Абстрацт

Цистанцхе десертицолаМа, познатији као "пустињски гинсенг", је драгоцена паразитска лековита биљка широко распрострањена у северозападној Кини. Његове полисахаридне компоненте представљају једну од најважнијих биоактивних супстанци са анти-агинг, имуномодулаторном и антиоксидативном функцијом. У овој студији, три приступа екстракције, укључујући екстракцију топлом водом, ензимску екстракцију и екстракцију уз помоћ ултразвука, упоређена су за принос полисахарида изЦистанцхе десертицола. Експерименти са једним фактором у комбинацији са Бок-Бехнкеновом методологијом површине одзива примењени су за оптимизацију параметара екстракције уз помоћ ултразвука, са односом чврста и течност, временом ултразвучне екстракције и ултразвучном температуром као независним варијаблама. Ин-витро антиоксидативни капацитет добијених полисахарида је окарактерисан ДППХ и АБТС тестовима уклањања радикала, користећи витамин Ц (Вц) као позитивну контролу. Резултати су показали да ултразвучна екстракција даје највећи принос полисахарида међу три тестиране технике. Оптимални услови су били однос чврста и течност 1:100 (5,0 г сировог праха у 500 мЛ дестиловане воде), време ултразвучне екстракције 40 мин и температура екстракције 48 степени, што је дало стопу екстракције полисахарида од 7,49 %. Под овим оптимизованим условима, ДППХ активност уклањања радикалаЦистанцхе десертицолаполисахариди су достигли 84,27 % активности Вц, а капацитет уклањања радикала АБТС износио је 73,95 % у односу на Вц. Ово истраживање пружа експерименталну референцу за производњу и примену великих размераЦистанцхе десертицолаполисахариди у функционалној прехрамбеној, нутрицеутској и здравственој индустрији.

Кључне речи: Цистанцхе десертицола; пустињски гинсенг; биљни полисахарид; ултразвучна екстракција; методологија површине одговора; ДППХ; АБТС; антиоксидативна активност; природни функционални састојак

1. Увод

Цистанцхе десертицолаМа је вишегодишња биљка холопаразита која успева у пустињским регионима Синђианга, Унутрашње Монголије и кинеске провинције Гансу. Хиљадама година у традиционалној кинеској медицини словио је као „пустињски гинсенг“ због тонизирања бубрежне есенције, опуштања функције црева и одлагања старења Вилеи-а. У савременим нутриционистичким и фармаколошким истраживањима биоактивни састојци изЦистанцхе десертицола, посебно полисахариди, фенолна једињења, флавоноиди и алкалоиди, привукли су све већи глобални истраживачки интерес за природне антиоксидативне сировине за функционални развој хране.

Полисахариди су макромолекули високе молекуларне тежине полимеризовани из моносахаридних јединица повезаних гликозидним везама.Цистанцхе десертицолаполисахариди поседују широку дистрибуцију молекулске тежине у распону од десетина хиљада до милиона далтона и састоје се од глукозе, галактозе, манозе и других остатака моносахарида. Комплексне гранасте структуре доприносе њиховим јединственим физичко-хемијским карактеристикама и биолошким перформансама. Осим полисахарида, сирова биљка садржи и обиље есенцијалних аминокиселина, незасићених масних киселина и елемената у траговима као што су цинк, селен и бакар, који подржавају људски физиолошки метаболизам и имунолошку хомеостазу. Ендогена антиоксидативна једињења уЦистанцхе десертицолаукључују катехин, галну киселину, кверцетин, кемпферол, бетаин и цистанхе алкалоиде. Ове супстанце елиминишу реактивне врсте кисеоника и ограничавају пероксидацију липида да би ублажиле оксидативна оштећења. Важно је напоменути да на ефикасност антиоксиданата у великој мери утичу ток рада екстракције, постојећи облици биомолекула и ефекти интеракције једињења између различитих фитокемикалија.

Технологија екстракције је одлучујући корак за опоравак активних једињења биљног порекла. Уобичајене стратегије екстракције ботаничких полисахарида у индустријској лабораторији садрже екстракцију топлом водом, алкохолну екстракцију, екстракцију уз помоћ ултразвука, екстракцију уз помоћ микроталасне пећнице и екстракцију суперкритичном течношћу. Свака метода има различите предности и недостатке. Екстракција топлом водом је јефтина и погодна за рад за масовну производњу, али обично даје умерени принос и ко-екстрахује значајне нечистоће. Протоколи засновани на алкохолу фаворизују липофилне метаболите, али су неприкладни за полисахариде растворљиве у води и носе ризике од органских растварача. Екстракција уз помоћ ултразвука користи ефекте механичке кавитације да поремети зидове биљних ћелија, убрзавајући пренос масе унутарћелијских супстанци у водени растварач. Одликује се краћим трајањем обраде и побољшаним приносом екстракције; ипак, високи ултразвучни интензитет или превисока температура могу деградирати биокомпоненте осетљиве на топлоту и захтевају веће капиталне инвестиције за опрему. Екстракција суперкритичном течношћу даје екстракте без растварача високе чистоће, али трпи компликоване радне прагове и скупо улагање у инструменте.

Иако се више истрага бавилоЦистанцхе десертицолаекстракција полисахарида и биоактивност, систематска упоредна процена између токова рада топле воде, ензима и ултразвука и даље је ограничена. Овај рад је дизајниран да упореди приносе полисахарида из три репрезентативна протокола екстракције, оптимизује услове уз помоћ ултразвука једнофакторским скринингом и моделирањем површине одговора и квантификује ин витро антиоксидативне профиле пречишћених полисахаридних производа. Циљ је био да се успоставе практични параметри обраде како би се максимизирао опоравак полисахарида уз задржавање антиоксидативне моћи. Налази могу подржати даљу експлоатацијуЦистанцхе десертицолакао јестиво-медицински ресурс за глобална тржишта функционалне хране и нуди методолошку референцу за оптимизацију процеса природних производа.

2. Материјали и методе

2.1 Сировине и хемијски реагенси

Осушени блокови гомоља одЦистанцхе десертицолакупљени су од локалног добављача кинеског биља у граду Баисе. Препарат једињења целулаза-пектиназа и раствор фосфатног пуфера добијени су од Гуангзхоу Кангзхонгианг Биотецхнологи Цо., Лтд. Аналитички степен 1,1-дифенил-2-пикрилхидразил (ДППХ), 2,2′‑азино‑бис‑(3‑етилбензотиазолин‑6‑сулфонска киселина) дијамонијум со (АБТС) испоручио је Схангхаи Донгфулонг Био‑Реагент Цо., Лтд. Остале хемикалије укључујући фенол, концентровану сумпорну киселину, концентровану сумпорну киселину, 9% чисту.

2.2 Инструменти и апарати

ЦГ‑01 аналитичка вага, 6800 брзи пулверизатор, РК‑100 машина за сечење, ТВС‑1000 термостатско водено купатило; ВХ50 ротациони испаривач, СГ30‑01А ултразвучни екстрактор (350 В, 40 кХз); УАР‑2000 УВ‑Вис спектрофотометар, ТХК‑03 центрифуга, БТС‑31Е сушач замрзавањем.

2.3 Припрема узорка

ОсушениЦистанцхе десертицолакртоле су испране ултра чистом водом и осушене у пећници на 40 степени док се не уклони влага са површине. Материјал је исечен на 0,3 мм дебљине, уситњен и просејан кроз сито од 100-месх да би се добио хомогени прах за накнадна испитивања екстракције.

2.4 Три протокола за екстракцију полисахарида

2.4.1 Екстракција топле воде

5.0 g Цистанцхе десертицолапрах је пребачен у чашу од 1000 мЛ помешану са 500 мЛ дестиловане воде. Екстракција у воденом купатилу одржавана је 2 х на 100 степени. Ручно мешање је вршено сваких 100 минута да би се суспендовали преципитати и олакшало растварање полисахарида. Смеша је охлађена на собну температуру, центрифугирана на 4000 о/мин током 10 мин да би се сакупио супернатантна течност. Супернатант је концентрован под сниженим притиском на 40 степени помоћу ротационог испаривача до 20 мЛ запремине. 60 мЛ 95% етанола је додат за преципитацију алкохола и стајао преко ноћи. Талог је сакупљен након центрифугирања (3000 о/мин, 10 мин), лиофилизован сушењем замрзавањем да би се добио сирови полисахаридни прах.

2.4.2 Ензимска екстракција

5,0 г праха узорка је дисперговано у 500 мЛ пуферског раствора једињења целулаза-пектиназа (пХ 5,0). Ензимска хидролиза је настављена у воденом купатилу на 45 степени током 5 х. Завршетак реакције је реализован загревањем раствора до 100 степени у трајању од 10 мин да би се инактивирао ензимски протеин. Након хлађења, течност је центрифугирана (4000 о/мин, 10 мин). Супернатант је вакуумски концентрован до 20 мЛ, помешан са 95% етанолом за преципитацију преко ноћи. Кораци центрифугирања и сушења замрзавањем били су идентични процедури топле воде за сакупљање сировог полисахарида.

2.4.3 Ултразвучна екстракција

5.0 g Цистанцхе десертицолапрах је помешан са 500 мЛ дестиловане воде. Хомогена суспензија је постављена у ултразвучни екстрактор снаге 350 В и фреквенције 40 кХз. Након заказаног ултразвучног третмана, течност узорка се природно охладила. Центрифугирање, ротационо испаравање, преципитација етанолом и кораци лиофилизације су пратили доследан радни ток који је горе поменут да би се добили сирови екстракти полисахарида.
 

2.5 Одређивање приноса екстракције полисахарида

Укупни садржај угљених хидрата је квантификован тестом фенол-сумпорне киселине према модификованој методи описаној у објављеној литератури. Стандардни раствори глукозе су конфигурисани на серијским градијентима концентрације. 1 мЛ 10% фенолног реагенса плус 3 мЛ концентроване сумпорне киселине су помешани са стандардним растворима. Реакција је инкубирана на 85 степени током 15 минута, вредност апсорпције је очитана на таласној дужини од 540 нм да би се направила калибрација криве. Регресиона једначина: \\(и=9.6959к+0.0077\\), коефицијент детерминације \\(Р^2=0.999\\).

Узорци сировог полисахарида (0,1 г) растворени су у 100 мЛ дестиловане воде. Аликвот је анализиран под идентичном реакцијом фенол-сумпорна киселина. Принос полисахарида (%) је израчунат по формули (1):

\\(Принос(\\%)=\\фрац{Ц\\пута В\\пута н}{М}\\тимес100\\% \\таг{1}\\)

Где: Ц=концентрација полисахарида (г/мЛ); В=запремина раствора узорка; н=вишеструко разблаживање; М=тежина сировогЦистанцхе десертицолапрах (г).

2.6 Експериментални дизајн са једним фактором за екстракцију уз помоћ ултразвука

Испитиване су три главне варијабле које утичу: однос чврста и течност, трајање ултразвучне екстракције и ултразвучна температура. Принос полисахарида је био индикатор евалуације. Градијент односа чврста и течност: 1:400, 1:200, 1:100, 1:50; ултразвучни временски градијент: 10 мин, 20 мин, 30 мин, 40 мин, 50 мин; температурни градијент: 37 степени, 43 степена, 48 степени, 53 степена. Свака група је изведена у три примерка.

2.7 Методологија одзива-површине (Бок-Бехнкен дизајн)

На основу излазних резултата једнофакторског теста, конструисана је шема бокс-Бехнкенове површине одзива са три фактора и три нивоа. Фактор А представља однос чврстог и течног; Фактор Б је означавао време ултразвучне екстракције; Фактор Ц представља ултразвучну температуру. Принос екстракције полисахарида је постављен као вредност одговора И. Прилагођавање регресионог модела и анализа варијансе су завршени да би се прегледали оптимални параметри екстракције.

2.8 Процена антиоксидативне активности ин-витро

Раствори узорака сирових полисахарида су припремљени у опсегу концентрација: 0,1 мг/мЛ-0,7 мг/мЛ. Раствор витамина Ц (Вц) служио је као позитивна контролна група антиоксиданса.

2.8.1 Мерење активности уклањања радикала ДППХ

2 мЛ раствора узорка полисахарида реагује са 1,5 мЛ ДППХ радног раствора анхидрованог етанола. Мешана течност је инкубирана у тамном окружењу 40 мин. Апсорбанца \\(А_и\\) је откривена на таласној дужини од 517 нм. \\(А_ј\\) означава апсорпцију контролне групе са Вц; \\(A_0\\) представља апсорпцију празне групе када дестилована вода замени течност узорка. Стопа уклањања радикала ДППХ (%) је израчуната помоћу формуле (2):

\\(ДППХ\\ радикал\\ брзина чишћења\\(\\%)=\\фрац{A_0-(А_и-А_ј)}{A_0}\\тимес100\\% \\таг{2}\\)

2.8.2 Анализа активности уклањања радикала АБТС

АБТС радна течност је била свеже припремљена. 2 мЛ раствора узорка полисахарида помешана са 4 мЛ АБТС реагенса, инкубирана у мраку 15 мин. Очитавање апсорпције је забележено на 752 нм. \\(А_и\\), \\(А_ј\\), \\(A_0\\) одговарају групи узорака, позитивној контролној групи и контролној групи празног дела. Стопа уклањања радикала АБТС (%) је израчуната по формули (3):

\\(АБТС\\ радикал\\ брзина чишћења\\(\\%)=\\фрац{A_0-(А_и-А_ј)}{A_0}\\тимес100\\% \\таг{3}\\)

2.9 Статистичка анализа

Сва експериментална испитивања су поновљена три пута. Обрада података, регресиона анализа и анализа варијансе вршени су статистичким софтвером. За визуелно поређење експерименталних група извршено је цртање графикона.

3. Резултати и дискусија

3.1 Поређење приноса екстракције полисахарида за три технологије екстракције

Екстракција топлом водом, ензимска екстракција и ултразвучна екстракција спроведени су према одговарајућим стандардним токовима рада. Постојале су значајне разлике у коначним приносима полисахарида. Екстракција топлом водом дала је најнижу вредност приноса; ензимска екстракција је произвела умерени опоравак; Екстракција уз помоћ ултразвука је постигла највећи принос од (7,27±0,04) %. Пошто су после екстракције концентрација, преципитација и кораци лиофилизације били идентични за три серије, дивергенција приноса директно потиче од разлика у механизму екстракције.

Екстракција топлом водом се ослања само на термално растварање у води. Одређене фракције полисахарида високе молекуларне тежине показују ограничену растворљивост у води под условима загревања под атмосферским притиском, што доводи до непотпуног ослобађања из биљног ткива. Ензимска екстракција разграђује састојке целулозе и пектина у ћелијским зидовима једињењем хидролазом како би се олакшало ослобађање активне супстанце. Међутим, сложени ензимски систем показује ограничену ефикасност хидролизе за друге компоненте матрикса ћелијског зида, ограничавајући укупни излаз полисахарида. Ултразвучна сила кавитације непрекидно удара и ломиЦистанцхе десертицоластруктура ћелијског зида, повећање контактне површине растварача и чврсте материје и убрзавање ефикасности преноса масе интрацелуларних молекула полисахарида у водену фазу. Сходно томе, ултразвучна екстракција значајно је побољшала ефикасност обнављања полисахарида. Према овом упоредном исходу, ултразвучна екстракција је одабрана за накнадно испитивање оптимизације процеса.

3.2 Резултати теста са једним фактором за екстракцију уз помоћ ултразвука

3.2.1 Утицај односа чврстог и течног на принос полисахарида

Однос чврста и течност одређује покретачку силу градијента концентрације између унутрашњости ћелије биљке и спољашњег воденог растварача. Са повећањем удела течности, принос екстракције полисахарида је прво порастао, а затим опао. У односу чврста и течност 1:100 (5 г праха додато у 500 мЛ дестиловане воде), принос је достигао максимум од 7,46 %. Када је запремина растварача била недовољна (однос чврста и течност 1:50), капацитет растварача је постао засићен, ограничавајући растварање полисахарида. Превише висок однос растварача (1:200,1:400) би разблажио концентрацију растворене супстанце и повећао радно оптерећење за каснију вакуум-концентрацију без даљег побољшања приноса. Стога је однос чврстоће и течности 1:100 изабран као централни ниво за дизајн површине одзива.

3.2.2 Утицај времена ултразвучне екстракције на перформансе екстракције

Принос полисахарида је континуирано растао са продужењем времена ултразвучног третмана у року од 30 мин. Након прекорачења од 30 минута, тенденција раста приноса се смањила. Кратко трајање ултразвука не може да обезбеди адекватну механичку енергију кавитације да би се у потпуности разбиле баријере ћелијског зида. Једном када је прекид ћелијског зида постигао засићење, продужење времена ултразвучне обраде тешко би могло да подстакне ослобађање полисахарида. Претерано дуго излагање ултразвуку може потенцијално да изазове делимичну деградацију полисахаридних макромолекуларних ланаца. Стога је 30 минута одабрано као референтни централни ниво за дизајн површине одговора.

3.2.3 Утицај ултразвучне температуре екстракције

Polysaccharide extraction yield climbed as temperature increased up to 53 ℃. Once temperature surpassed 55 ℃, yield dropped sharply. Moderate heating enhances molecular diffusion rate and water solubility of polysaccharide. Nevertheless, high thermal condition will trigger thermal degradation of polysaccharide macromolecules, breaking glycosidic bonds and destroying target components, resulting in decreased measurable yield. Based on single‑factor response trend, 48‑53 ℃ temperature interval was adopted for further multi‑factor optimisation.

3.3 Анализа оптимизације одзива и површине

Експериментални дизајн Бок-Бехнкенове површине одзива је изведен узимајући однос чврста и течност (А), ултразвучно време (Б), ултразвучну температуру (Ц) као независне варијабле и принос полисахарида као одговор И. Вишеструка квадратна регресиона једначина је постављена као:

\\(И=7.120-0.065А+0.280Б-0,210Ц+0.390АБ+0.04АЦ+0.072БЦ-0,190А^2-0,860Б^2-0,075Ц^2\\)

Variance‑analysis outcomes illustrated that overall regression model reached extremely significant level (\(P=0.0003\)). The lack‑of‑fit term showed non‑significant difference (\(P=0.0592>0,05\\)), показујући добар степен уклапања између једначине регресије и стварних експерименталних података. Прилагођени коефицијент детерминације \\(Р^2_{Адј}=0.9232\\), који доказује више од 92% варијације приноса полисахарида може се тумачити овим математичким моделом.

Поређење значајности фактора: време ултразвучне екстракције (Б) има изузетно значајан утицај на принос (\\(П=0.0035\\)); ултразвучна температура (Ц) је произвела значајан утицај (\\(П=0.0256\\)); Однос чврста и течност (А) показао је незнатан ефекат (\\(П=0.3938\\)). Редослед приоритета утицаја фактора: време ултразвучне екстракције > температура ултразвучне екстракције > однос чврста и течност. Термин интеракције АБ (однос чврста и течност × ултразвучно време) постигао је изузетно значајан ефекат интеракције.

Из експерименталних серија матрице површине одговора, максимални измерени принос полисахарида од 7,49 % се појавио под условима: однос чврста и течност 1:100, време ултразвучне екстракције 40 мин, температура ултразвучне екстракције 48 степени. Овај скуп параметара је потврђен као оптимални услов екстракције уз помоћ ултразвукаЦистанцхе десертицолаполисахариди.

3.4 Процена антиоксидативне активности оптимално екстрахованих полисахарида

Под оптималним параметрима екстракције уз помоћ ултразвука, ин витро капацитет уклањања радикалаЦистанцхе десертицолаполисахариди су мерени са Вц као позитивна референтна вредност. Капацитет уклањања радикала ДППХ узорка полисахарида достигао је 84,27 % у односу на перформансе уклањања Вц; његова активност уклањања радикала АБТС износила је 73,95% у поређењу са Вц стандардом. ДППХ и АБТС су два класична комплементарна ин-витро система за процену антиоксиданса, који одражавају капацитет елиминације слободних радикала према различитим врстама радикала. Подаци теста су то потврдилиЦистанцхе десертицолаполисахарид поседује изражен антиоксидативни потенцијал.

Антиоксидативни механизам биљних полисахарида је генерално повезан са хидроксилним групама распоређеним на гранама ланца шећера. Хидроксилни делови дају протоне водоника да неутралишу слободне радикале и прекину радикално-ланчану реакцију. Поред тога, заостале коекстраховане полифенолне и флавоноидне нечистоће у сировом полисахаридном праху могу да генеришу синергистички антиоксидативни ефекат. Треба напоменути да би технолошки параметри екстракције могли да промене дистрибуцију молекулске тежине полисахарида и постојећи садржај мањих компоненти, додатно модификујући коначну антиоксидативну моћ. Оптимизован ток рада уз помоћ ултразвука не само да је максимизирао принос полисахарида, већ је и резервисао релативно високу антиоксидативну активност за екстракте.

3.5 Свеобухватна дискусија

У поређењу са конвенционалном екстракцијом топлом водом и ензимском екстракцијом, екстракција уз помоћ ултразвука комбинује физички поремећај механичке кавитације са растварањем у води. Остварује већи принос полисахарида без велике потрошње ензимског препарата. Према резултатима анализе варијансе, време ултразвучне обраде било је најдоминантнија варијабла. Недовољно трајање ултразвука ограничава фрагментацију ћелијског зида; прекомерно време може да ризикује деградацију биомолекула. Температура се мора строго контролисати испод прага термичке разградње полисахаридних супстанци. Однос чврсте материје и течности углавном утиче на равнотежу растварања и трошкове енергије након обраде; у разумном интервалу његов утицај је релативно слабији од времена и температуре.

Добијени сирови полисахарид показује снажну способност уклањања слободних радикала ин витро, што подржава његову перспективу развоја као природног антиоксидантног сировог материјала који замењује делимичне синтетичке антиоксиданте у формулама функционалне хране. Ова студија је проценила само сирови полисахарид. Будуће истраживање може се фокусирати на пречишћавање полисахарида, анализу састава моносахарида, карактеризацију молекулске тежине и валидацију антиоксиданса на нивоу ћелије или животињског модела. Осим тога, даља истраживања могу истражити однос компромиса између приноса екстракције и биолошке активности; одређени оштри параметри екстракције високог приноса могу умањити биоактивност иако повећавају производњу сирове масе.

4. Закључак

У овом истраживању, три тока рада екстракције заЦистанцхе десертицолаполисахариди су систематски упоређивани. Екстракција уз помоћ ултразвука надмашила је екстракцију топлом водом и ензимску екстракцију у погледу брзине опоравка полисахарида. Једнофакторски скрининг у комбинацији са Бок-Бехнкен методологијом одзивне површине одредио је оптималне ултразвучне параметре екстракције: однос чврста и течност 1:100 (5,0 гЦистанцхе десертицолапрах помешан са 500 мЛ дестиловане воде), време ултразвучне екстракције 40 мин, температура екстракције 48 степени. Под овим оптимизованим подешавањима, принос екстракције полисахарида је достигао 7,49 %. Откривање антиоксидативне активности показало је да је активност полисахаридних екстраката у уклањању радикала ДППХ достигла 84,27% учинка витамина Ц; Капацитет уклањања радикала АБТС био је еквивалентан 73,95% Вц.

Ова студија даје практичне параметре обраде за производњу уз помоћ ултразвукаЦистанцхе десертицолаполисахариди. Експериментални резултати потврђују да полисахариди изЦистанцхе десертицолапоседују значајну антиоксидативну биоактивност. Налази постављају експерименталну основу за даље коришћењеЦистанцхе десертицолакао природна функционална сировина у глобалном нутриционистичком, дијететском и функционалном сектору исхране.

Референце

[1] Лиу ЗКС, Ли ББ, Зхао И, ет ал. Припрема и стабилност ресвератрола Пицкеринг емулзије стабилизоване протеином ораха /Цистанцхе десертицолаполисахарид [Ј]. Фоод Сциенце, 2024, 45(23): 2328‑2334. [2] Ма ЈЦ, Ли КСП, Гонг И Ф. Оптимизација прераде сложених напитака са џемом од ружа иЦистанцхе десертицоламетодологијом одговор-површине[Ј]. Цхина Цондимент, 2024, 49(11):102‑109. [3] Сху ВЛ, Ие И, Менг В Д. Оптимизација припреме и анализа компоненти оригиналаЦистанцхе десертицолаорална течност[Ј]. Истраживање и развој хране, 2024,45(19):132‑139. [4] Лиу В Х. Студија о екстракцији и антиоксидативној активности испарљивог уља изЦистанцхе десертицоладестилацијом воденом паром уз помоћ ултразвучног сољења [Ј]. Гуангзхоу Цхемицал Индустри, 2024,52(15):46‑50,58. [5] Ксианг С К. Анализа нутритивних компоненти и истраживање антиоксидативне активностиЦистанцхе десертицола[Ј]. Јоурнал оф Фоод Сафети Ревиев, 2024(12): 96‑98. [6] Цхен И, Сонг ЗП, Ву Х. Оптимизација процеса екстракције и анализа антиоксидативне активности полисахарида изПеристропхе бивалвис[Ј]. Наука и технологија прехрамбене индустрије, 2023,44(5):166‑173.