Студија о одвајању и имунокомпетентности воденог екстракта полисахарида из Цистанцхе Тубулоса

за више информација:ali.ma@wecistanche.com

Аиладан·Маимаитиаили1,ЛИ Ианг1,ИАО Јун1,ИУАН Јие2

（1. Фармацеутски факултет, Медицински универзитет Ксињианг, Урумки 830011, Кина; 2. Колаж Хоубо, Медицински универзитет Синђанг, Синђанг Кламаји 834000, Кина)

АПСТРАКТНИ ЦИЉ:За изоловање воденог екстракта одполисахариди из Цистанцхе тубулоса, и да истраже њихову имунокомпетентност ин витро. МЕТОДЕ: АБ{{{{30}}}} макропорозна адсорпциона смола је коришћена за обезбојавање полисахарида Ц. тубулоса. Процес деколоризације је оптимизован ортогоналним тестом са стопом задржавања и стопом деколоризације полисахарида као свеобухватним резултатом, и коришћењем брзине адсорпције, времена деколоризације, концентрације узорка као фактора. Спроведени су верификациони тестови. ДЕАЕ-650М колона за измену јона је коришћена за одвајање воденог екстракта обезбојеног полисахарида Ц. тубулоса. ЦЦК-8 тест је коришћен за откривање ефеката различитих концентрација полисахарида (6.25-100 уг/мЛ) пре и после изолације на брзину пролиферације макрофага мишева РАВ264.7. Гриессова метода и ЕЛИСА тест су усвојени за откривање ефеката ниске, средње и високе концентрације полисахарида (12,5,25,50 уг/мЛ) на ослобађање НО,ИЛ-6 и ТНФ-а. у ћелијама РАВ264.7 изазваним ЛПС. РЕЗУЛТАТИ: У оптималном процесу деколоризације АБ-8 макропорозне адсорпционе смоле, брзина протока адсорпције је била 1,2 БВ/х, време деколоризације је било 9 х, а концентрација узорка 25 мг/мЛ. Свеобухватни резултати 3 пута верификационих тестова били су 63,43% ,63,29% и 63,34% , респективно, са просеком од 63,35％（РСД＝0.11% ,н＝3）. Један неутрални полисахарид (ЦТЗ) и 5 ​​киселих полисахарида (ЦТ1,ЦТ2,ЦТ3,ЦТ4,ЦТ5) су изоловани из полисахарида Ц. цистанцхе, садржај је био 299,2,168.0,123,2,541. 11,2 мг/г. У поређењу са контролном групом, 6.25-100 уг/мЛ ЦТЗ (осим 6,25 μг/мЛ), ЦТ2, ЦТ4, ЦТ5 и 6,25 μг/мЛ ЦТЦ (полисахарид пре одвајања) могао би значајно повећати брзину пролиферације ћелија РАВ264.7 (П＜{{80}}.05), док 6.25-100 уг/мЛ ЦТ1,ЦТ3 и 50 уг/мЛ ЦТЦ могу смањити брзину пролиферације РАВ264. 7 ћелија (П<0,05). у="" поређењу="" са="" лпс="" групом,="" ослобађање="" но="" је="" значајно="" смањено="" у="" групама="" ниске,="" средње="" и="" високе="" концентрације="" цтц,="" цт2,="" цт3="" и="" цт5,="" цтз="" групе="" ниске="" концентрације="" (п＜0,05）),="" док="" је="" значајно="" повећано="" у="" групама="" високе="" концентрације="" цт1="" и="" цт4="" （п＜0,05）.="" ослобађање="" ил-6="" (осим="" за="" групу="" са="" високом="" концентрацијом="" цт1="" и="" групу="" са="" ниском="" концентрацијом="" цт5)="" и="" тнф-="" (осим="" за="" групу="" средње="" концентрације="" цт1)="" је="" значајно="" смањено="" у="" групама="" ниске,="" средње="" и="" високе="" концентрације=""><0,05). ）.="" закључци:="" оптимизована="" технологија="" деколоризације="" макропорозне="" адсорпционе="" смоле="" је="" стабилна="" и="" изводљива="" у="" студији.="" из="" воденог="" екстракта="" полисахарида="" ц.="" тубулоса="" могу="" се="" изоловати="" један="" неутрални="" полисахарид="" и="" 5="" киселих="" полисахарида,="" међу="" којима="" цт2="" полисахарид="" има="" јачу="" антиинфламаторну="">

КЉУЧНЕ РЕЧИ:Цистанцхе тубулоса полисахарид; Деколоризација; Одвајање; Имунокомпетенција

Цистанцхе тубулосаје сува, месната стабљика са љускавим листовимаЦистанцхе тубулоса (Сцхенк) Вигхтиз породице Лиданацеае. Савремена истраживања су показала да Цистанцхе Тубула садржи гликозиде фенетил алкохола, иридоидне гликозиде, лигнане, полисахариде, алкалоиде и друге биолошки активне супстанце, које имају афродизијачка, лаксатива, заштитна својства јетре и анти-агинг својства. , појачан имунитет против умора и ноотропна дејства [1-4], могу се користити за клиничко лечење дефицита јанга бубрега, недостатка есенције и крви, импотенције и неплодности, слабости струка и колена, слабости мишића и кости, сува црева и затвор [5].

Цлицк то Цистанцхе херба производи

Водени екстракт одЦистанцхе тубулоса полисахаридје браонкасто-жута. Претходни експеримент наше истраживачке групе открио је да поредЦистанцхе тубулоса полисахарида, водени екстракт такође садржи нециљне компоненте као што су пигменти и протеини растворљиви у води. Ово доприноси раздвајању и пречишћавању полисахарида. Истраживање биолошке активности изазвало је велике потешкоће. Традиционални третман деколоризације органским растварачем ће уништити хемијску структуру циљне компоненте у сировом екстракту и смањити фармаколошку активност особе и уношење штетних састојака у људско тело [6]. Макропорозна адсорпциона смола је уобичајен материјал за деколоризацију полисахарида у екстрактима кинеске медицине. То је исплатив полимерни адсорпциони материјал са стабилним физичким и хемијским својствима. Може бити циљана његовом селективном адсорпцијом и перформансама просијавања пигментних компоненти. Да би се уклонили пигменти у екстрактима традиционалне кинеске медицине, осим тога, може се регенерисати кисељењем и алкалним прањем, па се широко користи [7]. Ова студија намерава да користи макропорозну адсорпциону смолу за деколоризацију воденог екстракта полисахарида Цистанцхе Тубула и да користи ортогонални експеримент за оптимизацију услова деколоризације; након деколоризације екстракта, у складу са различитом природом групе коју носи полисахарид, планирано је коришћење Метода јоноизмењивачке колонске хроматографије даље раздваја неутралне и киселе компоненте полисахарида у полисахариду одЦистанцхе тубулоса.

Студије су то показалецистанцхе плантполисахариди имају имуномодулаторно дејство и природни су имуномодулатори који могу да активирају систем комплемента и имуне ћелије као што су Т/Б лимфоцити, макрофаги, природне ћелије убице (НК), а такође могу да промовишу различито ослобађање цитокина и подстичу производњу антитела. , итд. [8-11]. Липополисахарид (ЛПС) може активирати инфламаторни сигнални пут макрофага, индуковати азот оксид (НО) и проинфламаторне цитокине као што су интерлеукин 6 (ИЛ-6) и фактор некрозе тумора-алфа (ТНФ-). Синтеза и ослобађање, чиме се покреће низ инфламаторних реакција у телу [12]. Ова студија има за циљ да успостави модел инфламације макрофага РАВ264.7 код миша изазваног ЛПС, почевши од ефеката полисахарида Цистанцхе Тубула на пролиферацију макрофага, секрецију инфламаторног фактора и производњу НО, и прелиминарне процене његовог утицаја на имунолошку активност организма. Има за циљ да пружи теоријску основу за дубинско проучавање основе антиинфламаторне активне супстанцеЦистанцхе тубулосаполисахарида и развоја његових полисахаридних ресурса.

Прелиминарне студије су откриле да када се полисахариди у Цистанцхе цистанцхе екстрахују водом, више супстанци растворљивих у води ће се растворити заједно, што утиче на чистоћуцистанцхе цистанцхе полисахариди. Стога њихово даље раздвајање и пречишћавање може поставити темеље за проучавање материјалне основе полисахарида и биолошке активности. Метода макропорозне адсорпционе смоле је уобичајена метода деколоризације [17-19]. Пошто је још увек нејасно о саставу пигмента уЦистанцхе тубулоса, тако да је истраживачка група користила експерименте статичке адсорпције да би издвојила најприкладнију макропорозну адсорпциону смолу АБ-8 од макропорозних адсорпционих смола различитих поларитета. Полисахарид Цистанцхе десертицола има добру способност задржавања. Да би се постигао бољи ефекат деколоризације, ово истраживање је засновано на претходним истраживањима и ортогоналним експериментима за одређивање процеса деколоризације (прања). Оптимизовани су проток десорпције, време деколоризације и масена концентрација узорка. Као резултат, оптимална метода деколоризације за полисахарид Цистанцхе тубулоса била је брзина протока елуације од 1,2 БВ/х, време деколоризације од 9 х и масена концентрација узорка од 25 мг/мЛ. Резултати верификационог експеримента показују да је метода деколоризације изводљива.

Чистоћа и врста природних полисахарида су важни фактори који утичу на његову активност. Стога су релевантна истраживања о методама изолације и пречишћавања полисахарида и даље у фокусу истраживачког рада природних активних полисахарида. Најчешће коришћене методе за одвајање полисахарида укључују преципитацију, гел хроматографију, хроматографију измене ањона, хроматографију на колони са макропорозном смолом и ултрафилтрацију [20]. Због различитог састава моносахарида, полисахариди имају различита својства наелектрисања. Могу се поделити на неутралне полисахариде и киселе полисахариде. Неутрални полисахариди су полимери састављени од два или више различитих мономера на бази шећера који не садрже органске киселине. Кисели полисахариди су сложенији од неутралних полисахарида у погледу састава и структуре, осим што садрже више од два мономера на бази шећера. , Такође садржи уронску киселину моно Боди [21]. Колона хроматографије са ањонском изменом користи разлику у наелектрисању полисахарида за одвајање неутралних полисахарида од киселих полисахарида [22]. Из тог разлога, ова студија је користила ДЕАЕ-650М колону за хроматографску хроматографију са јоноизмењивачем за одвајање полисахарида Цистанцхе Тубула, а издвојено је укупно 1 неутрални полисахарид и 5 киселих полисахарида. Макрофаги су имунокомпетентне ћелије које могу регулисати имунитет гутањем и убијањем патогених микроорганизама. Истраживања су показала да када је људско тело стимулисано патолошким или механичким оштећењем, интервенција лека може активирати макрофаге да побољша фагоцитни капацитет макрофага индукованих ЛПС-ом, чиме се инхибира производња НО и низа инфламаторних ћелија као што је ИЛ{{ 9}} и лучење ТНФ-фактора, чиме се штити домаћин од патогена [23]. У том циљу, ова студија је тестирала ефекте различитих полисахарида Цистанцхе тубулоса на брзину пролиферације ћелија РАВ264.7, као и ефекте на ЛПС-индуковане макрофаге да ослобађају НО, ИЛ-6 и ТНФ-. Као резултат тога, у опсегу масене концентрације од 12,5, 25 и 50 уг/мЛ, не само да је промовисао пролиферацију ћелија РАВ264.7, већ је такође значајно инхибирао пролиферацију ћелија РАВ264.7.

Тхеполисахарид Цистанцхе тубулосау ћелијама РАВ264.7 изазваним ЛПС-ом да ослобађају НО, ИЛ-6 и ТНФ- су ЦТ2. Релевантне студије су показале да ће састав моносахарида и молекулска тежина полисахарида утицати наимуномодулаторноактивност. Моносахариди као што су галактоза, арабиноза, маноза и глукоза су у позитивној корелацији са имунолошком активношћу полисахарида [24]. Полисахариди са већом молекуларном тежином могу садржати већу структуру вишеструких високо репетитивних чворова, могу унакрсно повезати површинске рецепторе плазма мембране у више смерова, и посебнопојачати имуномодулаторефекат [25]. Према томе, састав моносахарида киселог полисахарида ЦТ2 у овој студији може садржати посебне моносахариде или вишеструке моносахариде који су позитивно повезани са имунолошком активношћу, а молекулска тежина може бити већа од неутралних полисахарида и других киселих полисахарида, али су потребна даља истраживања да би се потврдило . Укратко, оптимизовани процес деколоризације макропорозне адсорпционе смоле у ​​овом истраживању је стабилан и изводљив; 1 неутрални полисахарид и 5 киселих полисахарида могу се издвојити из воденог екстракта Цистанцхе цистанцхе цистанцхе, међу којима је имунолошка активност киселог полисахарида ЦТ2 Стронгер. Ова студија може поставити експерименталну основу за развој и коришћење полисахарида Цистанцхе Тубула.