Промјене у антиоксидансном активној активности током ферментације ензима

Поглавље 4 Промјене у антиоксидансивној активности током ферментације ензима

Воће су богате хранљивим материјама и долазе у многим сортима. Производња супстанци током ферментације је сложена и разнолика, а постоји много студија о њиховомантиоксидантна активност. Људи увек истражују и откривају, тражећи храну која је корисна заздравље људиДакле, ензими су постали врућа тема последњих година. Традиционални процес производње ензима је добијање ензима природним ферментацијом воћа и поврћа. На основу претходних истраживања, овај чланак додаје 4 корисне бактерије ферментације. Сама бактерија такође постоји у ензимима. Након додатног додавања бактерија, мења се број и врста микроорганизама у процесу ферментације. Какав ће се ефекат ова промена имати на његову антиоксидативну активност? У претходном поглављу узели смо јабуке као пример за детаљно објашњење. Поређење антиоксидантне активности експерименталне групе и контролне групе у различитим концентрацијама ензима показало је да је антиоксидантна активност ензима у експерименталној групи била већа од оне контролне групе. Интензитет антиоксидативне активности такође такође одражава поузданост ензима на одређени начин.

Нова биљка цистанце са снажном антиоксидативном снагом

 

Подршка служба Вецистанца - највећи извозник цистанса у Кини:
Е-пошта: wallence.suen@wecistanche.com
Вхатсапп / Тел: +86 15292862950

 

Ово поглавље додаје заједничке плодове Фруитс и Цитрус на првобитни експеримент и прати и открива промене у њиховомантиоксидантна активносттоком ферментације. На основу смањења трошкова, експериментима се надамо да ћемо свеобухваљивије одражавати биолошку активност ензима након додавања бактерија и пружити одређену теоријску основу и подршку података за производњу микробних ензима БРЗИи вештачка инокулација сојева.

 

 

 

4.1 Материјали и методе

4.1.1 Материјали

(1) експериментални материјали

Оперите свеже јабуке, крушке и цитрусно воће стерилном водом под стерилним условима, наравно, осушите их на стерилни оперативни сто, огулите их и исеците их за касније. Додајте бели шећер и воће у стерилизовану стаклену теглу на масовном односу од 1: 1. Активирајте бактерије потребне за експерименте и инокулирати их у ензим према оптималној шеми (овај корак рада је изостављен за контролну групу), запечатите га и поставите на хладно и суво место. Узмите узорке у различитим временским периодима ферментације на собној температури да бисте добили сву течност ензима која садржи воћну целулозу и филтрирајте је. Узмите супернатант као експериментални узорак и користите га за мерење релевантних података након што је центрифугирање на 10, 000 о / мин у центрифугу велике брзине током 15 минута. Вриједно је напоменути да у процесу прављења ензима, како би се избегло непотребна контаминација, све наше операције се изводе под стерилним условима.

(2) Главни инструменти

Инструменти потребни за експеримент су исти као 3.1.1 (2).

 

4.1.2 Методе

(1) промене у укупном садржају фенола током ферментације

450 ул узорака раствора је додато дестилованом водом како би се направио запремина 46мл, а затим је додато 1МЛ реагенса фолин-фенола. Добро мешати и реагујте за 3мин. Затим је додато 3мл од 20% Нацо3. Смеша је уздрмана у константној кабили за водене температуре у 25 степени за 2х. Дестилована вода је коришћена као празна контрола. Апсорбанција А мерена је на 760нм спектрофотометром. Три репликата су извршена за сваки третман. Укупни садржај фенола израчунат је према стандардној једначини кривуље.

(2) Промјене у смањењу снаге током ферментације

Додајте 45 0 ул узорак на 2,5 мл фосфатног пуфера са концентрацијом 0. 2Мол / Л и пХ вредност 6,6, а затим додајте 2,5 мл калијум ферикланид (в / в) са масовном концентрацијом од 1%, реагујте на 5,5 мл трихлоортечке киселине, додајте 2,5 мл трихлоортечке киселине, додајте 2,5 мл трихлоортечке киселине, додајте 2,5 мл трихлооцетичке киселине, додајте 2,5 мл трихлоортечке киселине, додајте 2,5 мл трихлоортечке киселине од 10% центрифуга на 3000рпм током 10 минута, извадите и одмах нацртајте 2,5 мл супернатант у волуметријску тиквицу, додајте 2,5 мл дестиловане воде и 0,5 мл ферричног хлорида (В / В) масовне концентрације од 0,1%. Користите дестиловану воду као празну контролу и мерите апсорбанцију А на таласној дужини од 700нм са спектрофотометром. Извршите 3 репликате за сваки третман. Снага смањења снаге утврђује се на основу вредности апсорбанције.

 

(3) Промене у супероксидним анионским радикалним способностима окидања током ферментације
Поставите 4,5 мл 0. {{1 {16}}}} 5 мол / л пХ 8,2 Трис-ХЦл пуфер у константној температурној воденој купељи и подесите температуру на 25 степени. Након 20 мин, додајте 1 мл ензимског узорка раствора и 0,4 мл пирогалолног раствора са моларном концентрацијом од 25 ммол / л. Добро мешати и ставите у водену купатилу од 25 степени 5 мин. Додајте 1,0 мл 8 мол / Л ХЦл да бисте прекинули реакцију. Користите Трис-ХЦл пуфер као референцу и користите спектрофотометар за мерење апсорбанције А на 299 НМ да бисте израчунали брзину окидања. Празна контролна група користи 1 мл растварача уместо узорака. Стопа осипне окидања супероксида је израчуната према формули 4.1: супероксид анион радикална брзина прочишћења (%)=(а {{24} А2) / А1 × 100 (4.1) где: А1 је апсорбанција празне контролне групе; А2 је апсорбанција ензимског узорка раствора експерименталне групе.

 

(4) Промене у хидроксилној радикалној способности окидања током ферментације

 

Додајте воду на 45 0 μЛ узорак за узорак до 2 мл, а затим је додајте на 1,4мл водоник пероксида са моларном масом концентрацијом од 6 ммл / л, а затим додајте 0,6 мл натријум салицилата са моларном масом концентрацијом од 1,5 мМол / Л и топлота у константној температурној купељи на константној температури. 1х. Нула са дестилованом водом и мери апсорбанцију а на таласној дужини од 562НМ са спектрофотометром. Три репликата су извршена за сваки третман. Хидроксилна радикална брзина прочишћавања израчуната је према Формули 4.2: хидроксил радикална брзина чишћења (%)=[(а 1- А2) / А1] × 100 (4.2) где: А1 је просечна апсорбанција празних; А2 је просечна апсорбанција решења узорка.

 

(5) Промене у ДПП-у слободној способности задирке током ферментације
Тачно пренесите 2 мл ензимског узорка узорака на 1 0 мл волуметријска тиквица, а затим додајте 2 мл 80% ДППХ етанол воденог раствора на волуметријску тиквицу, са моларном масом концентрацијом од 2 × 10-4 мол / л. Добро мешати и оставите да стојите на собној температури током 30 мин. Узмите 80% етанол решење као референцу и мерите апсорбанцију узорка на таласној дужини од 517 Нм, што је забележено као А1. Помешајте 2 мл ДППХ раствора и 2 мл 80% етанол раствора и мерите њихову апсорбанцију на истој таласној дужини, која је забележена као А0. Помешајте 2 мл ензимског раствора и 2 мл 80% етанол раствора и измерите њихову апсорбанцију на истој таласној дужини, која је забележена као А2. Три репликата су извршена за сваки третман. Израчунајте ДППХ без радикалне раскошне окидање према Формули 4.3:
ДППХ БЕСПЛАТНИ РАДИЧНА СТОПА (%) {0}} [0}}} [1-] × 100 (4.3) где: А1 је просечна апсорбанција од 2 мл ДППХ 80% етанол воденог раствора и 2 мл раствора узорака; А2 је апсорбанција раствора од 2 мл ензима и 2 мл 80% мешовитих решења етанола; А0 је апсорбанција 2 мл ДППХ раствора и 2 мл 80% мешовитог решења етанола.

(6) Промјене у АБТС слободној радикалној способности за очување током ферментације
8 μл узорак раствора је допуњен на 10 ул са фосфатним пуфером (5 ммол / л пХ 7,4), а затим помешано са 10 мл калијум сулфата и подстиче мешовити раствор да реагује на реакциону температуру од 30 степени од 30 степени од 30 степени и време реакције и време реакције и време реакције од 5 мин. Нула раствор са дестилованом водом и мери апсорбанцију А на таласној дужини од 734 НМ користећи спектрофотометар. Три репликата су извршена за сваки третман. Стопа осипне окидачке окачене ручке израчуната је према Формули 4.4:
АБТС слободна радикална брзина прочишћавања (%)=[(А 1- А2) / А1] × 100 (4.4) где: А1 је апсорбанција празне контролне групе; А2 је апсорбанција експерименталне групе узорка.