Целомоцити глисте Олигоцхаета Лумбрицус Террестрис (Линнаеус, 1758) као еволуциони кључ одбране: морфолошка студија

Апстрактан

Метазоани имају неколико механизама унутрашње одбране за свој опстанак. Унутрашњи одбрамбени систем је еволуирао заједно са организмима. Аннелидае има циркулишуће целомоците који обављају функције упоредиве са фагоцитним имуним ћелијама кичмењака. Неколико студија је показало да су ове ћелије укључене у фагоцитозу, опсонизацију и процесе препознавања патогена. Попут макрофага кичмењака, ове циркулишуће ћелије које прожимају органе из целимске шупљине хватају или инкапсулирају патогене, реактивне врсте кисеоника (РОС) и азот оксид (НО). Штавише, они производе низ биоактивних протеина укључених у имуни одговор и врше функције детоксикације кроз свој лизозомални систем.

Целомоцити такође могу учествовати у литичким реакцијама против циљних ћелија и ослобађању антимикробних пептида. Наша студија имунохистохемијски идентификује целимоците Лумбрицус террестрис расуте у епидермалном и везивном слоју испод, како у уздужном тако иу слоју глатких мишића, по први пут имунореактивне на ТЛР2, ЦД14 и -Тубулин. ТЛР2 и ЦД14 нису у потпуности колокализовани један са другим, што сугерише да ови целомоцити могу припадати две различите породице. Експресија ових имуних молекула на целимоцитима Аннелидае потврђује њихову кључну улогу у унутрашњем одбрамбеном систему ових протостома Олигоцхаета, што указује на филогенетску конзервацију ових рецептора. Ови подаци би могли да пруже даљи увид у разумевање унутрашњег одбрамбеног система Аннелида и сложених механизама имуног система код кичмењака.

Целомоцити су уско повезани са имунитетом. Целомоцити су ћелије повезане са имунолошким системом. Они могу да луче различите имуне факторе, као што су цитокини, интерлеукини, антигени и антитела, да регулишу и побољшају имунолошку способност тела.

Целомоцити играју различите имунолошке функције, укључујући регулацију ћелијских имуних одговора као ћелије које представљају антиген, директно убијају патогене и абнормалне ћелије и учествују у регулацији упале и имунолошких одговора. Поред тога, неке студије су показале да целомоцити такође могу побољшати имунитет на потенцијалне патогене акумулацијом ћелија имунолошке меморије, чиме се побољшава имунитет тела.

Стога је одржавање нормалне функције и количине целомоцита кључно за имунитет тела. Истовремено, регулацијом и јачањем имунолошке функције целимоцита, може се побољшати и имунитет организма, како би се боље спречиле и лечиле различите болести. Из овога можемо видети важност имунитета. Цистанцхе може побољшати имунитет. Цистанцхе је богат разним антиоксидативним супстанцама, као што су витамин Ц, витамин Ц, каротеноиди, итд. Ови састојци могу уклонити слободне радикале, смањити оксидативни стрес и побољшати имунитет. отпор система.

Кликните на предности цистанцхе тубулоса

Кључне речи

Анелид, Целомоцити, Глисте, Еволуција, Имунитет.

Увод

Унутрашњи одбрамбени механизми омогућавају опстанак домаћина у метазоану. Ови механизми постају све сложенији како се организми развијају. За разлику од деутеростома кичмењака, протостоми немају адаптивни имунитет, заснивајући своју одбрану на урођеном имунитету [56]. Почетна линија одбране од бактерија и микроорганизама код кичмењака је брза активација урођених имуних ћелија и молекула. Недавно су бескичмењаци постали кандидати за анализу урођеног имунитета како би се откриле стратегије и сложеност адаптивног имунолошког одговора кичмењака. Бескичмењаци су развили различите активне имуне механизме укључујући производњу антимикробних пептида, коагулацију, фагоцитозу и реакције инкапсулације [20, 24]. Ови механизми зависе од "рецептора за препознавање узорака" (ПРР), урођених имуних молекула који могу разликовати "ја" од "не-ја" компоненти мембране.

Препознавање „молекуларних образаца повезаних са патогеном“ (ПАМП) регулише почетак есенцијалних сигналних путева, све до активације гена који кодирају инфламаторне медијаторе, антимикробне пептиде и регулаторе фагоцитозе [32]. Олигоцхаетес аннелидс (кишне глисте) постале су модел за компаративну имунологију и, као и пијавице, користе се за биомониторинг копнене и водене животне средине (Б.-Т. [48, 52, 53, 72]. Глисте су урођене, високо развијене). , и ефикасним одбрамбеним механизмима од опасних микроорганизама из животне средине.Прва механичко-биолошка линија одбране, која одваја тело анелида од спољашње средине је тегумент, састављен од епидермиса и мишићних слојева.Има кутикулу са танким слојем мукополисахариди и протеини, који делују као антимикробна баријера [20].

Код глиста, ћелијски и хуморални имуни систем по први пут у еволуцији метазоана раде заједно. Сматра се да је течност у целимској шупљини одговорна за хуморалне имунолошке активности. Целомична шупљина глиста испуњена је течностима које садрже слободне и лутајуће целимоците и њихове пигментне агрегате, зване смеђа тела, производ инкапсулације инвазивних бактерија и остатака честица. Неколико биолошких процеса, укључујући хемолитичке, протеолитичке, цитотоксичне и антибактеријске, изводи се целомском течношћу кишних глиста [19, 24, 29]. Целом директно комуницира са спољашњим окружењем кроз дорзалне поре и спојене нефридијалне тубуле, који излучују метаболите. Ове поре су такође укључене у елиминацију бактерија и исцрпљених целимоцита. У условима стреса, целомска течност и суспендоване ћелије могу се брзо избацити повећањем интраколонског притиска [24].

Целомоцити глиста су суштински елемент ћелијског урођеног имунитета. Ове ћелије личе на леукоците кичмењака и по морфологији и по функцији [33]. Целомоцити обављају широк спектар задатака, укључујући ћелијску цитотоксичност, инкапсулацију и фагоцитозу. Могу се поделити на две примарне субпопулације: меланоците и амебоците (хијалинске и грануларне) [33]. Хијалински и грануларни амебоцити су укључени у фагоцитозу и инкапсулацију, експримирајући различите ПРР [23, 60]. Ове циркулишуће ћелије које мигрирају у ткива из целимске шупљине су веома сличне макрофагима кичмењака, патогенима који прогутају или инкапсулирају, реактивним врстама кисеоника (РОС) и азот-оксиду (НО) [39]. Елеоцити производе широк спектар биоактивних протеина који су укључени у хуморални имуни одговор и такође детоксикацију тела кроз свој лизозомални систем [24]. Целомоцити могу да учествују у литичким реакцијама против циљних ћелија и ослобађању антимикробних пептида. Међу имунолошким механизмима, експерименти трансплантације су показали постојање самопрепознавања код кишних глиста [28].

Целомоцити аннелида брзо формирају имуне механизме против бактерија, паразита и квасаца путем ћелијских реакција [59]. Овај брзи одговор је посредован растворљивим антибактеријским молекулима, као што су лизозим, лизенин и лубрицин [22, 42, 68]. Високо очувани имунолошки молекули, као што су индикатори ћелијске површине, откривени су на целомоцитима коришћењем цитометрије за анализу. Конкретно, целимоцити су реаговали са антителима специфичним за сисаре, показујући површну позитивност на антитела анти-ЦД11а, ЦД45РА, ЦД45РО, ЦДв49б, ЦД54, б2-М и Ти-1 [30, 34].

Наша студија има за циљ да имунохистохемијски процени присуство ТЛР2, ЦД14 и -Тубулина по први пут у целимоцитима Лумбрицус террестрис (Линнаеус, 1758), широке, вишесегментисане, цилиндричне глисте која припада породици Лумбрицидае, Онгонцхалидае, , хермафродит, дужине 8 до 10 цм [55]. Побољшање знања о унутрашњем систему одбране бескичмењака може помоћи у разумевању софистициранијег имунитета кичмењака и, последично, еволуције имуног одговора [63].

материјали и методе

Узорци и припрема ткива

Узорци Ломбрицус террестрис потичу из наше лабораторије хистотеке. Претходно су одведени на незагађеном отвореном пољу и аклиматизовани две недеље у свежем тлу, како су известили Лицата ет ал. [51], а затим су припремљени стандардним методама за светлосну микроскопију. Узорци су потопљени у имуни (параформалдехид 4 процента) (05-В01030705, БиоОптица Милано СпА, Милано, Италија) два сата. Затим су третирани дехидрирајућим етанолом (од 30 до 100 процената етанола), а затим припремљени за укључивање у парафин коришћењем ксилена.

Једном када су укључени, два танка пресека од 3–5 μм исечена ротационим микротомом су стављена на сваки слајд.

Хистологија

За обраду стакалца коришћене су морфолошке и хистохемијске боје [4, 6]. Кришке су затим рехидриране коришћењем прогресивних раствора алкохола (од 100 до 30 процената етанола), у дестиловану воду након што су депарафинизоване у ксилену [17], Г. [75], а затим су обојене Маллори трихромом и АБ/ПАС [3] . Након бојења, дијапозитиви су монтирани помоћу Еукитт-а (БиоОптица Милано СпА, Милано, Италија, Европа). Подаци о сојевима коришћеним у овој студији укључени су у табелу 1.

Имунофлуоресценција

Депарафнизовани пресеци су третирани са 5% раствором натријум борохидрида да би се елиминисала аутофлуоресценција, затим је коришћен 2,5% раствор говеђег серумског албумина (БСА), а затим су резови инкубирани преко ноћи са примарним антителима против ТЛР2, ЦД14 и -Тубулина [40]. ]. Након тога је извршена инкубација секундарних антитела. Да би се избегло бељење, резови су монтирани коришћењем Флуоромоунт™ воденог медијума за монтажу (Сигма-Алдрицх, Тауфкирцхен Немачка, Европа). Експерименти су изведени без примарних антитела као негативне контроле (подаци нису приказани). Да би се потврдило да су примарна антитела имунопозитивна, ткива коже пацова су коришћена као позитивна контрола (подаци нису приказани) [5, 47, 74].

Секције су анализиране под Зеисс ЛСМ ДУО конфокалним ласерским скенирајућим микроскопом са МЕТА модулом (Царл Зеисс МицроИмагинг ГмбХ, Јена, Немачка, Европа) са хелијум-неонским (543 нм) и аргонским (458 нм) ласерима различитих таласних дужина [7] . За побољшање слика коришћен је Зен 2011 (софтвер ЛСМ 700 Зеисс, Оберкоцхен, Немачка, Европа). Користећи Адобе Пхотосхоп ЦЦ верзију 2019 (Адобе Системс, Сан Хозе, Калифорнија, САД) дигиталне слике су спојене у композитну фигуру. Криве интензитета флуоресценције су затим процењене коришћењем функције Зен 2011 „Дисплаи профиле“ [58]. Детаљи о антителима су сажети у табели 2.

Квантитативна анализа

Подаци за квантитативну анализу прикупљени су испитивањем десет пресека и двадесет поља по узорку. Позитивност и број ћелија су процењени коришћењем софтвера ИмагеЈ 1.53е. Број целимоцита који су позитивни на ТЛР2, ЦД14 и -Тубулин је пребројан коришћењем СигмаПлот верзије 14.0 (Систат Софтваре, Сан Јосе, ЦА, УСА). Нормално распоређени подаци су анализирани коришћењем једносмерне АНОВА и Студентовог т-теста. Пријављене су средње вредности и стандардне девијације (СД) броја имунореактивних целомоцита: ** п Мање или једнако 0.01, * п Мање или једнако 0,05.

Резултати

Кишна глиста Лумбрицус террестрис има монослојни епител и прекривајућу влакнасту кутикулу која чини епидермис. Везивно и мишићно ткиво које чине већину зида тела леже испод епидермиса. Епидермални епител држи колагенску кутикулу одвојеном од остатка организма и одговоран је за производњу овог кутикуларног колагена. Заноктица, епидермис, уздужни мишић и кружни мишић видљиви су хистолошким прегледом попречног пресека зида тела глиста. Епидермис је морфолошки добро дефинисан; или је један епителни слој или псеудостратификован; састоји се од потпорних, базалних, жлезданих и сензорних ћелија (слика 1). Имунофлуоресцентна анализа, на конфокалном микроскопу, показује позитивне целимоците на ТЛР2 (сл. 2, 3), ЦД14 (слика 2) и -Тубулин (слика 3), расуте у епидермалном и везивном слоју испод, оба у уздужном и у слоју глатких мишића. ТЛР2 и ЦД14 нису у потпуности колокализовани један са другим, што сугерише да ови целомоцити могу припадати две различите породице (слика 2). Штавише, ћелије мукозне жлезде су биле тубулин-позитивне у епидермису (слика 3). Анализом функције „профила приказа“ конфокалног микроскопа, потврдили смо флуоресцентне врхове колокализације између тестираних антитела.

Квантитативна анализа је открила сличан број позитивних целомоцита за појединачна тестирана антитела, као што је приказано у табели 3.

Дискусија

Одговори домаћина на инвазију патогена су физиолошки механизми који припадају свим живим организмима. Од појаве првих еукариотских ћелија, неколико одбрамбених процеса је еволуирало како би се гарантовао интегритет ћелије, хомеостаза и преживљавање домаћина [25]. Бескичмењаци су развили низ одбрамбених одговора који ефикасно препознају и уклањају стране материјале, микробе или паразите. Док хордати имају адаптивни имунитет, лофотрохозои као глисте се ослањају првенствено на урођене имуне ћелије, као што су фагоцити (амебоцити, целомоцити), које укључују филогенетски конзервиране ПРР да би посредовали у имунолошком одговору [41]. Рецептори за чишћење, ТЛР и Нод-лике рецептори (НЛР) су истакнути представници код бескичмењака. Након везивања рецептор-лиганд, трансдукција сигнала покреће сложену каскаду ћелијских реакција, што доводи до производње једног или више ефекторских молекула укључених у имуни одговор [61]. Целомични цитолитички протеин (ЦЦФ), протеин који везује липополисахариде (ЕаЛБИ/БПИ) и Толл-лике ЕаТЛР рецептор су три типа ПРР-а који су до сада идентификовани код кишних црва [65, 66]. ЦЦФ је идентификован и окарактерисан као имуни молекул целемичне течности и целомоцита Еисениа фоетида (Савигни, 1826). ЦЦФ, везујући се за микробне антигене, може покренути каскаду профенолоксидазе, важан имунски механизам бескичмењака који такође испољава опсонизирајућа својства, чиме се промовише фагоцитоза [18, 35].

ТЛР су еволутивно очувани рецептори за препознавање мембране [9, 15] који препознају стране антигене користећи ПАМП [2] и доприносе модулацији имуног одговора [8, 9, 11, 36]. Бодо и др. [24] је показао присуство ТЛР на целомоцитима анелид олигохете Еисениа андреи (Боуцхе, 1972) [24]. Сканта и др. (2013) изоловао ТЛР глиста (ЕаТЛР) из Е. андреи. Велика интраспецијска разноврсност овог рецептора указује на присуство неколико ТЛР гена унутар генома Е. андреи. ТЛР из аннелида полихете Цапителла телета (Блаке, Грассле и Ецкелбаргер, 2009), ЕаТЛР и ТЛР мекушаца и бодљокожаца деле много сличности, према филогенетским истраживањима [66]. Процхазкова и др. истакнути ЕаТЛР и вишеструки цистеински кластер (МЦЦ) ЕаТЛР експримиран у телесним ткивима кишних црва. Први је посебно заступљен у дигестивном систему, док други може деловати у ембрионалном развоју и одговору на паразите [61]. Штавише, његово присуство у целомоцитима може бити прекомерно изражено услед акумулације бактерија [66]. Целомоцити Лумбрицус террестрис су били у стању да препознају моноците ин витро као не-себе, потврђујући њихов капацитет за имунолошко препознавање [62]. Студије транскриптомије потврђују присуство 18 ТЛР-а у полихети аннелиду Ареницола марина (Линнаеус, 1758) [67].

Раније смо показали присуство ТЛР2 код неколико кичмењака [4, 11, 12, 16, 46, 54] и урохордата [14, 45].

Пратећи ове податке, наша студија је по први пут окарактерисала имунохистохемијски ТЛР2 у целимоцитима Лумбрицус террестрис. Колокализовали смо ТЛР2/ЦД14 и ТЛР2/-Тубулин, потврђујући два типа ћелија целимоцита, како је известио Енгелман [33]. Нису сви целомоцити колокализовани за тестирана антитела, што указује на вероватну функционалну и структурну диверсификацију ових ћелија. Иако не постоје експериментални докази, присуство ТЛР2/ЦД14 колокализованих целомоцита може сугерисати да би ове ћелије могле бити амебоцити укључени у фагоцитозу, док целимоцити који експримирају само ТЛР могу бити ћелије меланоцита укључене у имуни одговор, али не обављају фагоцитне функције [1, 37 , 38], СЈ [49, 50], стр., [57, 71]. Упркос томе што Бодо и др. што сугерише одсуство ТЛР у меланоцитима Е. андреи помоћу кПЦР [23], ТЛР2-позитивни меланоцити су откривени у Л. террестрис, што указује на разлику између врста глиста, као што је већ претпостављено на бази нуклеарног генома [64].

Студија Егуиелор ет ал. [31] код пијавице Глоссипхониа цомпланата (Линнаеус, 1758) идентификовао је морфолошки и хистохемијски три главна типа ћелија (ћелије сличне макрофагима, ћелије сличне НК, гранулоцити типа И и ИИ) користећи различите анти-хумане маркере код миша специфичних за макрофаге ЦД14 и ЦД61 [44] и НК ћелије ЦД56 и ЦД57 [43]. Ова унакрсна реактивност на антитела створена против ЦД антигена сисара слаже се са литературним подацима о филогенетским корелацијама између анелида и кичмењака [21, 30] и може бити пример еволутивног очувања ових имуних молекула.

Мишја анти-хумана анти-ЦД24, анти-туморска некроза фактора (ТНФ), анти-ЦД45РА и анти-ЦД45РО антитела су локализована на површинама целимоцита глисте Еисениа фоетида [30, 34], што сугерише да су ови молекули високо конзервисан током филогенезе. Ове студије су у складу са претходним истраживањима која показују да су површински антигени целимоцита унакрсно реактивни са антителима против ЦД14, ЦД11б и ЦД11ц произведених у Темисте петрицола сисара (Амор, 1964), карактеришући фагоците позитивне на анти-ЦД14, ЦД11б и ЦД11ц антитела ]. Према овим подацима, наши резултати су показали фагоцитне ћелије имунореактивне на ЦД14 у Лумбрицус террестрис.

Штавише, показали смо имунопозитивност целимоцита на -Тубулин, колокализован са ТЛР2, показујући везу између цитоскелета, микротубула и урођеног имуног одговора посредованог ТЛР2. Колокализација ТЛР2 и -Тубулина потврђује учешће тубулина у транспорту ТЛР-а на површини мембране. Студија Хели Уронен-Ханссон ет ал. [70] су показали екстензивну тубуловезикуларну експресију ТЛР2 и ТЛР4 на унутрашњим и спољашњим моноцитима, као иу дендритичним ћелијама. Пошто су ови рецептори колокализовани са -Тубулином и директно повезани са Голгијевим комплексом, микротубуле могу послужити као провод за пренос ТЛР везикула [70]. Тубулин је такође присутан у епидермису, помажући да се одржи његов интегритет [27] и интервенише у зарастању рана [73], помажући на тај начин урођени имуни систем, као што су такође објавиле студије о Нематода Цаенорхабдитис елеганс (Маупасс, 1900) [27, 69].

Колокализација, потврђена функцијом „профила приказа“ конфокалног микроскопа, потврђује добијене резултате, наглашавајући врх флуоресценције који одговара везивању антитела за одговарајуће антигене.

У закључку, наша студија идентификује конфокалном микроскопијом целимоците имунореактивне на ТЛР2, ЦД14 и -Тубулин по први пут у Олигоцхаета аннелид Лумбрицус террестрис. Ови подаци не само да потврђују важну еволуциону конзервацију ових молекула, већ и продубљују наше знање о унутрашњем систему одбране бескичмењака, посебно анелида, и могу пружити корисне индикације за будућа истраживања, побољшавајући проучавање сложених урођених имуних механизама горњи кичмењаци.

Изјава институционалног одбора за преглед

Одустало се од етичког прегледа и одобрења за ову студију јер на узорке нису примењене експерименталне процедуре.

Прилози аутора

Концептуализација, Алесио Алесци; формална анализа, Алессио Алесци и Ангело Фумиа; истрага, Алессио Алесци, Гиоеле Цапилло, Ангело Фумиа, Марко Албано, Еммануеле Мессина, Нунзиацарла Спано, Симона Перголиззи и Еугениа Рита Лауриано; кустос података, Алессио Алесци, Гиоеле Цапилло, Ангело Фумиа, Марко Албано, Еммануеле Мессина, Нунзиацарла Спано, Симона Перголиззи и Еугениа Рита Лауриано.; писање—припрема оригиналног нацрта, Алессио Алесци; писање—рецензија и уређивање, Алессио Алесци, Гиоеле Цапилло, Нунзиацарла Спано, Симона Перголиззи и Еугениа Рита Лауриано; визуелизација, Алесио Алеши и Анђело Фумија; надзор, Еугениа Рита Лаутиано. Сви аутори су прочитали и сложили се са објављеном верзијом рукописа.

Финансирање

Ово истраживање није добило спољно финансирање.

Доступност података и материјала

Подаци представљени у овој студији доступни су у чланку.

Декларације

Етичко одобрење и сагласност за учешће

Није применљиво.

Такмичарски интереси

Аутори изјављују да нема сукоба интереса.

Референце

1. Адерем А, Ундерхилл ДМ. Механизми фагоцитозе у макрофагима. Анну Рев Иммунол. 1999;17(1):593–623. хттпс://дои.орг/10.1146/аннур ев.иммунол.17.1.593.

2. Акира С, Уематсу С, Такеуцхи О. Препознавање патогена и урођени имунитет. Ћелија. 2006;124(4):783–801. хттпс://дои.орг/10.1016/ј.целл.2006.02.015.

3. Алесци А, Албано М, Савоца С, Мокхтар ДМ, Фумиа А, Арагона М, Ло Цасцио П, Хуссеин ММ, Цапилло Г, Перголиззи С, Спано Н, Лауриано ЕР. Конфокална идентификација имунолошких молекула у ћелијама кожних клубова зебрафша (Данио рерио, Хамилтон 1882) и њихова могућа улога у имунитету. Биологија. 2022;11(11):1653. хттпс://дои.орг/10.3390/биологи11111653.

4. Алесци А, Цапилло Г, Фумиа А, Мессина Е, Албано М, Арагона М, Ло Цасцио П, Спано Н, Перголиззи С, Лауриано ЕР. Конфокална карактеризација цревних дендритских ћелија од миксина до телеоста. Биологија. 2022;11(7):1045.хттпс://дои.орг/10.3390/биологи11071045.

5. Алесци А, Цапилло Г, Мокхтар ДМ, Фумиа А, Д'Ангело Р, Ло Цасцио П, Албано М, Гуеррера МЦ, Саиед РКА, Спано Н, Перголиззи С, Лауриано ЕР. Експресија антимикробног пептида Писцидин1 у мастоцитима Гиллс оф Гиант Мудскиппер Периопхтхалмодон сцхлоссери (Паллас, 1770). Инт Ј Мол Сци. 2022;23(22):13707. хттпс://дои.орг/10.3390/ијмс232213707.

6. Алесци А, Цицеро Н, Фумиа А, Петрарца Ц, Мангифеста Р, Нава В, Ло Цасцио П, Гангеми С, Ди Гиоаццхино М, Лауриано ЕР. Хистолошка и хемијска анализа тешких метала у бубрезима и шкргама Боопса Боопса: центри меланомакрофага и ћелије родлета као биомаркери животне средине. Токсици. 2022;10(5):218. хттпс://дои.орг/10.3390/токицс10050218.

7. Алесци, А., Фумиа, А., Миллер, А., Цалабро, Ц., Сантини, А., Цицеро, Н., & Ло Цасцио, П. (2022). Спирулина подстиче агрегацију макрофага у јетри зебрице (Данио рерио). Нат Прод Рес, 1–7. хттпс://дои.орг/10.1080/14786419. 2022.2089883.

8. Алесци, А., Гитто, М., Котанска, М., Ло Цасцио, П., Миллер, А., Ницосиа, Н., Фумиа, А., & Перголиззи, С. (2022). Имуногеност, ефикасност, безбедност и психолошки утицај ЦОВИД-19 мРНА вакцина. Хуман Иммунол, С0198885922001586. хттпс://дои.орг/10.1016/ј.хумимм.2022.08.004.

9. Алесци, А., Лауриано, ЕР, Арагона, М., Цапилло, Г., & Перголиззи, С. (2020). Обележавање Лангерхансових ћелија кичмењака, од риба до сисара. Ацта Хистоцхемица, 122(7): 151622. хттпс://дои.орг/10.1016/ј.ацтхис.2020.151622.

10. Алесци А, Лауриано ЕР, Фумиа А, Иррера Н, Мастрантонио Е, Ваццаро ​​М, Гангеми С, Сантини А, Цицеро Н, Перголиззи С. Однос између имуних ћелија, депресије, стреса и псоријазе: може ли се користити природни производи Бити од помоћи? Молецулес. 2022;27(6):1953.

11. Алесци, А., Перголиззи, С., Цапилло, Г., Ло Цасцио, П., & Лауриано, ЕР (2022). Родлет ћелије у бубрегу златне рибице (Царассиус ауратус, Линнаеус 1758): студија светле и конфокалне микроскопије. Ацта Хистоцхемица, 124(3):151876.

12. Алесци, А., Перголиззи, С., Фумиа, А., Цалабро, Ц., Ло Цасцио, П., & Лауриано, ЕР (2022). Мастоцити у цревима златне рибице (Царассиус ауратус): Имунохистохемијска карактеризација. Ацта Зоологица.

13. Алесци А, Перголиззи С, Фумиа А, Миллер А, Церниглиаро Ц, Заццоне М, Саламоне В, Мастрантонио Е, Гангеми С, Пиоггиа Г, Цицеро Н. Имуни систем и психолошко стање трудница током ЦОВИД-а-19 .Пандемија: Да ли микронутријенти могу да подрже трудноћу? Нутриентс. 2022;14(12):2534. хттпс://дои.орг/10.3390/ну14122534. 14. Алесци, А., Перголиззи, С., Ло Цасцио, П., Цапилло, Г., & Лауриано, ЕР (2022). Локализација имунореактивних ћелија вазоактивног цревног пептида и рецептора 2 у ендостилу урохордата Стиела плицата (Лесуеур, 1823). Мицросц Рес Тецх, хттпс://дои.орг/10.1002/јемт.24119.

15. Алесци А, Перголиззи С, Ло Цасцио П, Фумиа А, Лауриано ЕР. Неуронска регенерација: упоредни преглед кичмењака и нове перспективе за неуродегенеративне болести. Ацта Зоологица. 2021. хттпс://дои.орг/10. 1111/азо.12397.

16. Алесци А, Перголиззи С, Савоца С, Фумиа А, Мангано А, Албано М, Мессина Е, Арагона М, Ло Цасцио П, Цапилло Г, Лауриано ЕР. Откривање пехарастих ћелија црева широког јабука Ептатретус Циррхатус (Форстер, 1801): Евалуација конфокалне микроскопије. Биологија. 2022;11(9):1366.хттпс://дои.орг/10.3390/биологи11091366.

17. Алтуркистани ХА, Тасхканди ФМ, Мохаммедсалех ЗМ. Хистолошке мрље: Преглед литературе и студија случаја. Глобал Ј Хеалтх Сци. 2015;8(3):72.хттпс://дои.орг/10.5539/гјхс.в8н3п72.

18. Бесцхин А, Билеј М, Брис Л, Торрееле Е, Луцас Р, Магез С, Де Баетселиер П. Конвергентна еволуција цитокина. Природа. 1999;400(6745):627–8.хттпс://дои.орг/10.1038/23164.

19. Билеј М, Де Баетселиер П, Бесцхин А. Антимикробна одбрана глиста. Фолиа Мицробиол. 2000;45(4):283–300. хттпс://дои.орг/10.1007/БФ028 17549.

20. Билеј М, Процхазкова П, Шилерова М, Јоскова Р (2010) Имунитет на глисте. У: Содерхалл К, едотиро. Инвертебрате Иммунити, Вол. 708. Бостон: Спрингер; стр. 66–79). хттпс://дои.орг/10.1007/978-1-4419-8059-5_4.

21. Бланцо ГАЦ, Есцаладе АМ, Алварез Е, Хајос С. ЛПС-индукована стимулација фагоцитозе у сипунцулан црву Тхемисте петрицола: Могућа укљученост хуманих ЦД14, ЦД11Б и ЦД11Ц унакрсно реактивних молекула. Дев Цомп Иммунол. 1997;21(4):349–62. хттпс://дои.орг/10.1016/ С0145-305Кс(97)00007-4.

22. Бодо К, Борос А, Румплер Е, Молнар Л, Бороцз К, Неметх П, Енгелманн П. Идентификација нових хомолога лубрицина у глистама Еисениа андреи. Дев Цомп Иммунол. 2019;90:41–6.

23. Бодо, К., Ернсзт, Д., Неметх, П., & Енгелманн, П. (2018). Изразити имуни и одбрамбени молекуларни отисци прстију у одвојеним подскуповима целомоцита глиста Еисениа андреи. Преживљавање бескичмењака Ј, 338–345.

24. Бодо К, Келермаиер З, Ласзло З, Борос А, Кокханиук Б, Неметх П, Енгелманн П. Урођени имуни одговор изазван повредама током регенерације сегмента кишне глисте, Еисениа андреи. Инт Ј Мол Сци. 2021;22(5):2363.

25. Буцхманн, К. (2014). Еволуција урођеног имунитета: трагови од бескичмењака преко риба до сисара. Границе у имунологији.

For more information:1950477648nn@gmail.com