Укупни гликозиди Цистанцхе Десертицола подстичу опоравак неуролошких функција индукујући неуроваскуларну регенерацију путем Нрф- 2/Кеап-1 пута код МЦАО/Р пацова

Позадина:

Традиционална кинеска медицина Цистанцхе десертицола је објављена као валидна за кардиоваскуларне и цереброваскуларне болести. Међутим, његове активне компоненте за заштиту од исхемијског можданог удара нису јасне. Циљ нам је био да истражимо активне компоненте Ц. десертицола против исхемијског можданог удара, као и његове потенцијалне механизме.

Методе:

Истраживали смо заштитне ефекте екстраката из Ц. десертицола, укупних гликозида (ТГ), полисахарида (ПС) и олигосахарида (ОС) на моделу оклузије-реперфузије средње церебралне артерије (МЦАО/Р) код пацова. 2, 3, 5-Бојење трифенилтетразолијум хлоридом (ТТЦ) је коришћено за процену запремине церебралног инфаркта, а Евансов плави тест је усвојен за процену пропустљивости крвно-мождане баријере (БББ). Затим, изрази ЦД31, а-СМА, ПДГФРб, СИН, ПСД95, МАП-2, ЗО-1, цлаудин-5, оклудин, Кеап-1 и Нрф{{ 13}} су анализирани применом Вестерн блот-а или имунофлуоресценције, а активности МДА, СОД, ЦАТ и ГСХ-Пк су анализиране коришћењем комплета.

Резултати:

Третман ТГ је значајно смањио резултате неуролошког дефицита и запремине инфаркта, промовисао ангиогенезу и неурално ремоделирање и ефикасно одржавао интегритет крвно-мождане баријере у поређењу са моделном групом. Штавише, ТГ су значајно смањиле нивое МДА и повећале антиоксидативне активности (СОД, ЦАТ и ГСХ-Пк) у мозгу. У међувремену, ТГ-ови су значајно смањили Кеап-1 експресију и олакшали Нрф-2 нуклеарну транслокацију. Напротив, нису примећени заштитни ефекти за групе ПС и ОС.

Закључак:

ТГ су главне активне компоненте Ц. десертицола против МЦАО/индуковане церебралне повреде, а заштита је углавном путем Нрф-2/Кеап-1 пута.

КликнитеПриродни производ са екстрактом Цистанцхе Десертицола

УВОД

Мождани удари се сматрају главним узроком смрти и инвалидитета у свету (Доннан ет ал., 2008). Скоро 87 процената свих случајева можданог удара је изазвано исхемијским можданим ударом (Овбиагеле и Нгуиен-Хуинх, 2011). Тренутно, најефикаснији агенс и једини лек који је одобрила ФДА и који се користи за лечење исхемијског можданог удара је рекомбинантни ткивни активатор плазминогена. Међутим, велики број пацијената са можданим ударом не реагује на овај лек, због његовог уског терапијског временског оквира и озбиљног ризика од хеморагијских компликација (Лее ет ал., 2012; Сцхеллингер и Кохрманн, 2014). Главни изазов тромболитичког лечења је повреда исхемије/реперфузије (И/Р), која се сматра главним узроком повреде мозга и деструкције функције. Реперфузија након церебралне исхемије повећава ризик од крварења у мозгу док доводи до неуроваскуларних повреда и производње прекомерних реактивних врста кисеоника (РОС) које оштећују крвно-мождану баријеру (Аллури ет ал., 2015). Неколико студија је потврдило да је поремећај БББ главни узрок патогенезе исхемијског можданог удара (Цао ет ал., 2016б).

БББ се углавном састоји од ендотелних ћелија, перицита, астроцита, неурона и базалних мембрана. Основне компоненте БББ-а су церебралне микроваскуларне ендотелне ћелије које су спојене чврстим спојевима, ограничавајући тако егзогене молекуле у мозак. Патолошке промене тесних спојева—посебно оклудин, клаудин-5 и зонула оклудентс-1 (ЗО-1)—значајно утичу на функцију БББ током исхемијског можданог удара, посебно на пропустљивост баријере (Лиу ет. сар., 2014; Ху и сар., 2018; Лиу и сар., 2019). Током И/Р периода, прекомерни РОС је један од главних фактора који доводе до директног оштећења неурона мозга (Динг ет ал., 2014). Прекомерна производња РОС-а доводи до деградације одређених спојева и поремећаја БББ-а, што доводи до тога да егзогени молекули улазе у мозак кроз БББ, што доводи до погоршања оштећења мозга (Цхеон ет ал., 2016; Зханг КИ ет ал., 2017). Стога се заштита БББ антиоксидансима сматра потенцијалним начином за спречавање реперфузионих повреда.

Поред разградње БББ, И/Р може довести до неуроваскуларне повреде и неуронске смрти (Јунг ет ал., 2010). Током можданог удара, повећана смрт неуронских ћелија може бити резултат оксидативног стреса (Цхи ет ал., 2018), а бројне студије су показале да РОС погоршава тежину можданог удара и неуролошка оштећења (Кондо ет ал., 1997; Црацк ет ал., 2001; Црацк ет ал., 2006). Иако клиничка испитивања нису дала задовољавајуће резултате, неуропротекција је и даље обећавајућа стратегија за лечење акутног исхемијског можданог удара (Моретти ет ал., 2015). Стога је проналажење ефикасних неуропротективних лекова за лечење можданог удара корист за пацијенте са можданим ударом.

Традиционална кинеска медицина (ТЦМ) предузима мере да интервенише против унутрашње неравнотеже тела (Гаире, 2018). Због сложене патогенезе исхемијског можданог удара, мултифакторски ефекат ТЦМ и његових активних састојака игра кључну улогу у лечењу можданог удара. Цистанцхе десертицола ИЦ Ма, распрострањена у сушним или полусушним подручјима широм Монголије и северозападне Кине, била је широко коришћена ТЦМ биљка за лечење различитих болести као што су заборавност и депресија више од 1,000 године у Кини . Савремене фармаколошке студије су показале да су сирови екстракти из Ц. десертицола показали вишеструке фармаколошке активности, као што су побољшање функције учења и памћења, неуропротекција, јачање имунитета, антиоксиданси, ефекти против старења и умора (Ко и Леунг, 2007; Ванг ет ал. , 2012; Ли и сар., 2015). Хемијска анализа Ц. десертицола је показала да њени главни састојци укључују фенилетаноидне гликозиде, иридоидне гликозиде, полисахариде и олигосахариде (Јианг и Ту, 2009). Међутим, активне компоненте Ц. десертицола за заштиту мозга нису сасвим јасне.

Неуропротективно својство Ц. десертицола имплицира њен терапеутски потенцијал код когнитивних болести као што су мождани удар и депресија, као и Алцхајмерова болест (Ванг ет ал., 2017). Међутим, истраживања о утицају Ц. десертицола на мождани удар, укључујући његове активне компоненте и механизме деловања, веома су ограничена.

У овом раду истражили смо заштитни ефекат три екстракта из Ц. десертицола, укупних гликозида (ТГ, фенилетаноидних гликозида и других гликозида), полисахарида (ПС) и олигосахарида (ОС) на церебралне И/Р повреде. Наши налази могу допринети тачној клиничкој примени Ц. десертицола и обезбедити средство кандидата за терапију исхемијског можданог удара.

МАТЕРИЈАЛИ И МЕТОДЕ

Хемикалије и реагенси

Стабљике Цистанцхе десертицола су купљене из Алашана, Унутрашња Монголија, а идентификовао их је један од аутора (П.-Ф. Ту). ТГ, ПС и ОС су припремљени према нашој претходно објављеној методи (Гао ет ал., 2015). Квантитативна анализа ТГ је извршена течном хроматографијом високих перформанси (ХПЛЦ) како је претходно описано (Ли ет ал, 2019), а њен хроматограм је приказан на слици 1. Главне компоненте ТГ су ехинакозид, тубулозид А, актеозид, изоактеозид, и 2'-ацетилактеозид; њихов садржај је 163,05 мг/г, 4,125 мг/г, 41,66 мг/г, 22,655 мг/г, односно 12,045 мг/г. Садржај ПС и ОС је 69,42 одсто и 65,24 одсто, респективно, како је утврђено ХПЛЦ и анализом фенол-сумпорна киселина (Зханг А. ет ал., 2018; Схи ет ал, 2019).

Стандардне референце ехинакозида (А0282), тубулозида А (А0942), актеозида (А0280), изоактеозида (А0281) и 2'-ацетилактеозида (А0943) купљене су од Цхенгду Муст Биотецхнологи (Сицхуан, Кина). Чистоћа свих стандарда је више од 98 процената. Ниссл Стаин Х&Е комплети су купљени од Бостера (Вухан, Кина). Едаравоне (Т0407-1) ​​је купљен од Таргет Мола (Шангај, Кина). Купљени су зечји антипацовски МАП-2 (аб32454), Нрф-2 (аб31163), ПДГФРб (аб32570), Кеап-1 (аб66620) и миш ЦД31 против пацова (аб24590) од Абцам Инц (Кембриџ, МА, САД). Зечји антипацов Цлаудин5 (БС1069), ЗО-1 (БС9802М) и Оццлудин (БС72035) купљени су од Биоворлд Тецхнологи (Нањинг, Кина). Целл Сигналинг Тецхнологи Инц. (Бостон, МА, САД) је био извор зечјег синапсина против пацова-1 (СИН,5297Т), ПСД95 (3450Т), а-Смоотх Мусцле Ацтина (а-СМА,19245Т). ГАПДХ (ХРП-60004) је купљен од Протеинтецх Гроуп, Инц. (Чикаго, САД).

Секундарна антитела је испоручила Зхонгсхан Голден Бридге Биотецхнологи (Пекинг, Кина). Хоецхст 33258 је добијен од Беиотиме (Јиангсу, Кина).

Животиње

Спрагуе-Давлеи пацови (мужјаци, тежине 250–300 г) су добијени од Витал Ривер Лаборатори Анимал Тецхнологи (Пекинг, Кина) и смештени у климатизованој просторији која је држана у циклусу светлости/мрака од 12 сати. Сви експерименти на животињама изведени су у складу са смерницама АРРИВЕ за истраживање на животињама (Килкенни ет ал., 2010; МцГратх ет ал., 2010), а одобрени су од стране Институционалног комитета за негу и употребу животиња Универзитета у Пекингу (ЛА2019123).

Експериментални протоколи на животињама

Пацови су подвргнути МЦАО/Р, као што је претходно описано (Ванг ет ал., 2018). Укратко, лева заједничка каротидна артерија (ЦЦА), спољашња каротидна артерија (ЕЦА) и унутрашња каротидна артерија (ИЦА) су откривене, а 3-0 најлонски монофиламентни шав је уметнут из ЕЦА у ИЦА до средине церебрална артерија (МЦА). После 1,5 х МЦА оклузије, реперфузија је симулирана уклањањем филамента. Током хируршке процедуре, телесна температура свих пацова је одржавана на 37,0 степени.

Примене лека

Пацови су насумично подељени у шест група коришћењем СПСС софтвера верзије 22.0 како је описано (Јианг ет ал., 2014): нормална група (НОР); група модела (МОД); група едаравона (позитиван лек, 6 мЛ/кг, ЕДИ); ТГс група (280 мг/кг, ТГс); Група ПС (280 мг/кг, ПС) и група ОС (280 мг/кг, ОС). ТГ, ПС и ОС су давани једном дневно након МЦАО/Р током 14 дана. Групе НОР и МОД су третиране нормалним физиолошким раствором. Број животиња приказан је у табели 1.

Мерење тежине и модификованих резултата неуролошког дефицита (НСС)

Телесна тежина је праћена 14. дана коришћењем АДВЕНТУРЕ™ дигиталне ваге (ОХАУС, Њу Џерси, САД). Маса је процењена према методи коју је описао ФЈ Ванг (Ванг ет ал., 2018), уз мање измене.

2, 3, 5-Бојење трифенилтетразолијум хлоридом (ТТЦ)

Волумен инфаркта је измерен као што је претходно описано (Ванг ет ал., 2015). Укратко, мозгови су подељени на седам короналних блокова на једнаким размацима (2 мм). Ови делови су обојени са 2 процента ТТЦ (Цоолабер, Пекинг, Кина) на 37 степени током 15 минута. Волумен инфаркта ( проценат )=(запремина ипсилатералне исхемијске хемисфере − запремина контралатералне исхемијске хемисфере)/запремина контралатералне исхемијске хемисфере × 100.

Ниссл и Х&Е бојење

Пацови су дубоко анестезирани, а цео мозак је затим брзо уклоњен из лобање и фиксиран коришћењем 4 процента параформалдехида и уграђен у парафински восак, и исечен на кришке дебљине 7 µм. Секције су обојене Нисслом и Х&Е. У овој студији, шест насумичних 200 × 200 µм поља је ухваћено у сваком узорку ткива светлосним микроскопом. Број Нисслових тела је пребројан помоћу ИПП софтвера верзије 6.0 (Медиа Цибернетицс, Бетхесда, САД).

Еванс Блуе Тест

Пацовима је убризган 2% ЕБ (Цоолабер Сциенце & Тецхнологи Цо., ЛТД) након МЦАО/Р. Два сата касније, пацови су анестезирани и цео мозак је затим брзо уклоњен и хомогенизован у ацетону. Супернатанти су анализирани на 620 нм помоћу читача апсорбанције 800 ТС (БиоТек, САД).

Мерење активности каталазе (ЦАТ), супероксид дисмутазе (СОД), малондиалдехида (МДА) и глутатион пероксидазе (ГСХ-Пк)

Сви узорци серума су центрифугирани на 4,000 × рпм током 15 минута на 4 степена, а затим анализирани да би се откриле активности МДА, ЦАТ, СОД и ГСХ-Пк према упутствима произвођача (Јиангсу Меимиан Индустриал Цо., Лтд, Кина).

Вестерн блоттинг анализа

Ткива мозга (100 мг) сакупљена од сваког пацова су хомогенизована и лизирана у РИПА пуферу за лизу, а затим анализирана да би се детектовала концентрација протеина коришћењем БЦА комплета (Беијинг ТрансГен Биотецх Цо., Лтд.). Укупни протеини ткива су напуњени на 10 процената СДС-ПАГЕ гелова и пребачени на нитроцелулозну мембрану. Мембрана је блокирана коришћењем 5% обраног млека, а затим инкубирана преко ноћи са примарним антителима на 4 степена. Мембрана је затим инкубирана са секундарним антителом. Вестерн блот анализа је анализирана коришћењем Кодак Дигитал Имагинг Систем (5200 Мулти, Танон, Кина).

Имунофлуоресцентна анализа

Урађено је имунофлуоресцентно бојење за ЦД31, а-СМА, ЗО-1, цлаудин5, оклудин, ПДГФРб, СИН, ПСД95, МАП-2, Нрф-2 и Кеап-1. Примарна антитела против Нрф-2, ЦД31, а-СМА, ЗО-1, цлаудин5, оклудина, ПДГФРб, СИН, ПСД95, МАП-2 и Кеап{15}} су разређена до 1 :200 и 1:100, респективно. Секундарна антитела Алека Флур 488 мишјег анти-зечјег ИгГ и родаминског (ТРИТЦ) козјег анти-зечјег ИгГ-а су разблажена до 1:200. Језгра су обојена Хоецхст 33258. Слике су снимљене коришћењем Вецтра® Поларис™ аутоматизованог система квантитативне патологије (ПеркинЕлмер, САД). Експресија протеина је анализирана коришћењем ИПП софтвера верзије 6.0.

Статистичка анализа

Сви подаци су описани као средња вредност ± СД. СПСС софтвер верзија 22.0 је урађен за статистичку анализу. Једносмерна АНОВА је коришћена приликом поређења различитих група. П < 0.05 се сматрало статистичком разликом.

РЕЗУЛТАТИ

ТГ повећавају телесну тежину и смањују оштећења мозга код МЦАО/Р пацова

После 14 дана лечења са ТГ, ПС, Осс и ЕДИ, процењене су телесне тежине, неуролошки дефицити и запремине инфаркта И/Р пацова. Резултати су показали да је телесна тежина у МОД групи значајно смањена, док је смањена тежина у групама ТГ, ПС и ЕДИ повећана (Слика 2А). Резултати неуролошког дефицита су значајно смањени ЕДИ и ТГ (Слика 2Б). Резови мозга код пацова групе НОР су били тамноцрвени и није било инфаркта, док су пацови групе МОД показали велики ипсилатерални церебрални инфаркт. Након третмана ТГ, запремине инфаркта су значајно смањене (Слике 2Ц, Д). Третман ПС и ОС није показао очигледан ефекат на горе наведене индексе. Горе наведени подаци су показали да ТГ могу значајно да ублаже церебралну повреду изазвану И/Р, али ПС и ОС не могу.

ТГ побољшавају хистопатолошка оштећења код МЦАО/Р пацова

Да би се утврдили неки од ефеката третмана ТГ, ПС и ОС на хистопатолошка оштећења, Х&Е бојење је урађено да би се открила патолошка оштећења. Хистоморфолошке структуре мозга у НОР групи су редовно распоређене. Морфолошке промене у ТГ групама биле су мање од оних у МОД групи. Међутим, групе за лечење ПС и ОС нису показале значајно побољшање морфолошких промена (Слика 3).

ТГ ублажавају повреде неурона након И/РИ индукованих пацова

Ниссл бојење је показало хистопатолошке промене неурона у пенумбри исхемијског подручја. Као што је приказано на слици 4, нормални неурони су имали јасну нуклеолу и нетакнуту структуру. У групи са МОД, неурони су имали увећане међућелијске просторе. Лепа тела су нестала, смежурана и дубоко умрљана. Међутим, ове промене су ретко примећене у групама ЕДИ, ТГ и ПС. Ови резултати су илустровали да ТГ и ПС могу значајно умањити оштећење неурона изазвано исхемијом/реперфузијом.

ТГ ублажавају поремећај БББ после пацова третираних И/РТ

Евансов плави тест је класична метода за истраживање промене пермеабилности БББ. Резултати експеримента су показали да је повећана Еванс плава уочена у МОД групи, док је значајно смањена Еванс плава код пацова третираних ТГс и ЕДИ. Штавише, није било значајне разлике између група на терапији ПС и ОС (Слика 5). Ови резултати сугеришу да би ТГ могли значајно умањити поремећај БББ.

ТГ подстичу ангиогенезу код И/Р повређених пацова

Новије студије показују да ангиогенеза игра кључну улогу у неуролошком функционалном опоравку и прогностичким исходима након акутног исхемијског можданог удара (Иуен ет ал., 2015). Да би се проценили ефекти ТГ, ПС и ОС на ангиогенезу, ЦД31 и а-СМА су коришћени за квантификацију капиларних бројева. Имунофлуоресцентно бојење је показало да је МОД група изазвала значајно смањење експресије ЦД31 (Слике 6А, Б) и аСМА (Слике 6Ц, Д) у пенумбри исхемијских подручја И/Р пацова, у поређењу са нормалним пацовима. Овај резултат је илустровао да И/Р може изазвати васкуларно оштећење у полусјени кортекса исхемијских хемисфера. Међутим, третман ТГс и ЕДИ значајно је повећао густину капилара, ангиогенезу и артериогенезу на шта указује повећана експресија ЦД31 и а-СМА. Ови резултати сугеришу да би ТГ могли да промовишу ангиогенезу у исхемијској пенумбри И/Р пацова, али ПС и ОС нису могли.

ТГ повећавају експресију протеина тесног споја код И/Р повређених пацова

Поремећај БББ може повећати садржај воде у мозгу и отицање ткива, што доводи до повреде мозга. Протеини чврстог споја су важне структурне компоненте БББ (Тенреиро ет ал., 2016; Јианг ет ал., 2018). Да би се тестирало да ли третман ТГ, ПС и ОС после можданог удара може да утиче на интегритет БББ, имунофлуоресцентном анализом су извршене експресије ЗО-1, клаудина-5 и оклудина. Резултати су показали да су изрази клаудин-5, оклудин и ЗО-1 били видно смањени у МОД групи. Међутим, они су значајно повећани након 14 дана његове администрације. Групе ПС и ОС нису показале значајне промене у експресији ових протеина (Слика 7). Ови подаци су показали да ТГ могу регулисати експресију протеина тесног споја и одржати интегритет БББ након И/Р повреде.

ТГ повећавају покривеност перицитом на капиларама код И/Р повређених пацова

Покривеност капиларима перицитима игра кључну улогу у одржавању интегритета БББ (Армулик ет ал., 2010; Данеман ет ал., 2010). Стога смо тестирали да ли се покривеност перицитима може повећати третманом ТГ, ПС и ОС. Резултати анализе интензитета имунофлуоресценције показали су да су експресије и ПДГФРб и ЦД31 драматично смањене у групи са МОД. Примена ТГ код И/Р пацова значајно је опоравила или чак повећала интензитет експресије ПДГФРб и ЦД31, али није примећена разлика у групама које су третирале ПС и ОС (Слика 8). Према томе, третман ТГ може значајно повећати покривеност перицитима. Ови налази су даље потврдили да ТГ могу одржати интегритет БББ након И/Р.

ТГ промовишу неуронско ремоделирање код И/Р повређених пацова

Према бројним студијама, неурогенеза након можданог удара може значајно побољшати функционални опоравак (Грефкес и Вард, 2014; Зханг ет ал., 2019). Синаптофизин (СИН), протеини постсинаптичке густине 95 (ПСД-95) и протеин 2 повезан са микротубулама (МАП-2) коришћени су као маркери за испитивање неуронске пластичности у исхемијској пенумбри кортекса. Да би се проценили ефекти третмана ТГ, ПС и ОС на неурогенезу код И/Р повређених пацова, извршена је имунофлуоресценција и вестерн блот за СИН, ПСД95 и МАП-2 експресије. Као што је приказано на сликама 9 и 10, нивои експресије СИН, ПСД95 и МАП-2 код И/Р пацова након 14 дана реперфузије су се смањили у поређењу са НОР пацовима, док би излечење ТГ и ПС могло значајно да повећа- регулишу нивое њихове експресије. Група ОС није имала значајне промене у поређењу са групом МОД. Подаци су показали да је лек за ТГ и ПС био у стању да драматично промовише неурално ремоделирање након И/Р повреде.

ТГс Алтер Нрф-2 и Кеап{1}} експресије код И/Р повређених пацова

Оксидативни стрес је главни патогени механизам у И/Р повреди (Иа ет ал., 2018; Иу ет ал., 2018). Студије су потврдиле да је Нрф-2 главни регулатор антиоксидативних одговора (Тхомпсон ет ал., 2015). Да бисмо истражили оксидативне одговоре посредоване Нрф-2 и Кеап-1 након И/Р повреде, проценили смо цитоплазматску експресију као и нуклеарну транслокацију Кеап-1. У међувремену, експресија Нрф-2 у можданим ткивима пацова повређених И/Р је такође анализирана (Слике 10 и 11). Према имунофлуоресцентној анализи, утврђено је да се Нрф-2 углавном налази у цитоплазми у НОР групи. У групи ТГс, експресија Нрф-2 у цитоплазматској локализацији је смањена, али повећана у језгру, а такође је примећена смањена Кеап{12}} експресија. Подаци су показали да заштита мозга ТГ може бити повезана са модулацијом Нрф-2 и Кеап-1.

ТГ смањују оксидативни стрес можданог ткива код И/Р повређених пацова

Да би се потврдили антиоксидативни ефекти ТГ, активности СОД, ЦАТ, ГСХ-Пк и МДА су процењене код И/Р повређених пацова. На слици 12, садржај МДА је значајно повећан у МОД групи, а истовремено је смањена активност СОД, ЦАТ и ГСХ-Пк у поређењу са нормалним пацовима. Супротно томе, третман ТГ је довео до значајног смањења садржаја МДА и повећања активности СОД, ЦАТ и ГСХ-Пк. Ови резултати су додатно потврдили антиоксидациону активност ТГ.

ДИСКУСИЈА

Многа истраживања сугеришу да ТЦМ Ц. десертицола има екстензивне биолошке активности, нпр. побољшава способност учења, памћења и имунитета (Донг ет ал., 2007; Јианг и Ту, 2009; Ванг ет ал., 2017; Ксиа ет ал., 2018). Међутим, активне компоненте Ц. десертицола за неуропротекцију остају нејасне. Садашњи рад има за циљ да испита активне компоненте из Ц. десертицола против исхемијског можданог удара на МЦАО/Р моделу. Три екстракта из Ц. десертицола (ТГ, ПС и ОС) су коришћена да би се проценио њихов ефекат на МЦАО/Р пацове, као и могући механизми. Мождани удар је уобичајена акутна цереброваскуларна болест. Епидемиолошке студије показују да је мождани удар чешћи код мушкараца него код жена (Сеали-Јефферсон ет ал., 2012; Гузик и Бусхнелл, 2017).

Тако су у нашем експерименту за тестове усвојени мужјаци пацова. Наши резултати су доказали да индукција И/Р убрзава оксидативни стрес и запремину инфаркта, разбијајући БББ и доводи до нервних и цереброваскуларних повреда. Након скрининга, утврђено је да ТГ смањују запремину инфаркта и промовишу неуронско ремоделирање и ангиогенезу. Штавише, примећено је да ТГ одржавају интегритет БББ након И/Р повреде. Напротив, ПС и ОС не ублажавају значајно И/Р повреду. Према томе, ТГ се сматрају главном активном фракцијом Ц. десертицола за неуропротекцију, потенцијално кроз промовисање неуралног ремоделирања, ангиогенезе и интегритета БББ путем активације Нрф2/Кеап-1 пута.

Све више доказа указује на то да је успостављање ефикасне колатералне циркулације значајно важно за избегавање формирања инфаркта и исхемијске пенумбре, и да је критичан третман у раној фази исхемијског можданог удара (ЕлАли, 2016; Ивасава ет ал., 2016). Пролиферација васкуларних ендотелних ћелија и ћелија глатких мишића након исхемијског инфаркта одређује успостављање колатералне циркулације.

Међутим, модели исхемије имају заједнички феномен - то јест, оксидативни стрес је широко постојао у микроваскулатури мозга. Подаци студије су показали да велики број антиоксиданата може пореметити функцију БББ и својства ангиогенезе (Ментор и Фисхер, 2017). ЦД31 и а-СМА су маркери васкуларних ендотелних ћелија, као и ћелија глатких мишића (Сабоор ет ал., 2016). Да бисмо истражили ефекат горе поменуте ћелијске пролиферације екстраката из Ц. десертицола, испитали смо експресију ЦД31 и а-СМА у хомогенату церебралне исхемијске пенумбре. Наши подаци су показали да су ТГ упечатљиво побољшали експресију ЦД31 и а-СМА. Међутим, није било значајних разлика између ПС и ОС група. Стога смо закључили да ТГ могу смањити оштећење мозга промовисањем ангиогенезе повећањем експресије ЦД31 и а-СМА, док ПС и ОС нису пружили такву заштиту од оштећења мозга. Ови резултати су даље потврдили да само ТГ могу спречити церебралну И/Р повреду.

Исхемијски мождани удар може се сматрати резултатом церебралне исхемије узроковане оштећењем пластичности неурона или ремоделирањем подручја мозга. Већина пацијената са можданим ударом пати од неуролошких дефицита. Активирање неурогенезе је обећавајућа стратегија за пацијенте са можданим ударом да побољшају своје неуролошке функције (Црамер и Цхопп, 2000). Неурогенеза директно учествује у опоравку неуролошких функција након И/Р повреде мозга (Зханг ет ал., 2019). Претходна истраживања показују да ТГ могу побољшати стопу преживљавања хипокампалних пирамидалних ћелија и индуковати неурогенезу (Лиан ет ал., 2017). Оксидативни стрес узрокује губитак неурона током многих болести, као што су Паркинсон, мождани удар и тако даље (Дуан и Си, 2019; Сингх ет ал., 2019). Нрф-2 транскрибује много гена који се односе на неуро-заштиту у њиховом промоторском региону, углавном укључујући СОД, МДА, ЦАТ и глутамил цистеин лигазе, итд (Сатох ет ал., 2006). СИН, ПСД-95 и МАП-2 протеини, који су блиско повезани са синаптичким формирањем и неуротрансмисијом, могу се сматрати маркерима истраживачке неуронске пластичности у исхемијском региону пенумбре. Након проучавања, открили смо да лек са ТГ може значајно да повећа експресију ПСД95, СИН и МАП-2, што указује да је церебрална заштита ТГ у корелацији са повећаном пластичношћу неурона током И/Р. Међутим, штета је што не постоји очигледна разлика између ПС-а као и ОС група. Ови резултати су показали да ТГ могу побољшати неуропластичност након церебралне И/Р повреде.

Снимање пацијената са можданим ударом показало је да се дисфункција БББ може сматрати упадљивим атрибутом пер исхемијског мозга (Банг ет ал., 2007). ТЈс, који се састоје од цитоплазматских протеина, трансмембранских протеина и молекула адхезије споја између капиларних ендотелних ћелија, веома су важни у одржавању интегритета БББ (Ие ет ал., 2019). Међу њима, ЗО-1, цлаудин-5 и оклудин су најважнији протеини у ТЈ. Све већи докази показују да повећана пермеабилност БББ изазвана исхемијом генерално корелира са променама ЗО-1, клаудина-5 и оклудина (Цао ет ал., 2016а; Паге ет ал., 2016; Иу и сар., 2017; Лиу и сар., 2018).

У овом раду, резултати су показали да иако ТГ могу значајно повећати експресију протеина ЗО-1, клаудина-5 и оклудина у можданим ткивима изазваним МЦАО, ни ПС ни ОС то нису урадили. БББ се састоји од церебралних ендотелних ћелија и блиско је повезан са перицитима (Ниул-Тотх ет ал., 2016). Перицити су витални за интегритет БББ (Белл ет ал., 2010). Исхемијски мождани удар изазива смрт перицита и одвајање од ендотелних ћелија мозга у акутној фази, дестабилизујући тако микроваскулатуру и мењајући својства БББ (Зецхариах ет ал., 2013). Наши подаци су показали да ТГ могу повећати покривеност перицитима на капиларама и повећати нивое експресије ЗО-1, клаудина-5 и оклудина. Ови феномени су доказали да ТГ могу ефикасно заштитити интегритет БББ након церебралне И/Р повреде. Укратко, ТГ могу ублажити церебралне повреде на више начина, као што су промовисање ангиогенезе, побољшање пластичности неурона и одржавање интегритета БББ.

Затим смо истражили сигнални пут да бисмо истражили механизам који лежи у основи заштите мозга ТГ. Процес И/Р повреде је мултифакторски, те су стога бројни механизми укључени у патогенезу. Оксидативни стрес је основни фактор ризика који доприноси повреди мозга изазваном И/Р (Суда ет ал., 2013), као што је оштећење структуре БББ, дисфункција васкуларног ендотела и погоршање исхемијске повреде неурона (Ксионг ет ал., 2015; Цаглаиан ет ал., 2019; Приестлеи ет ал., 2019).

Дакле, оксидативни стрес је постао атрактивна терапеутска мета код повреде мозга изазване И/Р. Ензими фазе 2, који су посредовани фактором повезаним са нуклеарним фактором Е2-фактором-2 (Нрф-2), сматрају се важним средством помоћу којег се неурони штите од оксидативног стреса (Сузуки и Иамамото , 2015; Иа ет ал., 2018). Све више доказа указује да је активација Нрф-2 током И/Р потенцијална терапијска мета за неуропротекцију (Динг ет ал., 2015; Зханг Р. ет ал., 2017). Нрф-2, као важан регулатор ендогене антиоксидативне одбране, посредује у нивоу хем оксигеназе 1 (ХО-1) и других антиоксидативних ензима, као што је НАД(П)Х кинон оксидоредуктаза 1 (НКО1), СОД, ЦАТ, ГСХ и МДА (Сиов ет ал., 2007; Динг ет ал., 2014). Штавише, Нрф-2 игра важну регулаторну улогу у ангиогенези. Ова студија показује да се Нрф-2 може значајно појачати и активирати у процесу васкуларног развоја (Веи ет ал., 2013).

Као што је раније описано (Јианг и Ту, 2009), ТГ садрже много биоактивних једињења, на пример, ехинакозид, тубулозид А, актеозид, изоактеозид и 2'-ацетилактеозид, а неки од њих су показали неуропротективне функције након церебралне И/Р повреде ( Пенг ет ал., 2016). Ехинакозид има много фармаколошких ефеката, као што су антиоксидација, анти-сенесценција, неуропротекција, анти-инфламација, промоција цикатризације, хепатопротекција, промоција формирања костију и антитуморске активности (Иу ет ал., 2016; Ли ет ал., 2018; Зханг И. ет ал., 2018; Ји ет ал., 2019; Ксу ет ал., 2019).

Недавно је ехинакозид идентификован као моћан антиоксиданс у централном нервном систему (Лу ет ал., 2016). Ехинакозид може смањити садржај МДА и побољшати активности СОД и ГСХПк код исхемијске повреде мозга, а молекуларна анализа је показала да се ехинакозид може везати за Кеап-1, што доводи до нуклеарне транслокације Нрф-2 (Ли ет ал., 2018). Студија Ксиа је показала да актеозид може смањити запремину инфаркта и садржај воде у мозгу како би побољшао неуролошке дефиците код МЦАО/Р пацова ублажавањем оксидативног стреса (Ксиа ет ал., 2018). Друге студије су показале да изоактеозид може повећати активности ћелијских антиоксидативних ензима, СОД и ЦАТ у В79-4 ћелијама третираним Х2О2-(Цхае ет ал., 2005). На основу горњих извештаја о активним једињењима садржаним у ТГ, могуће је закључити да ТГ могу заштитити од исхемијског можданог удара путем антиоксидационих путева.

Пријавио сам о неуропротективним ефектима фенилетаноидних гликозида (ПхГ) на Х2О2-индуковану апоптозу на ПЦ12 ћелијама путем Нрф2/АРЕ пута (Ли ет ал., 2018). Ови ПхГ су значајно потиснути покретањем нуклеарне транслокације Нрф2 и повећањем експресије ХО-1, НКО1, каталитичке подјединице глутамат-цистеин лигазе (ГЦЛЦ) и подјединице модификатора глутамат-цистеин лигазе (ГЦЛМ) (Ли ет ал., 2018). ; Гонг ет ал., 2019).

Стога, ови налази сугеришу да пут Нрф-2/АРЕ игра кључну улогу у заштитним ефектима посредованим ПхГс на неуронске ћелије. Слично томе, у овој студији смо открили да ТГ могу смањити ниво МДА и повећати нивое СОД, ЦАТ и ГСХ-Пк код И/Р пацова. У међувремену, ТГ би могли повећати експресију Нрф2 у језгру, смањити одговарајућу експресију у цитоплазми и значајно смањити експресију Кеап-1. Стога, пут Нрф-2/Кеап-1 може бити укључен у неуропротективне ефекте посредоване ТГ. Даља валидација овог пута би се извршила ин витро ћелијском културом са моделима повреде депривације кисеоника и глукозе/реоксигенације у будућности. Штавише, екстракти Ц. десертицола су давани у нашој студији током 14 дана непрекидно. Пошто би неурогенеза одраслих утицала на тумачење неуропротективних ефеката током 14 дана реперфузије, неурогенеза се не може искључити из нашег тренутног дизајна експеримента у истраживању неуропротективног ефекта ЦТ-а. Ово је ограничење нашег истраживања.

У закључку, ТГ из Ц. десертицола могу побољшати ангиогенезу и неурогенезу, као и одржати интегритет БББ код пацова са И/Р повредама, али не и ПС и ОС. Ефекти могу бити посредовани активацијом Нрф-2/Кеап-1 путање.

ИЗЈАВА О ДОСТУПНОСТИ ПОДАТАКА

Необрађене податке који подржавају закључке овог чланка аутори ће, без непотребне резерве, ставити на располагање сваком квалификованом истраживачу.

ЕТИЧКА ИЗЈАВА

Овај рад је обављен у складу са Смерницама за експерименте на животињама Пекиншког универзитета. Протоколе студије је одобрио Комитет за институционалну негу и употребу животиња при Здравственом научном центру Универзитета у Пекингу (ЛА2019123).

ПРИЛОЗИ АУТОРА

ИЈ, КЗ и ПТ дизајнирали су истраживање. ФВ је извршио истраживање. ФВ и РЛ су анализирали податке. ФВ, РЛ и ЈЦ написали су рукопис и ХПЛЦ анализу. ЈЦ, КЗ, ИЈ и ПТ ревидирали су рукопис.

ФИНАНСИРАЊЕ

Ова студија је подржана од стране Националног кључног истраживачког и развојног пројекта (2017ИФЦ1702400, 2019ИФЦ1711000), Националне фондације за природне науке Кине (81773932) и Националног програма за истраживање и развој кључних технологија „Нове иновације у дрогама“ Кине (2018ЗКС{6}} ).

РЕФЕРЕНЦЕ

Аллури, Х., Анасооиа Схаји, Ц., Давис, МЛ, и Тхаракан, Б. (2015). Депривација глукозе кисеоником и реоксигенација као ин витро модел повреде исхемије-реперфузије за проучавање дисфункције крвно-мождане баријере. Ј. Вис. Екп. 99, е52699. дои: 10.3791/52699

Армулик, А., Генове, Г., Мае, М., Нисанциоглу, МХ, Валлгард, Е., Ниаудет, Ц., ет ал. (2010). Перицити регулишу крвно-мождану баријеру. Природа 468 (7323), 557–561. дои: 10.1038/натуре09522

Банг, ОИ, Буцк, БХ, Савер, ЈЛ, Алгер, ЈР, Иоон, СР, Старкман, С., ет ал. (2007). Предвиђање хеморагијске трансформације након реканализационе терапије применом Т2*-пропустљивости магнетне резонанце. Анн. Неурол. 62 (2), 170–176. дои: 10.1002/ана.21174

Белл, РД, Винклер, ЕА, Сагаре, АП, Сингх, И., ЛаРуе, Б., Деане, Р., ет ал. (2010). Перицити контролишу кључне неуроваскуларне функције и неуронске фенотипове у мозгу одраслих и током старења мозга. Неурон 68 (3), 409–427. дои: 10.1016/ј.неурон.2010.09.043

Цаглаиан, Б., Килиц, Е., Далаи, А., Алтунаи, С., Тузцу, М., Ертен, Ф., ет ал. (2019). Алил изотиоцијанат ублажава оксидативни стрес и упалу модулацијом Нрф2/ХО-1 и НФ-каппаБ путева код трауматских повреда мозга код мишева. Мол. Биол. Реп. 46 (1), 241–250. дои: 10.1007/с11033-018-4465-4

Цао, Г., Јианг, Н., Ху, И., Зханг, И., Ванг, Г., Иин, М., ет ал. (2016а). Рускогенин ублажава дисфункцију крвно-мождане баријере изазвану церебралном исхемијом супресијом ТКСНИП/НЛРП3 активације инфламасома и МАПК пута. Инт. Ј. Мол. Сци. 17 (9), 1–17. дои: 10.3390/ијмс17091418

Цао, Г., Ие, Кс., Ксу, И., Иин, М., Цхен, Х., Коу, Ј., ет ал. (2016б). Ињекција праха ИиКиФуМаи побољшава дисфункцију крвно-мождане баријере и едем мозга након фокалне церебралне исхемије-реперфузије код мишева. Друг Дес. Дев. Тхер. 10, 315–325. дои: 10.2147/дддт.С96818

Цхае, С., Ким, ЈС, Канг, КА, Бу, ХД, Лее, И., Сео, ИР, ет ал. (2005). Антиоксидативна активност изоактеозида из Цлеродендрон трицхотомум. Ј. Токицол. Енвирон. Здравље А 68 (5), 389–400. дои: 10.1080/15287390590900750

Цхеон, СИ, Цхо, КЈ, Ким, СИ, Кам, ЕХ, Лее, ЈЕ и Коо, БН (2016). Блокада киназе 1 која регулише сигнал апоптозе смањује активност матриксне металопротеиназе 9 у ендотелним ћелијама мозга и каснију апоптозу у неуронима након исхемијске повреде. Фронт. Целл Неуросци. 10, 213. дои: 10.3389/фнцел.2016.00213

Цхи, Х., Цханг, ХИ и Санг, ТК (2018). Механизми смрти неуронских ћелија у главним неуродегенеративним болестима. Инт. Ј. Мол. Сци. 19 (10), 1–18. дои: 10.3390/ ијмс19103082

Црацк, ПЈ, Таилор, ЈМ, Флентјар, Њ, де Хаан, Ј., Хертзог, П., Ианнелло, РЦ, ет ал. (2001). Повећана величина инфаркта и погоршана апоптоза у мозгу миша који је нокаутирао глутатион пероксидазу-1 (Гпк-1) као одговор на исхемијску/реперфузијску повреду. Ј. Неуроцхем. 78 (6), 1389–1399. дои: 10.1046/ј.1471- 4159.2001.00535.к

Црацк, ПЈ, Таилор, ЈМ, Али, У., Манселл, А., анд Хертзог, ПЈ (2006). Потенцијални допринос НФ-каппаБ у смрти неуронских ћелија код миша који је нокаутирао глутатион пероксидазу-1 као одговор на повреду исхемијом-реперфузијом. Строке 37 (6), 1533–1538. дои: 10.1161/01.Стр.0000221708.17159.64

Црамер, СЦ, анд Цхопп, М. (2000). Опоравак рекапитулира онтогенезу. Трендс Неуросци. 23 (6), 265–271. дои: 10.1016/с0166-2236(00)01562-9

Данеман, Р., Зхоу, Л., Кебеде, АА, и Баррес, БА (2010). Перицити су потребни за интегритет крвно-мождане баријере током ембриогенезе. Природа 468 (7323), 562–566. дои: 10.1038/натуре09513

Динг, И., Цхен, М., Ванг, М., Ванг, М., Зханг, Т., Парк, Ј., ет ал. (2014). Неуропротекција ацетил-11-кето-бета-босвелинском киселином, код исхемијске повреде мозга, укључује одбрамбени пут Нрф2/ХО-1. Сци. Реп. 4, 7002. дои: 10.1038/среп07002

Динг, И., Цхен, М., Ванг, М., Ли, И., и Вен, А. (2015). Посттретман са 11- кето-бета-босвелинском киселином побољшава церебралну исхемију-реперфузиону повреду: Нрф2/ХО-1 пут као потенцијални механизам. Мол. Неуробиол. 52 (3), 1430–1439. дои: 10.1007/с12035-014-8929-9

Донг, К., Иао, Ј., Фанг, ЈН, и Динг, К. (2007). Структурна карактеризација и имунолошка активност два полисахарида која се екстрахују хладном водом из Цистанцхе десертицола ИЦ Ма. угљени хидрат. Рес. 342 (10), 1343–1349. дои: 10.1016/ј.царрес.2007.03.017

Доннан, ГА, Фисхер, М., Мацлеод, М., и Давис, СМ (2008). Удар. Ланцет 371 (9624), 1612–1623. дои: 10.1016/с0140-6736(08)60694-7

Дуан, К. и Си, Е. (2019). МикроРНА-25 погоршава Абета1-42-индуковану повреду хипокампалног неурона код Алцхајмерове болести тако што смањује КЛФ2 преко Нрф2 сигналног пута у моделу миша. Ј. Целл Биоцхем. 120 (9), 15891–15905. дои: 10.1002/јцб.28861

ЕлАли, А. (2016). Импликација сигнализације неуроваскуларне јединице у контроли суптилне равнотеже између повреде и поправке након исхемијског можданог удара. Неурал Регенер. Рес. 11 (6), 914–915. дои: 10.4103/1673-5374.184485

Гаире, БП (2018). Биљна медицина у исхемијском можданом удару: изазови и изгледи. Брада. Ј. Интегр. Мед. 24 (4), 243–246. дои: 10.1007/с11655-018-2828-2

Гао, И., Јианг, И., Даи, Ф., Хан, З., Лиу, Х., Бао, З., ет ал. (2015). Студија о лаксативним састојцима у Цистанцхе десертицола ИЦ Ма. Мод. Брада. Мед. 17 (04), 19–22 плус 26. дои: 10.13313/ј.иссн.1673-4890.2015.4.003

Гонг, Кс., Ксу, И., Рен, К., Баи, Кс., Зханг, Ц., и Ли, М. (2019). Фенилетаноидни гликозиди из Парабоеа мартини штите ћелије феохромоцитома пацова (ПЦ12) од оштећења ћелија изазваних водоник-пероксидом. Биосци. Биотецхнол. Биоцхем. 83 (12), 2202–2212. дои: 10.1080/09168451.2019.1654359

Грефкес, Ц. и Вард, НС (2014). Кортикална реорганизација након можданог удара: колико и колико функционална? Неуросциентист 20 (1), 56–70. дои: 10.1177/ 1073858413491147

Гузик, А., и Бусхнелл, Ц. (2017). Епидемиологија можданог удара и управљање факторима ризика. Континуум (Миннеап Минн) 23 (1, Цереброваскуларни дис), 15–39. дои: 10.1212/цон.0000000000000416

Ху, С., Ву, И., Зхао, Б., Ху, Х., Зху, Б., Сун, З., ет ал. (2018). Панак нотогинсенг сапонини штите церебралне микроваскуларне ендотелне ћелије од депривације кисеоника-глукозе/реперфузијом изазване баријерне дисфункције путем активације антиоксидантног сигналног пута ПИ3К/Акт/Нрф2. Молецулес 23 (11), 1–17. дои: 10,3390/молецулес23112781

Ивасава, Е., Ицхијо, М., Исхибасхи, С., анд Иокота, Т. (2016). Акутни развој колатералне циркулације и терапијски изгледи код исхемијског можданог удара. Неурал Регенер. Рес. 11 (3), 368–371. дои: 10.4103/1673-5374.179033

Ји, С., Ли, С., Зхао, Кс., Канг, Н., Цао, К., Зху, И., ет ал. (2019). Заштитна улога фенилетаноидних гликозида, торенозида Б и саватизида А, у Алцхајмеровој болести. Екп. Тхер. Мед. 17 (5), 3755–3767. дои: 10.3892/итем.2019.7355

Јианг, И., и Ту, ПФ (2009). Анализа хемијских састојака у врстама Цистанцхе. Ј. Цхроматогр. 1216 (11), 1970–1979. дои: 10.1016/ ј.цхрома.2008.07.031

Јианг, Т., Иу, ЈТ, Зху, КСЦ, Ванг, ХФ, Тан, МС, Цао, Л., ет ал. (2014). Акутна предкондиционирање метформином даје неуропротекцију против фокалне церебралне исхемије пре-активацијом АМПК-зависне аутофагије. Бр. Ј. Пхармацол. 171 (13), 3146–3157. дои: 10.1111/бпх.12655

Јианг, Кс., Анђелковић, АВ, Зху, Л., Ианг, Т., Беннетт, МВЛ, Цхен, Ј., ет ал. (2018). Дисфункција крвно-мождане баријере и опоравак након исхемијског можданог удара. Прог. Неуробиол. 163-164, 144–171. дои: 10.1016/ј.пнеуробио.2017.10.001

Јунг, ЈЕ, Ким, ГС, Цхен, Х., Маиер, ЦМ, Нарасимхан, П., Сонг, ИС, ет ал. (2010). Реперфузија и неуроваскуларна дисфункција у можданом удару: од основних механизама до потенцијалних стратегија за неуропротекцију. Мол. Неуробиол. 41 (2-3), 172–179. дои: 10.1007/с12035-010-8102-з

Килкенни, Ц., Бровне, ВЈ, Цутхилл, ИЦ, Емерсон, М., анд Алтман, ДГ (2010). Побољшање извештавања о истраживању о бионауци: смернице АРРИВЕ за извештавање о истраживањима на животињама. ПЛоС Биол. 8 (6), е1000412. дои: 10.1371/часопис. био.1000412

Ко, КМ, и Леунг, ХИ (2007). Повећање капацитета за генерисање АТП-а, антиоксидантне активности и имуномодулаторних активности кинеских Ианг и Иин тонизирајућих биљака. Брада. Мед. 2, 3. дои: 10.1186/1749-8546-2-3

Кондо, Т., Реауме, АГ, Хуанг, ТТ, Царлсон, Е., Мураками, К., Цхен, СФ, ет ал. (1997). Смањење активности ЦуЗн-супероксид дисмутазе погоршава повреду неуронских ћелија и формирање едема након пролазне фокалне церебралне исхемије. Ј. Неуросци. 17 (11), 4180–4189. дои: 10.1523/ЈНЕУРОСЦИ.17-11-04180

Лее, М., Савер, ЈЛ, Алгер, ЈР, Хао, К., Старкман, С., Али, ЛК, ет ал. (2012). Поремећаји пермеабилности крвно-мождане баријере у исхемијском можданом удару задње циркулације: учесталост и веза са хеморагијском трансформацијом. Ј. Неурол. Сци. 313 (1-2), 142–146. дои: 10.1016/ј.јнс.2011.08.048

Ли, Н., Ванг, Ј., Ма, Ј., Гу, З., Јианг, Ц., Иу, Л., ет ал. (2015). Неуропротективни ефекти терапије херба на даљину на пацијенте са умереном Алцхајмеровом болешћу. Алтерн комплемента заснован на Евиду. Мед. 2015, 103985. дои: 10.1155/2015/103985

Ли, М., Ксу, Т., Зхоу, Ф., Ванг, М., Сонг, Х., Ксиао, Кс., ет ал. (2018). Неуропротективни ефекти четири фенилетаноидна гликозида на Х(2)О(2)- индуковану апоптозу на ПЦ12 ћелијама путем Нрф2/АРЕ пута. Инт. Ј. Мол. Сци. 19 (4), 1–17. дои: 10.3390/ијмс19041135

Ли, Р., Зхао, М., Ту, П., и Јианг, И. (2019). Симултано одређивање пет фенилетаноидних гликозида у Цистанцхес Херба коришћењем квантитативне анализе вишекомпоненти помоћу једног маркера. Ј. Цхин. Пхарм. Сци. 28 (08), 537–546. дои: 10.5246/јцпс.2019.08.051

Лиан, Ј., Ванг, Л., Зхао, Ф., Лин, С., Иан, Кс., Јиа, Ј., ет ал. (2017). Ефекти гликозида цистанхе на синаптичку морфолошку пластичност код мишева са убрзаним старењем. Ј. Баотоу Медл Цолл. 33 (08), 78–80. дои: 10.16833/ј.цнки.јбмц.2017.08.036

Лиу, И., Ванг, Д., Ванг, Х., Ку, И., Ксиао, Кс., и Зху, И. (2014). Заштитни ефекат ХЕТ0016 на едем мозга и дисфункцију крвно-мождане баријере након церебралне исхемије / реперфузије. Браин Рес. 1544, 45–53. дои: 10.1016/ ј.браинрес.2013.11.031

Лиу, П., Зханг, Р., Лиу, Д., Ванг, Ј., Иуан, Ц., Зхао, Кс., ет ал. (2018). Испитивање временског тока пермеабилности крвно-мождане баријере и промена протеина чврстог споја у моделу трајне фокалне исхемије пацова. Ј. Пхисиол. Сци. 68 (2), 121–127. дои: 10.1007/с12576-016-0516-6

Лиу, С., Цханг, Л., и Веи, Ц. (2019). Сониц хедгехог пут посредује заштиту изазвану Тонгкинлуо капсулом против нарушавања крвно-мождане баријере након исхемијског можданог удара код мишева. Басиц Цлин. Пхармацол. Токицол. 124 (6), 660–669. дои: 10.1111/бцпт.13186

Лу, ЦВ, Лин, ТИ, Хуанг, СК, и Ванг, СЈ (2016). Ехинакозид инхибира ослобађање глутамата супресијом уласка Ца(2 плус) зависног од напона и протеин киназе Ц у цереброкортикалним нервним терминалима пацова. Инт. Ј. Мол. Сци. 17 (7), 1–13. дои: 10.3390/ијмс17071006

МцГратх, ЈЦ, Друммонд, ГБ, МцЛацхлан, ЕМ, Килкенни, Ц., и Ваинвригхт, ЦЛ (2010). Смернице за пријављивање експеримената који укључују животиње: смернице АРРИВЕ. Бр. Ј. Пхармацол. 160 (7), 1573–1576. дои: 10.1111/ј.1476-5381.2010.00873.к

Ментор, С., и Фисхер, Д. (2017). Агресивни антиоксидативни редуктивни стрес нарушава ангиогенезу ендотелних ћелија мозга и функцију крвно-мождане баријере. Цурр. Неуровасц Рес. 14 (1), 71–81. дои: 10.2174/1567202613666161129113950

Морети, А., Ферари, Ф., и Вила, РФ (2015). Неуропротекција за исхемијски мождани удар: тренутни статус и изазови. Пхармацол. Тхер. 146, 23–34. дои: 10.1016/ј.пхармтхера.2014.09.003

Ниул-Тотх, А., Суциу, М., Молнар, Ј., Фазакас, Ц., Хаско, Ј., Херман, Х., ет ал. (2016). Разлике у молекуларној структури крвно-мождане баријере у можданој кори и белој материји: студија ин силицо, ин витро и ек виво. Сам. Ј. Пхисиол. Хеарт Цирц. Пхисиол. 310 (11), Х1702–Х1714. дои: 10.1152/ајпхеарт.00774.2015

Овбиагеле, Б., и Нгуиен-Хуинх, МН (2011). Епидемиологија можданог удара: унапређење нашег разумевања механизма и терапије болести. Неуротерапеутика 8 (3), 319–329. дои: 10.1007/с13311-011-0053-1

Паге, С., Мунселл, А., и Ал-Ахмад, АЈ (2016). Церебрална хипоксија/исхемија селективно ремети комплексе чврстих спојева у микроваскуларним ендотелним ћелијама људског мозга добијеним од матичних ћелија. Баријере течности ЦНС 13 (1), 16. дои: 10.1186/ с12987-016-0042-1

Пенг, Ф., Цхен, Ј., Ванг, Кс., Ксу, Ц., Лиу, Т., и Ксу, Р. (2016). Промене нивоа фенилетаноидних гликозида, антиоксидативне активности и других особина квалитета у кришкама цистанцхе десертицола обрадом паром. Цхем. Пхарм. Бик. (Токио) 64 (7), 1024–1030. дои: 10.1248/ЦПБ.ц16-00033

Приестлеи, ЈРЦ, Финк, КЕ, МцЦорд, ЈМ, и Ломбард, ЈХ (2019). Активација НРФ2 са Протандимом ублажава васкуларну дисфункцију изазвану солима и микроваскуларну рефакцију. Мицроцирцулатион, 26 (7), е12575. дои: 10.1111/мисц.12575

Сабоор, Ф., Рецкманн, АН, Томцзик, ЦУ, Петерс, ДМ, Веиссманн, Н., Касцхтанов, А., ет ал. (2016). Ћелије васкуларног зида које експримирају Нестин покрећу развој плућне хипертензије. ЕУР. Респир. Ј. 47 (3), 876–888. дои: 10.1183/13993003.00574-2015

Сатох, Т., Окамото, СИ, Цуи, Ј., Ватанабе, И., Фурута, К., Сузуки, М., ет ал. (2006). Активација Кеап1/Нрф2 пута за неуропротекцију помоћу електрофилних [корекција електрофилних] индуктора фазе ИИ. Проц. Натл. Акад. Сци. УСА 103 (3), 768–773. дои: 10.1073/пнас.0505723102

Сцхеллингер, ПД, и Кохрманн, М. (2014). Временски оквир од 4.5-часовни оквир за интравенску тромболизу са рекомбинантним активатором плазминогена ткивног типа је успостављен. Строке 45 (3), 912–913. дои: 10.1161/ строкеаха.113.002700

Сеали-Јефферсон, С., Винг, ЈЈ, Санцхез, БН, Бровн, ДЛ, Меурер, ВЈ, Смитх, МА, ет ал. (2012). Узрасне и етнички специфичне полне разлике у ризику од можданог удара. Генд Мед. 9 (2), 121–128. дои: 10.1016/ј.генм.2012.02.002

Схи, З., Ву, И., Зху, И., Цуи, Ванг, М., Иин, Х., ет ал. (2019). Квантитативно одређивање бетаина, манитола, фруктозе, глукозе и сахарозе у Цистанцхес Херба помоћу ХПЛЦ-ЕЛСД. Мод. Брада. Мед. 32 (6), 1–11. дои: 10.13313/ ј.иссн.1673-4890.20190320006

Синг, Д., Реета, КХ, Схарма, У., Јаганнатхан, НР, Динда, АК, и Гупта, ИК (2019). Неуро-протективни ефекат монометил фумарата на исхемијско-реперфузиону повреду код пацова: Улога Нрф2/ХО1 пута у пери-инфарктном региону. Неуроцхем. Инт. 126, 96–108. дои: 10.1016/ј.неуинт.2019.03.010

Сиов, РЦ, Исхии, Т., анд Манн, ГЕ (2007). Модулација експресије антиоксидативних гена помоћу 4-хидроксиноненала: атеропротективна улога Нрф2/АРЕ транскрипционог пута. Редок Реп. 12 (1), 11–15. дои: 10.1179/ 135100007к162167

Суда, С., Катсура, К., Канамару, Т., Саито, М., и Катаиама, И. (2013). Валпроична киселина ублажава исхемијско-реперфузиону повреду у мозгу пацова кроз инхибицију оксидативног стреса и упале. ЕУР. Ј. Пхармацол. 707 (1-3), 26–31. дои: 10.1016/ј.ејпхар.2013.03.020

Сузуки, Т., и Иамамото, М. (2015). Молекуларна основа Кеап1-Нрф2 система. Слободни Радиц. Биол. Мед. 88 (Пт Б), 93–100. дои: 10.1016/ј.фреерадбиомед.2015.06.006

Тенреиро, ММ, Ферреира, Р., Бернардино, Л., анд Брито, МА (2016). Ћелијски одговор крвно-мождане баријере на повреду: Потенцијални биомаркери и терапеутски циљеви за регенерацију мозга. Неуробиол. Дис. 91, 262–273. дои: 10.1016/ј.нбд.2016.03.014

Тхомпсон, ЈВ, Нараианан, СВ, Короновски, КБ, Моррис-Бланцо, К., Даве, КР, и Перез-Пинзон, МА (2015). Сигнални путеви који воде до исхемијске неуропротекције митохондрија. Ј. Биоенерг. Биомембр. 47 (1-2), 101–110. дои: 10.1007/с10863-014-9574-8

Ванг, Т., Зханг, Кс., и Ксие, В. (2012). Цистанцхе десертицола ИЦ Ма, "Десерт гинсенг": рецензија. Сам. Ј. Цхин. Мед. 40 (6), 1123–1141. дои: 10.1142/с0192415к12500838

Ванг, Кс., Ванг, С., Ванг, Ј., Гуо, Х., Донг, З., Цхаи, Л., ет ал. (2015). Неуропротективни ефекат куесхуантонг за ињекцију (лиофилизован) у моделу пролазне и трајне церебралне исхемије пацова. Алтерн комплемента заснован на Евиду. Мед. 2015, 134685. дои: 10.1155/2015/134685

Ванг, Д., Ванг, Х. и Гу, Л. (2017). Антидепресиви и активности побољшања когнитивних способности традиционалне кинеске биљке цистанцхе. Алтерн комплемента заснован на Евиду. Мед. 2017, 3925903. дои: 10.1155/2017/3925903

Ванг, ФЈ, Ванг, СКС, Цхаи, Љ, Зханг, И., Гуо, Х., и Ху, ЛМ (2018). Ињекција Ксуесхуантонг (лиофилизована) у комбинацији са салвијанолном лиофилизованом ињекцијом штити од фокалне церебралне исхемије/реперфузијске повреде код пацова кроз слабљење оксидативног стреса. Ацта Пхармацол. Син. 39 (6), 998–1011. дои: 10.1038/апс.2017.128Веи, И., Гонг, Ј., Тхиммулаппа, РК, Космидер, Б., Бисвал, С., и Дух, ЕЈ (2013). Нрф2 делује ћелијски аутономно у ендотелу да регулише формирање врха ћелија и васкуларно гранање. Проц. Натл. Акад. Сци. УСА 110 (41), Е3910–Е3918. дои: 10.1073/пнас.1309276110

Ксиа, Д., Зханг, З., и Зхао, И. (2018). Актеозид ублажава оксидативни стрес и неуронску апоптозу код пацова са фокалном церебралном исхемијом-реперфузијом. Биол. Пхарм. Бик. 41 (11), 1645–1651. дои: 10.1248/боб.б18-00210

Ксионг, В., МацЦолл Гарфинкел, АЕ, Ли, И., Беновитз, ЛИ, и Цепко, ЦЛ (2015). НРФ2 промовише преживљавање неурона код неуродегенерације и акутног оштећења нерава. Ј. Цлин. Инвест. 125 (4), 1433–1445. дои: 10.1172/јци79735

Ксу, ХТ, Зханг, ЦГ, Хе, ИК, Схи, СС, Ванг, ИЛ и Цхоу, ГКС (2019). Фенилетаноидни гликозиди из Сцхнабелиа центифолиа (Бентх.) ПДЦантино промовишу пролиферацију остеобласта. Фитохемија 164, 111–121. дои: 10.1016/ј.пхитоцхем.2019.05.003

Иа, БЛ, Лиу, К., Ли, ХФ, Цхенг, ХЈ, Иу, Т., Цхен, Л., ет ал. (2018). Мокраћна киселина штити од фокалне церебралне исхемије/реперфузије изазваног оксидативног стреса преко активирања Нрф2 и регулисања експресије неуротрофног фактора. Окид. Мед. Целл Лонгев 2018, 6069150. дои: 10.1155/2018/6069150

Ие, ЗИ, Ксинг, ХИ, Ванг, Б., Лиу, М., и Лв, ПИ (2019). ДЛ-3-бутил фталид штити крвно-мождану баријеру од повреде исхемије/хипоксије путем регулације протеина уско спојених. Брада. Мед. Ј. (Енгл.) 132 (11), 1344–1353. дои: 10.1097/цм9.0000000000000232

Иу, К., Ли, Кс., и Цао, Кс. (2016). Кардиопротективни ефекти екстракта богатог фенилетаноидним гликозидом из Цистанцхе десертицола код инфаркта миокарда изазваног исхемијом-реперфузијом код пацова. Анн. Васц. Сург. 34, 234–242. дои: 10.1016/ј.авсг.2016.04.002

Иу, Н., Ванг, З., Цхен, И., Ианг, Ј., Лу, Кс., Гуо, И., ет ал. (2017). Мелиоративни ефекат пункције за пуштање крви при руци дванаест Јинг-велл тачака на церебрални едем изазван трајном средњом церебралном исхемијом кроз заштиту чврстих спојева крвно-мождане баријере. БМЦ Цомплемент Алтерн. Мед. 17 (1), 470. дои: 10,1186/с12906-017-1979-6

Иу, В., Гао, Д., Јин, В., Лиу, С., и Ки, С. (2018). Пропофол спречава оксидативни стрес смањењем исхемијске акумулације сукцината код фокалне церебралне исхемије-реперфузије. Неуроцхем. Рес. 43 (2), 420–429. дои: 10.1007/ с11064-017-2437-з

Иуен, ЦМ, Цхунг, СИ, Тсаи, ТХ, Сунг, ПХ, Хуанг, ТХ, Цхен, ИЛ, ет ал. (2015). Екстракорпорални ударни талас ефикасно смањује запремину можданог инфаркта и побољшава неуролошку функцију код пацова након акутног исхемијског можданог удара. Сам. Ј. Трансл. Рес. 7 (6), 976–994.

Зецхариах, А., ЕлАли, А., Доеппнер, ТР, Јин, Ф., Хасан, МР, Хелфрицх, И., ет ал. (2013). Фактор раста васкуларног ендотела промовише покривање можданих капилара перицитима, побољшава церебрални проток крви током накнадне фокалне церебралне исхемије и чува метаболичку пенумбру. Строке 44 (6), 1690–1697. дои: 10.1161/строкеаха.111.000240

Зханг, КИ, Ванг, ЗЈ, Сун, ДМ, Ванг, И., Ксу, П., Ву, ВЈ, ет ал. (2017). Нови терапеутски ефекти задржавања на исхемијском можданом удару: нови механизми интегритета БББ. Окид. Мед. Целл Лонгев 2017, 7150376. дои: 10.1155/2017/7150376

Зханг, Р., Ксу, М., Ванг, И., Ксие, Ф., Зханг, Г., и Кин, Кс. (2017). Нрф2-обећавајући терапеутски циљ за одбрану од оксидативног стреса у можданом удару. Мол. Неуробиол. 54 (8), 6006–6017. дои: 10.1007/с12035-016-0111-0

Зханг, А., Ианг, Кс., Ли, К., Ианг, И., Зхао, Г., Ванг, Б., ет ал. (2018). Имуностимулативна активност полисахарида који се екстрахују водом из Цистанцхе десертицола као биљног адјуванса ин витро и ин виво. ПЛоС Оне 13 (1), е0191356. дои: 10.1371/јоурнал.поне.0191356

Зханг, И., Ванг, К., Цхен, Х., Хе, Р., Цаи, Р., Ли, Ј., ет ал. (2018). Антиинфламаторни лигнани и фенилетаноидни гликозиди из корена Исодон террицолоус (Д.Дон) Кудо. Пхитоцхемистри 153, 36–47. дои: 10.1016/ ј.пхитоцхем.2018.05.017

Зханг, К., Зханг, К., Денг, Ј., Ли, Ј., Ли, Ј., Вен, Л., ет ал. (2019). АЛК5 сигнални пут посредује неурогенезу и функционални опоравак након церебралне исхемије/реперфузије код пацова преко Гадд45б. Целл Деатх Дис. 10 (5), 360. дои: 10,1038/с41419-019-1596-з

Сукоб интереса:

Аутори изјављују да је истраживање спроведено у одсуству било каквих комерцијалних или финансијских односа који би се могли протумачити као потенцијални сукоб интереса.

Уредник руковања је изјавио заједничку припадност, иако не постоји друга сарадња, са ауторима КЗ и ИЈ, у време прегледа.

Ауторска права © 2020 Ванг, Ли, Ту, Чен, Зенг и Ђијанг. Ово је чланак отвореног приступа који се дистрибуира под условима лиценце Цреативе Цоммонс Аттрибутион Лиценсе (ЦЦ БИ). Употреба, дистрибуција или репродукција на другим форумима је дозвољена, под условом да су оригинални аутор(и) и власник(и) ауторских права наведени и да је оригинална публикација у овом часопису цитирана, према прихваћеној академској пракси. Није дозвољена никаква употреба, дистрибуција или репродукција која није у складу са овим условима.

For more information:1950477648nn@gmail.com