Спонтана гранулоцитна леукемија код А НОД/Схи-сцид ИЛ-2Р нулл миша

Апстрактан:Овде извештавамо о случају спонтане гранулоцитне леукемије код 51-недељно старог мушкарца НОД/Схи-сцидИЛ{0}}Р нулти (НОГ) миш. Миш је показаопрогресивна анемијаигруби респираторни покрети. Макроскопски, слезина је промењена и увећана. Хистолошки, коштана сржгрудне костиа бутна кост је била веома ћелијска и скоро искључиво испуњенанеопластичне ћелије. Једра неопластичних ћелија су била велика, овалног до благо неправилног облика, а мали број ћелија је имаобубрега- или језгра у облику прстена.Неопластичне ћелијеекстензивно инфилтрирао органе, а слезина и јетра су биле значајно захваћене. Имунохистохемијски, велика популација неопластичних ћелија у црвеној пулпи слезине и синусоиди јетре била је позитивна намијелопероксидаза. На основу хистолошких карактеристика, овај случај је дијагностикован сагранулоцитна леукемија. Ова нова информација оспонтани тумориможе бити од помоћи за одговарајућу употребу овог соја миша у даљим истраживањима. (ДОИ: 10.1293/ток.2020-0092; Ј Токицол Патхол 2021; 34: 241–244)

Кључне речи: гранулоцитна леукемија, НОГ миш, спонтани тумор

КЛИКНИТЕ ОВДЕ ДА ДОБИЈЕТЕ ПРИРОДНИ ОРГАНСКИ ЕКСТРАКТ ЦИСТАНЦХЕ СА 25% ЕХИНАКОЗИДА И 9% АКТЕОЗИДА ЗА ФУНКЦИЈУ БУБРЕГА

Вецистанцхе услуга подршке - највећи извозник цистанцхе у Кини:

Е-пошта:wallence.suen@wecistanche.com

Вхатсапп/тел:+86 15292862950

Купите за више детаља о спецификацијама:

хттпс://ввв.кјцистанцхе.цом/цистанцхе-схоп

Спонтана гранулоцитна леукемијасе ретко јавља код неколико сојева мишева, иако хемијски агенси и јонизујуће зрачење могу повећати инциденцу код неких сојева мишева1, 2. НОД/Схи-сцид ИЛ-2Р нулл (НОГ) мишеви су озбиљноживотиње са ослабљеним имунитетом, и представљају дефекте у Т-, Б- и природним ћелијама убицама, и лоше функционишуће макрофаге и дендритске ћелије нокаутом ланца рецептора ИЛ-2 (ИЛ2Р ц) у НОД-сцид сој3. Овај сој миша се користи за неклиничке тестове, као што је тест туморигености, за процену квалитета и безбедности биолошких производа за регенеративну медицину коришћењем ћелија/ткива људског порекла, због знатно бољег пресађивања ксеногених ћелија4–6. Иако су имунодефицијентно стање и његове импликације на ксенотрансплантате добро проучене, мало је информација доступно о спонтаним туморима који се јављају код овог соја миша, као што је лимфом тимуса,млечне жлездежлезда аденом/аденокарцином, бронхиолоалвеоларни карцином, рабдомиосаркоми тератома7. Овде извештавамо о случају гранулоцитне леукемије код 51-недељно старог мужјака НОГ миша.

Животиња је добијена од Ин-Виво Сциенце Инц. (Канагава, Јапан) у доби од 6 недеља и није третирана. Животиња је била појединачно смештена у пластични кавез са индивидуално вентилисаним кавезним системом (Маки Мисер Цагинг Систем; Ориентал Гикен Инц., Токио, Јапан) у просторији са системом баријера контролисане животне средине, која је одржавана на температури од 22 ± 2 степена са влажност од 50 ± 20% и циклус светлости/мрака 12-х. Миш је храњен аутоклавираном пелетираном исхраном (ЦРФ-1; Цхарлес Ривер Јапан, Инц., Токио, Јапан) са аутоклавираном водом из славине и либитумом. Са животињом се поступало у складу са протоколом који је одобрио Комитет за институционалну негу и употребу животиња компаније ЦМИЦ Пхарма Сциенце Цо., Лтд., који је акредитован од стране АААЛАЦ Интернатионал.

Овај миш је показао клиничке знаке слабљења, као што су анемија, груби респираторни покрети и смањење телесне тежине између 49. и 51. недеље старости. Животиња је еутаназирана у доби од 51 недеље. Приликом обдукције, слезина је променила боју и увећала. Нису примећени очигледни груби абнормални налази у другим органима. Тимус и лимфни чвор били су атрофични, слични онима код нормалних НОГ мишева.

Сви узорци органа и ткива су рутински сакупљени, фиксирани у 10% неутралном пуферисаном формалину, уграђени у парафин и пресечени на приближно 3 μм. За његово патолошко испитивање, пресеци су обојени хематоксилином и еозином (ХЕ). Делови слезине и јетре су имунохистохемијски обојени на поликлонско антитело зечје против хумане мијелопероксидазе (МПО) (Дако Јапан, Токио, Јапан) као маркер мијелоидних ћелија, зечје анти-хумано ЦД3 моноклонско антитело (Ницхиреи Биосциенцес Јапан Инц., Токио ) као маркер Т ћелија, и зечје анти-хумано Пак-5 моноклонско антитело (Абцам Инц., Кембриџ, УК) као Б ћелијски маркер8. Секције су инкубиране са антителима на собној температури 1 х, а имунодетекција је изведена коришћењем Хистофине® МОУСЕСТАИН КИТ-а (Ницхиреи Биосциенцес Инц.) са 3,3′-диаминобензидин/Х2О2 као хромогеном. Имуно обојене секције су тадаобојен хематоксилином.

Хистопатолошки, коштана срж грудне кости и фемура је била веома ћелијска и скоро искључиво испуњена неопластичним ћелијама (слика 1А). Масно ткиво је потпуно измештено. У сржи су се повремено јављала ћелијска жаришта која се састоје од еритроидних и мегакариоцитних елемената, за које се сматрало да су остацинормална хематопоеза. Већина неопластичних ћелија је показала бластични изглед, карактерисан великим, овалним до благо неправилног облика језгра, и са ретикуларним хроматином који садржи једну или више истакнутих језгара. Постојао је мали број ћелија са језгром у облику бубрега или прстена, а такође је било присутно неколико ћелија са језгрима у облику режња (слика 1Б). Грануле у цитоплазми неопластичних ћелија нису биле очигледне на пресецима обојеним ХЕ. У сржи су пронађене бројне митотичке фигуре, а примећена су и повремена апоптотичка тела. Неопластичне ћелије су значајно напале периостеум и околни скелетни мишић. Дошло је до екстензивне инфилтрације неопластичних ћелија у друге органе и ткива, а слезина и јетра су биле значајно укључене. У слезини, неопластичне ћелије су примећене у целој црвеној пулпи (слика 2). Евидентна је капсуларна инфилтрација неопластичних ћелија. Уочено је неколико еритроидних серија и мегакариоцита у развоју. Повремено су примећени мегакариоцити који садрже једну или неколико мијелоидних ћелија у цитоплазми, што указује на емпериполезу. У јетри су неопластичне ћелије дифузно инфилтриране у Глисонову капсулу и јетрене синусоиде (слика 3). Неопластичне ћелије са језгром у облику бубрега или прстена такође су биле евидентне у неким крвним судовима. Неки хепатоцити у перипорталном подручју, са израженом инфилтрацијом неопластичних ћелија, показали су дегенерацију или некрозу, док је нормална структура хепатичног лобула остала нетакнута. Инфилтрација неопластичних ћелија је такође пронађена у другим органима, укључујући алвеоларни зид и периваскуларни регион плућа, интерстадијум у бубрегу, синусоид у надбубрежним жлездама и слузокожу и субмукозу у гастричном тракту (желудац и црева). Имунохистохемијски, велика популација неопластичних ћелија у црвеној пулпи слезине (слика 4) и синусоиди јетре била је позитивна на МПО. ЦД3 и Пак-5 позитивне ћелије нису откривене. Резултати имунобојења ЦД3 и Пак{11}} били су слични резултатима слезине нормалних НОГ мишева, који су хистолошки били хипопластични и нису показали ЦД3 или Пак{13}} позитивне ћелије.

Имунохистохемијско испитивање открило је да неопластичне ћелије потичу из мијелоидних ћелијских линија. У неким од захваћених подручја, посебно у слезини и јетри, мали број ћелија имао је облик бубрега, прстена или режња који указује на диференцијацију мијелоидних серија. Ови налази сугеришу да су неопластичне ћелије изведене из незрелих гранулоцита. Случај тешке мијелопоезе може бити евидентан присуством свих врста мијелоидних серија у развоју, за разлику од доминације незрелих ћелија код леукемије. Поред тога, прогресивна анемија је уобичајен клинички знак гранулоцитне леукемије, а повећање еритроидних и мегакариоцитних ћелија је слабо1. Мања популација гранулоцита са режњевим језгрима у захваћеном подручју без очигледне упале указује да је налаз овог случаја неопластична а не реактивна мијелопоеза.

Код гранулоцитне леукемије, коштана срж може бити замењена незрелим и зрелим мијелоидним ћелијама. У претходном извештају о другим сојевима мишева, ове неопластичне ћелије су се у потпуности инфилтрирале у јетру, слезину, лимфне чворове, итд.2, а ове ћелије у слезини и јетри су углавном биле смештене у црвеној пулпи и око Глисонове капсуле1. Дакле, дистрибуција леукемијских ћелија у овом случају била је идентична оној у претходном случају. На основу морфологије ћелија, гранулоцитна леукемија код мишева је класификована у два типа: јувенилни тип, који је упоредив са хуманом акутном мијелогеном леукемијом, и зрели тип са хуманом хроничном мијелогеном леукемијом1. У јувенилном случају, неопластичним ћелијама у коштаној сржи, слезини и јетри доминирале су слабо диференциране ћелије, док се мијелоидни елементи који представљају различите степене сазревања могу видети и проценат мијелобласта је био низак у неким зрелим случајевима2, 9. У овом случају, леукемијским ћелијама је доминирала незрела форма са великим, овалним до благо неправилног облика језгра. Поред тога, имајући у виду клиничке налазе да се опште погоршање здравља, укључујући прогресивну анемију и грубе респираторне покрете, акутно развило; стога се претпоставља да је овај предмет малолетничког типа.

Слика 1. Хистолошке слике коштане сржи бутне кости. О: Неопластичне ћелије се дифузно размножавају, чиме замењују коштану срж. Б: Језгра су велика, овалног до благо неправилног облика. Мали број ћелија има језгра у облику бубрега (жута стрелица), прстенаста (зелена стрелица) или режња (бели врх стрелице). Митотичка фигура је означена белом стрелицом. ХЕ мрље. Црна трака=50 μм (А), 10 μм (Б).

У претходној публикацији о НОГ мишевима, неопластичне лезије су генерално биле ретке; међутим, лимфом тимуса је пријављен на 0.82% у старосној групи у распону од 16 до 40 недеља7, 10. Колико је нама познато, спонтана гранулоцитна леукемија није раније пријављена код НОГ мишева. Код неколико сојева мишева, укључујући Б6Ц3Ф1 и БАЛБ/ц, гранулоцитна леукемија се ретко јављала2, 11, и није пријављена у случају ових мишева у доби од 12 месеци или млађој. Овај случај је развио гранулоцитну леукемију у доби од 51 недеље, што је било релативно младо доба. Ове нове информације о спонтаним туморима могу бити од помоћи за одговарајућу употребу овог соја мишева у даљим истраживањима.