Ефекти Цистанцхе на функционално оштећење плућа, јетре и тимуса код пацова са сепсом

Апстрактан

Циљ: Проучити ефекте екстракта Цистанцхе на акутнујетра, оштећење функције плућа и тимуса код пацова са септичким шоком и истраживање лечења септичког шока.

Методе: Користите лигацију и перфорацију цекуса (ЦЛП) да бисте поновили модел септичког шока, посматрајте патолошке променејетра, плућа и тимусног ткива и одређују биолошке показатеље акутног оштећења јетре, плућа и тимуса и утицајаЦистанцхеекстракт.

Резултати: Након ЦЛП-а код пацова, митохондријално стање ИИИ, П/О однос и брзина респираторне контроле хепатоцита у групи са нормалним физиолошким раствором су значајно смањени, а активност натријум-калијум калцијум магнезијум-АТПазе митохондријалне мембране значајно је смањена; Однос тежине мокрог и сувог плућа, индекс пермеабилности алвеоларне комуникације, пермеабилност плућних капилара и малондиалдехид плућног ткива су значајно повећани, а супероксид дисмутаза је значајно смањена; проценат апоптозе тимоцита и фрагментације ДНК значајно се повећао. УЦистанцхеГрупа за администрацију, горе наведени показатељи су значајно побољшани у поређењу са групом са нормалним физиолошким раствором, достижући или приближавајући се нивоу групе са вештачком хирургијом.

Закључак:Цистанцхеима добар заштитни ефекат на акутнејетра, плућа иповреда тимусакод пацова септичког шока. Његов механизам може бити да смањи оштећење слободних радикала кисеоника у ткивима, побољша функцију ћелијске мембране и побољша имунолошку функцију тела и способност стреса.

Кључне речи:

биљни екстракти/фармакологијаЦистанцхедесертицола/фармаколошка сепса/компликације шок, сепса/пацови терапије кинеском медицином.

Ова студија је посматрала ефектеЦистанцхена моделу септичког шока пацова са акутним плућима,јетра, и оштећење тимуса и других органа, покушавајући да заштити функцију ћелије као пробој, истражује ефекат и механизамЦистанцхекод сепсе, како би се развили ефикасни заштитни лекови за лечење сепсе Направите корисна истраживања.

За више информација контактирајте:Joanna.jia@wecistanche.com

Цистанцхе тубулоса спречава болест бубрега, кликните овде да бисте добили узорак

1 . Материјал и методе

1.1 Лекови, реагенси и лекови за инструменте:

Натријум пентобарбитал (Цхина Натионал Пхармацеутицал Гроуп Схангхаи Цхемицал Реагент Цомпани), комплет малондиалдехида (МДА), комплет супероксид дисмутазе (СОД), реагенс АТПасе (Нањинг Јианцхенг Институте оф Биологицал Енгинееринг),ЦистанцхеОценио др Ванг Чижи са Одељења за традиционалну кинеску медицину, Универзитет Три клисуре) Водени децокција, Еванс Блуе. Инструмент: Хитацхи Х-600 трансмисиони електронски микроскоп, проточни цитометар (ЕПИЦС, Бецкман Цоултер), спектрофотометар типа 721.

1.2 Припрема екстракта Цистанцхе десертицола

Екстракт одЦистанцхе\ је припремљен методом лужења. Узмите 200 г суве масеЦистанцхе, ставите у чашу, додајте дестиловану воду у размери 1:10, потопите 30мин до 1х, загревајте на електричном шпорету 1х, филтрирајте и поновите поступак два пута. Сакупљени филтрат је загрејан да испари и концентрован до 1г/мЛ, а затим затворен и чуван у фрижидеру на 4 степена за каснију употребу.

1.3 Животиње и животињски модели септикемије

Здрави мужјаци СД пацова (обезбеђен од Центра за експерименталне животиње Универзитета науке и технологије Хуазхонг, тежине 200 25 ог. Животиње су насумично подељене у 3 групе, група лажне операције (, з-8), нормална контролна група физиолошког раствора (, з-8), и аЦистанцхедесертицолагрупа (један 8). Групи за лажну операцију и контролној групи дат је нормалан физиолошки раствор (1.0 мЛ/кг) путем сонде, а групи која је примењивала 1 г/мЛ (доза за давање 200 мг/кг)Цистанцхепутем сонде, лд 2 пута, и храњен до 15 дана физиологије. Контролна група са сланим раствором иЦистанцхе десертицолагрупа је користила лигацију и перфорацију цекума да би поновила модел сепсе. Пре операције животиње су имале бесплатну воду за пиће и пост 12 сати.

1.4 Мерење митохондријалне активности АТПазе јетре пацова и респираторне функције митохондрија јетре

16 сати након операције, 6г пацовајетрабрзо је стављен у медијум за одвајање од {{0}} степена (250ммол сахарозе, 2 ммол етокси-етил пиперазина 2-етилсулфонске киселине, 0,1 ммол етилендиаминтетрасирћетне киселине, пХ 7.4), коришћењем диференцијалне брзине Митохондрије пацова су припремљене центрифугалним одвајањем на ниској температури. Користите метод одређивања фосфора [2 за мерење активности АТПазе. Метода Цларк кисеоничке електроде [3] је коришћена за снимање криве редокс реакције митохондрија помоћу ЈИД-ИА мерача раствореног кисеоника, као и брзине дисања фазе ИИИ и стадијума ИВ, брзине контроле дисања (РЦР) и односа фосфора и кисеоника ( АДлП/0) су израчунати.

1.5 Хистологија плућа пацова и мерење плућне функције

Након 16 сати отворен је грудни кош и извађен леви режањ плућа. Након вагања мокре масе, печена је у рерни (80 степени, 20х) до константне тежине и израчуната је сува тежина. За садржај протеина, израчунајте индекс пропусности плућа (протеин течности алвеоларног испирања/га протеин плазме, ЛПИ). Према методи интравенске ињекције Еванс блуе коју су увели Зхоу ет ал. [4] мерене су промене плућне васкуларне пермеабилности (ПВП) пацова. За одређивање активности малондиалдехида (МДА) у плућном ткиву пацова коришћен је метод Лс тиобарбитурне киселине (ТБА). Коришћењем методе ксантин оксидазе [6] за одређивање активности СОД.

1.6 Ткиво тимуса

Физички преглед и одређивање стопе апоптозе ћелија 2 до 3 пацова у свакој групи жртвовано је у одговарајуће време након операције, интактни тимус је изолован, и направљени су рутински парафински пресеци, обојени ХЕ и посматрани под светлосним микроскопом; 2.5 фиксација глутаралдехида, Направите пресек електронским микроскопом и посматрајте га трансмисионим електронским микроскопом. Друга припрема суспензије тимоцита, проточна цитометрија, откривање броја ћелија које се налазе у апоптотичкој зони, добија се проценат апоптотичких ћелија. Према Буртону и др. Л7] (метода дифениламина), читач микроплоче детектује и израчунава проценат фрагментације геномске ДНК тимоцита.

1.7 Статистичка обрада

Експериментални подаци су изражени као средња вредност ± стандардна девијација ± с). СПСС софтвер врши једносмерну анализу варијансе и корелационе анализе. П<0.05 indicates="" a="" statistical="">

2. Резултат

2.1 Промене у стању митохондрија јетре Ⅲ, РЦР и П/О однос контролна група

Брзина дисања у стању ИИИ била је значајно нижа од оне у групи лажне операције (П<0.01). the="" breathing="" rate="" of="" state="" iv="" was="" not="" significantly="" changed="" compared="" with="" that="" of="" the="" sham="" operation="" group.="" as="" a="" result,="" the="" rcr="" of="" the="" control="" group="" was="" significantly="" lower="" than="" that="" of="" the="" sham="" operation="" group=""><0.01). the="" rcr="" in="" the="">Цистанцхегрупа третмана била је ближа групи лажне операције. Однос АДП/0 у контролној групи се смањио, а однос у групи која је примала Цистанцхе опоравио се. У поређењу са групом лажне операције, постојала је значајна разлика (П<>

2.2 Ефекат Цистанцхеа на активност митохондријалне АТПазе

Активности митохондријалне мембране калцијум-АТПазе, натријум-калијум АТПазе, магнезијум-АТПазе и калцијум-магнезијум-АТПазе хепатоцита у контролној групи биле су значајно ниже од оних у групи лажне операције. Активности ензимаЦистанцхетретиране групе биле су значајно веће од одговарајуће контролне групе, достижући ниво лажне оперативне групе.

2.3 Ефекат Цистанцхеа на апоптозу тимоцита

Резултати проточне цитометрије су показали да је у поређењу са групом лажне операције апоптоза тимоцита у контролној групи значајно повећана након операције, док јеЦистанцхеекстракт десертицола могао је ефикасно да смањи стопу апоптозе, а проценат фрагментације ДНК био је сличан оном који је откривен проточном цитометријом. Резултати су у основи исти (табела 4).

2.4 Ефекат Цистанцхеа на хистолошке промене тимуса

Парафинско посматрање тимуса у групи лажне операције није показало очигледне патолошке промене. Тимоцити су били густо распоређени у кортексу тимуса, језгро је било округло, тамноплаво обојено и мање цитоплазме; након преласка у медулу, језгро се постепено повећава, а преовлађују светлије обојене епителне ретикуларне ћелије. У контролној групи, тимусни кортекс животиња био је ретко састављен од ћелија, лимфоцити су смањени, а макрофаги повећани. Локално су примећени фокална некроза и расути ћелијски фрагменти. Ћелије медуле тимуса се нису значајно смањиле, а ћелије су биле гушће распоређене од кортикалног подручја, формирајући такозвани феномен "кортикално-медуларне инверзије". Фрагменти тимоцита животиња уЦистанцхе-примењене групе су значајно смањене, а феномен "инверзије кортекса и пулпе" је такође значајно побољшан.

Електронско микроскопско посматрање контролне групе показало је да је већи део ћелијске запремине смањен, ћелијска површина је смањена, стварање пликова, агломерација хроматина, неке ћелије су у облику полумесеца, формирана су апоптотска тела, а честа је некроза и лиза ћелија. УЦистанцхетретираној групи, промене у морфологији ћелија су значајно смањене, а феномен некрозе и лизе ћелија је значајно побољшан.

3. Дискусија

Синдроми вишеструке дисфункције органа су основни разлог за иреверзибилно стање и висок морталитет у касној фази септичког шока. Заштита функције органа је од великог значаја за смањење високог клиничког морталитета септичког шока. Цистанцхе је традиционални кинески биљни лек у нашој земљи. Први пут је објављен у „Шенлонг Материа Медица”. То је један од познатих традиционалних кинеских лекова за исхрану есенције и крви, храњење бубрега и јачање јанга. Савремене фармаколошке студије су показале да може побољшати имунолошку функцију тела и стрес, промовисати синтезу ДНК, одолети 7 зрачењу, одолети старењу, повећати стопу ћелијске синтезе ДНК и заштитити ћелије ткива. Главни састојци садржани у њему укључују Цистанцхе полисахарид (цДПС) и Д-манитол, који могу ефикасно уклонити слободне радикале.Цистанцхеполисахариди такође могу промовисати пролиферацију Т и Б лимфоцита и могу синергистички стимулисати пролиферацију тимоцита миша са ЦонА и ПХА. Овај експеримент се заснива на основној тачки побољшања и заштите функције важних виталних органа у септичком шоку и идеји да ТКМ ојача организам, коришћењем објективних и осетљивих метода детекције за уочавање ефектаЦистанцхена Ⅲ стањујетрамитохондрије код пацова септичког шока, брзина респираторне контроле (РЦР), П/О однос, мембранска АТПаза и индекс плућне пермеабилности, плућна васкуларна пермеабилност, МДА плућног ткива, активност СОД, апоптоза тимоцита. Експериментални резултати то показујуЦистанцхеможе повећатијетрамитохондријски РЦР, П/О однос, побољшатијетрамитохондријалну респираторну функцију, убрзавају пренос електрона у митохондријском респираторном ланцу, повећавају степен спреге оксидативне фосфорилације и активности мембранске АТПазе и повећавају интрацелуларну синтезу АТП-а. У групи која је примала Цистанцхе, индекс плућне пермеабилности и плућна васкуларна пермеабилност су значајно смањени, малондиалдехидна активност плућног ткива је смањена, а супероксид дисмутаза значајно порасла. Сугерише се да Цистанцхе својим антиоксидативним дејством може да смањи оштећење слободних радикала кисеоника у ћелијама плућног ткива и да има добар заштитни ефекат код повреда плућа. Код септичког шока, тимоцита, посебно незрелих Т-лимфоцита, велики број апоптозе може изазвати смањење ослобађања зрелих лимфоцита у периферне лимфоидне органе, а затим директно или индиректно оштетити имунолошку функцију организма. Корекција абнормалне апоптозе тимоцита у септичком шоку је корисна за побољшање имунитета тела. Ова експериментална студија је то открилаЦистанцхеекстракт може значајно побољшати апоптозу тимоцита, а има и значајан заштитни ефекат на тимоците животиња септикемије. Осим тога, повећава имунитет организма током процеса инфекције и смањује оштећење важних органа страних токсина. Такође смо открили да је крвни притисак групе лекова значајно побољшан, а стопа морталитета значајно смањена. Цистанцхе и Цистанцхе су побољшали функцију ћелија јетре и плућа и смањили апоптозу тимоцита. Постоји значајна позитивна корелација, што указује на тоЦистанцхеможе побољшати функције виталних органа тела и побољшати имунитет организма може бити важна фармаколошка основа за Цистанцхе у лечењу септичког шока.

Цистанцхеима значајан заштитни ефекат на акутна оштећења органа, а његов механизам може бити: ① отпоран на пероксидацију мембранског естра, побољшати стабилност мембране и смањити оштећење слободних радикала на структуру мембране. ② Промовише синтезу нуклеинске киселине ткива и успорава разградњу и уништавање нуклеинске киселине, промовише синтезу протеина и убрзава поправку и регенерацију ћелија ткива. ③Ојачати имунолошку функцију организма и смањити штету организму узроковану патогеним факторима. ④ Инхибирају прекомерну апоптозу ћелија ткива. ⑤Побољшати микроциркулацију тела и обезбедити снабдевање крвљу виталних органа.

Референце

[1] Јин Хуиминг, модел сепсе након лигације цекалног црева и перфорације [Ј]. Цхина Дисеасе Јоурнал оф Пхисиологи, 1990, 6(2):126.

[2]3 Ванг Киан, Зху Ксиаофенг, Зхао Ксилонг. Савремене медицинске експерименталне методе [М]. Северни Пекинг: Издавачка кућа за народно здравље, 1997:342.

[3] Ванг Киан, Зху Ксиаофенг, Зхао Ксилонг. Савремене медицинске експерименталне методе [М3. Северни Пекинг: Пеопле'с Хеалтх Пресс, 1997: 508-510.

[4] Зханг Ксиуминг, Ли Јианзхаи, Веи Мингјинг, итд. Савремени клинички биохемијски преглед

[5]. Пекинг: Медицинска штампа народне армије, 2001: 896-899.

[6] Хе Веијинг, Ли Веи, Би Зхенг, итд. Детекција апоптозе у ћелијама леукемије Дифениламинска метода [Ј]. Схангхаи Јоурнал оф Медицал Тестинг, 2001, 16(3): 160.