Проучавање кришки Цистанцхе Десертицола и производа обрађеног на пари од Цистанцхе Десертицола

Разлика хемијских компоненти и биолошких активности резина сирових производа и производа обрађеног паром вина из Цистанцхеа

Контакт: emily.li@wecistanche.com

Јинг Зханг, 1,2 Иуеву Ванг, 3 Сонг Ианг, 1 Иунфенг Ксиао, 3 Хаибин Гуан, 2 Ксин Иуе, 2 Ксиаокин Ванг, 2 и Ксиангри Ли 1

Апстрактан

Као добро познати кинески биљни лек,Цистанцхе десертицоласе користи за лечење синдрома недостатка бубрега у Кини хиљадама година. Оба сирови производЦистанцхе десертицола кришке(РЦД) и његовеПроизвод прерађен паром вина(ВСЦД) се клинички користе за различите ефекте. У овој студији утицаји процеса парења са вином (СПВ) изЦистанцхе десертицолао хемијском саставу и биолошким ефектима су истраживани. За проучавање разлика у хемијском саставу коришћена је анализа главних компоненти (ПЦА) и квантитативна анализа. Ефекти исхране бубрега су такође истражени да би се упоредиле разлике између РЦД (Цистанцхе десертицола кришке)и ВСЦД (Производ прерађен паром вина). Резултати ПЦА су показали да је очигледно раздвајање постигнуто у РЦД(Цистанцхе десертицола кришке)и ВСЦД (Производ прерађен паром вина). Резултати квантитативне анализе су показали да ВСЦД има веће количине укупних полисахарида, укупних ПхГс, изоактеозида и османтузида Б од РЦД(Цистанцхе десертицола кришке), док се садржај 2′-ацетилактеозида и актеозида смањио након СПВ. Поређење РЦД и ВСЦД на биолошке активности показало је да оба могу да поврате ниво полних хормона у моделу недостатка бубрега-јанга и побољшају антиоксидативни ефекат. ВСЦД(Производ прерађен паром вина)био много бољи у повећању тежине унутрашњих органабубрегаи семена везикула. Резултати су показали да је СПВ променио своје хемијске компоненте и побољшао своје биолошке активности.

1. Представљање

Цистанцхе десертицолаје уобичајена традиционална кинеска медицина и углавном се користи као тоник у Кини и Јапану дуги низ година, познатији као "пустињски гинсенг".Цистанцхе десертицолаје први пут забележен као врхунски у „Шенонговом биљном класику Материа Медица (Схен Нонг Бен Цао Јинг)“ око 100 година пре нове ере и коришћен за лечење разних болести укључујући недостатак бубрега, импотенцију, неплодност код жена, морбидну леукореју, обиље метрорагије (белци) , осећај хладноће у слабинама и коленима и хронични затвор код старијих [1]. До сада је изоловано неколико главних састојака, као што су полисахариди [2, 3], фенилетаноидни гликозиди (ПхГ) [1, 4], иридоиди [1] и лигнаноиди [1, 5]. Међу њима, ПхГс и полисахариди су се показали као главне биолошки активне компоненте уЦистанцхе десертицола[6–9]. Савремени фармаколошки експерименти су доказали да Цистанцхе десертицола може побољшати производњу тестостерона и заштитити сперму, стимулисати пролиферацију ћелија и повећати стопу преживљавања ћелија, показујући изражене активности за сексуалну потенцију, побољшање памћења, против старења, уклањање слободних радикала и неуропротекцију [10]. –13].

Да би се смањила токсичност и/или побољшали ефекти, већину традиционалних кинеских биљака треба обрадити пре него што се издају на рецепт. Традиционални процеси укључују чишћење, процес воде (млевење у води, пару и печење) и процес ватре (загревање са вином, сирћетом, сољу или медом) [14]. Током процеса хемијске компоненте могу да се мењају: релативни садржај појединих компоненти може да се промени или да се формирају нове компоненте [15]. ПроцесЦистанцхе десертицолаима дугу историју иЦистанцхе десертицолатреба обрадити намакањем у пиринчаном вину, кухањем на пари како је описано у Кинеској фармакопеји (издање 2015.) [16]. Доказано је да СПВ утиче на њихов утицај на меридијан бубрега према теорији традиционалне кинеске медицине (ТЦМ) [17]. ВСЦД(Производ прерађен паром вина)је први пут документовано у „Леи Гонгс Трактату о припреми и кључању Материа Медица (Леи Гонг Пао Зхи Лун)“ у Северној и Јужној династији Кине. ВСЦД се боље користи за лечење недостатака бубрега и заштиту сперме као што је забележено у „Таипинг Схенгхуи Фанг“ у кинеској династији Сонг. Међутим, није било упоредних студија о хемијским компонентама између РЦД(Цистанцхе десертицола кришке)и ВСЦД(Производ прерађен паром вина)досад.

Савремена фармаколошка истраживања су показала да ВСЦД може тонизирати бубрег како би осигурао есенцију стимулацијом осовине хипоталамус-хипофиза-гонада у различитим степенима и користи се за лечење дефицита бубрега као што је недостатак бубрега-јанга [18]. Међутим, до сада су разлике у биолошким активностима између РЦД(Цистанцхе десертицола кришке)и ВСЦД(Производ прерађен паром вина)нису истражене. Недавно, да би се олакшало експериментално истраживање, животињски модел недостатка бубрега-јанга је дуплиран тако што се пацовима убризгава висока доза хидрокортизона, у којој ће пацови показивати симптоме који су веома слични онима који су описани у бубрежно-јанг недостатку ТЦМ [19, 20] . Пацови са недостатком бубрега-јанга увек имају неке симптоме као што су губитак тежине, смањење потрошње хране, слабост, повећан унос воде и смањена активност. На основу овог животињског модела, откривене су разлике у хранљивим ефектима на бубреге између РЦД и ВСЦД и чак су откриле научну суштину традиционалног кинеског процеса.

Цистанцхе десертицола има много функција

2. Материјал и методе

2.1. Материјали и хемикалије

Стандардна супстанца као што су актеозид, изоактеозид, ехинакозид, цистанозид А и 2′-ацетилактеозид купљена је од Схангхаи Иуание Биотецхнологи Цо. Лтд (Шангај, Кина). Цистанозид Ф, цистанозид Ц, османтузид Б и тубулозид Б су набављени од Цхенгду Пфеиде Биотецхнологи Цо. Лтд (Ченгду, Кина). Чистоћа свих стандарда није била мања од 98 процената. ХПЛЦ метанол и ацетонитрил су набављени од Аладдин Цхемистри Инц. (Шангај, Кина). Дејонизована вода је добијена коришћењем МиллиК50 СП Реагент Ватер Систем (Бедфорд, МА, САД) за припрему узорака и мобилних раствора. Сви остали органски растварачи коришћени у овој студији били су аналитичког квалитета и купљени су од Схангхаи Цхемицал Цо. Лтд (Шангај, Кина).

2.2. Збирка узорака

Све сировоЦистанцхе десертицола(7 серија узорака) прикупио је Медицински универзитет Унутрашње Монголије из провинција Унутрашња Монголија и Нингсија. Сви су идентификовани каоцистанцхе десертицолаИЦ Ма од Ксиао-кин Ванг-а, професора одељења за фармакогнозију на Медицинском универзитету Унутрашње Монголије. Узорак ваучера депонован је на Фармацеутском факултету Медицинског универзитета Унутрашње Монголије. Након сакупљања, цвасти одЦистанцхе десертицоласу уклоњене, стабљике су исечене и осушене на собној температури са ваздухом, а затим су кришке насумично подељене у две групе у свакој серији: једна је РЦД(Цистанцхе десертицола кришке)а други се користи за припрему ВСЦД(Производ прерађен паром вина).

ВСЦД(Производ прерађен паром вина)припремљени су у лабораторији према кинеској фармакопеји (издање 2015.) [16], што значи да исечени РЦД(Цистанцхе десертицола кришке)натопљене у пиринчаном вину са затвореном посудом 6 х до мекоће, парене у воденом купатилу додатних 12 х док површина не поцрне, и сушене на собној температури на ваздуху.

2.3. Анализа главних компоненти (ПЦА)

Анализа главних компоненти (ПЦА) је софистицирана техника која се широко користи за смањење димензија мултиваријантних проблема. Он смањује димензионалност оригиналног скупа података објашњавајући корелацију између великог броја варијабли у смислу мањег броја основних фактора без значајног губитка информација. У овој студији, разлике између РЦД(Цистанцхе десертицола кришке)и ВСЦД(Производ прерађен паром вина)су изведене од стране ПЦА без надзора коришћењем софтвера СИМЦА 13.0 на основу релативних површина пикова у ХПЛЦ хроматографији. Уз помоћ ПЦА утврђени су главни утицаји хемикалија на класификацију међу различитим узорцима.

2.4. Припрема узорка

2.4.1. Припрема екстракта за животиње

РЦД(Цистанцхе десертицола кришке)и ВСЦД(Производ прерађен паром вина)изабрани су из узорака сакупљених и припремљених како је описано у одељку 2.2.

Осушен на ваздуху и исечен РЦД(Цистанцхе десертицола кришке)је у праху у праху (ФВ135, Тиањин Таисите Инструмент Цо., Лтд.), тачно тежак 1.0 кг, и натопљен у 50 посто етанола 30 минута, а коришћени односи биљка/етанол су били 1/ 10 (в/в). А затим је екстрахован под рефлуксом два пута по 1 х сваки пут. Два екстракта су комбинована и филтрирана, а етанол је рекупериран под сниженим притиском на 60 степени. Укупни сирови екстракт ПхГс је осушен у вакууму на 60∘Ц и пречишћен макропорозном смолом. Коначно, добијен је ПхГс екстракт РЦД-а и тачно измерен.

ПхГс екстракт ВСЦД(Производ прерађен паром вина)добијен је по истом поступку горе.

Седименти из екстракције ПхГ-а су осушени на ваздуху и децоктовани два пута по 1,5 х сваки пут са 20 пута воде. Два екстракта су комбинована и центрифугирана на 4000 рпм током 10 мин, а супернатант је концентрован и преципитиран са 95% етанола. После центрифугирања, талог је осушен у вакууму на 60 степени. Коначно, полисахаридни екстракт РЦД(Цистанцхе десертицола кришке)је добијен и тачно измерен.

Екстракт полисахарида ВСЦД(Производ прерађен паром вина)добијен је по истом поступку горе.

ПхГс и полисахаридни екстракти РЦД(Цистанцхе десертицола кришке)и ВСЦД(Производ прерађен паром вина)су мешане суспензије у води, респективно, када су пацови третирани орално.

2.4.2. Припрема узорка за одређивање ПхГс

Екстракти ПхГс у одељку 2.4.1 су тачно измерени као 0.15 г и екстраховани ултразвуком са 50мЛ 50% воденог раствора метанола током 40 минута. Након хлађења, губитак тежине је допуњен са 50 процената метанола. Сви узорци и растварачи су филтрирани кроз 0,45 μм мембрану пре анализе. Садржај четири ПхГ у РЦД(Цистанцхе десертицола кришке)и ВСЦД(Производ прерађен паром вина)је одређен коришћењем ХПЛЦ, а укупни ПхГ су одређени коришћењем УВ спектрофотометрије.

2.4.3. Припрема узорка за одређивање полисахарида

Екстракти полисахарида у одељку 2.4.1 су тачно измерени као 0.10 г и екстраховани ултразвуком са 50 мЛ вреле воде током 40 минута; након хлађења, губитак тежине је допуњен водом. Сви узорци и растварачи су филтрирани кроз 0,45 μм мембрану пре анализе.

2.5. Хроматографски услови ХПЛЦ и одређивање четири ПхГ

Хроматографско раздвајање је обављено у УлтиМате 300{{40}} ХПЛЦ систему (Тхермо Фисхер Сциентифиц, САД), опремљеном пумпом са двоструким градијентом, одељком за колону , и ДАД детектор. Подаци су прикупљени и обрађени коришћењем ЦхромеЛеон система података за хроматографију. Узорци су раздвојени на Агилент Зорбак СБ-Ц18 (250мм×4,6 мм, 5 μм) са Ц18 заштитном колоном (4,6 мм×12,5 мм, 5 μм). Мобилна фаза се састојала од ацетонитрила (А) и 0.1 проценат раствора фосфорне киселине (Б) при брзини протока од 1 мЛ/мин. Градијент елуације је следећи: почетни 0–13 мин, линеарна промена од АБ (5:95, в/в) до АБ (15:85, в/в); 13–25 мин, линеарна промена у АБ (20:80, в/в); 25–43 мин, линеарна промена у АБ (25:75, в/в). Таласна дужина детектора је праћена на 330 нм. Температура колоне је подешена на 30 степени, а запремина убризганог узорка била је 10 μЛ [21]. Основни раствор који садржи четири референтна стандарда припремљен је растварањем референтних стандарда у 50% метанола до коначне концентрације од 0,20 мг/мЛ за 2-ацетилактеозид, 0,20 мг/мЛ за актеозид, 0,05 мг/мЛ за османтузид Б, и 0,10 мг/мЛ за изоактеозид. Раствор је затим разблажен у пет различитих концентрација са три понављања да би се успоставиле калибрационе криве. Садржај узорка је изражен у г/кг сирове тежине.

Проучавање кришки Цистанцхе десертицола и производа обрађеног паром вина из Цистанцхе десертицола

2.6. Одређивање укупних ПхГс

Укупни ПхГ су одређени методом УВ спектрофотометрије на таласној дужини од 330нм у УВ1000 спектрофотометру (Схангхаи Тианмеи Сциентифиц Инструмент Цо., Лтд.). Основни раствор је припремљен растварањем стандарда ехинакозида у 50% метанола до коначне концентрације од 0,10 мг/мЛ и затим разблажен у пет различитих концентрација са три понављања да би се успоставиле калибрационе криве.

2.7. Одређивање полисахарида

Одређивање полисахарида је спроведено методом фенол-сумпорна киселина. 1 мЛ раствора узорка стављен је у епрувету од 20 мЛ са стакленим чепом, па је додато 1 мЛ 6% раствора фенола и 5 мЛ концентроване сумпорне киселине и мућкано 5 мин. Смеша је пребачена у кључало водено купатило током 10 минута и охлађена на собну температуру ради ултраљубичасте детекције. Апсорпција ултраљубичастог зрачења је праћена на 480 нм у УВ1000 спектрофотометру. Референтни стандард анхидроване Д-глукозе је тачно измерен и растворен у дестилованој води до коначне концентрације од 0,10 мг/мЛ. Затим је раствор разблажен до пет различитих концентрација са три понављања да би се успоставиле калибрационе криве.

2.8. Експерименти на животињама

2.8.1. Животиње и смештај

Мужјаци СД пацова полне зрелости (180-200 г) су купљени са експерименталне животињске фарме Ксинглонг (Пекинг) (старост: 6 недеља) и дозвола за лабораторијске животиње је била СЦКСК (Јинг):2016-0003. Све процедуре на животињама су одобрене од стране Комитета за истраживање животиња Медицинског универзитета Унутрашње Монголије и спроведене у складу са смерницама Националног института за здравље у вези са принципима неге животиња (2004). Све животиње су држане у систему баријере са регулисаном температуром од 21–23 степена и релативном влажношћу од 40–65 процената и у циклусу тамно/светло од 12 сати. Пацовима је дата храна и вода ад либитум и аклиматизовани су на горенаведену средину недељу дана.

2.8.2. Дозирање и узорковање

Пацови су пребачени у појединачне метаболичке кавезе и насумично подељени у 6 група (= 10 у свакој групи). Добили су интрамускуларну ињекцију од 15 мг/кг хидрокортизон натријум сукцината (купљено од Тиањин Биоцхемицал Пхармацеутицал Цо., Лтд., Тиањин, Кина) током 2 недеље осим за групу 1 којој је убризгана једнака запремина физиолошког раствора. 14. дана прикупљени су телесна тежина, потрошња хране, унос воде, запремина урина и спонтана активност у року од 5 минута како би се утврдило да ли је модел недостатка бубрега-јанга успешно направљен. Од 15. дана третирано је 6 група на следећи начин: група 1 и група 2 (модел група, М) третиране су једнаком запремином дестиловане воде, група 3 (ПхГс екстракт РЦД).(Цистанцхе десертицола кришке)група, ПР) третирани су са 0.42 г/кг ПхГс екстракта РЦД, што је било једнако око 1,8 г/кг сировогЦистанцхе десертицолаа остале групе су биле исте, група 4 (ПхГс екстракт ВСЦД(Производ прерађен паром вина)група, ПВ) су третирани дозом од 0.49 г/кг ПхГ екстракта ВСЦД(Производ прерађен паром вина), група 5 (полисахаридни екстракт РЦД(Цистанцхе десертицола кришке)група, СР) су третирани са 0.18 г/кг полисахаридног екстракта РЦД, а група 6 је била (полисахаридни екстракт ВСЦД(Производ прерађен паром вина)група, СВ) третирани су дозом од 0.22 г/кг полисахаридног екстракта ВСЦД. Сви пацови су третирани гастричном перфузијом дневно. После месец дана третмана, пацовима је ускраћена храна 12 сати пре узимања крви. Следећег дана, сви пацови су анестезирани и жртвовани. Током тестирања, пацови су мерени једном недељно ради прилагођавања дозе и поново мерени пре жртвовања. Узорци крви су сакупљени у Епендорфову епрувету са 10% раствора ЕДТА-2На. Серум је одвојен центрифугирањем на 2000 рпм током 15 минута и чуван на -80 степени за даљу употребу. Поред тога, уклоњени су и брзо измерени бубрези, тестиси, епидидимис, простата и семена везикула. Након вагања, тестиси су замрзнути у течном азоту за одређивање СОД и МДА.

2.9. Анализа хормонских и антиоксидативних ефеката

Ниво тестостерона (Т) и естрадиола (Е2) одређиван је у Кингдао Кецхуанг центру за инспекцију квалитета радиоимунитетом и колориметријском методом. Замрзнути тестиси су измерени и помешани са 20 пута хладног физиолошког раствора (В/В). Хомогенат тестиса добијен хомогенатом ткива у леденом купатилу је центрифугиран да би се добио супернатант. Садржај СОД и МДА тестиса одређен је СОД и МДА комплетима према упутствима.

2.10. Статистичка анализа

Значајност разлика међу групама је упоређена путем једносмерног АНОВА теста праћеног Шефеовим тестом са границом значајности од 0.05 коришћењем софтвера СПСС 25.0. Сви подаци су изражени као средња вредност ± стандардна девијација (СД) (н=3).

3. Резултати

3.1. Анализа промена ПхГ након СПВ коришћењем ПЦА

Да би се упоредиле промене ПхГс после СПВ, 9 хроматографских пикова је одабрано као карактеристични пикови и идентификовани су. Њихове структуре су приказане на слици 1, чије су релативне површине врхова израчунате за квантитативни израз. ХПЛЦ хроматограм као што је приказано на слици 2, који указује да је релативни садржај главних ПхГ промењен током СПВ. ПЦА анализа на релативним површинама пикова 9 компоненти је добијена за дискриминацију различитих узорака. РЦД(Цистанцхе десертицола кришке)и ВСЦД(Производ прерађен паром вина)били су удаљени један од другог у дијаграму резултата (слика 3(а)), што је показало да су узорци класификовани у два кластера. Дакле, верује се да је садржај хемијских састојака био различит. Да би се даље пронашли потенцијални хемијски маркери за дискриминацију, извршена је проширена статистичка анализа да би се генерисала дијаграм оптерећења Би (Слика 3(б)). Врхови 2, 3, 4, 6 и 7 ће се смањити након СПВ-а, док ће се врхови 5, 8 и 9 повећати, и сви су они били најважније компоненте за разликовање РЦД-а(Цистанцхе десертицола кришке)и ВСЦД(Производ прерађен паром вина). Релативни садржај пика 1 није много варирао након СПВ.

Слика 1 Хемијске структуре ПхГс уЦистанцхе десертицолаИЦ Ма.

Слика 2 ХПЛЦ хроматограм стандардне супстанце (а), РЦД(Цистанцхе десертицола кришке)(б) и ВСЦД(Производ прерађен паром вина)(ц). Врхови: (1) цистанозид Ф, (2) ехинакозид, (3) цистанозид А, (4) актеозид, (5) изоактеозид, (6) цистанозид Ц, (7) 2′-ацетилактеозид, (8) османтузид Б и (9) тубулозид Б.

Слика 3 Графикон ПЦА резултата (а) и дијаграм Би оптерећења (б) РЦД-а(Цистанцхе десертицола кришке)(зелени круг) и ВСЦД (црвени круг). РЦД и ВСЦД су класификовани у два кластера. Врхови 2, 3, 4, 6 и 7 су најважније компоненте за разликовање РЦД и ВСЦД, које ће се смањити током СПВ; врхови 5, 8 и 9 су такође најважније компоненте за разлику између РЦД и ВСЦД(Производ прерађен паром вина), који ће се повећати током СПВ.

3.2. Садржај укупних полисахарида и ПхГ се променио након СПВ

Као што је приказано на слици 3(б), 8 компоненти (5, 8 и 9 су се повећале, а 2, 3, 4, 6 и 7 смањиле) значајно су се промениле и имале велики утицај на груписање узорака. Међу њима, изоактеозид и османтузид Б су се највише повећали, док су се 2′-ацетилактеозид и актеозид највише смањили. Дакле, садржај изоактеозида, османтузида Б, 2′-ацетилактеозида и актеозида одређен је ХПЛЦ. Као што је приказано на слици 1, пик 4 је био актеозид, пик 5 је био изоактеозид, пик 7 је био 2′-ацетилактеозид, а пик 8 је био османтузид Б. Укупни ПхГ у РЦД(Цистанцхе десертицола кришке)и ВСЦД(Производ прерађен паром вина)Одређени су УВ методом, а укупни полисахариди методом фенол-сумпорна киселина, резултати су приказани у табели 1, изоактеозид, османтузид Б, укупни полисахариди и ПхГ у ВСЦД су значајно повећани у поређењу са РЦД. 2′-ацетилактеозид и актеозид су се значајно смањили.

Табела 1 Садржај полисахарида и ПхГ у РЦД(Цистанцхе десертицола кришке)и ВСЦД(Производ прерађен паром вина)(мг/г) (н=3).

Белешка. Значајне разлике са РЦД(Цистанцхе десертицола кришке)означени су као *п < 0.05.

3.3. Направљен је модел недостатка бубрега-јанга изазваног хидрокортизоном

У поређењу са нормалном групом, након 2 недеље интрамускуларне ињекције 15 мг/кг хидрокортизон натријум сукцината, телесна тежина, потрошња хране и спонтана активност су значајно смањени (П<0.05) and="" the="" water="" intake="" and="" urine="" volume="" were="" increased;="" the="" results="" were="" shown="" in="" table="" 2.="" the="" t="" and="" e2="" levels="" in="" the="" serum="" of="" the="" model="" group="" were="" lower="" than="" the="" normal="" group="" as="" shown="" in="" figure="" 4.="" from="" the="" above,="" the="" kidney-yang="" deficiency="" model="" was="" successfully="">

Табела 2 Индикатори су се променили након интрамускуларне ињекције хидрокортизон натријум сукцината, (н=10).

Белешка. Значајне разлике са Н групом су означене као^# p<>

Слика 4 Нивои Т и Е2: (а) ниво Т и (б) ниво Е2. Значајне разлике са М групом су означене као^∗п < 0.05.="" значајне="" разлике="" са="" н="" групом="" су="" означене="">^#п < 0.05.

3.4. Утицај екстраката на просечну тежину и индекс унутрашњих органа

Сви пацови и њихови изнутрици су измерени, а затим је израчунат просечни индекс унутрашњих органа.

У поређењу са Н групом, М група је значајно смањила тежину унутрашњости бубрега, семенских везикула, епидидимиса и тестиса, што је такође указало да је модел дефицијенције бубрега изазваног хидрокортизоном успешно направљен. У поређењу са М групом, сва посматрана тежина унутрашњих органа је повећана у ПВ и СР групи, ПР група је имала повећану тежину тестиса, епидидимиса, семенских везикула и простате, а СВ група је имала повећану тежину бубрега, тестиса, епидидимиса, и семена везикула. У поређењу са ПР групама, ПВ група је била боља у бубрезима, семенским везикулама и простати. Није било значајне разлике између СР и СВ група у тежини тестиса, епидидимиса, семених везикула и простате. Резултати су приказани у табели 3.

Табела 3 Тежина унутрашњости (г) (н=10).

Белешка. Значајне разлике са М групом су означене као^∗п < 0.05.="" значајне="" разлике="" са="" н="" групом="" су="" означене="">^#п < 0.05.

У поређењу са Н групом, у М групи су смањени висцерални индекси бубрега, тестиса, епидидимиса и семена мехурића. У поређењу са М групом, ПВ и СР група имале су повећање индекса бубрега, тестиса, простате и семенских везикула, ПР групе су повећале индекс тестиса, простате и семене везикуле, а СВ група је имала повећан индекс бубрега, тестиса и семенских везикула. У поређењу са ПР групама, ПВ група је била боља у бубрезима, семенским везикулама и простати. Групе СВ и СР су имале сличан индекс бубрега, тестиса, семена везикула и епидидимиса. Резултати су приказани у табели 4.

Табела 4 Просечан индекс унутрашњих органа (г/100г) (н=10).

Белешка. Значајне разлике са М групом су означене као^∗п < 0.05.="" значајне="" разлике="" са="" н="" групом="" су="" означене="">^#п < 0.05.

3.5. Утицај екстракта на ниво хормона (Т и )

Као што је приказано на слици 4, у поређењу са М групом, нивои Т и Е2 у свим третираним групама (ПВ, ПР, СВ и СР група) су значајно порасли (П<0.05). however,="" the="" pw="" group="" was="" better="" than="" the="" pr="" group="" at="" levels="" t="" and="" e2.="" the="" sr="" and="" sw="" groups="" had="" no="" significant="">

3.6. Утицај екстраката на антиоксидативни ефекат

СОД је важан антиоксидативни ензим. МДА је производ пероксидације липида који је индикатор који одражава степен оштећења оксиданса. Садржај СОД и МДА одражава степен оксидативне и антиоксидативне способности. Као што је приказано на слици 5, у поређењу са М групом, антиоксидативни ефекат у свим третираним групама (ПВ, ПР, СВ и СР) је био појачан. СВ група је имала највећеантиоксидансефекат.

Слика 5. Садржај МДА и СОД: (а) садржај МДА и (б) садржај СОД. Значајне разлике са М групом су означене као^∗p< 0.05.="" significant="" differences="" with="" the="" n="" group="" were="" designated="" as=""><>

4. Дискусија

Пре клиничке примене, сирови материјали треба да буду подвргнути традиционалним кинеским процесним техникама. Кување на пари је један од традиционалних приступа преради неких кинеских лековитих биљака, који даје црну боју произведену Мејардовом реакцијом [22], повећавајући количине неких биоактивних компоненти [23] и фармаколошке активности. ВСЦД(Производ прерађен паром вина)као један од производних процеса је бољи у погледу исхране бубрега у поређењу са РЦД(Цистанцхе десертицола кришке)као што је документовано у издању кинеске фармакопеје из 2015. У овој студији, резултати ПЦА су показали да је СПВ променио хемијски профил РЦД(Цистанцхе десертицола кришке). Штавише, 8 компоненти у ПхГс се значајно променило. Укупни ПхГ, укупни полисахариди, изоактеозид и османтузид Б су се највише повећали, док су 2′-ацетилактеозид и актеозид смањени након СПВ. Резултати су показали да СПВ може да промени хемијске састојке РЦД(Цистанцхе десертицола кришке). Садржај ПхГ са 1,3,4-трисупституисаним глукопиранозилним деловима (као што су актеозид, 2′-ацетилактеозид и цистанозид Ц) смањен је у ВСЦД(Производ прерађен паром вина)Међутим, концентрације њихових изомера са 1,3,5-трисупституисаним глукопиранозилном остатком (као што су изоактеозид и тубулозид Б) су порасле, што је указивало да се трансформација хемијских састојака може десити током СПВ-а, а реакција хидролизе ће бити једна од разлога. Предложени путеви трансформације су приказани на слици 6. Повећање полисахарида након СПВ такође је забележено у гинсенгу [24].

Слика 6 Предложени путеви трансформације ПхГ у Цистанцхе десертицола ИЦ Ма током СПВ.

Цистанцхе десертицолаје документовано да окрепљује бубреге и преокреће смањење нивоа тестостерона и поседује антиоксидативни ефекат и антиинфламаторно дејство [25], а ПхГ и полисахариди су биле две главне биолошки активне компоненте у Цистанцхе десертицола. Као ПхГ, изоактеозид и османтузид Б су имали антиоксидативно и антиинфламаторно дејство [26, 27]. Дакле, поређење фармаколошких ефеката на ниво тестостерона и антиоксидативно дејство РЦД и ВСЦД(Производ прерађен паром вина)је проучаван. У моделу дефицијенције бубрега-јанга изазваног хидрокортизоном, ендокрини је био поремећен и ниво полних хормона у крви је значајно смањен. У овој студији, резултати анализе полних хормона показали су да су оба РЦД(Цистанцхе десертицола кришке)и ВСЦД могу значајно повећати ниво Т и Е2, а и ПхГ и полисахариди су показали побољшање полних хормона. ВСЦД је био бољи од РЦД(Цистанцхе десертицола кришке), посебно у групама екстракта ПхГс. Резултати индекса унутрашњих органа показали су да и ПхГ и полисахариди могу побољшати тежину унутрашњих органа и њихове индексе тежине. У групама екстраката ПхГс, ВСЦД(Производ прерађен паром вина)је бољи од РЦД у повећању тежине и индекса бубрега и семенских везикула. Додатно,Цистанцхе десертицолаима значајан антиоксидативни ефекат, посебно групе екстракта полисахарида са ВСЦД. Као што је горе поменуто, оба РЦД-а(Цистанцхе десертицола кришке)и ВСЦД би могао побољшати синдром недостатка бубрега-јанга; међутим, ВСЦД је бољи од РЦД у повећању нивоа Т, Е2, тежине и индекса епидидимиса и тестиса. Резултати проучавања фармаколошких ефеката показали су да је СПВ променио хемијске компоненте ПхГс и повећао садржај полисахарида, што је заузврат повећало ниво полних хормона и побољшалоантиоксидансефекат.

5. Закључак

Студија је била да открије промену ПхГ, укупних полисахарида и фармаколошког ефекта у РЦД(Цистанцхе десертицола кришке)и ВСЦД на пацовима са недостатком бубрега-јанга, посебно на нивоу хормона и антиоксидативном дејству. Ова студија је показала да процес традиционалних кинеских биљака може променити њихове хемијске састојке и утицати на њихову биоактивност. Такође се подржава да су сирови производи и прерађени производи различито прописивани у клиници.

Доступност података

Подаци који се користе као подршка налазима ове студије доступни су од одговарајућег аутора на захтев.

Сукоби интереса

Аутори изјављују да немају сукоб интереса.

Прилози аутора

Јинг Зханг и Сонг Ианг су осмислили експерименте. Иинг Зханг, Иуеву Ванг и Иунфенг Ксиао су водили прикупљање и припрему узорака. Јинг Зханг је анализирао податке и саставио рад. Ксиангри Ли и Ксиаокин Ванг су били одговорни за надзор студија. Сви аутори су учествовали у писању и давању повратних информација о раду. Сви аутори су прочитали и одобрили завршни рад.

Признања

Овај рад је подржан грантовима из Процедура обраде припремљених комада кинеске сирове дроге (бр. ИП-ПЗ-2014). Посебно хвала Вењиа Ку и Тианиинг Јиа на њиховој великој помоћи у прикупљањуЦистанцхе десертицола.

Референце

1. И. Јианг и П.-Ф. Ту, "Анализа хемијских састојака у врстама Цистанцхе", Јоурнал оф Цхроматограпхи А, вол. 1216, бр. 11, стр. 1970–1979, 2009.

Погледај на: Сајт издавача|Гоогле академик

2. В. Зхао, Х. Иан, З.-И. Лианг, И.-Ј. Зханг и Кс.-К. Јиао, "Структурна анализа полисахарида растворљивог у води СПА изолованог из стабљикеЦистанцхе десертицолаМа," Цхемицал Јоурнал оф Цхинесе Университиес, вол. 26, бр. 3, стр. 461–463, 2005.

Погледајте на: Гоогле академик

3. К. Донг, Ј. Иао, Ј.-Н. Фанг и К. Динг, „Структурна карактеризација и имунолошка активност два полисахарида која се екстрахују хладном водом изЦистанцхе десертицолаИЦ Ма,“ Истраживање угљених хидрата, вол. 342, бр. 10, стр. 1343–1349, 2007.

Погледај на: Сајт издавача|Гоогле академик

4. Кс.-М. Ву и П.-Ф. Ту, "Изолација и карактеризација -(1→6)-глукана изЦистанцхе десертицола," Јоурнал оф Асиан Натурал Продуцтс Ресеарцх, том 7, бр. 6, стр. 823–828, 2005.

Погледај на: Сајт издавача|Гоогле академик

5. Б. Кошикова, А. Ебрингерова и Р. Наран, „Карактеризација фракција лигнина и угљених хидрата изолованих из дрвног паразитаЦистанцхе десертицолаИЦ Ма.“, Холзфорсцхунг, вол. 53, бр. 1, стр. 33–38, 1999.

Погледајте на: Гоогле академик

6. Г. Схенг, Кс. Пу, Л. Леи, П. Ту и Ц. Ли, „Тубулозид Б из Цистанцхе салса спашава ПЦ12 неуронске ћелије од 1-метил-4- фенилпиридинијум-индукованих јона апоптоза и оксидативни стрес", Планта Медица, вол. 68, бр. 11, стр. 966–970, 2002.

Погледај на: Сајт издавача|Гоогле академик

7. М. Денг, Ј.-И. Зхао, Кс.-Д. Ју, П.-Ф. Ту, И. Јианг и З.-Б. Ли, "Заштитни ефекат тубулозида Б на ТНФ алфа-индуковану апоптозу у неуронским ћелијама", Ацта Пхармацологица Синица, вол. 25, бр. 10, стр. 1276–1284, 2004.

Погледајте на: Гоогле академик

8. Кс. Генг, Л. Сонг, Кс. Пу и П. Ту, „Неуропотективни ефекти фенилетаноидних гликозида из Цистанцхес салса против 1-метил-4-фенил-1,2,3 ,6-допаминергичка токсичност изазвана тетрахидропиридином (МПТП) код Ц57 мишева," Биологицал & Пхармацеутицал Буллетин, вол. 27, бр. 6, стр. 797–801, 2004.

Погледај на: Сајт издавача|Гоогле академик

9. Х. Цхен, ФЦ Јинг, ЦЛ Ли, ПФ Ту, КС Зхенг, и ЗХ Ванг, "Ецхинацосиде спречава смањење стријаталних екстрацелуларних нивоа моноаминских неуротрансмитера код 6- хидроксидопаминских лезија пацова," Јоурнал оф Етхнопхармацологи, вол. . 114, бр. 3, стр. 285–289, 2007.

Погледај на: Сајт издавача|Гоогле академик

10 Ј. Пан, Ц. Иуан, Ц. Лин, З. Јиа и Р. Зхенг, "Фармаколошке активности и механизми природних фенилпропаноидних гликозида", Дие Пхармазие, вол. 58, бр. 11, стр. 767–775, 2003.

Погледајте на: Гоогле академик

11. Г. Фу, Х. Панг и ИХ Вонг, "Фенилетаноидни гликозиди који се јављају у природи: потенцијални води за нове терапеутике", Цуррент Медицинал Цхемистри, вол. 15, бр. 25, стр. 2592–2613, 2008.

Погледај на: Сајт издавача|Гоогле академик

12. Кс.-В. Ванг, Кс.-Ф. Ванг и Л.-И. Ву, „Побољшање сећања мишева на фенилетаноидне гликозидеЦистанцхе десертицола," Кинески фармаколошки билтен, бр. 19, стр. 41-42, 2002.

Погледајте на: Гоогле академик

13. Ј.-Кс. Ксие и Ц.-Ф. Ву, „Ефекат етанолног екстрактаЦистанцхе десертицолао садржају моноаминских неуротрансмитера у мозгу пацова“, Кинески традиционални и биљни лекови, бр. 24, стр. 417–419, 1993.

Погледајте на: Гоогле академик

14. Х. Ву и Ц.-Ј. Ху, Кинеска медицинска процесна дисциплина, Народна медицинска издавачка кућа, Пекинг, Кина, 2012.

15. ЗЗ Зхао, ЗТ Лианг, К. Цхан ет ал., "Јединствено питање у стандардизацији кинеске материа медица: обрада", Планта Медица, вол. 76, бр. 17, стр. 1975–1986, 2010.

Погледај на: Сајт издавача|Гоогле академик

16. Кинеска фармакопејска комисија, Фармакопеја Народне Републике Кине 2015, вол. ИВ, Фармакопеја Народне Републике Кине, Пекинг, Кина, 2015.

17. Ј.-М. Чен, Просветитељски почетни језик Материа Медицал, Традиционална кинеска медицина Анциент Боокс Пресс, Пекинг, Кина, 2009.

18. Б.-Р. Ли и И.-Ц. Она, "Ефекти тонизирајућих лекова за бубреге на осовину хипоталамус-хипофиза-гонада (ХПГ)," Јоурнал оф Традитионал Цхинесе Медицине, бр. 7, стр. 63–65, 1984.

Погледајте на: Гоогле академик

19. М. Цхен, Л. Зхао и В. Јиа, "Метабономска студија о биохемијским профилима животињског модела изазваног хидрокортизоном", Јоурнал оф Протеоме Ресеарцх, вол. 4, бр. 6, стр. 2391–2396, 2005.

Погледај на: Сајт издавача|Гоогле академик

20. К. Цхен и Н.-И. Ии, "Тхе анимал моделс анд другс фор Иин-дефициенци анд Ианг-дефициенци," у Експерименталној методологији фармаколошких истраживања у традиционалној кинеској медицини, Пеопле'с Хеалтх Публисхинг Хоусе, Пекинг, Кина, 1993.

Погледајте на: Гоогле академик

21. З.-Г. Ма, З.-Л. Ианг, П. Ли и Ц.-Х. Ли, "Истовремено одређивање осам фенилетаноидних гликозида у различитим врстама рода Цистанцхе течном хроматографијом високих перформанси", Јоурнал оф Ликуид Цхроматограпхи & Релатед Тецхнологиес, ​​вол. 31, бр. 18, стр. 2838–2850, 2008.

Погледај на: Сајт издавача|Гоогле академик

22. З. Лиу, З. Цхао, И. Лиу, З. Сонг и А. Лу, "Маиллардова реакција укључена у процес парења корена Полигонум мултифлорум", Планта Медица, вол. 75, бр. 1, стр. 84–88, 2009.

Погледај на: Сајт издавача|Гоогле академик

23. В.-Т. Цханг, ИХ Цхои, Р. Ван Дер Хеијден, ет ал., "Традиционална обрада снажно утиче на састав метаболита хидролизом у коренима Рехманниа глутиноса", Цхемицал & Пхармацеутицал Буллетин, вол. 59, бр. 5, стр. 546–552, 2011.

Погледај на: Сајт издавача|Гоогле академик

24. И. Јин, И.-Ј. Ким, Ј.-Н. Јеон ет ал., "Утицај белог, црвеног и црног гинсенга на физичкохемијска својства и гинсенозиде", Биљна храна за исхрану људи, вол. 70, бр. 2, стр. 141–145, 2015.

Погледај на: Сајт издавача|Гоогле академик

25. Т. Ванг, Кс.-И. Зханг и В.-И. Ксие, "Цистанцхе десертицолаИЦ Ма, 'пустињски гинсенг': Преглед," Амерички часопис кинеске медицине, вол. 40, бр. 6, стр. 1123–1141, 2012.

Погледај на: Сајт издавача|Гоогле академик

26. С.-И. Нам, Х.-И. Ким, М.-С. Иооу ет ал., "Анти-инфламаторни ефекти изоактеозида из Абелиопхиллум дистицхум," Иммунопхармацологи анд Иммунотокицологи, вол. 37, бр. 3, стр. 258–264, 2015.

Погледај на: Сајт издавача|Гоогле академик

27. С. Цхае, ЈС Ким, КА Канг, ет ал., "Антиоксидативна активност изоактеозида из Цлеродендрон трицхотомум," Јоурнал оф Токицологи анд Енвиронментал Хеалтх, Парт А. Цуррент Иссуес, вол. 68, бр. 5, стр. 389–400, 2005.

Погледај на: Сајт издавача|Гоогле академик

Из: Комплементарна и алтернативна медицина заснована на доказима / 2019 / Чланак

Обим 2019 |ИД чланка 2167947|хттпс://дои.орг/10.1155/2019/2167947