Читач РНА М6 А ИТХДФ2 контролише антитуморски и антивирусни имунитет НК ћелија, 6. део
Feb 22, 2024
Модел метастатског меланома и МЦМВ изазов
Б16Ф10 ћелије (105) су убризгане ив мишевима. 14 дана након ињекције, мишеви су еутаназирани за постморталну анализу. Метастатски чворови у плућима анализирани су макроскопски и избројани. Ћелијску линију Б16Ф10 обезбедила је Хуа Иу (Цити оф Хопе, Лос Анђелес, Калифорнија). Итхдф2ΔНК и Итхдф2ВТ мишеви су инфицирани ип ињекцијом Смитовог соја МЦМВ (2,5 × 104 ПФУ), који је купљен од Америчке колекције типских култура (ВР-1399). Узорци периферне крви добијени су субмандибуларном пункцијом 0, 4 и 7 дана након инфекције.
Чворови плућне метастазе се односе на чворове формиране од ћелија малигних тумора са других места које мигрирају у плућа кроз крв или лимфни систем. За многе пацијенте ово је уобичајена манифестација рака плућа.
Међутим, иако чворови метастаза у плућима представљају претњу физичком здрављу пацијената, не постоји директна веза између њих и памћења. Зато се треба активно суочити са изазовима рака плућа и нодула метастаза на плућима, а не дозволити да негативне емоције и анксиозност утичу на наше физичко и ментално здравље.
Истовремено, можемо одржавати и побољшати памћење кроз неке позитивне методе. На пример, обавите неке тренинге памћења, као што су математичка израчунавања, читање, слушање музике, играње игрица, итд. Осим тога, придржавање добрих животних навика, као што су редовна вежба, довољно сна, здрава исхрана, итд. побољшати наше памћење.
Најважније је задржати позитиван став. Без обзира на потешкоће са којима се суочавате, морате веровати у своју снагу и флексибилност свог нервног система, а кроз позитивна прилагођавања и одговоре на крају ћете успешно превазићи потешкоће.
Укратко, иако метастатски чворови у плућима представљају претњу физичком здрављу, они нису директно повезани са памћењем. Требало би да се суочимо са тим позитивно и да одржавамо и побољшавамо своје памћење прилагођавајући начин живота и одржавајући добар став. Види се да морамо побољшати памћење, а цистанцхе десертицола може значајно побољшати памћење, јер и цистанцхе десертицола може да регулише равнотежу неуротрансмитера, као што је повећање нивоа ацетилхолина и фактора раста. Ове супстанце су веома важне за памћење и учење. Поред тога, Цистанцхе десертицола такође може побољшати проток крви и промовисати испоруку кисеоника, што може осигурати да мозак добије довољно хранљивих материја и енергије, чиме се побољшава виталност и издржљивост мозга. Види се да морамо побољшати памћење, а цистанцхе десертицола може значајно побољшати памћење, јер и цистанцхе десертицола може да регулише равнотежу неуротрансмитера, као што је повећање нивоа ацетилхолина и фактора раста. Ове супстанце су веома важне за памћење и учење. Поред тога, Цистанцхе десертицола такође може побољшати проток крви и промовисати испоруку кисеоника, што може осигурати да мозак добије довољно хранљивих материја и енергије, чиме се побољшава виталност и издржљивост мозга.
Кликните на суплементе да бисте побољшали памћење
Да би се измерило вирусно оптерећење у периферној крви, слезини и јетри, ДНК је изолована коришћењем КИАГЕН ДНеаси комплета за крв и ткиво за кПЦР анализу. Коришћени су следећи прајмери: МЦМВ-ИЕ1,59-АГЦЦАЦЦААЦАТТГАЦЦАЦГЦАЦ-39 (напред) и МЦМВИЕ1, 59-ГЦЦЦЦААЦЦАГГАЦАЦАЦААЦТЦ-39 (обрнуто).
Ин виво третман мишева са ИЛ-15
За ин виво третман мишева са ИЛ-15, мишевима Итхдф2ΔНК и Итхдф2ВТ је убризгано 2 µг ип рекомбинантног хуманог ИЛ-15 (кат.бр. 745101; Национални институт за рак) током 5 дана. Третирани и контролни мишеви су затим еутаназирани за анализу проточне цитометрије.
Проточна цитометрија
Једноћелијске суспензије припремљене су од БМ, крви, слезине, јетре и плућа Итхдф2ΔНК и Итхдф2ВТ мишева као што је претходно описано (Ванг ет ал., 2018б). Анализа проточне цитометрије и сортирање ћелија обављени су на ЛСРФортесса Кс-20 и ФАЦСАриаФусион проточном цитометру (БД Биосциенцес), респективно.
Подаци су анализирани коришћењем НовоЕкпресс софтвера (Агилент Тецхнологиес).
Коришћена су следећа антитела обележена флуоресцентном бојом из БД Биосциенцес, БиоЛегенд, Инвитроген или Целл Сигналинг Тецхнологи: ЦД3ε (145-2Ц11), ЦД19 (1Д3), Гр-1 (РБ6-8Ц5 ),ТЕР-119 (ТЕР-119), ЦД11ц (Н418), ЦД4 (ГК1.5), ЦД8 (53-6.7), ЦД122 (5Х4), ЦД132 (ТУГм2), НК1.1 (ПК136), ЦД11б (М1/70), ЦД27 (ЛГ.3А10), ЦД117 (2Б8), ЦД127 (СБ/199), ЦД135 (А2Ф10.1), КЛРГ1 (2Ф1), ЦД45 ({{46 }}Ф11), ЦД45.1 (А20), ЦД45.2 (104), ИФН- (КСМГ1.2), 2Б4 (м2Б4), гранзим Б (КА16А02), перфорин (С16009А), Ли49Х (3Д10), Ли49Д ( 4е5), ЦД69 (Х1.2Ф3), ЦД226(ТКС42.1), НКГ2Д (ЦКС5), НКГ2А (16А11), НКп46 (29А1.4), ТИГИТ(1Г9), ПД-1 (Ј43), анексин В, Ки67 (б56), Тбет (4б10) и Еомес (ВД1928), фосфо-п44/42 Ерк1/2 (Тхр202/Тир204, #9101), фосфо-Акт (Сер473, #5315), фосфо-С6 рибосф ,пхоспхо-Стат3 (Тир705, #9145) и пхоспхо-Стат5 (Тир694, #9539).
За процену пролиферације НК ћелија, ћелије су обележене са 5 µМ ЦТВ (Инвитроген) у складу са протоколом произвођача пре преношења у мишеве примаоце. Интрацелуларно бојење Ки67, Тбет и Еомес изведено је фиксирањем и пермеабилизацијом помоћу комплета за бојење Фокп3/транскрипционог фактора (еБиосциенце).
За детекцију фосфорилираних протеина, пречишћене НК ћелије слезине су претходно третиране рекомбинантним хуманим ИЛ-15 (50 нг/мл) током 1 х, а затим фиксиране са Пхосфлов Фик пуфером И након чега је уследила пермеабилизација са Пхосфлов Перм пуфером ИИИ (БД Биосциенцес) и бојење са антитела.
Адоптивни пренос ћелија
За процену ефекта недостатка Итхдф2 на сазревање НК ћелија, мешавина 5 × 106 БМ ћелија у односу 1:1 из ЦД45.1 или Итхдф2ΔНК ЦД45.2 мишева је котрансферисана у Раг2-/-Ил2рг-/- мишеве. Реконституција прималаца је процењена проточном цитометријом 8 недеља након трансплантације.
За експерименте хомеостатичке пролиферације изазване лимфопенијом, једнак број пречишћених ћелија слезене НК са ЦД45.1 или Итхдф2ΔНК ЦД45.2 мишева је котрансферован у Раг2−/−Ил2рг−/− мишеве, након чега је уследила процена релативних процената пренетих ћелија ВТ и Итхдф2 у спленичним ћелијама с НК. Раг2−/−Ил2рг−/− реципијената помоћу проточне цитометрије у назначеним временским тачкама.
За метастатски меланомамодел, 106 ИЛ-2-проширених НК ћелија из Итхдф2ΔНК или Итхдф2ВТ мишева су убризгане ив у Раг2−/−Ил2рг−/− мишеве. 1 дан касније, ћелије Б16Ф10 (105) су убризгане ив мишевима. 14 дана након ињекције, мишеви су еутаназирани ради постмортем анализе. У неким експериментима, ћелије су обележене ЦТВ (5 µМ, Инвитроген) да би се пратила ћелијска пролиферација пре трансфера.
Ин виво тест трговине људима
За откривање промета НК ћелија из БМ у периферну крв, 1 µг ив АПЦ-обележено анти-ЦД45 антитело је убризгано у Ц57БЛ/6 мишеве. Два минута након ињекције антитела, мишеви су одмах еутаназирани, а БМ ћелије су сакупљене за проточну цитометрију након што су ћелије обојене ЦД3 и НК1.1 антителима. Паренхимске НК ћелије су идентификоване недостатком бојења ЦД45, док су синусоидне НК ћелије идентификоване присуством обележавања ЦД45. Стога, однос НК ћелија у синусоидима (ЦД45+) према оним у паренхимским регионима (ЦД45−) указује на трговину НК ћелијама из БМ топериферне крви у стабилном стању.
РТ-кПЦР у реалном времену и имуноблотирање
РНК је изолована коришћењем РНеаси Мини Кит (КИАГЕН) и затим реверзно транскрибована на цДНК помоћу ПримеСцрипт РТ Реагент Кит-а са гДНА Ерасер-ом (Такара Био) према упутствима произвођача. Нивои експресије мРНА су анализирани коришћењем СИБРГреен ПЦР Мастер Мик-а и КуантСтудио 12К Флек Реал-ТимеПЦР система (оба компаније Тхермо Фисхер Сциентифиц). Прајмер секвенце су наведене у табели С1.
Имуноблотирање је обављено према стандардним процедурама, као што је претходно описано (Денгет ал., 2015; Иу ет ал., 2006). Коришћена су следећа антитела: МЕТТЛ3 (кат. бр. 15073-1-АП; Протеинтецх), МЕТТЛ14 (кат. бр.26158-1-АП; Протеинтецх), ИТХДФ1 (кат. бр. 17479-1-АП ; Протеинтецх), ИТХДФ2 (кат. бр. РН123ПВ; МБЛ), ИТХДФ3 (кат. бр.25537-1-АП; Протеинтецх), АЛКБХ5 (кат. бр. аб195377; Абцам), ФТО (кат. бр. аб124892; Абцам), МДМ2 (кат. бр. 33-7100; Инвитроген), ТДП-43 (кат. бр. ПА5-29949; Инвитроген) и -ацтин (кат. бр. {{20 }}Иг; Протеинтецх).
сиРНА кноцкдовн тест
IL-2–expanded NK cells were transfected with Accell mouse Tardbp siRNA (cat. no. E-040078-00-0005; Dharmacon) or Mdm2 siRNA (cat. no. E-041098-00-0005; Dharmacon) using Accell delivery media (Dharmacon) according to the manufacturer's instructions in the presence of IL-15 (50 ng/ml). The Accell eGFP control pool was used as siRNA control. The transfection efficiency was >90% мерено проточном цитометријом. Ефикасност обарања гена је одређена кПЦР-ом и имуноблотингом. 3 д након трансфекције, ћелијска апоптоза и пролиферација су анализирани проточном цитометријом као што је горе описано.
Луциферазни репортерски тест
Регион промотора Итхдф2 у распону од –2,000 бп до +100 бпоф ТСС-а је амплифициран из мишјих НК ћелија и клониран у апГЛ4-Басиц Луциферасе Репортер Вецтор (Промега) да генерише апГЛ{ {5}}Итхдф2 репортер плазмид. ХЕК293Т ћелије купљене од АТЦЦ су котрансфектоване са пГЛ4-Итхдф2 репортер плазмидима, као и СТАТ5а или СТАТ5б плазмидима прекомерне експресије или празним вектором, заједно са пРЛ-ТК Ренилла репортер плазмидом (Промега) за нормализацију ефикасности трансфекције. Ћелије су сакупљене за лизу 24 х након трансфекције, а луциферазна активност је квантификована флуориметријски помоћу система Дуал-Луциферасе (Промега). Прајмер секвенце за клонирање Итхдф2 промотора и плазмида прекомерне експресије СТАТ5а и СТАТ5б наведене су у табели С1.
ЦхИП тестови
ЦхИП тестови су изведени коришћењем Пиерце Магнетиц ЦхИП комплета (кат. бр. 26157; Тхермо Фисхер Сциентифиц) према упутствима произвођача. Укратко, једнака количина ананти-анти-фосфо-Стат5 (Тир694, кат. бр. 9351; Целл Сигналинг Тецхнологиес) или одговарајућег контролног нормалног зечјег ИгГ одвојено је коришћена за преципитацију умрежених ДНК-протеинских комплекса изведених из 5 × 106 пречишћених примарних НК ћелија миша које су претходно третиране са ИЛ-15 (50 нг/мл) током 1 х. Након преокрета унакрсног повезивања, ДНК имунопреципитирана индикованим антителом је тестирана кПЦР-ом. Секвенце свих прајмера су наведене у табели С1.
Ек виво тест цитотоксичности
Ек виво цитотоксичност НК ћелија је процењена стандардним 51 Цррелеасе тестовима. Ћелијске линије мишјег лимфома РМА-С (МХЦ класа Идефициент) и РМА (МХЦ класа И довољне) ћелије, поклон Андре´Веиллетте-а (МцГилл Университи, Монтреал, Канада), коришћене су као астаргет ћелије. Мишеви су третирани ип ињекцијом полиинозинске:полицитидилне киселине [поли (И: Ц); 200 µг/мишеви] током 18 х. Поли(И:Ц)-активиране НК ћелије су изоловане из слезине коришћењем ЕасиСепМоусе НК Целл Исолатион Кит (СТЕМЦЕЛЛ Тецхнологиес). Пречишћене НК ћелије су кокултивисане са циљним ћелијама у односу 5:1, 2,5:1 и 1,25:1 у присуству ИЛ-2 (50 У/мл).
м6А-сек
Пречишћене НК ћелије слезине су проширене помоћу ИЛ-2 (1,000 У/мл, кат. бр. Булк Ро 23-6019; Национални институт за рак) ин витро током 7 дана. Укупна РНК је изолована помоћу ТРИзол реагенса (Тхермо ФисхерСциентифиц) из 50 милиона ИЛ-2-проширених НК ћелија. Полиаденилована РНК је додатно обогаћена из укупне РНК коришћењем комплета за пречишћавање мРНА Динабеадс (Инвитроген). Узорци мРНА су фрагментисани у 100- нт дуге фрагменте са реагенсима за фрагментацију РНК (Инвитроген).
Фрагментирана мРНА (5 µгмРНА) је коришћена за м6А имунопреципитацију коришћењем м6А антитела (202003; Синаптиц) према стандардном протоколу Магна МеРИП м6А комплета (Мерцк Миллипоре). РНК је обогаћена помоћу РНА Цлеан & Цонцентратор-5 (Зимо Ресеарцх) за генерисање библиотеке са КАПА РНА ХиперПреп комплетом (Роцхе). Секвенцирање је обављено у објекту за геномику Цити оф Хопе на Иллумина ХиСек 2500 машини са режимом једног читања 50-бп. Очитавања секвенционирања су мапирана на мишгеном помоћу софтвера ХИСАТ2 в101 (Ким ет ал., 2015).
Маппедреадс имунопреципитације и улазних библиотека обезбеђени су коришћењем Р пакета екомеПеак (Менг ет ал., 2014). м6Апеакс су визуелизовани коришћењем софтвера Интегративе Геномицс Виевер (хттп://ввв.игв.орг). Мотив везивања м6А анализирали су МЕМЕ (хттпс://меме-суите.орг) и ХОМЕР (хттп://хомер.уцсд.еду/хомер/мотиф). Названи врхови су означени пресеком са архитектуром гена помоћу Рпацкаге ЦхИПсеекер (Иу ет ал., 2015).
StringTie was used to assess expression levels for mRNAs from input libraries by calculating the total exon fragments/mapped reads in millions × exon length in kb (Pertea et al., 2015). The differentially expressed mRNAs were selected with log2(fold change) >1 орлог2 (промена пута)<−1 and P < 0.05 using the R package edgeR (Robinson et al., 2010).
ИТХДФ2 РИП-сек
50 милиона ИЛ-2–проширених НК ћелија је сакупљено и испрано двапут хладним ПБС, а ћелијска пелета је лизирана са 2 вол пуфера за лизу (10 мМ Хепес, пХ 7,6, 150 мМ КЦл, 2 мМ ЕДТА, 0,5% НП-40, 0,5 мМ дитиотреитола, коктел инхибитора протеазе 1:100 [Тхермо Фисхер Сциентифиц] и 400 У/мл инхибитора СУПЕРасе-Ин РНасе [Тхермо Фис]).
Лизат је инкубиран на леду 5 мин и центрифугиран 15 мин да би се очистио лизат. Једна десетина запремине ћелијског лизата је сачувана као улаз. Остатак ћелијског лизата је инкубиран са 5 µг анти-ИТХДФ2 (кат. бр. РН123ПВ; МБЛ) који је спојен са магнетним перлама протеина А (кат. бр. 10001Д; Инвитроген) на 4 степена 2 х уз лагано окретање. Након тога, куглице су испране пет пута са 1 мл ледено хладног пуфера за прање (50 мМ ХЕПЕС, пХ 7,6,200 мМ НаЦл, 2 мМ ЕДТА, 0,05% НП-40, 0,5 мМ дитиотреитола У/мл 200 инхибитор).
Имунопреципитирани узорци су подвргнути дигестији протеиназе К у пуферу за испирање са додатком 1% СДС и 2 мг/мл протеиназе К (ТхермоФисхер Сциентифиц) инкубирани уз мућкање на 1.200 рпм на 55 степени током 1 х. Укупна РНК је екстрахована из улазне и имунопреципитиране РНК додавањем 5 вол ТРИзол реагенса, а затим Дирецт-зол РНА Минипреп (Зимо Ресеарцх).
Библиотека цДНК је генерисана са КАПА РНА ХиперПреп комплетом (Роцхе) и секвенционирана на Иллумина ХиСек 2500 платформи. Врхунске резултате позивања са имунопреципитацијом и улазним библиотекама генерисао је Р пакет РИПСеекер (Ли ет ал., 2013). ХОМЕР је коришћен за проналажење мотива дистрибуције података у регионима врхова. Названи врхови су обележени пресеком са архитектуром гена и транскрипта коришћењем ЦхИПпеакАнно (Зху ет ал., 2010).
тест стабилности мРНА
Пречишћене НК ћелије слезине из Итхдф2ΔНК и Итхдф2ВТ мишева су култивисане са ИЛ-15 (50 нг/мл). 3 дана након културе, ћелије су третиране актиномицином Д (5 µг/мл, кат. бр. А9415; Сигма) за назначено време. Ћелије без третмана су коришћене на 0 х. Ћелије су сакупљене у назначено време, а укупна РНК је екстрахована из ћелија за кПЦР. Полуживот мРНК је израчунат коришћењем методе коју су претходно описали Венг ет ал. (2018). Прајмер секвенце су наведене у табели С1.
Онлине анализа базе података
Користили смо онлајн ресурс БиоГПС (хттп://биогпс.орг) да анализирамо ткивно специфичну експресију Итхдф2. Скупови РНА-секвентних података били су из ГЕО под приступним бр. ГСЕ106138, ГСЕ113214 и ГСЕ25672. Нормализовани подаци из РНА-сек анализа су извезени, а з-сцоре експресије гена је визуелизован помоћу функције Хеатмап.2 у оквиру гплотс Рлибрари
Статистика
Неупарени Студентови т-тестови (двострани) су изведени коришћењем софтвера ГрапхПад Присм. Једносмерна или двосмерна АНОВА је изведена када су упоређене три или више независних група. П вредности су прилагођене за вишеструка поређења коришћењем Холм-Сˇ´ıдак процедуре. П < 0.05 се сматрало значајним. *, П < {{10}}.05; **, П < 0,01; и ***, П < 0,001.
Онлине додатни материјал
Слика С1 приказује нивое протеина ИТХДФ2 у имуним ћелијама, укључујући НК ћелије као одговор на ИЛ-15 стимулацију, МЦМВ инфекцију и прогресију тумора; генерација мишева са делецијом Итхдф2 специфичном за НК ћелије. Слика С2 приказује вирусне титре у слезини и јетри код мишева инфицираних МЦМВ и проценат и апсолутни број Ли49Х+ и/или Ли49Д+ НК ћелија код мишева инфицираних МЦМВ. Слика С3 приказује пролиферацију, преживљавање, сазревање и експресију активирајућих и инхибиторних рецептора НК ћелија из Итхдф2ВТ и Итхдф2ΔНК мишева. Слика С4 приказује регулацију експресије ИТХДФ2 ИЛ-15-СТАТ5 сигнализацијом и експресију компоненти ИЛ-15 рецептора, ПИ3К–АКТ пута и МЕК–ЕРК пута уНК ћелијама из Итхдф2ВТ и Итхдф2ΔНК мишеви. Слика С5 приказује тестове РНА-сек, м6А-сек и РИП-сек у НК ћелијама широм транскриптома. У табели С1 су наведени прајмери коришћени у студији.
Доступност података
Подаци РНА-сек, м6А-сек и РИП-сек депоновани су у Национални центар за биотехнолошке информације ГЕО под приступним бр. ГСЕ174027. Преостали подаци који подржавају налазе ове студије доступни су од одговарајућих аутора на захтев.
Признања
Овај рад су подржали Национални институти за здравље (НС106170, АИ129582, ЦА247550, ЦА163205, ЦА223400, ЦА068458 и ЦА210087), Друштво за леукемију и лимфоме ({{7СЦ Цалифорниа) Медицински институт{{7} 9}}), и награду за изузетан пројекат Алијансе за борбу против рака дојке 2021. Овај рад је такође делимично подржан од стране УСДАавард (УСДА/НИФА 2020-67017-30843).
Доприноси аутора: С. Ма, Ј. Иу и МА Цалигиури осмислили су и дизајнирали пројекат. С. Ма, Ј. Иан, Ј. Зханг и Ј. Иу је изводио експерименте и/или анализе података. З. Цхен, Л.-С.Ванг, ЈЦ Сун и Ј. Цхен дали су реагенсе и материјалну подршку. С. Ма, Ј. Иу, Ј. Цхен и МА Цалигиури написали су, прегледали и/или ревидирали рад. Сви аутори су расправљали о резултатима и коментарисали рукопис.
Откривања: Ј. Цхен је пријавио „друго“ из Геновел БиотецхЦорп. изван послатог рада и научни је оснивач Геновел Биотецх Цорп. и научни саветник за онкологију раса. Нису пријављена друга открића.
Референце
1. Арасе, Х., ЕС Моцарски, АЕ Цампбелл, АБ Хилл, и ЛЛ Ланиер. 2002. Директно препознавање цитомегаловируса активирањем и инхибицијом рецептора НК ћелија. Наука. 296:1323–1326.
2. Аиала, ИМ, Т. Мистели, анд ФЕ Баралле. 2008. ТДП-43 регулише фосфорилацију протеина ретинобластома кроз потискивање експресије циклин зависне киназе 6. Проц. Натл. Акад. Сци. САД. 105:3785–3789.
3.Барбиери, И., К. Тзелепис, Л. Пандолфини, Ј. Схи, Г. Миллан-Замбрано, СЦ Робсон, ´Д. Асприс, В. Миглиори, АЈ Баннистер, Н. Хан, ет ал. 2017. МЕТТЛ3 везан за промотор одржава мијелоидну леукемију помоћу контроле транслације зависне од м6А. Природа. 552:126–131.
4. Бецкнелл, Б., и МА Цалигиури. 2005. Интерлеукин-2, интерлеукин-15 и њихове улоге у људским природним ћелијама убицама. Адв. Иммунол. 86: 209–239.
5. Бертоли, Ц., ЈМ Скотхеим, и РА де Бруин. 2013. Контрола транскрипције ћелијског циклуса током Г1 и С фазе. Нат. Рев. Мол. Целл Биол. 14:518–528.
6.Безман, НА, ЦЦ Ким, ЈЦ Сун, Г. Мин-Оо, ДВ Хендрицкс, И. Камимура, ЈА Бест, АВ Голдратх и ЛЛ Ланиер. Конзорцијум за пројекат имунолошког генома. 2012. Молекуларна дефиниција идентитета и активације природних ћелија убица. Нат. Иммунол. 13:1000–1009.
7. Царсон, ВЕ, ЈГ Гири, МЈ Линдеманн, МЛ Линетт, М. Ахдиех, Р. Пактон, Д. Андерсон, Ј. Еисенманн, К. Грабстеин и МА Цалигиури. 1994. Интерлеукин (ИЛ) 15 је нови цитокин који активира људске природне ћелије убице преко компоненти ИЛ-2 рецептора. Ј. Екп. Мед. 180:1395–1403.
8. Царсон, ВЕ, ТА Фехнигер, С. Халдар, К. Ецкхерт, МЈ Линдеманн, ЦФ Лаи, ЦМ Цроце, Х. Бауманн и МА Цалигиури. 1997. Потенцијална улога интерлеукина-15 у регулацији преживљавања људских природних ћелија убица.Ј. Цлин. Инвест. 99:937–943.
9. Цхан, ЦЈ, МЈ Смитх и Л. Мартинет. 2014. Молекуларни механизми активације природних ћелија убица као одговор на ћелијски стрес. Целл ДеатхДиффер. 21:5–14.
10.Цхен, Кс., Ј. Хан, Ј. Цху, Л. Зханг, Ј. Зханг, Ц. Цхен, Л. Цхен, И. Ванг, Х.Ванг, Л. Ии, ет ал. 2016. Комбинована терапија ЕГФР-ЦАР НК ћелија и онколитичког херпес симплекс вируса 1 за метастазе рака дојке у мозгу. Онцотаргет. 7:27764–27777.
For more information:1950477648nn@gmail.com
