Утицај хуминских супстанци у исхрани на ћелијски имунитет и карактеристике крви код прасади

Апстрактан: Циљ ове студије био је да се утврди утицај хуминских супстанци у исхрани на имуни одговор и крвне профиле прасади. Укупно 24 укрштена прасад (словачка бела × ландрас; стара 35 дана; просечна телесна тежина 11,67 кг) распоређена су у две групе исхране са (експериментално; 5 г·кг−1 ) или без (контрола; 0 г·кг−1 ) допуна природних хуминских материја. У овој студији приметили смо значајно повећање удела ЦД4+ЦД8- лимфоцита (п < {{10}}.001) у експерименталној групи. Резултати су такође показали тенденцију повећања фагоцитне активности и капацитета захватања фагоцита и броја осталих праћених субпопулација лимфоцита (ЦД3+, ЦД21+, ЦД4-Д 8+, ЦД4+ЦД8+, ЦД4+ЦД25+) код прасади у експерименталној групи у поређењу са контролном групом. Суплементација хуминских супстанци је повећала серумску алкалну фосфатазу у поређењу са контролном групом (п < 0,05). Дијетални третман није значајно утицао на друге праћене параметре крви. Закључено је да укључивање хумусних материја у исхрану прасади може имати стимулативни ефекат на ћелијски имунитет, без негативног утицаја на хематолошке и биохемијске параметре.

Кључне речи: хумусне материје; фагоцитоза; лимфоцит; биохемија крви; хематологија; прасади

Предности додатка цистанцхе-како ојачати имуни систем

1. Представљање

Хуминске супстанце (ХС) су класа ненутритивних природних органских биоактивних једињења формираних у земљишту [1]. Оне су важне компоненте хумуса чија је примарна функција преношење хранљивих материја из земљишта у живе организме. ХС посебно укључује хуминску киселину, фулвичну киселину и хумин као њихове главне састојке [2]. Ове компоненте су неопходне за раст биљака [3] и могу промовисати ефикасно коришћење хранљивих материја од стране биљке [4]. Због забране употребе антибиотика као промотера раста у Европској унији, повећано је интересовање за алтернативне адитиве сточној храни за производњу животиња [5]. У последње две деценије повећано је интересовање за примену ХС у исхрани животиња [2,6]. Многи аутори су током својих студија уочили побољшање производних параметара након додавања ХС у храну за животиње. Последњих година показало се да ХС који се додаје храни за моногастричне животиње као што су свиње, живина и зечеви подстиче раст [7–10]. Штавише, ХС се користи као имуностимулаторно, антидијареално, аналгетичко и антимикробно средство у ветеринарској пракси [11–13]. Додавање биолошки активних суплемената хумусне природе у исхрану животиња стимулисало је метаболичке процесе и сварљивост хранљивих материја, а такође је активирало апсорпцију неких минералних елемената [14]. Друге студије су откриле да ХС помаже у смањењу излучивања амонијака из стајњака и побољшава релативни број лимфоцита у крви. Горе поменуте модификације помажу имунитету животиња [2,8,15]. Међутим, због различитих извора и врста ХС препарата, као и чињенице да не постоји јединствен стандард за мерење стварних ХС ефеката, њихов био-ефекат зависи од спецификације. На основу наших претходних резултата и искустава из студија живине (бројлера и кокошака носиља) о утицају хумусних материја (у концентрацијама од 0,8% и 0,5%, респективно) на имунолошки статус и имунолошког одговора, одлучили смо да проверимо овај ефекат код прасади. Приметили смо значајно повећање активности фагоцита и одговора Б ћелија, као и значајно повећање односа ЦД4+:ЦД8+ лимфоцита [16,17]. Генерално, суплементација као додатак храни за свиње није добро пријављена у поређењу са живином, а научне студије о утицају додатка ХС у исхрани свиња на имунитет и метаболизам су још увек релативно ограничене. Због тога је ова студија, као пилот испитивање, спроведена да би се проценио ефекат суплементације 0,5% ХС на имунолошке индикаторе, као и биохемијске и хематолошке варијабле у крви прасади.

Предности додатка цистанцхе-како ојачати имуни систем

Кликните овде да видите производе Цистанцхе Енханце Иммунити

【Затражите више】 Е-пошта:cindy.xue@wecistanche.com / Вхатс Апп: 0086 18599088692 / Вецхат: 18599088692

2. Материјал и методе

2.1. Експериментални дизајн

Експеримент је спроведен у складу са „Европском директивом о заштити животиња које се користе у научне сврхе“ [18]. Животиње су биле смештене у акредитованим шталама Катедре за исхрану и сточарство на Универзитету ветеринарске медицине у Кошицама, Словачка, под потребним зоохигијенским условима. Током експеримента просечна температура у штали износила је 20,2 ± 1,5 ◦Ц, а релативна влажност ваздуха 68,5 ± 4,8%. Испитивање је одобрила Етичка комисија Универзитета ветеринарске медицине и фармације у Кошицама (протокол бр. ЕКВ/2022-11). Укупно 24 укрштена (словачка бела к ландрас) 35- једнодневна прасад је подељена у две групе (н=12; 50% мужјака и 50% женке у обе групе). Пре почетка експеримента забележена је почетна просечна телесна маса (ТМ) животиње од 11,68 ± 1,35 кг у контролној групи и 11,65 ± 1,34 кг у експерименталној групи. У студију су укључене следеће експерименталне групе: контролна група и експериментална група, где је исхрана експерименталне групе допуњена додатком ХС од 0,5%. Експеримент је трајао 4 недеље. У експерименту су коришћене исте дијете за обе групе (табела 1). Увођење додатка ХС у исхрану реализовано је на рачун јечма у огледној групи. Свиње су храњене два пута дневно потпуним крмним мешавинама. Вода за пиће је била доступна животињама ад либитум током експерименталног периода. Комплетне крмне мешавине у експерименту су формулисане према нутритивним захтевима Шимечек и сар. [19]. Природни ХС додатак исхрани (ХУМАЦ® Натур АФМ; Хумац, доо, Кошице, Словачка) је самлевен и физички пречишћен са Леонардитом без хемијског третмана. Комплетне смеше за животиње су анализиране на суву материју, сирове протеине, сирова влакна, укупан пепео, скроб и укупан фосфор у складу са Уредбом ЕК Комисије 152/2009 [20]. Ниво калцијума и натријума у ​​исхрани је анализиран применом пламене методе атомског апсорпционог спектрометра (Уницам Солар 939, Цамберлеи, Сурреи, УК). Метаболичне енергетске вредности потпуне крмне мешавине израчунате су по формули према Шимечек и сар. [19].

2.2. Узорковање и мерења

У недељи 4, ујутру последњег дана експеримента, пункцијом орбиталног синуса узети су узорци крви од свих свиња појединачно у обе групе за накнадну анализу. Серум је добијен центрифугирањем (3000 рпм током 30 мин) и чуван на -20 ◦Ц до анализе. Хепаринизована крв је коришћена за одређивање хематолошких параметара, тестирање активности фагоцита и идентификацију субпопулација лимфоцита.

Табела 1. Формула и хемијски састав крмних смеша за свиње (основа храњења).

2.2.1. Хематолошки и серумски биохемијски параметри

Комплетна крвна слика је урађена аутоматским хематолошким анализатором (сцил Вет АБЦ™ Хематологи Анализер, Немачка). Варијабле процењене у нашој студији биле су хематокритна вредност (ХЦТ), концентрација хемоглобина (Хб), број црвених крвних зрнаца (РБЦ), средњи корпускуларни волумен (МЦВ) и укупни број белих крвних зрнаца (ВБЦ). Биохемијски параметри серума—укупни протеин, албумин, глукоза, уреа, триглицериди, холестерол, креатинин, аспартат аминотрансфераза (АСТ), алкална фосфатаза (АЛП) и фосфор мерени су коришћењем потпуно аутоматског анализатора са случајним приступом (Еллипсе, Италија). Концентрација калцијума у ​​серуму је одређена помоћу пламеног атомског апсорпционог спектрометра (Уницам Солар 939, Цамберлеи, Сурреи, УК).

2.2.2. Биомаркер пероксидације липида

Концентрације продуката пероксидације липида (нивои малондиалдехида, МДА) у серуму мерене су као супстанце реактивне са тиобарбитурном киселином (ТБАР) према методи спектрофотометријске модификације коју су описали Цоста ет ал. [21]. Укратко, узорци серума су помешани са раствором трихлоросирћетне киселине (15%; Мерцк, Дармстадт, Немачка), тиобарбитурне киселине (0.38%; Сигма-Алдрицх, Ст. Лоуис, МО, САД) и хлороводоничне киселине (0.25 Н; Микроцхем, Пезинок, Словачка) и загрева се 30 мин у кључалом воденом купатилу. После хлађења у леденој води и центрифугирања, мерена је апсорпција супернатанта на 535 нм. Концентрација ТБАР је одређена из стандардне криве припремљене коришћењем 1,1,3,3-тетраметокси пропана (малондиалдехид-бис (диметил ацетал); Ацрос Органицс, Геел, Белгија). Резултати су изражени као нмол МДА/мЛ серума.

цистанцхе биљке које повећавају имуни систем

2.2.3. Тестирање активности фагоцита и идентификација субпопулација лимфоцита

Комерцијални Пхаготест® тест (Целониц, Минхен, Немачка) је коришћен за одређивање фагоцитне активности и капацитета фагоцита за гутање. Приликом извођења теста испоштована су упутства произвођача. Директан тест имунолошког бојења је примењен за идентификацију одабраних субпопулација лимфоцита. Две комбинације коњугованих мишјих анти-свињских моноклонских антитела: ЦД3е/ЦД21 и ЦД4/ЦД8а/ЦД25 су коришћене према спецификацијама датим у табели 2. Хепаринизована крв у количини од 50 µЛ је инкубирана са моноклонским антителима 15 минута у мраку. на лабораторијској температури. После инкубације, 1 мЛ БД ФАЦС раствора за лизу је додат у епрувете. Епрувете су инкубиране додатних 20 мин у мраку на лабораторијској температури, а затим центрифугиране (300 × г током 5 мин). Ћелијске пелете су затим испране и центрифугиране два пута са 1 мЛ фосфатног пуфера физиолошког раствора (ПБС; МП Биомедицалс, Иллкирцх-Граффенстаден, Француска) на 300 × г током 5 минута. На крају, ћелије су ресуспендоване у 200 µЛ ПБС-а за накнадну цитометријску анализу.

Табела 2. Спецификација и количине коришћених мишјих анти-свињских моноклонских антитела.

Анализа фагоцитне активности као и идентификација субпопулација лимфоцита обављена је на шестобојном проточном цитометру БД ФАЦСЦантоТМ (Бецтон Дицкинсон Биосциенцес, Сан Јосе, ЦА, УСА) коришћењем софтвера БД ФАЦС ДиваТМ. Положај анализираних ћелија је одређен у ФСЦ вс. ССЦ тачкицама. Гранулоцити, моноцити и обе ћелијске популације заједно, респективно, су затворене за анализу фагоцитне активности. На основу ниског садржаја ДНК у хистограму црвене флуоресценције (ФЛ-2), бактеријски агрегати су искључени из даље анализе. Проценат активних фагоцита и средњи интензитет флуоресценције одређени су на хистограму зелене флуоресценције (ФЛ-1). За идентификацију субпопулација лимфоцита коришћени су затворени лимфоцити (слика 1а,б). ЦД3+ лимфоцити представљају Т лимфоците и ЦД21+ Б лимфоците (слика 1ц). Субпопулација ЦД4+ЦД8- је процењена као Т помоћни лимфоцити, ЦД4-ЦД8+ као цитотоксични лимфоцити, ЦД4+ЦД8+ као двоструко позитивни Т лимфоцити (Слика 1д) и ЦД4+ЦД25+ као регулаторни Т лимфоцити (Слика 1е). Пропорције лимфоцита су изражене у процентима.

2.3. Статистичка анализа

Резултати су статистички процењени неупареним т-тестом са статистичким софтвером ГрапхПад Присм 8.0. Вредност п < 0.05 се сматрала статистички значајном. Резултати добијени у овом експерименту изражени су као средња вредност ± стандардна грешка средње вредности (СЕМ).

Слика 1. Стратегија гајтинга: (а) одређивање положаја лимфоцита (црвено) на основном тачком (ФСЦ-А наспрам ССЦ-А); (б) уклањање дублета и агломерата из анализе; (ц) анализа заступљености ЦД3+ и ЦД21+ лимфоцита; (д) анализа заступљености ЦД4+ и ЦД8+ лимфоцита; (е) одређивање репрезентације ЦД4+ЦД25+ лимфоцита на хистограму из ЦД4+ позитивних ћелија (затворено зеленом бојом).

3. Резултати

3.1. Хематолошки и серумски биохемијски параметри

Ефекти ХС на хематолошке и биохемијске крвне профиле приказани су у табели 3. Утврђени параметри крви укључујући садржај црвених крвних зрнаца, белих крвних зрнаца, хемоглобина, хематокрита, средње запремине корпускула, укупног протеина, албумина, глукозе, урее, триглицерида , холестерол, креатинин, АСТ, Ца и П нису били под утицајем дијететског третмана ХС. Међутим, додатак исхрани са ХС повећао је активност АЛП (п < 0.05).

Табела 3. Утицај хумусних материја на неке хематолошке и серумске биохемијске параметре прасади

Ниво ТБАР у серуму, секундарни продукти пероксидације липида (који су важан параметар који се користи у одређивању пероксидације липида), није био под утицајем додатка ХС.

3.2. Ћелијски имуни одговор

Додавање ХС храни за прасад није имало значајан утицај на проценат активних фагоцита (Табела 4) и капацитет фагоцита за гутање (Табела 5). Веће вредности ових параметара урођеног имуног одговора утврђене су у експерименталној групи у односу на контролну групу.

Табела 4. Утицај хумусних супстанци на активност фагоцита у крви прасади процењен као проценат активних фагоцита-фагоцитна активност

Табела 5. Утицај хумусних супстанци на капацитет захватања фагоцита изражен као средњи интензитет флуоресценције (МФИ).

Слика 2. Наставак.

Слика 2. Утицај хумусних супстанци на проценат лимфоцита: (а) ЦД3+; (б) ЦД21+; (ц) ЦД4+ЦД8-; (д) ЦД4-ЦД8+; (е) ЦД4+ЦД8+; (ф) ЦД4+ЦД{{10}}; и (г) однос ЦД4:ЦД8 лимфоцита у крви прасади. Колона означена звездицом се значајно разликује од контролне (*** п < 0,001).

4. Дискусија

4.1. Ћелијски имуни одговор

Главни циљ наше студије био је да прати како хуминске супстанце (ХС) утичу на неколико различитих индикатора ћелијског имунитета. Проценат активних фагоцита и њихов капацитет гутања одабрани су као индикатори за праћење утицаја на урођени ћелијски имунитет. У нашој претходној студији је утврђено да је додавање ХС у исхрану ({{0}}}.8%) бројлера значајно повећало фагоцитну активност као и средњи интензитет флуоресценције [16]. Поред тога, ЕЛнаггар и Ел-Келави [22] су приметили повећање фагоцитне активности и фагоцитног индекса након додавања хуминске киселине исхрани (0.1, 0.2 и 0. 4%) Саццо пилића. Слични налази су добијени и код кокошака носиља [17]. У тренутној студији, суплементација ХС исхрани прасади није имала значајан утицај на фагоцитозу. Међутим, проценат активних фагоцита, као и њихов капацитет гутања, били су бројчано већи код прасади са додатком ХС него код прасади у контролној групи. Према Санмигуелу и Рондону [23], ефекат ХС на фагоците зависи од времена. Открили су да је додатак ХС исхрани (0.1 и 0.2%) кокошака носиља повећао фагоцитни индекс 8. и 3. дана0 примене, али у поређењу онима из Ванга ет ал. [2], који је открио да свиње чија храна има додат 10% ХС имају већи релативни број лимфоцита. Слични резултати су добијени и за живину која је храњена храном са додатком 0,15% хумата [24], или је додата 20 мг хуминске киселине/кг телесне тежине у води за пиће [25]. Према Цетину и др. [24], суплементација исхране кокошака носиља хуминским једињењима доводи до значајног повећања броја лимфоцита, што се може приписати повећаном стварању ИЛ-2, као и експресији ИЛ{{29} } рецептор на лимфоцитима. Изгледа да хуминске супстанце повећавају активност ћелија које производе ИЛ{30}. Међутим, други аутори нису приметили било какав значајан утицај на број лимфоцита код свиња које су храњене храном обогаћеном хуминском киселином [26], као ни код пилића којима су даване хуминске киселине у води за пиће [27] или у исхрани [22]. . Наши резултати су слични запажањима Мудро ˇнова ет ал. [16], који је открио да је проценат ЦД4 лимфоцита значајно повећан код бројлера храњених додатком ХС (0,8%) у поређењу са контролном групом. Такође су приметили значајно смањење ЦД8+ лимфоцита (Т цитотоксични лимфоцити), што је резултирало статистички већим односом ЦД4:ЦД8, који се користи као маркер имунолошке стимулације. С друге стране, храњење кокошака носиља са исхраном од 0,5% ХС значајно је повећало удео ИгМ+ лимфоцита који представљају субпопулацију Б лимфоцита и значајно смањило удео ЦД{45}} лимфоцита који представљају укупне Т лимфоците. Пропорција Т помагача и Т цитотоксичних лимфоцита није била погођена [17]. На основу наших резултата, као и различитих студија, произилази да ХС може имати имуностимулаторно дејство на које може утицати састав и количина употребљених хумата, начин њихове примене, животињска врста и, према ЕЛнаггар и Ел. -Келави [22], узгојем животиња у различитим регионима света, који се разликују по клими. Имуномодулација ХС се теоретски може састојати од формирања комплекса хумата са сахаридима. Ови комплекси се везују за површину Т лимфоцита и НК ћелија и утичу на њихову функцију, укључујући производњу цитокина, који даље утичу на друге ћелије имуног система [28].

цистанцхе тубулоса-побољшава имуни систем

4.2. Хематолошки и биохемијски параметар серума

Други циљ ове студије био је да се процене одабрани хематолошки и биохемијски параметри крви у исхрани прасади са додатком ХС. Није утврђена значајна разлика у одабраним варијаблама протеинског, енергетског и минералног метаболизма, као ни у хематолошким индексима између експерименталне групе животиња са додацима ХС исхрани и контролне групе, осим активности АЛП у тренутној студији. Биохемијски индикатори у нашој студији били су у оквиру референтног опсега код свих прасади, према Доубек и сар. [29] и Крафт и Дурр [30]. Наши налази су у складу са претходним радом Ванг ет ал. [2], који нису открили значајне промене у црвеним и белим крвним зрнцима током испитивања у својој студији да би открили ефекте ХС на крвне варијабле код завршних свиња. Након третмана исхраном која садржи ХС, Херзиг ет ал. [31], као и Шамудовска и Деметерова [32], приметили су незнатно повећану активност АЛП код пилића. У нашем истраживању смо открили да је експериментална група имала значајно већу активност АЛП од контролне групе. Њихове вредности су, у међувремену, остале у референтном опсегу за нивое АЛП свиња (2–17 кат·Л −1) [29,30]. С друге стране, Јад'уттова ет ал. [33] и Ратх ет ал. [34] приметили су значајно смањење активности АЛП код пилића након храњења са ХС. Према овим ауторима, ниво АЛП у крви код бројлера који су добијали 1.00% ХС додатка храни се смањио. Иако су смањене вредности активности АЛП у Ратх ет ал. [34] студије су се статистички разликовале од контролне, нису одражавале никакав токсични ефекат ХС на селективне органе (мишиће, бубреге, срце или јетру). Количина ХС коју обезбеђује исхрана може утицати на концентрацију минерала у крви. Ниво калцијума и фосфора у крвном серуму прасади није био под утицајем примене ХС у концентрацији од 0.5%. Способност ХС да хелатира метале, на коју утиче значајна количина бочних ланаца карбоксилне киселине, може бити разлог за смањење концентрације минерала у серуму [34]. У нашем истраживању концентрације калцијума и фосфора у крви прасади нису смањене испод референтних вредности додавањем ХС у крмну смешу огледне групе. МДА је производ пероксидације липида изазване слободним радикалима кисеоника, који се може користити као маркер за процену антиоксидативног статуса и пероксидације липида [35]. МДА је одређен као биомаркер оксидативног стреса мерењем нивоа реактивних супстанци тиобарбитурне киселине (ТБАР) у крви. Смањење оксидативног стреса карактерише смањење нивоа МДА. Претходна истраживања су показала да ХС може имати антиоксидативна својства, штитећи од разних поремећаја повезаних са оксидативним стресом који слободни радикали обично изазивају. На пример, Ванг ет ал. [15] открили су да додатак исхрани натријум хумата (2000 мг·кг-1) може побољшати антиоксидативни статус одбијених прасади. Уочили су значајно смањење садржаја МДА у серуму, као и значајно повећање укупног антиоксидативног капацитета. Међутим, ХС су природни материјали са променљивим саставом, који могу изазвати различиту ефикасност, што такође може зависити од њихове примењене количине. У тренутном експерименту, није примећена варијација у серумским нивоима МДА (ТБАРс) прасади храњених ХС у поређењу са контролном групом. Наши резултати су у складу са Зханг ет ал. [36], који су открили да додавање натријум хумата у исхрану (0,1, 0,3 и 0,5%) кокошака носиља нема утицаја на укупни антиоксидативни капацитет серума и вредности МДА.

Предности додатка цистанцхе-како ојачати имуни систем

5. Закључци

На основу резултата добијених у овој студији, може се закључити да би суплементација исхраном са 0.5% хумусних супстанци могла имати стимулативни ефекат на неке имуне ћелије прасади. Дошло је до значајног повећања удела ЦД4+ЦД8- лимфоцита у крви. Суплементација са хуминским супстанцама повећава серумску АЛП. Међутим, ове вредности су и даље биле унутар референтног опсега. Резултати су показали да чак и тако ниска концентрација ХС може позитивно утицати на ћелијски имунитет прасади. С обзиром да је одабрана концентрација хумусних супстанци значајно утицала само на неке показатеље ћелијског имунитета, биће неопходна даља истраживања како би се одабрала одговарајућа концентрација и потврдио стимулативни ефекат на имунитет ове категорије животиња.

Референце

1. Пена-Мендез, ЕМ; Хавел, Ј.; Патоˇцка, Ј. Хуминске супстанце-једињења јос непознате структуре: Примена у пољопривреди, индустрији, зивотној средини и биомедицини. Ј. Аппл. Биомед. 2005, 3, 13–24. [ЦроссРеф]

2. Ванг, К.; Цхен, ИЈ; Иоо, ЈС; Ким, ХЈ; Цхо, ЈХ; Ким, ИХ Ефекти допунских хуминских супстанци на перформансе раста, карактеристике крви и квалитет меса код свиња дораде. Ливест. Сци. 2008, 117, 270–274. [ЦроссРеф]

3. Виссер, СА Утицај хуминских супстанци на више животиње и човека, могућа употреба хуминских једињења у медицинским третманима. У Процеедингс оф тхе Интернатионал Хумиц Ацид Социети Меетинг, Севилла, Спаин, 1988; стр. 27.

4. Стевенсон, ФЈ Хумус Цхемистри: Генесис, Цомпоситион, Реацтионс; Вилеи-Интер-Сциенце: Нев Иорк, НИ, УСА, 1994; стр. 34–41.

5. Хасан, ХМА; Мохамед, МА; Иоуссеф, АВ; Хассан, ЕР Ефекат употребе органских киселина за супституисање антибиотских промотера раста на перформансе и цревну микрофлору бројлера. Асиан-Ауст. Ј. Аним. Сци. 2010, 23, 1348–1353. [ЦроссРеф]

6. Галик, Б.; Хрнˇцар, Ц.; Гашпаровић, М.; Ролинец, М.; Ханушовскы, ​​О.; Јураˇцек, М.; Шимко, М.; Забранскы, Л.; Ковачик, А. Утицај хуминских супстанци на квалитет меса у тову пољопривредних фазана (Пхасианус цолцхицус). Пољопривреда 2023, 13, 295. [ЦроссРеф]

7. Караоглу, М.; Мацит, М.; Есенбуга, Н.; Дурдаг, Х.; Тургут, Л.; Билгин, ОЦ Ефекат суплементације хумата на различитим нивоима на перформансе раста, особине клања и трупа бројлера. Инт. Ј. Поулт. Сци. 2004, 3, 406–410.

8. Ји, Ф.; МцГлоне, ЈЈ; Ким, СВ Ефекти дијететских хуминских супстанци на перформансе раста свиња, карактеристике трупа и емисију амонијака. Ј. Аним. Сци. 2006, 84, 2482–2490. [ЦроссРеф]

9. Лацкова, З.; Зиго, Ф.; Фаркашова, З.; Ондрашовиˇцова, С. Ефекат хуминских супстанци као органског суплемента на перформансе това, квалитет меса и одабране биохемијске параметре кунића. Живот 2022, 12, 1016. [ЦроссРеф]

10. Каевска, М.; Лоренцова, А.; Виденска, П.; Седлар, К.; Провазник, И.; Трцкова, М. Ефекат натријум хумата и цинк оксида који се користе у профилакси дијареје након одбића на састав фекалне микробиоте код одбијених прасади. Вет. Мед. 2016, 61, 328–336. [ЦроссРеф]

11. Трчкова, М.; Матлова, Л.; Худцова, Х.; Мартин, Ф.; Зрали, З.; Дворска, Л.; Беран, В.; Павлик, И. Тресет као додатак исхрани животиња: преглед. Вет. Мед. -чешки. 2005, 50, 361–377. [ЦроссРеф]

12. Вебер, ТЕ; ван Самбеек, ДМ; Габлер, НК; Керр, БЈ; Мореланд, С.; Јохал, С.; Едмондс, МС Ефекти дијететске хуминске и бутирне киселине на перформансе раста и одговор на липополисахариде код младих свиња. Ј. Аним. Сци. 2014, 92, 4172–4179. [ЦроссРеф]

13. Мао, И. Модулација перформанси раста, састава меса, оксидативног статуса и имунитета бројлера дијеталним фулв киселинама. Поулт. Сци. 2019, 98, 4509–4513. [ЦроссРеф] [ПубМед]

14. Степцхенко, ЛМ Улога хумусних препарата у управљању метаболичким процесима у формирању биолошких производа пољопривредних животиња. У Достигнућа и изгледи за употребу хуминских супстанци у пољопривреди; Издавачка кућа Пољопривредног института: Дњепропетровск, Украјина, 2008; стр. 70–74. (На руском)

15. Ванг, К.; Иинг, Ј.; Зоу, П.; Зхоу, И.; Ванг, Б.; Иу, Д.; Ли, В.; Зхан, Кс. Ефекти дијететских суплемената натријум-оксида хуминске киселине и цинковог оксида на перформансе раста, имунолошки статус и антиоксидативни капацитет прасади које се одбију. Анималс 2020, 10, 2104. [ЦроссРеф] [ПубМед]

16. Мудро ˇнова, Д.; Караффова, В.; Пешулова, Т.; Кошˇцова, Ј.; Марушˇцакова, ИЦ; Бартковскы, ​​М.; Марцинˇцакова, Д.; Шевˇцикова, З.; Марцинˇцак, С. Утицај хуминских супстанци на микробиоту црева и имуни одговор бројлера. Фоод Агриц. Иммунол. 2020, 31, 137–149. [ЦроссРеф]

17. Мудро ˇнова, Д.; Караффова, В.; Семјон, Б.; Над', П.; Кошˇцова, Ј.; Бартковскы, ​​М.; Макиш, А.; Буј ˇнак, Л.; Наги, Ј.; Мојжишова, Ј.; ет ал. Ефекти дијететских суплемената хуминских супстанци на производне параметре, имуни статус и цревну микробиоту кокошака носиља. Пољопривреда 2021, 11, 744. [ЦроссРеф]

18. Европска комисија. Директива 2010/63/ЕУ Европског парламента и Савета од 22. септембра 2010. о заштити животиња које се користе у научне сврхе. Ван. Ј. Еур. Унион 2010, 276, 33–79.

19. Шимеˇцек, К.; Земан, Л.; Хегер, Ј. Потребе за нутријентима и табеле нутритивних вредности хране за свиње, 3. изд.; Чешка академија пољопривредних наука: Брно, Чешка Република, 2000; 125п. (на чешком)

20. Европска комисија. Уредба Комисије (ЕЦ) бр. 152/2009 од 27. јануара 2009. о утврђивању метода узорковања и анализе за званичну контролу хране за животиње. Ван. Ј. Еур. Унија. 2009, 54, 2–54.

21. Коста, ЦМ; Сантос, РЦЦ; Лима, ЕС Једноставна аутоматизована процедура за мерење тиола у узорцима људског серума. Ј. Брас. Патол. Мед. Лаб. 2006, 42, 345–350. [ЦроссРеф]

22. ЕЛнаггар, АС; Ел-Келави, МИ Ефекат додатка хуминске киселине на продуктивне перформансе, састојке крви, имуни одговор и карактеристике трупа Сассо пилетине. Египат. Ј. Аним. Прод. 2018, 55, 75–84.

23. Санмигуел, ПР; Рондон, БИ Суплементација хуминским супстанцама утиче на урођени имунитет код кокошака носиља у фази пост поста. Рев. МВЗ Цордоба 2016, 21, 5198–5210. [ЦроссРеф]

24. Цетин, Е.; Гуцлу, БК; Цетин, Н. Ефекат дијететског суплементације хуматом и органском киселином на социјални стрес изазван високом густином стајања код кокошака носиља. Ј. Аним. Вет. Адв. 2011, 10, 2402–2407.

25. Салах, Х.; Мансоур, Е.; Рехам, РР; Абд Ел Хамид, ЕС Студија о утицају хуминске киселине на перформансе раста, имунолошке, неке крвне параметре и контролу цревног клостридија код бројлерских пилића. Заг. Вет. Ј. 2015, 43, 102–109. [ЦроссРеф]

26. Ким, К.; Бае, И.; Цхо, Ј.; Цхои, И.; Ха, Ј.; Цхои, Ј. Ефекти додатка хуминске киселине и праха листова боровнице у сточној храни на продуктивност, квалитет крви и меса дорадних свиња. Фоод Сци. Аним. Ресоур. 2019, 39, 276–285. [ЦроссРеф] [ПубМед]

27. Лала, АО; Оквелум, Н.; Ирекхоре, ОТ; Огунладе, БА; Адигун, АА; Елегбеде, ЛА; Оиедеји, ММ Хематолошки и биохемијски параметри пилића бројлера допуњених хуминском киселином у води за пиће. Аппл. Троп. Агриц. 2016, 21, 74–78.

28. Терратол, ЛЛЦ Ефекти хуминске киселине на животиње и људе. Доступно на мрежи: хттпс://фулвиц.инфо/вп-цонтент/уплоадс/2019 /01/М-Терратрол_Артицле-1.пдф (приступљено 10. августа 2022).

29. Доубек, Ј.; Шлосаркова, С.; ˇРехакова, К.; Боуда, Ј.; Сцхеер, П.; Пиперисова, И.; Томенендалова, Ј.; Маталова, Е. Интерпретација основних биохемијских и хематолошких налаза код животиња, 2. изд.; Новико: Брно, Чешка, 2010; стр. 102. (на чешком)

30. Крафт, В.; Дурр, УМ Клиничка лабораторија Диагностика во Ветеринарнеј Медицине, 1. изд.; Хајко & Хајкова: Братислава, Словачка, 2001; стр. 1–380. (на словачком)

31. Херзиг, И.; Навратилова, М.; Тотушек, Ј.; Суцхы, П.; Веˇцерек, В.; Блахова, Ј.; Зралы, З. Ефекат хуминске киселине на акумулацију цинка у ткивима бројлера пилића. чешки Ј. Аним. Сци. 2009, 54, 121–127. [ЦроссРеф]

33. Шамудовска, А.; Деметерова, М. Ефекат исхране допуњене природним хуминским једињењима и натријум хуматом на перформансе и одабране метаболичке варијабле код бројлерских пилића. Ацта Вет. Брно 2010, 79, 385–393. [ЦроссРеф]

33. Јад'уттова, И.; Марцинˇцакова, Д.; Бартковскы, ​​М.; Семјон, Б.; Харˇцарова, М.; Нагиова, А.; Вацзи, П.; Марцинˇцак, С. Утицај дијететских хуминских супстанци на учинак това, принос трупа, биохемијске параметре крви и минерални профил костију бројлерских пилића. Ацта Вет. Брно 2019, 88, 307–313. [ЦроссРеф]

34. Ратх, НЦ; Хуфф, ВЕ; Хуфф, ГР Ефекти хуминске киселине на пилиће бројлера. Поулт. Сци. 2006, 85, 410–414. [ЦроссРеф]

35. Сумида, С.; Танака, К.; Китао, Х.; Накадомо, Ф. Пероксидација липида изазвана вежбањем и цурење ензима пре и после додавања витамина Е. Инт. Ј. Биоцхем. 1989, 21, 835–838. [ЦроссРеф]

36. Зханг, АР; Пирзадо, СА; Лиу, ГХ; Цхен, ЗМ; Цханг, ВХ; Цаи, ХИ; Бриден, ВЛ; Зхенг, АЈ Додатак исхрани са натријум хуматом побољшава квалитет јаја и имунолошку функцију кокошака носиља. Ј. Аппл. Аним. Нутр. 2020, 8, 93–99. [ЦроссРеф]