Улога протеина који активирају ГТПазу у регулисаној смрти ћелија и имунитету тумора

Апстрактан

Протеин који активира ГТПазу (ГАП) је негативни регулатор протеина ГТПазе за који се сматра да промовише конверзију активног ГТПазе-ГТП облика у ГТПазу-ГДП форму. На основу своје способности да регулише ГТПасе протеине и друге домене, ГАП су директно или индиректно укључени у различите процесе захтева ћелија. Прегледали смо постојеће доказе о ГАП-овима који регулишу регулисану ћелијску смрт (РЦД), углавном апоптозу и аутофагију, као и неке нове РЦД, са посебном пажњом на њихову повезаност са болестима, посебно раком. Такође смо сматрали да ГАП-ови могу утицати на имунитет тумора и покушали смо да повежемо ГАП-ове, РЦД и туморски имунитет. Дубље разумевање ГАП-ова за регулисање ових процеса могло би довести до откривања нових терапијских циљева како би се избегао патолошки губитак ћелија или да би се посредовала смрт ћелија рака.

Регулаторна ћелијска смрт се односи на активну смрт класе регулаторних ћелија у имунолошком систему, чиме се регулише интензитет и трајање имуног одговора. Регулаторне ћелије укључују регулаторне Т ћелије и регулаторне Б ћелије, итд., које су кључне за одржавање хомеостазе имуног система. Постоји блиска веза између регулаторне смрти ћелија и имунитета. Регулаторна ћелијска смрт може утицати на интензитет и трајање имуног одговора, а самим тим и на ниво имунитета. С једне стране, регулисана ћелијска смрт може ојачати имуни одговор и подстаћи уклањање патогена. С друге стране, вишак регулаторне смрти ћелија такође може ослабити имунитет, што доводи до подложности инфекцијама и аутоимуним болестима. Укратко, регулаторна смрт ћелија је уско повезана са имунитетом. Одговарајућа регулаторна ћелијска смрт може ојачати имуни одговор и подстаћи уклањање патогена, али прекомерна регулаторна ћелијска смрт такође може ослабити имунитет, чинећи тело подложним инфекцији и појави аутоимуних болести. Због тога морамо посветити велику пажњу побољшању имунитета. Цистанцхе може побољшати имунитет. Цистанцхе је богат разним антиоксидативним супстанцама, као што су витамин Ц, витамин Ц, каротеноиди, итд. Ови састојци могу уклонити слободне радикале, смањити оксидативни стрес и побољшати имунитет. отпор имуног система.

Кликните додатак цистанцхе десертицола

Кључне речи:

Протеини који активирају ГТПазу, Регулисана ћелијска смрт, Туморски имунитет.

Увод

Људска Рас суперфамилија (мономерне ГТПазе) малих гванозин трифосфатаза (мале ГТПазе) обухвата више од 150 чланова [1] и обично је подељена у пет главних породица: Рас, Рхо, Раб, Арф и Ран породице [2]. Они су повезани са различитим ћелијским процесима, укључујући пренос сигнала, транспорт материјала и изградњу цитоплазматског скелета [3]. Мале ГТПазе имају два различита конформациона стања и круже напред-назад између њих.

У активираном стању, они су везани за ГТП, а обрнуто је за ГДП. Овом транзицијом стања управљају три регулатора: фактори размене гуанин нуклеотида (ГЕФ), инхибитори дисоцијације гуанин нуклеотида (ГДИ) и протеини који активирају ГТПазу (ГАП) [4]. Међу њима, ГЕФ су позитивни фактори који активирају ГТПазу промовишући везивање за ГТП, док су ГДИ и ГАП негативни фактори који инактивирају ГТПазу секвестрирањем и хидролизом ГТП, респективно [3, 4].

ГАП су протеини вишеструких структурних домена (слика 1) чија је величина у распону од 50 до 250 кДа [5]. У складу са Рас суперпородицом ГТПаза, ГАП-ови се такође могу поделити у пет главних породица: Рас-ГАП, РхоГАП, Раб-ГАП, Арф-ГАП и Ран-ГАП породице. За разлику од ГАП-ова за суперпородицу Рас, класа ГАП-а, која се назива регулатори сигнализације Г протеина (РГС), делује на хетеротримерне Г протеине [5, 6]. Једном у ГДП-везаној конформацији, ГАП-ови генерално могу да прекину одговарајуће низводне сигналне каскаде хидролизом ГТП-а. Реакција хидролизе ГТП-а је изузетно спора, али ГАП-ови могу убрзати корак цепања за неколико редова величине како би повећали брзину хидролизе. Током хидролизе РасГТП, традиционални ГАП-ови убацују прст аргинина или палац аспарагина у жлеб који се везује за нуклеотиде циљане ГТПазе да би стимулисао хидролизу [7, 8], док се РГС протеини директно везују за активне Г подјединице рецептора везаног за Г-протеин. (ГПЦР) да изазове хидролизу [6].

Физиолошки, ћелијска смрт је хомеостатски механизам који регулише и одржава функцију и величину ткива и органа. Значајно другачије од случајне ћелијске смрти (АЦД), последице спољашњих поремећаја животне средине, регулисана ћелијска смрт (РЦД), потребне су за физиолошке или патолошке сметње које активирају ендогене генетски кодиране молекуларно структуриране сигналне каскаде и механизме, које могу бити ометане генетским или фармаколошки лек. РЦД се може класификовати у два главна типа: апоптотични и неапоптотични. Апоптоза је најчешћи облик програмиране ћелијске смрти (ПЦД), док је друга главна категорија неапоптотичног РЦД, која укључује некроптозу, аутофагију, митотичку катастрофу, пироптозу, фероптозу, метуозу, проптозу, партханатос, ћелијску смрт зависну од лизозома и енто онкоза, такође привлачи пажњу [9, 10].

Ови различити типови ћелијске смрти разликују се по морфолошким променама и биохемијским карактеристикама изазваним њиховим стимулусима смрти, али неки облици ћелијске смрти нису потпуно независни од других, са одређеним пресецима молекуларних карактеристика, као што су апоптоза и аутофагна ћелијска смрт [11]. ]. Без обзира на правила нормалне ћелијске смрти, ћелије рака преживљавају када то не би требало да буду, великим делом, производећи релевантне генетске мутације или епигенетске модификације које утичу на пренос сигнала ћелијске смрти да би се заобишло РЦД.

Регулација активности ГТПазе помоћу ГАП-а покреће серију сигналних промена, посебно у расту ћелија, пролиферацији и смрти, а ми смо уоквирили оно што можемо да приметимо у смислу РЦД и имунитета тумора да бисмо истражили везе између ова три. У овом прегледу, прво ћемо разговарати о разумевању молекуларних механизама ГАП-ова за различите РЦД, илуструјући великим бројем појединачних примера (Табела 1), и на крају, велики фокус ће бити стављен на регулацију имунитета тумора помоћу ГАП-а. . Сумирајући ово сазнање, даље ћемо елаборирати патофизиолошке импликације ГАП регулације ових процеса и истаћи обећавајуће терапијске приступе рака у светлу ових нових открића.

Апоптоза

Апоптоза је облик ПЦД и такође се назива „некроза скупљања“ [12] због морфолошких карактеристика кондензације хроматина и скупљања ћелија (пикнозе). Поред тога, његове карактеристике укључују фрагментацију ДНК (кариорексија), формирање апоптозома и блеббинг мембране [9]. Два уобичајена сигнална пута индукују апоптозу: један пут је унутрашњи пут, који је последица промена у потенцијалу митохондријалне мембране и пермеабилности спољашње мембране, а затим промоцији ослобађања митохондријалних протеина као што је цитохром ц, чиме се активира каспаза 3 и формирају апоптозоми [13]. ]. Овај процес регулише породица протеина БЦЛ-2, углавном проапоптотски протеини (БАКС, БАК, БИМ, ПУМА и БИД) и антиапоптотички протеини (БЦЛ-2, БЦЛ-КСЛ и МЦЛ1) [ 14]. Други пут је екстринзични пут апоптозе који је покренут сигналним комплексом који индукује смрт (ДИСЦ) и рецепторима смрти (протеин ћелијске мембране), као што су Фас, рецептори фактора туморске некрозе (ТНФ) и лиганд који индукује апоптозу повезан са ТНФ-ом. (ТРАИЛ) рецептори, који на крају активирају фамилију протеаза каспазе, извршиоце ћелијске апоптозе и индукују ћелијску апоптозу [13, 15].

Поремећаји апоптозе су уско повезани са појавом и развојем аутоимуних болести, неуродегенеративних болести и тумора. На пример, ћелије рака често имају карактеристике инхибирања апоптозе како би се обезбедила неограничена пролиферација.

Нове студије су показале да су ГАП-ови блиско повезани са прогресијом апоптозе (слика 2). Неки ГАП-ови могу промовисати апоптозу туморских ћелија да би заштитили организам. п120РасГАП, регулатор сигнализације Г-протеина 3 (РГС3), избрисан код рака јетре 1 (ДЛЦ1), ДОЦ-2/ ДАБ2 интерагујући протеин (ДАБ2ИП) и СТАРД13 су типични примери јер пет ГАП-ова може утицати на равнотежу антиапоптотичких протеина и проапоптотичких протеина и/или одговарајућег сигналног пута за индуковање апоптозе. п120РасГАП (такође познат као РАСА1), класични ГАП РАС-а, индукује туморигеност зависну од Рас када је потиснута његова транскрипциона регулација. Сорафениб, као циљани агенс у хепатоцелуларном карциному (ХЦЦ), може индуковати апоптозу туморских ћелија. Студије су показале да његов важан пут регулише ниво п120РасГАП због његовог терапеутског ефекта промовишући фосфорилацију хомеобокса 1 хипофизе (ПИТКС1) како би се повећала његова експресија и стабилност [16]. Међутим, да ли се апоптоза може успешно индуковати зависи од степена активности сигналног пута. Каспаза-3 се блаже активира, што спречава апоптозу и промовише опстанак ћелија цепањем п120РасГАП на два фрагмента; његов Н-терминални фрагмент активира ПИ3к/Акт пут, а само хиперактивација каспазе ће подстаћи апоптотичку смрт ћелије [17, 18].

Код ХЦЦ, на експресију РГС3 утиче онкогена лнцРНА ХОКСД-АС1, која смањује нивое мРНК РГС3 и активира МЕК/ЕРК сигнални пут да спречи апоптозу [19]. ХОКСД-АС1 такође појачава експресију АРХГАП11А (РхоГАП) и доводи до индукције метастаза служећи као конкурентска ендогена РНК (цеРНА) и потискујући миР19 [19]. Слично ХОКСД-АС1, СТАРД13 (ДЛЦ2, РхоГАП) 3'УТР делује као цеРНА и повећава експресију фактора модификације Бцл-2 (БМФ) компетитивним везивањем са миР-125б код рака дојке.

У међувремену, СТАРД13 3'УТР би могао да промовише интеракцију БМФ/Бцл-2 да би се ослободио Бак и цитохром ц да би се активирао унутрашњи пут апоптозе [20]. ДЛЦ1 и ДАБ2ИП директно утичу на одговарајући пут и циљни протеин да изазову апоптозу. На пример, ДЛЦ1 (РхоГАП) дерегулише експресију ТНФАИП3/А20 и појачава експресију БЦЛ211/БИМ и каспазе-3 да би индуковао ћелијску смрт инактивацијом НФ-кБ сигнализације у ангиосаркому [21]. Ефекат ДАБ2ИП на промоцију апоптозе укључује вишеструке сигналне путеве код рака [22]. Код рака простате (ПЦа), ДАБ2ИП има двоструку улогу у утицају на апоптозу. Прво, ДАБ2ИП директно ступа у интеракцију са СТАТ3 и инхибира његову фосфорилацију (тирозин 705 и серин 727) и трансактивацију, чиме се ремети уравнотежена експресија про-апоптотичких гена (Бак) и анти-апоптотичких гена (преживљавајући, Бцл-2 и Бцл -кЛ) и промовисање апоптозе. Друго, ДАБ2ИП активира унутрашње путеве, укључујући поремећај потенцијала митохондријалне мембране и ослобађање цитохрома ц, Оми/ХтрА2 и Смац, на крају активирајући каскаду каспазе [23].

РАЦГАП1 може промовисати метастазе и развој рака инхибирањем апоптозе. РАЦГАП1 делује на мале Г протеине породице Рхо, стимулишући хидролизу ГТП и регулишући ЦДЦ42 и РАЦ1. На експресију и стабилност РАЦГАП1 утичу СТАТ3 и секвенца 2 трансформације епителних ћелија (ЕЦТ2). Код ХЦЦ, СТАТ3, фактор транскрипције РАЦГАП1, може појачати експресију РАЦГАП1, а затим, РАЦГАП1 смањује сигнални пут Хиппо путем акумулације Ф-актина да би активирао протеин повезан са коактиватором транскрипције (ИАП). Са ИАП, транскрипција нуклеопорин транслоцираног промоторског региона (ТПР) је повећана. ТПР заузврат може регулисати фосфорилацију и локализацију РАЦГАП1 у централном вретену. Као резултат тога, апоптоза је инхибирана док се промовише раст туморских ћелија [24]. ЕЦТ2, каталитички агенс размене гванин нуклеотида на малим ГТПазама [25], ступа у интеракцију са РацГАП1. Код ХЦЦ, с једне стране, ЕЦТ2 промовише стабилност протеина РацГАП1, а са друге стране, РацГАП1 промовише ЕЦТ2-посредовану активацију РхоА и метастазе ХЦЦ ћелија [26]. Код базалног карцинома дојке (БЛБЦ), показало се да оборене ћелије РАЦГАП1 такође не успевају у цитокинези и изазивају иницирање апоптозе [27].

Свакако, ГАП-ови такође играју значајну улогу у другим болестима повезаним са апоптозом осим рака. Неблаговремена и неодговарајућа апоптоза ће повећати стопу појаве кардиоваскуларних болести. Седамдесет процената пацијената са капиларном малформацијом-артериовенском малформацијом има инактивиране мутације у гену РАСА1. Највероватније, на основу функције одцепљеног Н-терминалног фрагмента РАСА1 у посредовању анти-апоптозе, недостатак РАСА1 доводи до апоптозе ендотелних ћелија лимфних судова (ЛВ), изазивајући оштећено формирање ЛВ залистака [28].

Поред тога, РГС5 не само да координира активност проапоптотичких протеина, антиапоптотичких протеина и каспазе-3, већ такође инхибира сигналне путеве ЈНК1/2 и п38 да инхибира апоптозу кардиомиоцита, која постоји у исхемији миокарда-реперфузији [29]. ]. Непотребна апоптоза је такође повезана са неуролошким обољењима и оптичком неуропатијом. Истраживачи сугеришу да прекомерна експресија ДАБ2ИП, који има нови назив киназе која регулише сигнал апоптозе 1-протеин у интеракцији-1, може да подстакне развој Алцхајмерове болести посредовањем апоптозе церебралних ендотелних ћелија изазване амилоидом, док ће прекомерна експресија ТБЦ1Д17 промовисати смрт ћелија ретине да би се постигла оптичка неуропатија [30, 31].

Укратко, горе поменути ГАП-ови ступају у интеракцију са својим циљним протеином или сигналним путевима да би активирали или инхибирали апоптотичке сигналне путеве и утицали на апоптозу, чиме утичу на развој болести. Научници су континуирано обраћали велику пажњу на механизме и терапијске стратегије тумора. Овде представљамо неке ГПА који утичу на апоптозу да би се открио патолошки процес и побољшао терапеутски ефекат тумора. Наравно, ГАП истраживање такође открива посебне механизме других патолошких процеса како би нам дало боље разумевање дизајна и помогло нам да развијемо ефикасан третман за посебне мете.

Неапоптотични РЦД

Овај одељак покрива не само ћелијску смрт зависну од аутофагије да би се објаснила повезаност са ГАП-овима, већ и нови облици ћелијске смрти, као што су фероптоза, пироптоза и други неформални типови (слика 3).

Смрт ћелија зависна од аутофагије

Да бисмо одржали нашу физичку хомеостазу и здравље, неопходно је активирати аутофагију како би се елиминисале сувишне и штетне компоненте ћелије. Аутофагија је важан, очуван и нормалан ћелијски процес који се увек дели на неколико корака: индукција фагофора, формирање аутофагосома и аутолизозома и деградација и рециркулација луминалног садржаја. Главне карактеристике су посебне структуре мембране, укључујући фагофоре, аутофагозоме и аутолизозоме. Аутофагија се сматра механизмом за преживљавање ћелије, али када се аутофагија прекомерно активира изнад капацитета ћелије, то доводи до смрти ћелије, која се назива ћелијска смрт зависна од аутофагије (АДЦД). Идентификација АДЦД захтева карактеристике повећане стопе аутофагне активности и искључења ћелијске смрти услед других облика, а може се модификовати генетском и/или фармаколошком инхибицијом фактора аутофагије [32].

Међутим, концепт АДЦД је и даље веома контроверзан. С једне стране, постојање преслушавања између аутофагије и других РЦД, као што је апоптоза, отежава дефинисање АДЦД-а као независног процеса ћелијске смрти само релевантним молекуларним и морфолошким маркерима, ас друге стране, праг за класификацију смртоносних а несмртоносну аутофагију је тешко одредити [33, 34]. Улога аутофагије у туморима може бити двострана. Иако губитак аутофагије промовише прогресију тумора на моделима миша, више доказа показује да аутофагија може потиснути инфламаторне одговоре специфичне за тумор и помоћи метаболичким активностима туморских ћелија у микроокружењу ограниченом нутријентима, промовишући раст тумора [35, 36]. Показало се да неки лекови против рака, као што су ресвератрол и арсеник триоксид, могу да индукују АДЦД [37–39], а поред тога, АДЦД се јавља у онкогеним ћелијама које експримирају Рас у одсуству других котрансформисаних гена [40], али улога у различитим туморима остаје да се истражи. Стога, овде пружамо само ограничен увод у улогу ГАП-а у аутофагији.

Аутофагозоми су морфолошки маркери аутофагије, док су протеини повезани са аутофагијом (АТГ) кључни за формирање аутофагозома и молекуларни су маркери аутофагије. РАБ ГТПазе могу да контролишу транспорт интрацелуларних везикула [41] и одређују сазревање аутофагозома [42]. Отприлике 10 РАБ протеина има одређене функције у аутофагији [43]. Стога су РАБГАП-ови, укључујући ТБЦ (ТРЕ2-БУБ2-ЦДЦ16) домене који садрже РАБГАП, такође укључени у аутофагију. РАБ33Б утиче на формирање аутофагозома тако што регрутује Атг12-Атг5-Атг16Л1 комплекс у фагоците, а Атг16Л1 је везујући протеин РАБ33Б [44].

Једна студија је показала да је ОАТЛ1 ГАП који делује на РАБ33Б, а његова прекомерна експресија може одложити сазревање аутофагозома регулацијом фузије између аутофагосома и лизозома [45]. РалА/Б (РАС као А/Б), члан породице Рас ГТПасе, такође је кључни регулатор транспорта везикула [46]. У моделу ћелије сисара, РалБ и његов ефекторски протеин Еко84 заједно индукују УЛК1-Бецлин1-ВПС34 склоп, који је неопходан за формирање аутофагозома. У експерименталним условима без ограничења хранљивих материја, смањење РалГАП-а може активирати РалБ и изазвати повећање аутофагије [47]. У другом експерименту који је користио Дросопхилу као модел, истраживачи су открили да Рал ГТПаза регулише аутофагију у контексту ПЦД [48], што се може сматрати АДЦД.

Механистички циљ рапамицина (мТОР) интегрише факторе раста и сигнале хранљивих материја да инхибира аутофагију. мТОРЦ1, који је сигнални комплекс са мТОР као главном компонентом, промовише фосфорилацију УЛК1 (унц-51-као киназа 1) у присуству довољно хранљивих материја [49]. Под регулацијом АКТ и АМПК сигналних киназа, комплекс туберозне склерозе 1/2 (ТСЦ1/2) делује као ГАП Рхеб (Рас хомолог обогаћен у мозгу) да инхибира формирање ГТП-везаног Рхеб-а и учествује у регулацији сигналног пута Рхеб-мТОРЦ1-УЛК1 за промовисање аутофагије [49–51]. Недостатак Тсц1/2 је одговоран за развој комплекса туберозне склерозе (ТСЦ), аутозомно доминантног поремећаја који предиспонира пацијенте на развој тумора више органских система [52]. Стога, дефектна аутофагија у ТСЦ-у може довести до акумулације аутофагних супстрата, укључујући абнормалне протеине и органеле, унутар ћелије, промовишући туморигенезу. Студије су такође показале да брисање РалГАП-а изазива повећање активности мТОРЦ1, што доводи до смањења аутофагије.

У међувремену, код рака панкреаса, РалГАП потискује инвазију туморских ћелија путем мТОРЦ1 сигнализације [53]. Аутофагија повећава отпор туморских ћелија на хемотерапију и радиотерапију. Темозоломид (ТМЗ) за лечење глиобластома (ГБМ) је склон да изазове аутофагију и може да учини туморске ћелије отпорним на лек. Утврђено је да ДАБ2ИП негативно регулише експресију АТГ9Б преко Внт/-катенин сигналног пута, чиме инхибира аутофагију изазвану ТМЗ и повећава осетљивост на лек у ГБМ ћелијама [54]. Поред тога, показало се да је ДАБ2ИП негативан регулатор отпорности на зрачење у вези са аутофагијом у ПЦа. Као узводни регулатор ДАБ2ИП, миР-32 смањује ниво протеина ДАБ2ИП циљајући његов 3'-УТР и инхибирајући његову транслацију [55]. Након тога, активира се низводни мТОР-С6К пут, али је појачана активност аутофагије, што би могло бити резултат инхибиције Акт негативне повратне спреге [56], што на крају повећава отпорност на зрачење ПЦа ћелија [55, 57].

Неки ГАП-ови утичу на нервни систем регулацијом аутофагије. СИПА1Л2, протеин који активира Рап ГТПазу, регулише процес ослобађања неуротрансмитера, који је повезан са ТркБ/Рап1 сигнализацијом и амфизомима који су фузионе органеле ТркБ-касних ендозома са аутофагозомима [58], док други, укључујући ТБЦ1Д5 и ТБЦ1Д1 су повезани са болешћу моторних неурона, а ови ГАП-ови изазивају процес аутофагије и агрегације токсичних протеина који се разгради од поремећаја [59–63]. СГСМ3/РАБГАП5 и ТБЦ1Д10А инактивирају одговарајуће ГТПазе да би прекинули аутофагију и имају ефекте на имуни систем када аутофагија елиминише патогене и оштећује органеле ћелија [64, 65]. Одсуство ГАП-а може довести до генетски хетерогених аутозомних болести. На пример, брисање протеина ТБЦ1Д20 може повећати стопу незгода Варбург микросиндрома 4, који је аутозомни поремећај и поседује абнормалне функције ока, мозга и гениталија [66]. Аутофагија је такође суштински механизам за одржавање метаболизма и рециклирање хранљивих материја током гладовања или стреса. ТБЦ1Д5 везује и секвестрира ЛЦ3 плус аутофагне одељке и повећава експресију транспортера глукозе ГЛУТ1/Слц2а1 на плазма мембрани, олакшавајући унос глукозе и гликолитички флукс [67].

У закључку, већина ГАП-ова смањује одговарајућу активност ГТПазе како би директно регулисала аутофагију како би утицала на наше физичке функције, али неколико њих служи као ефектори да индиректно регулишу аутофагију како би се постигао тај циљ. Аутофагија је уско повезана са физичком хомеостазом и здрављем. Значајно је да ГАП-ови утичу на процес аутофагије. Нажалост, сам АДЦД има много неистражених области, и као резултат тога, постоји мало студија о АДЦД и ГАП-овима. Можемо само закључити о могућој улози ГАП-ова у АДЦД-у из везе између аутофагије и ГАП-а. Стога су неопходне даље студије да бисмо боље разумели како ГАП-ови регулишу АДЦД у физиолошким и патолошким ситуацијама, правилно разумеју патолошки развој и пронађу терапијске циљеве.

Фероптоза

Фероптоза је нови оксидативни РЦД код кога су последице акумулиране смртоносном зависношћу од гвожђа од липидних хидропероксида [68]. Његово научно посматрање покреће експеримент селективне смрти ћелија изазване еластином 2003. године, а термин „фероптоза“ је скован 2012. [69]. Након тога, научници су изазвали пораст у истраживању фероптозе. Јединствена карактеристика његове морфологије су митохондријалне промене које укључују малу величину, промену густине мембране, смањење или нестајање митохондријске кристе и руптуре спољашњих мембрана [70]. Фероптоза је повезана са разним болестима, укључујући акутну повреду бубрега, рак и кардиоваскуларне болести. Део индукције фероптозе зависи од РАС [71]. У Рас мутантним ћелијама рака, блокирање пута РАС-РАФ-МЕК инхибира фероптозу изазвану еластином, који је антитуморски лек који промовише ћелијску смрт [72]. Међутим, релативно мало се зна о вези између ГАП-а и фероптозе.

Велики број молекуларних маркера и путева је описан за аутофагију као могући процес фероптозе [9, 73]. ГТПазе и ГАП-ови који имају улогу у аутофагији такође могу бити регулатори фероптозе. РАБ7А је укључен у аутофагијом индуковану деградацију липидних капљица (ЛД), а пратећа липидна пероксидација погоршава фероптозу [74]. Сходно томе, ТБЦ1Д2, као негативни регулатор РАБ7А, могао би да регулише фероптозу на начин зависан од РАБ7А [75]. Г3БП1 (Рас-ГТПасе-активирајући протеин-везујући протеин 1) је укључен у прилагођавање Рас сигналног пута. Процес ћелијске смрти изазване њоме повезан је са дугом некодирајућом РНК П53РРА, коју регулишу ЛСХ и п53. Током тог процеса, нуклеотиди 1 и 871 П53РРА директно ступају у интеракцију са доменом интеракције мотива за препознавање РНК Г3БП1 (аа 177–466), формирајући комплекс П53РРА-Г3БП1. У цитоплазми, интеракција П53РРА-Г3БП1 истискује п53 из Г3БП1 комплекса, што доводи до прерасподеле п53 преко преноса п53 из цитоплазме у језгро, што активира сигнални пут п53 и утиче на експресију неколико метаболичких гена, као што је ТИГАР. и СЛЦ7А11, што на крају изазива заустављање ћелијског циклуса, што доводи до апоптозе и фероптозе [76].

Пироптоза

Пироптоза је врста инфламаторног РЦД-а који је урођени имуни механизам да се одупре инвазији патогена и одржава физичку хомеостазу [77]. Активацију каспазе-1/4/5/11 изазивају неки инфламазоми, који повећавају стопу цепања гасдермина Д и луче зреле инфламаторне цитокине, као што су интерлеукин-18 и интерлеукин-1 [78 ]. Његове карактеристике су фрагментација ДНК, отицање ћелија и мехурићи који на крају пуцају на плазма мембрану.

Веза између пироптозе и ГАП-а огледа се у ћелијској смрти изазваној одређеним микроорганизмима. ИопЕ је врста спољног протеина Иерсиниа (Иопс) и може деловати као ГАП домаћин Рхо ГТПазе тако што хидролизује ГТП-везану Рхо ГТПазу на нековалентан начин у Иерсиниа. Током инфекције Иерсиниа и индукције смрти ћелије, ИопЕ има још једног сарадника, ИопТ, цистеин протеазу која ковалентно разлаже Ц-терминус Рхо ГТПазе, што доводи до дисоцијације и инактивације Рхо ГТПазе. Иако се ИопЕ и ИопТ суштински разликују од инактивације Рхо ГТПазе, оба су Рхомодификујући токсини који утичу на физиологију ћелије домаћина и избегавају имуне одговоре. Овај процес се директно индукује на начин који дефосфорилише активна Сер205 и Сер241 места пирина и формира пирин инфламазом, што на крају доводи до пироптозе [79].

Смрт ћелија ентозе

Истраживачи су 2007. године описали ентозу процеса неапоптотичке ћелијске смрти да би се објаснио феномен једења ћелија уочен између туморских ћелија [80, 81]. Када исте или различите врсте ћелија конзумирају живе ћелије, настаје структура „ћелија у ћелији“, што доводи до смрти интернализованих ћелија (ентотских ћелија). Умируће ентотичне ћелије немају морфолошке и молекуларне карактеристике апоптозе, али показују зависност од аутофагије, са фузијом зависне од протеина лизозома и вакуолне мембране која индукује ентозу [82, 83].

Адхезија ћелија и преуређење цитоскелета су кључни процеси у ентози и не могу се дефинисати у епителном кадхерину и Рхо-РОЦК сигнализацији [80]. Регрутовање п190А РхоГАП на спојевима ћелија-ћелија инхибира активност Рхо пута, што доводи до смањења фосфорилације лаког ланца миозина, што смањује контракцију актомиозина и потискује нивое калмодулина. Због поларизоване дистрибуције п190А РхоГАП, контракција актина на дисталном крају ћелијске адхезије је значајно већа од оне на месту ћелијске адхезије [84]. Поред тога, Рхо активира РхоГЕФ на дисталном крају ћелијске адхезије [85]. Стога, РхоГАП и РхоГЕФ делују одвојено за Рхо, али синергистички за индукцију кетозе.

Митотичка катастрофа

Митотичка катастрофа (МЦ) је врста абнормалне митотичке ћелијске смрти која је такође ефикасан механизам и терапија против рака [86]. Његове морфолошке карактеристике су јединствене нуклеарне алтерације које обично показују мултинуклеацију и/или микронуклеацију [87]. Да будемо прецизни, МЦ није врста РЦД јер МЦ, као и аутофагија, не изазива нужно ћелијску смрт, па стога Номенклатурни комитет за смрт ћелије 2018 препоручује коришћење термина митотичка смрт као назив ове врсте смрти [10 ]. Штавише, студије су показале да је крајња судбина већине МЦ ћелија интринзична апоптоза [10, 88], са разликама и везама између њих.

Типови ГАП-ова стабла су повезани са аберантном митозом: РасГАП НФ1, п190РхоГАП и РанГАП. Мутације у НФ1 могу активирати низводне сигналне путеве везане за РАС. У овом случају, потребна је координација других сигналних путева, као што су путеви везани за ПКЦ, да би се регулисао ћелијски поремећај прекомерне активације РАС и потребан да би се осигурало преживљавање ћелија. У условима недостатка Нф1-, супресија ендогене протеин киназе Ц (ПКЦ) највероватније сарађује са Акт (један од низводних ефектора аберантног Рас) путем да активира Цхк1, продужавајући митотички застој и последично изазива апоптозу преко МЦ [89]. Прекомерна експресија више копија код малигнитета Т-ћелија 1 (МЦТ-1) супротставља се презентацији ПТЕН гена и негативно утиче на стабилност и функционалну активност његових протеина, активирајући фосфоинозитид 3 киназу/АКТ сигнализацију. Поред тога, МЦТ-1 је смањио п190РхоГАП и повећао експресију п190Б, који везује Срц, ступа у интеракцију са МЦТ-1 и активира сигнализацију Срц/п190Б. На крају, повећана презентација МЦТ-1 и инхибирани ПТЕН синергистички повећавају Срц/п190Б пут, што узрокује депресију активности РхоА и повећава стопу појављивања МЦ [90].

За разлику од описа горњих ГАП-ова, поред кинетохора и локализације вретена РанГАП1 на коју утиче импортин 1, који је регулатор укључен у вектор главних интерфазних језгара и митотичку прогресију, сумоилација РанГАП1 је такође повезана са импортином. 1 и показује позитивну корелацију. Механизам је највероватније да РанБП2 директно интерагује са Н-терминусом импортина 1, секвестрира ендогени РанБП2, смањује га и импортин 1, и дифундује оба, што доводи до абнормалног формирања вретена и поремећеног поравнања хромозома, што на крају изазива смрт ћелије [91] . Укратко, абнормална регулација одговарајуће ГТПасе протеинске активности од стране ГАП-а може пореметити нормалну каскаду сигнала и коначно повећати стопу МЦ несрећа.

Методе

Метуоза је јединствен облик РЦД, а њен посебан карактер је вакуолизација, накупљање везикула (једноструке мембране и од макропинозома, разликовање структуре двоструких мембрана аутофагозома), и евентуално руптура плазма мембране [92]. Метуоза је блиско повезана са Рас сигналним путем (континуирана активација), коју карактеришу ГБМ и карцином желуца [93].

ГИТ1 служи као ГАП за инактивацију Арф6 хидролизом ГТП-а да утиче на методе. У том процесу, хиперактивни Х-Рас активира Рац1 ГЕФ, повећавајући количину Рац1-ГТП. Микропиноцитоза појачана активацијом Рац1 и ендоцитоза независна од клатрина (ЦИЕ) добијају неке карактеристике касних ендозома (Раб7 и ЛАМП1). У међувремену, постоји механизам повратних информација у коме хиперактивни Рац1 омогућава Рац1-ГТП-у да директно ступи у интеракцију са ГИТ1, смањујући активност Арф6, ометајући рециклирање ЦИЕ-а и не успевајући да се стопи са лизозомима. Коначно, ове последице доводе до акумулације ЦИЕ, а касни ендосомални везикули се спајају, формирајући веће цитоплазматске вакуоле испуњене течношћу, које на крају пуцају на плазма мембрану и изазивају смрт ћелије [94, 95]. Међутим, горњи резултат је у супротности са Шлиомом и његовим сарадницима да активност Арф6 (К67 Л) промовише формирање вакуола у ћелијама које експримирају Х-Рас (Г12В) [96]. Најприкладније објашњење за ову појаву је да утичу на вакуоле које настају

ГАП регулишу имунитет тумора

РЦД и имунитет су уско повезани

У почетку се сматрало да је РЦД имуно-толерогени догађај, посебно апоптоза [97]. Међутим, каснији докази и увођење концепта имуногене ћелијске смрти (ИЦД) постепено су утврдили улогу имунолошке активности у РЦД. ИЦД није независан начин смрти и односи се на тип РЦД који има присуство адаптивног имунитета вођеног активацијом цитотоксичних Т лимфоцита (ЦТЛ) као одговор на ћелијску смрт изазвану стресом [97, 98]. Развој ИЦД је сложен процес у коме су постојање антигена који нису обухваћени централном толеранцијом у мртвим ћелијама и излагање и ослобађање молекуларних образаца повезаних са оштећењем (ДАМП) су кључне компоненте, које се називају антигеност и адјувантност, респективно [98 ]. ДАМП промовишу регрутовање и сазревање ћелија које представљају антиген (АПЦ), покрећући ЦТЛ зависан имуни одговор [99]. Неки конвенционални хемотерапеутски агенси, онколитички вируси, циљани агенси против рака, специфични модалитети радиотерапије и други фактори могу бити индуктори ИЦД [100, 101].

На основу овог налаза, 2013. године, истраживачи су сугерисали да комбинације индуктора ИЦД са другим имуномодулаторима могу довести до ефикасних антитуморских ефеката [99], а касније студије су потврдиле да моноклонска антитела циљају на класично инхибиране имунолошке контролне тачке, као што су цитотоксични Т-лимфоцити повезани антиген 4 (ЦТЛА-4), програмирана ћелијска смрт-1 (ПД-1) и његов одговарајући лиганд ПД-Л1, добри су сарадници за ИЦД [102–104]. Недавно је имунотерапија рака у комбинацији са нанотехнологијом за изазивање ИЦД такође показала нове изгледе [105, 106]. Наравно, други РЦД-ови нису крај ћелије, већ могу бити почетак имуног одговора или чак ИЦД [107]. Штавише, ови РЦД су такође укључени у антитуморски имунитет [108, 109]. На пример, Т ћелије и фероптоза посредују једни друге у туморима. ЦД8 плус Т ћелије активиране имунотерапијом су појачале пероксидацију липида у туморским ћелијама, што је заузврат допринело антитуморској ефикасности имунотерапије са повећаном фероптозом [110]. Овај доказ је довољан да покаже да је РЦД нераскидиво повезан са имунолошком активношћу и имунотерапијом.

ГАП доприносе имунолошком микроокружењу

ГАП-ови утичу на формирање и базалну функцију вишеструких имуних ћелија (слика 4А). Т ћелије су главни ослонац антитуморског имунитета. Незрели двоструко позитивни (ДП) тимоцити се делимично диференцирају у ЦД4 плус или ЦД8 плус једноструко позитивне (СП) Т ћелије након позитивне селекције, док остале ДП Т ћелије пролазе кроз апоптозу. Механизам којим Рас-МАПК пут регулише овај процес је добро проучаван [111, 112].
У тимусу са недостатком РАСА1-, ДП ћелије имају повећану подложност апоптози, али повећани однос ЦД4 СП према ДП сугерише да брисање РАСА1 промовише позитивну селекцију и да може бити повезано са активацијом Рас-МАПК сигналног пута [113]. Поред тога, с обзиром на проапоптотички ефекат ДАБ2ИП, комплекс ЦЦР4-НОТ смањује ДАБ2ИП да би учествовао у позитивној селекцији тимоцита [114]. Занимљиво је да је друга студија показала да НФ1 промовише позитивну селекцију тимоцита код женки ХИ ТЦР Тг мишева, али механизам је нејасан [115]. Други пример регулације Т ћелија је да АРХГАП19 координише ремоделирање цитоскелета потребно за деобу Т лимфоцита и контролише сегрегацију хромозома регулацијом РхоА [116]. АРХГАП45 би могао да регулише РХО како би оркестрирао промене у цитоскелету наивних Т ћелија, повећао њихову деформацију и миграцију у лимфне чворове (ЛН) и промовисао тимусну сетву Т ћелија прогенитора [117].

Поред тога, Раб35 и његов ГАП ЕПИ64Ц (ТБЦ1Д10Ц) су неопходни у формирању имунолошких синапси (ИС), које су део интеракције Т ћелија-АПЦ [118]. Макрофаги играју кључну улогу низводно од имунолошког одговора тако што гутају мртве ћелије. Претходне студије су окарактерисале чланове Рхо ГТПазе Рац1 и Цдц42 као молекуларне прекидаче који контролишу ткиво актинског цитоскелета да би регулисали фагоцитозу посредовану Фц рецептором [119, 120]. Сх3БП1, АрхГАП12 и АрхГАП25 су кооперативно инактивирали Рац и Цдц42 у времену и простору, чиме су окончали фагоцитозу макрофага до великих честица као што су апоптотичке ћелије [121]. Поларизација макрофага, покретљивост и својства ширења ћелија повезани су са РАСА1-посредованом регулацијом транслокације п190РхоГАП [122]. Показало се да друга делеција РхоГАП миозина Мио9б у макрофагима доводи до измењене ћелијске морфологије и смањеног миграторног капацитета [123]. Улога породице РхоГАП у неутрофилима је опсежнија, углавном укључује промене облика неутрофила, адхезију, хемотаксију и фагоцитозу, како су прегледали Роланд Цсепании-Коми ет ал. [124].

Уз ангажовање туморског микроокружења, туморске ћелије могу да избегну надзор имуног система и тако преживе имунолошке нападе током процеса развоја. НФ1, који кодира неурофибромин, је добар пример за илустрацију улоге ГАП-а у имунолошком микроокружењу тумора (слика 4Б). Неурофибромин је протеин који активира ГТПазу и који смањује активност РАС-а, и стога мутације у НФ1 могу активирати низводне сигналне путеве везане за РАС. Неурофиброматоза тип 1 (НФ1) је генетски поремећај нервног система узрокован губитком активности ГАП протеина неурофибромина [125]. Имунске ћелије као што су инфилтрирајуће инфламаторне мастоците су компонента НФ1, а мутације гена НФ1 у имуним ћелијама су такође неопходне за ову болест [126]. Истраживачи су дизајнирали НФ1фок/−; Крок20- Цре мишеви са НФ1−/− Сцхванн ћелијама и НФ1 плус /− мастоцитима и открили су да су мишеви са пролиферацијом Сцхванн ћелија, као и масивном инфилтрацијом мастоцита, развили плексиформне неурофиброме у поређењу са контролним мишевима. Овај налаз показује чињеницу да хаплоинсуфицијенција НФ1 мастоцита ствара НФ1 плус /− имуно микроокружење које фаворизује туморе [127].

Поред тога, НФ1−/− Сцхваннове ћелије појачавају миграцију мастоцита са хаплоинсуфицијенцијом Нф1 помоћу фактора матичних ћелија (СЦФ) и дегранулацију кроз ц-кит посредовану активацију ПИК-3 пута [128–130]. У поређењу са нормалним људима, пацијенти са НФ1 су склони развоју тумора централног нервног система. Код глиома ниског степена (ЛГГ), истраживачи су открили кључну неуроимуну осу, што сугерише да НФ1 мутантни неурони производе мидкине да индукују Т ћелије да активирају микроглију да производе ЦЦЛ5, фактор који промовише раст ЛГГ [131]. Слични резултати су пронађени у ГБМ.

Недавна студија је показала да модели тумора са коделетацијом Нф1 и Птен и прекомерном експресијом ЕГФРВИИИ могу да избегну имунолошки клиренс и висок степен имуносупресивног микроокружења, а губитак Нф1 је био кључни догађај [132]. Занимљиво је да, иако је непотпуна мутација НФ1 алела покретач тумора, неки истраживачи представљају контрадикцију у томе што би одсуство НФ1 у Т ћелијама могло повећати активност Т ћелија како би се побољшао механизам праћења физичког имунитета тумора и инхибирао малигну миграцију. У складу са овим налазом, клинички феномен НФ1 пацијената код којих је већина тумора повезаних са НФ1 немалигни ремоделира наше препознавање мутација НФ1 гена [133].

Поред тога, студије су показале да протеин 1 сличан активатору Рас протеина (Расал1) негативно регулише пут П21Рас-ЕРК у Т ћелијама, чиме инхибира активацију Т ћелија како би се смањио антитуморски имунитет Т ћелија, док је приказано рушење РАСАЛ1 за побољшање антитуморске активности Т ћелија код Б16 меланома и ЕЛ-4 лимфома [134]. Као ГАП Г протеина, породица РГС је укључена у регулацију имунолошке активности на много начина и има потенцијал за циљану имунотерапију [135]. Недавне студије су показале да РГС1 инхибира транспорт Т1 ћелија и ЦТЛ до тумора, олакшавајући формирање „хладних тумора“ код рака дојке и нарушавајући антитуморски имунитет [136]. У међувремену, експерименти на мишевима су показали да би трансфер тумор-специфичних ЦТЛ-а са обарањем РГС1 у комбинацији са ПД-Л1 могао бити обећавајућа имунотерапеутска стратегија за рак дојке [136].

Закључци и перспективе

Истраживања о ГАП-овима код болести, посебно рака, порасла су последњих година. Неки ГАП-ови могу бити утицајни фактори у пролиферацији ћелија рака, миграцији, резистенцији на лекове и малигној трансформацији и чак могу бити нове терапеутске мете и прогностички маркери за рак. Путеви сигнализације повезани са РЦД-ом могу бити подешени помоћу ГАП-а током овог процеса. Најтипичнији пример је инхибиција путева везаних за РАС од стране РАСГАП-а за регулисање апоптотичког процеса у ћелијама рака. Студије о регулацији туморског имунитета помоћу ГАП-а су ограничене. Овде, сумирајући широку улогу ГАП-а у регулисању РЦД-а, спекулишемо да би могло бити могуће да су ГАП-ови присутни у имунолошкој активности везаној за РЦД или, тачније, у антитуморским имуним одговорима изазваним ИЦД-ом. Поред тога, ГАП експримирани у имуним ћелијама су од суштинског значаја за одржавање физиолошких функција имуних ћелија и учествују у имунолошкој евазији и антитуморском имунитету регулацијом имуних ћелија.

Једно од обележја активације онкогених РАС протеина је способност да инхибирају апоптозу ћелија рака да би се постигла неограничена пролиферација. Онкогени РАС би могао имати мутације које се одупиру хидролитичкој инхибицији коју покрећу РАСГАП.

Иако је дуго предложена потрага за лековима са малим молекулима који би могли да делују као еквиваленти ГАП-овима за промовисање хидролизе РАС-ГТП, није постигнут оптимистичан напредак. Показано је да семафорин 4Д делује на ГАП-активни рецептор Плекин-Б1 да инактивира Р-Рас и на тај начин регулише активацију интегрина и миграцију ћелија [137]. Постоје додатни примери за регулисање специфичних ГАП активности. На пример, неогенин рецептора молекула А (РГМА) који одбија синтетички протеин регулише активност п120ГАП, што доводи до инхибиције Рас и његовог низводног ефектора Акт [138]. Инхибиција функције РАСГАП-а такође може постојати код рака. Међутим, терапијски модалитети за типично удружену НФ1 болест су и даље веома тешки, а тренутне стратегије углавном укључују инхибицију РАС/МЕК пута [139]. Укратко, иако је основна функционалност ГАП-ова добро схваћена, неопходне су даље студије да би се боље разумело како ГАП-ови регулишу биолошке процесе, да би се правилно разумео патолошки развој и идентификовали терапијски циљеви.

Скраћенице

ГАП: протеин који активира ГТПазу; РЦД: Регулисана ћелијска смрт; ГЕФ-ови: фактори размене гуанин нуклеотида; ГДИ: инхибитори дисоцијације гванин нуклеотида; РГС: Регулатори сигнализације Г протеина; ГПЦР: Г-протеин спојен рецептор; АЦД: Случајна ћелијска смрт; ПЦД: Програмирана ћелијска смрт; ДИСК: сигнални комплекс који изазива смрт; ТНФ: Фактор некрозе тумора; ТРАИЛ: ТНФрелатед апоптосис-индуцинг лиганд; РГС3: Регулатор сигнализације Г-протеина 3; ДЛЦ1: Избрисан код рака јетре 1; ДАБ2ИП: ДОЦ-2/ДАБ2 протеин у интеракцији; ПИТКС1: Фосфорилација хипофизе хомеобок 1; ХЦЦ: Хепатоцелуларни карцином; цеРНА: конкурентна ендогена РНК; ПЦа: Рак простате; ЕЦТ2: секвенца трансформације епителних ћелија 2; ИАП: Да-повезан протеин; ТПР: Транслоцирани регион промотера; БЛБЦ: базални рак дојке; ЛВ: Лимфни суд; АДЦД: ћелијска смрт зависна од аутофагије; мТОР: Механистички циљ рапамицина; ТМЗ: Темозоломид; ГБМ: Глиобластом; Г3БП1: Рас-ГТПасе-активирајући протеин-везујући протеин 1; Иопс: Иерсиниа Спољашњи протеини; МЦ: Митотичка катастрофа; МЦТ-1: Вишеструке копије код малигнитета Т-ћелија 1; ИЦД: Имуногена ћелијска смрт; ЦТЛ: цитотоксични Т лимфоцити; ДАМП: молекуларни обрасци повезани са оштећењем; АПЦ: ћелије које представљају антиген; ДП: Двоструко позитивно; НФ1: Неурофброматоза тип 1; СЦФ: Фактор матичних ћелија; ЛГГ: глиом ниског степена; Расал1: 1 протеин сличан Рас протеин активатору.

Признања

Захваљујемо проф. Ионггуанг Таоу и др Ли Ксиеу и Венбинг Лиу на верификацији фигура и рукописа.

Прилози аутора

ИЈ и ЛЦ допринели су концепцији и дизајну ревије. ХХ и СВ су написали рукопис. ЈХ и ХХ су припремили слике и табелу. СЈ, ЛЛ и ИЛ прикупили су референце и учествовали у дискусији. Сви аутори су прочитали и одобрили коначни рукопис

Финансирање

Овај рад су подржале Национална фондација за природне науке Кине (81802785 [ИЈ], 82100490 [ЛЦ]), Кинеска фондација за природне науке провинције Хунан (2020ЈЈ5382 [ИЈ], 2020ЈЈ5381 [ЛЦ]), Научно-истраживачки пројекат здравља Хунан Провин Комисија (20200763 [ВЛ]) и Пројекат основних истраживања Бироа за науку и технологију Чангше (кк2004127 [ЛКС]).

Доступност података и материјала

Није применљиво.

Декларације

Етичко одобрење и сагласност за учешће

Није применљиво.

Сагласност за објављивање

Није применљиво.

Такмичарски интереси

Аутори изјављују да немају супротстављене интересе.

Детаљи о аутору

1 Кључна лабораторија за моделну биологију животиња и матичних ћелија у провинцији Хунан, Хунан Нормал Университи, Цхангсха 410013, Хунан, Народна Република Кина. 2 Медицински факултет, Хунан Нормал Университи, Цхангсха 410013, Хунан, Народна Република Кина. 3 Одељење за хирургију главе и врата, Придружена болница за рак на медицинском факултету Ксиангиа, Централ Соутх Университи, Цхангсха 410013, Хунан, Народна Република Кина. 4 Кључна лабораторија за карциногенезу и инвазију рака, Министарство образовања, Одељење за патологију, болница Ксиангиа, Факултет основне медицине, Централ Соутх Университи, Цхангсха 410078, Хунан, Народна Република Кина.

Референце

1. Веннерберг К, Россман КЛ, Дер ЦЈ. Кратак поглед на суперпородицу Рас. Ј Целл Сци. 2005;118(Пт 5):843–6.

2. Такаи И, Сасаки Т, Матозаки Т. Мали ГТП-везујући протеини. Пхисиол Рев. 2001;81(1):153–208.

3. Бос ЈЛ, Рехманн Х, Виттингхофер А. ГЕФс и ГАПс: критични елементи у контроли малих Г протеина. Ћелија. 2007;129(5):865–77.4. Цхерфлс Ј, Зегхоуф М. Регулација малих ГТПаза ГЕФ-овима, ГАП-овима и ГДИ-овима. Пхисиол Рев. 2013;93(1):269–309.

5. Лигети Е, Велти С, Сцхефзек К. Инхибиција и завршетак физиолошких одговора протеинима који активирају ГТПазу. Пхисиол Рев. 2012;92(1):237–72.

6. Росс ЕМ, Вилкие ТМ. Протеини који активирају ГТПазу за хетеротримерне Г протеине: регулатори сигнализације Г протеина (РГС) и протеини слични РГС-у. Анну Рев Биоцхем. 2000;69:795–827.

7. Сцхефзек К, Ахмадиан МР, Кабсцх В, Виесмуллер Л, Лаутвеин А, Сцхмитз Ф, Виттингхофер А. Комплекс Рас-РасГАП: структурна основа за активацију ГТПасе и њен губитак у онкогеним Рас мутантима. Наука. 1997;277(5324):333–8.

8. Сцхефзек К, Схивалингаиах Г. Рас-специфичне ГТПасе-активирајуће протеинске структуре, механизми и интеракције. Цолд Спринг Харб Перспецт Мед. 2019;9(3):а031500.

9. Танг Д, Канг Р, Бергхе ТВ, Ванденабееле П, Кроемер Г. Молекуларна машинерија регулисане ћелијске смрти. Целл Рес. 2019;29(5):347–64.

10. Галлуззи Л, Витале И, Ааронсон СА, Абрамс ЈМ, Адам Д, Агостинис П, Алнемри ЕС, Алтуцци Л, Амелио И, Андревс ДВ, Анниццхиарицо-Петруззелли М, Антонов АВ, Арама Е, Баехрецке ЕХ, Барлев НА, Базан НГ, Бернассола Ф, Бертранд МЈМ, Бианцхи К, Благосклонни МВ, Бломгрен К, Борнер Ц, Боиа П, Бреннер Ц, Цампанелла М, Цанди Е, Цармона-Гутиеррез Д, Цеццони Ф, Цхан ФК, Цхандел НС, ет ал. Молекуларни механизми ћелијске смрти: препоруке Номенклатурног комитета за смрт ћелија 2018. Целл Деатх Диффер. 2018;25(3):486–541.

11. Маиури МЦ, Залцквар Е, Кимцхи А, Кроемер Г. Самоједење и самоубијање: унакрсни разговор између аутофагије и апоптозе. Нат Рев Мол Целл Биол. 2007;8(9):741–52.

12. Керр ЈФ. Некроза скупљања: посебан начин ћелијске смрти. Ј Патхол. 1971;105(1):13–20.

13. Царнеиро БА, Ел-Деири ВС. Циљање апоптозе у терапији рака. Нат Рев Цлин Онцол. 2020;17:395–417.

14. Цзаботар ПЕ, Лессене Г, Страссер А, Адамс ЈМ. Контрола апоптозе од стране БЦЛ{1}} породице протеина: импликације на физиологију и терапију. Нат Рев Мол Целл Биол. 2014;15(1):49–63.

15. Сеирек К, Иванисенко НВ, Рицхтер М, Хиллерт ЛК, Кониг Ц, Лаврик ИН. Контролисање ћелијске смрти путем пост-транслационих модификација ДЕД протеина. Трендс Целл Биол. 2020;30(5):354–69.

16. Таи ВТ, Цхен ИЛ, Цху ПИ, Цхен Љ, Хунг МХ, Схиау ЦВ, Хуанг ЈВ, Тсаи МХ, Цхен КФ. Протеин тирозин фосфатаза 1Б дефосфорилише ПИТКС1 и регулише п120РасГАП код хепатоцелуларног карцинома. Хепатологија. 2016;63(5):1528–43.

17. Ванли Г, Семпоук Ц, Видманн Ц. Каспаза-3/п120 РасГАП модул за откривање стреса смањује учесталост рака јетре, али не утиче на укупно преживљавање код мишева зрачених гама зрачењем и мишева третираних канцерогеном. Мол Царциног. 2017;56(6):1680–4.

18. Ианг ЈИ, Мицход Д, Валицки Ј, Мурпхи БМ, Касибхатла С, Мартин СЈ, Видманн Ц. Делимично цепање РасГАП каспазама је потребно за преживљавање ћелија у условима благог стреса. Мол Целл Биол. 2004;24(23):10425–36.

19. Лу С, Зхоу Ј, Сун И, Ли Н, Миао М, Јиао Б, Цхен Х. Некодирајућа РНК ХОКСД-АС1 је критични регулатор фенотипа метастаза и апоптозе у хуманом хепатоцелуларном карциному. Мол Цанцер. 2017;16(1):125.

20. Гуо Кс, Ксианг Ц, Зханг З, Зханг Ф, Кси Т, Зхенг Л. Дисплацемент оф Бак би БМФ посредује СТАРД13 3'УТР-индуковану апоптозу ћелија рака дојке на начин који зависи од миРНА. Мол Пхарм. 2018;15(1):63–71.

21. Санцхез-Мартин Д, Отсука А, Кабасхима К, Ха Т, Ванг Д, Киан Кс, Лови ДР, Тосато Г. Ефекти недостатка ДЛЦ1 на инхибицију раста контакта ендотелних ћелија и прогресију ангиосаркома. Ј Натл Цанцер Инст. 2018;110(4):390–9.

22. Белаззо А, Ди Минин Г, Цоллавин Л. Блок један, ослободите стотину. Механизми инактивације ДАБ2ИП код рака. Целл Деатх Диффер. 2017;24(1):15–25.

23. Зхоу Ј, Нинг З, Ванг Б, Иун ЕЈ, Зханг Т, Понг РЦ, Фазли Л, Глеаве М, Зенг Ј, Фан Ј, Ванг Кс, Ли Л, Хсиех ЈТ, Хе Д, Ву К. ДАБ2ИП додељује губитак отпорност рака простате на терапију депривације андрогена кроз активирање СТАТ3 и инхибирање апоптозе. Целл Деатх Дис. 2015;6:е1955.

24. Ианг КСМ, Цао КСИ, Хе П, Ли Ј, Фенг МКС, Зханг ИЛ, Зханг КСЛ, Ванг ИХ, Ианг К, Зху Л, Ние ХЗ, Јианг СХ, Тиан ГА, Зханг КСКС, Лиу К, Ји Ј, Зху Кс, Ксиа К, Зханг ЗГ. Прекомерна експресија протеина 1 који активира Рац ГТПазу доприноси пролиферацији ћелија рака смањењем сигнализације нилског коња ради промовисања цитокинезе. Гастроентерологија. 2018;155(4):1233–49.

25. Татсумото Т, Ксие Кс, Блументхал Р, Окамото И, Мики Т. Хуман ЕЦТ2 је фактор размене за Рхо ГТПазе, фосфорилисан у Г2/М фазама и укључен у цитокинезу. Ј Целл Биол. 1999;147(5):921–8.

26. Цхен Ј, Ксиа Х, Зханг Кс, Картхик С, Пратап СВ, Оои ЛЛ, Хонг В, Хуи КМ. ЕЦТ2 регулише Рхо/ЕРК сигналну осу како би промовисао рани рецидив код хуманог хепатоцелуларног карцинома. Ј Хепатол. 2015;62(6):1287–95.

27. Лавсон ЦД, Фан Ц, Митин Н, Бакер НМ, Георге СД, Грахам ДМ, Пероу ЦМ, Бурридге К, Дер ЦЈ, Россман КЛ. Анализа транскриптома Рхо ГТПазе открива онкогене улоге протеина који активирају рхо ГТПазу код базалних карцинома дојке. Цанцер Рес. 2016;76(13):3826–37.

28. Лапински ПЕ, Лубецк БА, Цхен Д, Доости А, Завиеја СД, Давис МЈ, Кинг ПД. РАСА1 регулише функцију вентила лимфних судова код мишева. Ј Цлин Инвест. 2017;127(7):2569–85.

29. Ванг З, Хуанг Х, Хе В, Конг Б, Ху Х, Фан И, Лиао Ј, Ванг Л, Меи И, Лиу В, Ксионг Кс, Пенг Ј, Ксиао И, Хуанг Д, Куан Д, Ли К, Ксионг Л, Зхонг П, Ванг Г. Регулатор сигнализације Г-протеина 5 штити кардиомиоците од апоптозе током ин витро срчане исхемије-реперфузије код мишева инхибирајући и ЈНК1/2 и П38 сигналне путеве. Биоцхем Биопхис Рес Цоммун. 2016;473(2):551–7.

30. Ванг Х, Фан Л, Ванг Х, Ма Кс, Ду З. Амилоид бета регулише експресију и функцију АИП1. Ј Мол Неуросци. 2015;55(1):227–32.

31. Сирохи К, Сваруп Г. Дефекти у аутофагији узроковани мутацијама у оптинеурину повезаним са глаукомом. Екп Еие Рес. 2016;144:54–63.

32. Схен ХМ, Цодогно П. Аутофагна ћелијска смрт: чудовиште из Лох Неса или угрожена врста? Аутофагија. 2011;7(5):457–65.

33. Криел Ј, Лоос Б. Добар, лош и аутофагозом: истраживање неодговорених питања ћелијске смрти зависне од аутофагије. Целл Деатх Диффер. 2019;26(4):640–52. 34. Линдквист ЛМ, Симон АК, Баехрецке ЕХ. Актуелна питања и могуће контроверзе у аутофагији. Целл Деатх Дисцов. 2015;1:1–7.

35. Амаравади Р, Киммелман АЦ, Вхите Е. Недавни увиди у функцију аутофагије код рака. Генес Дев. 2016;30(17):1913–30.

36. Киммелман АЦ, Вхите Е. Аутофагија и метаболизам тумора. Целл Метаб. 2017;25(5):1037–43.

37. Канзава Т, Кондо И, Ито Х, Кондо С, Германо И. Индукција аутофагне ћелијске смрти у ћелијама малигног глиома помоћу арсеник триоксида. Цанцер Рес. 2003;63(9):2103–8.

38. Дасари СК, Биалик С, Левин-Заидман С, Левин-Саломон В, Меррилл АХ Јр, Футерман АХ, Кимцхи А. РНАи екран на нивоу сигнала идентификује ГБА1 као позитивног посредника аутофагне ћелијске смрти. Целл Деатх Диффер. 2017;24(7):1288–302.

39. Зеин Л, Фулда С, Когел Д, ван Вијк СЈЛ. Механизми специфични за органеле ћелијске смрти изазване аутофагијом. Матрик Биол. 2021;100–101:54–64.

40. Елгенди М, Схеридан Ц, Бруматти Г, Мартин СЈ. Онкогена Рас-индукована експресија Нока и Бецлин-1 промовише аутофагичну ћелијску смрт и ограничава клоногено преживљавање. Мол Целл. 2011;42(1):23–35.

41. Стенмарк Х. Раб ГТПазе као координатори саобраћаја везикула. Нат Рев Мол Целл Биол. 2009;10(8):513–25.

42. Хиттинен ЈМ, Нииттикоски М, Салминен А, Каарниранта К. Сазревање аутофагозома и ендозома: кључна улога за Раб7. Биоцхим Биопхис Ацта. 2013;1833(3):503–10.

43. Сзатмари З, Сасс М. Аутопхагиц ролес оф Раб смалл ГТПасес анд тхеир упстреам регулаторс: а ревиев. Аутофагија. 2014;10(7):1154–66.

44. Пантоом С, Константинидис Г, Восс С, Хан Х, Хофнагел О, Ли З, Ву ИВ. РАБ33Б регрутује комплекс АТГ16Л1 у фагофор преко неканонског РАБ везујућег протеина. Аутофагија. 2020. хттпс://дои.орг/10.1080/ 15548627.2020.1822629.

45. Итох Т, Канно Е, Уемура Т, Вагури С, Фукуда М. ОАТЛ1, нови Раб33Б-ГАП резидент аутофагозома, регулише сазревање аутофагозома. Ј Целл Биол. 2011;192(5):839–53.

46. ​​Москаленко С, Хенри ДО, Россе Ц, Миреи Г, Цамонис ЈХ, Вхите МА. Егзоциста је Рал ефецтор комплекс. Нат Целл Биол. 2002;4(1):66–72.

For more information:1950477648nn@gmail.com