а затим је додато са 30 ул ПБС и постављено 3 цм директно испод УВБ озрачије за 110 с; Нормална група је увек користила медијум за културу високог глукозе; Празна група није била инокулирана ћелијама, већ умјесто једнаке количине медијума за културу.
У моделу упале за инфламацију у ЛПС-у, модел Група модела је културала са Рјешењем ПБС-а ЛПС у концентрацији од 20 уг / мЛ током 24 х; Експериментална група је била претресана са 100 ул узорака решења различитих масовних концентрација током 24 сата, а затим је додата са 20 УГ / МЛ ЛПС раствором за 24 х; Нормална група је увек користила средњи медијум високо глукозе; Празна група није била инокулирана ћелијама, већ са једнаком количином медијума за културу.
У Аф-индуцираном моделу ХАЦАТ ћелијски оксидативни стрес, Група модела је култивисана са раствором од 100 мл ААФ (2,5 ммол) у концентрацији од 25 ммол / Л током 24 х; Експериментална група је била претресана са 100 ул узорака раствора различитих масовних концентрација током 24 сата, а затим је додата Афф раствором у концентрацији од 25 мммол / Л током 24 х; Нормална група је увек користила средњи медијум високо глукозе; Празна група није била инокулирана ћелијама, већ са једнаком количином медијума за културу.
Свака група је постављена са 3 репликације бунара и култивирала се у инкубатору у 37 степени, 5% Фракције за јачину звука ЦО2 и 70% влажности.
1.4.3 Тест цитотоксичности
Поступак ЦЦК8 коришћен је за одређивање цитотоксичности. Б16Ф1 0 и Хацат ћелије у фази раста логаритамика пробављени су са 0,25% трипсин током 3 мин. Након што је пробава прекинута, културни медијум је више пута испухан да би се ћелијска суспензија уградила густином од 1 × 104 ћелија / мл. Ћелије су инокле инокулиране у тањиру 96-, 100 ул по добро, а ПБС је додат у бунари око ћелија. Након што се ћелије придржавају зида, додате су различите масовне концентрације узорака раствора по групи и култивирају се у инкубатору на 37 степени, 5% Фракције јачине звука од 5%, и 70% влаге за 24, 48 и 72 х, а затим је раствор одбачено. Све групе су додате са 100 ул комплетног културног медија која садржи 10% ЦЦК8 фракције јачине звука и инкубиране током 60 мин. Апсорбанција раствора на 450 нМ мерена је помоћу ЕЛИСА читача. Оражност ћелије (%) је израчуната према формули (4).
Где: Експериментална група је апсорбанција бунара који садрже ћелије и раствор узорака под зрачење УВБ-а; Нормална група је апсорбанција бунара који садрже ћелије и раствор узорака без озрачења УВБ-а; Прскана група је апсорбанција бунара који садрже медијум за културу, али без ћелија.
1.4.5 Одређивање садржаја меланина
Садржај меланина одређен је методом наОХ лизе. Након третирања ћелија 72 х према поступку у одељку 1.4.2, супернатант је одбачен и испран два пута са ПБС-ом, а додат је 100 ул НаОХ воденог раствора који садржи 10% ДМСО-а по запремини (концентрација 1 мол / Л). Након што је постављен у пећницу од 90 степени током 1 х, апсорбанција раствора на 490 НМ одређена је ензимски маркер. Експеримент је поновљен 3 пута. Садржај меланина (%) је израчунат према формули (5).
1.5 Одређивање инфламаторног фактора садржаја и оксидативног стреса
Након третирања ћелија током 48 х према поступку у одељку 1.4.2, ћелије Хаћева у свакој групи сакупљене су стругачем ћелија, центрифугиране, а супернатант је прикупљен. Садржај ИЛ -6 и ТНФ-а је одређен у складу са упутствима ЕЛИСА комплета.
Након третирања ћелија током 48 х према поступку у одељку 1.4.2, ћелије Хаћева у свакој групи сакупљене су стругачем ћелија, а ћелије су разбијене поновљеном смрзавањем и одмрзавањем. Ћелије су центрифугиране на 12000 Р / мин на 4 степени током 10 мин, а супернатант је прикупљен. СОД активност и садржај мачака утврђени су у складу са упутствима ЕЛИСА комплета.
1.6 Одређивање комбинованог индекса
Комбиновани метод индекс (ЦИ) коришћен је за утврђивање да ли су ПХГ-ови и ГЛА у различитим омјерима масе имали синергистички ефекат у инхибицији активности тирозиназе и антисидације. Комбиновани индекс је израчунат према формули (6):
Wherein: D1 and D2 are the mass concentrations (mg/mL) of the two drugs when the activity reaches x% in the combined treatment; DX is the mass concentration (mg/mL) required for the activity to reach x% when the two substances are used alone. Compusyn software was used for calculation. CI>1 означава антагонистички ефекат, ЦИ =1 означава адитив ефекат и ЦИ<1 indicates a synergistic effect.
1.7 Анализа података
Сви подаци су изражени као "Аритметичка средња вредност ± стандардна девијација (𝑥 ± 𝑠)". Графички призми 9.5. 0 Софтвер је коришћен за статистичку анализу. Једносмјерна анализа варијанце коришћена је за поређење више група. П<0.05 was considered statistically significant.
