Процена токсичности екстракта цвета Долицхандроне Серрулата (ДСФ) на функцију бубрега и јетре

за више информација:ali.ma@wecistanche.com

Процена токсичности екстракта цвета Долицхандроне серрулата на виталне и репродуктивне органе код одраслих мужјака пацова

Ц. Цхаимонтриа и С. Иамсаард

Апстрактан

МадаЦвет Долицхандроне серрулатаПоказало се да водени екстракт (ДСФ) поседује фармаколошка својства, а његова системска токсичност тек треба да се процени. Ова студија је имала за циљ да истражи субхронични токсични ефекат ДСФ-а (Цвет Долицхандроне серрулата)екстракт о биохемијским параметрима и хистолошким структурамајетра, бубрега, тестис. и епидидимис плус семеновод. Одраслим мужјацима пацова је даван ДСФ (Цвет Долицхандроне серрулата) на 100,300 и 600 мг/кг ТМ путем оралне сонде током 48 узастопних дана док је контрола примала дестиловану воду. На крају експеримента, крв.јетра, бубрегаСакупљени су узорци , тестиса и епидидимиса плус вас деференса да би се утврдиле било какве промене у биохемијским компонентама серума укључујући нивое АЛТ, АЛП и креатинина и хистолошке структуре. Резултати нису открили значајну разлику у телесној тежини и потрошњи хране или воде између контролне и ДСФ (Цвет Долицхандроне серрулата)-третиране групе. Утврђено је да ДСФ (Цвет Долицхандроне серрулата)значајно повећава тежину епидидимиса плус семеновода, док себубрегаијетрапоказало смањење у групи са високим дозама (П вредност< 0.05).="" histological="" changes="" in="" these="" vital="" and="" reproductive="" tissues="" including="" fibrosis="" were="" not="" observed="" after="" administration="" but="" alt,="" alp,="" and="" creatinine="" levels="" were="" significantly="" altered="" in="" the="" treated="" groups(pwlue="" <="" 0.051.="" these="" altered="" levels.="" however,="" were="" still="" within="" normal="" ranges="" in="" conclusion,="" these="" findings="" demonstrated="" that="" d.serulata="" flower="" extract="" had="" no="" sub-chronic="" toxicity="" on="" vital="" and="" reproductive="" structures="" but="" slightly="" altered="" some="">функције јетре и бубрега.

Кликните на Цистанцхес и Цистанцхе за болест бубрега

Кључне речи:Долицхандронесеррулата, јетра, бубрега, тестис, епидидимис.

1. Представљање

Употреба лековитог биља за лечење болести је дугогодишња традиција. Потенцијална лековита својства биљака зависе од врсте и количине њихових хемијских једињења. Познато је да сваки део појединих лековитих биљака има различита једињења. Поред тога, врста и количина супстанци могу да варирају у зависности од других фактора као што су врста биљака, окружење за садњу и период бербе (Срингеуниуан и Хонгвисет, 1990). Тренутно, влада Тајланда промовише употребу лековитих биљака и биља, које се сматрају лековитим алтернативама савременој здравственој заштити (Срингеуниуан и Хонгвисет., 1990) с обзиром да су биљни производи углавном нетоксични. Штавише, биљни третмани потичу из локалног знања тајландске традиционалне медицине. Кхае На илиДолицхандроне серрулата(илиД.серрулата фловер(ДСФ)) је древна лековита биљка за коју се традиционално верује да има многа фармаколошка својства (Срипрасерт, 2016). Већина делова (цвет. махуна, кора и корен) ове биљке су корисни и конзумирају се због својих бројних фармаколошких својстава (Срипрасерт, 2016; Киратипаибоон ет ал., 2012). Садашња студија је открила заштитни ефекат ДСФ-а (Цвет Долицхандроне серрулата)против репродуктивног оштећења код дијабетичких пацова (Ианнаситхинон ет ал., 2021). Биолошка истраживања метанолног екстракта ДСФ-а (Цвет Долицхандроне серрулата)је показао своје обећавајуће антиоксидативне активности (Пхантхонг ет ал., 2015). Утврђено је да ДСФ (Цвет Долицхандроне серрулата)екстракти су садржали шест једињења укључујући халерон, протокатекуинску киселину, ренгиолон, клероиндицин Б, изнутра и изомалтозу (Пхантхонг ет ал, 2015). Штавише, претходна студија је проценила фитокемијске профиле и биолошке активности ДСФ-а (Цвет Долицхандроне серрулата)етанолни екстракти (Срипрасерт, 2016). Фитокемијске студије етанолних екстраката из ове биљке откриле су секундарне метаболите као што су флавоноиди, кумарини, сапонини, танини, терпеноиди, стероиди и срчани гликозиди (Срипрасерт, 2016). Недавно је водени екстракт ДСФ-а (Цвет Долицхандроне серрулата)пријављено је да има антиоксидативни капацитет и монотерпеноиде као што су ренгиолон и клероиндицин Б (Цхаимонтриет ал., 2021). Међутим, показало се да су неке биљке сродне овој Д. серрулата токсичне за виталне и репродуктивне органе. На пример, водени екстракт П.аллиацеум, екстрахован етанолом у студији акутне токсичности, смањио је способност белих крвних зрнаца (Гранадос-Ецхегоиенет ал., 2015). Претходно су Аба и Амади (2019) известили да екстракт воћа А. царамбола може оштетити јетрено и бубрежно ткиво. Поред тога, откривено је да гинсенг може да промени параметре крвног серума, укључујући нивое АЛТ, АЛП и креатинина, што указује надисфункције јетре и бубрега(Ким ет ал. 2013). Штавише, Азу ет ал. (2010) су известили да високе дозе екстракта воћа К. Африцана могу инхибирати сперматогенезу. Примећено је да континуирана конзумација недавних биљних производа током дужег периода може оштетити виталне и репродуктивне органе (Киратипаибоон ет ал, 2012; Фреитас ет ал, 2013; Јосхи ет ал, 2011; Карнати ет ал, 2013; Лее ет ал, 2012). Иако ДСФ (Цвет Долицхандроне серрулата)се конзумира већ дуже време, токсични ефекти његовог воденог екстракта најетра, бубрега, тестис и епидидимис тек треба да се процене. Да бисмо побољшали наше разумевање овог питања, ова студија је настојала да истражи субхроничне токсичности ДСФ-а (Цвет Долицхандроне серрулата)екстракти на виталним и репродуктивним органима како би се утврдила могућност безбедног конзумирања ове супстанце током дужег периода.

Цвет Долицхандроне серрулата(ДСФ)

2. Материјал и методе

2.1. Животиње

Четрдесет одраслих мужјака Спрагуе-Давлеи пацова (120-150г) купљено је од Номура Сиам Интернатионал, Бангкок, Тајланд. Животиње су држане у кавезима од нерђајућег челика у експерименталним собним условима (циклус светло/мрак 12 сати, температура 23±2 степена, влажност 40-60 процената, звук<85 decibels,="" and="" light="" intensity="" approximately="" 350-400="" lux)in="" the="" northeast="" laboratory="" animal="" center,="" khon="" kaen="" university,="" thailand.="" this="" experimental="" study="" was="" approved="" by="" the="" animal="" ethics="" committee="" research="" of="" northeast="" laboratory="" animal="" center="" khon="" kaen="" university.="" the="" code="" of="" this="" animal="" ethic="" is="">

2.2. Сакупљање и припрема цвета Д.серрулата

Биљни примерци свежег Кхае На су сакупљени из подокруга Бан Тхум, округа Муеанг, провинције Кхон Каен, Тајланд, а аутентичност их је оверио асист. Проф. др Пимвадее Порнпонгрунгруенг, Департман за биологију, Природно-математички факултет Универзитета Кхон Каен (узорци ваучера Д.серрулата, чувани у хербаријуму ККУ са бројем С.ламсаард02). У екстракцији, осушени ДСФ (Цвет Долицхандроне серрулата)је исечен на мале комаде пре него што је натопљен и куван у дестилованој води на 90-95 степена 40 мин. Водени ДСФ (Цвет Долицхандроне серрулата)екстракт је лиофилизован коришћењем лиофилизатора (М-00359-1/57,13-1011-18-2019, Лабцонцо, Бецтхаи Сциентифиц Индустри, Тајланд). Процентуални принос сировог ДСФ екстракта био је 40,78 процената. Овај екстракт је добијен од др Ситтхицхаи Ламсаарда као што је претходно описано у детаљима екстракције (Цхаимонтри ет ал., 2021; Ианнаситхинон ет ал, 2021).

2.3. Експериментални дизајн

Након аклиматизације током 7 дана, мужјаци пацова су насумично подељени у 4 групе (10 пацова по групи) укључујући контролу, ДСФ (Цвет Долицхандроне серрулата)100, ДСФ (Цвет Долицхандроне серрулата)300 и ДСФ (Цвет Долицхандроне серрулата)600 група, респективно. ДСФ (Цвет Долицхандроне серрулата) дозе екстракта су израчунате на основу максималне дозе потрошње ДСФ-а (Цвет Долицхандроне серрулата)код особе просечне тежине 60 кг. Укратко, доза од 600 мг/кг ТМ израчуната је на основу могућности потрошње од 40 цветова дневно по особи. Пропорционални односи средње (300 мг) и најниже (100 мг) дозе су израчунати од 600 мг. За ДСФ (Цвет Долицхандроне серрулата)третиране групе, пацови су третирани са ДСФ (Цвет Долицхандроне серрулата)-екстракт растворен у дестилованој води (ДВ) у дозама од 100, 300 и 600 мг/кг ТМ, респективно, путем оралне сонде. Животиње у контролној групи добијале су само ДВ. Њихова телесна тежина је бележена дневно током примене током 48 узастопних дана.

2.4. Биохемијска анализа

На крају експеримента, сви пацови су анестезирани тиопентал натријумом (60 мг/кг ТМ преко ип) пре еутаназије дислокацијом грлића материце. Након отварања торакалног зида, крв је сакупљена пункцијом срца и центрифугирана на 12,000 р/мин 10 минута на 4 степена, користећи микроцентрифугу (Мицрофуге 22Р Центрифуге, Бецкман Цоултер ТМ, САД) за одвајање крвних ћелија из серума. Крвни серум је одмах послат у имунолошку јединицу, болницу Сринагаринд, Медицински факултет Универзитета Кхон Каен, Тајланд ради одређивања азота урее у крви (БУН) и креатинина (забубрегафункције) и албумин, аспартат аминотрансфераза (АСТ), аланин аминотрансфераза (АЛТ) и алкална фосфатаза (АЛП) (за функције јетре). Биохемијски нивои су одређени коришћењем електрохемилуминисцентног имуноесеја (Роцхе Диагностицс) са Цобас и имунолошким анализатором (Роцхе Диагностицс, Маннхеим, Немачка).

2.5. Хистолошка студија виталних органа

Након узимања крви,јетра, бубрега, а репродуктивни органи укључујући тестисе и епидидимис су брзо сакупљени и измерени. Сва ткива су фиксирана са 10 процентним раствором фиксатора формалина током 72 сата. Затим су обрађени за рутинске парафинске секције и обојени Массоновим трихромским бојама да би се истражио развој колагених влакана. Укратко, делови ткива су депарафинизовани ксиленом и рехидрирани серијским опадајућим алкохолима. Затим су пресеци потопљени у Боуин-ов раствор и обојени Веигертовим гвожђем хематоксилином. Након тога, пресеци су обојени Массоновим трихромским комплетима за бојење (каталошки број ХТ15, Сигма-Алдрицх, Инц, УСА). На крају, пресеци су испрани са 1 процентом сирћетне киселине. Хистолошке промене виталних органа и репродуктивних органа посматране су и фотографисане Никон светлосним микроскопом ЕЦЛИПСЕ Е200 опремљеним дигиталним фотоапаратом ДКСМ1200.

2.6. Статистичка анализа

Сви подаци су изражени као средња вредност ± стандардна девијација (СД). Да би се упоредиле разлике између четири групе, коришћена су вишеструка поређења Пост Хоц за нормално дистрибуиране податке, а разлике података су изведене коришћењем Оне Ваи АНОВА коришћењем програма СПСС статистика 19.0.2софтвер (статистички пакет за друштвене науке, верзија 19.0.2, СПСС Инц, Армонк, Њујорк, САД инсталиран из ККУСофтваре центра, Кхон Каен универзитет) за анализу података. За испитивање значајне разлике између група коришћен је СПСС програм. П-вредност<0.05 was="" considered="" a="" significant="">

3. Резултати

3.1. Утицај екстракта цвета Д.серрулата на телесну тежину, виталне и репродуктивне органе

Просечно тело је променило тело, а тежина тестиса животиња у контролној и третираној групи није показала значајну разлику. Насупрот томе, тежина епидидимиса плус вас деференса у ДСФ (Цвет Долицхандроне серрулата)600 третирана група је значајно повећана у поређењу са контролном. Унос воде и потрошња хране за све животиње нису показали значајне варијације (Табела 1). Занимљиво је да су релативне тежинебубрегаи јетрау ДСФ (Цвет Долицхандроне серрулата)300 и 600 третираних животиња су значајно смањене у поређењу са контролом (П < 0,05).

Табела 1. Поређења телесне тежине, тестиса, епидидимиса плус вас деференса, бубрега и тежине органа јетре између контролне и ДСФ (Цвет Долицхандроне серрулата)-третирани пацови након 48 дана студије субхроничне токсичности.

3.2. Ефекат екстракта цвета Д.серрулата на биохемијске параметре

Након анализе серума, биохемијски параметри који указују на функцију јетре показали су да ДСФ (Цвет Долицхандроне серрулата)значајно смањен ниво аланин аминотрансферазе (АЛТ) и алкалне фосфатазе (АЛП) у поређењу са контролном групом (П<0.05, table="" 2).="" by="" contrast,="" creatinine="" levels="" which="">функцију бубрега, из ДСФ-а (Цвет Долицхандроне серрулата)100 и ДСФ (Цвет Долицхандроне серрулата)300 група је значајно повећано у поређењу са контролном групом (П<0.05, table="" 2).="" interestingly,="" no="" difference="" in="" renal="" function="" was="" indicated="" by="" aspartate="" aminotransferase="" (ast),="" albumin,="" and="" blood="" urea="" nitrogen(bun)levels="" in="" all=""> (Цвет Долицхандроне серрулата)посматрано је третираних група.

Табела 2. Поређења нивоа биохемијских параметара у серуму између контролних и третираних пацова након 48 дана студије субхроничне токсичности

3.3.Утицај екстракта цвета Д.серрулата на развој колагених влакана у тестисима, каудалном епидидимису, бубрезима и јетри пацова

Секције ткива тестиса, каудални епидидимис,бубрега, и јетраобојени Массоновим трихомом нису показали разлику у дебљини колагених влакана између контролних и третираних група као што је приказано на сликама 1-4. Насупрот томе, обилна колагена влакна и фибробласти пронађени су на базалној ламини испод семиниферног епитела (плаве стрелице на слици 1). Поред тога, каудални епидидимис показује фина колагена влакна заједно са цевастим зидом и интертубуларним просторима (црне звездице на слици 2). ). У бубрезима су колагенска влакна присутна у базалној мембрани бубрежних тубула и Бовмановом простору (плаве стрелице на слици 3). Штавише, ткиво јетре свих група показало је малу количину колагених влакана око порталне тријаде која садржи хепатичну артерију, порталну вену и жучни канал (плаве стрелице на слици 4).

Слика 1. Репрезентативна хистологија тестиса обојених Массоновим трихомом контроле: (А), ДСФ100 (Б), ДСФ300 (Ц) и ДСФ600 (Д) групе, респективно. Црвене стрелице=колагена влакна; СГ=сперматогонија; РС=округли сперматид.	Слика 2. Репрезентативна хистологија каудалног епидидимиса обојеног Массоновим трихомом контроле: (А), ДСФ100 (Б), ДСФ300 (Ц) и ДСФ600 (Д) групе, респективно. Црне звездице=колагена влакна.
Слика 3. Репрезентативна хистологија бубрега обојеног Массоновим трихомом контроле: (А), ДСФ100 (Б), ДСФ300 (Ц) и ДСФ600 (Д) групе, респективно. Плаве стрелице=колагена влакна; РТ=бубрежни тубули.	Слика 4. Репрезентативна хистологија јетре која приказује порталну тријаду обојену Массоновим трихомом контроле: (А), ДСФ100 (Б), ДСФ300 (Ц) и ДСФ600 (Д) групе, респективно. Плаве стрелице=колагена влакна.

4. Дискусија

Ова студија је показала да ДСФ (Цвет Долицхандроне серрулата)екстракт није утицао најетра, бубрегаи структуре репродуктивних органа након примене током 48 дана. Међутим, ДСФ (Цвет Долицхандроне серрулата)мало измењенфункција јетре и бубрега, али су њихови нивои у серуму и даље били у границама нормале у складу са стандардним вредностима. Пријављено је да високе дозе (500 мг/кг ТМ) исте врсте ове биљке потискују производњу сперме (Азует ал., 2010); међутим, висока доза ДСФ-а (Цвет Долицхандроне серрулата)(600 мг/кг ТМ) није променила тежину репродуктивног органа или хистолошке структуре. Овај резултат се сложио са претходном студијом која је показала повећану концентрацију и квалитет сперме епидидима након ДСФ-а (Цвет Долицхандроне серрулата)третман (Цхаимонтри ет ал., 2021). Штавише, ДСФ је побољшао број сперматозоида и физиологију, као и хистопатологију тестиса код пацова са дијабетесом типа 1 (Ианнаситхинон ет ал., 2021). Заједно са нашим резултатима, та истраживања сугеришу да водени ДСФ (Цвет Долицхандроне серрулата)екстракт нема суб-хроничне токсичности на мушки репродуктивни систем. Ово се може објаснити воденим ДСФ-ом (Цвет Долицхандроне серрулата)који представљају антиоксидативне активности и садрже укупне фенолне садржаје укључујући терпеноидне компоненте (Цхаимонтри ет ал., 2021). Заиста, у литератури се показало да многи делови Д.серрулата екстраховани етанолом или метанолом имају антиоксидативне капацитете и супстанце као што су алкалоиди, флавоноиди, гликозиди, фенолна једињења, сапонини и танини (Цхатцханаиуенионг и Сујаианонт, 2002; ет ал, 2018; Киратипаибоон ет ал., 2012; Синапхет ет ал, 2006; Ситтивет, 2009). Ови антиоксидативни капацитети ДСФ-а (Цвет Долицхандроне серрулата)може смањити висок ниво брзе глукозе у крви (ФБГ) и малондиалдехида у тестисима (МДА) са повећаним нивоима тестостерона код пацова који су третирани ДМ типа 2 (Ианнаситхинон ет ал., 2021).

Претходне студије су пријавиле токсичност многих супстанци, укључујући биљне екстракте на наслаге колагених влакана у дијабетичким тестисима (Исмаил ет ал.2017), хипертензивни епидидимис (Мазен и Зидан, 2017), дистрибуцију звездастих ћелија јетре (Нисхимура ет ал, 2012; Товне ет ал., 2015), ихронична болест бубрегапацијената (Аллон ет ал, 2019). Као што је показано у овој недавној студији, интензитет колагених влакана присутних у тестисима, каудалном епидидимису, јетри и бубрежним ткивима обојеним Массоновим трихромом, не показује разлику између контролне и ДСФ. (Цвет Долицхандроне серрулата)групе третмана. Ови резултати су показали да ДСФ (Цвет Долицхандроне серрулата)екстракт није индуковао хистопатолошко фиброзу, акумулирана колагена влакна, у виталним и репродуктивним ткивима. Ови резултати сугеришу да конзумирање ДСФ-а (Цвет Долицхандроне серрулата)екстракт за суб-хронични период није изазвао фиброзу у репродуктивним или виталним органима. Примећено је да је дебљина Бовманове капсуле међу ДСФ (Цвет Долицхандроне серрулата) третиране групе нису показале очигледне промене у поређењу са контролном групом. Поред тога, тежине тих органа нису се значајно разликовале између група, што се слагало са претходном студијом која је посматрала мишеве третиране током периода акутне токсичности (Катисарт и Консуе, 2019).

Јетра и бубрезимикроструктуре нису показале очигледне промене након ДСФ-а (Цвет Долицхандроне серрулата)давање у било којој дози. Међутим, њихове функције су незнатно измењене услед снижених нивоа АЛТ и АТП, док је ниво креатинина значајно повећан. Такве функционалне промене могу се објаснити активношћу сапонина који се налази у ДСФ (Цвет Долицхандроне серрулата)сирови екстракт као што је описано у претходној студији (Киратипаибоон ет ал. 2012). Овај механизам може бити сличан оном који је примећен у лечењу сунчаним гинсенгом, чији је садржај сапонина довео до промена параметара крвног серума везаних за јетру ибубрегафункцијакао што су нивои АЛТ, АЛП и креатинина (Ким ет ал.2013). Међутим, такве физиолошке промене нису биле довољне да озбиљно оштете јетру ибубрегаструктуре. Као што је приказано у табели 2; биохемијски параметри у крвном серуму из ДСФ (Цвет Долицхандроне серрулата)третиране групе су измењене у поређењу са онима у контролној групи, међутим, њихови нивои су и даље били у нормалним границама укључујући АЛТ[{{0}}У/Л], АЛП 62-230 У/Л] и креатинин [0.2-0.5 мг/дл као што је претходно пријављено на животињском моделу (Хаиакава ет ал., 2013; Переира ет ал., 2017). Као ограничење студије, друге токсичне супстанце у ДСФ-у (Цвет Долицхандроне серрулата)а апоптотичке маркере у ткивима треба даље истражити да би се утврдила њихова безбедност за употребу и потрошњу током дужег периода.

5. Закључак

Ова студија је показала да водени ДСФ (Цвет Долицхандроне серрулата)Екстракт цвета није био токсичан на виталне органе и мушко репродуктивно ткиво, али је изазивао благе промене неких параметара зајетра ибубрегафункција.

6. Будући изгледи

На основу налаза овог чланка, безбедност ДСФ-а (Цвет Долицхандроне серрулата)приказана је потрошња током дужег периода за микроструктуре бубрега и јетре. Тачније, ДСФ (Цвет Долицхандроне серрулата)показало се да екстракт није токсичан за тестисе и епидидимис. Надамо се, ДСФ (Цвет Долицхандроне серрулата)екстракт се може даље развијати као додатак исхрани за репродуктивно здравље мушкараца.

Референце

1. АБА, ПЕ и АМАДИ, АУ, 2019. Процена могућих хепатотоксичних и нефротоксичних потенцијала екстракта сока Аверрхоа царамбола код женки албино пацова. Часопис за основну и клиничку физиологију и фармакологију, вол.31,бр.1.хттпс:// дои.орг/10.1515јбцпп-2019-0042.ПМид:31536032.

2. АЛЛОН,М.,ЛИТОВСКИ,СХ,ТЕИЈ,СУНДБЕРГ,ЦА,ЗХАНГ,И,ЦХЕН,З.,ФАНГ,И.,ЦХЕУНГ,АК.и СХИУ,ИТ,2019.Абнормалности васкуларне хистологије и конфигурације колагених влакана у пацијенти са узнапредовалимхронична болест бубрега.Тхе Јоурнал оф Васцулар Аццесс, вол. 20, бр.1, стр.{2}}.хттп://дк. дои. орг/10.1177/1129729818773305.ПМид:29742957.

Белешка:горе наведено није потпуна листа референци