Да ли укупни гликозид цистанцхе утиче на мирис?

Контакт:joanna.jia@wecistanche.com/ ВхатсАпп: 008618081934791

Ефекат укупних гликозида цистанхе на ћелије које облажу мирис пацова и њихово лучење неуротрофних фактора

Ли Цхуангфенг, Гуо Јиниу, Зханг Ксу, Лиу Иуннан

Повреда кичмене мождине (СЦИ) је озбиљна повреда централног деланервни систем, што чини {{0}}.2 процента —0,5 процената укупне трауме. Код прелома кичме, 16%—40% је компликовано повредом кичмене мождине, која често оставља тешку инвалидност, што доводи до потешкоћа у свакодневном животу које утичу на квалитет живота пацијената и изазивају велики терет за породицу и друштво.Олфацторићелије омотача (ОЕЦ) су посебна врста нервног лепка. Плазма ћелије могу да мигрирају у мозак самириснанервних аксона и могу да луче многе факторе раста као што су НГФ, ГДНФ, БДНФ, НТ-3, неуропептид-И и С-100. Због ових карактеристика намириснаоблажући ћелије, ОЕЦ се сматра једним од обећавајућих ћелија семена за трансплантацију ћелија за поправку СЦИ. Тренутно се лечење СЦИ у области рехабилитационе медицине углавном заснива на свеобухватној рехабилитацији. Да би се пронашао ефикаснији метод, спроведено је следеће истраживање о дејствуцистанцхеукупногликозидина ОЕЦ-има:

Цистанцхе укупни гликозид за ћелије које облажу мирисне ћелије

1 Материјал и методе

1.1 Експериментални материјали

Вистар пацов (обезбеђује Центар за животиње Универзитета Унутрашње Монголије);цистанцхеукупногликозиди, ДМЕМ/Ф12 медијум, фетални телећи серум (ФЦС), поли-Д-лизин, арабинозид (Ара-Ц), трипсин, Д-Ханксов раствор, зечји анти-п75НГФР (Санта Круз), ЕЛИСА комплет (Промега), ћелијски инкубатор (Тхермо-ХЕПА Цласс 100), микроскоп са инвертним фазним контрастом (Олимпус ЦККС41, Јапан), ултра чист радни сто (Сузхоу Антаи Аир Тецхнологи Цо., Лтд.) Компанија, СВ-ЦЈ-2ФД), ензим анализатор етикета (Веллсцан МКХ), проточни цитометар итд.

1.2 Методе истраживања

1.2.1 ОЕЦ култура, пречишћавање и идентификација: Вистар пацови су жртвовани декапитацијом и натопљени у вину 5 минута. Предња лобања је отворена да би се откриламириснасијалица. Двамириснасијалице су потпуно уклоњене под микроскопом за сецирање. Оперите у Д-Ханкс раствору; исецимириснасијалица са микрохируршким маказама, додати 2 мл 0.25 процената панкреатина и инкубирати на 37 степени 20 минута; додати Д МЕМ/Ф12 медијум за културу који садржи 10 процената телећег серума у ​​епрувету за центрифугу од 2 мл. Дигестија је прекинута у средини; бус пипета је аспирирала непотпуно дигестирано ткиво на 800 рпм и центрифугирала 5 мин, одбацила супернатант; коначно употребљен кондиционирани медијум (20 процената ФЦС плус 20|и, мол/ЛФорсколин плус 20|иг/млБПЕ плус ДМЕМ /Ф12) Претворите га у лк 107мл једноћелијску суспензију, инокулирајте у боцу за ћелијску културу обложену полилизином, ставите у инкубатору са 37 степени, 5 процената ЦО2, а затим додати Арац. Пречишћавање је спроведено на 36 сати. Користите зечје анти-п75Е и ФИТЦ-означено козје анти-зечје ИгГ секундарно антитело за имунохистохемијску идентификацију ћелија и посматрање флуоресцентним микроскопом.

1.2.2 Користите МТТ и проточну цитометрију да одредите ефекатцистанцхе укупни гликозидинамириснаоблагање ћелија: инокулирати култивисане и пречишћенемириснаобложите ћелије у 96-плочу са бунарима на 1Кс106 и додајтецистанцхе укупни гликозиди(акционе концентрације су Ијиг/мл, 10 мг/мл, 100 мг/мл), измерите вредност ОД и измерите ћелијску проточну цитометрију након 24 сата деловања. Подесите контролну групу иЦистанцхе укупни гликозидиразличите концентрационе групе: Група А (Контролна група): Подлога за културу која садржи серум се користи као негативна контрола; Група Б (цистанцхе укупни гликозидигрупа ниске концентрације: ллиг/мл); Група Ц (цистанцхе укупни гликозиди средња концентрација Група: Л10јкг/МК); Група Д (цистанцхе укупни гликозидигрупа високе концентрације: 100|кг/мло): 15 пацова у свакој групи.

1.2.3 Одређивање садржаја неуротрофног фактора у супернатанту помоћу ЕЛИСА: инокулирати култивисан и пречишћенмириснаоблагање ћелија у 6-плочи са бунарима на 1к106, додатицистанцхе укупни гликозиди(иста концентрација као горе) после 24 сата и деловати 24 сата, и одвојено сакупити супернатант, сачуван на -80 дуго. Садржај фактора раста нерава у течности одређен је ЕЛИСА методом.

1.3 Статистичка анализа

Подаци у овој студији се третирају као подаци мерења, а добијени подаци се изражавају као средња вредност ± стандардна девијација, а за статистичку анализу се користи СПСС 11.{1}} статистички софтвер. Добијени подаци се анализирају анализом варијансе, а П<0.05 indicates="" that="" there="" is="" a="" significant="">

2 Ресултс

2.1 Ефекат одцистанцхеукупни гликозиди намириснаоблагање ћелија

2.1.1 Резултати одређивања методе метил оксазолил тетразола (МТ): Група А: 0.617±0.149; Група Б: 0.589±0.147; Група Ц: 0.761±0.138; Група Д: 0.732±0.234. Поређење измеђуЦистанцхе укупни гликозиди group (B) and Control group (A), P>0.05, разлика није била значајна;Цистанцхе укупни гликозиди10мг/мл, 100мг/мл група концентрације (Ц, Д) у поређењу са контролном групом (А) П<0.05, the="" difference="" is="">

2.1.2 Резултат одређивања проточне цитометрије приказан је на слици 1. У поређењу са контролном групом,цистанцхе укупни гликозидигрупа је била већа од контролне групе, а проценат апоптотичких ћелија је био нижи од контролне групе.

2.2 Резултати имуноензимског теста (ЕЛИСА).

Резултати испитивања су показали да је садржај неуротрофног фактора који потиче из глијалне ћелијске линије (ГДНФ): пре дозирања: 302,1±16,6 пг/мл, група А: 340,5±13,2пг/мл; група Б: 333,2±23,6 пг/мл; Група Ц: 355,2±17,6 пг/мл; Група Д; 379,2±15,3 пг/мл. У поређењу са претходном применом, садржај ГДНФ је значајно повећан; у поређењу са контролном групом (А), садржај ГДНФ уЦистанцхе укупни гликозидиКонцентрациона група од 100 мг/мл (Д) је значајно повећана.

3 Дискусија

Потешкоће у регенерацији аксона један су од главних разлога због којих се тешко опоравити након повреде кичмене мождине. ОЕЦ имају улогу у регенерацији аксона централних неурона које је тешко заменити другим типовима ћелија. Последњих година истраживање омириснаоблагање ћелија постало је врућа тачка.Олфацториенсхеасхинг ћелије су посебна врста глијалних ћелија које имају карактеристике Шванових ћелија и астроцита. Потичу измириснабазалној мембрани и широко су распоређени по површинимириснаслузокоже,мириснанерв, имириснасијалица. Има способност да се дели и регенерише за живот и може да пратимириснанервних аксона да мигрирају у мозак. Аксони намириснанерв може да прође кроз спој између периферног нервног система и централног нервног система сваких 30-60 дана, поново прерасте умириснаомотати и успоставити синаптичке везе4.Олфацторићелије које покривају омотач могу да луче многе факторе раста као што су НГФ, БДНФ, ГДНФ, НТ-3, неуропептид-И и С-100. Студије су показале да фактор раста нерава (НГФ) може спречити атрофију неурона црвеног језгра кичменог стуба и ојачати кортикоспинални тракт Спроут и промовисати регенерацију нервног пута кичмене мождине црвеног језгра; и неуротрофни фактор који потиче из мозга (БДНФ) и неуротрофин-3 (НТ-3) могу спречити апоптозу ћелија кичмене мождине црвеног језгра код одраслих пацова са аксотомизованом повредом и спасити умируће неуроне и промовисати регенерацију аксона П. Додатно,мириснаћелије које покривају такође експримирају друге факторе на својим ћелијским мембранама, као што је фактор адхезије нервних ћелија (Н-ЦАМ), који су укључени у ћелијску адхезију и раст аксона. Због ових карактеристика намириснаоблажући ћелије, ОЕЦ се сматра једним од обећавајућих ћелија семена за трансплантацију ћелија за поправку СЦИ.

Хемијске компонентеЦистанцхеуглавном укључују фенилетаноидне гликозиде, иридоиде, испарљиве компоненте, лигнане, полисахариде и алкалоиде. Студија је то открилаЦистанцхеа његове хемијске компоненте имају неуропротективно дејство. Денг ет ал. проучавао је ефекат тубулоза Б на апоптозу СХ-СИ5И неурона индуковану фактором туморске некрозе (ТНФ). Резултати су показали да су након 100 уг/ неурони СХ-СИ5И након 36 сати третмана ТНФ са Л показали типичне карактеристике апоптозе, док би третман тубулина Б током 2 сата могао значајно смањити апоптозу изазвану ТНФ-ом. Поред тога, студије су такође показале да фенилетаноидни гликозиди могу да инхибирају апоптозу ћелија гранула малог мозга пацова инхибирањем каспазе-3 и каспазе-8, и против Ц57 мишје црне боје изазване метил фенил тетрахидропиридином (МПТП). Оштећење квалитетних допаминергичких неурона има заштитно дејство. Не само то, негоЦистанцхетакође може ублажити различита оштећења као што је исхемија-реперфузија нервног система. Експеримент са исхемијом мозга код миша показује да је опсег инфаркта од 24х и 48х након исхемије у групи церебралне исхемије-реперфузије 72,98% и 60,45% у просеку. Насупрот томе, тхецистанцхеУкупне групе гликозида велике, средње и ниске дозе (250.0мг·кг/д; 125,0мг·кг/д; 62,5мг·кг/д) могу да направе мозак мишева након церебралне исхемије-реперфузије 24х Величина инфаркта је смањена на 25,94 одсто, 25,81 одсто и 31,13 одсто, а величина инфаркта мозга је смањена на 22,14 одсто, 20,06 одсто и 22,27 одсто после 48 сати. Постојала је значајна разлика између ова два, показујући значајан инхибиторни ефекат на апоптозу неурона.

У овој студији различите концентрацијецистанцхе укупни гликозидипримењене су на ОЕЦ. МТТ метода и мерење проточне цитометрије потврдили су да је 10мг/мл100мг/млцистанцхе укупни гликозидиможе промовисати пролиферацијумириснаоблагање ћелија. То су показали резултати проточне цитометријецистанцхе укупни гликозидиможе промовисати пролиферацијумириснаоблагање ћелија Углавном промовише пролиферацију Г1 циклусамириснасперматозоида и значајно смањује апоптотичке ћелије. дакле,Цистанцхе укупни гликозидине може само да промовише пролиферацијумириснапокривају ћелије, али такође повећавају ћелијску активност и инхибирају њихову апоптозу. Имуноензимски тест доказује тоЦистанцхе укупни гликозидиможе значајно да подстакне лучење ГДНФ одмириснаоблагање ћелија. Горе наведени резултати пружају експерименталну основу за клиничку применуЦистанцхе укупни гликозиди.

Референце

[1] Киу Веихонг, Зху Хонгкианг, Зханг Баикианг, ет ал. Фактори који утичу на квалитет живота пацијената са повредом кичмене мождине током рехабилитације [Ј]. Кинески часопис за рехабилитациону медицину, 2009, 4(24): 313.

[2] Рицхтер МВ, Флетцхер ПА, Лиу Ј, ет ал. Ламина проприа имириснаћелије које облажу бик показују диференцијалну интеграцију и миграцију и промовишу клијање деференцијалног аксона у оштећеној кичменој мождини [Ј]. Ј Неуросци, 2005.25(46):10700 -10711.

[3] Фаирлесс Р, Бамет СЦ. ћелије које покривају мирис мириса: њихова улога у обнављању централног нервног система [Ј.Инт Ј Биоцхем Целл Биол. 2005,37(4):693-699.

[4] Цхен Кс, Фанг Х. Сцхвоб ЈЕ. Мултипотенција пречишћеног. трансплантиране базалне ћелије глукозе умириснаепител [Ј]. Ј Цомп Неурол, 2004, 46914): 457—474.

[5] Ла П, Јонес ЛЛ. Тусзински МХ. БДНФ-експримирајућа маростромална ћелија; подржавају екстензивни раст аксона на местима д повреде кичмене мождине[Ј]. Екп Неурол, 2005, 191(2):344—360.

[6] Денг М, Зхао ЈИ, Ју КСД, ет ал. Заштитни ефекат тубулосе Б на апоптозу индуковану ТНФ у неуронским ћелијама [Ј]. Ацта Пхармацол Син, 2004, 25 (102 1276

[7] ТианКсуе-Феи, ПуКсиао-Пинг.фенилетаноидгликозидиизЦистанцхессалса инхибира апоптозу изазвану 1-метил-4-фенилпиридинијум јоном у неуронима[Ј]. Ј Етхнопхармацол, 2005, 97 (1): 59.

[8] Генг Кс, Сонг Л.Пу Кс, ет ал. Неуропротективни ефекат