Брисање МиР-29б2/ц доводи до убрзаног старења и неуропротекције код мишева са Паркинсоновом болешћу изазваних МПТП

Апстрактан

Студије откривају везу између миР-29с у старењу и Паркинсонове болести (ПД). Овде показујемо да нивои миР-29 у серуму у 1-метил-4-фенил-1,2,3,6-тетрахидропиридином (МПТП) индукованом ПД мишеви су показали динамичке промене. Улога миР-29б2/ц у старењу и ПД проучавана је коришћењем миР-29б2/ц ген нокаут мишева (миР-29б2/ц КО). миР-29б2/ц КО мишеви су били окарактерисани значајно мањом тежином, кифозом, слабошћу мишића и абнормалним ходом у поређењу са мишевима дивљег типа (ВТ). ВТ је такође развио очигледно задебљање дермиса и смањење масног ткива. Међутим, недостатак миР-29б2/ц је ублажио МПТП-индукована оштећења допаминергичког система и глијалну активацију у нигростријаталном путу и ​​последично побољшала моторну функцију КО мишева третираних МПТП-ом. Нокаутирање миР-29б2/ц инхибира експресију инфламаторних фактора у примарним културама мешане глије, примарних астроцита или ЛПС-ом третираним са 1-метил-4-фенил пиридинијумом (МПП плус ) примарна микроглија. Штавише, недостатак миР-29б2/ц појачао је активност АМПК, али је потиснуо НФ-κБ п65 сигнализацију у глијалним ћелијама. Наши резултати показују да миР-29б2/ц КО мишеви показују фенотип сличан прогерији. Мање активиране глијалне ћелије и потиснута неуроинфламација могу довести до допаминергичке неуропротекције код миР- 29б2/ц КО мишева. Коначно, миР-29б2/ц је укључен у регулацију старења и игра штетну улогу у Паркинсоновој болести.

Кључне речи

МиР-29б2/ц; неуропротецтион; МПТП-индукована Паркинсонова болест;Цистанцхе користи.

Кликните овде да бисте добиликакви су ефекти Цистанцхеа

Увод

Паркинсонова болест (ПД) је друга најчешћа неуродегенеративна болест, коју карактерише прогресивни губитак допаминергичких неурона у супстанци нигра пар цомпацта (СНпц) средњег мозга и повећана глијална активација и неуроинфламација [1–3]. МикроРНА су кратки некодирајући РНК молекули који регулишу експресију гена на пост-транскрипционом нивоу [4, 5]. МикроРНА су укључене у регулацију развоја нервног система, пластичности неурона и неуродегенеративних болести. МикроРНА29 фамилија (миР- 29с) се састоји од два кластера гена: миР-29а/б1 и миР-29б2/ц, који се налазе на хромозому 6 и хромозому1, респективно. геном миша. миР-29а и миР-29ц имају само једну нуклеотидну разлику, док су миР-29б1 и миР-29б2 идентични у секвенци [6]. миР-29и су укључени у више биолошких процеса. Многи циљни гени миР-29и су експериментално верификовани, укључујући гене преживљавања Процелла Бцл-2, Мцл-1, Цдц42 и п85-; проапоптотички гени Пума, Бим, Бак и Бмф; и проинфламаторни цитокини ИФН- и ИЛ-12. У периферном систему, студије су показале да су миР-29 укључени у фиброзу ткива [7–9], метаболизам и регулацију имунитета [10–13].

миР-29 се широко експримирају у централном нервном систему, а њихови транскрипти постоје и у неуронима и у глијалним ћелијама [14, 15]. Повезаност између миР-29а и неуролошких болести се све више илуструје. миР-29 су укључени у регулацију производње -амилоида, и они су смањени у мозгу пацијената са АД [16, 17]; Нивои миР-29 се такође смањују код пацијената са Хантингтоновом болешћу (ХД) и код мишева модела ХД [18, 19], док се повећавају код пацијената са амиотрофичном латералном склерозом (АЛС) и АЛС мишјих модела [16, 20]. И миР-29а/б-1-дефицијентни миР-29 миР{16}с наниже регулисани мишеви показују фенотип сличан атаксији [6, 21]. Што се тиче ефеката експресије миР-29 на неуропротекцију и промоцију неуронске смрти у моделима исхемијских глодара, пријављени су супротни резултати [22, 23]. У претходним студијама приметили смо да су нивои миР-29 значајно смањени у серуму пацијената са ПД са опадајућим трендом повезаним са тежим паркинсонизмом [24]. Даље, нивои миР{26}с корелирају са перформансама памћења код пацијената са ПД [25]. Закључили смо да је миР-29б2/ц блиско повезан са ПД, али су његове физиолошке функције и патолошки механизми укључени у ПД углавном непознати.

У овој студији, нивои миР-29 у серуму миша као одговор на примену МПТП мерени су до 120 дана након ињекције. Ефекти дефицијенције миР-29б2/ц на периферна ткива проучавани су коришћењем миР-29б2/ц КО мишева. Допаминергички неуротоксин МПТП је даље коришћен за индукцију мишјег модела ПД. Затим су истраживане повреде нигростриаталног допаминергичког система, перформансе понашања и потенцијални механизми. Приметили смо да нивои миР-29 у серуму миша показују динамичке промене након примене МПТП. миР- 29б2/ц КО мишеви су показали убрзано старење, на шта указује мања телесна тежина, смањење масног ткива, кифоза, задебљање коже, слабост мишића и абнормалност хода. Међутим, недостатак миР-29б2/ц довео је до ублажавања допаминергичког оштећења и глијалне активације, а самим тим и до побољшања понашања у животињском моделу сличном ПД.

Цистанцхе пилуле

Резултат

1. Фенотип сличан прогерији код миР-29б2/ц КО мишева

миР-29б2/ц нокаут мишеви (миР-29б2/ц КО) су генерисани коришћењем ЦРИСПР-Цас9 технике. Стратегија циљања гена и генотипизација мутантних мишева представљени су на додатној слици 1. Четворомесечни и 16- миР-29б2/ц КО мишеви су имали смањену телесну тежину (слика 1А). Са три месеца старости, карактеристике миР-29б2/ц КО мишева остале су непромењене, што је доказано рендгенским микро-компјутеризованом томографијом (микро-ЦТ) скенирањем (додатна слика 2А). Није било разлика у минералној густини костију (БМД), средњој БМД трабекула, трабекуларној сепарацији, дебљини трабекуле и индексу структурног модела (СМИ) између миР-29б2/ц КО мишева и њихових ВТ колега у доби од 13 месеци ( Додатна слика 2Б). Бојењем хематоксилином и еозином (Х&Е) открили смо да 13-месечни миР-29б2/ц КО мишеви показују задебљани дермис са повећаним и продубљеним борама (Слика 1Б, 1Ц). А кифоза је била очигледна код 16-месечних миР-29б2/ц КО мишева (слика 1Ц). миР-29б2/ц КО мишеви у младости (стари 3 месеца) имали су нормално масно ткиво (додатна слика 2Ц, 2Д). Међутим, абдоминално масно ткиво (комбинована поткожна маст и висцерална маст) и смеђе масно ткиво су драматично смањени код миР-29б2/ц КО мишева у поређењу са ВТ мишевима у доби од 16 месеци (Слика 1Д). Даље, анализирани су нивои транскрипције маркера старења п21 и п53 у мозгу. Они су се значајно повећали у хипокампусу, али не и у кортексу миР-29б2/ц КО мишева у доби од шест месеци. Нивои протеина п53 и п16 у хипокампусу са недостатком миР-29б2/ц нису се разликовали од ВТ контрола. Поред тога, активност -галактозидазе, позната карактеристика ћелијског старења, није се разликовала између мозга тромесечних ВТ и миР-29б2/ц КО мишева.

Слабост мишића и абнормалност хода код миР- 29б2/ц КО мишева

Процењено је понашање мишева са недостатком миР-29б2/ц. Снага мишића је мерена тестовима Вире хангинг и Грид хангинг теста. МиР-29б2/ц КО мишеви су постигли ниже резултате од контролних мишева у тесту висеће жице (Слика 2А). А латенција до пада је била драматично краћа код миР-29б2/ц КО мишева у поређењу са панданима дивљег типа у Грид тесту висећег типа (Слика 2Б), али перформансе Ротарод теста ВТ и миР{{10} }б2/ц КО мишеви се нису значајно разликовали (слика 2Ц). Систем за анализу Цатвалк КСТ детектовао је ход животиња. Изненађујуће, и брзина и дужина корака миР-29б2/ц КО мишева су биле веће од оних код њихових колега, док су циклус корака, стајање и време замаха били краћи, а радни циклус смањен, у миР{ {15}} мишеви са недостатком б2/ц (слика 2Д).

Промене миР-29 у ПД мишјем серуму изазваном МПТП

Нивои миР-29с су се смањили у серуму пацијената са ПД у поређењу са здравим контролама [24]. У овој студији, нивои миР-29 у серуму ПД мишева су квантификовани 3, 30 и 120 дана након примене субакутног режима МПТП. Нивои миР-29а и миР-29б смањили су се 3 дана након ињекције и вратили се на почетне вредности за 30 дана, и поново опали за 120 дана. Међутим, ниво миР-29ц се није значајно променио (додатна слика 5).

Цистанцхе суплементи

Недостатак миР-29б2/ц ублажава нигростриаталне повреде изазване МПТП-ом и моторне дефиците код мишева

миР-29б2/ц нокаут мишеви и ВТ легла су убризгани МПТП да би се индуковао ПД модел. Нивои експресије п21, п53 и Паи1 у стриатуму миР-29б2/ц КО мишева и ВТ контрола нису се променили након примене МПТП. Излагање МПТП-у изазвало је значајно смањење ТХ-позитивних допаминергичких неурона у СНпц [Ф(1, 20)=5.441, П=0.0302] и ТХ-позитивних нервних терминала, ТХ протеина [Ф(1, 20)=10.5, П=0.0041] и нивои допамина, ДОПАЦ-а и ХВА у стриатуму (Слика 3А–3Д). Међутим, нигростриаталне повреде код миР-29б2/ц КО мишева третираних МПТП-ом су драматично ублажене у поређењу са ВТ контролама третираним МПТП као што су број допаминергичких неурона, густина допаминергичких нервних терминала и нивои стријаталног ТХ протеина и концентрација допамина је била значајно већа; Поред тога, промене у односима ДОПАЦ према ДА и ХВА према ДА [Ф(1, 19)=12.64, П=0.0021] су значајно ублажене (Слика 3А–3Д). Код нормалних мишева миР-29б2/ц КО убризганих физиолошким раствором, стријаталне концентрације 5-ХТ и његовог метаболита 5-ХИАА су порасле у поређењу са њиховим ВТ колегама, а концентрације НЕ биле су близу између дивљи тип и миР-29б2/ц КО мишеви (слика 3Д). Реаринг и Поле тест су коришћени за процену спонтане вертикалне активности [26, 27] и локомоторне активности мишева [28], респективно. Два дана након последње ињекције МПТП, учесталост узгоја се смањила код ВТ мишева током последња 2 минута у поређењу са нормалним ВТ контролама третираним сланим раствором. Слични експерименти нису открили ефекат дефицијенције миР- 29б2/ц на промене фреквенције узгоја изазване МПТП (Слика 3Е). Слично томе, укупно време проведено на окретање и спуштање надоле се повећало код ВТ мишева након примене МПТП-а у Поле тесту, док је укупно време било близу између нормалног физиолошког раствора и миР-29б2/ц КО мишева третираних МПТП-ом (слика 3Ф) .

Недостатак миР-29б2/ц смањује глијалну активацију изазвану МПТП-ом код мишева

Активација глијалних ћелија и неуроинфламација посредована глијалним ћелијама укључени су у патологију ПД [29]. Астроцити су се значајно повећали у нигростријаталном путу ВТ мишева, док су се ГФАП плус астроцити повећали у стриатуму, али не и у СНпц [Ф(1, 8)=5.412, П=0.0484] миР -29б2/ц КО мишеви три дана након МПТП ињекције. Значајно је да се густине астроцита нису разликовале у два региона ВТ и миР-29б2/ц КО мишева третираних МПТП-ом (Слика 4А, 4Б). Иба 1 плус микроглија повећана је у супстанцији нигра ВТ мишева и у стриатуму [Ф(1, 8)=12.74, П=0.0073] и ВТ и миР{{21} }б2/ц КО мишеви након примене МПТП. Штавише, код миР-29б2/ц КО мишева МПТП ињекција је значајно смањила густину микроглија (Слика 4Ц, 4Д).

2. Ефекти недостатка миР-29б2/ц у примарно култивисаним астроцитима

Коришћен је тест огреботина да се тестира да ли недостатак миР-29б2/ц утиче на пролиферацију и миграцију астроцита. Примарни миР-29б2/ц КО астроцити нису показали разлику у способности пролиферације и миграције. Вијабилност ћелија примарних ВТ и миР-29б2/ц КО астроцита није се манифестовала на почетку. Након МПП плус интоксикације, виталност ћелија ВТ астроцита је била већа у поређењу са контролом, док се виталност мутантних астроцита није променила [Ф(1, 18)=5.727, П=0.0278 ]. Повећани РОС производ и унос глукозе примећени су у ВТ и миР-29б2/ц КО астроцитима третираним МПП плус.

Цистанцхе тубулоса

Мерени су нивои експресије неуротрофних фактора, молекула повезаних са упалом, астроцитних А1 типа и А2 маркерских гена у МПП плус-третираним астроцитима. 12 х након изазивања, експресија БДНФ-а је била повишена у ВТ и миР-29б2/ц КО астроцитима (слика 5А). Ниво експресије ТГФ- 1 је значајно повећан у ВТ астроцитима након излагања МПП плус, док је смањен у миР- 29б2/ц КО астроцитима у поређењу са астроцитима дивљег типа и на почетку и након интоксикација (Слика 5Б). Основни ниво ТНФ транскрипта био је нижи у миР-29б2/ц КО астроцитима у поређењу са ВТ астроцитима. После третмана од 12 сати, нивои експресије ИЛ-1, ИЛ-6 и ЦОКС-2 су значајно порасли у ВТ и миР-29б2/ц астроцитима, док ТНФ транскрипт био је повишен само у ВТ астроцитима, а транскрипти ИЛ-1, ТНФ и ЦОКС-2 су смањени у миР-29б2/ц КО астроцитним ћелијама у поређењу са дивљим типовима (Слика 5Ц) . А1 маркер Х2-Т23 и А2 маркер ЦД14 били су значајно нижи у миР- 29б2/ц КО астроцитима третираним ПБС-ом у поређењу са ВТ контролама. После третмана од 12 х, А1 маркери Х2-Д1, Ггта1 и Ц3 и А2 маркери Цлцф1 и С100 10 су повећани и у ВТ и миР-29б2/ц КО астроцитима; Х2-Т23 повећан само у ВТ астроцитима; Гбп2 и ЦД14 се нису променили у два генотипа астроцита. Штавише, транскрипти Х2-Т23, Х2-Д1 и ЦД14 су смањени у миР-29б2/ц КО астроцитима у поређењу са ВТ контролама (Слика 5Д, 5Е). 12 х и 24 х након третмана, нивои АМПК протеина и фосфорилисаних АМПК протеина се нису променили у ВТ астроцитима, док се 24 х након МПП плус изазова ниво АМПК протеина смањио у миР-29б2/ ц КО астроцити, а однос п-АМПК и АМПК у мутантним астроцитима се повећао у поређењу са ВТ астроцитима и ПБС-третираним мутантним астроцитима (слика 5Ф). Поред тога, кондиционирани медијум из БВ2 ћелија третираних са ПБС или ЛПС (кратки називи ЦМ и ЛЦМ) је коришћен за стимулацију примарних астроцита ВТ и миР-29б2/ц КО мишева. Иако експресија п-АМПК протеина није промењена након 12 х третмана ЛЦМ, била је значајно већа у миР-29б2/ц КО астроцитима у поређењу са ВТ астроцитима. Приметили смо да су се пАМПК протеини повећали у оба генотипа астроцита након 24 третмана ЛЦМ. ЛЦМ стимулација је значајно повећала експресију ЦОКС- 2 протеина [Ф(2, 18)=10.29, П=0.0010], међутим, ниво ЦОКС-2 протеина у миР-29б2/ц КО астроцити су смањени у поређењу са ВТ астроцитима (Слика 5Г). Концентрација нитрита у миР-29б2/ц КО астроцитима третираним ЛЦМ је такође била значајно нижа у поређењу са ЛЦМ-третираним ВТ астроцитима [Ф(2, 30)=17, П<0.0001] (Figure 5H). Further, the expression of senescence marker genes was evaluated. 12 h-treatment of MPP+ increased p53 transcript levels in both WT and miR- 29b2/c KO astrocytes. p19 and Pai1 transcripts were elevated only in WT astrocytes, and Pai1 expression levels in miR-29b2/c KO astrocytes were decreased compared to WT astrocytes after the treatment. Moreover, Bcl-2, Bax protein levels, and the ratio of Bcl-2 to Bax did not change in WT and miR-29b2/c KO astrocytes.

3. Ефекти дефицита миР-29б2/ц у примарно култивисаној микроглији

Да би се измерио одговор микроглије са недостатком миР-29б2/ц на инфламаторне стимулусе, коришћен је ЛПС. Ниво експресије БДНФ био је нижи у миР-29б2/ц КО микроглије на почетку. Четири и осам сати након третмана ЛПС-ом, количина транскрипата ИЛ-1, ИЛ-6, ТНФ и ЦОКС-2 је повећана, док је експресија ИГФ-1 смањена у ВТ и миР-29б2/ц КО микроглијалне ћелије, експресија БДНФ се смањила само у ВТ микроглијама [Ф(2, 27)=41.5, П<0.0001]. IL-10 transcript increased in WT and miR-29b2/c KO microglia [F(2, 27) = 3.753, P=0.0365], and TGF-β1 transcript decreased in WT microglia at eight hours after the LPS challenge. BDNF and TGF-β1 transcripts were not changed in miR-29b2/c KO microglia. In addition, IL-6 transcripts were significantly reduced in miR-29b2/c KO microglia after the challenge compared to WT controls, IGF-1 and IL-10 transcripts were markedly higher in miR-29b2/c KO microglia after four and eight hours of intoxication, respectively (Figure 6A–6C). At baseline, the p-AMPK protein level and pAMPK to AMPK ratio were dramatically elevated in miR-29b2/c KO microglia when compared with WT microglia. 24 h after the treatment of LPS, p-AMPK level [F(1, 17) = 5.066, P=0.0379] and the ratio [F(1, 17) = 5.537, P=0.0309] were elevated only in WT microglia (Figure 6D). At one hour after the treatment, the phosphorylated-NF-κB p65 (p-p65) proteins and pp65 to p65 ratio, but not p65 proteins, increased in wildtype and miR-29b2/c KO microglial cells, yet the ratio decreased modestly in miR-29b2/c KO microglial cells when compared with WT microglia (p=0.071) (Figure 6E). The expression of COX-2 was enhanced in the two genotypes of microglial cells; whereas, the level of COX-2 in mutant microglia decreased when compared with WT controls after 24 h-treatment of LPS [F(1, 17) = 5.33, P=0.0338] (Figure 6D). Nitrite product was induced by the treatment of LPS in both genotypes of microglia, however, it was dramatically lower in miR- 29b2/c KO microglia at baseline and after the treatment of LPS [F(1, 20) = 14.03, P=0.0013] (Figure 6F).

Дискусија

Експресија чланова породице миР-29 се појачава у више ткива када појединци старе [30–32]. Радови из наше и других лабораторија показали су везу између миР-29 и Паркинсонове болести [33]. У овој студији проучавана је улога миР- 29б2/ц у старењу и Паркинсоновој болести. миР-29 испољавају ефекте против старења и старења у зависности од ткива, врсте и фазе развоја. Открили смо да 3-мјесечни миР-29б2/ц КО мишеви имају нормалан скелет и масно ткиво, а 4-мјесечни миР- 29б2/ц КО мишеви показали мању телесну тежину у поређењу са својим ВТ колегом, што је у сагласности са другим студијама [11, 34]. Слабост мишића и нестабилан ход откривени су код 3-месечних миР- 29б2/ц КО мишева. Тринаестомесечни миР-29б2/ц КО мишеви су показали задебљање дермиса. Међутим, имали су нормалну фину структуру бутне кости. Смањење телесне тежине је постојало код 16-месечних миР-29б2/ц КО мишева. У овом узрасту, миР-29б2/ц КО мишеви су имали мање абдоминалне масти и смеђе масти и испољили су очигледну кифозу. миР-29 су укључени у п{35}посредовано заустављање ћелијског циклуса [35, 36] и п16/Рб вођено ћелијско старење [37]. Међутим, ћелијско старење није било очигледно у миР-29б2/ц КО мишјем мозгу. Стога, иако миР-29б2/ц доприноси регулацији старења, његове улоге у периферним ткивима и мозгу могу бити различите.

Нивои миР-29 у серуму су смањени код пацијената са ПД у поређењу са здравим контролама [24]. Овде смо открили да експресија миР-29а у ПД мишјем серуму варира од 3 до 120 дана након примене МПТП. миР-29 су у изобиљу у мозгу [6, 30]. Проласком кроз ГЕО профил, откривено је да је експресија миР{{8}ц повећана у субстантиа нигра пацијената са ПД (п=0.0059, према Манн-Вхитнеи тесту), штавише, миР{{12 }}ц експресија у горњем фронталном гирусу се није разликовала (п=0.47, према Студент-Т-тесту), у поређењу са контролним субјектима (додатна слика 10). Овде су миР-29б2/ц КО мишеви били изазвани МПТП-ом да изазову повреде сличне ПД. Мутантни мишеви су показали мање озбиљне повреде нигростриаталног допаминергичког система и блажу глијалну активацију, а потом и отпорност на понашање у одређеној мери. Дакле, миР-29б2/ц има штетну улогу у патологији ПД. Приметили смо да се у МПТП-индукованом моделу ПД миша, стријатни нивои транскрипата п21, п53 и Паи1 нису променили, што сугерише да се ћелијско старење можда неће догодити. Старење се сматра фактором високог ризика за развој ПД [38], међутим, промене у мозгу које су повезане са старењем, посебно у допаминергичком систему, могу бити релевантнији фактор.

Примарна глија из ВТ и миР-29б2/ц КО мишева је култивисана да би се истражили основни механизми. МПП плус третман је повећао експресију ГДНФ и смањио експресију ИЛ-1 у мешаној глији са недостатком миР-29б2/ц. МПП плус је такође повећао експресију проинфламаторних гена у ВТ астроцитима, али не и у миР- 29б2/ц-дефицијентним астроцитима. Слично, мутантни астроцити су произвели мање НО у поређењу са ВТ астроцитима након што су били изложени кондиционираном медијуму БВ2 ћелија третираних ЛПС-ом. У примарној култури микроглије, у поређењу са ЛПС-третираним ВТ контролама, транскрипти антиинфламаторног цитокина ИЛ-10 и неуротрофичног фактора ИГФ-1 били су значајно виши, а транскрипти про-инфламаторног цитокина ИЛ{ {15}} смањио ЛПСтретирани миР-29б2/ц КО микроглије. Нивои НО су смањени у миР-29б2/ц КО микроглијама на почетку и након интоксикације ЛПС. Студије су показале да су миР-29и и многи предвиђени циљни гени укључени у метаболичке процесе [34, 39–41]. Као суштински регулатор, доказано је да је АМПК протективан у ПД када се активира [42]. Активација АМПК стимулише Сиртуин 1 и индиректно инхибира активацију НФ-κБ и низводне циљне гене запаљења [43]. Приметили смо да су ниво фосфорилисаног-АМПК протеина и однос п-АМПК према АМПК повећани у миР- 29б2/ц КО астроцитима третираним ЛЦМ и МПП плус третираним миР- 29б2/ц КО. Ниво ЦОКС-2 протеина је смањен у ЛЦМ-третираним мутантним астроцитима у поређењу са ВТ астроцитима. На почетку, активност АМПК је била повишена у миР-29б2/ц КО микроглијама. Количина ЦОКС-2 протеина је значајно смањена у миР-29б2/ц КО микроглије у поређењу са ВТ контролама након третмана ЛПС. Под ЛПС третманом, однос п-п65 и п65 је благо смањен у мутантној микроглији, што имплицира смањени НФ-κБ сигнални пут. Наши резултати показују да појачана активност АМПК и смањени инфламаторни одговор у глији штите нигростријатни пут код миР-29б2/ц КО мишева (слика 6Г). Коначно, миР-29б2/ц игра важну улогу у старењу и оштећењу нигростријаталног допаминергичког система.

Референце

1. Браак Х, Дел Тредици К. Позвани чланак: Патологија нервног система код спорадичне Паркинсонове болести. Неурологи. 2008; 70:1916–25.

2. Ванг К, Лиу И, Зхоу Ј. Неуроинфламација код Паркинсонове болести и њен потенцијал као терапијски циљ. Трансл Неуродегенер. 2015; 4:19.

3. Ванг З, Донг Х, Ванг Ј, Хуанг И, Зханг Кс, Танг И, Ли К, Лиу З, Ма И, Тонг Ј, Хуанг Л, Феи Ј, Иу М, ет ал. Просурвивал и анти-инфламаторне улоге НФ-κБ ц-Рел у моделима Паркинсонове болести. Редок Биол. 2020; 30:101427.

4. Зху С, Ву Х, Ву Ф, Ние Д, Схенг С, Мо ИИ. МикроРНА- 21 циља гене супресора тумора у инвазији и метастазама. Целл Рес. 2008; 18:350–59.

5. Киу Л, Зханг В, Тан ЕК, Зенг Л. Дешифровање функције и регулације микроРНА у Алцхајмеровој болести и Паркинсоновој болести. АЦС Цхем Неуросци. 2014; 5:884–94.

6. Пападопоулоу АС, Сернеелс Л, Ацхсел Т, Мандемакерс В, Цаллаертс-Вегх З, Доолеи Ј, Лау П, Аиоуби Т, Радаелли Е, Спиназзи М, Неуманн М, Хеберт СС, Силахтароглу А, ет ал. Недостатак кластера миР-29а/б-1 доводи до атаксичних карактеристика и церебеларних промена код мишева. Неуробиол Дис. 2015; 73:275–88.

7. Хиун Ј, Цхои СС, Диехл АМ, Јунг И. Потенцијална улога Хедгехог сигнализације и микроРНА-29 у фибрози јетре код мишева са недостатком ИКК. Ј Мол Хистол. 2014; 45:103–12.

8. Кин В, Цхунг АЦ, Хуанг КСР, Менг КСМ, Хуи ДС, Иу ЦМ, Сунг ЈЈ, Лан ХИ. ТГФ-/Смад3 сигнализација промовише фиброзу бубрега инхибирањем миР-29. Ј Ам Соц Непхрол. 2011; 22: 1462–74.

9. Ксиао Ј, Менг КСМ, Хуанг КСР, Цхунг АЦ, Фенг ИЛ, Хуи ДС, Иу ЦМ, Сунг ЈЈ, Лан ХИ. миР-29 инхибира плућну фиброзу изазвану блеомицином код мишева. Мол Тхер. 2012; 20: 1251–60.

10. Стеинер ДФ, Тхомас МФ, Ху ЈК, Ианг З, Бабиарз ЈЕ, Аллен ЦД, Матлоубиан М, Блеллоцх Р, Ансел КМ. МикроРНА-29 регулише транскрипционе факторе Т-кутије и производњу интерферона у Т ћелијама помагачима. Имунитет. 2011; 35: 169–81.

11. Доолеи Ј, Гарциа-Перез ЈЕ, Среенивасан Ј, Сцхленнер СМ, Вангоитсенховен Р, Пападопоулоу АС, Тиан Л, Сцхонефелдт С, Сернеелс Л, Дероосе Ц, Стаатс КА, Ван дер Сцхуерен Б, Де Строопер Б, ет ал. Породица микроРНА-29 диктира равнотежу између хомеостатског и патолошког управљања глукозом код дијабетеса и гојазности. дијабетес. 2016; 65:53–61.

12. Адоро С, Цубиллос-Руиз ЈР, Цхен Кс, Деруаз М, Врбанац ВД, Сонг М, Парк С, Муроока ТТ, Дудек ТЕ, Лустер АД, Тагер АМ, Стреецк Х, Бовман Б, ет ал. ИЛ-21 индукује антивирусну микроРНА-29 у ЦД4 Т ћелијама да ограничи ХИВ-1 инфекцију. Нат Цоммун. 2015; 6:7562.

13. Ма Ф, Ксу С, Лиу Кс, Зханг К, Ксу Кс, Лиу М, Хуа М, Ли Н, Иао Х, Цао Кс. МикроРНА миР-29 контролише урођени и адаптивни имуни одговор на интрацелуларну бактеријску инфекцију циљањем интерферона- . Нат Иммунол. 2011; 12:861–69.

14. Јовичић А, Росхан Р, Моисои Н, Прадерванд С, Мосер Р, Пиллаи Б, Лутхи-Цартер Р. Свеобухватне анализе експресије миРНА специфичних за тип неуралне ћелије идентификују нове детерминанте спецификације и одржавања неуронских фенотипова. Ј Неуросци. 2013; 33:5127–37.

15. Оуианг ИБ, Ксу Л, Лу И, Сун Кс, Иуе С, Ксионг КСКС, Гиффард РГ. МиР-29а обогаћен астроцитима циља ПУМА и смањује рањивост неурона на исхемију предњег мозга. Глиа. 2013; 61:1784–94.

16. Схиоиа М, Обаиасхи С, Табуноки Х, Арима К, Саито И, Исхида Т, Сатох Ј. Аберантна експресија микроРНА у мозгу неуродегенеративних болести: миР-29а смањен у мозгу Алцхајмерове болести циља неуронски навигатор 3. Неуропатхол Аппл Неуробиол. 2010; 36:320–30.

17. Хеберт СС, Хорре К, Ницолаи Л, Пападопоулоу АС, Мандемакерс В, Силахтароглу АН, Кауппинен С, Делацоурте А, Де Строопер Б. Губитак кластера микроРНА миР-29а/б-1 спорадично Алцхајмерова болест корелира са повећаном експресијом БАЦЕ1/бета-секретазе. Проц Натл Ацад Сци УСА. 2008; 105:6415–20.

18. Јохнсон Р, Зуццато Ц, Белиаев НД, Гуест ДЈ, Цаттанео Е, Буцклеи Њ. Пут дисрегулације гена заснован на микроРНК код Хантингтонове болести. Неуробиол Дис. 2008; 29:438–45.

19. Пацкер АН, Ксинг И, Харпер СК, Јонес Л, Давидсон БЛ. Бифункционална микроРНА миР-9/миР-9* регулише РЕСТ и ЦоРЕСТ и смањена је код Хантингтонове болести. Ј Неуросци. 2008; 28: 14341–46.

20. Нолан К, Митцхем МР, Јименез-Матеос ЕМ, Хенсхалл ДЦ, Цонцаннон ЦГ, Прехн ЈХ. Повећана експресија микроРНА-29а код АЛС мишева: функционална анализа њене инхибиције. Ј Мол Неуросци. 2014; 53:231–41.

21. Росхан Р, Схридхар С, Сарангдхар МА, Баник А, Цхавла М, Гарг М, Сингх ВП, Пиллаи Б. Обарање миР-29 специфично за мозак доводи до смрти неуронских ћелија и атаксије код мишева. РНА. 2014; 20: 1287–97.

22. Кханна С, Ринк Ц, Гхооркханиан Р, Гниавали С, Хеигел М, Вијесингхе ДС, Цхалфант ЦЕ, Цхан ИЦ, Банерјее Ј, Хуанг И, Рои С, Сен ЦК. Губитак миР-29б након акутног исхемијског можданог удара доприноси смрти нервних ћелија и величини инфаркта. Ј Цереб Блоод Флов Метаб. 2013; 33:1197–206.

23. Схи Г, Лиу И, Лиу Т, Иан В, Лиу Кс, Ванг И, Схи Ј, Јиа Л. Упрегулисани миР-29б промовише смрт неуронских ћелија инхибирањем Бцл2Л2 након исхемијске повреде мозга. Екп Браин Рес. 2012; 216:225–30.

24. Баи Кс, Танг И, Иу М, Ву Л, Лиу Ф, Ни Ј, Ванг З, Ванг Ј, Феи Ј, Ванг В, Хуанг Ф, Ванг Ј. Смањење регулације микроРНА у крвном серуму 29 породице код пацијената са Паркинсоновом болешћу . Сци Реп. 2017; 7:5411.

25. Хан Л, Танг И, Баи Кс, Лианг Кс, Фан И, Схен И, Хуанг Ф, Ванг Ј. Удружење серумске микроРНА{1}} породице са когнитивним оштећењем код Паркинсонове болести. Старење (Албани НИ). 2020; 12:13518–28.

26. Цхинта СЈ, Воодс Г, Демариа М, Ране А, Зоу И, МцКуаде А, Рајагопалан С, Лимбад Ц, Мадден ДТ, Цамписи Ј, Андерсен ЈК. Ћелијско старење је изазвано неуротоксином паракватом из животне средине и доприноси неуропатологији повезаној са Паркинсоновом болешћу. Целл Реп. 2018; 22:930–40.

27. Виллард АМ, Боуцхард РС, Гиттис АХ. Диференцијална деградација моторичких дефицита током постепеног исцрпљивања допамина са 6-хидроксидопамином код мишева. Неуросциенце. 2015; 301:254–67.

28. Кам ТИ, Мао Кс, Парк Х, Цхоу СЦ, Каруппагоундер СС, Уманах ГЕ, Иун СП, Брахмацхари С, Паницкер Н, Цхен Р, Андраби СА, Ки Ц, Поириер ГГ, ет ал. Поли(АДП-рибоза) покреће патолошку -синуклеинску неуродегенерацију код Паркинсонове болести. Наука. 2018; 362:еаат8407.

29. Хуанг Д, Ксу Ј, Ванг Ј, Тонг Ј, Баи Кс, Ли Х, Ванг З, Хуанг И, Ву И, Иу М, Хуанг Ф. Динамичке промене у нигростријаталном путу у МПТП мишјем моделу Паркинсонове болести. Паркинсонова болест. 2017; 2017:9349487.

30. Угалде АП, Рамсаи АЈ, де ла Роса Ј, Варела И, Марино Г, Цадинанос Ј, Лу Ј, Фреије ЈМ, Лопез-Отин Ц. Старење и хронична реакција оштећења ДНК активирају регулаторни пут који укључује миР{{2} } и п53. ЕМБО Ј. 2011; 30:2219–32.

31. Ху З, Клеин ЈД, Митцх ВЕ, Зханг Л, Мартинез И, Ванг КСХ. МикроРНА-29 индукује ћелијско старење у мишићима који старе преко више сигналних путева. Старење (Албани НИ). 2014; 6:160–75.

32. Фенн АМ, Смитх КМ, Ловетт-Рацке АЕ, Гуерау-деАреллано М, Вхитацре ЦЦ, Годбоут ЈП. Повећана микроРНА 29б у остарјелом мозгу корелира са смањењем фактора раста сличног инсулину-1 и фракталкинског лиганда. Неуробиол Агинг. 2013; 34:2748–58.

33. Ванг Р, Ианг И, Ванг Х, Хе И, Ли Ц. МиР-29ц штити од запаљења и апоптозе у моделу Паркинсонове болести ин виво и ин витро циљајући СП1. Цлин Екп Пхармацол Пхисиол. 2020; 47:372–82.

34. Царавиа КСМ, Фањул В, Оливер Е, Роиз-Валле Д, Моран-Алварез А, Десдин-Мицо Г, Миттелбрунн М, Цабо Р, Вега ЈА, Родригуез Ф, Фуеио А, Гомез М, ЛобоГонзалез М, ет ал. Регулаторна оса микроРНА-29/ПГЦ1 је критична за метаболичку контролу срчане функције. ПЛоС Биол. 2018; 16:е2006247.

35. Варела И, Цадинанос Ј, Пендас АМ, Гутиеррез-Фернандез А, Фолгуерас АР, Санцхез ЛМ, Зхоу З, Родригуез ФЈ, Стеварт ЦЛ, Вега ЈА, Триггвасон К, Фреије ЈМ, ЛопезОтин а Ц. протеаза је повезана са активацијом сигнализације п53. Природа. 2005; 437:564–68.

36. Парк СИ, Лее ЈХ, Ха М, Нам ЈВ, Ким ВН. миР-29 миРНА активирају п53 циљајући п85 алфа и ЦДЦ42. Нат Струцт Мол Биол. 2009; 16:23–29.

37. Мартинез И, Цазалла Д, Алмстеад ЛЛ, Стеитз ЈА, ДиМаио Д. миР-29 и миР-30 регулишу експресију Б-Миб током ћелијског старења. Проц Натл Ацад Сци УСА. 2011; 108:522–27.

38. Цоллиер ТЈ, Канаан НМ, Кордовер ЈХ. Старење и Паркинсонова болест: различите стране истог новчића? Мов Дисорд. 2017; 32:983–90.

39. Массарт Ј, Сјогрен РЈ, Лунделл ЛС, Мудри ЈМ, Францк Н, О'Горман ДЈ, Еган Б, Зиерат ЈР, Кроок А. Измењена миР- 29 експресија код дијабетеса типа 2 утиче на метаболизам глукозе и липида у скелету Мусцле. дијабетес. 2017; 66:1807–18.

40. Доолеи Ј, Лагоу В, Гарциа-Перез ЈЕ, Химмелреицх У, Листон А. миР-29а-дефицијенција не модификује ток ацинарног карцинома мишјег панкреаса. Онцотаргет. 2017; 8:26911–17.

41. Квон ЈЈ, Фацтора ТД, Деи С, Кота Ј. Систематски преглед миР-29 код рака. Мол Тхер Онцолитицс. 2018; 12:173–94.

42. Лу М, Су Ц, Киао Ц, Биан И, Динг Ј, Ху Г. Метформин спречава смрт допаминергичких неурона у моделу Паркинсонове болести изазваном МПТП/ПИ код миша путем аутофагије и митохондријалног уклањања РОС. Инт Ј Неуропсицхопхармацол. 2016; 19:пив047.

43. Салминен А, Хиттинен ЈМ, Каарниранта К. АМП-активирана протеин киназа инхибира НФ-κБ сигнализацију и инфламацију: утицај на здравље и животни век. Ј Мол Мед (Берл). 2011; 89:667–76.

Ксиаоцхен Баи 1,2, Ксиаосхуанг Зханг 1, Ронг Фанг 1, Јингхуи Ванг 1, Иуаниуан Ма 1, Зхаолин Лиу 1, Хонгтиан Донг 1, Кинг Ли 1, Јингиу Ге 1, Меи Иу 1, Јиан Феи 3,4, Руилин 4, Фанг Хуанг 1

1. Одељење за транслациону неуронауку, болница округа Јинг'ан у Шангају, Државна кључна лабораторија за медицинску неуробиологију и МОЕ Фронтиерс Центар за науку о мозгу, Институти за науку о мозгу, Универзитет Фудан, Шангај 200032, Кина

2. Одељење за рехабилитациону медицину, Шеста народна болница придруженог универзитета Јиао Тонг у Шангају, Шангај 200233, Кина

3. Школа природних наука и технологије, Универзитет Тонгји, Шангај 200092, Кина

4. Шангајски инжењерски истраживачки центар за моделе организама, Шангајски центар за моделе организама, ИНЦ, Шангај 201203, Кина