Повољан ефекат Тхимелаеа Хирсута на дегенерацију острваца панкреаса, фиброзу бубрега и оштећења јетре

Санае Абид, Хассане Мекхфифи, Абдеррахим Зиииат, Абдекхалек Легссиер, Мохаммед Азиз и Мохамед Бноухам

Лабораторија за биоресурсе, биотехнологију, етнофармакологију и здравство, Департман за биологију ПМФ-а,

Универзитет Мохамед Ист, Бд: Мохамед ВИ, БП: 717, Оујда 60000, Мароко

Контакт:joanna.jia@wecistanche.com/ ВхатсАпп: 008618081934791

Објективан. У Мароку, плус имелаеа хирсуте (Т. хирсуте) (Тхимелаеацеа) је лековита биљка која се широко користи за лечење и превенцију дијабетеса. Ова студија је имала за циљ да процени средњорочни антидијабетички ефекат воденог екстракта (АкТх) и етилацетатне фракције (ЕаТх) Тх и да истражи њихов претпостављени заштитни ефекат на дегенерацију острваца панкреаса, дијабетичку нефропатију и оштећење јетре код стрептозотоцина (СТЗ) - пацови дијабетичари. Методе. Експериментални дијабетес код пацова изазван је једном интраперитонеалном ињекцијом од 50 мг/кг СТЗ. Током периода лечења (4 недеље), 200 мг/кг АкТх и 50 мг/кг ЕаТх дневно су орално давани СТЗ дијабетичким пацовима. Проучавана је група параметара укључујући глукозу у крви наташте, биохемијске параметре и инхибицију интестиналне глукозидазе. Штавише, хистолошка студија панкреаса,бубрега, јетре и аорте је такође реализован. Резултати. На крају третмана, и АкТх и ЕаТх су нормализовали глукозу у крви наташте на 1,08 и 1,25 г/л, респективно. АкТх је такође смањио креатинин у урину и ХбАц1. ЕаТх је показао инхибиторну активност против интестиналне -глукозидазе, док АкТх није имао овај инхибиторни ефекат. Штавише, бојење панкреаса хематоксилином и еозином показало је да АкТх или ЕаТх спречава дегенерацију ћелија острваца панкреаса. Као истобубрега, Массоново трихромно бојење је показало значајну превенцијубубрежнифиброза код дијабетичких пацова третираних АкТх или ЕаТх. С друге стране, бојење јетре хематоксилином и еозином показало је да АкТх и ЕаТх спречавају оштећење јетре. Закључак. Закључујемо да средњорочна примена АкТх и ЕаТх испољава значајан антихипергликемијски ефекат код СТЗ-дијабетичких пацова, вероватно кроз инхибицију интестиналне глукозидазе и заштиту од оштећења ћелија острваца панкреаса. Штавише, третман АкТх и ЕаТх спречава нефропатију и компликације јетре код СТЗ-дијабетичких пацова.

Цистанцхе хербаможе лечитифиброза бубрега

Увод

Дијабетес мелитус је најчешћа ендокрина болест. Инциденција ове болести расте алармантном стопом (4-5 процената) [1]. Нелечен или неконтролисан, инсулин-зависни дијабетес типа 2 (ДМ2) може изазвати неколико компликација као што су кардиоваскуларне болести и дијабетичка нефропатија, и може довести до дијабетеса типа 1 зависног од инсулина (ДМ1).

Дијабетичка нефропатија је једна од важних компликација дијабетеса и главни је разлог повећаног броја пацијената са завршном стадијумом дијабетеса.бубрежниболести (ЕСРД) [2], које захтевајубубрегадијализа или абубрегатрансплантација за живот пацијента.

Стога, управљање дијабетесом постаје веома важно како би се избегли његови озбиљни метаболички исходи као што је нефропатија.

У данашње време лечење дијабетеса подразумева контролу исхране, вежбање, употребу инсулина и/или хипогликемијских лекова, а такође и употребу лековитог биља као комплементарне алтернативне медицине. Неколико лековитих биљака показало је круцијални антихипергликемијски ефекат са минималним нежељеним ефектима [3–5], због чега је Светска здравствена организација (СЗО) скренула велику пажњу на рационалну употребу традиционалних и природних лекова за лечење дијабетеса [6].

У Мароку се више од 100 лековитих биљака користи за лечење и превенцију дијабетеса [7–10]. Потврђена је антихипергликемијска и антидијабетичка активност бројних екстраката и производа ових биљака (Амми виснага Лам., Глобулариа алум, Нигелла сатива, и Олеа еуропаеа вар.)[9].

Т. хирсута је лековита биљка која се традиционално користи за превенцију и лечење дијабетеса, у североисточном Мароку [8]. Претходне фармаколошке студије су показале акутни антихипергликемијски ефекат АкТх и ЕаТх [11–13]. Међутим, средњорочни антидијабетички ефекат ова два екстракта Т. хирсута још није утврђен. Стога је циљ ове студије да се по први пут процени средњорочна антидијабетичка активност АкТх и ЕаТх и да се испита њихов претпостављени заштитни ефекат на дегенерацију острваца панкреаса, дијабетичку нефропатију, стеатозу јетре и компликације аорте код СТЗ- индуковане дијабетичке пацове.

2. Материјал и методе

2.1. Хемикалије и реагенси.

Глуцосе Аутокит је купљен од БиоСистемс-а (Шпанија). СТЗ је купљен од Сигма Алдрицх (Кина). Акарбоза (Глуцор 50) је добијена од Баиер Сцхеринг Пхарма (Казабланка, Мароко). Сахароза је купљена од Пролабо (група Рхоне-Поуленц) (ЕЕЦ). Пентобарбитал је добијен од ЦЕВА Санте Анимале (ЛаБалласти`ере). Антхроне (Ц14Х10О) је купљен од компаније Органицс. Парафифин восак је купљен од ФлукаЦхемика (Швајцарска). Еозин (Ц20Х6Бр4На2О5) је добијен од Риедел-де Хаен (Сеелзе), а хематоксилин је добијен од БДХ Цхемицалс Лтд. (Пооле Енгланд). Фуксинска киселина је купљена од Ацрос Органицс ​​(Њу Џерси, САД), фосфомолибдинска киселина је купљена од Сигма-Алдрицх (ПФ, Стеинхеим), а светло зелена је купљена од Сигма-Алдрицх (МО, САД).

2.2. Животиње.

Вистар пацови оба пола, првобитне тежине 150–250 г (8-9 недеља), добијени су из животињске куће Одсека за биологију Природно-математичког факултета (Оујда, Мароко). Студија је спроведена према „Принципи неге лабораторијских животиња“ [14]. Одржавани су у стандардним лабораторијским условима (циклус светлост/мрак од 12/12 х и температура 23 плус 2 степена са 3 пацова по кавезу са приступом храни и води. За прикупљање урина и одређивање воде и уноса хране, пацови су одржавани у метаболички кавези.

2.3. Индукција дијабетеса.

Након 14 х гладовања, пацовима је интраперитонеално убризгана појединачна доза СТЗ (50 мг/кг ТМ), припремљена у свежем и хладном пуферу натријум цитрата (0.1 М лимунске киселине и 0,1 М тринатријум цитрат дихидрат) на ПХ4,5, за изазивање дијабетеса [15]. После 1 недеље, пацови са опсегом глукозе у крви наташте од 1,26–2 г/л сматрани су дијабетичарима типа 2 и укључени су у студију.

2.4. Припрема биљног узорка.

Т. хирсута је купљена на традиционалној пијаци у Оујди (Оријентални Мароко) и потврђена је од стране ботаничара на Одељењу за биологију (Научни факултет, Оујда, Мароко), а примерак ваучера (ХУМПОМ137) је депонован у биљном делу Универзитет Хербариум Мохамед Премијер из Оујда, Мароко (ХУМПО).

Надземни делови Т. хирсуте су прво очишћени и испрани водом, а затим сушени на 40 степени преко ноћи у рерни. Да би се припремио АкТх, 140 г надземних делова Т. хирсута је инфузијо у 2 Л дестиловане воде током 3 сата. Принос АкТх је био 4,53 процента. ЕаТх је припремљен како је описано у нашој претходној студији [13].

2.5. Експериментални дизајн.

Пацови су насумично подељени у пет група (5 или 6 пацова по групи): нормални контролни пацови (примјени само са дестилованом водом), контролни пацови дијабетичари (примјени само са дестилованом водом), дијабетички пацови третирани са 10 мг /кг ТМ акарбозе (стандардни хипогликемијски лек), дијабетички пацови третирани са 50 мг/кг ЕаТх, и дијабетички пацови третирани са 200 мг/кг БВ АкТх. Оптималне дозе су одређене на основу наших претходних студија [13] и прелиминарних тестова. Сви пацови су третирани једном дневно током 4 недеље. Телесна тежина се бележи сваки дан. Праћени су унос воде и хране и запремина урина пре и после третмана, а глукозурија је мерена на крају третмана. Глукоза у крви наташте је испитивана пре третмана (недеља 0) и после 1, 2, 3 и 4 недеље лечења. Инхибиција -глукозидазе, ин виво, проучавана је дан пре жртвовања пацова. После 4 недеље третмана, све животиње су анестезиране са 50 мг/кг пентобарбитала, након 14 х гладовања. Затим је крв сакупљена срчаном пункцијом и одмах центрифугирана на 3000 тура/мин током 10 минута. *е серум је затим чуван на -20 степени до биохемијске анализе (укупни холестерол и триглицериди). Тхебубрега, јетра, аорта, срце и панкреас су уклоњени, измерени (бубрегајетра и срце), а затим фиксирани (бубрези, јетра, аорта и панкреас) у 10 посто формалина за хистолошку студију. Узорак јетре је чуван на -20 степени за анализу садржаја гликогена.

цистацхезабубрежна функција

2.6. Процена глукозе у крви наташте.

Током периода лечења, гликемија наташте је квантификована недељно. После 14 х гладовања, микрокапиларима је уклоњена крв из репних вена, под лаганом етром анестезијом. Затим је центрифугиран на 5000 × г током 10 минута, а гликемија је процењена у серуму коришћењем комерцијалног комплета за глукозу (БиоСистемс, Шпанија) заснованог на методи пероксидазе глукоза оксидазе [16].

2.7. - Инхибиција глукозидазе, ин виво студија.

Дан пре жртвовања, пацови лишени хране током 14 х су коришћени за праћење инхибиције -глукозидазе, ин виво. 30 мин пре оралног оптерећења сахарозом (2 г/кг), свакој групи је давана доза која одговара њеном третману. Крв је сакупљена из репне, вене помоћу микрокапилара, непосредно пре примене тест дозе (-30 мин), непосредно пре оптерећења сахарозом (0 мин), и 30, 60 и 120 мин након оптерећења сахарозом. Након центрифугирања на 5000 ×г/10 мин, ниво глукозе у плазми је одређен методом глукоза оксидазе пероксидазе [17].

2.8. Екстракција и одређивање хепатичног гликогена.

Измерени узорци ткива јетре ({{0}}.3–0,5 г) из свих група су коришћени за екстракцију гликогена према Онгу и Кхооу[18]. Узорци јетре су прво уситњени, хомогенизовани са 2 мл 30% калијум хидроксида (КОХ) и кувани на 100 степени/30 мин. Затим, за таложење гликогена, смеша је два пута третирана са 4 мл 95 процентног етанола, и сваки пут смеша је чувана на 4 степена/30 мин. После центрифугирања на 3000 тура/мин/15 мин, пелета је испрана са 8 мл 95% етанола, а затим центрифугирана при 3000 тура/мин/15 мин. Добијени гликоген је растворен у 1 мл дестиловане воде. Концентрација гликогена је праћена коришћењем антрон реагенса. Оптичка густина је очитана на 625 нм.

2.9. Биоцхемицал Ассаис.

Гликозурија је мерена комерцијалним Аутокитом (БиоСистемс, Шпанија) на основу методе глукоза оксидазе пероксидазе. Гликозиловани хемоглобин (ХбА1ц) је процењен коришћењем комерцијалног комплета (Цал-тецх диагностицс, ИНЦ, УСА), а холестерол је одређен коришћењем комерцијалних комплета за анализу (СГМ-Италиа, Рома, Итали). Триглицериди и креатинин у урину су процењени коришћењем комерцијалних комплета за анализу (Био Суд Диагностиц СРЛ, Рицерца, Италија).

2.10. Хистопатологија.

Након периода фиксације од 3 ± 1 дан у 10% формалина, панкреас,бубрега, ткива јетре и аорте су испирана дестилованом водом 20 мин. Затим су дехидрирани са повећањем наслова етанола (30 процената током 30 минута, 70 процената током 30 минута, 95 процената током 30 минута и 2 × 100 процената током 60 минута). Након корака просветљења у толуену (2 × 120 мин), органи су укључени смешом парафинтолуена (1В/1В) током 90 мин, затим парафином (2 × 120 мин). Коначно, органи су уграђени у парафин пре сечења на 7 μм (микротом Леитз 1512). Секције панкреаса и јетре су обојене хематоксилином и еозином.Бубрега делови аорте су обојени Массоновим трихромом да би се показала фифиброза/колаген.

Пре бојења хематоксилином и еозином, пресеци су депарафинизовани и инкубирани у толуену (2 × 5 мин), затим хидратисани смањењем наслова етанола (100 процената, 95 процената и 70 процената, респективно) током 5 мин. Затим, за бојење хематоксилином и еозином, након 20 минута испирања, ћелијска језгра су обојена потопљеним у хематоксилин током 5 минута, након чега је уследило 15 минута испирања водом. За бојење цитоплазме, секције су уроњене у 1% еозина током 5 минута, а затим испране 2 минута. Након бојења, пресеци су дехидрирани са 100% етанолом (2 × 1/2 мин) и толуеном (2 × 2 мин). Массоново трихромно бојење, након хидратације,бубрега, а пресеци аорте су рефиксирани у Боуин-овом раствору за 1 сат/56 степени. Затим, након 10 мин прања, пресеци су обојени у Веигертовом гвожђем хематоксилину током 2 мин. После 10 мин испирања, секције су потопљене у фуксинску киселину на 3 мин, а након 10 мин испирања, диференцирана је фосфомолибдна киселина 15 мин. За бојење колагена, делови су пребачени директно у светло зелену 15 минута. После 2 мин диференцијације у 1 проценту сирћетне киселине, пресеци су дехидрирани кроз 95 процената и 100 процената етанола током 1 мин сваки, а затим очишћени у толуену (2 × 1 мин) [19–21].

Коначно, делови обојени на ламелама су постављени најважније. Након сушења, микроскопско посматрање је направљено коришћењем очног система 40к објектива светлосног микроскопа Олимпус Токио (Јапан).

Да би се одредио ефекат лека на ткиво панкреаса, израчунат је број и пречник ћелија острваца панкреаса. За квантификацију колагена убубрегасекције, резултати су оцењени од нула до три (0: без колагена, 1: слаб колаген, 2: умерен колаген и 3: јак колаген) [22]. Ефекат лечења на аорту је процењен мерењем пречника аорте, а оштећење јетре је разјашњено развојем липидних капљица.

2.11. Статистичка анализа.

Све вредности су изражене као средња вредност ± СЕМ. Статистичка анализа и поређење средњих вредности обављени су коришћењем непарног Студентовог теста за поређење средњих вредности две групе и упареног Студентовог теста за поређење две средње вредности унутар исте групе. Да би се утврдио заштитни ефекат лека набубрезии јетре, коришћен је хи-квадрат тест. п вредности<0.05 were="" considered="">

3. Резултати

3.1. Ефекат лечења лековима на глукозу у крви наташте код СТЗ-

Индуковани дијабетички пацови. Код нелечених контролних пацова са дијабетесом, примећено је значајно повећање глукозе у крви наташте у поређењу са нормалним контролним пацовима. Третман са 200 мг/кг АкТх смањио је ниво глукозе у крви од 1. недеље примене, а овај ефекат је био значајан у 3. (п < 0.001)="" и="" 4.="" недељу="" (п="">< 0,05)="" у="" поређењу="" са="" нелеченим="" пацовима="" са="" дијабетесом.="" третман="" са="" 50="" мг/кг="" еатх="" смањио="" је="" хипергликемију="" од="" 2.="" недеље,="" а="" овај="" ефекат="" је="" био="" значајан="" (п="">< 0,05)="" у="" 3.="" и="" 4.="" недељи.="" током="" 2.,="" 3.="" и="" 4.="" недеље,="" еа*="" ефекат="" је="" био="" статистички="" сличан="" оном="" од="" 10="" мг/кг="" акарбозе="" (слика="">

3.2. Ефекат лекова на активност глукозидазе, ин виво студија.

Код нормалних контролних пацова, глукоза у крви је повећана на 1,48 г/л,30 мин након пуњења сахарозом, а затим се враћа на нормалну вредност за 120 мин, док је код нелечених дијабетичких пацова гликемија била повећана на 2,76 г/л на 30 мин пуњења сахарозом да би се постигла 2,85 г/л на 120 мин. 50 мг/кг ЕаТх је значајно (п < 0,05)="" спречило="" хипергликемију="" изазвану="" оптерећењем="" сахарозом="" на="" 30="" и="" 60="" минута="" у="" поређењу="" са="" нетретираним="" дијабетичким="" пацовима.="" у="" групи="" од="" 200="" мг/кг="" актх="" показано="" је="" антихипергликемијско="" дејство.="" ниво="" глукозе="" у="" крви="" достигао="" је="" 2,63="" г/л="" и="" 2,70="" г/л="" на="" 30="" и="" 60="" мин,="" а="" смањио="" се="" на="" 2,21="" г/л="" на="" 120="" мин.="" 10="" мг/кг="" акарбозе="" је="" значајно="" (п="">< 0,01)="" спречило="" хипергликемију="" изазвану="" оптерећењем="" сахарозом="" на="" 30,="" 60="" и="" 120="" минута="" у="" поређењу="" са="" контролом="" дијабетеса.="" ефекат="" акарбозе="" био="" је="" статистички="" сличан="" еатхтхеффффецт="" (слика="">

3.3. Ефекат лека

Лечење телесне тежине, уноса хране и воде. Повећање телесне тежине код нелечених дијабетичких пацова је значајно (п < {{0}}.05)="" смањено="" у="" поређењу="" са="" нормалним="" пацовима.="" актх="" је="" значајно="" (п="">< 0.05)="" спречио="" пад="" телесне="" тежине="" у="" поређењу="" са="" нелеченим="" дијабетичким="" пацовима.="" пацови="" третирани="" еатх="" и="" акарбозом="" нису="" значајно="" (п=""> 0.05) променили повећање телесне тежине у поређењу са нетретираним пацовима са дијабетесом. На крају третмана, унос воде се није променио код нетретираних дијабетичких пацова, АкТх, ЕаТх и групе акарбозе у поређењу са подацима пре третмана, док је унос хране значајно повећан код дијабетичких пацова и пацова третираних АкТх-, ЕаТх- и акарбозом. (п < 0,05,="" п="">< 0,05,="" п="">< 0,05,="" а="" дп="">< 0,01,="" респективно)="" у="" поређењу="" са="" пре="" примене="" лека="" (табела="">

3.4. Ефекат лечења лековима на параметре урина.

После {{0}}недељног периода лечења, креатинин и гликозурија у урину су значајно повећани (п < 0.05="" и="" п="">< 0,001,="" респективно)="" код="" нелечених="" дијабетичких="" пацова="" у="" поређењу="" са="" нормални="" пацови.="" орална="" примена="" актх="" је="" значајно="" смањила="" (п="">< 0,05)="" креатинин="" у="" урину="" у="" поређењу="" са="" нелеченим="" дијабетичким="" пацовима,="" али="" није="" примећена="" значајна="" разлика="" у="" гликозурији="" у="" поређењу="" са="" нелеченим="" дијабетичким="" пацовима.="" еатх="" третман="" је="" спречио="" повећање="" креатинина="" у="" урину="" у="" поређењу="" са="" нормалним="" пацовима;="" међутим,="" еатх="" није="" значајно="" променио="" гликозурију.="" с="" друге="" стране,="" ефекат="" актх="" и="" еатх="" на="" креатинин="" и="" гликозурију="" у="" урину="" био="" је="" статистички="" сличан="" оном="" код="" 10="" мг/кг="" акарбозе.="" коначно,="" није="" било="" значајне="" разлике="" у="" запремини="" урина="" када="" се="" упоређују="" подаци="" пре="" и="" после="" третмана="" са="" актх,="" еатх="" или="" акарбозом="" (табела="">

3.5. Ефекат лечења лековима на биохемијске параметре.

После {{0}}недељног периода лечења, ХбА1ц је значајно повећан (п < 0.05),="" код="" нелечених="" дијабетичких="" пацова,="" у="" поређењу="" са="" нормалним="" пацовима.="" орална="" примена="" актх="" спречила="" је="" повишење="" хба1ц="" у="" поређењу="" са="" нормалним="" пацовима.="" на="" крају="" периода="" лечења,="" количина="" гликогена="" у="" јетри="" је="" значајно="" смањена="" (п="">< 0,05)="" код="" нелечених="" дијабетичких="" пацова="" у="" поређењу="" са="" нормалним="" пацовима.="" третмани="" ак*="" и="" еа*="" нису="" показали="" значајан="" ефекат="" на="" гликоген="" у="" јетри="" у="" поређењу="" са="" нетретираним="" дијабетичким="" пацовима,="" док="" третман="" акарбозом="" није="" променио="" количину="" гликогена="" у="" јетри="" у="" поређењу="" са="" нормалним="" пацовима.="" коначно,="" резултати="" укупног="" холестерола="" и="" триглицерида="" показују="" да="" нема="" значајне="" промене="" након="" третмана="" актх,="" еатх="" или="" акарбозом="" у="" поређењу="" са="" нормалним="" и="" дијабетичким="" пацовима="" (табела="">

3.6. Ефекат лечења лековима на тежину органа.

Табела 4 приказује јетру,бубрегаи тежину срца на крају периода лечења. Резултати указују на тобубрегатежина је значајно повећана код нелечених дијабетичких пацова у поређењу са нормалним пацовима. Третман са 200 мг/кг АкТх или 50 мг/кг ЕаТх није променио тежину јетре, бубрега и срца у поређењу са нелеченим дијабетичким пацовима, док постоји значајно повећање тежине јетре и срца код пацова третираних акарбозом у поређењу са нелеченим дијабетичким пацовима .

3.7. Хистопатолошко посматрање

3.7.1. Промене панкреаса.

Светлосно микроскопско посматрање ћелија острваца панкреаса код нормалних пацова показује нормалан хистолошки изглед са великим пречником и високом густином гранулације (Слика 3). Код нелечених дијабетичких пацова, значајно смањење пречника и броја ћелија острваца (п < 0.001="" и="" п="">< 0.01,="" респективно="" )="" примећено.="" третмани="" са="" 200="" мг/кг="" актх="" значајно="" су="" спречили="" смањење="" пречника="" и="" броја="" ћелија="" лангерхансовог="" острва="" (п="">< 0,01="" и="" п="">< 0,05,="" респективно).="" истовремено,="" 50="" мг/кг="" еатх="" има="" значајно="" (п="">< 0,05)="" заштићену="" пречник="" и="" број="" ћелија="" од="" редукције.="" третман="" са="" 10="" мг/кг="" акарбозе="" је="" спречио="" значајно="" (п="">< 0,05)="" смањење="" броја="" ћелија="">

3.7.2. Промене бубрега.

Массоново бојење означава плаво/зелена колагена влакна, смеђа језгра, цитоплазму црвених мишићних влакана и наранџаста крвна зрнца. Минимални тубулоинтерстицијски колаген је примећен у нормалној групи (Слика 4). Значајно повећање (п < 0.0}1)="" тубулоинтерстицијалног="" колагена="" је="" откривено="" код="" нелечених="" дијабетичких="" пацова.="" третман="" са="" 20{{10}}="" мг/кг="" актх="" и="" 50="" мг/кг="" еатх="" су="" значајно="" спречили="" (п="">< 0,001="" и="" п="">< 0,05)="" тубулоинтерстицијски="" колаген="" у="" поређењу="" са="" нетретираним="" дијабетичким="" пацовима,="" али="" третман="" са="" 10="" мг/кг="" акарбозе="" није="" значајно="" променио="" (п=""> 0,05). С друге стране, гломерули колаген је примећен код 33,3 одсто нормалних пацова. Код дијабетичких пацова, гломерули колаген је откривен код свих пацова (100 процената). Третман са 200 мг/кг АкТх значајно је смањио (п < 0,05)="" колаген="" гломерула="" на="" 40="" процената,="" али="" еа*="" и="" акарбоза="" нису="" (слика="">

3.7.3. Промене јетре.

Испитивање пресека обојених хематоксилином и еозином показало је да нормални пацови имају нормалан хистолошки изглед. Код нелечених дијабетичких пацова примећена је значајна дегенеративна промена у ткиву јетре. Липидне капљице су се појавиле код свих пацова (100 процената). Третман са 200 мг/кг АкТх и 50 мг/кг ЕаТх је значајно (п < 0,05)="" умањио="" овај="" ефекат.="" проценат="" заштите="" био="" је="" 60,="" односно="" 50="" одсто.="" међутим,="" третман="" са="" 10="" мг/кг="" акарбозе="" није="" ублажио="" ово="" оштећење="" јетре="" (слика="">

3.7.4. Промене аорте.

Светлосно микроскопско посматрање показује да су нелечени дијабетички пацови имали нормалан пречник аорте у поређењу са нормалним пацовима. Третман са 200 мг/кг АкТх, 50 мг/кг ЕаТх или 10 мг/кг акарбозе није значајно променио пречник аорте у поређењу са нормалним и дијабетичким пацовима (Слика 6).

4. Дискусија

У овој студији смо по први пут показали антидијабетички ефекат средњерочне примене Т. хирсута (4 недеље) и његову превенцијубубрежнии компликације на јетри код дијабетичких пацова изазваних СТЗ.

Наши резултати су показали да средњорочни третман са 200 мг/кг АкТх или 50 мг/кг ЕаТх значајно смањује глукозу у крви наташте код дијабетичких пацова третираних СТЗ у поређењу са пацовима са дијабетесом који нису лечени СТЗ. ЕаТх је показао сличну инхибиторну активност -глукозидазе у поређењу са 10 мг/кг акарбозе, али АкТх није инхибирао активност -глукозидазе након пуњења сахарозом. Ови резултати указују на то да је средњорочни антихипергликемијски ефекат Еа* повезан са инхибицијом интестиналне -глукозидазе. Дакле, овај налаз потврђује наше претходне резултате [13], док се чини да је антидијабетички ефекат Ак* повезан са другим механизмом од -глукозидазног пута. Поред тога, приметили смо смањење нивоа ХбАц1 код дијабетичких пацова третираних Ак*, док третман Еа* није променио нивое ХбАц1 у поређењу са нелеченим дијабетичким пацовима. Ово објашњава зашто се инхибитори -глукозидазе често прописују са другим антидијабетичким лековима у лечењу дијабетеса.

Хистопатолошка студија пресека панкреаса показала је да примена АкТх и ЕаТх током 4 недеље значајно повећава пречник и број ћелија у Лангерхансовим острвцима. Сличне студије су доказале да многи биљни екстракти значајно обнављају пречник оточића и број ћелија код дијабетичких пацова [23–25].

Сходно томе, вероватан механизам деловања АкТх у контроли нивоа глукозе у крви може бити повећање секреције инсулина из ћелија панкреаса. Као и код других могућих механизама, АкТх може да сензибилизира инсулински рецептор на инсулин или да стимулише матичне ћелије Лангерхансових острваца у панкреасу СТЗ-индукованих дијабетичких пацова [25].

Стога закључујемо да се антихипергликемична фитокемијска једињења присутна у АкТх разликују од оних у ЕаТх.

Многе студије су доказале да секундарни метаболити као што су флавоноиди, танини и терпеноиди имају потенцијалне инхибиторне ефекте на алфа-глукозидазу [26–28]. У претходној студији нашег тима, фракција Т. хирсутахас богата полифенолима показала је снажан антидијабетички ефекат код дијабетичких пацова[29]. Дакле, инхибиторно дејство ЕаТх на -глукозидазу је вероватно последица присуства флавоноида.

Добро је познато да је дијабетес повезан са макроваскуларним и микроваскуларним компликацијама као што је нефропатија. Статистике су показале да од свих пацијената на дијализи, дијабетичари представљају 20,6 процената у 2001. години наспрам 13,1 процената у 1995. и 6,9 процената у 1989. Стопа морталитета пацијената на дијализи је незнатно већа код дијабетичара него код недијабетичара (241,4/10053 вс. особа-година) [30]. Просечно преживљавање дијабетеса типа 2 на дијализи је приближно 3 године [31, 32]. Дијабетичку нефропатију карактерише акумулација неких протеина као што је колаген у гломеруларном мезангуму и у тубулоинтерстицијалном простору који доводе добубрежнифиброза и тако дабубрежнинеуспех [33–35]. У овој студији смо показали да средњорочна орална примена 200 мг/кг АкТх или 50 мг/кг ЕаТх спречава повећање креатинина у урину и тубулоинтерстицијални бубрежни колаген у поређењу са нелеченим дијабетичким пацовима као што је приказано убубрегахистопатолошки резултати. Ови налази показују да АкТх и ЕаТх могу заштитити од фиброзе бубрега кроз инхибицију акумулације протеина екстрацелуларног матрикса (ЕЦМ). Ови резултати су слични другим етнофармаколошким студијама које су показале да бели лук и Сцлероцариабирреа побољшавају процес реналне фиброзе код дијабетичке нефропатије [36, 37]. Заштитни ефекат против бубрежне акумулације ЕЦМ протеина је последица инхибиције протеин киназе Б/мета сисара сигналног пута рапамицина (ПКБ/мТОР) [38]. Недавне истраживачке студије су показале да активација ПКБ изазива активацију мТОРЦ1 и његовог низводног протеина п70С6К, који су критични регулатори ћелијског раста, пролиферације ћелије и синтезе протеина [39, 40].

Ефекатцистанцхепобољшатифункцију бубрега

Сходно томе, лечење дијабетес мелитуса са АкТх и ЕаТх једињењима може имати корисне ефекте набубрежнифункција код пацијената са дијабетесом

Докази сугеришу да је код дијабетичких пацова примећена комплексна промена у активностима антиоксидативних ензима [41]. Ова промена доводи до оштећења ткива и игра важну улогу у патогенези дијабетичких компликација. У овој студији, хистопатолошки резултати јетре показују да нелечени дијабетички пацови развијају стеатозу јетре коју карактеришу капљице липида. Друге студије су откриле да је јетра некротизована код СТЗ-индукованих дијабетичких пацова [42]. СТЗ се сматра класичним моделом индукције дијабетеса јер изазива токсичност за ћелије панкреаса и ћелијску смрт [43], што доводи до хипоинзулинемије и хипергликемије. Инсулин игра важну метаболичку улогу као супресор липолизе у масном ткиву [44]. Дакле, хипоинсулинемија код дијабетеса доводи до повећаног ослобађања слободних масних киселина (ФФА) у крвоток [45] и прилива киселина у јетру. Интрахепатична акумулација триглицерида настаје када прилив липида у јетру надмаши капацитет јетре да извози триглицериде у крвоток [45] што узрокује развој стеатозе јетре као дијабетичке компликације [46].

У овој студији, хистопатолошки подаци показују да средњорочна орална примена 200 мг/кг АкТх или 50 мг/кг ЕаТх значајно штити јетру под стеатозом кроз смањење акумулације липидних капљица. Сличне налазе су известили Елиза ет ал. [47] где је Цостус специосус смањио поремећај јетре. Поред тога, друге студије су показале да Цамеллиа олеифера седамелиорира стеатозу јетре путем регулације ФФА [48], а куркумин смањује стеатохепатитис и таложење липида тако што је антиоксидант и има улогу антиинфламаторног и хватача слободних радикала [49]. Међутим, третман акарбозом није имао ово својство за заштиту јетре. Ово потврђује нежељени ефекат овог лека на јетру [50].

Штавише, Т. хирсута садржи стероле, кумарине, терпене, танине, алифатични алкохол, лактон, алкане и алканоле [51]. Занимљиво је да антихипергликемијски и антидијабетички ефекти АкТх и ЕаТх могу бити последица присуства ових фитокемикалија или других непознатих једињења.

5. Закључци

У закључку, наша студија је показала да је средњорочна примена АкТх и ЕаТх Т. хирсута имала потенцијал да смањи ниво глукозе у крви код пацова са дијабетесом изазваних СТЗ. Антихипергликемијски ефекат ЕаТх може се делимично објаснити инхибицијом активности интестиналне глукозидазе. А антихипергликемијска активност АкТх може се приписати стимулацији лучења инсулина из ћелија острваца панкреаса. Поред тога, АкТх и ЕаТх су показали кључни превентивни ефекат противбубрежникомпликације фиброзе и стеатозе јетре. Стога, ови налази сугеришу да се АкТх и ЕаТх могу сматрати ефикасним оралним антидијабетичким третманом. Тренутно су наше студије фокусиране на изолацију и идентификацију активних једињења ЕаТх и АкТх, која су одговорна за антидијабетички ефекат Т. хирсута.

Скраћенице

АкТх: Водени екстракт плус имелаеа хирсута

ДМ1: дијабетес типа 1

ДМ2: дијабетес типа 2

ЕаТх: Етил ацетатна фракција плус имелаеа хирсута

ЕЦМ: Екстрацелуларни матрикс

ЕСРД: Завршна фазабубрежниболест

ФФА: Слободне масне киселине

мТОР: Циљ рапамицина код сисара

ПКБ: Протеин киназа Б

СТЗ: Стрептозотоцин

Т. хирсута: плус имелаеа хирсута

УМПО: Универзитет Хербариум Мохамед Премијер

Оујда, Мароко

СЗО: Светска здравствена организација.

Доступност података

Подаци који се користе као подршка налазима ове студије доступни су на захтев аутора.

Сукоби интереса

Аутори изјављују да нема сукоба интереса.

Признања

Аутори желе да изразе своју захвалност Рамдаоуију Кариму и Бадраоуију Мустафи за њихову техничку помоћ.

цистанцхе биенфаитсзабубрега

Из: „Повољан ефекат Тхимелаеа хирсута на дегенерацију острваца панкреаса, фиброзу бубрега и оштећења јетре“ Санае Абид

---Тхе Сциентифиц Ворлд Јоурнал