Контакт: Аудреи Ху Вхатсапп/хп: 0086 13880143964 Е-пошта:audrey.hu@wecistanche.com

Апстрактан:Растућа брига за опште здравље покреће глобално тржиште природних састојака не само у прехрамбеној индустрији већ иу козметичкој области. У овој студији, скрининг потенцијалне козметичке примене водених екстраката из три исландскаморске алгес произведен импулсним електричним пољима (ПЕФ). Екстракти произведени ПЕФ-ом из Улва лацтуца, Алариа есцулента и Палмариа палмата упоређени су са традиционалном екстракцијом топлом водом у погледу садржаја полифенола, флавоноида и угљених хидрата. Штавише,антиоксиданссвојства и ензимске инхибиторне активности су процењене коришћењем ин витро тестова. ПЕФ је показао сличне резултате као традиционална метода, показујући неколико предности као што су његова нетермална природа и краће време екстракције. Међу три исландске врсте, Алариа есцулента је показала највећи садржај фенола (средња вредност 8869,7 µг ГАЕ/г дв) и флавоноида (средња вредност вредност 12.098,7 µг КЕ/г дв) једињења, која такође показују највећуантиоксиданскапацитети. Штавише, екстракти Алариа есцулента су показали одличне анти-ензимске активности (76,9, 72,8, 93.0 и 100 процената за колагеназу, еластазу,тирозиназеи хијалуронидаза, респективно) за њихову употребу у производима за избељивање коже и против старења. Дакле, наша прелиминарна студија сугерише да би се екстракти на бази исландске Аларије есцулента произведени од стране ПЕФ-а могли користити као потенцијални састојци за природне козметичке и козметичке формулације.

Кључне речи:макроалге; Улва лацтуца; Алариа есцулента; Палмариа палмата; ПЕФ-потпомогнута екстракција;биоактивна једињења; зелена екстракција; природних састојака; козмецеутика

цистанцхе су природни састојци за избељивање

1. Представљање

Последњих година, потражња за новим биоактивним једињењима са потенцијалним здравственим предностима је значајно порасла. Многе истраживачке групе су ставиле нагласак на истраживање морских организама, као што су макроалге, како би пронашли нове и одрживе изворе природних једињења за примену у пољопривредно-прехрамбеној индустрији, фармакологији, храни и, однедавно, у области козметике [1,2] . Макроалге су велика и хетерогена група фотосинтетских организама које карактерише огроман биодиверзитет и сложен биохемијски састав. Према својој хемијској структури и садржају пигмента, макроалге се могу поделити у три лозе укључујући смеђе алге (Пхаеопхицеае), црвене алге (Рходопхита) и зелене алге (Виридиплантае). Једињења алги се чувају унутар ћелијске цитоплазме или су везана за ћелијске мембране; стога је поремећај ћелија кључан за валоризацију биомасе алги. Поред тога, састав ћелијског зида је веома варијабилан између врста алги, од ситних мембрана до вишеслојних сложених структура, што представља изазов за опоравак производа од алги [3]. Генерално, морске алге су одлични извори полисахарида, протеина, липида и широког спектра секундарних метаболита као што су фенолна једињења, терпеноиди, каротеноиди, пигменти и деривати азота [4–6]. Иако примарни метаболити имају кључну важност, недавни подаци су показали да садржај секундарних метаболита одређује биолошке активностиморске алгеекстракти [7].

Све већа брига за опште здравље и добробит, као и свест о штетним хемикалијама у свакодневним производима, покреће глобално тржиште природних и органских састојака [8]. Током протеклих година, свест потрошача према преференцији природних састојака и еколошки прихватљивих производа проширила се од прехрамбене индустрије до козметичке индустрије и индустрије личне неге [9]. Штавише, у тренутном контексту глобалног загревања и еколошких питања, дошло је до повећања свести јавности о питањима животне средине. У светлу ових тренутних забринутости, потрошачи су окренули своје интересе ка зеленим, здравим производима и производима без хемикалија. Као резултат тога, козметичка индустрија тренутно замењује токсичне хемикалије и штетне састојке новим и природним једињењима високе вредности да би произвела „хемијски чисте“ козметичке производе [10].

Козметика је традиционално дефинисана као производи који се примењују на људско тело за чишћење, улепшавање или промовисање привлачности без утицаја на структуру или функције тела. Међутим, нови трендови и недавни захтеви потрошача промовисали су развој нових производа који пружају вишеструке предности уз минималан напор. Термин козмецеутика се сада често користи за описивање козметичких производа са биоактивним састојцима за које се тврди да имају медицинске користи или користи сличне лековима [11]. Козметички производи обично садрже функционалне састојке као што су витамини, фитокемикалије, ензими,антиоксидансии/или етерична уља [12]. Пошто је широк спектар ових биоактивних једињења пронађен у макроалгама, истраживање новихморске алгеи екстракти добијени из морских алги показали су се као обећавајућа област козмецеутских и козметичких студија [13,14].

Бројни секундарни метаболити изведени изморске алгесу познате по својим вредним здравственим благотворним ефектима на кожу, као што су фото-заштитна, хидратантна,антиоксиданс,антиинфламаторна и регенеративна својства [15]. На основу ових благотворних ефеката, алге се уграђују у козметичке производе као што су креме за сунчање, производи против старења, као и за превенцију хиперпигментације, док се полисахариди користе за одржавање влажности коже и спречавање исушивања [16]. Током старења, протеини екстрацелуларног матрикса су подложни прекомерној активности протеолитичких ензима као што су колагеназе иеластазе, што доводи до видљивих промена на кожи, као што су боре или губитак еластичности коже. Приступ који обећава за спречавање спољашњег старења коже је инхибиција активности колагеназе и еластазе природним једињењима. Екстракти биљака су широко истражени и утврђено је да поседују антиколагеназну и антиеластазну активност [17]. Међутим, постоји мало информација о инхибиторним ензимским активностима екстраката морских алги.

Методе екстракције које се најчешће примењују за изолацију биоактивних материја из морских алги заснивају се на конвенционалним техникама. Ипак, коришћење традиционалних метода има неколико недостатака, као што су употреба великих количина органских растварача, дуже време екстракције, високе температуре, проблеми селективности, високи захтеви за енергијом и коекстракција нециљаних или интерферирајућих једињења [18]. Дакле, нове технике екстракције засноване на принципима зелене хемије имају потенцијални интерес [19].

Пулсно електрично поље (ПЕФ) је нова, нетермална и енергетски ефикасна технологија прераде хране [20]. ПЕФ укључује примену импулса електричног поља обично високог напона (опсег кВ) и кратког трајања (микро или наносекунде) на производ постављен између две електроде [21]. Примена електричних импулса доводи до стварања реверзибилних или иреверзибилних пора у ћелијским мембранама, дефинисаних као електропорација или електро-пермеабилизација, што последично олакшава брзу дифузију растварача и повећање преноса масе интрацелуларних једињења [22]. Недавне апликације су се фокусирале на коришћење импулсне електричне енергије као технике екстракције (ПЕФ-ассистедектрацтион) из био-, прехрамбених и пољопривредних производа [23]. Са ПЕФ третманом изводљиво је добити екстракте веће чистоће, повећати брзину екстракције биоактивних једињења као што су полифеноли, каротеноиди или антоцијанини и елиминисати употребу органских растварача и скратити време екстракције [24,25]. ПЕФ третман је успешно примењен за екстракцију вредних једињења из различитих морских извора, као што су протеини [26–28], угљени хидрати [29,30], липиди [31,32] и пигменти као што су каротеноиди, хлорофили или фикоцијанини [22,33]. ,34] од микроалги и морских алги.

Стога је главни циљ ове студије био да се процени потенцијална козметичка примена ПЕФ екстраката из три врсте макроалги које расту на Исланду: У. лацтуца (зелене макроалге), А. есцулента (смеђе макроалге) и П. палмата (црвене макроалге) . У настојању да се развију органски и природни састојци за зелене формулације, ПЕФ-помоћна деекстракција је предложена као еколошки прихватљива алтернатива традиционалној екстракцији органским растварачем. Након процеса екстракције, водениморске алгеекстракти су окарактерисани у погледу садржаја полифенола, флавоноида и угљених хидрата. Штавише,антиоксиданссвојства и ензимске инхибиторне активности су процењене коришћењем ин витро тестова активности. Овде пријављени резултати ће пружити основу за побољшање разумевања смеђих, црвених и зелених макроалги за производњу активних састојака за иновативне формулације у козметичким производима који садрже биолошки активна једињења изолована из природних и одрживих извора.

2. Резултати и дискусија

2.1. Екстракција уз помоћ ПЕФ-а за прераду биомасе исландских морских алги

Резултати показују да је електрична проводљивост била највећа у суспензији припремљеној од А. есцулента, затим П. палмата и У. лацтуца (п < {{0}}}.05)="" (табела="" 1).="" међутим,="" ефекат="" типа="" третмана="" није="" идентификован="" као="" значајан="" (п=""> 0,05). Мерење електричне проводљивости су успешно користили други аутори за процену ефикасности ПЕФ третмана у биолошким ткивима за ослобађање интрацелуларних јонских супстанци, као резултат повећане пермеабилизације ћелијске мембране [35–37].

У нашој студији, резултати нису указивали на јаче ослобађање ових супстанци од стране ПЕФ-а, пошто су промене у проводљивости изазване екстракцијским третманима обично биле највеће у суспензијама ХВ. Претходне студије су закључиле да почетна проводљивост ванћелијског медијума утиче на ефикасност електропорације, али не постоји сагласност о томе да ли постоји позитиван или негативан однос између ова два фактора [38]. Варијације у проводљивости и карактеристикама материјала могу компликовати поређење. У нашем истраживању постојала је велика разлика између проводљивости суспензије А. есцулента и друге две врсте, што се није одразило на степен промене проводљивости током екстракције. Наведено је да садржај пепела у смеђим морским алгама може чинити преко 50 процената његове суве тежине [39], који се углавном састоји од јона, што може делимично да објасни високу проводљивост у суспензијама А. есцулента у поређењу са друге две врсте.

Резултати показују да је пХ у суспензији У. лацтуца био нижи него код друге две врсте, али нису произвели јасни ефекти типа екстракције. Температура је повећана са 22 ± 1◦Ц пре третмана, на 95 ◦Ц помоћу ХВ (за све врсте), на 36.0 ± 1.0 ◦Ц, 46,3 ± 0. 6 ◦Ц и 51.0 ± 1◦Ц према ПЕФ, у суспензијама А. есцулента, П. палмата и У. лацтуцаса. Исти тренд је примећен за групе третиране ПЕФ-ом, које су затим додатно загрејане ХВ. Пораст температуре је узрокован конверзијом електричне енергије у топлотну енергију (омско загревање), у суспензији током ПЕФ третмана. Познато је да је ниво повећања температуре пропорционалан примењеној струји, али у обрнутој пропорцији са проводљивошћу. Ово би могло објаснити зашто П. палмата и У. лацтуца су достигле вишу температуру током ПЕФ третмана иако имају нижу проводљивост од А. есцулента.

2.2. УВ-ВИС апсорпциони спектри екстракта исландских алги

Проучаване морске алге се разликују по спектралним профилима (Слика 1), што сугерише да састав и потенцијал апсорпције УВ зрачења варирају између врста. Међутим, врста технике екстракције није показала значајан ефекат у спектру УВ апсорпције; екстракти морских алги су показали сличне профиле апсорпције без обзира на метод екстракције.

Спектри УВ апсорпције зелене алге У. лацтуца показали су истакнути врх у УВ-Б опсегу (280–320 нм) (Слика 1а), док екстракти из смеђе алге А. есцулентас нису показали јасно формирање апсорпционе зоне (Слика 1ц ). Међутим, резултати су указивали на већу апсорпцију на 220 нм у екстрактима А. есцулента у поређењу са У. лацтуца и П. палматав, за шта се претпостављало да је резултат високог садржаја фенолних једињења у А. есцулента (Табела 2). Максимум апсорпције унутар овог опсега је повезан са везом између фенолних једињења и алгината. Претпоставља се да овај однос одржава способност УВ апсорпције фенолних једињења током времена [40].

Занимљивији налаз је био да су резултати добијени за екстракте црвених алги, П. палмата апсорбовала део УВ-А зрачења (320–400 нм). Познато је да црвене алге акумулирају фотопротективна једињења са способношћу апсорпције ултраљубичастог зрачења, као што су аминокиселине сличне микоспорину (МАА), које апсорбују у овом специфичном УВрегиону [41]. П. палмата је био изванредан у спектру УВ апсорпције са истакнутим пиковима између 320 и 340 нм у складу са присуством МАА који се апсорбују у овом опсегу [42], као што је палитинол (вршна апсорпција на 332 нм), астерина-330 (апсорпциона пена 330 нм), порфира-334 (вршна апсорпција на 334 нм) и други [43]. Пошто је познато да услови екстракције, као што је врста растварача, утичу на ефикасност екстракције, резултати у овој студији су упоређени са претходним студијама о екстракцији МААс водом из П. палмата. У овим студијама, максимуми апсорпције су детектовани на 325 до 330 нм [44], као у овој студији. Стога је могуће претпоставити да пикови уочени између 320 и 340 нм могу бити последица присуства МАА.

Разлике у спектрима апсорпције између 350 и 700 нм објашњене су присуством различитих помоћних пигмената у одговарајућим фотосистемима зелених, смеђих и црвених макроалги, хлорофила-б (450-500 нм), фукоксантина (400-500 нм) и (600–650 нм) респективно [45]. Концентрација једињења растворљивих у води у екстрактима имала је јаче дејство. Сходно томе, образац који одражава разлику у пигментима између врста алги није био очигледан у овој студији.

2.3. Укупан садржај фенола, флавоноида и угљених хидрата у екстрактима исландских алги

Укупан садржај фенола уморске алгес се кретао од 1592 до 9368 µг ГАЕ/г дв (Табела 2). Смеђа алга А. есцулента показала је највећу количину (п < 0.05)="" фенолних="" једињења="" (средња="" вредност="" 8869,7="" µг="" гае/г="" дв),="" затим="" п.="" палмата="" (средња="" вредност="" 1806,2="" µг="" гае/г="" дв)="" и="" у.="" лацтуца="" (средња="" вредност="" 1750,7="" µг="" гае/г="" дв)="" (постојале="" су="" значајне="" разлике="" између="" екстракта="" п.="" палмата="" и="" у.="" лацтуца)).="" за="" сваку="" врсту="" морске="" алге,="" садржај="" полифенола="" се="" није="" разликовао="" међу="" методама="" екстракције="" осим="" за="" у.="" лацтуца,="" чији="" резултати="" су="" показали="" да="" је="" хв="" најефикаснија="" техника="" (п="">< 0,05).="" међутим,="" треба="" истаћи="" предности="" пеф-а,="" укључујући="" његову="" нетермалну="" природу,="" краће="" време="" екстракције="" (10="" мин="" наспрам="" 45="" мин)="" и="" зелени="">

Међу три групе алги, смеђе макроалге садрже већи број полифенола него црвене и зелене макроалге. Резултати су били у сагласности са раним студијама [46,47] које су известиле да врсте смеђих (нпр. А. есцулента и Саццхарина латиссма) алги имају већи садржај фенола од црвених (П. палмата) и зелених врста (нпр. У. лацтуца). Ово су подржали и други аутори [48] који су закључили да је средњи садржај полифенола био специфичан за врсту (А. есцулента > С. латиссма > П. палмата) и да је садржај фенола био више од три пута већи у А. есцулента него у другим врстама ( А. есцулента: 37 мг флороглуцинол еквивалента (ПГЕ)/г дв; С. латиссма: 8 мг ПГЕ/г дв; П. палмата: 5 мгГАЕ/г дв). Штавише, у истој студији, аутори су известили да садржај полифенола варира у зависности од сезоне, док су просторне варијације (алге су убране у Норвешкој, Француској и Исланду) показале маргинални ефекат. На пример, Гагер ет ал. (2020) су открили да постоји значајан ефекат сезонских варијација у садржају полифенола у А. есцулента, са више од 300 мг ГАЕ/г ДВ у јесен у поређењу са испод 20 мг ГАЕ/г ДВ у пролеће. Флоротанини из седам смеђих морских алги комерцијално убраних у Британију (Француска) детектовани 1Х НМР и ин витро тестовима: временска варијација и потенцијална валоризација у козметичким применама. Наши узорци су прикупљени у јулу (У. лацтуца иА. есцулента) и у новембру (П. палмата). У Ролединој студији [48], просечан садржај А. есцулента из Трондхајма, Норвешка (није сакупљен на Исланду) током лета био је 40 мг ПГЕ/г дв и П. палмата са Исланда, али је био 4 мг ГАЕ/г дв у јесен. Више вредности које су пријављене у поређењу са нашом студијом могу се објаснити коришћеним медијумом за екстракцију (80:20 ацетон:вода), који ће вероватно резултирати већим приносима екстракције. Већи садржај полифенола је такође утврђен за екстракте А. есцулента коришћењем мешавине етанола и воде (50:50) уз ултразвук [49]. Међутим, користећи исти медијум за екстракцију и класичну екстракцију растварачем, пријављено је да А. есцулента садржи 44,1 мг ГАЕ/100 г водених екстраката [50], релативно слично ономе уоченом у овој студији.

Средњи садржај флавоноида био је специфичан за врсту (А. есцулента > У. лацтуца > П. палмата; (п < 0.{{10}}} 5) (Табела 2). Највећа количина флавоноиди су уочени за екстракте А. есцулента (средња вредност 12098,7 µг КЕ/г дв), док је мањи садржај утврђен за У. лацтуца (средња вредност 4152,4 µг КЕ/г дв), а минимални садржај одређен је за екстракте П. палмата ( средња вредност 905,8 µг КЕ/г дв).Слично понашању утврђеном за укупан садржај фенола, тип технологије екстракције није имао значајне ефекте на садржај флавоноида (п > 0,05), са изузетком У. лацтуца.Резултати су показали да ХВ и комбинација обе технике (ПЕФ плус ХВ) биле су најефикасније технике за екстракцију флавоноида у У. лацтуца (п < 0,05).

Постоје бројне студије о садржају флавоноида у копненим биљкама, али студије садржаја флавоноида у алгама су ретке [51], а посебно у врстама које су проучаване у овом раду. Наиме, студија Уммат ет ал. [49] је известио да је екстракција уз помоћ ултразвука побољшала опоравак флавоноида у свих 11морске алгес истраживано (укључујући А. есцулента) у поређењу са конвенционалним екстракцијама растварачем коришћењем смеше од 50 процената етанола. У другој студији, флавоноиди су квантификовани у метанолним екстрактима четири врсте Улва (Улва цлатхрата, Улва линза, Улва флекуоса и Улва интестиналис) узгајане на различитим деловима северних обала Персијског залива на југу Ирана; садржај флавоноида у екстрактима алги варирао је од 8 до 33 мг РЕ/г дв [52]. Међутим, претходне студије исте истраживачке групе откриле су значајне промене у хемијским састојцима са променама годишњих доба и услова животне средине [53]. Стога је мало тешко имати потпуни преглед библиографије ових биоактивних једињења уморске алгес, због недостатка доступних објављених истраживања, али и због промена у садржају флавоноида под утицајем услова узгоја и географског положаја.

Mean carbohydrate content of produced extracts was also species-specific (P. palmata >У. лацтуца > А. есцулента; п < 0.05)="" (табела="" 2).="" садржај="" се="" кретао="" од="" 44,8="" до="" 510="" мг="" глуе/гдв="" у="" зависности="" од="" врсте="" алги.="" морске="" алге="" садрже="" велику="" количину="" полисахарида="" са="" важним="" функцијама="" за="" ћелије="" макроалги,="" укључујући="" структурну="" подршку="" и="" складиштење="" енергије.="" на="" пример,="" главни="" део="" ћелијских="" зидова="" црвене="" и="" смеђе="" морске="" алге="" представљају="" сулфатни="" галактани,="" познати="" као="" агар,="" алгинат="" и="" карагенан="" [54].="" највећу="" количину="" угљених="" хидрата="" (средња="" вредност="" 441="" мгглуе/г="" дв)="" показала="" је="" редалгае="" п.="" палмата.="" резултати="" су="" били="" у="" сагласности="" са="" претходним="" студијама="" које="" су="" пријавиле="" највећу="" концентрацију="" полисахарида="" у="" врстама="" палмариа="" [55].="" штавише,="" мутрипах="" ет="" ал.="" [56]="" је="" описао="" укупан="" садржај="" угљених="" хидрата="" у="" п.="" палмата="" од="" 469="" мг/г="" суве="" морске="" алге,="" релативно="" сличан="" оном="" уоченом="" у="" овој="">

Зелена макроалга У. лацтуца показала је садржај до 249,5 мг ГлуЕ/г дв у зависности од коришћене технике екстракције (Табела 2). На основу литературе, У. лацтуца има растворљиву у води и нерастворљиву целулозу која одговара структурним полисахаридима са главном компонентом званом улван, која доприноси од 9 до 36 процената суве масе биомасе [57]. Улван се углавном састоји од сулфатне рамнозе, уронских киселина (глукуронска киселина и идуронска киселина) и ксилозе. Због своје поларне природе, растворљивост улванских раствора у води се побољшава екстракцијом на високим температурама (80–90 ◦Ц) [58]. Температура екстракције могла би бити разлог зашто је укупан садржај угљених хидрата екстраката У. лацтуца добијених традиционалном екстракцијом топлом водом и комбинацијом обе методе (ПЕФ плус ХВ) био већи (п < 0,05)="" од="" садржаја="" постигнутог="" коришћењем="" само="">

С друге стране, други аутори истичу значај сезонских варијација у садржају полисахарида. На пример, Сцхиенер ет ал., тврде да идентификују сезонске варијације и предвиђају најбоља времена жетве за алге. Анализа сезонског састава А. есцулента показала је да се максималне вредности угљених хидрата поклапају са смањеним концентрацијама протеина, пепела, полифенола и влаге [39]. Према ауторима, ове односе, који варирају између годишњих доба и врсте, индустрије могу користити за максимизирање приноса циљанихморске алгекомпоненте.

2.4. Антиоксидативни капацитети екстракта исландских морских алги

А. есцулента је имала најјачу активност уклањања ДППХ међу сировим екстрактима три врсте алги (п < {{0}}}.05),="" са="" ефектом="" уклањања="" већим="" од="" 90="" процената="" (табела="" 3).="" у="" поређењу="" са="" различитим="" стандардним="" растворима,="" а.="" есцулента="" је="" показала="" упоредиву="" активност="" чишћења="" као="" 100="" µг/мл="" аскорбинске="" киселине="" (87,9="" процената),="" галне="" киселине="" (91,0="" процената)="" и="" -токоферола="" (87,9="" процената).="" наши="" резултати="" су="" били="" у="" складу="" са="" недавним="" студијама="" [50],="" које="" су="" такође="" пријавиле="" позитивне="">антиоксидансактивност екстракта А. есцулента. Изненађујуће, нема значајних разликаантиоксиданспримећене су активности између различитих тестираних метода екстракције (п > 0.05). Очекивало се да ће ПЕФ екстракти показати боље антиоксидативне вредности од екстраката произведених врућом традиционалном екстракцијом, јер су друге студије показале да зелене технике (као што је екстракција уз помоћ микроталасне пећнице или ензимска екстракција) могу ефикасно да избегну разлагање биоактивних једињења, показујући веће антиоксидативне активности [59]. ,60].

Способностморске алгеЕкстракти за редукцију фери (Фе3 плус ) до гвожђе (Фе2 плус ) јона и способност да се уклоне радикали АБТС су такође проучавани, ФРАП и АБТС методом, респективно. Резултати ФРАП-а показали су сличне трендове као ДППХ, показујући да је А. есцулента имала најјачу способност да редукује јоне гвожђа (Фе3 плус ) у гвожђе (Фе2 плус ) међу сировим екстрактима три врсте алги (п < 0.{{6}="" }5).="" међутим,="" утврђено="" је="" другачије="" понашање="" за="" абтс.="" екстракти="" алги="" су="" показали="" сличну="" способност="" уклањања="" радикала="" абтс="" (п=""> 0,05), што указује да ове врсте вероватно садрже нека ефикасна једињења која су одговорна за његову активност чишћења.

Генерално, познато је да су смеђе алге више заступљенеантиоксиданспотенцијал у поређењу са црвеним и зеленим породицама [61]. Наши резултати су такође показали да водени екстракти из А. есцулента је показала ефикасне антиоксидативне активности у погледу уклањања слободних радикала и редукције моћи, што сугерише да би А. есцулента потенцијално могао да буде ресурс за природне антиоксиданте. Висока антиоксидативна активност уочена за екстракте А. есцулента може бити повезана са високим садржајем фенолних једињења утврђених у екстрактима смеђих алги. У многим студијама,антиоксидансактивност екстраката алги је приписана фенолним једињењима, показујући позитивну корелацију између садржаја фенола и капацитета чишћења углавном са ДППХ [62,63]. Слични резултати корелације пронађени су у тренутној студији за екстракте А. есцулента (погледајте бољу дискусију у одељку 2.6. Корелације између хемијских једињења и биоактивних својстава).

2.5. Ензимске инхибиторне активности екстракта исландских алги

исландскиморске алгеЕкстракти су показали позитивне инхибиторне ефекте према свим испитиваним ензимима (Табела 4), отварајући нове путеве за експлоатацију природних ензимских инхибитора из ресурса алги. Колико нам је познато, ово је први пут да ензимско-инхибиторне активности Исландаморске алгеЕкстракти произведени од стране ПЕФ-а су тестирани.

2.5.1. Активност инхибиције колагеназе

Екстракти А. есцулента су показали позитивну инхибицију колагеназе у распону од 68 до 91 процената, док су екстракти П. палмариа и У. лацтуца показали безначајну инхибициону активност против колагеназе (Табела 4). Екстракт топле воде А. есцулента показао је 71,1 проценат инхибиције колагеназе, што је било веће од стандардног раствора епигалокатехин-3-галата (ЕГЦГ) (63,2 процента) и упоредиво са позитивним стандардом који обезбеђује комерцијални ензимски комплет (74,9 процената). откриће је да екстракти А. есцулента произведени од стране ПЕФ-а показују инхибицију аколагеназе од 91 процената, показујући чак и већу активност од инхибитора обезбеђеног у комерцијалном комплету. Треба нагласити да је ова активност примећена само у воденим екстрактима произведеним од ПЕФ-а, а не у комбинацији ПЕФ плус ХВ. Ово понашање се може објаснити могућношћу да процес топле воде може имати негативан ефекат на једињења одговорна за инхибицију активности колагеназе. Међутим, потребне су додатне студије да би се објаснили ови резултати због сложености сирових екстраката алги. Горе поменута истраживачка група тренутно ради на идентификацији инхибиционих молекула у екстрактима А. есцулента како би боље разумела ове позитивне ефекте које производи ПЕФ.

Резултати у вези са инхибицијом колагеназе екстрактима А. есцулента су у складу са претходним подацима у којима се А. есцулента користи у комерцијалним екстрактима због свог ефекта против старења. До деградације колагена долази са старењем због активности колагеназе, што резултира борама на кожи. Инхибиција колагеназе природним једињењима је занимљива прилика за производе против старења. На пример, СЕППИЦ, добављач састојака за козметичку индустрију, нуди липофилни екстракт А. есцулента (Калпариане® АД) [64].

2.5.2. Активност инхибиције еластазе

Само су сирови екстракти А. есцулента инхибирали еластазу, показујући активности веће од 70 процената инхибиције (Табела 4). Међутим, антиеластазне активности екстракта А. есцулента нису се статистички разликовале међу методама екстракције (п > 0.05). У поређењу са растворима кверцетина, добро познатим инхибитором еластазе који је показао 100 процената инхибиције при 1 мМ и 58,7 процената при 0,5 мМ, учинак екстраката из А. есцулента је био висок.

Еластаза је ензим протеиназа који може да смањи еластин разбијањем специфичних пептидних веза. Сходно томе, инхибиција активности еластазе у слоју дермиса може се користити за одржавање еластичности коже [65]. Многи биљни екстракти су идентификовани као инхибитори еластазе [17]; међутим, спроведено је неколико истраживања о инхибицији еластазе из ресурса алги. Према литературним подацима, познато је да су полифеноли екстраховани из биљака јаки инхибитори еластазе и хијалуронидазе [66]. Недавна студија је објавила да флоротанини, тип танина у смеђим алгама, екстракти морске алге Еисениа бицицлис и смеђе алге Ецклониа цава, помажу кожи значајно смањујући активност еластазе [67]. Екстракти А. есцулента произведени у овој студији показали су да највише вредности ТПЦ и ТФЦ у поређењу са другим испитиваним врстама (Табела 4), па би то могао бити разлог зашто водени екстракти из П. палмариа и У. лацтуца нису показали антиеластазно деловање. Да би се потврдила ова хипотеза, спроведена је Пирсонова корелациона анализа, која сугерише да анти-ензимске активности позитивно корелирају са садржајем фенолних супстанци (видети даљу дискусију у одељку 2.6. Корелације између хемијских једињења и биоактивних својстава).

2.5.3. Активност инхибиције тирозиназе

Екстракти А. есцулента су били позитивнитирозиназеинхибиција већа од 90 процената за све коришћене методе екстракције, док екстракти П. палмариа и У. лацтуца нису испољили ефекте инхибиције тирозиназе (Табела 4). Међутим, антитирозиназне активности екстракта А. есцулента нису се разликовале (п < 0.05)="" са="" методама="" екстракције.="" упоређујући="" ефекат="" екстраката="" а.="" есцулента="" са="" испитаним="" растворима="" кверцетина,="" сирови="" екстракти="" смеђих="" алги="" су="" показали="" боље="" инхибиторне="" активности="" од="" ових="" раствора="" (88="" и="" 75="" процената="" за="" растворе="" кверцетина="" од="" 0,5="" и="" 1="" мм,="" респективно).="" на="" основу="" литературе,="" неколико="" истраживача="" је="" пријавило="" анти-тирозиназно="" деловање="" биљака,="" бактерија="" и="" гљивица="" [68].="" међутим,="" иако="" различите="" студије="" сугеришу="" да="" биоактивна="" једињења="" добијена="" из="" морских="" алги="" имају="" добар="" потенцијал="" да="" се="" користе="" као="" агенси="" за="" избељивање="" коже="" [13],="" ово="" је="" још="" увек="" неистражен="" домен="" и="" спроведено="" је="" само="" неколико="" студија.="" већина="" студија="" спроведених="" у="" овој="" области="" фокусирана="" је="" на="" смеђе="" алге,="" што="" се="" слаже="" са="" резултатима="" ове="" студије="" у="" којој="" су="" а.="" есцулентаектрацтс="" показали="" најбоље="" анти-тирозиназне="" активности.="" на="" пример,="" деривати="" флороглуцинола="" и="" флоротанини,="" уобичајени="" секундарни="" метаболити="" пронађени="" у="" смеђим="" алгама,="" показали="" су="" инхибиторну="" активност="" против="" тирозиназе="" због="" своје="" способности="" да="" хелирају="" бакар="" [69].="" у="" недавној="" студији,="" екстракт="" смеђе="" алге="" лессониа="" трабецулате="" произведен="" екстракцијом="" уз="" помоћ="" микроталасне="" пећнице="" инхибирао="" је="" активност="" тирозиназе="" од="" 33,73="" процента="" [60].="" у="" другој="" студији,="" екстракт="" смеђе="" алге="" турбинариа="" цоноидес="" показао="" је="" активност="" као="">антиоксиданситирозиназеинхибитор, међутим, у овом случају, као растварач је коришћен етанол [70]. Значајна корелација између инхибиторне моћи полифенола екстрахованих из биљака на печуркаматирозиназеје објављено у претходним студијама [68]. Слично, резултати ове студије сугеришу да је инхибиторна активност према тирозинази била у позитивној корелацији са садржајем флавоноида и фенола (видети одељак 2.6. Корелације између хемијских једињења и биоактивних својстава).

Тирозиназа игра важну улогу у биосинтези пигмента меланина у кожи. Меланин је одговоран за заштиту од штетног ултраљубичастог зрачења, које може изазвати неколико патолошких стања [71]. Поред тога, може створити естетске проблеме када се меланин акумулира као хиперпигментиране мрље [72]. Стога, укључивање инхибитора тирозиназе у козметичке производе може бити атрактивно због ефеката избељивања и/или осветљивања.

цистанцхе може инхибирати тирозиназу

2.5.4. Активност инхибиције хијалуронидазе

Свеморске алгеЕкстракти су показали значајно високу антихијалуронидазну активност (Табела 4), показујући резултате упоредиве са растворима танинске киселине (добро познати инхибитор хијалуронидазе). Конкретно, екстракти А. есцулента су показали 100 проценат инхибиције за све тестиране методе. Штавише, екстракти У. лацтуца су показали активности веће од 90 процената инхибиције, при чему је инхибиција екстраката произведених помоћу ПЕФ (96,8 процената) и комбинације ПЕФ плус ХВ (97,3 процената) била већа од инхибиције произведене традиционалном методом топле воде 93,4 проценат ) (п < 0,05).="" сви="" екстракти="" п.="" палмариа="" су="" показали="" сличне="" активности="" (п="">< 0,05),="" инхибиција="" екстраката="" произведених="" помоћу="" пеф-а="" била="" је="" (91,9="" процената)="" и="" комбинације="" пеф="" плус="" хв="" (89,5="" процената)="" и="" традиционалне="" методе="" топле="" воде="" (91,8="">

Други аутори су такође описали антихијалуронидазну активност различитихморске алгес екстракти, посебно за екстракте богате флоротанинима из смеђих алги [73,74]. Међутим, према нашим сазнањима, ово је први пут да су пријављене активности инхибитора хијалуронидазе екстракта П. палмата и У. лацтуца произведених помоћу ПЕФ-а.

Хијалуронска киселина је главна компонента дермиса, где учествује у обнављању ткива, разграђује се са старењем, изазивајући боре и губитак чврстоће коже. У том смислу, инхибитори хијалуронидазе повећавају ниво хијалуронске киселине дермалног екстрацелуларног матрикса за побољшање изгледа коже лица која стари [13]. Стога би резултати ове студије могли да отворе нове путеве за експлоатацију природних инхибитора хијалуронидазе из ресурса алги са потенцијалном употребом у козметичким производима.

Укратко, прикупљени подаци су нам омогућили да закључимо да екстракти А. есцулента показују укупно боље инхибиторне активности од П. палмариа и У. лацтуца према испитиваним ензимима. Дакле, као најперспективнија врста морске алге са одличним анти-ензимским деловањем и због тога је одабрана за даља истраживања у нашој лабораторији. Иако се чини да су сирови екстракти из А. есцулента добри кандидати за експерименте ин витро, потребно је спровести даље студије да би се разјаснио идентитет метаболита одговорних за ове биолошке ефекте.

екстракт цистанцхе: анти-оксидација

2.6. Корелације између хемијских једињења и биоактивних својстава

Резултати анализе главних компоненти (ПЦА) показали су да је главно раздвајање група дефинисано ПЦ1 и ПЦ2, који су чинили 71,9 процената и 14,5 процената варијансе у подацима, респективно (Слика 2). Екстракти А. есцулента су се одликовали већим садржајем флавоноида и фенолних једињења, инхибиторним дејством на ензиме (колагеназа, тирозиназа и еластаза) и вредностима ДППХ и ФРАП у односу на друге врсте,П. палмата и У. лацтуца. Са друге стране, А. есцулента је имала мањи садржај угљених хидрата, посебно у поређењу са П. палмата (која се налазила на супротној страни ПЦ1). Варијације у подацима дуж ПЦ2 углавном су се односиле на АБТС и инхибицију хијалуронидазе. Као што показује локација на парцели, П. палмата је имала јачу корелацију са АБТС, док је У. лацтуца била више повезана са ефектима инхибиције хијалуронидазе, у поређењу са ове две врсте.

Висока и значајна позитивна корелација између ТПЦ, ТФЦ, ДППХ, ФРАП и инхибиторних ефеката на колагеназу, еластазу итирозиназеје демонстрирано Пирсоновом корелационом анализом (Табела 5).

Ово је било у складу са претходним студијама, у којима се наводи да су фенолна једињења (укључујући флавоноиде) главни фактори који доприносе антиоксидативној активности различитихморске алге[75–77]. Висока антиоксидативна активност екстраката из смеђих макроалги повезана је са специфичном групом полифенола, флоротанина и њиховом јединственом молекуларном структуром. Извештава се да флоротани из смеђих алги имају до осам међусобно повезаних фенолних прстенова који делују као замке електрона [78,79]. Очекивало се да ће АБТ корелирати са ТПЦ, осталоантиоксиданспараметрима. Могући разлози могу бити да се методе заснивају на различитим реакционим условима и да се реактивност разликује и по времену и по опсегу компоненти. На пример, АБТС реагенс реагује са ширим опсегомантиоксиданснего ДППХ радикал [80]. С друге стране, једно од ограничења наведених за АБТС је дуга реакција и опште време реакције можда неће дозволити постизање крајње тачке.

Резултати показују да постоји висока позитивна корелација ТПЦ и ТФЦ са инхибиторском активношћу колагеназе, еластазе и тирозиназе ({{0}}.93–0}.99), док је однос према инхибицији хијалуронидазе није била тако јака (р=0.42 и 0.54, респективно). Ово указује да су друге компоненте можда допринеле инхибиторном ефекту екстраката. Друге студије су известиле да полисахариди имају инхибициону активност на хијалуронидазу, на пример, алгинска киселина у смеђим алгама [81,82]. Потребне су даље студије о хемијском саставу врста макроалги за ефекте изолованих једињења на ензим да би се проценио допринос сваке хемијске компоненте, јер је у овој студији фокус био на сировим екстрактима.

Налази су били у складу са претходним студијама, наводећи да хемијски састав и нивои биоактивности екстраката значајно варирају између три лозе (црвене, зелене и смеђе алге) и између различитих врста које припадају истом типу су под утицајем старости и ткива. тип. Штавише, састав и карактеристике зависе од многих фактора животне средине који утичу на дистрибуцију и раст макроалги. На пример, светлост (УВ-зрачење), температура, доступност хранљивих материја, изложеност ваздуху, кретање воде, изложеност таласима и салинитет. Температура је описана као фактор који има најјаче утицаје на формирање пигмента и концентрацију хранљивих материја, салинитет и УВ зрачење као факторе који утичу на концентрацију ТПЦ [83].

Распрострањеност различитих врста макроалги варира са дубином воде. Позиције које су више уз обалу у међуплимној или литоралној зони су стресније јер врсте које тамо расту, морају да издрже вишеструке промене абиотских фактора услед промена плиме и осеке. На пример, ефекат сушења ваздуха, велика сунчева зрачења (у време осеке), промене салинитета и температуре и, у условима ниских температура ваздуха, укључујући смрзавање. Испод ниског нивоа воде, повећање дубине доводи до веома брзог смањења интензитета светлости и мањег излагања зрачењу.

Алге које расту у опсегу плиме и осеке имају мању осетљивост на УВ зрачење и брже се опорављају од сунчевог стреса. Док су алге које расту у сублиторалној зони осетљивије на УВ зрачење и имају мањи опоравак од сунчевог стреса [84]. Истовремено, водени стуб пружа заштиту. У овој студији изложеност сунчевој светлости била је вероватно јача за П. палмата у поређењу са другим врстама. Друге студије су показале да је формирање МАА директно повезано са сунчевом светлошћу [85], штитећи организме од УВ-А и УВ-Б зрачења. Штавише, показало се да се специфична количина МАА смањује са повећањем дубине сакупљања. Морске алге као што је А. есцулента, познате су да расту у горњој сублиторалној зони, али се такође протежу у најнижи међуплиму непосредно изнад ниског воденог жига. То значи да је водени стуб пружао јачу заштиту него код П. палмата. Поред тога, морфолошке карактеристике су различите, оштрице А. есцулента су дебље у односу на друге две врсте. У. лацтуца, која расте углавном у интертидаланд сублиторалу, способна је да фотосинтезује и расте под веома ниским зрачењем. Излагање УВБ светлости је наведено да убрзава опоравак фотосинтетских параметара У. лацтуца од негативних ефеката УВА светлости. Мањи је, једноставније структуре и краћег је века (3 месеца) и од А. есцулента (5–7 година) и од П. палмата који сваке године има нови раст.

Укратко, могу се извући претпоставке да су главне разлике у својствима екстраката у варијацијама у животном веку, морфолошким карактеристикама и условима раста врста алги.

3. Материјали и методе

3.1. Материјали

исландскиморске алгес У. лацтуца (зелене алге), А. есцулента (смеђе алге) и П. палмата (црвене алге) обезбедиле су исландска плава дагња иМорске алге, који је убрао морске алге у Брејдафјордуру (Западни Исланд). Након бербе, морске алге су осушене (на приближно 90 процената сувог материјала), самељене и достављене у вакууму. Узорци су чувани на сувом и тамном месту на собној температури до употребе.

тирозиназаиз печурака, Л-3,4-дихидроксифенилаланин (Л-ДОПА), еластаза из свињског панкреаса, аскорбинска киселина, Н-сукцинил-Ала-Ала-Ала-п-нитроанилид (АААПВН), хијалуронидаза из говеђих тестиса , кверцетин, -токоферол, танинска киселина, 2,2-дифенил-1-пикрилхидразил (ДППХ), 2,4,6-Трипиридил-с-триазин (ТПТЗ), Тролок, Фолин-Циоцалтеу реагенс, гална киселина и комплет за колориметријску анализу активности колагеназе (МАК293) су набављени од Сигма-Алдрицх Цо. (Сент Луис, МО, САД). Натријумова со хијалуронске киселине купљена је од МакингЦосметицс (Редмонд, ВА, САД). Све остале коришћене хемикалије и реагенси су били аналитичког квалитета и добијени су од ВВР Интернатионал, ЛЛЦ. Дејонизована вода (Елик® Ессентиал,Мерцк, Дармстадт, Немачка) је коришћена за екстракцију и припрему раствора на бази воде.

3.2. Експериментални дизајн

Факторски дизајн је коришћен за процену ефеката исландских врста морских алги (У. лацтуца, А. есцулента, П. палмата) и третмана екстракције (екстракција топлом водом (ХВ, 95 ◦Ц)), екстракције уз помоћ ПЕФ (ПЕФ) и комбинације оба технике (ПЕФ плус ХВ), о саставу екстракта и биоактивности (Табела 6). Екстракција је изведена у три примерка за сваку групу и свака реплика екстракта је анализирана у три примерка.

3.3. Екстракција биоактивних састојака из исландских морских алги

Експлоатација биомасе макроалги на различитим нивоима мотивисала је научнике да истраже еколошки прихватљивије, ефикасније и исплативије технике екстракције, засноване на приступима зелене екстракције. У овом раду, ПЕФ-потпомогнута екстракција је оцењена као новеланд зелена метода за производњу функционалних екстраката, док је за поређење коришћена традиционална екстракција топлом водом. Штавише, проучаван је ефекат комбинације обе технике, ПЕФ третмана макроалги праћеног традиционалном екстракцијом топлом водом, на биоактивни опоравак. Због очекиване електропорације произведене у ћелијским мембранама након физичког третмана, следећа екстракција топлом водом могла би додатно да олакша ослобађање интрацелуларног материјала [86], повећавајући принос екстракције. За материјале је потребно време након третмана да дифундују из ћелија [87,88], а у овом експерименту суспензије су чекале преко ноћи док се течност (екстракт) не одвоји од пулпе.

Што се тиче медијума за екстракцију, за производњу је коришћена дестилована водаморске алгеекстракти за превазилажење ограничења у вези са употребом токсичних и органских растварача. Вода се показала као добар растварач за екстракцију неколико биоактивних једињења изморске алгес [46,89–91] и еколошки је прихватљив. Поред тога, вода се обично користи за екстракцију уз помоћ ПЕФ-а јер је добар проводник за електричну енергију.

3.3.1. Процедуре екстракције

За сваку реплику у свакој групи,морске алгес (15 г) натопљени су преко ноћи на собној температури (22 ◦Ц) у дејонизованој води (300 мЛ). Затим је суспензија третирана ПЕФ (ПЕФ), загрејана (ХВ) или обоје ПЕФ третирана и загрејана (ПЕФ плус ХВ). Суспензије су држане преко ноћи у фрижидеру, након чега је уследила филтрација са грубим (20 µм) филтер папиром. Затим су филтрати (екстракти) чувани на 4 ◦Ц до њихове анализе.

Екстракција уз помоћ импулсног електричног поља изведена је коришћењем генератора импулса који је уграђен у кућу. Имао је ФуГХЦК-200-2000 кондензатор (ФуГ Електроник ГмбХ, Розенхајм, Немачка) и искриште (18,5 кВ ОГ75, Перкин-Елмер Оптоелецтроницс, ГМБХ, Виесе баден, Немачка). ПЕФ опрема је генерисала експоненцијалне импулсе распада ширине 0.96 µс и амплитуде од 18 кВ. Комора за третман од плексигласа димензија (Д × В × Ш) 20 × 8 × 2,5 цм, са најкраћим растојањем између плочастих електрода коришћена је за третирање суспензија са електричним пољем од 8 кВ/цм на 1,2 Хз током 10 мин.

Екстракти ХВ су припремљени загревањем суспензије у чаши у купатилу са термостатском водом и држани на 95 ◦Ц 45 мин. За комбиновану обраду импулсног електричног поља и загревања, суспензије су третиране ПЕФ-ом, а затим стављене у чашу, загрејане у воденом купатилу и држане на 95 ◦Ц 45 мин.

3.3.2. Мерење проводљивости, пХ и температуре

Електрична проводљивост и пХ суспензија морских алги мерени су након намакања и након третмана екстракције, на собној температури, помоћу пХ метра (ОрионСтар™ А215 пХ/Цондуцтивити Бенцхтоп Метер, Тхермо Сциентифиц, Валтхам, МА, УСА) опремљеног сензором проводљивости и Комбинована пХ/АРЦ триода електрода. Поред тога, забележене су промене температуре услед третмана.

3.4. Спектрални профили екстраката морских алги

Спектри апсорпције УВ-ВИС различитих екстраката морских алги мерени су за опсег од 200 до 450 нм коришћењем двоструког снопа Тхермо Сциентифиц Еволутион 350 УВ Вис спектрофотометра (Тхермо Фисхер Сциентифиц, Валтхам, МА, УСА) са кварц киветима од 1 цм. Урађена су три скенирања за сваки екстракт морске алге.

3.5. Одређивање укупног садржаја полифенола

Укупан садржај фенола (ТПЦ) уморске алгеекстракти су одређени коришћењем Фолин–Циоцалтеу реагенса према мало модификованој методи коју је описао Зханг [92] коришћењем аМултискан Ски Мицроплате Спецтропхотометер (Тхермо Фисхер Сциентифиц, Валтхам, МА,УСА). Запремина од 20 µЛморске алгеекстракт или серијски стандардни раствор је помешан са 100 µЛ Фолин–Циоцалтеу реагенса (10 процената у дестилованој води). После 5 минута, додато је 80 µЛ 7,5 процената (в/в) раствора натријум карбоната. Реакциона смеша је инкубирана на собној температури и у мраку 30 мин. Апсорбанца је мерена на таласној дужини од 760 нм. Дестилована вода је коришћена као бланко. Стандардна крива галне киселине је коришћена за одређивање укупног садржаја фенола и изражена као µг еквивалената галне киселине (ГАЕ) по граму сувог материјала (µг ГАЕ/г дв).

3.6. Одређивање укупног садржаја флавоноида

Укупан садржај флавоноида (ТФЦ) уморске алгеекстракти су одређени методом коју је описао Камтекар [93] и прилагођени 96-микроплочама у бунарима. Укратко, запремина од 25 µЛоф екстракта морске алге или серијског стандардног раствора је помешана са 100 µЛ натријум нитрита (0,375 процената в/в). После 5 минута, 25 µЛ алуминијум хлорида (3 процента в/в) је додато у смешу и инкубирано 6 минута на собној температури. Затим је у смешу додато 100 уЛ натријум хидроксида (2 процента в/в) и помешано. Одмах је мерена апсорпција на таласној дужини од 510 нм. Дестилована вода и етанол су коришћени као празни. Стандардна крива кверцетина (раствореног у етанолу) је коришћена за одређивање укупног садржаја фенола и израженог као µг кверцетинских еквивалената (КЕ) по граму сувог материјала (µг КЕ/г дв).

3.7. Одређивање садржаја угљених хидрата

Садржај слободних шећера мерен је методом описаном у [94], уз мале модификације. 50 µЛ раствора фенола (4 процента) и 250 µЛ сумпорне киселине (96 процената) додато је у 100 µЛ узорка или стандардног раствора. После 10 минута инкубације на собној температури, очитана је апсорпција смеше на 490 нм. Стандардна крива глукозе је коришћена за одређивање укупног садржаја угљених хидрата и изражена као мг еквивалената глукозе (ГлуЕ) по граму сувог материјала (мг ГлуЕ/г дв).

3.8. Антиоксидативна својства екстракта морских алги

3.8.1. 2,2 дифенил-1-пикрилхидразил (ДППХ) тест уклањања слободних радикала

Тхеантиоксидансактивност (ДППХ) офморске алгеЕкстракти су одређени према претходно описаној методологији [94] уз одређене модификације. Укратко, 200 µЛоф 10,825 × 10-5 М раствора ДППХ додато је у 100 µЛ узорка (1:1 у метанолу) у 96-плочи са бунарима. Иста запремина ДППХ је помешана са 50 µЛ стандарда плус 50 µЛ метанола. Затим су узорци и стандард инкубирани на тамном месту на собној температури 30 мин. Апсорбанца је мерена на таласној дужини од 517 нм. Дестилована вода је коришћена као бланко. Способност уклањања ДППХ радикала израчуната је коришћењем следеће једначине:

Ефекат чишћења ( проценат )=(1 − (Узорак − Слеп узорак)/(А контрола − Аметанол бланк)) × 100 (1)

где је Ацонтрол апсорбанца контроле (ДППХ раствор без узорка), А узорак је апсорбанција узорка за испитивање (ДППХ раствор плус тест узорак), А узорак је апсорбанца само узорка (узорак без ДППХ раствора) и Аметанол бланк је апсорпција само метанола. Комерцијалниантиоксидансс (аскорбинска киселина, гална киселина и -токоферол) су коришћене као позитивне контроле.

цистанцхе су антиоксиданси

3.8.2. Тест за смањење антиоксидативне моћи (ФРАП) јона гвожђа

ФРАП активност је мерена према методи Бензие анд Страин [95]. Укратко, ацетатни пуфер (300 мМ, пХ 3,6), 2,4,6-трипиридил-с-триазин (ТПТЗ) 10 мМ у 40 мМ ХЦл, и ФеЦл3·6Х2О (20 мМ) су помешани у односу 10:1:1 да добијете радни ФРАПреагент. Реакциона смеша је инкубирана на 37 ◦Ц 10 мин. Узорак од 50 µЛ из сваког екстракта је помешан са 150 µЛ радног раствора ФРАП током 8 минута на собној температури. Апсорбанца обојеног производа, Ферроус-ТПТЗ је измерена на таласној дужини од 593 нм. ФРАП вредности одморске алгес екстракти су изражени као µМ тролокс еквивалената (ТЕ) по граму сувог материјала.

3.8.3. 2,2 Азино-бис (3-етилбензотиазолин-6-сулфонска киселина) (АБТС) тест

Анализа је обављена коришћењем АБТС протокола за деколоризацију [76] са одређеним модификацијама. АБТС радикалски катјон (АБТС. плус) је произведен реакцијом АБТС (66 мг) са 10 мЛ раствора калијум персулфата (2,45 мМ). Смеша је остављена у мраку на собној температури 12-16 х пре употребе. Тхе АБТС. плус раствор је разблажен водом до апсорпције од 0,700 на 734 нм. Реакциона смеша (200 ул) је пребачена на амикроплочу, додато је 50 уЛ узорка и затим 150 уЛ раствора реагенса. Плоча је мућкана 10 с средњом брзином, а апсорбанца је измерена на 734 нм након 5 минута инкубације на собној температури. Стандардна крива је припремљена графиком инхибиције А734нм Тролок стандарда као функције њихових концентрација. Тхе ТролокекуивалентантиоксидансВредност капацитета (ТЕАЦ) узорака је израчуната коришћењем једначине добијене из линеарне регресије стандардне криве замењене вредностима А734нм за сваки узорак:

ТЕАЦ (µМ)=(инхибиција узорка А734нм − пресек)/нагиб (2)

Тхеантиоксидансактивност је изражена у концентрацији ТЕАЦ, µмол/г суве алге.

3.9. Анти-ензимска активност екстракта морских алги

3.9.1. Тест инхибиције колагеназе

Комплет за колориметријску анализу активности колагеназе (МАК293), купљен од Сигма Алдрицх, коришћен је за одређивање инхибиције колагеназеморске алгеекстракти. Комплет је мерио активност колагеназе коришћењем синтетичког пептида (ФАЛГПА) који имитира структуру колагена. Поступак је обављен према упутствима комплета.

3.9.2. Тест инхибиције еластазе

Инхибиција еластаземорске алгес екстракти су испитивани у раствору ТРИС пуфера модификованом методом као што је раније описано [96]. Укратко, 100 µЛ 0,1 М раствора ТРИС пуфера (пХ 8,0), 25 µЛ еластазе (1 У/мЛ у ТРИС пуферу) и 25 µЛ екстракта узорка су помешани и инкубирани 15 минута на 30 Ц пре додавања супстрата за почетак реакције. После времена инкубације, додато је 50 уЛ 2 мМ раствора АААПВН. Затим је апсорбанца на 420 нм праћена током 20 минута коришћењем читача микроплоча на константној температури од 30 Ц. Коначно, инхибиција еластазе је израчуната у процентима коришћењем једначине:

проценат инхибиције=[(∆Абс/мин контрола − ∆Абс/мин узорак)/∆Абс/минконтрола] × 100 (3)

где је Абсцонтрол апсорбанца теста који користи пуфер уместо инхибитора (узорак), а Абс узорак је апсорбанца екстракта узорка. Кверцетин је коришћен као позитивна контрола. ТРИС пуфер је коришћен као празан.

ефекти одекстракт цистанцхе:против старења

3.9.3. Тест инхибиције тирозиназе

тирозиназаинхибиторни тест је изведен према методи коју је претходно описао [66] користећи Л-ДОПА као супстрат. 20 µЛ узорка, 10 µЛ печуркетирозиназераствор (50 У/мЛ у фосфатном пуферу) и 80 µЛ фосфатног пуфера (пХ=6.8) су помешани у микроплочи и претходно инкубирани на 37 ◦Ц 5 мин. Затим је додато 90 уЛ Л-ДОПА (2 мг/мЛ). Формирање допахрома је одмах праћено током 20 минута на 475 нм у читачу микроплоча на константној температури од 37 ◦Ц. Проценат инхибицијетирозиназеензим је израчунат помоћу једначине:

проценат инхибиције=[(∆Абс/минцонтрол − ∆Абс/мин узорак)/∆Абс/минцонтрол] × 100 (4)

где је контрола Абс апсорпција теста који користи пуфер уместо инхибитора (узорак), а Абс узорак је апсорбанца екстракта узорка. Кверцетин је коришћен као позитивна контрола. Фосфатни пуфер је коришћен као бланко.

3.9.4. Тест инхибиције хијалуронидазе

Инхибициона активност хијалуронидазе је мерена као што је претходно описано у [66] са неколико модификација. Запремина од 100 µл хијалуронидазе типа-1-С говеђих тестиса (2100 У/мЛ) растворена у 0. 1 М ацетатни пуфер (пХ 3,5) је помешан са 100 µЛ екстракта и инкубиран на 37 ◦Ц током 20 мин. Запремина од 200 µЛ 6 мМ калцијум хлорида је додата у реакциону смешу, а затим је смеша инкубирана на 37 ◦Ц током 20 мин. Ова Ца2 плус активирана хијалуронидаза је третирана са 250 µЛ натријум хијалуроната (1,2 мг/мЛ) раствореног у 0,1 М ацетатном пуферу (пХ 3,5), а затим инкубирана у воденом купатилу на 37 ◦Ц током 40 мин. У реакциону смешу је додато 50 µЛ 0,9 М натријум хидроксида и 100 µЛ 0,2 М натријум бората и затим инкубирано у кључалом воденом купатилу 5 минута. После хлађења на собну температуру, 250 уЛ раствора ρ-диметиламинобензалдехида (ДАМБ) је додато у реакциону смешу. Раствор ДАМБ је припремљен растварањем 0,25 гоф ДАМБ у 21,88 мЛ 100% сирћетне киселине и 3,12 мЛ 10Н хлороводоничне киселине. Контролна група је третирана са 100 µЛ 5 процената воде уместо екстракта. Апсорбанца је мерена на таласној дужини од 585 нм после 45 мин. Проценат инхибиције ензима је израчунат коришћењем следеће једначине:

проценат инхибиције=[(Абсцонтрол − Абссампле)/Абсцонтрол] × 100 (5)

где је контрола Абс апсорпција теста који користи пуфер уместо инхибитора (узорак), а Абс узорак је апсорбанца екстракта узорка. Танинска киселина се користи као референтни стандард.

3.10. Статистичка анализа

Просек троструке анализе сваког екстракта је израчунат и коришћен за проналажење средњих вредности и стандардних девијација за сваку групу (н {{0}}). Општи линеарни модели (ГЛМ) за фиксне факторе су примењени да би се проценили главни ефекти и двосмерне интеракције експерименталних фактора (врсте и методе екстракције) на мерене варијабле. Даље, АНОВА и Тукеи–Крамеров тест су коришћени за идентификацију значајних (п < 0,05)="" разлика="" између="" група.="" пирсонова="" корелација="" је="" коришћена="" за="" процену="" линеарног="" односа="" између="" варијабли.="" анализа="" главних="" компоненти="" (пца)="" је="" коришћена="" за="" откривање="" структуре="" у="" односу="" између="" мерених="" варијабли="" и="" експерименталних="" фактора.="" тхепца="" редукује="" обимне="" податке="" на="" мали="" скуп="" линеарних="" комбинација="" повезаних="" варијабли="" (тј.="" фактора)="" на="" основу="" образаца="" корелације="" између="" оригиналних="" варијабли.="" добијене="" комбинације="" линеарних="" атрибута="" могу="" се="" користити="" за="" профилисање="" специфичних="" карактеристика="" производа="" на="" основу="" проучаваних="" варијабли.="" све="" статистичке="" анализе="" су="" обављене="" коришћењем="" нцсс="" 2020="" статистицалсофтваре="" (2020)="" (нцсс,="" ллц.,="" каисвилле,="" ут,="">

екстракт цистанцхе против старења

4. Закључци

Исходи овог првог скрининг експеримента показали су потенцијал три исландскаморске алгеврсте обезбеђујући ефикасне корисне ефекте на неколико путева. Зелени приступ развијен коришћењем водених импулсних електричних поља показао је сличне резултате као и традиционална екстракција топле воде, показујући неколико предности као што су његова нетермална природа и краће време екстракције (10 мин наспрам 45 мин). Међу три врсте алги, смеђе макроалге А. есцулента су показале највећи садржај ТПЦ и ТФЦ, а такође су показале и највећиантиоксиданскапацитети Штавише, водени екстракти А. есцулента су показали боље инхибиторне активности од П. палмариа и У. лацтуца према колагенази, еластази, тирозинази и хијалуронидази као најперспективнијимморске алгеврсте са одличним анти-ензимским активностима за њихову употребу у избељивању коже,против старењаи здравље коже. Занимљиво је да је А. Екстракти есцулента произведени ПЕФ методом показали су инхибицију колагеназе од 91 процената, већу од активности инхибиције коју показује традиционална екстракција топлом водом и чак већу од инхибитора обезбеђеног комерцијалним комплетом. У закључку, наша прелиминарна студија сугерише да исландскиморске алгеЕкстракти на бази, посебно екстракти смеђе макроалге А. есцулента, произведени екстракцијом потпомогнутом воденим импулсним електричним пољима, су потенцијални функционални састојци који би се у блиској будућности могли користити као активна једињења за козметичке и козмецеутске формулације.

Референце

1. Ариеде, МБ; Цандидо, ТМ; Јацоме, АЛМ; Веласцо, МВР; де Царвалхо, ЈЦМ; Баби, АР Козметички атрибути алги—Аревиев. Алгал Рес. 2017, 25, 483–487. [ЦроссРеф]

2. Маккар, ХПС; Тран, Г.; Хеузе, В.; Гигер-Ревердин, С.; Лессире, М.; Лебас, Ф.; Анкерс, П. Морске алге за исхрану стоке: Преглед.Аним. Феед Сци. Тецхнол. 2016, 212, 1–17. [ЦроссРеф]

3. О'Цоннор, Ј.; Меанеи, С.; Вилијамс, Џорџија; Хаиес, М. Екстракција протеина из четири различите морске алге користећи три различите физичке стратегије пре третмана. Молецулес 2020, 25, 2005. [ЦроссРеф]

4. Макимо, П.; Ферреира, ЛМ; Бранко, П.; Лима, П.; Лоуренцо, А. Сецондари Метаболитес анд Биологицал Ацтивити оф Инвасиве Мацроалгаеоф Соутхерн Еуропе. Мар. Другс 2018, 16, 265. [ЦроссРеф]

5. Баркиа, И.; Саари, Н.; Маннинг, СР Микроалге за производе високе вредности за људско здравље и исхрану. Мар. Другс 2019, 17, 304. [ЦроссРеф]

6. Гомез-Заваглиа, А.; Прието Лаге, МА; Јименез-Лопез, Ц.; Мејуто, ЈЦ; Симал-Гандара, Ј. Тхе Потентиал оф Сеавеедс ас а Соурцеоф Фунцтионал Ингредиентс оф Пребиотиц анд Антиокидант Валуе. Антиоксиданси 2019, 8, 406. [ЦроссРеф] [ПубМед]

7. Салехи, Б.; Схарифи-Рад, Ј.; Сеца, АМЛ; Пинто, ДЦГА; Мицхалак, И.; Тринцоне, А.; Мисхра, АП; Нигам, М.; Зам, В.; Мартинс, Н. Тренутни трендови морских алги: Поглед на хемијски састав, фитофармакологију и козметичке примене. Молецулес2019, 24, 4182. [ЦроссРеф]

8. Газали, Е.; Ускоро, ПЦ; Мутум, ДС; Нгуиен, Б. Здравље и козметика: Истраживање вредности потрошача за куповину органских производа за личну негу. Ј. Ретаил. Цонсум. Серв. 2017, 39, 154–163. [ЦроссРеф]

9. Амберг, Н.; Фогарасси, Ц. Греен Цонсумер Бехавиор ин тхе Цосметицс Маркет. Ресурси 2019, 8, 137. [ЦроссРеф]

10. Переира, Л. Морске алге као извор биоактивних супстанци и терапија за негу коже—козмецеутика, алготерапија и таласотерапија. Козметика 2018, 5, 68. [ЦроссРеф]

11. Мартинс, А.; Виеира, Х.; Гаспар, Х.; Сантос, С. Морски природни производи на тржишту у фармацеутској и козмецеутској индустрији: савети за успех. Мар. Другс 2014, 12, 1066–1101. [ЦроссРеф] [ПубМед]

12. Агатоновић-Кустрин, С.; Мортон, Д. Цосмецеутицалс добијени од биоактивних супстанци које се налазе у морским алгама. Океанографија 2013,1, 106.

13. Ванг, Х.-МД; Цхен, Ц.-Ц.; Хуинх, П.; Цханг, Ј.-С. Истраживање потенцијала коришћења алги у козметици. Биоресоур. Тецхнол. 2015, 184, 355–362. [ЦроссРеф]

14. Јахан, А.; Ахмад, ИЗ; Фатима, Н.; Ансари, ВА; Акхтар, Ј. Биоактивна једињења алги у козмецеутској индустрији: преглед. Пхицологиа 2017, 56, 410–422. [ЦроссРеф]

15. Мороне, Ј.; Алфеус, А.; Васцонцелос, В.; Мартинс, Р. Откривање потенцијала цијанобактерија у козметици и козмецеутици — нови биоактивни приступ. Алгал Рес. 2019, 41, 101541. [ЦроссРеф]

16. Цикош, А.-М.; Јерковић, И.; Молнар, М.; Шубари´ц, Д.; Јоки´ц, С. Нови трендови за примену природних производа из макроалги. Нат. Прод.Рес. 2019, 37, 1–12. [ЦроссРеф]

17. Тхринг, ТС; Хили, П.; Наугхтон, ДП Анти-колагеназа, антиеластаза и антиоксидативна активност екстраката из 21 биљке. БМЦЦомплемент. Алтерн. Мед. 2009, 9, 27. [ЦроссРеф]

18. Јацобсен, Ц.; Сøренсен, АМ; Холдт, СЛ; Акох, ЦЦ; Хермунд, ДБ Извор, екстракција, карактеризација и примена нових антиоксиданата из морских алги. Анну. Рев. Фоод Сци. Тецхнол. 2019, 10, 541–568. [ЦроссРеф]

19. Цастејон, Н.; Сеноранс, ФЈ Симултана екстракција и фракционисање омега-3 ацилглицерола и гликолипида из влажне биомасе микроалги Нанноцхлоропсис гадитана коришћењем течности под притиском. Алгал Рес. 2019, 37, 74–82. [ЦроссРеф]

20. Мохамед, МЕА; Еисса, АХА Пулсна електрична поља за технологију прераде хране. Структура. Фунцт. Фоод Енг. 2012, 11, 275–306.

21. Геада, П.; Родригуес, Р.; Лоуреиро, Л.; Переира, Р.; Фернандес, Б.; Теикеира, ЈА; Васцонцелос, В.; Виценте, АА Електротехнологије примењене на биотехнологију микроалги—Апликације, технике и будући трендови. Ренев. Сустаин. Енерги Рев. 2018, 94, 656–668.[ЦроссРеф]

22. Поојари, ММ; Барба, ФЈ; Алиакбариан, Б.; Донси, Ф.; Патаро, Г.; Диас, ДА; Јулиано, П. Иновативне алтернативне технологије за екстракцију каротеноида из микроалги и морских алги. Мар. Другс 2016, 14, 214. [ЦроссРеф] [ПубМед]

23. Воробиев, Е.; Лебовка, Н. 2— Екстракција из хране и биоматеријала побољшана импулсном електричном енергијом. Инновативе Фоод Процессинг Тецхнологиес; Кноерзер, К., Јулиано, П., Смитхерс, Г., ур.; Воодхеад Публисхинг: Савстон, УК, 2016; стр. 31–56.

24. Кафербоцк, А.; Сметана, С.; де Вос, Р.; Сцхварз, Ц.; Тоепфл, С.; Парниаков, О. Одржива екстракција вредних компоненти из Спирулине уз помоћ технологије пулсних електричних поља. Алгал Рес. 2020, 48, 101914. [ЦроссРеф]

25. Парниаков, О.; Барба, ФЈ; Грими, Н.; Марцхал, Л.; Јубеау, С.; Лебовка, Н.; Воробиев, Е. Пулсно електрично поље потпомогнуто екстракцијом нутритивно вредних једињења из микроалги Нанноцхлоропсис спп. коришћењем бинарне мешавине органских растварача и воде.Иннов. Фоод Сци. Емерг. Тецхнол. 2015, 27, 79–85. [ЦроссРеф]

26. Сцхерер, Д.; Круст, Д.; Фреи, В.; Муеллер, Г.; Ницк, П.; Гусбетх, Ц. Опоравак протеина из ЦхлореллаВулгарис уз помоћ пулсног електричног поља (ПЕФ) је посредован ензимским процесом након смрти ћелије. Алгал Рес. 2019, 41, 101536. [ЦроссРеф]

27. Насери, А.; Маринхо, ГС; Холдт, СЛ; Бартела, ЈМ; Јацобсен, Ц. Екстракција уз помоћ ензима и карактеризација протеина из црвене морске алге Палмариа палмитате. Алгал Рес. 2020, 47, 101849. [ЦроссРеф]

крст

28. Робин, А.; Казир, М.; Сацк, М.; Израел, А.; Фреи, В.; Муеллер, Г.; Ливнеи, ИД; Голберг, А. Функционални протеински концентрати екстраховани из зелене морске Мацроалга Улва сп., помоћу високонапонских импулсних електричних поља и механичке пресе. АЦС Сустаин. Цхем. инж.2018, 6, 13696–13705. [ЦроссРеф]

29. Еинарсдоттир, Р.; Þораринсдоттир, КА; Аðалбјорнссон, БВ; Гуðмундссон, М.; Мартеинсдоттир, Г.; Кристбергссон, К. Ефекат параметара третмана уз помоћ импулсног електричног поља на сирову водену екстракцију Ламинариа дигитата. Ј. Аппл. Пхицол. 2021, 33, 3287–3296. [ЦроссРеф]

30. Постма, ПР; Церезо-Цхинарро, О.; Аккерман, РЈ; Оливиери, Г.; Вијффелс, РХ; Бранденбург, ВА; Еппинк, МХМ Биорафинерија макроалги Улва Лацтуца: Екстракција протеина и угљених хидрата благом дезинтеграцијом. Ј. Аппл. Пхицол. 2018, 30, 1281–1293.[ЦроссРеф]

31. Збинден, МДА; Штурм, БСМ; Норд, РД; Цареи, ВЈ; Мооре, Д.; Схиногле, Х.; Стагг-Виллиамс, СМ Пулсно електрично поље (ПЕФ) као предтретман за интензивирање за екстракцију липида зеленијег растварача из микроалги. Биотецхнол. Биоенг. 2013, 110, 1605–1615.[ЦроссРеф]

32. Силве, А.; Папацхристоу, И.; Вустнер, Р.; Страßнер, Р.; Сцхирмер, М.; Лебер, К.; Гуо, Б.; Интерранте, Л.; Постен, Ц.; Фреи, В. Екстракција липида из влажних прототекоида микроалге Аукеноцхлорелла коришћењем третмана импулсним електричним пољем и мешавина етанол-хексан. АлгалРес. 2018, 29, 212–222. [ЦроссРеф]

33. Цхиттапун, С.; Јоњароен, В.; Кхумрангсее, К.; Цхароенрат, Т. Екстракција Ц-фикоцијанина из две слатководне цијанобактерије помоћу технике замрзавања-одмрзавања и пулсног електричног поља за побољшање ефикасности и чистоће екстракције. Алгал Рес. 2020, 46, 101789. [ЦроссРеф]

34. Ариее, АНА; Агиеи, Д.; Аканби, ТО Опоравак и употреба пигмената морских алги у преради хране. Цурр. Опин. Фоод Сци.2018, 19, 113–119. [ЦроссРеф]

35. Новацка, М.; Таппи, С.; Виктор, А.; Рибак, К.; Мисзцзиковска, А.; Цзизевски, Ј.; Дроздзал, К.; Витрова-Рајцхерт, Д.; Тилевицз, У. Утицај импулсног електричног поља на екстракцију биоактивних једињења из цвекле. Фоодс 2019, 8, 244. [Унакрсна референца]

36. Мартинез, ЈМ; Делсо, Ц.; Алварез, И.; Расо, Ј. Екстракција вредних једињења из микроорганизама уз помоћ импулсног електричног поља. Рев. Фоод Сци. Фоод Саф. 2020, 19, 530–552. [ЦроссРеф]

37. Патаро, Г.; Гоеттел, М.; Страесснер, Р.; Гусбетх, Ц.; Феррари, Г.; Фреи, В. Ефекат ПЕФ третмана на екстракцију вредних једињења из микроалги Ц. вулгарис. Цхем. инж. Транс. 2017, 57, 67–72.

38. Брунтон, НП; Луенго, Е. Импулсна електрична поља за екстракцију секундарних метаболита из биљака. У импулсним електричним пољима за екстракцију секундарних метаболита из биљака; Миклавчић, Д., ур.; Спрингер Интернатионал Публисхинг: Цхам, Свитзерланд, 2017; стр. 1–15.

39. Сцхиенер, П.; Блацк, КД; Станлеи, МС; Греен, ДХ Сезонске варијације у хемијском саставу врста морских алги Ламинариа дигитата, Ламинариа хипербореа, Саццхарина латиссима и Алариа есцулента. Ј. Аппл. Пхицол. 2015, 27, 363–373. [ЦроссРеф]

40. Салгадо, ЛТ; Томазетто, Р.; Цинелли, ЛП; Фарина, М.; Филхо, ГМА Утицај алгината смеђих алги на способност фенолних једињења за апсорпцију ултраљубичастог зрачења ин витро. Браз. Ј. Оцеаногр. 2007, 55, 145–154. [ЦроссРеф]

41. Орфаноудаки, М.; Хартманн, А.; Карстен, У.; Ганзера, М. Хемијско профилисање аминокиселина сличних микоспорину у двадесет три врсте алги. Ј. Пхицол. 2019, 55, 393–403. [ЦроссРеф]

42. Пангестути, Р.; Сиахаан, ЕА; Ким, С.-К. Фотозаштитне супстанце изведене из морских алги. Мар. Другс 2018, 16, 399.[ЦроссРеф] [ПубМед]

43. Сцхнеидер, Г.; Фигуероа, ФЛ; Вега, Ј.; Цхавес, П.; Алварез-Гомез, Ф.; Корбее, Н.; Бономи-Баруфи, Ј. Фотопротекциона својства морских фотосинтетичких организама узгајаних у областима високе изложености ултраљубичастом зрачењу: Козмецеутске примене. Алгал Рес. 2020,49, 101956. [ЦроссРеф]

44. Нишида, И.; Кумагаи, И.; Мицхиба, С.; Иасуи, Х.; Кисхимура, Х. Ефикасна екстракција и антиоксидативни капацитет аминокиселина сличних микоспорину из палмитата црвене алге Дулсе Палмариа у Јапану. Мар. Другс 2020, 18, 502. [ЦроссРеф] [ПубМед]

45. Рехм, Е.; Далглеисх, Ф.; Хуот, М.; Маттеоли, С.; Арцхамбаулт, П.; Ламберт Гирард, С.; Пицхе, М.; Лагунас-Моралес, Ј. Упоређивање флуоресцентних и диференцијалних апсорпционих ЛиДАР техника за детекцију биомасе алги са применама на арктичким супстратима. ИнОцеан Сенсинг анд Мониторинг Кс; Међународно друштво за оптику и фотонику: Беллингхам, ВА, САД, 2018; свеска 10631, стр. 106310З.

46. ​​Ванг, Т.; Јонсдоттир, Р.; Олафсдоттир, Г. Укупна фенолна једињења, уклањање радикала и хелација метала екстраката исландских морских алги. Фоод Цхем. 2009, 116, 240–248. [ЦроссРеф]

47. Бедоук, Г.; Хардоуин, К.; Бурлот, АС; Боургоугнон, Н. Дванаесто поглавље—Биоактивне компоненте из морских алги: Козметичке апликације и будући развој. Ин Адванцес ин Ботаницал Ресеарцх; Боургоугнон, Н., Ед.; Ацадемиц Пресс: Цамбридге, МА,САД, 2014; Том 71, стр. 345–378.

48. Роледа, МИ; Марфаинг, Х.; Десница, Н.; Јонсдоттир, Р.; Скјермо, Ј.; Ребоурс, Ц.; Нитсцхке, У. Варијације у садржају полифенола и тешких метала у расутом стању биомасе сакупљене и култивисане морске алге: Процена здравственог ризика и импликације за примену у храни. Контрола хране 2019, 95, 121–134. [ЦроссРеф]

49. Уммат, В.; Тивари, БК; Јаисвал, АК; Цондон, К.; Гарциа-Вакуеро, М.; О'Дохерти, Ј.; О'Доннелл, Ц.; Рајауриа, Г. Оптимизација фреквенције ултразвука, времена екстракције и растварача за опоравак полифенола, флоротанина и повезаних антиоксидативних активности из смеђих морских алги. Мар. Другс 2020, 18, 250. [ЦроссРеф]

50. Афонсо, Ц.; Матос, Ј.; Гуарда, И.; Гомес-Биспо, А.; Гомес, Р.; Цардосо, Ц.; Гуеифао, С.; Делгадо, И.; Цоелхо, И.; Цастанхеира, И.; ет ал.Биоактивни и нутритивни потенцијал Алариа есцулента и Саццхарина латиссима. Ј. Аппл. Пхицол. 2021, 33, 501–513. [ЦроссРеф]

51. Цотас, Ј.; Леандро, А.; Монтеиро, П.; Пацхецо, Д.; Фигуеиринха, А.; Гонцалвес, АММ; да Силва, ГЈ; Переира, Л. Фенолци морских алги: од екстракције до примене. Мар. Другс 2020, 18, 384. [ЦроссРеф]

52. Фарасат, М.; Кхавари-Нејад, РА; Набави, СМ; Намјооиан, Ф. Антиоксидативна активност, укупни феноли и садржај флавоноида у неким јестивим зеленим морским алгама са северних обала Персијског залива. ИЈПР 2014, 13, 163–170. [ПубМед]

53. Маниваннан, К.; Тхирумаран, Г.; Деви, ГК; Анантхараман, П.; Баласубраманиан, Т. Прокимате Цомпоситион оф Дифферент Гроупоф Сеавеедс фром Ведалаи Цоастал Ватерс (Гулф оф Маннар): Соутхеаст Цоаст оф Индиа. Блиски исток Ј. Сци. Рес. 2009, 4, 72–77.

54. Мишурцова, Л.; Шкрованкова, С.; Самек, Д.; Амброжова, Ј.; Мацх ˚у, Л. Поглавље 3—Здравствене предности полисахарида алги у исхрани људи. Ин Адванцес ин Фоод анд Нутритион Ресеарцх; Хенри, Ј., Ед.; Ацадемиц Пресс: Цамбридге, МА, САД, 2012; Том 66, стр. 75–145.

55. Лафарга, Т.; Ациен-Фернандез, ФГ; Гарциа-Вакуеро, М. Биоактивни пептиди и угљени хидрати из морских алги за примену у храни: Природна појава, изолација, пречишћавање и идентификација. Алгал Рес. 2020, 48, 101909. [ЦроссРеф]

56. Мутрипах, С.; Меинита, МДН; Канг, Ј.-И.; Јеонг, Г.-Т.; Сусанто, АБ; Прабово, РЕ; Хонг, И.-К. Производња биоетанола из хидролизата Палмариа палмата коришћењем сумпорне киселине и ферментације са пивским квасцем. Ј. Аппл. Пхицол. 2014, 26, 687–693.[ЦроссРеф]

57. Домингуез, Х.; Лорет, ЕП Улва лацтуца, Извор невоља и потенцијалних богатстава. Мар. Другс 2019, 17, 357. [ЦроссРеф]

58. Кидгелл, ЈТ; Магнуссон, М.; де Нис, Р.; Глассон, ЦРК Улван: Систематски преглед екстракције, састава и функције. Алгал Рес. 2019, 39, 101422. [ЦроссРеф]

59. Хабеебуллах, СФК; Алагарсами, С.; Арноус, А.; Јацобсен, Ц. Ензимска екстракција антиоксидативних састојака из данских морских трава и карактеризација активних принципа. Алгал Рес. 2021, 56, 102292. [ЦроссРеф]

60. Иуан, И.; Зханг, Ј.; Фан, Ј.; Цларк, Ј.; Схен, П.; Ли, И.; Зханг, Ц. Екстракција фенолних једињења уз помоћ микроталасне пећнице из четири економске врсте смеђих макроалги и процена њихових антиоксидативних активности и инхибиторних ефеката на -амилазу, -глукозидазу, липазу панкреаса и тирозиназу. Инт. Фоод Рес. Ј. 2018, 113, 288–297. [ЦроссРеф]

61. Балбоа, ЕМ; Цонде, Е.; Моуре, А.; Фалкуе, Е.; Домингуез, Х. Ин витро антиоксидативна својства сирових екстраката и једињења из смеђих алги. Фоод Цхем. 2013, 138, 1764–1785. [ЦроссРеф]

62. Каинама, Х.; Фатмавати, С.; Сантосо, М.; Папилаиа, ПМ; Ерсам, Т. Тхе Релатионсхип оф Фрее Радицал Сцавенгинг анд Тотал Пхенолицанд Флавоноид Цонтентс оф Гарциниа ласоар ПАМ. Пхарм. Цхем. Ј. 2020, 53, 1151–1157. [ЦроссРеф]

63. Dang, T.T.; Van Vuong, Q.; Schreider, M.J.; Bowyer, M.C.; Van Altena, I.A.; Scarlett, C.J. Optimisation of ultrasound-assistedextraction conditions for phenolic content and antioxidant activities of the alga Hormosira banksii using response surfacemethodology. J. Appl. Phycol. 2017, 29, 3161–3173. [CrossRef]

64. Цоутеау, Ц.; Цоиффард, Л. Поглавље 14—Примена морских алги у козметици. У Морске алге у здрављу и превенцији болести; Флеуренце, Ј., Левине, И., Едс.; Академска штампа: Сан Дијего, Калифорнија, САД, 2016; стр. 423–441.

65. Тсукахара, К.; Такема, И.; Мориваки, С.; Тсуји, Н.; Сузуки, И.; Фујимура, Т.; Имокава, Г. Селективна инхибиција кожне фибробластеластазе изазива превенцију формирања бора изазваног ултраљубичастим Б-индукованим у зависности од концентрације. Ј. Инвестиг. Дерматол. 2001, 117, 671–677. [ЦроссРеф]

66. Лиианаарацхцхи, ГД; Самарасекера, ЈКРР; Маханама, КРР; Хемалал, КДП тирозиназа, еластаза, хијалуронидаза, инхибиторна и антиоксидативна активност лековитих биљака Шри Ланке за нове козмецеутике. Инд. Цропс Прод. 2018, 111, 597–605. [ЦроссРеф]

67. Гупта, ПЛ; Рајпут, М.; Оза, Т.; Триведи, У.; Сангхви, Г. Еминенце оф Мицробиал Продуцтс ин Цосметиц Индустри. Нат. Прод.Биопроспецт. 2019, 9, 267–278. [ЦроссРеф] [ПубМед]

68. Золгхадри, С.; Бахрами, А.; Хассан Кхан, МТ; Муноз-Муноз, Ј.; Гарсија-Молина, Ф.; Гарсија-Кановас, Ф.; Сабоури, АА Свеобухватан преглед инхибитора тирозиназе. Ј. Ензиме Инхиб. Мед. 2019, 34, 279–309. [ЦроссРеф]

69. Цоутеау, Ц.; Цоиффард, Л. Пхицоцосметицс анд Отхер Марине Цосметицс, Специфиц Цосметицс Формулатед Усинг Марине Ресоурцес.Мар. Другс 2020, 18, 322. [ЦроссРеф]

70. Сари, ДМ; Анвар, Е.; Арифианти, АЕ Антиоксидативна и инхибиторна активност тирозиназе етанолних екстраката смеђих морских алги (Турбинариа цоноидес) као састојка за осветљавање. Пхарм. Ј. 2019, 11, 379–382. [ЦроссРеф]

71. Бреннер, М.; Слух, ВЈ Заштитна улога меланина од УВ оштећења у људској кожи. Пхотоцхем. Пхотобиол. 2008, 84,539–549. [ЦроссРеф] [ПубМед]

72. Лее, СИ; Баек, Н.; Нам, Т.-Г. Природни, полусинтетички и синтетички инхибитори тирозиназе. Ј. Ензиме Инхиб. Мед. Цхем. 2016, 31,1–13. [ЦроссРеф] [ПубМед]

73. Ферререс, Ф.; Лопес, Г.; Гил-Изкуиердо, А.; Андраде, ПБ; Соуса, Ц.; Моуга, Т.; Валентао, П. Екстракти флоротанина из фукала које карактерише ХПЛЦ-ДАД-ЕСИ-МСн: приступи инхибиционом капацитету хијалуронидазе и антиоксидативним својствима. Мар.Другс 2012, 10, 2766–2781. [ЦроссРеф] [ПубМед]

74. Фаиад, С.; Нехме, Р.; Танноури, М.; Леселлиер, Е.; Пицхон, Ц.; Морин, П. Водени екстракти Мацроалга Падина павоница добијени течном екстракцијом под притиском и екстракцијом уз помоћ микроталасне пећнице инхибирају активност хијалуронидазе као што је приказано капиларном електрофорезом.Ј. Цхроматогр. А 2017, 1497, 19–27. [ЦроссРеф] [ПубМед]

75. Атхукорала, И.; Ким, К.-Н.; Јеон, И.-Ј. Антипролиферативна и антиоксидативна својства ензимског хидролизата из смеђе алге, Ецклониа цава. Фоод Цхем. Токицол. 2006, 44, 1065–1074. [ЦроссРеф]

76. Јименез-Есцриг, А.; Гомез-Ордонез, Е.; Руперез, П. Смеђе и црвене морске алге као потенцијални извори антиоксидативних нутрацеутика.Ј. Аппл. Пхицол. 2012, 24, 1123–1132. [ЦроссРеф]

77. Каравита, Р.; Сиривардхана, Н.; Лее, К.-В.; Хео, М.-С.; Иео, И.-К.; Лее, И.-Д.; Јеон, И.-Ј. Чишћење реактивних врста кисеоника, металкелација, редукциона снага и својства инхибиције пероксидације липида различитих фракција растварача из Хизикиа фусиформис.Еур. Фоод Рес. Тецхнол. 2005, 220, 363–371. [ЦроссРеф]

78. Јормалаинен, В.; Хонканен, Т. Варијација у природној селекцији за раст и флоротанини у смеђој алги Фуцус весицулосус.Ј. Еволут. Биол. 2004, 17, 807–820. [ЦроссРеф] [ПубМед]

79. Коивикко, Р.; Лопонен, Ј.; Пихлаја, К.; Јормалаинен, В. Течна хроматографска анализа високих перформанси флоротанина из смеђе алге Фуцус весицулосус. Пхитоцхем. Анал. 2007, 18, 326–332. [ЦроссРеф] [ПубМед]

80. Мареˇцек, В.; Микишка, А.; Хампел, Д.; Цејка, П.; Неувиртхов ˇ а, Ј.; Малацхова, А.; Церкал, Р. АБТС и ДППХ методе као алат за проучавање антиоксидативног капацитета јарог јечма и слада. Ј. Цереал Сци. 2017, 73, 40–45. [ЦроссРеф]

81. Асада, М.; Сугие, М.; Иноуе, М.; Накагоми, К.; Хонго, С.; Мурата, К.; Ирие, С.; Такеуцхи, Т.; Томизука, Н.; Ока, С. Инхибицијски ефекат алгинских киселина на хијалуронидазу и ослобађање хистамина из мастоцита. Биосци. Биотецхнол. Биоцхем. 1997, 61, 1030–1032.[ЦроссРеф] [ПубМед]

82. Масе, Т.; Иамауцхи, М.; Като, И.; Есаки, Х.; Иссхики, С. Кисели полисахарид који инхибира хијалуронидазу изолован из Порпхиридиум Пурпуреум. Збирка истраживачких есеја на Универзитету Гакуен за жене Суисхан. Нат. Сци. 2013, 44, 105–113.83. Толпезникаите, Е.; Барткевичс, В.; Рузаускас, М.; Пилкаитите, Р.; Вискелис, П.; Урбонавициене, Д.; Завистанавициуте, П.; Зокаитите, Е.; Руибис, Р.; Барткиене, Е. Цхарацтеризатион оф Мацро- анд Мицроалгае Ектрацтс Биоацтиве Цомпоундс анд Мицро- анд Мацроелементс Транситион фром Алгае то Ектрацт. Фоодс 2021, 10, 2226. [ЦроссРеф]

84. Гомез, И.; Хуовинен, П. Морфо-функционални обрасци и зоналност јужночилеанских морских алги: значај фотосинтетичких и биооптичких особина. Мар. Ецол. Прог. Сер. 2011, 422, 77–91. [ЦроссРеф]

85. Карстен, У.; Виенцке, Ц. Фактори који контролишу формирање аминокиселина сличних микоспорину које апсорбују УВ у палмитату морске црвене Алге Палмарие из Шпицбергена (Норвешка). Ј. Плант. Пхисиол. 1999, 155, 407–415. [ЦроссРеф]

86. Уммат, В.; Сивагнанам, СП; Рајауриа, Г.; О'Доннелл, Ц.; Тивари, БК Напредак у техникама претходног третмана и технологијама зелене екстракције за биоактивност из морских алги. Трендс Фоод Сци. Технол 2021, 110, 90–106. [ЦроссРеф]

87. Боуссетта, Н.; Ланоиселле, Ј.-Л.; Бедел-Цлоутоур, Ц.; Воробиев, Е. Екстракција растворљиве материје из комине грожђа високонапонским електричним пражњењима за рекуперацију полифенола: ефекат сумпордиоксида и термичке обраде. Ј. Фоод Енг. 2009, 95, 192–198.[ЦроссРеф]

88. Гоеттел, М.; Еинг, Ц.; Гусбетх, Ц.; Страесснер, Р.; Фреи, В. Екстракција интрацелуларних вредности из микроалги уз помоћ импулсног електричног поља. Алгал Рес. 2013, 2, 401–408. [ЦроссРеф]

89. Хванг, П.-А.; Ву, Ц.-Х.; Гау, С.-И.; Цхиен, С.-И.; Хванг, Д.-Ф. Антиоксидативна и имуностимулирајућа активност топловодног екстракта из морске алге Саргассум епипхиллум. Ј. Мар. Сци. Тецхнол. 2010, 18, 41–46. [ЦроссРеф]

90. Сабеена Фарвин, КХ; Јацобсен, Ц. Фенолна једињења и антиоксидативне активности одабраних врста морских алги са данске обале. Фоод Цхем. 2013, 138, 1670–1681. [ЦроссРеф] [ПубМед]

92. Годлевска, К.; Мицхалак, И.; Тухи, Л.; Цхојнацка, К. Биостимуланси раста биљака на основу различитих метода екстракције морских алги водом. БиоМед Рес. Инт. 2016, 2016, 1–11. [ЦроссРеф] [ПубМед]

92. Зханг, К.; Зханг, Ј.; Схен, Ј.; Силва, А.; Деннис, ДА; Барров, ЦЈ Једноставна 96-метода микроплоче за процену садржаја укупног полифенола у морским алгама. Ј. Аппл. Пхицол. 2006, 18, 445–450. [ЦроссРеф]

93. Камтекар, С.; Кеер, В.; Патил, В. Процена садржаја фенола, садржаја флавоноида, инхибиторне активности антиоксиданса и алфа-амилазе у полихербалној формулацији која се продаје. Ј. Аппл. Пхарм. Сци. 2014, 4, 61.

94. Нето, Р.; Марцал, Ц.; Куеирос, А.; Абреу, М.; Силва, А.; Цардосо, С. Скрининг Улва ригида, Грацилариа сп., Фуцус весицулосус и Саццхарина латиссима као функционални састојци. Инт. Ј. Мол. Сци. 2018, 19, 2987. [ЦроссРеф]

95. Бензие, ИФ; Страин, ЈЈ Способност плазме да редукује гвожђе (ФРАП) као мера "антиоксидативне моћи": ФРАП тест. Анал.Биоцхем. 1996, 239, 70–76. [ЦроссРеф]

96. Еун Лее, К.; Бхарадвај, С.; Иадава, У.; Гу Канг, С. Евалуација кофеина као инхибитора колагеназе, еластазе и тирозиназе коришћењем ин силицо и ин витро приступа. Ј. Ензиме Инхиб. Мед. Цхем. 2019, 34, 927–936. [ЦроссРеф] [ПубМед]