Хемодијализа подиже оксидативни стрес кроз радикале центриране на угљеник упркос побољшаној биокомпатибилности

Активација леукоцита и резултујућиоксидативни стресизазванабиоинкомпатибилни материјалиу токуутицај хемодијализепрогноза пацијената. Упркос вишеструким напретцима удијализатори за хемодијализу, тхепрогноза хемодијализепацијенти са компликацијама које су дубоко повезане саоксидативни стрес, као такавдијабетеса мелитус остаје сиромашан. Стога смо поново проценили ефектехемодијализана више реактивних врста кисеоника користећи методе засноване на електронској спин резонанцији за даље побољшањебиокомпатибилностинхемодијализа. Уписали смо 31 пацијента у стабилном стању који су били на хемодијализи коришћењем полисулфонских дијализатора високог флукса. Ефекти хемодијализе на реактивне врсте кисеоника су процењени помоћу две методе: МУЛТиС, који процењује активности уклањања серума против више хидрофилних реактивних врста кисеоника, и и-СТрап, који детектује липофилне радикале у центру угљеника. Слично претходним студијама, открили смо да се активност уклањања хидроксилних радикала у серуму значајно побољшала након хемодијализе. За разлику од претходних студија, открили смо да је активност чишћења против алкоксил радикала значајно смањена након тогахемодијализа. Штавише, пацијенти са дијабетес мелитусом су показали смањење активности уклањања серума против алкил перокси радикала и повећање липофилних радикала у центру угљеника након хемодијализе. Ови резултати сугеришу да упркос великим побољшањима мембрана дијализатора, облициреактивне врсте кисеоникакоји се могу елиминисати током дијализе су ограничени, а више реактивних врста кисеоника остаје на повећаним нивоима током хемодијализе.

Кључне речи:хемодијализа, биокомпатибилност, алкил перокси радикална електронска спинска резонанца, МУЛТиС, и-СТрап

КЛИКНИТЕ ОВДЕ ДА ДОБИЈЕТЕ ПРИРОДНИ ОРГАНСКИ ЕКСТРАКТ ЦИСТАНЦХЕ СА 25% ЕХИНАКОЗИДА И 9% АКТЕОЗИДА ЗА ФУНКЦИЈУ БУБРЕГА

Вецистанцхе услуга подршке - највећи извозник цистанцхе у Кини:

Е-пошта:wallence.suen@wecistanche.com

Вхатсапп/тел:+86 15292862950

Купите за више детаља о спецификацијама:

хттпс://ввв.кјцистанцхе.цом/цистанцхе-схоп

Хронична болест бубрега(ЦКД) је познато да је повезан сависок оксидативни стрес. (-4)Акумулација уремичног токсинас са прооксидативним својствима која доводе домикроинфламацијеузрокованоповишење проинфламаторног цитокинаsје кључна карактеристикаЦКД патхопхисиологи. (с-, хемодијализа (ХД), широко спроведена терапија замене бубрега, делује као мач са две оштрице за смањење оксидативног стреса код пацијената са ЦКД. Активација полиморфонуклеарних леукоцита, услед контакта са мембраном или другим вештачким површинама у ХД колима , је главни узрок оксидативног стреса изазваног ХД.с-) Насупрот томе, уклањање прооксидативних уремичних токсина, посебно хидрофилних једињења ниске молекулске тежине као што су триметиламин-Ноксид или гванидино једињења, може побољшати антиоксидативну природу ХД, што доводи до дугорочног побољшања стопе преживљавања и квалитета живота упацијенти са ЦКД. (2,13) ​​Поред тога, корекција ацидозе доводи до поновног активирања антиоксидативних ензима и смањења запреминског преоптерећења што доводи до превенције кардио активности. васкуларне компликације су антиоксидативни механизми. (4 Дакле. је неопходно да ХД материјали минимизирају активацију леукоцита и максимизирају антиоксидативне ефекте. Да би се превазишао овај проблем, развијен је антиоксидативни и биокомпатибилни ХД материјал за који је пример дијализатор обложен витамином Е. (си7) Међутим, упркос бројним напретцима у ХД дијализаторима, прогноза пацијената са ХД остаје незадовољавајућа, посебно оних са дијабетес мелитусом (ДМ), болешћу која промовише високо оксидативно стање.(8) Ова забринутост је делимично због тога што су детаљи веома разноврсних и сложених ин вивореакције повезане са оксидативним стресомнису довољно анализирани. Стога је ова студија имала за циљ да разјасни ефекат ХД на динамику реактивних врста кисеоника (РОС), као узводних догађаја реакција оксидативног стреса, на основу концепта да свако циљно место оксидативних и антиоксидативних реакција у телу треба да буде биохемијски описано. у одређеном времену и простору. Једно објашњење за ово је анедостатак детаљне анализеузводне стране реакција повезаних са оксидативним стресом које стимулишу ове ћелијске реакције. Идентификација РОС који делују као стимулатори реакција оксидативног стреса или интеракција између РОС за генерисање оксидативних стимулатора је тешка због високих стопа реакција и сложених реакционих ланаца. Пошто РОС нису униформни и појединачни РОС имају специфичне карактеристике током ин виво реакција, потребна је анализа вишеструких РОС. (9-2н Дакле, да би се побољшала биокомпатибилност заснована на употреби антиоксидативних и биокомпатибилних материјала, мора се разумети промене у динамици РОС-а изазване ХД.

Да бисмо истражили динамику РОС током ХД, користили смо две новоразвијене методе засноване на електронској спин резонанцији (ЕСР). вишеструки хидрофилни тест уклањања слободних радикала (МУЛТИС) и тест детекције липофилних радикала на пуној крви (и-СТрап) Иако истраживање о активности уклањања РОС помоћу ЕСР није опсежно, остаје једина доступна метода за идентификацију типа и испитивање динамике оф РОС. Метод комбинује проточни систем типа течне хроматографије високих перформанси са системом ЕСР и користи 5-(2,2-диметил-1.3-пропоксициклофосфорил)-5- метил-1-пиролинНоксид (ЦИПМПО) као спин замка. МУЛТИС обезбеђује већу осетљивост и стабилност за мерење уклањања РОС у односу на конвенционалне тестове ЕСР.22-24) Један од наших коаутора је раније известио о активностима уклањања РОС мерених МУЛТИС-ом код пацијената са стадијумом 5 ЦКД. Међутим, нису проценили ефекат ХД.е2) Поред тога, и-СТрап метода је метода заснована на ЕСР која детектује РОС у пуној крви користећи 2-дифенилфосфиноил-2-метил-3,{ {20}}дихидро{21}}Х-пирол Н-оксидДПхПМПО) као његов спин замка и мери ЕСР након органске екстракције, одражавајући тако липофилни РОС.2с.26 У овој студији смо открили да су нивои неколико РОС били повећана и не елиминисана ХД, што указује да радикалне ланчане реакције још увек нису адекватно контролисане након ХД. Ово може утицати напрогноза пацијената са ЦКД.

Материјали и методе

Субјекти и информисани пристанак. Сви поступци који су спроведени на људима обављени су након добијања индивидуалне писмене сагласности. Коришћени протокол је одобрио Комитет за технологију Универзитета Цукуба (Број одобрења 201809). Ово је опсервациона студија; па су на пацијентима вршене интервенције. У студију је укључен укупно 31 стабилан ХД пацијент. Добили смо и снимили клиничке и демографске податке за сваког пацијента. Сви пацијенти су лечени високофлуксним полисулфонским мембранским дијализаторима (Тораи Медицал Цо., Лтд., Токио, Јапан) са различитим површинама мембране, прилагођеним конституцији тела сваког појединца. Пацијенти су подељени у две групе у зависности од узрока њиховог крајњег стадијума бубрежне болести: недијабетичку групу (група без ДМ, н=17) и групу дијабетичара, н=14).

Узимање узорака. Узорци крви су добијени на почетку и на крају третмана дијализом из узорка који се налази на артеријској страни ХД кола. За МУЛТИС мерења, серуми су раздвојени и чувани у замрзивачу на {{0}} степени (до извршења мерења, за и-СТрап мерења. Узорци целе крви су сакупљени у епрувете обложене хепарином које су дозвољене да одстоји један сат пре мерења Мерења вишеструке активности уклањања слободних радикала у серуму Активности уклањања хидрофилних РОС мерене су методом МУЛТИС коришћењем претходно описаних протокола са мањим модификацијама.2227) Активности чишћења против пет РОС, односно хидроксил радикала(ОХ) , мерени су супероксид(0,"), алкоксилни радикал (РО"), алкил пероксил радикал (РОО") и синглетни кисеоник ('0,). ЕСР спектрометар Кс-опсега( РР-Ксл ЕСР: Радицал Ресеарцх Инц., Токио, Јапан) који користи модулацију поља од 100 кХз и софтвер за рад ВН-РАД (Радицал Ресеарцх Инц.). Коришћени реагенси ЕСР за хватање спина су ЦИПМПО за " ОХ, О, РО' и РОО' и 4-хидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин (ТЕМП) за 'О. Типична подешавања спектрометра су била следећа: ширина модулације поља.0.1 мТ; снага микроталаса, 10 мВ; ширина и брзина скенирања поља+7.5 мТ/2 мин; и временска константа, 0,1 с. Сваки РОС је генерисан путем ин ситу осветљења УВ/видљивом светлошћу из осветљивачаРУВФ-203СР УВ осветљивача, Радицал Ресеарцх Инц.) опремљеног са живином/ксенонском лучном лампом средњег притиска од 200 В и кварцни светловод, повезан са шупљином резонатора. Извори светлости, времена осветљења, прекурсори и фотосензибилизатори који се користе за производњу РОС су сажети у табели 1. Активности уклањања РОС су израчунате према претходно описаној методи22) и претворене у јединицу еквивалентну познатим чистим чистачима: глутатион (ГСХ) за ОХ и 'О, супероксид дисмутаза (СОД) за О, 6-хидрокси-2, 5,7,8-тетраметилхроман-2-карбоксилну киселину (Тролок) за РО', и а -липоична киселина за РОО'МУЛТИСМерења за сваки РОС су обављена у три примерка.

Мерење липофилних

Активност чишћења Роса у пуној крви помоћу и-Страп-а. Активност липофилног уклањања РОс-а је мерена коришћењем и-СТрап ЕСР мерења ки (Дојин-Глоцал/Дојиндо, Кумамото, Јапан) на основу протокола произвођача и претходног извештаја.2с Ова метода се заснива на компетитивној реакцији између антиоксиданата у пуној крви и ДПхПМПО са терц-бутил хидропероксидом (БуООХрадицал. Узорци пуне крви су инкубирани са ДПхПМПО(1{{10}} мМ) и тест-БуООХ (10 мМ) 30 минута на собној температури. Након инкубације, центрифугирање адукти у органској фази екстраховани су коришћењем раствора хлороформа и метанола; мерења ЕСР су обављена коришћењем ових органских узорака. Услови мерења су били исти као и за МУЛТИСмеасуремент, осим ширине и брзине скенирања поља, постављених на +5 .0 мТ/2 мин, Није било специфичних антиоксиданата за и-СТрап мерење; стога је активност чишћења изражена као вредност 10/-1, где „0“ означава интензитет сигнала без узорка, а „' означава сигнал интензитет са узорком.(28)Реагенси. ЦИПМПО је добијен од РР ИНЦ. (Јапан); рибофлавин, 2,2'-азобис (2-амидинопропан) дихидрохлорид (ААПХ), тект-БуООХ, диметил сулфоксид (ДМСО) и ружа Бенгал су купљени од Сигма-Алдрицх Јапан (Токио, Јапан) и ТЕМП је купљен из Токио Цхемицал Индустри (Токио, Јапан). Водоник пероксид и пуфери су добијени од ВакоЦхемицал Цо. (Осака, Јапан). Статистичка анализа." Статистичка анализа је обављена коришћењем Присм 6 за Мац ОС Кс рачунарски софтвер (ГрапхПад СофтвареИнц., Ла Јолла, ЦА). Подаци су тестирани коришћењем Студент'с упарени т-тест Подаци су изражени као средње вредности са интервалом поверења од 95% (95% ЦИ.