Део 2 Превентивни ефекти фенилетанол гликозида из Цистанцхе Тубулоса на фиброзу јетре индуковану албумином говеђег серума код пацова
Mar 06, 2022
Контакт: Аудреи Ху Вхатсапп/хп: 0086 13880143964 Е-пошта:audrey.hu@wecistanche.com
Експресија НФ-κБ п65 и колагена И после интервенције лека у ХСЦ-Т6 ћелијама Да би се карактерисали сигнали фиброзе јетре, два кључна регулаторна гена у јетри су одређена путем РТ-ПЦР теста. Подаци су показали да ћелије тХСЦ-Т6 из контролне групе имају ниже нивое НФ-κБ и мРНК колагена типа И. Насупрот томе, ТГФ- 1 је индуковао ХСЦ-Т6 ћелије да значајно регулишу НФ-κБ (П < 0.01)="" и="" цол-и="" (п="">< 0,01)="" мрна,="" са="" нивоима="" вишим="" од="" они="" у="" контролној="" групи.="" у="" присуству="" различитих="" концентрација="">фенилетаноидни гликозид из цистанхе) , резултати НФ-κБ п65 [П НФ-κБ=0.001 за 100 уг/мл, П НФ-κБ=0.002 за 75 уг/мл, П НФ-κБ {{ 11}}.007 за 50 уг/мл, и П НФ-κБ=0.012 за 25 уг/мл, респективно] и Цол-И [П Цол-И=0.006, П Цол -И=0.009, П Цол-И=0.014, П Цол-И=0.019, респективно] су показали смањену експресију ових иРНК (слика 7).
Вестерн блот анализа нивоа колагена И након интервенције лека у ХСЦ-Т6 ћелијама Слика 8 приказује нивое експресије протеина колагена И у ћелијама ХСЦ-Т6 различитих експерименталних група. Ниво експресије протеина колагена И је значајно смањен у различитим дозним групама ЦПхГ(фенилетаноидни гликозид из цистанхе)(100 уг/мл, 75 уг/мл, 50 уг/мл и 25 уг/мл) у поређењу са ТГФ- 1 групом
Дискусија
ЦПхГс(фенилетаноидни гликозид из цистанхе)је фенилетаноидни гликозид изолован и пречишћен из ризома Цистанцхеа, који се користи као традиционални кинески биљни лек. Последњих година показало се да ЦПхГ поседују моћну способност да спрече повреде јетре [20]. Стога смо имали за циљ да истражимо да ли ЦПхГ имају инхибиторне ефекте на фиброзу хепатитиса фиброзом јетре изазваном БСА код пацова. БЈРГ се обично користи као терапеутски лек за фиброзу јетре у Кини. Направљен је од оклопа корњаче. Радик Паеониа рубра, Цордицепс Синенсис, Радик исатидис, итд. имају ефекте надопуњавања Ки-а и крви, ублажавања умора, омекшавања чворова. Поред тога, претходне студије показују да има очигледну функцију блокирања ране фиброзе јетре, инхибирања пролиферације ћелија које складиште масти и смањења синтезе колагена [21]. Стога је БЈРГ коришћен као позитиван лек у овој студији.
Патолошке промене фиброзе јетре код пацова изазване ињекцијама БСА су сличне онима код порталне цирозе код људи [22]. ЦПхГс(фенилетаноидни гликозид из цистанхе)дозно-зависно ублажио степен фиброзе јетре и инхибирао ХСЦ трансформацију у ћелије сличне миофибробласту, смањио повишене нивое серумских АЛТ, АСТ, ХА, ЛН, ЦИВ, ТГФ- 1 и индекса јетре, и значајно потиснуо експресију колагена И, колагена ИИИ и ТГФ- 1 у ткиву јетре. Фазе хепатичне фиброзе су у корелацији са нивоима ХА, ЛН и ИВ-Ц у серуму, који као маркери могу играти улогу у откривању степена фиброзе јетре [23]. Пријављено је да је ХА главни ресурс екстрацелуларног матрикса. ИВ-Ц као есенцијални елемент базалне мембране ће се синтетизовати у изобиљу и у великој мери депоновати у ранијим фазама цирозе јетре. Нивои ЛН и ИВ-Ц у серуму су индекси стопе обртања базалне мембране и показују степен фиброзе у подручју портала и синусоидних капилара [24]. ПЦ ИИИ је маркер у дијагнози хепатичне фиброзе и ране цирозе, али његова осетљивост и специфичност нису високе и нема значајне разлике између различитих стадијума фиброзе у многим референцама [24, 25].
Ова студија је добила сличан резултат. Поред тога, Х&Е и Массон-ова запажања обојена трихромом показују нормално ткиво јетре са изразитим јетреним лобулима и јетреним синусоидима. Структура ткива јетре у групи модела је поремећена, а ткиво јетре и јетрени синусоид замењени су великом количином везивног ткива. Међутим, примећено је значајно побољшање у третираним групама у поређењу са моделном групом. Важно је да експресија колагена типа И и колагена типа ИИИ играју суштинску улогу у развоју фиброзе јетре, чије блокирање може спречити и лечити фиброзу јетре. Стога, стварање и таложење у ткиву јетре колагена типа И и колагена типа ИИИ може послужити као важна детерминанта ефикасности анти-хепатичне фиброзе. ТГФ- 1 је такође важан профиброгени цитокин код оштећења јетре и биолошки је активан са вишеструким фармаколошким дејством [26]. За одржавање хомеостазе ткива потребна је равнотежа између ових радњи. Аберантна експресија ТГФ- 1 је укључена у патогенезу обољења јетре [27, 28]. Познато је да је ТГФ- 1 кључни цитокин који је укључен у ране фазе фиброзе јетре.
Оксидативни стрес покреће ТГФ- 1, што доводи до тога да овај други стимулише производњу и таложење ЕЦМ [29]. Стога је једна од ефикасних стратегија за производњу лека против фиброзе јетре да се идентификују анти-ТГФ- 1 агенси. Имунохистохемијска анализа је показала да експресије колагена типа И, колагена типа ИИИ и ТГФ- 1 могу открити патолошки процес фиброзе јетре. Експресије колагена типа И, колагена типа ИИИ и ТГФ- 1 у третираним групама су смањене, које су биле значајно ниже у високим дозама ЦПхГс(фенилетаноидни гликозид из цистанхе)терапијској групи, и сугерисао да је ЦПхГ ефикасан инхибитор колагена типа И, колагена типа ИИИ и ТГФ{0}}. Претпоставља се да ЦПхГ могу побољшати активност колагеназе, одржавајући динамичку равнотежу синтезе и деградације ЕЦМ, чиме одлажу и спречавају стварање фиброзе јетре. ЦПхГс(фенилетаноидни гликозид из цистанхе)не само да би могло побољшати фиброзу јетре изазвану БСА код пацова, већ би такође могло бити повезано са инхибицијом активације ХСЦ ин витро. Сматра се да активација ХСЦ представља кључни корак фиброгенезе. У овој студији, резултати су илустровали да је примена ЦПхГ са 25 на 100 уг/мл значајно ослабила смањену експресију НФ-κБ п65, експресију мРНА колагена И и експресију протеина колагена И у ХСЦ. НФ-κБ игра важну улогу у модулацији имунолошког одговора на инфекцију или стимулусе [30]. Нагомилавање НФ-κБ у ћелијама јетре може довести до регрутовања инфламаторних цитокина/медијатора, изазивајући тако развој фиброзе [31, 32]. Штавише, колаген је такође осетљив индекс који одражава ниво фиброзе и чини око 50 процената укупног протеина у фиброзној јетри [33].
Као резултат тога, претпоставили смо да је молекуларни механизам против хепато-фиброзе повезан са ЦПхГс(фенилетаноидни гликозид из цистанхе)-посредована инактивација експресије НФ-κБ, у којој корист доприноси синергистичкој улози слабљења имунотоксичности и инфламаторног стреса у ткиву јетре оштећеном БСА, даље исправљајући дисметаболизам како би се побољшале функције јетре.
Закључци
У закључку, наше студије показују да ЦПхГс(фенилетаноидни гликозид из цистанхе)значајно умањују степен фиброзе јетре изазване БСА код пацова. Његов механизам може барем делимично бити последица инхибиторног ефекта ЦПхГ на састав ЕЦМ и стимулације деградације ЕЦМ, и/или директном инхибицијом синтезе колагена типа И, колагена типа ИИИ и експресије ТГФ{ {0}}. Стога смо очекивали да се ЦПхГ могу користити у производима за здравствену заштиту или у клиничким лековима за превенцију фиброзе јетре код људи. Потребне су будуће студије да би се утврдила ефикасност ЦПхГ-а као снажног лека против фиброзе јетре.
Скраћенице
ЦПхГс:Фенилетанол гликозиди из цистанцхе; БСА: говеђи серум албумин; ХСЦ-Т6: звездасте ћелије јетре; Хип: хидроксипролин; БЈРГ: Сложени Биејиаранган таблете; ТГФ- 1: Трансформациони фактор раста 1; АЛТ: Аланин аминотрансфераза; АСТ: Аспартат аминотрансфераза; ХА: хијалуронска киселина; ЛН: Ламинин; ПЦ ИИИ: проколаген типа ИИИ; ИВ-Ц: колаген типа ИВ; НФ-κБ: Нуклеарни фактор капа-појачавач лаког ланца активираних Б ћелија; РТ-ПЦР: ланчана реакција реверзне транскриптазе-полимеразе; СДС-ПАГЕ: Натријум додецил сулфат-полиакриламид гел електрофореза.
Конкурентни интереси Аутори изјављују да немају супротстављених интереса. Доприноси аутора ТЛ, ЈЗ, СПИ, ЛМ, МТ и СЛЗ осмислили су и дизајнирали експерименте. СПИ, ТЛ и ЈЗ анализирали су податке. СПИ и ЈЗ су написали рукопис. ТЛ, ЛМ и ЈЗ су прегледали рукопис. Сви аутори су прочитали и одобрили коначни рукопис. Захвалност Ово истраживање је подржала Национална фондација за природне науке Кине (81260624). Аутори желе да изразе своју искрену захвалност професору Тао Лиу на предложеним побољшањима за писање овог рада. Детаљи о аутору 1 Одељење за токсикологију, Школа јавног здравља, Медицински универзитет у Синђијангу, бр.
Регион, Кина. 2 Кључна лабораторија за ујгурску медицину, Институт Материа Медица из Ксињианга, Урумки 830004, Кина. 3 Но. 140 Ксинхуа Соутх Роад, Тиансхан Дистрицт, Урумки 830000 Ксињианг Ујгурски аутономни регион, Кина. Примљено: 6. августа 2015. Прихваћено: 24. новембра 2015
Референце
Цохен-Нафтали М, Фриедман СЛ. Тренутни статус нових антифибротичних терапија код пацијената са хроничним обољењем јетре. Тхер Адв Гастроентерол. 2011;4(6):391–417.
Пуцхе ЈЕ, Саиман И, Фриедман СЛ. Звездасте ћелије јетре и фиброза јетре. Цомпр Пхисиол. 2013;3(4):1473–92.
Хернандез-Геа В, Фридман СЛ. Патогенеза фиброзе јетре. Анну Рев Патхол. 2011;6:425–56.
Сохрабпоур АА, Мохамаднејад М, Малекзадех Р. Прегледни чланак: реверзибилност цирозе. Алимент Пхармацол Тхер. 2012;36(9):824–32.
Равен ПХ, Зханг ЛБ, Вентенат О. Кинеска академија наука. 23рд ед. Кина: Редакција Флора оф Цхина; 2013. стр. 1–16.
Комисија за кинеску фармакопеју Министарства санитета Народне Републике Кине. Кинеска фармакопеја, део 1. Кина: Издавачка кућа хемијске индустрије; 2010. стр. 126.
Иан ГХ, Тиан ЈХ, Лонг БВ, Ли Н. Напредак истраживања фенилетаноидних гликозида из Цистанцхе тубулоса. Централ Соутх Пхарм. 2012;10:692–5.
Ли Ј, Хуанг Д, Хе Л. Ефекат Роу Цонг Ронга(Херба Цистанцхес Десертицола) на репродуктивну токсичност код мишева изазвану гликозидом Леигонгтенг (Радик ет Рхизома Триптеригии). Ј Традит Цхин Мед. 2014;34(3):324–32.
Ксинг И, Лиао Ј, Танг И, Зханг П, Тан Ц, Ни Х, ет ал. АЦЕ и инхибитори агрегације тромбоцита из Тамарик Хојнацки Бунге (биљка домаћин Херба Цистанцхес) која расте у Синђиангу. Пхармацогн Маг. 2014;10(38):111–7.
Јиа И, Гуан К, Јианг И, Салх Б, Гуо И, Ту П, ет ал. Побољшање колитиса изазваног декстран сулфатом натријумом код мишева екстрактом Цистанцхе тубулоса обогаћеним ехинакозидом. Пхитотхер Рес. 2014;28(1):110–9.
